一种具有缓解体力疲劳功能的组合物及其制备方法与流程

本发明涉及保健食品制备的技术领域，具体涉及一种具有缓解体力疲劳功能的组合物及其制备方法。

背景技术：

体力疲劳是指在从事体力劳动和脑力劳动过程中，经过一定的时间和达到一定的程度会出现活动能力的下降，表现为疲倦或肌肉酸痛或全身无力。疲劳的最主要生理本质是由于肌肉活动而对能量代谢功能的影响。

中医理论认为，肾藏精，主骨生髓，为先天之本，是体力产生的原动力和源泉，而脾为后天之本，生气血，脾主四肢肌肉，脾盛，则肌强健，脾虚，则肌无力。肝主疏泄主，主藏血。肝血充足，则筋骨强健，运动灵活，能耐受疲劳，并能较快地缓解疲劳。肝血不足，筋脉失于濡养出现懈怠乏力，或活动后容易疲劳，且疲劳缓解速度慢。

技术实现要素：

本发明旨在提供一种具有缓解体力疲劳功能的组合物，以重量计，所述组合物包括刺五加1～27份、肉苁蓉1～10份、西洋参1～6份、丹参1～15份。

进一步地，所述组合物包括刺五加2～25份、肉苁蓉2～8份、西洋参1～4份、丹参1～13份。

进一步地，所述组合物包括刺五加3～10份、肉苁蓉2～5份、西洋参2～3份、丹参2～5份。

优选地，所述组合物包括刺五加5份、肉苁蓉3份、西洋参2份、丹参2份。

本发明还提供了如上任一所述的组合物在制备具有缓解体力疲劳功能的药物、保健品或食品中的应用。

本发明提出了一种含有如前任一所述的组合物的药物、保健品或食品。

具体地，所述药物、保健品或食品选自片剂。

进一步地，所述药物、保健品或食品还包括辅料；所述辅料包括填充剂、崩解剂、润滑剂。

优选地，所述辅料包括但不限于：玉米淀粉、磷酸氢钙、碳酸钙、干淀粉、预交化淀粉、糊精、麦芽糊精、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、交联聚维酮、低取代羟丙纤维素、聚维酮k30、淀粉浆、羟丙基纤维素、硬脂酸镁、滑石粉或二氧化硅。

优选地，所述填充剂包括玉米淀粉、磷酸氢钙、麦芽糊精、微晶纤维素中的一种或几种；所述崩解剂包括交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙纤维素中的一种或几种；所述润滑剂包括硬脂酸镁、二氧化硅、滑石粉中的一种或几种。

