一种抗氧化饲料添加剂及其用途的制作方法
2021-01-07 10:01:39|331|起点商标网
本发明涉及饲料添加剂
技术领域:
,具体地涉及一种抗氧化饲料添加剂及其用途。
背景技术:
:随着我们畜牧业从数量型逐步向质量型的发展,近年来时常出现一些令人困惑的问题,如猪的黄膘肉、肉色和系水力不好,禽的猝死、腹水,鱼的体色异常、肝胆综合症等,严重影响了肉、蛋、奶产品的品质及畜牧业的可持续发展。从本质看,这些问题都属于体内过量自由基所引起的饲养动物氧化损伤问题,在健康正常情况下,动物体内的抗氧化系统可以将其控制在合理的水平,使其能够发挥有利于代谢的作用,即氧自由基的产生和清除处于一种动态平衡。但是随着动物年龄的增加,自身抗氧化能力逐渐下降,以及环境污染、药物、病毒感染等外界因素产生的大量氧自由基超过了动物体内所需的合理水平,从而损伤细胞,使组织器官机能下降,各种疾病开始慢慢形成。而目前饲料工业应对这类氧化损伤问题的方法有限,常用的有大剂量运用vite醋酸酯或者添加有机硒等。无论是vite还是有机硒,其均为人工选择的成分,且其成分单一,所以机体综合抗氧化效果有限,时常表现出解决饲养动物氧化损伤问题效果不佳的现象。技术实现要素:本发明的目的是为了克服上述
背景技术:
的不足,提供了一种抗氧化饲料添加剂,有助于保持氧自由基在体内的平衡,有助于维持机体的健康状态。本发明的目的通过以下技术方案来实现:第一方面,本发明提供一种抗氧化饲料添加剂,所述抗氧化饲料添加剂包含西红柿外泌体冻干粉、吐温80、甘露醇、甘氨酸和普鲁兰多糖。在优选的实施方式中,所述西红柿外泌体冻干粉和所述吐温80的重量份数比为1-3:3.5-5。例如,所述西红柿外泌体冻干粉的重量份数可以为1、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9或3;所述吐温80的重量份数可以为3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9或5。在优选的实施方式中,所述甘氨酸和所述普鲁兰多糖的重量份数比为1-5:3-7。例如,所述甘氨酸的重量份数可以为1、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3、3.2、3.5、3.7、3.8、4、4.1、4.3、4.5、4.6、4.9或5;所述普鲁兰多糖的重量份数可以为3、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5、5.1、5.2、5.3、5.5、5.7、6、6.1、6.2、6.3、6.5、6.6、6.8或7。在优选的实施方式中,所述西红柿外泌体冻干粉的制备方法包含以下步骤:西红柿外泌体冻干粉的提取:称取110g新鲜西红柿倒入破碎机中,向其中加入110ml灭菌pbs,破碎匀浆之后在2000×g,4℃离心20min,去除较大的残渣;取中间层的红色透明溶液在50000×g,4℃离心50min;取上清液在80000×g,4℃离心40min,然后使用2ml无菌pbs重悬沉淀再在80000×g,4℃离心40min;再次使用2ml无菌pbs重悬沉淀,即得西红柿外泌体;西红柿外泌体冻干粉的冻干:提取的西红柿外泌体在-30℃冷冻1h直至物料中心温度为-25℃,再将物料放置加热板进行加热,在0.5h内将加热板温度升高至90℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至80℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至60℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至50℃,并在此温度下维持5h直至物料温度不再变化,即得西红柿外泌体冻干粉。第二方面,提供一种饲料,所述饲料包含本发明所述的抗氧化饲料添加剂。在优选的实施方式中,所述抗氧化饲料添加剂的添加量为100-600mg/kg基础饲料。在优选的实施方式中,所述基础饲料包含牛乳粉、玉米粉、虾壳粉、海藻粉、果寡糖、维生素a、维生素b、山麦冬、胡萝卜和盐。在更优选的实施方式中,按照重量份数,所述基础饲料包含10-15份牛乳粉、15-20份玉米粉、2-6份虾壳粉、3-7份海藻粉、1-3份果寡糖、3-5份维生素a、3-5份维生素b、1-5份山麦冬、3-6份胡萝卜和0.5-2份盐。在最优选的实施方式中,按照重量份数,所述基础饲料包含11份牛乳粉、16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、2份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐。在优选的实施方式中,所述基础饲料的制备方法包含以下步骤:s1.将玉米粉、虾壳粉、海藻粉、牛乳粉、山麦冬和胡萝卜用搅拌机搅拌,超微粉碎后,得到混合物a;s2.将果寡糖、维生素a、维生素b和盐用搅拌机搅拌,得到混合物b;s3.将混合物a和混合物b混合,在搅拌机中搅拌,得到混合物c;s4.将混合物c进行膨化,膨化后进入100℃烘箱进行干燥;s5.将s4得到的干燥的物料通过模具制成块状,包装即得。在优选的实施方式中,所述抗氧化饲料添加剂的添加间隔为每隔24小时至每隔36小时一次。在更优选的实施方式中,所述抗氧化饲料添加剂的添加间隔为每隔24小时一次。第三方面,提供本发明所述的抗氧化饲料添加剂在制备饲料中的用途。第四方面,提供一种药物组合物,所述药物组合物包含安全有效量的如本发明所述的抗氧化饲料添加剂。第五方面,提供本发明所述的抗氧化饲料添加剂在制备药物组合物中的用途。在本发明中,安全有效量是指一定量的化合物或组合物,所述量足以显著诱发积极的有益效果,优选积极的抗氧化的有益效果,以独立或组合的形式包括本文所公开的有益效果,但所述量又足够低以避免严重的副作用,即在技术人员合理判断的范围内提供合理的效险比。相对于现有技术,本发明的有益效果在于:西红柿中含有的番茄红素和维生素c具有一定的抗氧化性,但是其抗氧化性仍然有限,而西红柿外泌体中除了番茄红素和维生素c,还有蛋白质、rna、次生代谢产物等,这些成分是西红柿自己本身进化选择出来的,这些成分共同协同能够更好的发挥抗氧化效果,而且西红柿外泌体为磷脂双分子层结构,粒径比较小,更容易与细胞发生反应,从而更好的发挥抗氧化效果。本发明提供的抗氧化饲料添加剂,选用西红柿外泌体冻干粉,通过高速离心提取及冻干技术,以物理提取方式和冻干技术保证提取率的同时最大程度的保留了西红柿外泌体完整的囊泡结构,并且抗氧化饲料添加剂中含有的吐温80可以作为西红柿外泌体冻干粉的保护剂,可以对西红柿外泌体冻干粉起到一定的包埋包裹的保护作用,从而保证了其活性,且可以延长西红柿外泌体冻干粉的保存时间,确保功效成分的有效性从而保证产品效果。本发明将西红柿外泌体冻干粉和吐温80的重量份数比控制在1-3:3.5-5的范围内,使得吐温80能够更好的保护西红柿外泌体冻干粉的活性,从而更好的保证产品功效。本发明将甘氨酸和普鲁兰多糖的重量份数比控制在1-5:3-7的范围内,能够更好的发挥甘氨酸和普鲁兰多糖的抗氧化性,从而保证了产品功效。本发明抗氧化饲料添加剂中各个组分的重量份数过多或过少都会对抗氧化饲料添加剂的性能产生影响,例如,吐温80的重量份数过高或过低都会降低对西红柿外泌体冻干粉的保护作用,影响西红柿外泌体冻干粉中功效成分的发挥;例如,西红柿外泌体冻干粉的重量份数过高,会影响其他功效成分的发挥,重量份数过低达不到要求的效果。即本发明提供的抗氧化饲料添加剂,通过各物质的整体配合,使得本发明抗氧化饲料添加剂的抗氧化作用最大化。具体实施方式为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合实施例,对本发明进行进一步详细说明。本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出,部分将从下面的描述中变得明显,或通过本发明的实践了解到。应当理解,以下描述仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。本文中所用的术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形,意在覆盖非排它性的包括。例如,包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素,而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。连接词“由…组成”排除任何未指出的要素、步骤或组分。如果用于权利要求中,此短语将使权利要求为封闭式,使其不包含除那些描述的材料以外的材料,但与其相关的常规杂质除外。当短语“由…组成”出现在权利要求主体的子句中而不是紧接在主题之后时,其仅限定在该子句中描述的要素;其它要素并不被排除在作为整体的所述权利要求之外。当量、浓度、或者其它值或参数以范围、优选范围、或一系列上限优选值和下限优选值限定的范围表示时,这应当被理解为具体公开了由任何范围上限或优选值与任何范围下限或优选值的任一配对所形成的所有范围,而不论该范围是否单独公开了。