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您当前的位置： 利用14-氨基甾族化合物减缓心肌结构损伤的发展速度的制作方法
2021-02-02 12:02:24|
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起点商标网 专利名称：利用14-氨基甾族化合物减缓心肌结构损伤的发展速度的制作方法
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本发明是关于14-氨基甾族化合物在减缓充血性心力衰竭(CHF)心肌结构损伤特性的发展速度方面的新用途。
CHF是一种进行性疾病，心力逐渐不能提供足够的心脏输出(CO)以输送充氧血液到末梢组织，所述心脏输出就是心脏每次泵送的血液体积。在心力衰竭的初期，身体的其余部位补偿CO的损失，这种补偿过程最终导致人们熟知的CHF并发症。随着CHF的发展，结构及血液动力损伤就发生了。这种结构损伤在心肌层上宏观地表现为心室肥大，在心室壁上微观地表现为间质性血管周移位性纤维变性、心肌毛细密度下降及心肌细胞死亡。当心肌组织纤维变性发生时，因为剩余存活心肌细胞的工作负荷加大，故损害心脏功能。
在血流动力学上，衰竭心脏在收缩期(心脏循环中血液从心室排出期)产生压力的能力减小。这样，为了完成任何给定的外部功，需要更大的未期舒张量(在心脏循环的舒张过程中，血液充入心室中)。在心脏衰竭中，由作功能与载荷失谐形成的降低了的血液排出会导致未期舒张压力及肺的毛细压力升高。紧接着常会发生肺充血和未梢水肿。由病人的观点可知，当CHF发展时，病人将经历逐渐恶化的疲劳和呼吸困难症状。
如果可能的话，CHF的有效治疗方法需要确定其病源，因为有些CHF病源具有其独特的治疗方式。CHF具有大量的病源，包括心肌疾病，如冠状动脉疾病或心肌炎;瓣膜疾病，如僧帽状瓣膜下垂或主动脉瓣狭窄;心包疾病;充血性心力疾病;肺病，心律不齐，高血压，以及糖尿病。例如，如果CHF的病源是心肌炎或心律不齐，那么分别利用消炎药或抗心律失常药治疗可以使病人的心功能恢复正常。
但是，一旦排除了与其他治疗方法不相适的病源，即可开始进行下列三种形式的治疗方法中的一种或多种1)通过服用影响肌体收缩力的药物以提高心脏的泵送能力，如洋地黄，2)通过休息和/或服用血管舒张药以降低心脏工作负荷，如甲巯丙脯酸，和3)通过低钠饮食或服用利尿药以控制钠和水的潴留，如氯苯并噻二嗪磺酰胺二氧化物。根据病人的病状及对一定药物的耐药量，CHF的治疗很个别。例如，有些病人对产生洋地黄毒性的趋向很强，而另一些具有轻微症状的病人则得益于利尿药，此药具有更大的治疗指数。再者，目前的贤明人士建议利尿药适合于最严重的CHF治疗，而且还建议先用利尿药治疗，接着用血管舒张药和洋地黄治疗。人们还注意到洋地黄对患有严重CHF的病人最有效。一般可见，Braunwald，Heart DiseaseA Textbook of Cardiovascular Medicine Vol.(3rded.1988)，Chung，E.K.，Quick Reference to Cardiovascular Disease，Chapter 27(2d ed.1983)和Fowler，N.O.，Cardiac Diagnosis and Treatment，Chapter12(2d ed.1976)。
目前的CHF治疗仅限于改善与CHF的血流动力学问题有关的症状。尽管洋地黄对改善与严重CHF的血流动力学问题有关的症状有用，但实际上其低治疗指数限制了其治疗应用。一般可见，Braunwald，Heart DiseaseA Textbook of Cardiovascular Medicine Vol.(3rd ed.1988)，Chung，E.K.，Quick Reference to Cardiovascular Disease，Chapter 27(2d ed.1983)，Fowler，N.O.，Cardic Diagnosis and Treatment，Chapter 12(2d ed.1976)和Goodman和Gilman，The Pharmacological Basis of Therapeutics，Chapter 34(8th ed.，1990)。