具体地，所述填充剂优选为微晶纤维素；所述崩解剂优选为交联羧甲基纤维素钠；所述润滑剂优选为硬脂酸镁。

本发明还提出了如前任意一项所述的组合物的制备方法，包括：

(1)提取：取刺五加、肉苁蓉、西洋参、丹参加水提取，得提取液；

(2)浓缩：对所述提取液浓缩，得浓缩液；

(3)干燥：对所述浓缩液进行干燥，得干浸膏。

进一步地，所述的组合物的制备方法包括：

(1)提取：取刺五加、肉苁蓉、西洋参、丹参加8～12倍量水提取1～3次，每次提取时间为1.0～2.0h，得提取液；

(2)浓缩：所述提取液减压浓缩至60～70℃下相对密度为1.05～1.15，过滤，得浓缩液；

(3)干燥：将所述浓缩液喷雾干燥，进料速度40～60r/min，进风温度为160～180℃；

(4)粉碎：粉碎，过筛。

本发明还提出了一种如前所述的药物、保健品或食品的制备方法，所述药物、保健品或食品选自片剂，所述制备方法包括：

(1)提取：刺五加5份、肉苁蓉3份、西洋参2份、丹参2份，加水提取2次，加水倍量为10倍，每次提取时间为1.0h，合并提取液；

(2)浓缩：所述提取液在真空度-0.08～-0.06mpa下，减压浓缩至60℃下相对密度为1.10，过滤，得浓缩液；

(3)干燥：将所述浓缩液喷雾干燥，进料速度40r/min，进风温度为160℃，得干浸膏；

(4)粉碎：所述干浸膏粉碎，过80目筛，得干膏粉；

(5)混合：将所述干膏粉、微晶纤维素混合均匀，得混合粉；

(6)制粒：所述混合粉中加入90％乙醇制备软材，20目筛制粒，50～60℃干燥，20目筛整粒，得颗粒；

(7)压片：所述颗粒加入交联羧甲基纤维素钠、硬脂酸镁混匀，压片，得素片；

(8)包衣：所述素片包薄膜衣，得包衣片。

进一步地，所述制粒工艺包括湿法制粒、干法制粒或一步制粒。

进一步地，所述薄膜包衣包括羟丙甲纤维素、聚乙烯醇、三乙酸甘油酯、滑石粉、胭脂红铝色淀、亮蓝铝色淀、钛白粉的一种或几种。

本发明中各组分有如下特点：

刺五加为五加科植物刺五加acanthopanaxseuticosus(rupr.etmaxim.)harms的干燥根和根茎或茎，辛、微苦，温，归脾、肾、心经，用于脾肺气虚，体虚乏力，食欲不振，肺肾两虚，久咳虚喘，肾虚腰膝酸痛，心脾不足，失眠多梦。中医认为刺五加有益气健脾，补肾安神的作用。《名医别录》谓：“补中，益精，坚筋骨，强意志，久服轻身耐老”。《大明本草》：“补五劳七伤”。

肉苁蓉为列当科植物肉苁蓉cistanchedeserticolay.c.ma或管花肉苁蓉cistanchetubulosa(schenk)wight的干燥带鱗叶的肉质茎，味甘、咸，性温，归肾、大肠经，补肾阳，益精血，润肠通便，用于肾阳不足，精血亏虛，阳痿不孕，腰膝酸软，筋骨无力，肠燥便秘。肉苁蓉为著名的补益中药，有“沙漠人参”的美誉。《新疆大芸》记载管花肉苁蓉补肾精亏损，肾亏多由精气虚寒，或思虑忧郁，损伤心脾，或因恐惧伤肾，也有因湿热下注，宗筋弛而痿的，但主要是肾阳虚衰而痿。《本草纲目》记载此物补而不峻，故有从容字号。

西洋参为五加科植物西洋参panaxquinquefoliuml.的干燥根，甘、微苦，凉，归心、肺、肾经。西洋参补气养阴，清热生津，用于气虚阴亏，虚热烦倦，咳喘痰血，内热消渴，口燥咽干。

丹参为唇形科植物丹参miltiorrhizabge.的干燥根和根茎，性苦，微寒，归心、肝经，活血祛瘀，通经止痛，清心除烦，凉血消痈，用于胸痹心痛，脘腹胁痛，癥瘕积聚，热痹疼痛，心烦不眠，月经不调，痛经经闭，疮瘍肿痛。本发明以刺五加为君药，刺五加益气健脾，补肾助阳，以肉苁蓉、西洋参为臣药，肉苁蓉补肾固本，西洋参补气养阴，同时佐以丹参活血化瘀、祛瘀生新以增强益气活血之功。四药合用，补肾益精、健脾、益气活血。肾为先天之本，是体力产生的原动力和源泉；脾为后天之本，气血生化之源。一为先天之本，一为后天之本，先天靠后天的营养，后天靠先天的滋温，相互为用，气血充沛，完成正常的生命活动，从而达到缓解体力疲劳的作用。

本发明以传统中医药理论为基础，结合现代科学研究，从缓解体力疲劳机制入手，科学配伍，提出了一种安全有效的缓解体力疲劳组合物，动物功能实验表明，本发明组合物能提高小鼠的负重游泳时间，负重游泳实验结果阳性，且血乳酸、血清尿素、肝糖元-肌糖元三项生化指标中任二项指标阳性，具有缓解体力疲劳功能的作用。

