一种可促进蜂蜜中嗜渗酵母快速生长的培养基及其制备方法与流程

[0001]
本发明属于细胞培养领域，具体为一种可促进蜂蜜中嗜渗酵母快速生长的培养基及其制备方法。


背景技术：

[0002]
蜂蜜中出现的酵母主要有两类：一类为嗜渗酵母，另一类为耐高糖酵母，其中嗜渗酵母对蜂蜜品质影响较大。因此，新的国家标准增加嗜渗酵母计数限量要求，也是进一步提高蜂蜜产品安全性的需要。目前，针对嗜渗酵母计数的检测，主要依据gb14963-201l《食品安全国家标准蜂蜜》附录a规定的方法进行。国标方法中对嗜渗酵母的培养条件为25℃
±
1℃恒温培养箱中培养7d，较一般的菌落培养周期长至4～5d。
[0003]
然而，使用传统的培养基如dg18培养基对嗜渗酵母进行培养时，培养周期较长，不适应于检测效率的提高。同时，由于嗜渗酵母颜色与培养基颜色相近，导致检测技术人员在技术时非常不便。


技术实现要素：

[0004]
本发明提供了一种可促进蜂蜜中嗜渗酵母快速生长的培养基及其制备方法，该培养基具有可促进嗜渗酵母快速生长的优点。
[0005]
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案:
[0006]
一种可促进蜂蜜中嗜渗酵母快速生长的培养基，以质量含量计，该培养基包括如下组分：飞廉水提物0.2～0.4g、蓝刺头水提物0.06～0.08g、银荆水提物0.1～0.2g、马铃薯浸粉1～2g、无水葡萄糖11～13g、磷酸氢钾0.7～1.4g、酪蛋白胨4～6g、氯硝胺0.001～0.003g、孟加拉红0.02～0.04g、光触媒0.002～0.004g、琼脂15～20g，溶解于1000ml的蒸馏水中。
[0007]
其中，飞廉水提物、蓝刺头水提物、银荆水提物具有抑菌功效，可抑制其他微生物的滋生，尤其是针对于霉菌。由于霉菌生长过程中，其颜色与嗜渗酵母相同，唯一区别点在于形态，但是也会增加技术检测人员的技术难度。故通过在培养基中加入抑菌物质，可有效杀灭霉菌。同时，上述提取物中具有糖份，可满足嗜渗酵母嗜糖的需求，为嗜渗酵母的快速生长提供充足的营养。
[0008]
作为优选，该培养基组分中还包括桄榔水提物、丁癸草水提物以及芜萍水提物中的任意一种，或是它们的混合物。桄榔水提物、丁癸草水提物以及芜萍水提物具有抑菌功效，可抑制培养基中杂菌的滋生。
[0009]
作为优选，光触媒包括氧化钛、氧化锌、氧化锡以及二氧化锆中的任意一种，或是它们的混合物。光触媒的加入可帮助培养基在制作过程(紫外杀菌)中更有效地灭菌。
[0010]
作为优选，以质量含量计，该培养基组分中包括如下组分：飞廉水提物0.2～0.4g、蓝刺头水提物0.06～0.08g、银荆水提物0.1～0.2g、桄榔水提物0.03～0.06g，丁癸草水提物0.01～0.04g，马铃薯浸粉1～2g、无水葡萄糖11～13g、磷酸氢钾0.7～1.4g、酪蛋白胨4～
6g、氯硝胺0.001～0.003g、孟加拉红0.02～0.04g、光触媒0.002～0.004g、琼脂15～20g，溶解于1000ml的蒸馏水中。
[0011]
作为优选，以质量含量计，该培养基组分中包括如下组分：飞廉水提物0.3g、蓝刺头水提物0.07g、银荆水提物0.15g、桄榔水提物0.04g、丁癸草水提物0.03g、马铃薯浸粉1.6g、无水葡萄糖12g、磷酸氢钾0.9g、酪蛋白胨5g、氯硝胺0.002g、孟加拉红0.03g、光触媒0.003g、琼脂15～20g，溶解于1000ml的蒸馏水中。
[0012]
本发明还提供了一种可促进蜂蜜中嗜渗酵母快速生长的培养基的制备方法，该制备方法包括如下制备步骤：
[0013]
(1)在容器内加入纯净水，加热至沸。
[0014]
(2)沸水冷却至40～60℃时，取飞廉水提物、蓝刺头水提物、银荆水提物、桄榔水提物、丁癸草水提物、马铃薯浸粉、无水葡萄糖、磷酸氢钾、酪蛋白胨、氯硝胺、孟加拉红、光触媒以及琼脂依次加入容器内，并搅拌均匀，得到混合液。
[0015]
(3)将混合液用七水硫酸镁调整ph至5.6～5.8，并用锥形瓶分装且封口后，放置于高压蒸汽灭菌锅内灭菌45～60min，得到灭菌完成的混合液。
[0016]
(4)将灭菌完成的混合液放入超净台冷却，冷却完成后，得到所述的培养基。
[0017]
作为优选，在步骤(2)中，沸水冷却后的温度为50℃。
[0018]
作为优选，在步骤(3)中，ph为5.7。
[0019]
作为优选，在步骤(3)中，高压蒸汽灭菌时间为50min。
