一种白芦笋汁口服液及其制备方法与流程

本发明属于果蔬饮品技术领域，具体涉及一种白芦笋汁口服液及其制备方法。

背景技术：

免疫是机体识别和消灭外侵异物，处理衰老、损伤、死亡变性的自身细胞的防御机制。免疫力低下会导致机体对外界的抵抗力降低，发病率增加。一旦人体免疫监视能力下降，体内癌细胞缺乏有效的监视，将有很大的机会在体内繁殖，久而久之就会导致癌症的发生。

芦笋(asparagusofcinalisl.)为百合科天门冬属多年生宿根草本植物，现全国各地均有栽培并大量出口。芦笋具有营养丰富，味美醇香，脆嫩爽口，清淡开胃，食而不腻的特点，是一种低热量，营养价值高的药食同源蔬菜，富含18种氨基酸、15中微量元素以及p、b族等多种维生素，且维生素含量普遍高于一般蔬菜，具有很高的食用与药用价值，故而在学术界享有“蔬菜之王”的美誉。芦笋中的黄酮类物质、抗坏血酸、谷胱甘肽和其它的酚类化合物，具有很高的抗氧化活性；芦笋多糖具有抗肿瘤、抗衰老等多种生理活性；芦笋皂苷具有溶血、降胆固醇、抗炎和对肿瘤的抑制作用等多方面的药理活性。

中国专利cn109170415a公开了一种芦笋汁及加工工艺，经过原料选取、消毒、压榨、分离出芦笋汁和芦笋渣、芦笋渣蒸制、破碎、过滤、压滤、预煮、杀菌包装9个步骤而获得，但此方法存在制备步骤繁琐，产品存在营养成分流失等缺陷；中国专利cn102133352b公开了一种芦笋口服液及其制备方法，其包含的芦笋提取物经水煎煮或乙醇加热提取，浓缩、加辅料过滤之后得到精滤的口服液，此方法因为经过高温提取，存在利用不充分，营养成分流失严重等缺陷；中国专利cn101946934a公开了一种芦笋汁饮料，由含有下述重量配比的原料制备而成：芦笋汁20份、海藻酸钠6份、魔芋胶4份、特丁基对苯二酚0.5份、羧甲基纤维素钠4份、白砂糖6份、异维c钠0.6份、纯净水11份，制备工艺流程包括：芦笋选料、洗净、蒸熏、榨汁、离心、冷处理、过滤、调配、过滤、胶体、均质、精滤、灌装、杀菌、贴标、装箱、入库、检验、成品，此方法的制备工艺繁琐，且虽然制备得到了稳定的芦笋汁，但是添加了大量的稳定剂及防腐剂，对人体健康不利。

综上所述，现有技术中芦笋汁产品的制备方法不仅步骤繁琐，同时芦笋的营养成分损失严重，且制备得到的产品质量欠佳，沉淀物过多，性状也不稳定。如何在最大程度保留芦笋营养成分，保留芦笋增加免疫、抗癌、耐疲劳、耐缺氧、镇痛、抗衰老、降血脂、保肝解毒等功能的同时，获得性状稳定、质量优良的芦笋汁产品，是目前亟待解决的问题。

技术实现要素：

本发明提供了一种具有免疫增强效果的白芦笋汁口服液及其制备方法。工艺简单，低耗能。通过本发明配方及方法获得的芦笋汁口服液，不仅最大程度保留了芦笋的营养成分，同时对废料进行合理利用，变废为宝，制备获得的芦笋汁口服液质量优异，长期储存也未出现沉淀，分层等不稳定现象。

