一种固定化的微生物土壤修复剂及其修复土壤方法与流程

本发明涉及环保领域，尤其是一种固定化的微生物土壤修复剂及其修复土壤方法。
背景技术：
：土壤污染物可直接被人体摄入，甚至可能在体内积累，影响人体生化和生理反应，从而影响新陈代谢、发育和生殖功能，还可能影响人的智力发育水平，破坏神经系统和内分泌系统。随着对环境中各种污染物的迁移、转化、污染情况及其毒性认识的深入，人们意识到环境中多环芳烃的污染研究及其相应的生物修复技术的开发已刻不容缓。cn105349153b公开了一种用于土壤修复的药剂及其制备方法和应用。所述用于土壤修复的药剂，包括如下组分：淀粉-丙烯酸接枝共聚物、可溶性硫酸盐、可溶性氯盐和水；所述可溶性硫酸盐和可溶性氯盐不发生反应。在淀粉-丙烯酸接枝共聚物的基础上，通过添加可溶性硫酸盐、可溶性氯盐，配制成水剂，通过淀粉-丙烯酸接枝共聚物和可溶性硫酸盐、可溶性氯盐在水中的相互作用，不仅可适宜提高土壤的导电性和保水性，而且增加土壤的产热、导热、保热能力；在热强化的土壤气相抽提法和生物通风法中使用，加大了土壤中有机物的挥发效果和好氧生物降解速率，从而提高了有机物去除效率。cn107216225a公开了一种用于废弃地的土壤修复药剂，由以下按照重量份的原料组成：玉米秸秆70-75份、锯末45-50份、活性污泥28-32份、禽畜粪便30-35份、豆饼12-18份、菌剂2-3份、螯合锌5-8份、螯合铁2-5份、螯合镁3-6份、尿素9-12份、磷酸氢二钾4-7份、改性海泡石粉10-14份、改性凹凸棒土12-15份、生石灰18-22份。该发明还公开了所述用于废弃地的土壤修复药剂的制备方法。本发明制备的土壤修复药剂能够对废弃地进行修复，有效去除土壤中的污染物，改善土壤肥力，且无二次污染，实用性强。cn105349153a公开了一种用于土壤修复的药剂及其制备方法和应用。所述用于土壤修复的药剂，包括如下组分：淀粉-丙烯酸接枝共聚物、可溶性硫酸盐、可溶性氯盐和水；所述可溶性硫酸盐和可溶性氯盐不发生反应。在淀粉-丙烯酸接枝共聚物的基础上，通过添加可溶性硫酸盐、可溶性氯盐，配制成水剂，通过淀粉-丙烯酸接枝共聚物和可溶性硫酸盐、可溶性氯盐在水中的相互作用，不仅可适宜提高土壤的导电性和保水性，而且增加土壤的产热、导热、保热能力；在热强化的土壤气相抽提法和生物通风法中使用，加大了土壤中有机物的挥发效果和好氧生物降解速率，从而提高了有机物去除效率。近年来，阴-非离子混合表面活性剂和生物表面活性剂在生物修复领域得到越来越广泛的应用。阴-非离子混合表面活性剂对hocs具有协同增溶作用，并能减少各自的吸附损失，降低相应的生态风险；生物表面活性剂可生物降解，不会造成二次污染，而且低毒、一般对生物的刺激性较小，这些表面活性剂提高了微生物修复的效率。以上专利以及现有技术制备的土壤修复对于多环芳烃有机物的去除效果不佳，而且由于多环芳烃的水溶性差，对微生物生长有抑制作用和其特殊而稳定的环状结构，使其难以被一般的生物药剂分解，因而它们在环境中呈不断累积的趋势。技术实现要素：为了解决上述问题，本发明提供了一种固定化的微生物土壤修复剂及其修复土壤方法。一种固定化的微生物土壤修复剂及其修复土壤方法，其具体制备方案如下：按照质量份数，取100-150份的微生物培养液，平均分成4份后分别接种硝化菌、反硝化菌、聚磷菌和伯克氏菌，然后在27-31℃下培养15-20h，当活菌数到达1.0×109cfu/ml以上时，将四个菌种培养液混合均匀后加入80-120份的生理盐水，搅拌均匀后加入10-15份的生物质活性炭，搅拌吸附120-180min，完成后加入5-12份的修复增效剂，搅拌10-30min后在快速搅拌下将100-200份的质量份数为0.5％-2％的氯化钙溶液缓慢加入到反应釜中，搅拌后得到凝胶颗粒，控温30-40℃，室温交联24-48h，干燥后即可得到固定化微生物土壤修复剂。