已知治疗血流动力学问题疗法的毒性问题，故需要一种能改善与CHF有关的心肌结构损伤的化合物。尽管洋地黄具有毒性问题，但是对能够减缓CHF发展时结构病状的化合物研究仍然是从影响肌体收缩力的洋地黄开始的。可见于Williams J.F.和Braunwald，E.，“Studies on Digitalis-Effects of Digitoxin on the Development of Cardiac Hypertrophy in the Rat Subjected to Aortic Constriction”，16Am.J.Cardiol.534(1965)(下文称Willioms和Braunwald)。Williams和Braunwald的结论是，在主动脉狭窄之前和之后服用洋地黄毒苷可以认为是对心脏施加了保护作用，这是由于该药消除了由长期负荷引起的心室肥大。然而，Williams和Braunwald的研究从没有证实洋地黄毒苷能够减缓心肌移位性纤维变性的速率。
正如本领域技术人员所知，在医学教课书中还公开了洋地黄处理“能够降低心脏疾病的发展速率”。可见于Goodman和Gilman，The Pharmacological Basis of Therapeutics，Chapter 34，(8thed.，1990)(下文称Goodman和Cilman)。但是，采用洋地黄降低CHF的发展速率仍然存疑。为了确定是萘心安还是异羟基洋地黄毒苷能够保护火鸡以免左心室膨胀，另外，研究者比较了异羟基洋地黄毒苷和萘心安，研究的结果是萘心安，而不是异羟基洋地黄毒苷，能预防左心室膨胀。可见Gwathmey，J.和Hamlin，R.，“Protection of Turkeys Against Furazolidone Induced Cardiomyopathy”Am.J.Cardiol.52626(1983)。
采用洋地黄减缓CHF的发展的可疑性以及其毒性问题激发研究者们去研制更安全的作用于心脏的化合物。下列专利描述了含对心脏速效的甾核化合物。1987年7月16日出版的Chiodini等人的世界专利公报WO87/04167描述了氨基配糖甾族衍生物，其位置3由氨基-糖基取代及位置14由乙缩醛连接。该公报指出此化合物对治疗高血压有用。1990年8月17日出版的Guina的法国专利2，642，973描述了一种与洋地黄类似的化合物，2，3-二氧甲基-6-甲基-3-β-D-葡萄糖-毒毛旋花苷，该化合物含甾核，其位置3由葡萄糖部分取代，位置17由内酯部分取代及位置14由羟基取代。此专利指出该化合物可用在预防由心力不足引起的病症上，也可用于预防由动脉钙化高血压引起的病症，心力不足引起的病症可服用洋地黄。Guina化合物还被声称是增强肌体收缩力的药物、未梢血管舒张剂及抗心律失常药。但是，不管是Chiodini还是Guina都没有公开一种能减缓与CHF有关的结构损伤发展的化合物。
另外，血管紧张肽转变酶抑制剂(ACEI)已显示出通过改善血流动力症状可降低CHF病人的死亡率。然而，服用ACEI并没有显示出能够减缓心肌层移位性纤维变性的沉积从而减缓与CHF有关的结构损伤的扩展。可见于Nicklas，J.M.和Pitt，B.，等人(SOLVD研究人员)“Effect of Enalapril on Surviual in Patients with Reduced Left Ventricular Ejection Fractions and Congestive Heart Failure”，N，Engl.J.Med.325(5)293(1991)。