具体实施方式

1.提取工艺的考察

1.1药材水提取单因素实验

1.1.1药材水提取时间单因素考察

取刺五加150份、肉苁蓉90份、西洋参60份、丹参60份，平行4份，加入10倍量水，提取2次，提取时间分别设为0.5h、1.0h、1.5h、2.0h，以水提液中总皂苷总量、松果菊苷和毛蕊花糖苷、紫丁香苷转移率为指标，采用单因素试验方案进行考察。试验结果见表1。

表1提取时间单因素试验

由表1可知，总皂苷总量在提取1.0h时，总量最高，1.5h后逐渐趋于平稳。松果菊苷和毛蕊花糖苷、紫丁香苷转移率则是随着时间的增加先逐渐升高，在1.5h后再降低。因此选择提取时间范围为1.0～2.0h。

1.1.2药材水提取加水倍量考察

取刺五加150份、肉苁蓉90份、西洋参60份、丹参60份，平行4份，提取时间设为1.0h，提取2次，加水倍量分别为8、10、12、14倍，以提取液中总皂苷总量、松果菊苷和毛蕊花糖苷、紫丁香苷转移率为指标，采用单因素试验方案进行考察。试验结果见表2。

表2加水倍量单因素试验

由表2可知，随着加水倍量的增加，总皂苷总量先升高后下降，10倍量时最高；松果菊苷和毛蕊花糖苷的转移率逐渐增加，10～14倍趋于平缓；紫丁香苷的转移率逐渐增加，12～14倍趋于平缓，因此选择加水倍量范围为8～12倍。

1.2提取正交试验

选取加水倍量(a)、提取时间(b)、提取次数(c)作为三个因素，每个因素各选三个水平，以提取液中总皂苷总量、松果菊苷和毛蕊花糖苷、紫丁香苷转移率为指标，选用采用l9(3⁴)正交试验进行考察，因素水平见表3。

表3因素水平表

取刺五加150份、肉苁蓉90份、西洋参60份、丹参60份，平行9份，按正交表相关参数要求进行提取，测定提取液中总皂苷、松果菊苷和毛蕊花糖苷、紫丁香苷含量，实验结果见表4～表9。

表4l9(3⁴)正交试验表(总皂苷)

表5方差分析表(总皂苷)

表6l9(3⁴)正交表(松果菊苷和毛蕊花糖苷)

表7方差分析表(松果菊苷和毛蕊花糖苷)

表8l9(3⁴)正交表(紫丁香苷)

表9方差分析表(紫丁香苷)

从表4～表5可知，以提取液中总皂苷总量为指标进行考察，各因素对提取工艺的影响极差r值为c>a>b，药材提取次数(因素c)的极差最大，各因素中c2>c1>c3、a2>a1>a3、b3>b1>b2，故直观分析最佳提取工艺为a2b3c2。方差分析显示，c因素显著，考虑节能原则，故最佳提取工艺为a2b1c2，即每次加10倍量水，回流提取2次，每次1.0小时。

从表6～表7可知，以提取液中松果菊苷和毛蕊花糖苷转移率为指标进行考察，各因素对提取工艺的影响极差r值为c>a>b，药材提取次数(因素c)的极差最大，各因素中c2>c1>c3、a2>a3>a1、b3>b2>b1，故直观分析最佳提取工艺为a2b3c2。方差分析显示，c因素显著，考虑节能原则，故最佳提取工艺为a2b1c2，即每次加10倍量水，回流提取2次，每次1.0小时。

从表8～表9可知，以提取液中紫丁香苷转移率为指标进行考察，各因素对提取工艺的影响极差r值为c>a>b，药材提取次数(因素c)的极差最大，各因素中c2>c1>c3、a2>a3>a1、b3>b2>b1，故直观分析最佳提取工艺为a2b3c2。方差分析显示，c因素显著，考虑节能原则，故最佳提取工艺为a2b1c2，即每次加10倍量水，回流提取2次，每次1.0小时。

