一种增强断奶仔猪的肠道黏膜免疫功能的饲料预混剂的制作方法

本发明属于饲料技术领域，具体涉及一种增强断奶仔猪的肠道黏膜免疫功能的饲料预混剂。

背景技术：

初生仔猪由于刚离开母体，其脂肪层薄，热调节能力差，缺乏先天性免疫力，因此，在其适应外界环境前，需要一段时间接受母乳喂养，以提高其自身免疫力，以免被外界细菌、病毒等感染，造成严重疾病。

同时，由于哺乳期的仔猪生长发育迅速，对营养物的需要量大，而母猪泌乳量在18日龄左右达到高峰后，就逐渐下降。通过早期补料的仔猪，21日龄断奶窝重，窝均采食量，饲料利用率，经济效率均有明显的提高。仔猪在7～10天开始诱食，12～14天采食补料。此时，仔猪已具有明显的采食行为，诱食的方法较多，有的给炒得焦黄酥脆的玉米、大米或高粱粒，引逗开食，有的用面粉煮成糊状或少许食盐或食糖或味精等调味品，糊在仔猪口里。有的用颗粒状教槽料撒在保温栏内和母猪栏内，随母猪学吃，21日龄前的诱食料蛋白质水平可以不要太高，因为诱食阶段的仔猪消化吸收饲料蛋白质的能力很弱。

但是，从母乳喂养到饲料喂养的过渡阶段中，仔猪最容易被病菌感染，因此，初断乳的仔猪在饲料选择上，需要花费多种心思，才能更好的保证仔猪健康。然而，现有的饲喂仔猪的饲料中常含有大量添加剂，这样容易使仔猪产生较强的应激反应，导致免疫力下降，引起仔猪发病。因此，开发一种新型饲料、能够显著提高仔猪免疫力，显得尤为重要。

基于此，中国专利申请cn109601746a公开了一种断奶仔猪饲料添加剂及其制备方法与应用；所述发明提供的饲料添加剂中包含氧化锌、油脂、淀粉、粘结剂及崩解剂等成分，这种饲料添加剂虽然可以降低仔猪腹泻率，改善毛色，但是，由于这种饲料添加剂同时加入了粘结剂及崩解剂，容易对仔猪产生一定的刺激作用，并不会对除腹泻之外的疾病产生免疫作用，因此，这种饲料添加剂不能全面提高仔猪的免疫力，不能有效保护仔猪的身体健康。

中国专利cn104605195b公开了一种断奶仔猪饲料添加剂，其中包含了假蒟提取物，并以二氧化硅或碳酸钙为载体，这种添加剂可以提高仔猪的生长性能，在一定程度上提高其免疫力，然而，这种添加剂无法为仔猪提供营养成分，容易导致营养不良，对外界细菌、病毒的抵抗力下降。

综上所述，现有技术中的饲料添加剂普遍存在无法提高仔猪的免疫力，营养不均衡，容易对猪产生刺激作用，且加入的成分多，导致生产成本高等缺点。

技术实现要素：

针对现有技术普遍存在的缺陷，本发明创造性的提供了一种增强断奶仔猪的肠道黏膜免疫功能的饲料预混剂。本发明提供的饲料预混剂，可以有效增强机体的抗氧化能力，维持仔猪良好的免疫功能，避免因断奶应激对其造成的身体伤害。

为了达到上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种增强断奶仔猪的肠道黏膜免疫功能的饲料预混剂，包含如下组分及其重量份数：甜菜粕10～25份，大豆异黄酮10～20份，半乳甘露寡糖5～20份，乳酸菌0～8份，谷氨酰胺0～8份，蔗糖14～71份，免疫增强剂5～15份，维生素d1～5份，触珠蛋白3～8份，乳清白蛋白5～10份。

优选地，包含如下组分及其重量份数：甜菜粕20份，大豆异黄酮15份，半乳甘露寡糖10份，乳酸菌3份，谷氨酰胺3份，蔗糖44份，免疫增强剂10份，维生素d3份，触珠蛋白5份，乳清白蛋白8份。

优选地，所述乳酸菌的活菌数为6×10⁹个/kg。

优选地，所述免疫增强剂由免疫球蛋白m及维生素c按重量比7～9：2～5组成。

优选地，所述免疫增强剂由免疫球蛋白m及维生素c按重量比8：3组成。

本发明还提供了一种所述饲料预混剂的制备方法，包括如下步骤：

s1、将乳酸菌与蔗糖按比例加入，高速搅拌均匀，制成混合物i；

s2、向步骤s1所得混合物i中甜菜粕、大豆异黄酮、半乳甘露寡糖、触珠蛋白及乳清白蛋白，低速搅拌均匀，得混合物ii；

s3、向步骤s2所得混合物ii中加入谷氨酰胺、免疫增强剂及维生素d，搅拌均匀，最后加入乳酸菌，低速搅拌混合均匀，即得。

优选地，步骤s1所述的高速搅拌条件为5000～6000rpm下，搅拌10～15min，步骤s2、s3所述的低速搅拌条件为600～800rpm下，搅拌20～30min。