清楚地，现有技术没有公开一种能够减缓与CHF有关的结构损伤发展的化合物。四百万人患有CHF及诊断CHF后五年内的死亡率男性为60%、女性为45%的事实表明当前改善血流动力障碍的疗法并不能减缓无情的CHF并发症的结构症状。可见于Parmley，W.W.，“Pathphysiology and Current Therapy of Congesfive Heart Failure”，J.Am.Col.Cardiol.13771-785(1989)。因此，本发明提供了一种减缓与CHF有关的结构损伤不可避免发展的新的治疗方法。
人们已经使用发现，服用一定的14-氨基甾族化合物可通过减缓心肌上间质性血管周移位性纤维变性的沉积从而减缓与CHF有关的结构畸形的发展。在下列三篇专利中描述了14-氨基甾族化合物，这里将它们引作参考1985年11月12日出版的Jarreau等人的美国专利4，552，868;1986年4月22日出版的Jarreau等人的美国4，584，289;1989年12月5日出版的Jarreau等人的美国专利4，885，280。这三篇专利描述了具有增强肌体收缩力作用的14-氨基甾族化合物。但是，从来没有人建议这些14-氨基甾族化合物能够改变与CHF有关的结构损伤的发展。本发明的化合物不仅能影响肌体的收缩力，而且当CHF发展时还能减缓结构损伤，正如心肌上移位性纤维变性量减少所表明的那样。心肌移位性纤维变性的减少表明心肌细胞死亡较少。此外，本发明的化合物可在CHF早期安全服用，其毒性比洋地黄大大减小。因此，如果CHF的发展减缓，那么对于严重病症的大量药物，如血管舒张剂、利尿药及其他纯影响肌体收缩力的药物或手术均要减少。
本发明是关于减缓以患有CHF的人为对象的心肌结构损伤的发展速度之方法，该方法包括所述对象服用具有如下通式的安全有效剂量的14-氨基甾族化合物或其酸盐
其中a)R1为(ⅰ)COOR5，其中R5为含1至4个碳原子的低级烷基、被氨基取代了的含2至4个碳原子的低级烷基、或含6至12个碳原子的芳烷基，或(ⅱ)CHR6OH，其中R6为氢原子或含1至4个碳原子的低级烷基;
b)R2为-NR7R8，其中R7和R8可以相同也可不同，它们是氢原子或含1至4个碳原子的低级烷基;
c)R3为(ⅰ)单糖糖残基，其中
R9为氢原子、羟基、或乙酸基，R10为羟基或乙酸基，或R9和R10一起形成二价亚烷二氧基，R11代表羟基、甲氧基、或乙酸基，以及R12为甲基或羟基-甲基，或(ⅱ)OH;
d)R4为(ⅰ)OH，或(ⅱ)H，或(ⅲ)OR13，其中R13为所述的单糖糖残基;
e)Z为(ⅰ)-CH-，其中a和b为单键，或(ⅱ)＝C，其中或者a或者b为双键。
14-氨基甾族化合物优选地以含14-氨基甾族化合物和药学上能接受的载体的药物组合物的形式服用。
本发明提供了一种减缓与CHF有关的心肌结构损伤的发展速度的方法，该方法包括服用14-氨基甾族化合物。
活性物质本发明的方法包括服用14-氨基甾族化合物。14-氨基甾族化合物包括具有如下通式的一种或多种化合物
其中a)R1为(ⅰ)COOR5，其中R5为含1至4个碳原子的低级烷基，优选地为甲基或乙基，或为被氨基取代的含2至4个碳原子的低级烷基，从而形成2-氨基乙基、3-氨基丙基，或为含6至12个碳原子的芳烷基，优选地为苯基、苯甲基或甲苯基，或(ⅱ)CHR6OH，其中R6为氢原子或含1至4个碳原子的低级烷基;优选地为甲基;
b)R2为-NR7R8，其中R7和R8可以相同也可不同，它们是氢原子或含1至4个碳原子的低级烷基;优选地为甲基;
c)R3为(ⅰ)单糖糖残基，其中
R9为氢原子、羟基、或乙酸基，优选地为羟基，R10为羟基或乙酸基，优选地为羟基，或R9和R10一起形成二价的亚烷二氧基，如亚甲基二氧基、亚乙基二氧基或异亚丙基二氧基，R11代表羟基、甲氧基、或乙酸基，优选地为羟基，以及R12为甲基或羟基-甲基，或(ⅱ)OH;
d)R4为(ⅰ)OH，或(ⅱ)H，或(ⅲ)OR13，其中R13为所述单糖糖残基;
e)Z为(ⅰ)-CH-，其中a和b为单键，或(ⅱ)＝C，其中或者a或者b为双键。