综合考虑，各指标及因素对提取工艺的影响极差r值为c>a>b，药材提取次数(因素c)的极差最大，且各指标成分中c因素显著，且最优值均为c2，因此确定最佳工艺中提取次数为2次。加水倍量(因素a)的极差其次，且各指标成分中a因素均不显著，且最优值均为a2，因此确定最佳工艺中加水倍量(因素a)为a2，即每次加10倍量水。提取时间(因素b)的极差影响最小，且各指标成分中b因素均不显著，各指标下的直观分析显示b3，由于各指标成分中b因素均不显著，考虑节能原则，因此确定最佳工艺中提取时间(因素b)为b1，即每次1.0小时。综上所述，最佳提取工艺为：

每次加10倍量水，回流提取2次，每次1.0小时。

1.3正交验证试验

根据正交试验结果，取刺五加300份、肉苁蓉180份、西洋参120份、丹参120份，平行9份，分为3组，加10倍量水，回流提取2次，每组时间分别为每次1.0h、1.5h、2.0h，提取液滤过，合并滤液，测定提取液中总皂苷、松果菊苷和毛蕊花糖苷、紫丁香苷的含量，以总皂苷总量、松果菊苷和毛蕊花糖苷、紫丁香苷转移率为指标，再次筛选最佳提取时间，验证最优工艺可行性及稳定性，结果见表10。

表10正交验证试验表

验证试验结果表明，提取液中总皂苷含量、松果菊苷和毛蕊花糖苷、紫丁香苷转移率在1.0h、1.5h、2.0h提取时间时，rsd均小于3，说明提取时间对各指标成分无显著影响，故确定提取时间为1.0h。因此确定最终提取工艺为：每次加10倍量水，回流提取2次，每次1.0小时。

2浓缩工艺考察

2.1浓缩温度考察

在上述优选的提取工艺条件下，对该组合物的浓缩温度条件进行考察，以总皂苷、松果菊苷和毛蕊花糖苷、紫丁香苷的转移率为考察指标，取相同量的提取液，采用旋转蒸发仪减压浓缩至相同重量的浓缩液，浓缩温度分别设置为60、70、80℃，实验结果见表11。

表11浓缩温度考察

由表11可知，当浓缩温度为70℃时，总皂苷和紫丁香苷转移率达到最高，当浓缩温度为60℃和70℃时，浓缩液中松果菊苷和毛蕊花糖苷、紫丁香苷转移率差别不大。故综合考虑，结合生产实际，选择减压浓缩温度为60～70℃。

2.2浓缩工艺验证

取相同量的提取液，按优选的浓缩工艺进行3批稍放大验证试验，在60～70℃条件下减压浓缩至相同重量的浓缩液，结果见表12。

表12浓缩工艺验证

由表12可知，三批浓缩工艺验证中，总皂苷、松果菊苷和毛蕊花糖苷、紫丁香苷转移率与小试实验结果相近，说明浓缩工艺稳定可行。

3干燥工艺条件考察

喷雾干燥具有生产过程连续、生产效率高等优点，故本发明组合物选用喷雾干燥。

3.1喷雾干燥工艺正交考察

以总皂苷、松果菊苷和毛蕊花糖苷、紫丁香苷转移率为考察指标，采用l9(3⁴)正交试验方案，对浓缩液比重、进料速度、进风温度进行考察。因素水平见表13。取所述处方比例的药材，加10倍量水，提取2次，每次1.0h，提取液滤过，合并滤液，在60～70℃条件下进行减压浓缩，分别得到比重为1.05、1.10、1.15(均为60℃热测，下同)的浓缩液备用。按l9(3⁴)正交表要求进行试验，收集喷干粉，测定喷干粉中总皂苷、松果菊苷和毛蕊花糖苷、紫丁香苷的含量，实验结果见表14～19。

表13因素水平

表14l9(3⁴)正交表(总皂苷)

表15方差分析表(总皂苷)

表16l9(3⁴)正交表(松果菊苷和毛蕊花糖苷)

表17方差分析表(松果菊苷和毛蕊花糖苷)

表18l9(3⁴)正交表(紫丁香苷)