本发明的目的是提供一种白芦笋汁口服液，其特征在于，所述白芦笋汁口服液包含白芦笋原汁，白芦笋渣提取物，稳定剂，调味剂，抑菌剂。

根据本发明的白芦笋汁口服液，其中所述的白芦笋原汁为新鲜白芦笋原料经过螺旋压榨、离心过滤后获得的白芦笋汁。

根据本发明的白芦笋汁口服液，其中所述的白芦笋渣提取物制备方法如下：新鲜白芦笋榨汁后剩余残渣烘干，乙醇超声提取后干燥得到浸膏，浸膏用水分散，用有机溶剂进行萃取，保留水层并弃去水分散液不溶物，真空干燥得到水极性部位的白芦笋渣提取物。

根据本发明的白芦笋汁口服液，所述的白芦笋渣提取物制备方法中，优选使用10-20倍(更优选为15倍)体积的乙醇(优选为75％乙醇)超声提取，优选提取1-3次(如1次，2次，3次)，每次1-3h(如1h、2h、3h)。萃取的有机溶剂优选石油醚、乙酸乙酯或正丁醇。

根据本发明的白芦笋汁口服液，其中所述白芦笋渣提取物的用量为白芦笋原汁的0.2-2.0％。优选为0.5-1.0％。

根据本发明的白芦笋汁口服液，其中所述稳定剂为羧甲基纤维素。

根据本发明的白芦笋汁口服液，其中所述稳定剂用量为白芦笋原汁的0.5-1.0％。优选为0.6-0.8％。

根据本发明的白芦笋汁口服液，其中所述抑菌剂为山梨酸钾。

根据本发明的白芦笋汁口服液，其中所述抑菌剂用量为白芦笋原汁的0.02％-0.1％。优选为0.08％-0.1％。

根据本发明的白芦笋汁口服液，其中所述调味剂是白砂糖、果糖、麦芽糖、葡萄糖其中的一种或多种。所述调味剂优选为白砂糖。

根据本发明的白芦笋汁口服液，其中所述调味剂用量为白芦笋原汁的4-8％，优选为5-7％。

本发明还提供所述白芦笋汁口服液的制备方法，包括如下步骤：

(1)挑选白芦笋原料，弃去腐败、老旧原料；

(2)进行螺旋压榨，离心过滤后得到白芦笋原汁；

(3)剩余白芦笋渣烘干后用乙醇超声提取，干燥后获得浸膏，浸膏用水分散，用有机溶剂进行萃取，保留水层并弃去水分散液不溶物，真空干燥得到水极性部位的白芦笋渣提取物；

(4)在白芦笋原汁中加入白芦笋渣提取物调配搅拌得到混合液；

(5)在混合液中加入稳定剂、调味剂、抑菌剂进行调配搅拌；

(6)离心过滤、高温瞬时灭菌之后灌装。

根据本发明的白芦笋汁口服液的制备方法，其中步骤(3)中所用乙醇为10-20倍(更优选为15倍)体积的75％乙醇。

根据本发明的白芦笋汁口服液的制备方法，其中步骤(3)中优选提取1-3次(如1次，2次，3次)，每次1-3h(如1h、2h、3h)。

根据本发明的白芦笋汁口服液的制备方法，其中步骤(3)中萃取的有机溶剂优选石油醚、乙酸乙酯或正丁醇。

根据本发明的白芦笋汁口服液的制备方法，其中步骤(6)中灭菌时控制温度为120℃至130℃，时间为2至4秒钟。

为了保留芦笋汁的风味及营养成分，在不过分加工的基础上很难调配出性状等各方面的质量均优异的芦笋汁口服液产品，本发明发明人经过大量实验，才筛选出合适处方，使芦笋汁口服液成品不仅质量优异，且能最大程度的发挥出其营养功效。本发明所具有的优点或者积极效果是：

(1)解决了以往在制作芦笋汁产品过程中由于预煮、高湿漂烫、酶解等操作，造成的风味、普养成份、保健效果等流失的问题，可使白芦笋汁得到充分有效利用，有效保留了白芦笋汁的原有风味，同时最大限度地保留了营养成份，使其不过分流失，饮用后能充分发挥其应有的增加人体免疫力的功效；