例如,当公开了范围“1至5”时,所描述的范围应被解释为包括范围“1至4”、“1至3”、“1至2”、“1至2和4至5”、“1至3和5”等。当数值范围在本文中被描述时,除非另外说明,否则该范围意图包括其端值和在该范围内的所有整数和分数。说明书和权利要求书中的近似用语用来修饰数量,表示本发明并不限定于该具体数量,还包括与该数量接近的可接受的而不会导致相关基本功能的改变的修正的部分。相应的,用“大约”、“约”等修饰一个数值,意为本发明不限于该精确数值。在某些例子中,近似用语可能对应于测量数值的仪器的精度。在本申请说明书和权利要求书中,范围限定可以组合和/或互换,如果没有另外说明这些范围包括其间所含有的所有子范围。本发明要素或组分前的不定冠词“一种”和“一个”对要素或组分的数量要求(即出现次数)无限制性。因此“一个”或“一种”应被解读为包括一个或至少一个,并且单数形式的要素或组分也包括复数形式,除非所述数量明显只指单数形式。实施例1本实施例提供一种饲料,所述饲料包含抗氧化饲料添加剂和基础饲料,按照重量份数,所述抗氧化饲料添加剂包含1份西红柿外泌体冻干粉、3.5份吐温80、2份甘露醇、1份甘氨酸和3份普鲁兰多糖;所述基础饲料包含11份牛乳粉、16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、2份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐;所述西红柿外泌体冻干粉的制备方法包含以下步骤:西红柿外泌体冻干粉的提取:称取110g新鲜西红柿倒入破碎机中,向其中加入110ml灭菌pbs,破碎匀浆之后在2000×g,4℃离心20min,去除较大的残渣;取中间层的红色透明溶液在50000×g,4℃离心50min;取上清液在80000×g,4℃离心40min,然后使用2ml无菌pbs重悬沉淀再在80000×g,4℃离心40min;再次使用2ml无菌pbs重悬沉淀,即得西红柿外泌体;西红柿外泌体冻干粉的冻干:提取的西红柿外泌体在-30℃冷冻1h直至物料中心温度为-25℃,再将物料放置加热板进行加热,在0.5h内将加热板温度升高至90℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至80℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至60℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至50℃,并在此温度下维持5h直至物料温度不再变化,即得西红柿外泌体冻干粉。实施例2本实施例提供一种饲料,所述饲料包含抗氧化饲料添加剂和基础饲料,按照重量份数,所述抗氧化饲料添加剂包含3份西红柿外泌体冻干粉、5份吐温80、6份甘露醇、5份甘氨酸和7份普鲁兰多糖;所述基础饲料包含11份牛乳粉、16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、2份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐;所述西红柿外泌体冻干粉的制备方法包含以下步骤:西红柿外泌体冻干粉的提取:称取110g新鲜西红柿倒入破碎机中,向其中加入110ml灭菌pbs,破碎匀浆之后在2000×g,4℃离心20min,去除较大的残渣;取中间层的红色透明溶液在50000×g,4℃离心50min;取上清液在80000×g,4℃离心40min,然后使用2ml无菌pbs重悬沉淀再在80000×g,4℃离心40min;再次使用2ml无菌pbs重悬沉淀,即得西红柿外泌体;西红柿外泌体冻干粉的冻干:提取的西红柿外泌体在-30℃冷冻1h直至物料中心温度为-25℃,再将物料放置加热板进行加热,在0.5h内将加热板温度升高至90℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至80℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至60℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至50℃,并在此温度下维持5h直至物料温度不再变化,即得西红柿外泌体冻干粉。实施例3本实施例提供一种饲料,所述饲料包含抗氧化饲料添加剂和基础饲料,按照重量份数,所述抗氧化饲料添加剂包含2份西红柿外泌体冻干粉、4份吐温80、3份甘露醇、2份甘氨酸和5份普鲁兰多糖;所述基础饲料包含11份牛乳粉、16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、2份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐;所述西红柿外泌体冻干粉的制备方法包含以下步骤:西红柿外泌体冻干粉的提取:称取110g新鲜西红柿倒入破碎机中,向其中加入110ml灭菌pbs,破碎匀浆之后在2000×g,4℃离心20min,去除较大的残渣;取中间层的红色透明溶液在50000×g,4℃离心50min;取上清液在80000×g,4℃离心40min,然后使用2ml无菌pbs重悬沉淀再在80000×g,4℃离心40min;再次使用2ml无菌pbs重悬沉淀,即得西红柿外泌体;西红柿外泌体冻干粉的冻干:提取的西红柿外泌体在-30℃冷冻1h直至物料中心温度为-25℃,再将物料放置加热板进行加热,在0.5h内将加热板温度升高至90℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至80℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至60℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至50℃,并在此温度下维持5h直至物料温度不再变化,即得西红柿外泌体冻干粉。实施例4本实施例提供抗氧化饲料添加剂制备方法,所述方法包含以下步骤:s1.称取西红柿外泌体冻干粉、吐温80、甘露醇、甘氨酸和普鲁兰多糖;s2.将步骤s1中称取的组分混合后倒入造粒机进行造粒;s3.将步骤s2中得到的颗粒进行包装。实施例5本实施例提供基础饲料的制备方法,所述方法包含以下步骤:s1.将玉米粉、虾壳粉、海藻粉、牛乳粉、山麦冬和胡萝卜用搅拌机搅拌,超微粉碎后,得到混合物a;s2.将果寡糖、维生素a、维生素b和盐用搅拌机搅拌,得到混合物b;s3.将混合物a和混合物b混合,在搅拌机中搅拌,得到混合物c;s4.将混合物c进行膨化,膨化后进入100℃烘箱进行干燥;s5.将s4得到的干燥的物料通过模具制成块状,包装即得。对比例1该对比例提供一种饲料,所述饲料包含抗氧化饲料添加剂和基础饲料,按照重量份数,所述抗氧化饲料添加剂包含2份生姜外泌体冻干粉、4份吐温80、3份甘露醇、2份甘氨酸和5份普鲁兰多糖;所述基础饲料包含11份牛乳粉、16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、2份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐;所述生姜外泌体冻干粉的制备方法包含以下步骤:生姜外泌体冻干粉的提取:称取110g新鲜生姜倒入破碎机中,向其中加入110ml灭菌pbs,破碎匀浆之后在2000×g,4℃离心20min,去除较大的残渣;取中间层的黄色透明溶液在50000×g,4℃离心50min;取上清液在80000×g,4℃离心40min,然后使用2ml无菌pbs重悬沉淀再在80000×g,4℃离心40min;再次使用2ml无菌pbs重悬沉淀,即得生姜外泌体;生姜外泌体冻干粉的冻干:提取的生姜外泌体在-30℃冷冻1h直至物料中心温度为-25℃,再将物料放置加热板进行加热,在0.5h内将加热板温度升高至90℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至80℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至60℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至50℃,并在此温度下维持5h直至物料温度不再变化,即得生姜外泌体冻干粉。对比例2该对比例提供一种饲料,所述饲料包含抗氧化饲料添加剂和基础饲料,按照重量份数,所述抗氧化饲料添加剂包含2份维生素e、4份吐温80、3份甘露醇、2份甘氨酸和5份普鲁兰多糖;所述基础饲料包含11份牛乳粉、16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、2份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐。对比例3该对比例提供一种饲料,所述饲料包含抗氧化饲料添加剂和基础饲料,按照重量份数,所述抗氧化饲料添加剂包含2份西红柿外泌体冻干粉、3份甘露醇、2份甘氨酸和5份普鲁兰多糖;所述基础饲料包含11份牛乳粉、16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、2份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐;所述西红柿外泌体冻干粉的制备方法包含以下步骤:西红柿外泌体冻干粉的提取:称取110g新鲜西红柿倒入破碎机中,向其中加入110ml灭菌pbs,破碎匀浆之后在2000×g,4℃离心20min,去除较大的残渣;取中间层的红色透明溶液在50000×g,4℃离心50min;取上清液在80000×g,4℃离心40min,然后使用2ml无菌pbs重悬沉淀再在80000×g,4℃离心40min;再次使用2ml无菌pbs重悬沉淀,即得西红柿外泌体;西红柿外泌体冻干粉的冻干:提取的西红柿外泌体在-30℃冷冻1h直至物料中心温度为-25℃,再将物料放置加热板进行加热,在0.5h内将加热板温度升高至90℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至80℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至60℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至50℃,并在此温度下维持5h直至物料温度不再变化,即得西红柿外泌体冻干粉。对比例4该对比例提供一种饲料,所述饲料包含抗氧化饲料添加剂和基础饲料,按照重量份数,所述抗氧化饲料添加剂包含2份西红柿外泌体冻干粉、4份吐温80、3份甘露醇和5份普鲁兰多糖;所述基础饲料包含11份牛乳粉、16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、2份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐;所述西红柿外泌体冻干粉的制备方法包含以下步骤:西红柿外泌体冻干粉的提取:称取110g新鲜西红柿倒入破碎机中,向其中加入110ml灭菌pbs,破碎匀浆之后在2000×g,4℃离心20min,去除较大的残渣;取中间层的红色透明溶液在50000×g,4℃离心50min;取上清液在80000×g,4℃离心40min,然后使用2ml无菌pbs重悬沉淀再在80000×g,4℃离心40min;再次使用2ml无菌pbs重悬沉淀,即得西红柿外泌体;西红柿外泌体冻干粉的冻干:提取的西红柿外泌体在-30℃冷冻1h直至物料中心温度为-25℃,再将物料放置加热板进行加热,在0.5h内将加热板温度升高至90℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至80℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至60℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至50℃,并在此温度下维持5h直至物料温度不再变化,即得西红柿外泌体冻干粉。对比例5该对比例提供一种饲料,所述饲料包含抗氧化饲料添加剂和基础饲料,按照重量份数,所述抗氧化饲料添加剂包含0.5份西红柿外泌体冻干粉、4份吐温80、3份甘露醇、2份甘氨酸和5份普鲁兰多糖;所述基础饲料包含11份牛乳粉、16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、2份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐;所述西红柿外泌体冻干粉的制备方法包含以下步骤:西红柿外泌体冻干粉的提取:称取110g新鲜西红柿倒入破碎机中,向其中加入110ml灭菌pbs,破碎匀浆之后在2000×g,4℃离心20min,去除较大的残渣;取中间层的红色透明溶液在50000×g,4℃离心50min;取上清液在80000×g,4℃离心40min,然后使用2ml无菌pbs重悬沉淀再在80000×g,4℃离心40min;再次使用2ml无菌pbs重悬沉淀,即得西红柿外泌体;西红柿外泌体冻干粉的冻干:提取的西红柿外泌体在-30℃冷冻1h直至物料中心温度为-25℃,再将物料放置加热板进行加热,在0.5h内将加热板温度升高至90℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至80℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至60℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至50℃,并在此温度下维持5h直至物料温度不再变化,即得西红柿外泌体冻干粉。对比例6该对比例提供一种饲料,所述饲料包含抗氧化饲料添加剂和基础饲料,按照重量份数,所述抗氧化饲料添加剂包含4份西红柿外泌体冻干粉、4份吐温80、3份甘露醇、2份甘氨酸和5份普鲁兰多糖;所述基础饲料包含11份牛乳粉、16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、2份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐;所述西红柿外泌体冻干粉的制备方法包含以下步骤:西红柿外泌体冻干粉的提取:称取110g新鲜西红柿倒入破碎机中,向其中加入110ml灭菌pbs,破碎匀浆之后在2000×g,4℃离心20min,去除较大的残渣;取中间层的红色透明溶液在50000×g,4℃离心50min;取上清液在80000×g,4℃离心40min,然后使用2ml无菌pbs重悬沉淀再在80000×g,4℃离心40min;再次使用2ml无菌pbs重悬沉淀,即得西红柿外泌体;西红柿外泌体冻干粉的冻干:提取的西红柿外泌体在-30℃冷冻1h直至物料中心温度为-25℃,再将物料放置加热板进行加热,在0.5h内将加热板温度升高至90℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至80℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至60℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至50℃,并在此温度下维持5h直至物料温度不再变化,即得西红柿外泌体冻干粉。对比例7该对比例提供一种饲料,所述饲料包含抗氧化饲料添加剂和基础饲料,按照重量份数,所述抗氧化饲料添加剂包含2份西红柿外泌体冻干粉、4份吐温80、3份甘露醇、2份甘氨酸和5份普鲁兰多糖;所述基础饲料包含16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、2份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐;所述西红柿外泌体冻干粉的制备方法包含以下步骤:西红柿外泌体冻干粉的提取:称取110g新鲜西红柿倒入破碎机中,向其中加入110ml灭菌pbs,破碎匀浆之后在2000×g,4℃离心20min,去除较大的残渣;取中间层的红色透明溶液在50000×g,4℃离心50min;取上清液在80000×g,4℃离心40min,然后使用2ml无菌pbs重悬沉淀再在80000×g,4℃离心40min;再次使用2ml无菌pbs重悬沉淀,即得西红柿外泌体;西红柿外泌体冻干粉的冻干:提取的西红柿外泌体在-30℃冷冻1h直至物料中心温度为-25℃,再将物料放置加热板进行加热,在0.5h内将加热板温度升高至90℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至80℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至60℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至50℃,并在此温度下维持5h直至物料温度不再变化,即得西红柿外泌体冻干粉。对比例8该对比例提供一种饲料,所述饲料包含抗氧化饲料添加剂和基础饲料,按照重量份数,所述抗氧化饲料添加剂包含2份西红柿外泌体冻干粉、4份吐温80、3份甘露醇、2份甘氨酸和5份普鲁兰多糖;所述基础饲料包含11份牛乳粉、16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、0.5份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐;所述西红柿外泌体冻干粉的制备方法包含以下步骤:西红柿外泌体冻干粉的提取:称取110g新鲜西红柿倒入破碎机中,向其中加入110ml灭菌pbs,破碎匀浆之后在2000×g,4℃离心20min,去除较大的残渣;取中间层的红色透明溶液在50000×g,4℃离心50min;取上清液在80000×g,4℃离心40min,然后使用2ml无菌pbs重悬沉淀再在80000×g,4℃离心40min;再次使用2ml无菌pbs重悬沉淀,即得西红柿外泌体;西红柿外泌体冻干粉的冻干:提取的西红柿外泌体在-30℃冷冻1h直至物料中心温度为-25℃,再将物料放置加热板进行加热,在0.5h内将加热板温度升高至90℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至80℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至60℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至50℃,并在此温度下维持5h直至物料温度不再变化,即得西红柿外泌体冻干粉。