一组优选的化合物是14-氨基甾族化合物，其中R1为CHR6OH，R2为NH2，R3为单糖糖残基，R4为OH或H，Z为CH，其中a和b为单键。特别地，优选的化合物有(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-17-(羟基甲基)雄甾烷-3-基6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖苷;(3β，5β，14β，20S)-14-氨基-20-羟基孕甾烷-3-基6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖苷及其20R异构体;(3β，5β，14β，20S)-14-氨基-20-羟基孕甾烷-3-基2，6-二脱氧-β-D-核-己吡喃糖苷及其20R异构体;(3β，5β，14β，20S)-14-氨基-20-羟基孕甾烷-3-基4-氨基-2，4，6-三脱氧-α-L-来苏-己吡喃糖苷及其20R异构体;(3β，5β，12β，14β，17β)-14-氨基-12-羟基-17-(羟基甲基)雄甾烷-3-基6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖苷;(3β，5β，12β，14β，20R)-14-氨基-12，20-二羟基孕甾烷-3-基6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖苷及其20S异构体;(3β，5β，12β，14β，20S)-14-氨基-12，20-二羟基孕甾烷-3-基，2，6-二脱氧-β-D-核-己吡喃甘露糖苷及其20R异构体;(3β，5β，12β，14β，20R)-14-氨基-20-羟基孕甾烷-3，12-二基双[6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖苷]及其20S异构体。这些化合物及其合成方法公开在1985年11月12日出版的Jarreau等人的美国专利4，552，868中，该文献在此引作参考。
另一组优选的化合物是14-氨基甾族化合物，其R3为OH基团。R3为OH基团的特殊化合物有(3β，5β，12β，14β，20R)-14-氨基-孕甾烷-3，12，20-三醇及其20S异构体和(3β，5β，12β，14β，17β)-14-氨基-3，12-二羟基-雄甾烷-17-甲醇。这些化合物及其合成方法公开在1986年4月22日出版的Jarreau等人的美国专利4，584，289中，该文献在此引作参考。
特别优选的化合物是14-氨基甾族化合物，其R1为COOR5，其中R5为含1至4个碳原子的低级烷基、被氨基取代了的含2至4个碳原子的低级烷基、或含6至12个碳原子的芳烷基，R2为NR7R8，其中R7和R8可以相同也可不同，它们均是氢原子或含1至4个碳原子的低级烷基，以及R3为单糖糖残基，而且R1、R2和R3位于药理学上最活泼的β位置。R4或者是-OH或者是H。Z可以是-CH，其中a和b为单键，或者是＝C，其中双键位于甾核上位置a或b上。尤其特别优选的化合物有(3β，5β，14β，17β)-14-甲基氨基-3-[(6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基)氧]雄甾烷-17-羧酸，甲酯;(3β，14β，17β)-14-氨基-3-[(6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基)氧]雄甾烷-4-烯-17-羧酸，甲酯;(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-[(6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基)氧]雄甾烷-17-羧酸，甲酯和(3β，5β，14β，20R)-14-氨基-20-羟基孕甾烷-3-基-6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖苷及其20S异构体。这些化合物及其制造方法公开在1989年12月5日出版的Jarreau等人的美国专利4，885，280中，该文献在此引作参考。