所述的微生物培养液中包括有葡萄糖，硫酸铵，尿素，黄豆饼粉和玉米浆。所述的修复增效剂和氯化钙溶液经过灭菌处理。所述的微生物在200-300rpm的摇床培养。所述的凝胶颗粒干燥温度为35-40℃。所述的生物质活性炭，其制备方法如下：按照质量份数，将40-50份的玉米秸秆，10-23份的树枝冲洗干净粉碎，然后3-8份的草木灰混合均匀，将0.5-5份的质量份数为10％-25％的氯化镁溶液喷洒后混合均匀，在80-100℃下干燥2-5h，然后在氮气保护下在300-400℃的炭化炉中低温碳化2-6h，然后升温到400-600℃，高温碳化1-3h，完成后冷却到室温，将碳粉加入到100-120份的质量浓度为0.5％-5％的硫酸中，控温70-90℃搅拌混合处理60-120min，完成后降温到室温，然后在溶液中加入0.4-0.8份的蛋白源，搅拌混合10-30min，然后过滤，清水洗涤在60-80℃下真空干燥，灭菌后即可得到所述的生物质活性炭。所述修复增效剂，其制备方法为：步骤一：按照质量份数，将20-40份的淀粉和100-200份的水加入到高压反应釜中，搅拌混合均匀，然后加入8-16份的质量分数为60％-70％的硫酸，控温40-55℃，继续搅拌反应5-7h，然后用质量份数为3％-10％的氢氧化钠溶液将反应液中和，然后过滤，用30-50份的去离子水打浆后过滤，然后将过滤物加入到280-360份的去离子水中，加热升温到90-100℃，糊化反应30-60min，步骤二：然后加入0.15-0.45份的过硫酸铵，搅拌混合均匀后将80-120份的油酸，5-9份的乙烯基-二羟基-甲基硅烷，0.01-0.2份的1-乙烯基-3-甲基咪唑碘盐，完成后加入1-4份的过硫酸铵，0.1-0.5份的硝酸铈铵，60-70℃继续搅拌反应1-5h，步骤三：完成后再加入30-40份山梨醇，12-19份质量百分比含量14-20％氢氧化钾水溶液，在180℃-200℃保温反应5-12h，降温至室温，加入12-19份质量百分比含量14-20％氢氧化钾水溶液，105-110℃抽真空脱水，经检测混合物的含水量为小于0.01％，升温至140-150℃，开始通环氧乙烷180-220份,逐渐升温至180-200℃继续反应1-4h，在110-120℃下脱水2-5h，即得到修复增效剂。该修复增效剂的反应机理为：淀粉与乙烯基-二羟基-甲基硅烷，油酸，1-乙烯基-3-丁基咪唑六氟磷酸盐，以上含双建单体进行聚合反应，得到的含有硅烷，离子液，以及羧酸，为羧酸多羟基的淀粉基化合物，与山梨醇发生酯化反应，生成多元酯的化合物，再与环氧乙烷反应，得到修复增效剂。其部分反应示意为：其部分共聚产物示意为：进一步的，该淀粉聚合物的羧酸与山梨醇发生酯化反应，再与环氧乙烷反应，制得修复增效剂。所述的蛋白源为酵母膏或牛肉膏或蛋白胨。所述的修复土壤方法为将多环芳烃污染土壤与所述的微生物土壤修复剂按照重量比为1:0.01-0.2的比例在混合均匀，然后在自然条件下处理放置5-15天。