对比例9该对比例提供一种饲料,所述饲料包含抗氧化饲料添加剂和基础饲料,按照重量份数,所述抗氧化饲料添加剂包含2份西红柿外泌体冻干粉、4份吐温80、3份甘露醇、2份甘氨酸和5份普鲁兰多糖;所述基础饲料包含11份牛乳粉、16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、4份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐;所述西红柿外泌体冻干粉的制备方法包含以下步骤:西红柿外泌体冻干粉的提取:称取110g新鲜西红柿倒入破碎机中,向其中加入110ml灭菌pbs,破碎匀浆之后在2000×g,4℃离心20min,去除较大的残渣;取中间层的红色透明溶液在50000×g,4℃离心50min;取上清液在80000×g,4℃离心40min,然后使用2ml无菌pbs重悬沉淀再在80000×g,4℃离心40min;再次使用2ml无菌pbs重悬沉淀,即得西红柿外泌体;西红柿外泌体冻干粉的冻干:提取的西红柿外泌体在-30℃冷冻1h直至物料中心温度为-25℃,再将物料放置加热板进行加热,在0.5h内将加热板温度升高至90℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至80℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至60℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至50℃,并在此温度下维持5h直至物料温度不再变化,即得西红柿外泌体冻干粉。效果验证:测定血液中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶和丙二醛受试样品:本发明实施例1-3、对比例1-9制备得到的样品实验对象:选取同品种猪120头,雌雄数目一样,实验前身体健康,体重相近(20kg左右),采用随机方式,分为十二组,其中每组公猪5头,母猪5头。实验管理:实验猪单笼饲养,每猪平均占有1m2左右,实验期间,实验猪自由饮水,每日饲喂4次,早中午晚各一次,每次间隔4-5h,少喂勤添,喂量以料槽内略有剩余为度。猪舍舍温控制在27-28℃,相对湿度控制在80%左右。定期冲洗圈舍,保持圈舍通风、清洁、干燥、卫生,至体重40kg左右结束。实验方法:实验结束当天的早上,对实验猪进行空腹采血15ml,静置冰盒30min后,在转速4000r/min条件下离心10min,分离血清,于-70℃冰箱中保存。采用南京建成生物工程研究所的检测试剂盒进行测定,测定步骤和结果计算按照说明书进行。数据分析:实验数据采用excel2007整理,用spss17.0进行统计分析。实验各组之间的差异采用“单因子方差分析”,多重比较采用“最小显著差数法”,结果用“平均值±标准误”表示,以p<0.05为差异显著判断标准。考虑到效果和成本的双重因素,本发明抗氧化饲料添加剂的添加量为200mg/kg基础饲料,本发明抗氧化饲料添加剂的添加间隔为每隔24小时添加一次。实验结果见下表1。表1血液中总抗氧化能力(u/ml)、超氧化物歧化酶(u/ml)和丙二醛(u/ml)的测定结果分组总抗氧化能力超氧化物歧化酶丙二醛实施例13.831503.23实施例23.851523.20实施例33.971583.11对比例13.131163.87对比例23.321184.52对比例33.121204.63对比例43.131254.16对比例53.101193.75对比例63.181214.00对比例73.121273.93对比例83.211303.86对比例93.231284.11同样的,为了进一步说明本发明的有益效果,提供以下对比例:提供对比例1.1,和实施例3相比,该对比例1.1的区别在于:将西红柿外泌体替换为牛奶外泌体;提供对比例1.2,和实施例3相比,该对比例1.2的区别在于:将西红柿外泌体替换为柠檬外泌体;结合本发明的制备方法制备成饲料,验证其在动物中的抗氧化作用,按照测定血液中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶和丙二醛的方法进行测试。观察对比例1.1、对比例1.2制备的饲料的抗氧化效果。结果同上述对比例1中类似。同样的,为了进一步说明本发明的有益效果,提供以下对比例:提供对比例2.1,和实施例3相比,该对比例2.1的区别在于:将西红柿外泌体替换为维生素c;结合本发明的制备方法制备成饲料,验证其在动物中的抗氧化作用,按照测定血液中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶和丙二醛的方法进行测试。观察对比例2.1制备的饲料的抗氧化效果。结果同上述对比例2中类似。同样的,为了进一步说明本发明的有益效果,提供以下对比例:提供对比例4.1,和实施例3相比,该对比例4.1的区别在于:未添加甘露醇;提供对比例4.2,和实施例3相比,该对比例4.2的区别在于:未添加普鲁兰多糖;结合本发明的制备方法制备成饲料,验证其在动物中的抗氧化作用,按照测定血液中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶和丙二醛的方法进行测试。观察对比例4.1、对比例4.2制备的饲料的抗氧化效果。结果同上述对比例4中类似。同样的,为了进一步说明本发明的有益效果,提供以下对比例:提供对比例5.1,和实施例3相比,该对比例5.1的区别在于:将吐温80的重量份数调整为2份;提供对比例5.2,和实施例3相比,该对比例5.2的区别在于:将甘氨酸的重量份数调整为0.5份;提供对比例5.3,和实施例3相比,该对比例5.3的区别在于:将普鲁兰多糖的重量份数调整为2份;结合本发明的制备方法制备成饲料,验证其在动物中的抗氧化作用,按照测定血液中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶和丙二醛的方法进行测试。观察对比例5.1、对比例5.2、对比例5.3制备的饲料的抗氧化效果。结果同上述对比例5中类似。同样的,为了进一步说明本发明的有益效果,提供以下对比例:提供对比例6.1,和实施例3相比,该对比例6.1的区别在于:将吐温80的重量份数调整为6份;提供对比例6.2,和实施例3相比,该对比例6.2的区别在于:将甘氨酸的重量份数调整为6份;提供对比例6.3,和实施例3相比,该对比例6.3的区别在于:将普鲁兰多糖的重量份数调整为8份;结合本发明的制备方法制备成饲料,验证其在动物中的抗氧化作用,按照测定血液中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶和丙二醛的方法进行测试。观察对比例6.1、对比例6.2、对比例6.3制备的饲料的抗氧化效果。结果同上述对比例6中类似。同样的,为了进一步说明本发明的有益效果,提供以下对比例:提供对比例7.1,和实施例3相比,该对比例7.1的区别在于:未添加果寡糖;提供对比例7.2,和实施例3相比,该对比例7.2的区别在于:未添加海藻粉;提供对比例7.3,和实施例3相比,该对比例7.3的区别在于:未添加山麦冬;结合本发明的制备方法制备成饲料,验证其在动物中的抗氧化作用,按照测定血液中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶和丙二醛的方法进行测试。观察对比例7.1、对比例7.2、对比例7.3制备的饲料的抗氧化效果。结果同上述对比例7中类似。由以上结果可知:提供包含本发明抗氧化饲料添加剂的饲料,饲养实验动物,实验动物的血清总抗氧化能力、血清超氧化物歧化酶酶活力均有明显提高,实验动物的血清丙二醛含量有明显降低,可见,本发明的抗氧化饲料添加剂能够显著提高机体的抗氧化能力,从而降低动物养殖过程中的氧化应激和氧化损伤。而提供未使用本发明配方体系的抗氧化饲料添加剂,饲养实验动物,实验动物的血清总抗氧化能力、血清超氧化物歧化酶酶活力提高不明显,实验动物血清丙二醛的含量降低也不明显。提供包含本发明基础饲料的饲料,饲养实验动物,实验动物的血清总抗氧化能力、血清超氧化物歧化酶酶活力均有明显提高,实验动物的血清丙二醛含量有明显降低,可见,包含本发明基础饲料的饲料能够显著提高机体的抗氧化能力,从而降低动物养殖过程中的氧化应激和氧化损伤。而提供未使用本发明配方体系的基础饲料,饲养实验动物,实验动物的血清总抗氧化能力、血清超氧化物歧化酶酶活力提高不明显,实验动物血清丙二醛的含量降低也不明显。应该理解到披露的本发明不仅仅限于描述的特定的方法、方案和物质,因为这些均可变化。还应理解这里所用的术语仅仅是为了描述特定的实施方式方案的目的,而不是意欲限制本发明的范围,本发明的范围仅受限于所附的权利要求。本领域的技术人员容易理解,以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。当前第1页1 2 3 