组合物本发明的化合物是以药物组合物的形式服用，该组合物包含一种安全有效量的14-氨基甾族化合物活性组分和一种药物上可接受的载体。
这里使用的“安全有效量”短语的意思是在正常的医学判断范围内，化合物或组合物的量高到足以使所治疗的症状和/或疾病得到显著的积极改善，低到足以避免严重的副作用(合理的利益/危险比)。本发明的方法中所用的安全有效量的活性组分随着接受治疗的病人的年龄和体质条件、疾病的严重程度、治疗的期限、共同疗法的性质、所使用的药物上能接受的特定赋形剂、以及在主治医师知识和专业范围内的类似因素的变化而变化。
本发明的组合物以单位剂量形式提供为优选。正如在此所用的，“单位剂量形式”是指本发明的组合物含有一定量的14-氨基甾族化合物，该量适于以单一剂量按良好的医学惯例给予人体。优选地，这些组合物含大约0.001mg(毫克)至约5mg 14-氨基甾族化合物，更优选地含约0.01mg至约2.0mg。
本发明的组合物可以是任何一种形式，适合于(例如)口服、舌下、颊腔、直肠、局部、吸入或非肠道给药或者以皮下植入方式给药。根据特殊给药途径的需要，可以采用大量现有技术公知的药物上能接受的载体。这些包括固体或液体的填充剂、稀释剂、水溶助长剂、表面活性剂和胶囊物质。下列文献中描述了本发明方法有用的制备剂量形式的技术和组合物，这些文献这里引作参考7Modern Pharmaceutics，第9和10章(Baker & Rhodes，editors，1979);Lieberman等人，Pharmaceutical Dosage FormsTablets(1981);和Ansel，Introdssction to Pharmaceutical Dosage Forms 2d Edition(1976)。
特别地，用于全身性给药可接受的载体包括糖、淀粉、纤维素及其衍生物、麦芽、明胶、滑石、硫酸钙、植物油、合成油、多元醇、藻酸、磷酸缓冲剂、乳化剂，等渗盐水、和无热原水。用于非肠道服药的优选载体包括丙二醇、油酸乙酯、吡咯烷酮、乙醇及芝麻油。优选地，在非肠道服药的组合物中，药物上能接受的载体含量至少为组合物总重量的大约95%。
可采用的口服剂型有多种，包括固体剂型，如片剂、胶囊剂、颗粒剂和大量粉剂。这些口服剂型包含有安全有效量14-氨基甾族化合物，优选的含量约从0.5mg到2.0mg。更优选的口服剂型含1.0mg14-氨基甾族化合物。片剂可以是压制片、研制片、肠溶衣片、糖衣片、薄膜衣片、或多层压制片，它们含有适当的粘合剂、润滑剂、稀释剂、崩解剂、着色剂、香味剂、引流剂、及助熔剂。液体口服剂型包括水溶液、乳浊液、悬浊液、由非泡腾颗粒重组的溶液和/或悬浊液、及由泡腾颗粒重组的泡腾制剂，它们包含合适的溶剂、防腐剂、乳化剂、悬浮剂、稀释剂、甜味剂、助熔剂、着色剂及香味剂。适用于口服的优选载体包括明胶、丙二醇、棉子油及芝麻油。
本发明的组合物也可局部给予受体，即通过直接将组合物敷于或喷于受体的表皮或上皮组织上。这种组合物包括，例如，洗剂，霜剂、溶液剂、胶剂和固体制剂。这些局部使用的组合物包含安全有效量14-氨基甾族化合物，优选的含量约为0.5mg到2.0mg。更优选的局部使用的组合物含1.0mg的14-氨基甾族化合物。局部施用的合适载体优选地以连续膜形式保留在皮肤的位置上，并阻止由出汗或在水中浸渍而被除去。一般地，此载体本质是有机的和能够分散或溶解14-氨基甾族化合物的物质。该载体可以包括药物上能够接受的润肤剂、乳化剂、增稠剂和溶剂。
本发明的组合物也可通过吸入的途径给药。此组合物被制备成一种基质，该基质包含一种溶剂，如水或乙二醇，还包含防腐剂如羟苯甲酸甲酯或丙酯，以及喷射剂如氮气或二氧化碳。
另外，本发明的组合物能够通过由硅氧烷弹性体、乙烯乙酸乙烯酯的共聚物或乳酸-乙二醇的共聚物所构成的皮下植入剂给药。
治疗方法这里使用的述语“CHF”指的是一种进行性疾病，在该疾病中，血流动力能力以及心脏本身的结构逐渐地不可避免地被损害。根据病人的症状，纽约心脏协会(NYHA)将CHF的发展分为四个机能性级别。