优选地，所述甜菜粕的制备过程为：将甜菜粕置于121℃的烘箱中处理20min，烘干，然后置于粉碎机中粉碎，过20目筛，即得。

本发明还提供了一种混合饲料，由所述饲料预混剂与基础日粮按重量比4：96组成。

优选地，所述基础日粮为市场上常规可见的断奶仔猪食用的饲料。

黏膜损伤一般来源于氧化应激反应，出现肠道绒毛变短，隐窝深度变浅，肠道内菌群失调。本发明提供的饲料预混剂一方面通过蔗糖增加采食，提高营养物质的摄入量，同时通过谷氨酰胺增加肠道黏膜的能量供应，增强机体抗应激能力，另一方面通过大豆异黄酮减少体内的自由基，增加机体的抗氧化应激能力，通过甜菜粕刺激肠道的发育，同时通过乳酸菌及半乳甘露寡糖来维持肠道的有益菌数量。从上述各方面来对抗断奶应激对肠道带来的影响。

同时，本发明在饲料预混剂中加入维生素d、触珠蛋白及乳清白蛋白，这两种蛋白质可以为仔猪提供一定的营养物质，提高其对外界环境的抵抗力；而且，本申请还加入了免疫增强剂，所述免疫增强剂由免疫球蛋白m及维生素c，这两种物质本身即为母乳中存在的物质，不会对仔猪造成刺激反应，将这两种物质按一定比例加入，可以显著提高仔猪的免疫功能，降低其发生病害的概率。

由本发明的技术方案可知，本发明的甜菜粕是直接将其干燥粉碎所得，这样制备过程简单，在保证其细度的同时，不破坏甜菜粕中的其他营养成分，同时，申请人在实际处理过程中意外发现，将维生素d与血清白蛋白一同加入饲料预混剂中，还可以显著提高仔猪的食欲，增强其体重。

与现有技术相比，本发明提供的增强断奶仔猪的肠道黏膜免疫功能的饲料预混剂具有如下优点：

(1)本发明提供的饲料预混剂，加入由免疫球蛋白m及维生素c按一定比例组成的免疫增强剂，不会对仔猪产生刺激反应，同时显著提高了仔猪的免疫功能，降低病害发生的概率；

(2)本发明提供的饲料预混剂，同时加入维生素d及血清白蛋白，可以提高仔猪的食欲，增强其体重；

(3)本发明提供的饲料预混剂，与常规饲料混合，在为仔猪补充足够营养物质的同时，还有效降低了断奶应激对肠道带来的各种不良影响，且生产成本低，有利于大规模生产和利用。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步解释，但是应当注意的是，以下实施例仅用以解释本发明，而不能用来限制本发明，所有与本发明相同或相近的技术方案均在本发明的保护范围之内。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所用原料为市售商品。

所述免疫球蛋白m可购自博奥派克生物科技有限公司；所述血清白蛋白可购自北京迈瑞达科技有限公司；所述基础日粮可购自漳州傲农生物科技有限公司生产，名称：离乳顺；所述其他试剂均可在常规生产厂家购买。

实施例1一种增强断奶仔猪的肠道黏膜免疫功能的饲料预混剂

所述饲料预混剂，包含如下组分及其重量份数：甜菜粕10份，大豆异黄酮10份，半乳甘露寡糖5份，蔗糖14份，免疫增强剂5份，维生素d1份，触珠蛋白3份，乳清白蛋白5份；所述乳酸菌的活菌数为6×10⁹个/kg；所述免疫增强剂由免疫球蛋白m及维生素c按重量比7：2组成。