[0020]
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
[0021]
(1)通过本发明提供的培养基，可大大缩短嗜渗酵母的培养时间，更有利于技术检测人员对大批量样本的检测，从而大大提高实验检测效率。
[0022]
(2)在培养过程中，培养基颜色与目标菌颜色对比鲜明更易观察计数。
[0023]
(3)本发明在组方中，添加有可抑制霉菌生长的组分，可防止霉菌滋生影响嗜渗酵母的计数。
附图说明：
[0024]
图1是实施例2对应的培养基培养嗜渗酵母情况示意图；
[0025]
图2是对比例1对应的培养基培养嗜渗酵母情况示意图。
具体实施方式
[0026]
下面采用具体实施方式对本发明的技术方案作进一步详细说明。
[0027]
实施例1
[0028]
一种可促进蜂蜜中嗜渗酵母快速生长的培养基，以质量含量计，该培养基包括如下组分：飞廉水提物0.2g、蓝刺头水提物0.06g、银荆水提物0.1g、桄榔水提物0.03g，丁癸草水提物0.01g，马铃薯浸粉1g、无水葡萄糖11g、磷酸氢钾0.7g、酪蛋白胨4g、氯硝胺0.001g、孟加拉红0.02g、光触媒0.002g、琼脂15～20g，溶解于1000ml的蒸馏水中。
[0029]
上述培养基的制备方法包括：
[0030]
(1)在容器内加入纯净水，加热至沸；
[0031]
(2)沸水冷却至50℃时，取飞廉水提物、蓝刺头水提物、银荆水提物、桄榔水提物、
丁癸草水提物、马铃薯浸粉、无水葡萄糖、磷酸氢钾、酪蛋白胨、氯硝胺、孟加拉红、光触媒以及琼脂依次加入容器内，并搅拌均匀，得到混合液。
[0032]
(3)将混合液用七水硫酸镁调整ph至5.7，并用锥形瓶分装且封口后，放置于高压蒸汽灭菌锅内灭菌50min，得到灭菌完成的混合液；
[0033]
(4)将灭菌完成的混合液放入超净台冷却，冷却完成后，得到所述的培养基。
[0034]
实施例2
[0035]
一种可促进蜂蜜中嗜渗酵母快速生长的培养基，以质量含量计，该培养基包括如下组分：飞廉水提物0.3g、蓝刺头水提物0.07g、银荆水提物0.15g、桄榔水提物0.04g、丁癸草水提物0.03g、马铃薯浸粉1.6g、无水葡萄糖12g、磷酸氢钾0.9g、酪蛋白胨5g、氯硝胺0.002g、孟加拉红0.03g、光触媒0.003g、琼脂15～20g，用纯净水定容至1l。
[0036]
上述培养基的制备方法同实施例1。
[0037]
实施例3
[0038]
一种可促进蜂蜜中嗜渗酵母快速生长的培养基，以质量含量计，该培养基包括如下组分：飞廉水提物0.36g、蓝刺头水提物0.072g、银荆水提物0.16g、桄榔水提物0.53g，丁癸草水提物0.34g，马铃薯浸粉1.6g、无水葡萄糖12.3g、磷酸氢钾0.9g、酪蛋白胨5.3g、氯硝胺0.025g、孟加拉红0.034g、光触媒0.003g、琼脂15～20g，用纯净水定容至1l。
[0039]
上述培养基的制备方法同实施例1。
[0040]
实施例4
[0041]
一种可促进蜂蜜中嗜渗酵母快速生长的培养基，以质量含量计，该培养基包括如下组分：飞廉水提物0.4g、蓝刺头水提物0.08g、银荆水提物0.2g、桄榔水提物0.06g，丁癸草水提物0.04g，马铃薯浸粉2g、无水葡萄糖13g、磷酸氢钾1.4g、酪蛋白胨6g、氯硝胺0.003g、孟加拉红0.04g、光触媒0.004g、琼脂15～20g，用纯净水定容至1l。
[0042]
上述培养基的制备方法同实施例1。
[0043]
对比例1
[0044]
dg18培养基，制备方法和实施例1相同。
[0045]
测试例1
[0046]
本发明现以培养嗜渗酵母为例。
[0047]
将实施例1～4和对比例1所提供的培养基分别编号为1、2、3、4、5。将取自蜂蜜样品中分离的嗜渗酵母分别接种至1～5组上，每组设置10个平行实验组。接种后将1～5组和a-g组在28
±
1℃微光条件下培养7天，观察比较各培养基内嗜渗酵母的生长情况统计如下表：
[0048]
同时，本测试例以实施例2和对比例1提供的培养基分别用于培养嗜渗酵母，嗜渗酵母来源相同，在28
±
1℃微光条件下培养7天后，嗜渗酵母的生长情况分别如图1和图2所示(实际培养过程中，图1的背景色是红色，因附图提交标准故将图1进行去色处理)。
[0049]
表1嗜渗酵母生长情况统计表
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