纽约心脏协会机能分类级别Ⅰ.病人患有心脏疾病，但不引起体力活动的限制。一般的体力活动不会产生过度疲劳、心悸、呼吸困难、或心绞痛。
Ⅱ.病人患有心脏疾病，能引起体力活动的轻微限制。他们在休息时感到舒适。一般的体力活动会产生疲劳、心悸、呼吸困难、或心绞痛。
Ⅲ.病人患有心脏疾病，能引起体力活动的显著限制。他们在休息时感到舒适。少于一般的体力活动便引起疲劳、心悸、呼吸困难、或心绞痛。
Ⅳ.病人患有心脏疾病，未感不适时无力进行任何体力活动。即使在休息时也会发生心机能不足或心绞痛并发症。如果从事任何体力活动，不适便会增加。
NYHA级别Ⅲ和Ⅳ，也就是指明显的充血性心力衰竭，通过经常服用由产生增强收缩力效果而增强心脏收缩力的化合物来进行治疗。增强心脏收缩力的供参考的化合物为口服异羟基洋地黄毒苷原。为满足机体代谢的需要，可通过服用影响肌体收缩力而增加CO的方法治疗明显的CHF症状，从而提高CHF病人的生命力，这是因为心脏能更好地满足机体代谢的需要。然而，常规知识表明，因为收缩力作用使心脏产生额外的工作负荷，所以影响肌体收缩力的药物如洋地黄增加了死亡率。更进一步，洋地黄的疗效与毒性剂量之比率很窄，而且在早于NYHA机能分类级别Ⅲ时服用洋地黄可能是不谨重的。
另外，二吡啶影响肌体收缩力的药物，二联吡啶酮，已经显示出加重心室心律失常，而且可能会增加死亡率。可见于DiBianco，R.等人，“A Comparison of Oral Milrinone，Digoxin，and Their Combination in the Treatment of Patients with Chronic Heart Failure”，N.Engl.J.Med.320677(1989)。
这里使用的述语“血流动力的”指的是心脏的力学性能。心力衰竭的初期血流动力结果是血液的冲程量下降，该冲程量是每次心跳排出血液量的量度。这样，心脏需得到补偿以增加CO来维持血液流向生命器官。当心力衰竭加重时，心内填充压力以及肺部压力和静脉压力都将升高。心力逐渐不能提供所需的CO。
这里使用的述语“结构损伤”指的是CHF患者的心脏中的微观和宏观变化。在结构上，发生了下列微观水平上的变化心脏肥大的早期形态特征是，肌原纤维和线粒体的体积增大，而且线粒体和细胞核肿大。肌肉细胞比正常偏大，但细胞组织受到了大大地保护。在肥大的更高发展阶段，由病菌引起的细胞器如线粒体的体积和数量优先增加，而且在细胞局部面积上，新的有收缩力的单元无规则的增加，这些导致了细胞组织和外形的微妙的畸形。相邻细胞的肿大程度可能会不同。在此阶段服用14-氨基甾族化合物可以减缓以心脏持续肥大为特征的心肌上移位性纤维变性的不可避免的沉积。
持续肥大的细胞在其细胞组织上显示出更明显的紊乱，如细胞核显著地肿大并分成许多小叶膜，因此，邻近肌原纤维移位并破坏了正常Z-带区域。线粒体的早期优先增加被占优势的纤维变性量所取代。肥大后期的特征是细胞死亡及失去收缩力单元和Z带被显著破坏、肌节的正常并行分布严重破坏、T形子管的曲折膨胀并增加、以及具有纤维组织的收缩力单元移位。可见于Braunwald，Heart DiseaseA Textbook of Cardiovascular Medicine，Vol.1(3rd ed.1988)。这些微观变化在宏观上表现为心脏肥大或心脏肿大。由于微观变化引起了收缩力单元损失和纤维沉积，所以肥大心脏的心功能变差，而且当病人通过各个NYHA机能分类发展时，其临床症状将会加重。
本发明的化合物通过减缓与CHF有关的心肌结构损伤而改变CHF的发展。主治医生可根据服药方式、CHF的严重性和治疗期限确定剂量范围为每天0.001mg到5mg/Kg之间。在优选的服药方法中，人体心肌中移位性纤维变性的沉积速率可得到减缓。为了减缓与CHF有关的结构损伤的发展，优选的服药方式为口服，因为口服可进行长期治疗。