本发明的一种固定化的微生物土壤修复剂及其修复土壤方法，本发明以一种生物炭为载体，制备了一种固定化微生物土壤修复剂，该种微生物修复剂对多环芳烃污染的土壤具有练好的修复作用；本方法使用的生物炭能提高土壤阳离子交换，提高土壤的养分保持和保水性，中和酸性土壤，促进对有机污染物具有良好的吸收效果；固定化的微生物土壤修复剂，将微生物固定在限定空间区域内，提高了微生物细胞的浓度，使其保持较高的生物活性，增加了微生物分泌氨基酸、有机酸、抗生素等有用物质的浓度和生物催化效果；有利于菌株定殖、促进污染物的降解；本方法在活性炭中负载少量蛋白源，有利于微生物的存活和增殖；本发明将固体废弃资源有效地应用于污染土壤修复，是一种双赢的环保手段；本发明的土壤修复方法具有操作方便、低价、环保、效果佳的特点。淀粉与乙烯基-二羟基-甲基硅烷，油酸，1-乙烯基-3-丁基咪唑六氟磷酸盐，以上含双建单体进行聚合反应，得到的油酸含有硅烷，离子液，以及羧酸，为羧酸多羟基的化合物，与山梨醇发生酯化反应，生成多元酯的化合物，再与环氧乙烷反应，得到修复增效剂。修复增效剂。采用含有硅烷，离子液的淀粉基油酸聚合物，为多羧酸多羟基的化合物，与山梨醇发生酯化反应，生成多元酯的化合物，再与环氧乙烷反应，得到的增效剂克服了现有技术中使用表面活性剂不容易生物降解，毒性大的缺点，其成本非常低廉，且具有增溶效果强、土壤中吸附损失少、环境适应范围更广等优点。因此，可提高土壤中的修复效率，也降低了污染土壤修复成本和后续可能产生的生态风险，适用于微生物土壤修复剂的淋洗操作。附图说明图1为实施例2制备的修复增效剂样品的傅里叶红外光谱图；在2962cm-1附近存在碳氢的伸缩吸收峰，在1157cm-1附近存在脂肪醚的反对称伸缩吸收峰，说明环氧乙烷参与了反应；在1732cm-1附近存在酯羰基的伸缩吸收峰，说明油酸参与了反应；在1067cm-1附近存在酯碳氧的伸缩吸收峰，在3396cm-1附近存在羟基的吸收峰，说明淀粉和山梨醇参与了反应；在736cm-1附近存在硅碳的伸缩吸收峰，说明乙烯基-二羟基-甲基硅烷参与了反应；在1636cm-1附近无明显吸收峰，说明油酸和乙烯基-二羟基-甲基硅烷的碳碳双键基本已完全反应。具体实施方式下面通过具体实施例对该发明作进一步说明：在各个实施例中使用人工制备的制备萘含量为50mg/kg的污染土壤样品，在实验后通过正己烷萃取，后液相色谱分析污染土壤样品中萘的含量，计算降解率。制备的微生物土壤修复剂中的活菌数的测定方法为：秤取1.000g样品溶于9ml磷酸盐缓冲液中，先以旋涡式震荡器充分震荡，将包埋菌体溶出再梯度稀释后，取0.1ml菌液浇注平板，37℃厌氧培养24h后计活菌数。实施例1一种固定化的微生物土壤修复剂及其修复土壤方法，其具体制备方案如下：取100g微生物培养液，平均分成4g后分别接种硝化菌、反硝化菌、聚磷菌和伯克氏菌，然后在27℃下培养15h，当活菌数到达1.0×109cfu/ml以上时，将四个菌种培养液混合均匀后加入80g生理盐水，搅拌均匀后加入10g生物质活性炭，搅拌吸附120min，完成后加入5g的修复增效剂，搅拌10min后在快速搅拌下将100g质量百分比含量为0.5％的氯化钙溶液缓慢加入到反应釜中，搅拌后得到凝胶颗粒，控温30℃，室温交联24h，干燥后即可得到固定化微生物土壤修复剂。所述的微生物培养液中包括有葡萄糖，硫酸铵，尿素，黄豆饼粉和玉米浆。所述的修复增效剂和氯化钙溶液经过灭菌处理。所述的微生物在200rpm的摇床培养。所述的凝胶颗粒干燥温度为35℃。