(2)解决以往制作方法中大剂量添加诸多如“香精”“食用胶”等不必要的添加剂，在最小化添加的同时保持了白芦笋汁的风味及质量；

(3)对白芦笋残渣进行回收利用，变废为宝，在有效保留白芦笋汁免疫活性的基础上，进一步提升白芦笋汁口服液的免疫增强效力；

(4)制备方法简单易行，便于工业化生产应用。

附图说明

图1白芦笋原汁对小鼠器官指数的影响

图2不同萃取物对小鼠器官指数的影响

图3白芦笋原汁对小鼠细胞因子的影响

图4不同萃取物对小鼠细胞因子的影响

具体实施方式

下面结合实施例，更具体地说明本发明的内容。应当理解，本发明的实施并不局限于下面的实施例，对本发明所做的任何形式上的变通与/或改变都将落入本发明保护范围。

实施例1白芦笋汁口服液

白芦笋原汁100ml，白芦笋渣提取物1g，羧甲基纤维素0.6g，白砂糖7g，山梨酸钾0.1g。

制备方法：新鲜白芦笋经挑选后，弃去腐败、老旧原料，进行螺旋压榨，经离心过滤得到白芦笋原汁，剩余白芦笋渣烘干后用15倍体积的75％乙醇超声提取2次，每次1h，干燥后获得浸膏，浸膏用水分散，用石油醚、乙酸乙酯或正丁醇进行萃取，保留水层并弃去水分散液不溶物，真空干燥得到水极性部位的白芦笋渣提取物，按照上述配方及用量进行调配搅拌，再离心过滤、高温瞬时灭菌、灌装。

实施例2白芦笋汁口服液

白芦笋原汁100ml，白芦笋渣提取物1g，羧甲基纤维素0.7g，白砂糖7g，山梨酸钾0.1g。

制备方法：新鲜白芦笋经挑选后，弃去腐败、老旧原料，进行螺旋压榨，经离心过滤得到白芦笋原汁，剩余白芦笋渣烘干后用20倍体积的75％乙醇超声提取2次，每次1h，干燥后获得浸膏，浸膏用水分散，用石油醚、乙酸乙酯或正丁醇进行萃取，保留水层并弃去水分散液不溶物，真空干燥得到水极性部位的白芦笋渣提取物，按照上述配方及用量进行调配搅拌，再离心过滤、高温瞬时灭菌、灌装。

实施例3白芦笋汁口服液

白芦笋原汁100ml，白芦笋渣提取物1g，羧甲基纤维素0.8g，白砂糖7g，山梨酸钾0.1g。

制备方法：新鲜白芦笋经挑选后，弃去腐败、老旧原料，进行螺旋压榨，经离心过滤得到白芦笋原汁，剩余白芦笋渣烘干后用15倍体积的75％乙醇超声提取2次，每次1h，干燥后获得浸膏，浸膏用水分散，用石油醚、乙酸乙酯或正丁醇进行萃取，保留水层并弃去水分散液不溶物，真空干燥得到水极性部位的白芦笋渣提取物，按照上述配方及用量进行调配搅拌，再离心过滤、高温瞬时灭菌、灌装。

实施例4-7白芦笋汁口服液

制备方法：同实施例1。

对比例1-6白芦笋汁口服液

对比例1-6中使用海藻酸钠作为稳定剂，成分及用量如下：

制备方法：同实施例1。

对比例7-12白芦笋汁口服液

对比例7-12中使用果胶作为稳定剂，成分及用量如下：

制备方法：同实施例1。

对比例13-18白芦笋汁口服液

对比例13-18中使用黄原胶作为稳定剂，成分及用量如下：

制备方法：同实施例1。

对比例19-24白芦笋汁口服液

对比例19-24中使用卡拉胶作为稳定剂，成分及用量如下：

制备方法：同实施例1。

试验例1.性状稳定性试验

将实施例1-7、对比例1-24制备得到的白芦笋汁口服液放置于同等环境下恒温(室温)环境下，在0/5/10/15/30天时观察各组口服液，以是否有固形物析出及是否分层来判断各组口服液的性状及其稳定性。结果见表1