因为化合物的效力处于细胞水平，所以尽管没有广泛采用，但心肌内膜的活组织检查是一种监视与CHF有关的结构损伤减缓的有效诊断工具。一般可见于Braunwald，Heart DiseaseA Textbook of Cardiovascular Medicine，Vol.(3rd ed.1988)，Chung，E.K.，Quick Reference to Cardiovascular Disease，第27章(2d ed.1983)和Fowler，N.O.，Cardiac Diagnosis and Treatment，第12章(2d ed.1976)。14-氨基甾族化合物减缓与CHF有关的结构损伤发展的效力是通过下列未侵入性诊断工具(但并不限于此)进行更广泛的监视的超声波心动描记术和放射照相术确定左心室肥大是否正在被减缓。这种宏观的改善可表明单个心细胞的微观操作的减缓。一般可见于Braunwald，Heart DiseaseA Textbook of Cardiovascular Medicine，Vol.(3rd ed.1988)，Chung，E.K.，Quick Reference to Cardiovascular Disease，第27章(2d ed.1983)和Fowler，N.O.，Cardac Diagnosis and Treatment，第12章(2d ed.1976)。另外，化合物减缓CHF结构发展的效力可通过评估病人的症状进行监视。当结构损伤被减缓时，病人将感到症状不太严重并且不会按NYHA机能分类那样快速发展。一般可见于Braunwald，Heart DiseaseA Textbook of Cardiovascular Medicine，Vol.(3rd ed.1988)，Chung，E.K.，Quick Reference to Cardiovascular Disease，第27章(2d ed.1983)和Fowler，N.O.，Cardiac Diagnosis and Treatment，第12章(2d ed.1976)。
为了阐明这些独特的14-氨基甾族化合物的特殊效用，提供了下列非限定性实施例。
例1根据本发明制备的即释口服药剂形式包括成分 量(mg)(3β，5β，14β，17β)-14- 1.0mg氨基-3-[(6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基)羟基]雄甾烷-17-羧酸甲酯微晶纤维素 70.0mg乳糖 30.0mgcrospovidone 3.0mg硬脂酸镁 0.3mg制备方法(对10，000片)1)将10.0g药剂、700.0g微晶纤维素、300.0g乳糖和30.0g crospovidone在Patterson-Kelly或其它适合的掺合器中混合。
2)在适当的掺合器中将上述混合物与3.0g的硬脂酸镁混合。
3)将上述最终混合物用适当的压片机压制成104.3mg的药片。
一位病人患有严重CHF(NYHA Ⅳ)，该病继发于慢性高血压、糖尿病和几种轻微的心肌梗塞。病人的症状包括不能直立、呼吸困难、四肢端部浮肿以及不能进行甚至有限的锻炼。病人正经历着频率不断加快的急性心力衰竭发作，而且最近十五周内三次急救住院。病人服用了标准摄入量的利尿药、地高辛以及ACE-抑制血管舒张药。但病症没有得到充分缓解。心脏病医生使病人从服用地高辛改为口服(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-[(6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基)氧]雄甾烷-17-羧酸甲酯，按上述组合物口服，剂量为每天1mg。病人的症状显著减轻，生活的本领相应提高。在由地高辛改服(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-[(6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基)氧]雄甾烷-17-羧酸甲酯之后14天内，浮肿消退，病人不再显示出不能直立。超声波心动描记分析表明，血液排出分数由18%提高到42%。一个月之后，病人能自己下床并能进行日常生活的简单功能性活动，如去卫生间和吃饭。一年之后患严重CHF病人的平均死亡率为50%，然而，采用本发明的疗法，该病人仍然活着，他们的CHF两年后得到了控制。