所述的生物质活性炭，其制备方法如下：将40g玉米秸秆，10g树枝冲洗干净粉碎，然后3g草木灰混合均匀，将0.5g质量百分比含量为10％的氯化镁溶液喷洒后混合均匀，在80℃下干燥2h，然后在氮气保护下在300℃的炭化炉中低温碳化2h，然后升温到400℃，高温碳化1h，完成后冷却到室温，将碳粉加入到100g质量浓度为0.5％的硫酸中，控温70℃搅拌混合处理60min，完成后降温到室温，然后在溶液中加入0.4g蛋白源，搅拌混合10min，然后过滤，清水洗涤在60℃下真空干燥，灭菌后即可得到所述的生物质活性炭。所述修复增效剂，其制备方法为：步骤一：将20g的淀粉和100g的水加入到高压反应釜中，搅拌混合均匀，然后加入8g的质量分数为60％的硫酸，控温40℃，继续搅拌反应5h，然后用质量g数为3％的氢氧化钠溶液将反应液中和，然后过滤，用30g的去离子水打浆后过滤，然后将过滤物加入到280g的去离子水中，加热升温到90℃，糊化反应30min，步骤二：然后加入0.15g的过硫酸铵，搅拌混合均匀后将80g的油酸，5g的乙烯基-二羟基-甲基硅烷，0.01g的1-乙烯基-3-甲基咪唑碘盐，完成后加入1g的过硫酸铵，0.1g的硝酸铈铵，60℃继续搅拌反应1h，步骤三：完成后再加入30g山梨醇，12g质量百分比含量14％氢氧化钾水溶液，在180℃保温反应5h，降温至室温，加入12g质量百分比含量14％氢氧化钾水溶液，105℃抽真空脱水，经检测混合物的含水量为小于0.01％，升温至140℃，开始通环氧乙烷180g,逐渐升温至180℃继续反应1h，在110℃下脱水2h，即得到修复增效剂。所述的蛋白源为酵母膏。所述的修复土壤方法为将多环芳烃污染土壤与所述的微生物土壤修复剂按照重量比为1:0.01的比例在混合均匀，然后在自然条件下处理放置15天。实施例2一种固定化的微生物土壤修复剂及其修复土壤方法，其具体制备方案如下：取130g微生物培养液，平均分成4g后分别接种硝化菌、反硝化菌、聚磷菌和伯克氏菌，然后在29℃下培养18h，当活菌数到达1.0×109cfu/ml以上时，将四个菌种培养液混合均匀后加入100g生理盐水，搅拌均匀后加入13g生物质活性炭，搅拌吸附150min，完成后加入8g的修复增效剂，搅拌20min后在快速搅拌下将150g质量百分比含量为1.5％的氯化钙溶液缓慢加入到反应釜中，搅拌后得到凝胶颗粒，控温35℃，室温交联36h，干燥后即可得到固定化微生物土壤修复剂。所述的微生物培养液中包括有葡萄糖，硫酸铵，尿素，黄豆饼粉和玉米浆。所述的修复增效剂和氯化钙溶液经过灭菌处理。所述的微生物在240rpm的摇床培养。所述的凝胶颗粒干燥温度为38℃。所述的生物质活性炭，其制备方法如下：将45g玉米秸秆，16g树枝冲洗干净粉碎，然后4g草木灰混合均匀，将2.5g质量百分比含量为17％的氯化镁溶液喷洒后混合均匀，在90℃下干燥3h，然后在氮气保护下在340℃的炭化炉中低温碳化4h，然后升温到500℃，高温碳化2h，完成后冷却到室温，将碳粉加入到110g质量浓度为2.5％的硫酸中，控温80℃搅拌混合处理90min，完成后降温到室温，然后在溶液中加入0.6g蛋白源，搅拌混合20min，然后过滤，清水洗涤在70℃下真空干燥，灭菌后即可得到所述的生物质活性炭。