表1不同配方白芦笋汁口服液性状及稳定性

筛选结果如表1所示，相同条件下，使用少量的羧甲基纤维素作为稳定剂，即可保证本发明的配方获得的白芦笋汁口服液产品性状及稳定性效果优异。

试验例2本发明的白芦笋汁口服液前期免疫效果试验

1.材料

1.1试验动物

spf级昆明小鼠80只(购自成都达硕实验动物有限公司)，雌雄各半，体重为20±2g。饲养条件：室温，自由进食及饮水。

1.2主要试剂及仪器

环磷酰胺(上海源叶生物科技有限公司)；黄芪多糖(成都乾坤动物药业股份有限公司)；(ifn-γ、tnf-α、il-2、il-4)elisa试剂盒(武汉贝茵莱生物科技有限公司)；bc-2800vet-兽用全自动血液细胞分析仪(深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司)；高速冷冻离心机(赛默飞世尔科技有限公司)；esj180-4型电子天平(沈阳龙腾电子有限公司)。

2.方法

80只spf级昆明小鼠，雌雄各半，适应性喂养一周后，随机分成10组，每组雌鼠雄鼠各8只，进行编号。分别为空白对照组，模型对照组，阳性对照组(50mg/kg黄芪多糖)，石油醚组(50mg/kg实施例1中石油醚萃取物)，乙酸乙酯组(50mg/kg实施例1中乙酸乙酯萃取物)，正丁醇组(50mg/kg实施例1中正丁醇萃取物)，水组(50mg/kg本发明实施例1所述水极性部位的白芦笋渣提取物)，白芦笋原汁低(5ml/kg)、中(10ml/kg)、高剂量组(20ml/kg)。除空白对照组外，其余各组每天腹腔注射80mg/kg环磷酰胺共3d造取免疫抑制模型，空白组腹腔注射等量生理盐水。造模成功后白芦笋原汁口服液低、中、高剂量组分别灌胃5ml/kg、10ml/kg、20ml/kg白芦笋原汁(实施例1制备获得)，阳性对照组灌胃50mg/kg黄芪多糖，空白组和模型组灌胃生理盐水，其余组灌胃50mg/kg相应提取物(溶于水中)，共7d。7d后处死小鼠，进行脏器指数检测、血常规分析、细胞因子测定，分析不同用量白芦笋原汁以及不同极性部位提取物对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。

3.结果

3.1脏器指数

由图1可知，与正常组相比，模型组肝脏、胸腺及脾脏指数均明显缩小。与模型组相比，阳性对照组、白芦笋汁低、中、高剂量组，肝脏、胸腺及脾脏的指数均明显增大，其中胸腺及脾脏指数变化最为显著。与白芦笋汁低、高剂量组对比，白芦笋汁中剂量组胸腺、脾脏及肝脏指数均略高，且与黄芪多糖组以及正常组差异更小。结果表明，本发明的白芦笋原汁能恢复由环磷酰胺所导致的肝脏、胸腺及脾脏的指数减少，对小鼠免疫器官及肝脏都有较好的保护作用，白芦笋汁各组相较而言，中剂量组恢复上述脏器指数能力更强(注：^ab不同的上标字母表示通过方差分析确定的统计差异(p<0.05))。

由图2可知，随着萃取溶液极性的不断增大，对免疫抑制小鼠的脏器指数增大越明显(p＜0.05)，其中石油醚试验组和乙酸乙酯试验组两组与模型组之间肝脏指数、胸腺指数、脾脏指数无显著性差别(p＞0.05)，水试验组与石油醚试验组、乙酸乙酯试验组、模型组有显著性差别(p＜0.05)，更接近正常范围。综上所述，白芦笋醇提取物中含有极性的免疫活性物质，免疫活性随着萃取液极性的增强而增强，对免疫器官的保护具有更积极的作用。(注：^abc不同的上标字母表示通过方差分析确定的统计差异(p<0.05))。