技术领域:
,具体地涉及一种抗氧化饲料添加剂及其用途。
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:随着我们畜牧业从数量型逐步向质量型的发展,近年来时常出现一些令人困惑的问题,如猪的黄膘肉、肉色和系水力不好,禽的猝死、腹水,鱼的体色异常、肝胆综合症等,严重影响了肉、蛋、奶产品的品质及畜牧业的可持续发展。从本质看,这些问题都属于体内过量自由基所引起的饲养动物氧化损伤问题,在健康正常情况下,动物体内的抗氧化系统可以将其控制在合理的水平,使其能够发挥有利于代谢的作用,即氧自由基的产生和清除处于一种动态平衡。但是随着动物年龄的增加,自身抗氧化能力逐渐下降,以及环境污染、药物、病毒感染等外界因素产生的大量氧自由基超过了动物体内所需的合理水平,从而损伤细胞,使组织器官机能下降,各种疾病开始慢慢形成。而目前饲料工业应对这类氧化损伤问题的方法有限,常用的有大剂量运用vite醋酸酯或者添加有机硒等。无论是vite还是有机硒,其均为人工选择的成分,且其成分单一,所以机体综合抗氧化效果有限,时常表现出解决饲养动物氧化损伤问题效果不佳的现象。技术实现要素:本发明的目的是为了克服上述
背景技术:
的不足,提供了一种抗氧化饲料添加剂,有助于保持氧自由基在体内的平衡,有助于维持机体的健康状态。本发明的目的通过以下技术方案来实现:第一方面,本发明提供一种抗氧化饲料添加剂,所述抗氧化饲料添加剂包含西红柿外泌体冻干粉、吐温80、甘露醇、甘氨酸和普鲁兰多糖。在优选的实施方式中,所述西红柿外泌体冻干粉和所述吐温80的重量份数比为1-3:3.5-5。例如,所述西红柿外泌体冻干粉的重量份数可以为1、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9或3;所述吐温80的重量份数可以为3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9或5。在优选的实施方式中,所述甘氨酸和所述普鲁兰多糖的重量份数比为1-5:3-7。例如,所述甘氨酸的重量份数可以为1、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3、3.2、3.5、3.7、3.8、4、4.1、4.3、4.5、4.6、4.9或5;所述普鲁兰多糖的重量份数可以为3、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5、5.1、5.2、5.3、5.5、5.7、6、6.1、6.2、6.3、6.5、6.6、6.8或7。在优选的实施方式中,所述西红柿外泌体冻干粉的制备方法包含以下步骤:西红柿外泌体冻干粉的提取:称取110g新鲜西红柿倒入破碎机中,向其中加入110ml灭菌pbs,破碎匀浆之后在2000×g,4℃离心20min,去除较大的残渣;取中间层的红色透明溶液在50000×g,4℃离心50min;取上清液在80000×g,4℃离心40min,然后使用2ml无菌pbs重悬沉淀再在80000×g,4℃离心40min;再次使用2ml无菌pbs重悬沉淀,即得西红柿外泌体;西红柿外泌体冻干粉的冻干:提取的西红柿外泌体在-30℃冷冻1h直至物料中心温度为-25℃,再将物料放置加热板进行加热,在0.5h内将加热板温度升高至90℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至80℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至60℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至50℃,并在此温度下维持5h直至物料温度不再变化,即得西红柿外泌体冻干粉。第二方面,提供一种饲料,所述饲料包含本发明所述的抗氧化饲料添加剂。在优选的实施方式中,所述抗氧化饲料添加剂的添加量为100-600mg/kg基础饲料。在优选的实施方式中,所述基础饲料包含牛乳粉、玉米粉、虾壳粉、海藻粉、果寡糖、维生素a、维生素b、山麦冬、胡萝卜和盐。在更优选的实施方式中,按照重量份数,所述基础饲料包含10-15份牛乳粉、15-20份玉米粉、2-6份虾壳粉、3-7份海藻粉、1-3份果寡糖、3-5份维生素a、3-5份维生素b、1-5份山麦冬、3-6份胡萝卜和0.5-2份盐。在最优选的实施方式中,按照重量份数,所述基础饲料包含11份牛乳粉、16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、2份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐。在优选的实施方式中,所述基础饲料的制备方法包含以下步骤:s1.将玉米粉、虾壳粉、海藻粉、牛乳粉、山麦冬和胡萝卜用搅拌机搅拌,超微粉碎后,得到混合物a;s2.将果寡糖、维生素a、维生素b和盐用搅拌机搅拌,得到混合物b;s3.将混合物a和混合物b混合,在搅拌机中搅拌,得到混合物c;s4.将混合物c进行膨化,膨化后进入100℃烘箱进行干燥;s5.将s4得到的干燥的物料通过模具制成块状,包装即得。在优选的实施方式中,所述抗氧化饲料添加剂的添加间隔为每隔24小时至每隔36小时一次。在更优选的实施方式中,所述抗氧化饲料添加剂的添加间隔为每隔24小时一次。第三方面,提供本发明所述的抗氧化饲料添加剂在制备饲料中的用途。第四方面,提供一种药物组合物,所述药物组合物包含安全有效量的如本发明所述的抗氧化饲料添加剂。第五方面,提供本发明所述的抗氧化饲料添加剂在制备药物组合物中的用途。在本发明中,安全有效量是指一定量的化合物或组合物,所述量足以显著诱发积极的有益效果,优选积极的抗氧化的有益效果,以独立或组合的形式包括本文所公开的有益效果,但所述量又足够低以避免严重的副作用,即在技术人员合理判断的范围内提供合理的效险比。相对于现有技术,本发明的有益效果在于:西红柿中含有的番茄红素和维生素c具有一定的抗氧化性,但是其抗氧化性仍然有限,而西红柿外泌体中除了番茄红素和维生素c,还有蛋白质、rna、次生代谢产物等,这些成分是西红柿自己本身进化选择出来的,这些成分共同协同能够更好的发挥抗氧化效果,而且西红柿外泌体为磷脂双分子层结构,粒径比较小,更容易与细胞发生反应,从而更好的发挥抗氧化效果。本发明提供的抗氧化饲料添加剂,选用西红柿外泌体冻干粉,通过高速离心提取及冻干技术,以物理提取方式和冻干技术保证提取率的同时最大程度的保留了西红柿外泌体完整的囊泡结构,并且抗氧化饲料添加剂中含有的吐温80可以作为西红柿外泌体冻干粉的保护剂,可以对西红柿外泌体冻干粉起到一定的包埋包裹的保护作用,从而保证了其活性,且可以延长西红柿外泌体冻干粉的保存时间,确保功效成分的有效性从而保证产品效果。本发明将西红柿外泌体冻干粉和吐温80的重量份数比控制在1-3:3.5-5的范围内,使得吐温80能够更好的保护西红柿外泌体冻干粉的活性,从而更好的保证产品功效。本发明将甘氨酸和普鲁兰多糖的重量份数比控制在1-5:3-7的范围内,能够更好的发挥甘氨酸和普鲁兰多糖的抗氧化性,从而保证了产品功效。本发明抗氧化饲料添加剂中各个组分的重量份数过多或过少都会对抗氧化饲料添加剂的性能产生影响,例如,吐温80的重量份数过高或过低都会降低对西红柿外泌体冻干粉的保护作用,影响西红柿外泌体冻干粉中功效成分的发挥;例如,西红柿外泌体冻干粉的重量份数过高,会影响其他功效成分的发挥,重量份数过低达不到要求的效果。即本发明提供的抗氧化饲料添加剂,通过各物质的整体配合,使得本发明抗氧化饲料添加剂的抗氧化作用最大化。具体实施方式为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合实施例,对本发明进行进一步详细说明。本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出,部分将从下面的描述中变得明显,或通过本发明的实践了解到。应当理解,以下描述仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。本文中所用的术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形,意在覆盖非排它性的包括。例如,包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素,而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。连接词“由…组成”排除任何未指出的要素、步骤或组分。如果用于权利要求中,此短语将使权利要求为封闭式,使其不包含除那些描述的材料以外的材料,但与其相关的常规杂质除外。当短语“由…组成”出现在权利要求主体的子句中而不是紧接在主题之后时,其仅限定在该子句中描述的要素;其它要素并不被排除在作为整体的所述权利要求之外。当量、浓度、或者其它值或参数以范围、优选范围、或一系列上限优选值和下限优选值限定的范围表示时,这应当被理解为具体公开了由任何范围上限或优选值与任何范围下限或优选值的任一配对所形成的所有范围,而不论该范围是否单独公开了。