所述修复增效剂，其制备方法为：步骤一：将25g的淀粉和180g的水加入到高压反应釜中，搅拌混合均匀，然后加入11g的质量分数为66％的硫酸，控温47℃，继续搅拌反应6h，然后用质量g数为8％的氢氧化钠溶液将反应液中和，然后过滤，用35g的去离子水打浆后过滤，然后将过滤物加入到300g的去离子水中，加热升温到95℃，糊化反应38min，步骤二：然后加入0.30g的过硫酸铵，搅拌混合均匀后将90g的油酸，7g的乙烯基-二羟基-甲基硅烷，0.03g的1-乙烯基-3-甲基咪唑碘盐，完成后加入2g的过硫酸铵，0.3g的硝酸铈铵，66℃继续搅拌反应2h，步骤三：完成后再加入35g山梨醇，15g质量百分比含量18％氢氧化钾水溶液，在190℃保温反应10h，降温至室温，加入5g质量百分比含量18％氢氧化钾水溶液，107℃抽真空脱水，经检测混合物的含水量为小于0.01％，升温至145℃，开始通环氧乙烷190g,逐渐升温至187℃继续反应2h，在118℃下脱水4h，即得到修复增效剂。所述的蛋白源为牛肉膏。所述的修复土壤方法为将多环芳烃污染土壤与所述的微生物土壤修复剂按照重量比为1:0.1的比例在混合均匀，然后在自然条件下处理放置10天。实施例3一种固定化的微生物土壤修复剂及其修复土壤方法，其具体制备方案如下：取150g微生物培养液，平均分成4g后分别接种硝化菌、反硝化菌、聚磷菌和伯克氏菌，然后在31℃下培养20h，当活菌数到达1.0×109cfu/ml以上时，将四个菌种培养液混合均匀后加入120g生理盐水，搅拌均匀后加入15g生物质活性炭，搅拌吸附180min，完成后加入12g的修复增效剂，搅拌30min后在快速搅拌下将200g质量百分比含量为2％的氯化钙溶液缓慢加入到反应釜中，搅拌后得到凝胶颗粒，控温40℃，室温交联48h，干燥后即可得到固定化微生物土壤修复剂。所述的微生物培养液中包括有葡萄糖，硫酸铵，尿素，黄豆饼粉和玉米浆。所述的修复增效剂和氯化钙溶液经过灭菌处理。所述的微生物在300rpm的摇床培养。所述的凝胶颗粒干燥温度为40℃。所述的生物质活性炭，其制备方法如下：将50g玉米秸秆，23g树枝冲洗干净粉碎，然后8g草木灰混合均匀，将5g质量百分比含量为25％的氯化镁溶液喷洒后混合均匀，在100℃下干燥5h，然后在氮气保护下在400℃的炭化炉中低温碳化6h，然后升温到600℃，高温碳化3h，完成后冷却到室温，将碳粉加入到120g质量浓度为5％的硫酸中，控温90℃搅拌混合处理120min，完成后降温到室温，然后在溶液中加入0.8g蛋白源，搅拌混合30min，然后过滤，清水洗涤在80℃下真空干燥，灭菌后即可得到所述的生物质活性炭。所述修复增效剂，其制备方法为：步骤一：将40g的淀粉和200g的水加入到高压反应釜中，搅拌混合均匀，然后加入16g的质量分数为60％-70％的硫酸，控温55℃，继续搅拌反应7h，然后用质量g数为10％的氢氧化钠溶液将反应液中和，然后过滤，用50g的去离子水打浆后过滤，然后将过滤物加入到360g的去离子水中，加热升温到100℃，糊化反应60min，步骤二：然后加入0.45g的过硫酸铵，搅拌混合均匀后将120g的油酸，9g的乙烯基-二羟基-甲基硅烷，0.2g的1-乙烯基-3-甲基咪唑碘盐，完成后加入4g的过硫酸铵，0.5g的硝酸铈铵，70℃继续搅拌反应1-5h，步骤三：完成后再加入40g山梨醇，19g质量百分比含量20％氢氧化钾水溶液，在200℃保温反应12h，降温至室温，加入19g质量百分比含量20％氢氧化钾水溶液，110℃抽真空脱水，经检测混合物的含水量为小于0.01％，升温至150℃，开始通环氧乙烷220g,逐渐升温至200℃继续反应4h，在120℃下脱水5h，即得到修复增效剂。所述的蛋白源为蛋白胨。所述的修复土壤方法为将多环芳烃污染土壤与所述的微生物土壤修复剂按照重量比为1:0.2的比例在混合均匀，然后在自然条件下处理放置15天。