所述饲料预混剂的制备方法，包括如下步骤：

s1、将乳酸菌与蔗糖按比例加入，于5000rpm的转速下高速搅拌10min，混合均匀，制成混合物i；

s2、向步骤s1所得混合物i中甜菜粕、大豆异黄酮、半乳甘露寡糖、触珠蛋白及乳清白蛋白，于600rpm的转速下低速搅拌20min，混合均匀，得混合物ii；所述甜菜粕的制备过程为：将甜菜粕置于121℃的烘箱中处理20min，烘干，然后置于粉碎机中粉碎，过20目筛，即得；

s3、向步骤s2所得混合物ii中加入谷氨酰胺、免疫增强剂及维生素d，搅拌均匀，最后加入乳酸菌，于600rpm的转速下低速搅拌20min，混合均匀，即得。

实施例2一种增强断奶仔猪的肠道黏膜免疫功能的饲料预混剂

所述饲料预混剂，包含如下组分及其重量份数：甜菜粕25份，大豆异黄酮20份，半乳甘露寡糖20份，乳酸菌8份，谷氨酰胺8份，蔗糖71份，免疫增强剂15份，维生素d5份，触珠蛋白8份，乳清白蛋白10份；所述乳酸菌的活菌数为6×10⁹个/kg；所述免疫增强剂由免疫球蛋白m及维生素c按重量比9：5组成；

所述饲料预混剂的制备方法，包括如下步骤：

s1、将乳酸菌与蔗糖按比例加入，于6000rpm的转速下高速搅拌15min，混合均匀，制成混合物i；

s2、向步骤s1所得混合物i中甜菜粕、大豆异黄酮、半乳甘露寡糖、触珠蛋白及乳清白蛋白，于800rpm的转速下低速搅拌30min，混合均匀，得混合物ii；所述甜菜粕的制备方法与实施例1相同；

s3、向步骤s2所得混合物ii中加入谷氨酰胺、免疫增强剂及维生素d，搅拌均匀，最后加入乳酸菌，于800rpm的转速下低速搅拌30min，混合均匀，即得。

实施例3一种增强断奶仔猪的肠道黏膜免疫功能的饲料预混剂

所述饲料预混剂，包含如下组分及其重量份数：甜菜粕20份，大豆异黄酮15份，半乳甘露寡糖10份，乳酸菌3份，谷氨酰胺3份，蔗糖44份，免疫增强剂10份，维生素d3份，触珠蛋白5份，乳清白蛋白8份；所述乳酸菌的活菌数为6×10⁹个/kg；所述免疫增强剂由免疫球蛋白m及维生素c按重量比8：3组成。

所述饲料预混剂的制备方法，包括如下步骤：

s1、将乳酸菌与蔗糖按比例加入，于5500rpm的转速下高速搅拌13min，混合均匀，制成混合物i；

s2、向步骤s1所得混合物i中甜菜粕、大豆异黄酮、半乳甘露寡糖、触珠蛋白及乳清白蛋白，于700rpm的转速下低速搅拌25min，混合均匀，得混合物ii；所述甜菜粕的制备方法与实施例1相同；

s3、向步骤s2所得混合物ii中加入谷氨酰胺、免疫增强剂及维生素d，搅拌均匀，最后加入乳酸菌，低速搅拌混合均匀，即得。

对比例1一种饲料预混剂

所述饲料预混剂的制备方法与实施例3类似；

与实施例3的区别在于，对比例1中不包含乳清白蛋白。

对比例2一种饲料预混剂

所述饲料预混剂的制备方法与实施例3类似；

与实施例3的区别在于，对比例2中免疫增强剂由免疫球蛋白m及维生素c按重量比1：1组成。

对比例3一种饲料预混剂

所述饲料预混剂的制备方法与实施例3类似；

与实施例3的区别在于，对比例3中的免疫增强剂为免疫球蛋白m。

对比例4一种饲料预混剂

所述饲料预混剂的制备方法与实施例3类似；

与实施例3的区别在于，对比例4中的免疫增强剂为维生素c。

对比例5一种饲料预混剂

所述饲料预混剂的制备方法与实施例3类似；

与实施例3的区别在于，对比例5中不包含维生素d。

试验例1采食情况对比试验

1.试验样品：分别将本发明实施例3、对比例1、对比例5所述的饲料添加剂，加入到基础日粮中，按4：96的重量比混合加入，制成三种分别含实施例3、对比例1、对比例5所述饲料添加剂的混合饲料；

2.试验动物：健康断奶仔猪40头，体重在8±0.5kg，随机分成4组，每组10只，要求：身体健康，无任何遗传病史；

3.试验方法：以基础日粮为空白对照试验，其余三组分别饲喂含不同饲料添加剂的饲料，每天每组提供3kg饲料，自由采食，自由饮水，计算每天剩下的饲料重量，连续投喂7天后，称量仔猪体重，称量前10h，禁止采食、饮水。