例如,当公开了范围“1至5”时,所描述的范围应被解释为包括范围“1至4”、“1至3”、“1至2”、“1至2和4至5”、“1至3和5”等。当数值范围在本文中被描述时,除非另外说明,否则该范围意图包括其端值和在该范围内的所有整数和分数。说明书和权利要求书中的近似用语用来修饰数量,表示本发明并不限定于该具体数量,还包括与该数量接近的可接受的而不会导致相关基本功能的改变的修正的部分。相应的,用“大约”、“约”等修饰一个数值,意为本发明不限于该精确数值。在某些例子中,近似用语可能对应于测量数值的仪器的精度。在本申请说明书和权利要求书中,范围限定可以组合和/或互换,如果没有另外说明这些范围包括其间所含有的所有子范围。本发明要素或组分前的不定冠词“一种”和“一个”对要素或组分的数量要求(即出现次数)无限制性。因此“一个”或“一种”应被解读为包括一个或至少一个,并且单数形式的要素或组分也包括复数形式,除非所述数量明显只指单数形式。实施例1本实施例提供一种饲料,所述饲料包含抗氧化饲料添加剂和基础饲料,按照重量份数,所述抗氧化饲料添加剂包含1份西红柿外泌体冻干粉、3.5份吐温80、2份甘露醇、1份甘氨酸和3份普鲁兰多糖;所述基础饲料包含11份牛乳粉、16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、2份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐;所述西红柿外泌体冻干粉的制备方法包含以下步骤:西红柿外泌体冻干粉的提取:称取110g新鲜西红柿倒入破碎机中,向其中加入110ml灭菌pbs,破碎匀浆之后在2000×g,4℃离心20min,去除较大的残渣;取中间层的红色透明溶液在50000×g,4℃离心50min;取上清液在80000×g,4℃离心40min,然后使用2ml无菌pbs重悬沉淀再在80000×g,4℃离心40min;再次使用2ml无菌pbs重悬沉淀,即得西红柿外泌体;西红柿外泌体冻干粉的冻干:提取的西红柿外泌体在-30℃冷冻1h直至物料中心温度为-25℃,再将物料放置加热板进行加热,在0.5h内将加热板温度升高至90℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至80℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至60℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至50℃,并在此温度下维持5h直至物料温度不再变化,即得西红柿外泌体冻干粉。实施例2本实施例提供一种饲料,所述饲料包含抗氧化饲料添加剂和基础饲料,按照重量份数,所述抗氧化饲料添加剂包含3份西红柿外泌体冻干粉、5份吐温80、6份甘露醇、5份甘氨酸和7份普鲁兰多糖;所述基础饲料包含11份牛乳粉、16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、2份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐;所述西红柿外泌体冻干粉的制备方法包含以下步骤:西红柿外泌体冻干粉的提取:称取110g新鲜西红柿倒入破碎机中,向其中加入110ml灭菌pbs,破碎匀浆之后在2000×g,4℃离心20min,去除较大的残渣;取中间层的红色透明溶液在50000×g,4℃离心50min;取上清液在80000×g,4℃离心40min,然后使用2ml无菌pbs重悬沉淀再在80000×g,4℃离心40min;再次使用2ml无菌pbs重悬沉淀,即得西红柿外泌体;西红柿外泌体冻干粉的冻干:提取的西红柿外泌体在-30℃冷冻1h直至物料中心温度为-25℃,再将物料放置加热板进行加热,在0.5h内将加热板温度升高至90℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至80℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至60℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至50℃,并在此温度下维持5h直至物料温度不再变化,即得西红柿外泌体冻干粉。实施例3本实施例提供一种饲料,所述饲料包含抗氧化饲料添加剂和基础饲料,按照重量份数,所述抗氧化饲料添加剂包含2份西红柿外泌体冻干粉、4份吐温80、3份甘露醇、2份甘氨酸和5份普鲁兰多糖;所述基础饲料包含11份牛乳粉、16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、2份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐;所述西红柿外泌体冻干粉的制备方法包含以下步骤:西红柿外泌体冻干粉的提取:称取110g新鲜西红柿倒入破碎机中,向其中加入110ml灭菌pbs,破碎匀浆之后在2000×g,4℃离心20min,去除较大的残渣;取中间层的红色透明溶液在50000×g,4℃离心50min;取上清液在80000×g,4℃离心40min,然后使用2ml无菌pbs重悬沉淀再在80000×g,4℃离心40min;再次使用2ml无菌pbs重悬沉淀,即得西红柿外泌体;西红柿外泌体冻干粉的冻干:提取的西红柿外泌体在-30℃冷冻1h直至物料中心温度为-25℃,再将物料放置加热板进行加热,在0.5h内将加热板温度升高至90℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至80℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至60℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至50℃,并在此温度下维持5h直至物料温度不再变化,即得西红柿外泌体冻干粉。实施例4本实施例提供抗氧化饲料添加剂制备方法,所述方法包含以下步骤:s1.称取西红柿外泌体冻干粉、吐温80、甘露醇、甘氨酸和普鲁兰多糖;s2.将步骤s1中称取的组分混合后倒入造粒机进行造粒;s3.将步骤s2中得到的颗粒进行包装。实施例5本实施例提供基础饲料的制备方法,所述方法包含以下步骤:s1.将玉米粉、虾壳粉、海藻粉、牛乳粉、山麦冬和胡萝卜用搅拌机搅拌,超微粉碎后,得到混合物a;s2.将果寡糖、维生素a、维生素b和盐用搅拌机搅拌,得到混合物b;s3.将混合物a和混合物b混合,在搅拌机中搅拌,得到混合物c;s4.将混合物c进行膨化,膨化后进入100℃烘箱进行干燥;s5.将s4得到的干燥的物料通过模具制成块状,包装即得。对比例1该对比例提供一种饲料,所述饲料包含抗氧化饲料添加剂和基础饲料,按照重量份数,所述抗氧化饲料添加剂包含2份生姜外泌体冻干粉、4份吐温80、3份甘露醇、2份甘氨酸和5份普鲁兰多糖;所述基础饲料包含11份牛乳粉、16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、2份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐;所述生姜外泌体冻干粉的制备方法包含以下步骤:生姜外泌体冻干粉的提取:称取110g新鲜生姜倒入破碎机中,向其中加入110ml灭菌pbs,破碎匀浆之后在2000×g,4℃离心20min,去除较大的残渣;取中间层的黄色透明溶液在50000×g,4℃离心50min;取上清液在80000×g,4℃离心40min,然后使用2ml无菌pbs重悬沉淀再在80000×g,4℃离心40min;再次使用2ml无菌pbs重悬沉淀,即得生姜外泌体;生姜外泌体冻干粉的冻干:提取的生姜外泌体在-30℃冷冻1h直至物料中心温度为-25℃,再将物料放置加热板进行加热,在0.5h内将加热板温度升高至90℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至80℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至60℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至50℃,并在此温度下维持5h直至物料温度不再变化,即得生姜外泌体冻干粉。对比例2该对比例提供一种饲料,所述饲料包含抗氧化饲料添加剂和基础饲料,按照重量份数,所述抗氧化饲料添加剂包含2份维生素e、4份吐温80、3份甘露醇、2份甘氨酸和5份普鲁兰多糖;所述基础饲料包含11份牛乳粉、16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、2份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐。对比例3该对比例提供一种饲料,所述饲料包含抗氧化饲料添加剂和基础饲料,按照重量份数,所述抗氧化饲料添加剂包含2份西红柿外泌体冻干粉、3份甘露醇、2份甘氨酸和5份普鲁兰多糖;所述基础饲料包含11份牛乳粉、16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、2份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐;所述西红柿外泌体冻干粉的制备方法包含以下步骤:西红柿外泌体冻干粉的提取:称取110g新鲜西红柿倒入破碎机中,向其中加入110ml灭菌pbs,破碎匀浆之后在2000×g,4℃离心20min,去除较大的残渣;取中间层的红色透明溶液在50000×g,4℃离心50min;取上清液在80000×g,4℃离心40min,然后使用2ml无菌pbs重悬沉淀再在80000×g,4℃离心40min;再次使用2ml无菌pbs重悬沉淀,即得西红柿外泌体;西红柿外泌体冻干粉的冻干:提取的西红柿外泌体在-30℃冷冻1h直至物料中心温度为-25℃,再将物料放置加热板进行加热,在0.5h内将加热板温度升高至90℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至80℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至60℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至50℃,并在此温度下维持5h直至物料温度不再变化,即得西红柿外泌体冻干粉。对比例4该对比例提供一种饲料,所述饲料包含抗氧化饲料添加剂和基础饲料,按照重量份数,所述抗氧化饲料添加剂包含2份西红柿外泌体冻干粉、4份吐温80、3份甘露醇和5份普鲁兰多糖;所述基础饲料包含11份牛乳粉、16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、2份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐;所述西红柿外泌体冻干粉的制备方法包含以下步骤:西红柿外泌体冻干粉的提取:称取110g新鲜西红柿倒入破碎机中,向其中加入110ml灭菌pbs,破碎匀浆之后在2000×g,4℃离心20min,去除较大的残渣;取中间层的红色透明溶液在50000×g,4℃离心50min;取上清液在80000×g,4℃离心40min,然后使用2ml无菌pbs重悬沉淀再在80000×g,4℃离心40min;再次使用2ml无菌pbs重悬沉淀,即得西红柿外泌体;西红柿外泌体冻干粉的冻干:提取的西红柿外泌体在-30℃冷冻1h直至物料中心温度为-25℃,再将物料放置加热板进行加热,在0.5h内将加热板温度升高至90℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至80℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至60℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至50℃,并在此温度下维持5h直至物料温度不再变化,即得西红柿外泌体冻干粉。对比例5该对比例提供一种饲料,所述饲料包含抗氧化饲料添加剂和基础饲料,按照重量份数,所述抗氧化饲料添加剂包含0.5份西红柿外泌体冻干粉、4份吐温80、3份甘露醇、2份甘氨酸和5份普鲁兰多糖;所述基础饲料包含11份牛乳粉、16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、2份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐;所述西红柿外泌体冻干粉的制备方法包含以下步骤:西红柿外泌体冻干粉的提取:称取110g新鲜西红柿倒入破碎机中,向其中加入110ml灭菌pbs,破碎匀浆之后在2000×g,4℃离心20min,去除较大的残渣;取中间层的红色透明溶液在50000×g,4℃离心50min;取上清液在80000×g,4℃离心40min,然后使用2ml无菌pbs重悬沉淀再在80000×g,4℃离心40min;再次使用2ml无菌pbs重悬沉淀,即得西红柿外泌体;西红柿外泌体冻干粉的冻干:提取的西红柿外泌体在-30℃冷冻1h直至物料中心温度为-25℃,再将物料放置加热板进行加热,在0.5h内将加热板温度升高至90℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至80℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至60℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至50℃,并在此温度下维持5h直至物料温度不再变化,即得西红柿外泌体冻干粉。对比例6该对比例提供一种饲料,所述饲料包含抗氧化饲料添加剂和基础饲料,按照重量份数,所述抗氧化饲料添加剂包含4份西红柿外泌体冻干粉、4份吐温80、3份甘露醇、2份甘氨酸和5份普鲁兰多糖;所述基础饲料包含11份牛乳粉、16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、2份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐;所述西红柿外泌体冻干粉的制备方法包含以下步骤:西红柿外泌体冻干粉的提取:称取110g新鲜西红柿倒入破碎机中,向其中加入110ml灭菌pbs,破碎匀浆之后在2000×g,4℃离心20min,去除较大的残渣;取中间层的红色透明溶液在50000×g,4℃离心50min;取上清液在80000×g,4℃离心40min,然后使用2ml无菌pbs重悬沉淀再在80000×g,4℃离心40min;再次使用2ml无菌pbs重悬沉淀,即得西红柿外泌体;西红柿外泌体冻干粉的冻干:提取的西红柿外泌体在-30℃冷冻1h直至物料中心温度为-25℃,再将物料放置加热板进行加热,在0.5h内将加热板温度升高至90℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至80℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至60℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至50℃,并在此温度下维持5h直至物料温度不再变化,即得西红柿外泌体冻干粉。对比例7该对比例提供一种饲料,所述饲料包含抗氧化饲料添加剂和基础饲料,按照重量份数,所述抗氧化饲料添加剂包含2份西红柿外泌体冻干粉、4份吐温80、3份甘露醇、2份甘氨酸和5份普鲁兰多糖;所述基础饲料包含16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、2份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐;所述西红柿外泌体冻干粉的制备方法包含以下步骤:西红柿外泌体冻干粉的提取:称取110g新鲜西红柿倒入破碎机中,向其中加入110ml灭菌pbs,破碎匀浆之后在2000×g,4℃离心20min,去除较大的残渣;取中间层的红色透明溶液在50000×g,4℃离心50min;取上清液在80000×g,4℃离心40min,然后使用2ml无菌pbs重悬沉淀再在80000×g,4℃离心40min;再次使用2ml无菌pbs重悬沉淀,即得西红柿外泌体;西红柿外泌体冻干粉的冻干:提取的西红柿外泌体在-30℃冷冻1h直至物料中心温度为-25℃,再将物料放置加热板进行加热,在0.5h内将加热板温度升高至90℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至80℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至60℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至50℃,并在此温度下维持5h直至物料温度不再变化,即得西红柿外泌体冻干粉。对比例8该对比例提供一种饲料,所述饲料包含抗氧化饲料添加剂和基础饲料,按照重量份数,所述抗氧化饲料添加剂包含2份西红柿外泌体冻干粉、4份吐温80、3份甘露醇、2份甘氨酸和5份普鲁兰多糖;所述基础饲料包含11份牛乳粉、16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、0.5份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐;所述西红柿外泌体冻干粉的制备方法包含以下步骤:西红柿外泌体冻干粉的提取:称取110g新鲜西红柿倒入破碎机中,向其中加入110ml灭菌pbs,破碎匀浆之后在2000×g,4℃离心20min,去除较大的残渣;取中间层的红色透明溶液在50000×g,4℃离心50min;取上清液在80000×g,4℃离心40min,然后使用2ml无菌pbs重悬沉淀再在80000×g,4℃离心40min;再次使用2ml无菌pbs重悬沉淀,即得西红柿外泌体;西红柿外泌体冻干粉的冻干:提取的西红柿外泌体在-30℃冷冻1h直至物料中心温度为-25℃,再将物料放置加热板进行加热,在0.5h内将加热板温度升高至90℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至80℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至60℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至50℃,并在此温度下维持5h直至物料温度不再变化,即得西红柿外泌体冻干粉。