以上实施例中萘的降解率以及制备的微生物土壤修复剂中活菌数测定结果如下表所示：萘降解率(％)活菌数(×108cfu/g)实施例184.416.4实施例286.918.7实施例392.724.8对比例1所述修复增效剂，其制备方法为：步骤一：将80g的油酸，5g的乙烯基-二羟基-甲基硅烷，0.01g的1-乙烯基-3-甲基咪唑碘盐，完成后加入1g的过硫酸铵，0.1g的硝酸铈铵，60℃继续搅拌反应1h，步骤二：完成后再加入30g山梨醇，12g质量百分比含量14％氢氧化钾水溶液，在180℃保温反应5h，降温至室温，加入12g质量百分比含量14％氢氧化钾水溶液，105℃抽真空脱水，经检测混合物的含水量为小于0.01％，升温至140℃，开始通环氧乙烷180g,逐渐升温至180℃继续反应1h，在110℃下脱水2h，即得到修复增效剂。其它同实施例1；所述的修复土壤方法为将多环芳烃污染土壤与所述的微生物土壤修复剂按照重量比为1:0.01的比例在混合均匀，然后在自然条件下处理放置15天。对比例2所述修复增效剂，其制备方法为：步骤一：将20g的淀粉和100g的水加入到高压反应釜中，搅拌混合均匀，然后加入8g的质量分数为60％的硫酸，控温40℃，继续搅拌反应5h，然后用质量g数为3％的氢氧化钠溶液将反应液中和，然后过滤，用30g的去离子水打浆后过滤，然后将过滤物加入到280g的去离子水中，加热升温到90℃，糊化反应30min，步骤二：然后加入0.15g的过硫酸铵，搅拌混合均匀后将80g的油酸，5g的乙烯基-二羟基-甲基硅烷，0.01g的1-乙烯基-3-甲基咪唑碘盐，完成后加入1g的过硫酸铵，0.1g的硝酸铈铵，60℃继续搅拌反应1h，步骤三：完成后再加入30g山梨醇，12g质量百分比含量14％氢氧化钾水溶液，在180℃保温反应5h，降温至室温，加入12g质量百分比含量14％氢氧化钾水溶液，在110℃下脱水2h，即得到修复增效剂。其它同实施例2；所述的修复土壤方法为将多环芳烃污染土壤与所述的微生物土壤修复剂按照重量比为1:0.01的比例在混合均匀，然后在自然条件下处理放置15天。对比例3一种固定化的微生物土壤修复剂及其修复土壤方法，其具体制备方案如下：取100g微生物培养液，平均分成4g后分别接种硝化菌、反硝化菌、聚磷菌和伯克氏菌，然后在27℃下培养15h，当活菌数到达1.0×109cfu/ml以上时，将四个菌种培养液混合均匀后加入80g生理盐水，搅拌均匀后加入10g生物质活性炭，搅拌吸附120min，完成后搅拌10min后在快速搅拌下将100g质量百分比含量为0.5％的氯化钙溶液缓慢加入到反应釜中，搅拌后得到凝胶颗粒，控温30℃，室温交联24h，干燥后即可得到固定化微生物土壤修复剂。所述的微生物培养液中包括有葡萄糖，硫酸铵，尿素，黄豆饼粉和玉米浆。所述的氯化钙溶液经过灭菌处理。所述的微生物在200rpm的摇床培养。所述的凝胶颗粒干燥温度为35℃。所述的生物质活性炭，其制备方法如下：将40g玉米秸秆，10g树枝冲洗干净粉碎，然后3g草木灰混合均匀，将0.5g质量百分比含量为10％的氯化镁溶液喷洒后混合均匀，在80℃下干燥2h，然后在氮气保护下在300℃的炭化炉中低温碳化2h，然后升温到400℃，高温碳化1h，完成后冷却到室温，将碳粉加入到100g质量浓度为0.5％的硫酸中，控温70℃搅拌混合处理60min，完成后降温到室温，然后在溶液中加入0.4g蛋白源，搅拌混合10min，然后过滤，清水洗涤在60℃下真空干燥，灭菌后即可得到所述的生物质活性炭。所述的蛋白源为酵母膏。