3.2血常规分析

表2白芦笋汁小鼠血常规的影响

注：^ab不同的上标字母表示通过方差分析确定的统计差异(p<0.05)。

通过观察表2可知，模型组小鼠白细胞数目、淋巴细胞百分比、单核细胞百分比及红细胞数目等较空白组显著降低。与模型组比较，阳性对照组以及白芦笋汁各剂量组，免疫低下的小鼠体内的白细胞数量、淋巴细胞和单核细胞百分比等均显著升高。比较白芦笋汁各剂量组，三个剂量组均无显著性差异，但中剂量组白细胞、红细胞、血红蛋白含量及血小板数目高于低、高剂量组。以上数据表明，白芦笋汁低、中、高剂量组均能调节小鼠免疫能力，将环磷酰胺造成的小鼠各项异常外周血指标恢复正常，且中剂量组效果更好。

表3不同萃取物对小鼠血常规的影响

注：^abcd不同的上标字母表示通过方差分析确定的统计差异(p<0.05)。

由表3可知，将白芦笋醇提物的不同萃取物组与模型组血常规指数进行比较，发现随着萃取溶液极性的不断增大，对免疫抑制小鼠的血细胞的增殖改善效果越明显，其中石油醚试验组和乙酸乙酯试验两组与模型组之间血常规指数无显著性差别(p＞0.05)，正丁醇试验组、水试验组与模型组相比，在白细胞、淋巴细胞、单核细胞、粒细胞、红细胞、血小板含量有显著性升高(p＜0.05)，且水试验组效果较好。

3.3细胞因子测定

据图3可得，与正常组对比，模型组小鼠外周血清中il-2、il-4、ifn-γ、tnf-α浓度显著降低。与模型组对比，黄芪多糖及白芦笋汁低、中、高剂量组血清中il-2、il-4、ifn-γ、tnf-α浓度均显著升高。与正常组相比，黄芪多糖组、白芦笋汁低、中、高剂量组无显著性差别，但白芦笋汁低、高剂量组小鼠血清中il-4的浓度略低于中剂量组。以上数据表明，白芦笋汁各剂量组以及黄芪多糖组均能恢复免疫低下小鼠血清中的il-2、il-4、ifn-γ、tnf-α至接近于正常值，但白芦笋汁低、高剂量组的免疫调节作用弱于中剂量组(注：^ab不同的上标字母表示通过方差分析确定的统计差异(p<0.05))。

由图4可知，随着萃取液极性的不断增大，对免疫抑制小鼠的血清中il-2、il-4、tnf-α及ifn-γ含量改善效果越明显。石油醚试验组和乙酸乙酯试验组两组与模型组之间il-2、il-4、tnf-α及ifn-γ含量无显著性差别(p＞0.05)，正丁醇试验组、水组与石油醚试验组、乙酸乙酯试验组、模型组均有显著性提高(p＜0.05)，其中水组更接近正常范围。白芦笋渣醇提取物中含有免疫活性物质且为高极性化合物，因此极性越强的萃取液提取免疫活性越强，对细胞因子的释放具有积极作用。(注：^abc不同的上标字母表示通过方差分析确定的统计差异(p<0.05))。

4.结论

白芦笋汁口服液主要成分为白芦笋原汁以及水极性部分的白芦笋渣提取物，综上分析白芦笋汁口服液中，白芦笋原汁以及水极性部分的白芦笋渣提取物均能够显著提高环磷酰胺所致的免疫抑制小鼠的胸腺、脾脏与肝脏指数，以及il-2、il-4、tnf-α、ifn-γ的含量，将血常规指数恢复至近正常生理水平。

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