表19方差分析表(紫丁香苷)

从表14～19可以看出，以喷干粉中总皂苷转移率为指标进行考察，各因素对干燥工艺的影响极差r值为a>b>c，浓缩液比重(因素a)的极差最大，各因素中a3>a2>a1、b3>b1>b2、c1>c3>c2，故直观分析最佳喷干工艺为a3b3c1。

从表14～19可以看出，以喷干粉中松果菊苷和毛蕊花糖苷转移率为指标进行考察，各因素对干燥工艺的影响极差r值为a>c>b，浓缩液比重(因素a)的极差最大，各因素中a2>a1>a3、b1>b2>b3、c2>c1>c3，故直观分析最佳喷干工艺为a2b1c2。

从表14～19可以看出，以喷干粉中紫丁香苷转移率为指标进行考察，各因素对干燥工艺的影响极差r值为a>c>b，浓缩液比重(因素a)的极差最大，各因素中a2>a3>a1、b2>b3>b1、c3>c1>c2，故直观分析最佳干燥工艺为a2b2c3。

综合考虑，干燥工艺各因素极差r值中，浓缩液比重(因素a)的极差最大，喷干粉中松果菊苷和毛蕊花糖苷指标成分中a因素显著，且最优值为a2，其他指标成分中a因素均不显著，因此确定最佳干燥工艺中浓缩液比重(因素a)为1.10。由于各指标成分中b因素均不显著，考虑到进料速度过快，不利于液体雾化，影响干燥效果，因此确定最佳干燥工艺中进料速度(因素b)为b1，即进料速度40r/min。由于各指标成分中c因素均不显著，考虑节能原则及指标成分的稳定性，因此确定最佳干燥工艺中进风温度(因素c)为c1，即进风温度为160℃。综上所述，最佳喷雾干燥工艺为：浓缩液比重为1.10，进风温度为160℃，进料速度为40r/min。

3.2喷雾干燥工艺验证试验

取比重为1.10的浓缩液3份，按优选的干燥工艺进行3批稍放大验证试验，收集喷干粉，测定喷干粉中总皂苷、松果菊苷和毛蕊花糖苷、紫丁香苷的含量，计算转移率，结果见表20。

表20喷雾干燥工艺稍放大验证结果

由表20可以看出，验证试验中，总皂苷、松果菊苷和毛蕊花糖苷、紫丁香苷转移率与正交试验最优结果接近，说明干燥工艺稳定可行。

综上所述，本发明组合物的制备工艺优选为：10倍量水，回流提取2次，每次1小时，提取液减压浓缩，浓缩温度为65±5℃，浓缩至比重1.10(60℃热测)，喷雾干燥，进料速度40r/min，进风温度160℃，得干膏，干膏粉碎，过80目筛，即得。

4制粒工艺研究

4.1填充剂的选择及用量考察

根据中间体干膏粉的性质，选择吸湿性较小的微晶纤维素、淀粉和糊精作为填充剂进行试验，以95％乙醇为润湿剂进行制粒压片，测定素片崩解时限，结果见表21。

表21填充剂种类及其用量筛选

结果表明，使用糊精制粒易结块，且素片崩解时间过长。使用玉米淀粉制粒易结块，可压性差。使用20％微晶纤维素制粒不结块，且可压性好，素片崩解时限为45min，已能够满足生产的要求。因此确定在中间体干膏粉中加入20％微晶纤维素作为填充剂。

4.2润湿剂的选择

分别以体积分数70％、80％、90％、95％的乙醇为润湿剂制软材，20目筛挤压制粒，55±5℃干燥，再用20目筛整粒，收集颗粒。以制软材情况、软材过筛情况和颗粒状态为指标，考察不同体积分数乙醇的制粒效果，结果见表22。

表22润湿剂考察结果

结果表明，采用90％乙醇作为润湿剂制粒最优。

4.3崩解剂的选择

该组合物为中药提取物，素片崩解时限为45min，崩解时限较长，考虑到后续包衣及储存因素，因此需要加入崩解剂以改善片剂崩解情况。以羧甲基淀粉钠和交联羧甲基纤维素钠为崩解剂，采用外加法，按常规使用量2％～5％加入，测定素片崩解时限，结果见表23。