所述的修复土壤方法为将多环芳烃污染土壤与所述的微生物土壤修复剂按照重量比为1:0.01的比例在混合均匀，然后在自然条件下处理放置15天。对比例4一种固定化的微生物土壤修复剂及其修复土壤方法，其具体制备方案如下：取100g微生物培养液，平均分成3g后分别接种硝化菌、反硝化菌和伯克氏菌，然后在27℃下培养15h，当活菌数到达1.0×109cfu/ml以上时，将四个菌种培养液混合均匀后加入80g生理盐水，搅拌均匀后加入10g活性炭，搅拌吸附120min，完成后加入5g的修复增效剂，搅拌10min后在快速搅拌下将100g质量百分比含量为0.5％的氯化钙溶液缓慢加入到反应釜中，搅拌后得到凝胶颗粒，控温30℃，室温交联24h，干燥后即可得到固定化微生物土壤修复剂。所述的微生物培养液中包括有葡萄糖，硫酸铵，尿素，黄豆饼粉和玉米浆。所述的修复增效剂和氯化钙溶液经过灭菌处理。所述的微生物在200rpm的摇床培养。所述的凝胶颗粒干燥温度为35℃。所述修复增效剂，其制备方法为：步骤一：将20g的淀粉和100g的水加入到高压反应釜中，搅拌混合均匀，然后加入8g的质量分数为60％的硫酸，控温40℃，继续搅拌反应5h，然后用质量g数为3％的氢氧化钠溶液将反应液中和，然后过滤，用30g的去离子水打浆后过滤，然后将过滤物加入到280g的去离子水中，加热升温到90℃，糊化反应30min，步骤二：然后加入0.15g的过硫酸铵，搅拌混合均匀后将80g的油酸，5g的乙烯基-二羟基-甲基硅烷，0.01g的1-乙烯基-3-甲基咪唑碘盐，完成后加入1g的过硫酸铵，0.1g的硝酸铈铵，60℃继续搅拌反应1h，步骤三：完成后再加入30g山梨醇，12g质量百分比含量14％氢氧化钾水溶液，在180℃保温反应5h，降温至室温，加入12g质量百分比含量14％氢氧化钾水溶液，105℃抽真空脱水，经检测混合物的含水量为小于0.01％，升温至140℃，开始通环氧乙烷180g,逐渐升温至180℃继续反应1h，在110℃下脱水2h，即得到修复增效剂。所述的蛋白源为酵母膏。所述的修复土壤方法为将多环芳烃污染土壤与所述的微生物土壤修复剂按照重量比为1:0.01的比例在混合均匀，然后在自然条件下处理放置15天。对比例5一种固定化的微生物土壤修复剂及其修复土壤方法，其具体制备方案如下：取100g微生物培养液，平均分成4g后分别接种硝化菌、反硝化菌、聚磷菌和伯克氏菌，然后在27℃下培养15h，当活菌数到达1.0×109cfu/ml以上时，将四个菌种培养液混合均匀后加入80g生理盐水，搅拌均匀后加入10g活性炭，搅拌吸附120min，搅拌10min后在快速搅拌下将100g质量百分比含量为0.5％的氯化钙溶液缓慢加入到反应釜中，搅拌后得到凝胶颗粒，控温30℃，室温交联24h，干燥后即可得到固定化微生物土壤修复剂。所述的微生物培养液中包括有葡萄糖，硫酸铵，尿素，黄豆饼粉和玉米浆。所述的氯化钙溶液经过灭菌处理。所述的微生物在200rpm的摇床培养。所述的凝胶颗粒干燥温度为35℃。所述的修复土壤方法为将多环芳烃污染土壤与所述的微生物土壤修复剂按照重量比为1:0.01的比例在混合均匀，然后在自然条件下处理放置15天。以上实施例中萘的降解率以及制备的微生物土壤修复剂中活菌数测定结果如下表所示：萘降解率(％)活菌数(×108cfu/g)对比例162.15.4对比例275.39.7对比例344.54.3对比例456.15.1对比例532.82.4当前第1页1 2 3 

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