对比例9该对比例提供一种饲料,所述饲料包含抗氧化饲料添加剂和基础饲料,按照重量份数,所述抗氧化饲料添加剂包含2份西红柿外泌体冻干粉、4份吐温80、3份甘露醇、2份甘氨酸和5份普鲁兰多糖;所述基础饲料包含11份牛乳粉、16份玉米粉、3份虾壳粉、5份海藻粉、4份果寡糖、4份维生素a、4份维生素b、3份山麦冬、5份胡萝卜和1份盐;所述西红柿外泌体冻干粉的制备方法包含以下步骤:西红柿外泌体冻干粉的提取:称取110g新鲜西红柿倒入破碎机中,向其中加入110ml灭菌pbs,破碎匀浆之后在2000×g,4℃离心20min,去除较大的残渣;取中间层的红色透明溶液在50000×g,4℃离心50min;取上清液在80000×g,4℃离心40min,然后使用2ml无菌pbs重悬沉淀再在80000×g,4℃离心40min;再次使用2ml无菌pbs重悬沉淀,即得西红柿外泌体;西红柿外泌体冻干粉的冻干:提取的西红柿外泌体在-30℃冷冻1h直至物料中心温度为-25℃,再将物料放置加热板进行加热,在0.5h内将加热板温度升高至90℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至80℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至60℃,并在此温度下维持5h;在0.5h内将加热板温度降至50℃,并在此温度下维持5h直至物料温度不再变化,即得西红柿外泌体冻干粉。效果验证:测定血液中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶和丙二醛受试样品:本发明实施例1-3、对比例1-9制备得到的样品实验对象:选取同品种猪120头,雌雄数目一样,实验前身体健康,体重相近(20kg左右),采用随机方式,分为十二组,其中每组公猪5头,母猪5头。实验管理:实验猪单笼饲养,每猪平均占有1m2左右,实验期间,实验猪自由饮水,每日饲喂4次,早中午晚各一次,每次间隔4-5h,少喂勤添,喂量以料槽内略有剩余为度。猪舍舍温控制在27-28℃,相对湿度控制在80%左右。定期冲洗圈舍,保持圈舍通风、清洁、干燥、卫生,至体重40kg左右结束。实验方法:实验结束当天的早上,对实验猪进行空腹采血15ml,静置冰盒30min后,在转速4000r/min条件下离心10min,分离血清,于-70℃冰箱中保存。采用南京建成生物工程研究所的检测试剂盒进行测定,测定步骤和结果计算按照说明书进行。数据分析:实验数据采用excel2007整理,用spss17.0进行统计分析。实验各组之间的差异采用“单因子方差分析”,多重比较采用“最小显著差数法”,结果用“平均值±标准误”表示,以p<0.05为差异显著判断标准。考虑到效果和成本的双重因素,本发明抗氧化饲料添加剂的添加量为200mg/kg基础饲料,本发明抗氧化饲料添加剂的添加间隔为每隔24小时添加一次。实验结果见下表1。表1血液中总抗氧化能力(u/ml)、超氧化物歧化酶(u/ml)和丙二醛(u/ml)的测定结果分组总抗氧化能力超氧化物歧化酶丙二醛实施例13.831503.23实施例23.851523.20实施例33.971583.11对比例13.131163.87对比例23.321184.52对比例33.121204.63对比例43.131254.16对比例53.101193.75对比例63.181214.00对比例73.121273.93对比例83.211303.86对比例93.231284.11同样的,为了进一步说明本发明的有益效果,提供以下对比例:提供对比例1.1,和实施例3相比,该对比例1.1的区别在于:将西红柿外泌体替换为牛奶外泌体;提供对比例1.2,和实施例3相比,该对比例1.2的区别在于:将西红柿外泌体替换为柠檬外泌体;结合本发明的制备方法制备成饲料,验证其在动物中的抗氧化作用,按照测定血液中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶和丙二醛的方法进行测试。观察对比例1.1、对比例1.2制备的饲料的抗氧化效果。结果同上述对比例1中类似。同样的,为了进一步说明本发明的有益效果,提供以下对比例:提供对比例2.1,和实施例3相比,该对比例2.1的区别在于:将西红柿外泌体替换为维生素c;结合本发明的制备方法制备成饲料,验证其在动物中的抗氧化作用,按照测定血液中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶和丙二醛的方法进行测试。观察对比例2.1制备的饲料的抗氧化效果。结果同上述对比例2中类似。同样的,为了进一步说明本发明的有益效果,提供以下对比例:提供对比例4.1,和实施例3相比,该对比例4.1的区别在于:未添加甘露醇;提供对比例4.2,和实施例3相比,该对比例4.2的区别在于:未添加普鲁兰多糖;结合本发明的制备方法制备成饲料,验证其在动物中的抗氧化作用,按照测定血液中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶和丙二醛的方法进行测试。观察对比例4.1、对比例4.2制备的饲料的抗氧化效果。结果同上述对比例4中类似。同样的,为了进一步说明本发明的有益效果,提供以下对比例:提供对比例5.1,和实施例3相比,该对比例5.1的区别在于:将吐温80的重量份数调整为2份;提供对比例5.2,和实施例3相比,该对比例5.2的区别在于:将甘氨酸的重量份数调整为0.5份;提供对比例5.3,和实施例3相比,该对比例5.3的区别在于:将普鲁兰多糖的重量份数调整为2份;结合本发明的制备方法制备成饲料,验证其在动物中的抗氧化作用,按照测定血液中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶和丙二醛的方法进行测试。观察对比例5.1、对比例5.2、对比例5.3制备的饲料的抗氧化效果。结果同上述对比例5中类似。同样的,为了进一步说明本发明的有益效果,提供以下对比例:提供对比例6.1,和实施例3相比,该对比例6.1的区别在于:将吐温80的重量份数调整为6份;提供对比例6.2,和实施例3相比,该对比例6.2的区别在于:将甘氨酸的重量份数调整为6份;提供对比例6.3,和实施例3相比,该对比例6.3的区别在于:将普鲁兰多糖的重量份数调整为8份;结合本发明的制备方法制备成饲料,验证其在动物中的抗氧化作用,按照测定血液中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶和丙二醛的方法进行测试。观察对比例6.1、对比例6.2、对比例6.3制备的饲料的抗氧化效果。结果同上述对比例6中类似。同样的,为了进一步说明本发明的有益效果,提供以下对比例:提供对比例7.1,和实施例3相比,该对比例7.1的区别在于:未添加果寡糖;提供对比例7.2,和实施例3相比,该对比例7.2的区别在于:未添加海藻粉;提供对比例7.3,和实施例3相比,该对比例7.3的区别在于:未添加山麦冬;结合本发明的制备方法制备成饲料,验证其在动物中的抗氧化作用,按照测定血液中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶和丙二醛的方法进行测试。观察对比例7.1、对比例7.2、对比例7.3制备的饲料的抗氧化效果。结果同上述对比例7中类似。由以上结果可知:提供包含本发明抗氧化饲料添加剂的饲料,饲养实验动物,实验动物的血清总抗氧化能力、血清超氧化物歧化酶酶活力均有明显提高,实验动物的血清丙二醛含量有明显降低,可见,本发明的抗氧化饲料添加剂能够显著提高机体的抗氧化能力,从而降低动物养殖过程中的氧化应激和氧化损伤。而提供未使用本发明配方体系的抗氧化饲料添加剂,饲养实验动物,实验动物的血清总抗氧化能力、血清超氧化物歧化酶酶活力提高不明显,实验动物血清丙二醛的含量降低也不明显。提供包含本发明基础饲料的饲料,饲养实验动物,实验动物的血清总抗氧化能力、血清超氧化物歧化酶酶活力均有明显提高,实验动物的血清丙二醛含量有明显降低,可见,包含本发明基础饲料的饲料能够显著提高机体的抗氧化能力,从而降低动物养殖过程中的氧化应激和氧化损伤。而提供未使用本发明配方体系的基础饲料,饲养实验动物,实验动物的血清总抗氧化能力、血清超氧化物歧化酶酶活力提高不明显,实验动物血清丙二醛的含量降低也不明显。应该理解到披露的本发明不仅仅限于描述的特定的方法、方案和物质,因为这些均可变化。还应理解这里所用的术语仅仅是为了描述特定的实施方式方案的目的,而不是意欲限制本发明的范围,本发明的范围仅受限于所附的权利要求。本领域的技术人员容易理解,以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。当前第1页1 2 3 
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