表23崩解剂考察结果

结果表明，以5％交联羧甲基纤维素钠作为崩解剂较好。

4.4润滑剂的筛选

为了降低压片时对冲模的磨损，使片面光洁美观，同时为了保证包衣顺利进行，片重差异符合规定，需要在颗粒中加入一定量的的润滑剂。常用的润滑剂为硬脂酸镁、滑石粉、微粉硅胶，一般用量约为1～2％。固定配方中其他因素，按照上述优选的配方制粒，分别加入1％和2％硬脂酸镁、滑石粉、微粉硅胶，以颗粒休止角和片剂光洁度为评价指标，结果见表24。

表24润滑剂筛选

结果表明，以2％硬脂酸镁作为润滑剂较好。

通过制剂工艺研究，确定该组合物的优选工艺为：刺五加、肉苁蓉、西洋参、丹参提取物按比例混合，加入20％微晶纤维素混合均匀，以90％乙醇制粒，颗粒干燥、整粒后加入5％交联羧甲基纤维素钠和2％硬脂酸镁，混匀，压片，包衣即得成品。

实施例1

取刺五加500份、肉苁蓉300份、西洋参200份、丹参200份，加入10倍量水，提取2次，每次1小时，合并提取液，于65±5℃减压浓缩至比重1.10(60℃热测)，喷雾干燥，进风温度为160℃，进料速度为40r/min，得干膏。干膏粉碎，过80目筛，得干膏粉。将干膏粉和微晶纤维素混匀，以90％乙醇制粒，颗粒干燥、整粒后加入交联羧甲基纤维素钠和硬脂酸镁，混匀，压片，包衣，得包衣片。

实施例2

取刺五加500份、肉苁蓉300份、西洋参200份、丹参200份，加入12倍量水，提取1次，每次2小时，合并提取液，于65±5℃减压浓缩至比重1.10(60℃热测)，喷雾干燥，进风温度为160℃，进料速度为40r/min，得干膏。干膏粉碎，过80目筛，得干膏粉。将干膏粉和微晶纤维素混匀，以90％乙醇制粒，颗粒干燥、整粒后加入交联羧甲基纤维素钠和硬脂酸镁，混匀，压片，包衣，得包衣片。

实施例3

取刺五加500份、肉苁蓉300份、西洋参200份、丹参200份，加入8倍量水，提取3次，每次1.5小时，合并提取液，于65±5℃减压浓缩至比重1.10(60℃热测)，喷雾干燥，进风温度为160℃，进料速度为40r/min，得干膏。干膏粉碎，过80目筛，得干膏粉。将干膏粉和微晶纤维素混匀，以90％乙醇制粒，颗粒干燥、整粒后加入交联羧甲基纤维素钠和硬脂酸镁，混匀，压片，包衣，得包衣片。

二缓解体力疲劳功能试验

1.材料与方法

1.1样品

样品组(按照本发明实施例1、2、3制备得到)；

空白对照组。

1.2实验动物

雄性健康icr小鼠，spf级，体重18-22g。由北京维通利华实验动物技术有限公司南京分公司提供，实验动物生产许可证号：scxk(苏)2016-0003号，合格证编号：201809889。实验动物屏障环境设施使用许可证号：syxk(苏)2017-0031。灭菌鼠饲料来源及合格证号：北京科澳协力饲料有限公司，scxk(京)2014-0010。实验期间全部动物给予灭菌全价鼠颗粒饲料和灭菌水自由食用。

1.3仪器及试剂

仪器：游泳箱，电子天平，tu1901双光束紫外可见分光光度计，biosenc-line葡萄糖/乳酸自动分析仪，奥林巴斯au640全自动生化分析仪，jy92-ⅱ型超声波细胞粉碎机等。试剂：尿素氮测定试剂盒(脲酶法)购自宁波美康生物科技有限公司；糖原测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所；乳酸酶膜及试剂购自德国ekf诊断公司；其余试剂均为分析纯。