平均日采食量＝投喂前饲料总量-投喂后饲料总量，最终平均日采食量为10只仔猪的每天采食平均值；

平均日增重＝(投喂后末重-投喂前初重)/7，各组取10只仔猪的平均值为每只猪的平均日增重。

4.试验结果：具体试验结果见表1。

表1投喂不同饲料时，各组的体重增长率对比

由表1可知，食用含本发明实施例3组饲料添加剂的饲料，平均体重日增长明显高于对比例1组，对比例5组及空白对照组，体现了本发明维生素d及乳清白蛋白协同促进觅食的作用，而对比例组的饲料又稍微高于空白对照组，说明维生素d及乳清白蛋白单独使用，也起到一定的微作用。

试验例2肠道黏膜免疫功能

1.试验样品：实施例1-3及对比例1-5制得的免疫增强剂，离乳顺常规基础日粮；2.试验对象：健康28日龄断奶仔猪90头，体重在6.5±1kg，随机分成9组；要求：断奶仔猪身体健康，无遗传病史；

3.试验方法：以常规离乳顺基础日粮为空白对照组；分别将基础日粮与实施例1-3及对比例1-5制得的饲料预混剂按4：96的重量比混合，组成混合饲料，共8组混合饲料，此为实验组；

实验组及对照组的小猪每天饲喂饲料6次，每次每只猪200g，自由饮水。在35天时，进行屠宰采样，每个组随机抽取6头猪，采样取十二指肠、空肠和回肠，用4％多聚甲醛固定，淋巴细胞数量通过苏木精-伊红(h-e)染色法。

组织切片的制备：

(1)载玻片和盖破片的处理：将玻片装入尼龙网袋中，放入重铬酸钾浓硫酸缸中浸泡两天，自来水冲洗干净后烘干；再入75％酒精中浸泡一天，将载玻片用布擦拭干净，在载玻片上滴加20μl的1:10稀释的多聚赖氨酸，拿另一张载玻片将其慢慢推开，室温下晾干后即可使用。

(2)冲水：将组织从4％多聚甲醛磷酸缓冲液中取出，修整成7mm小块，流水冲洗过夜；

(3)脱水、透明与浸蜡：置于自动脱水机上进行脱水透明，程序设置为：60％酒精、70％酒精各为4h→80％酒精3h→90％酒精3h→95％酒精ⅰ、95％酒精ⅱ各2h→100％酒精ⅰ、100％酒精ⅱ各1h→100％二甲苯ⅰ10min→100％二甲苯ⅱ5min→蜡缸ⅰ1h30min→蜡缸ⅱ1h30min；

(4)包埋：提前2h打开包埋机，蜡块溶化后将浸蜡后的组织放入包埋机中进行包埋；

(5)切片和烤片：切片前可先将包好的蜡块置于4℃的冰箱中冷冻30min，然后将所要切的包埋块固定在标本夹上，将切片厚度调整为4μm，连续切片十张左右，挑选一张，用镊子夹起(且勿夹住组织)置于42℃左右水浴展片锅中，使切片自然展平，捞片，将烤片机温度设为55℃，烤片，直至组织周围的石蜡溶化。

苏木精-伊红(h-e)染色法：

(1)脱蜡与水洗：二甲苯ⅰ、二甲苯ⅱ各10min→100％酒精ⅰ、100％酒精ⅱ各2min→95％酒精、85％酒精和75％酒精各2min→蒸馏水洗3次，每次5min；

(2)苏木精染色：染色10min；

(3)水洗：蒸馏水洗3次，每次5min；

(4)兰化：常温下流水兰化10～20min；

(5)伊红染色：染色前先将切片在75％酒精中作用1min，染色30s；

(6)脱水与透明：85％酒精1min→95％酒精、100％酒精ⅰ和100％酒精ⅱ各2min→100％二甲苯ⅰ和100％二甲苯ⅱ各5min；

(7)封片：中性树胶封片。

上皮间淋巴细胞数目试验组和对照组各选5张切片，每张切片中选取3根绒毛结构比较完整，柱状细胞排列整齐的绒毛进行计数，统计每100个柱状细胞之间分布的淋巴细胞的数量，结果用平均值±标准差(mean±sd)表示。

4.试验结果：具体试验结果见表2。

表2添加不同饲料预混剂时，各细胞数量对比结果

由表2可知，添加本发明实施例1-3组制得的饲料添加剂的混合饲料组，明显比对照组及对比例组的细胞数目多，尤其是实施例3组，各细胞数目均最多，因此，实施例3组为本发明的最佳实施例；而对比例1-5组，由于改变了饲料添加剂中各组分含量，导致细胞数目减少，但仍比空白对照组的细胞数目多。

最后应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明做了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。

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