1.4剂量选择及受试样品给予方式

游泳实验及各项生化指标(血清尿素氮、肝糖原、血乳酸)所用动物均各按体重随机分成4组，每组10只，按相当于人体每日每千克体重推荐摄入量(46mg/kg·bw)的10倍确定小鼠的中剂量，即小鼠每日食用量为460mg/kg·bw。将样品研磨成粉状后称取2300mg加纯化水至100ml配制成受试液，溶剂对照组给予纯净水，各组受试液以每日20ml/kg·bw的量经口灌胃，连续30天。

1.5实验方法

1.5.1负重游泳实验：末次经口灌胃给予受试物30min后，置尾根部负荷5％体重铅皮的小鼠于游泳箱中，水深大于30cm，水温25℃±1.0℃，记录小鼠从游泳开始至死亡的时间，作为小鼠负重游泳时间。

1.5.2血清尿素氮(bun)含量的测定：末次经口灌胃给予受试物30min后，小鼠在温度为30℃的水中游泳90min，休息60min后采血，分离血清按有关试剂盒要求检测。

1.5.3肝糖原含量测定：末次给予受试物30min后处死动物，精确称取肝脏100mg，按程序匀浆，离心，95％乙醇沉淀糖原，蒽酮法测定肝糖原含量。

1.5.4乳酸测定：末次给予受试物30min后，首先眼内眦采血测定安静状态下的血乳酸基础值：在30℃水中游泳10min，捞起擦干，立即第二次眼内眦采血，并于休息20min后第三次眼内眦采血，均用葡萄糖乳酸分析仪测定乳酸含量。

1.6统计方法

实验数据用spss软件进行统计分析。

2.结果

2.1样品对小鼠体重的影响见表25。

表25样品对小鼠体重的影响游泳组

乳酸组

肝糖原组

尿素氮组

由此可知，小鼠的初始体重各实验组与溶剂对照组间比较，数据均无显著性差异(p﹥0.05)，即小鼠的初始体重在各组间较为均衡。经口给予小鼠受试物30d后，各组终末体重满足方差齐的要求，各组与溶剂对照组比较，数据均无显著性差异(p﹥0.05)，即各受试物对小鼠的体重增长无明显影响。

2.2样品对小鼠负重游泳时间的影响见表26。

表26样品对小鼠负重游泳时间的影响

由此可知，与溶剂对照组比较，各样品组小鼠游泳时间均延长，但相对于溶剂对照组，实例1数据有显著性差异(p<0.01)，因此样品在负重游泳实验中结果为阳性。

2.3样品对小鼠运动后血清尿素氮水平和肝糖原储备量的影响见表27。

表27样品对小鼠运动后血清尿素氮水平和肝糖原储备量的影响

由此可知，游泳90min后，各样品组小鼠血清尿素氮含量均低于溶剂对照组值，相对于溶剂对照组，实例1、2组的数据有显著性差异(p<0.05，p<0.01)，因此样品在血清尿素氮实验中结果为阳性；各样品组小鼠肝糖原相对于溶剂对照组略有降低，但与溶剂对照组值比较，各样品组数据均无显著性差异(p﹥0.05)，因此样品在肝糖原测定实验中结果为阴性。

2.4样品对小鼠运动后血乳酸含量的影响见表28。

表28样品对小鼠运动后血乳酸含量的影响

注：血乳酸曲线下面积＝5*(游泳前血乳酸值+3*游泳后0min的血乳酸值+2*游泳后休息20min的血乳酸值)

由此可知，各样品组小鼠运动前后三个时间点血乳酸曲线下面积均小于溶剂对照组，其中实例1数据具有显著性差异(p<0.01)，因此样品在血乳酸实验中结果为阳性。

综上，本发明组合物在负重游泳实验、血清尿素氮测定和血乳酸实验结果均阳性，因此根据保健食品功能学评价标准，本发明组合物具有缓解体力疲劳的功能。

以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。

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