例2根据本发明制备的非肠道给药剂量形式包括成分 量(mg/ml)(3β，5β，14β，20R)-14- 1.0mg氨基-20-羟基孕甾烷-3-基-6-脱氧-α-L吡喃甘露糖苷甘露糖醇 200.0mg制备方法(对1000瓶)1)将1.0g药剂和200.0g甘露糖醇溶解在1200.0ml的去离子水中。
2)将上述溶液通过0.22微米孔径的无菌膜过滤器过滤。
3)将1.2ml上述无菌溶液注入Ⅰ型玻璃小瓶中，然后在适当的冻干器中冷冻干燥。
4)在冷冻干燥后，小瓶用氯丁橡胶或其它适合的塞子塞住并封口。
一位抱怨疲劳的病人，经详细身体检查后确认患有轻度CHF(NYHA Ⅱ)。该病人具有冠状局部缺血病史，因此冠状动脉粥样硬化。核心室造影术表明具有重复扩散性心肌梗塞病史。胸腔X-光显示出一轻微扩大的左心室，而且核心室造影术表明其血液排出分数为32%。该病人被开了利尿药和(3β，5β，14β，20R)-14-氨基-20-羟基孕甾烷-3-基6-脱氧-α-L吡喃甘露糖苷药方，并以每天1.0mg的剂量将上述组合物溶于盐水中以皮下注射方式给药，而且要求在六个星期内病症充分减缓。从初步诊断的结果来看，服用利尿药、地高辛和血管舒张药的病人的病情不断恶化，而且需要急救住院的急性代偿失调周期性发作，五年内的平均死亡率为50%。心脏组织检查表明，当疾病发展时，心肌细胞死亡的数量不断增加并被疤痕组织代替。这位病人在被诊断患有现在认为是中等(NYHA Ⅲ)CHF的五年后死于一次交通事故。到目前为止。一般的病人都将发展到严重CHF(NYHA Ⅳ)。但是，服用这种(3β，5β，14β，20R)-14-氨基-20-羟基孕甾烷-3-基6-脱氧-α-L吡喃甘露糖苷治疗的病人的尸检表明，患CHF五年的病人的细胞死亡及移位性纤维变性(＜30%)的速率大大减慢。五年之后，人们可以预计，多于50%的心肌会被疤痕组织代替。
例3根据本发明制备的舌下药剂形式包括成分 量(mg)(3β，5β，14β，17β)-14-氨基 0.5mg[(6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基)氧]雄甾烷-4-烯-17-羧酸甲酯乳糖 35.0mg蔗糖 1.5mg醇-水(60∶40) 适量制备方法1)筛选5.0g药剂、350g乳糖和15.0g蔗糖，在适合的掺合器中混合。
2)加入适量的醇-水(60∶40)溶液浸湿上述混合物。
3)将上述湿润的混合物置于药片的模具中，并在热空气炉上干燥。
4)重量37mg的干燥药片从模具中取出，包装待用。
一位病人被诊断为NYHA中等Ⅲ级患者，其血液排出分数低于35%，运动的能力有限，超声波心动描记术或胸透X-光表明心室肿大，而且肺毛细边缘压力大于25mmHg。病人起初用利尿药、血管舒张药和地高辛标准疗法治疗。当标准疗法证明无效时，病人被改服(3β，14β，17β)-14-氨基-3-[(6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基)氧]雄甾烷-4-烯-17-羧酸甲酯，并以舌下方式服用，上述组合物的剂量为每天0.5mg。在利用(3β，14β，17β)-14-氨基-3-[(6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基)氧]雄甾烷-4-烯-17-羧酸甲酯治疗三个月后进行心肌内膜活组织检查。该病人纤维组织沉积和收缩力单元的损失比预期的要少。作为减缓与CHF有关的结构损伤的结果，这位病人由NYHA中等Ⅲ级症状向Ⅳ级症状的发展减慢了。
权利要求
1.14-氨基甾族化合物及其酸盐在制备一种能减慢患有CHF人体中的心肌结构损伤的发展的药剂中的应用，其特征在于将具如下通式的安全有效量的所述14-氨基甾族化合物给予患者
其中a)R1为(ⅰ)COOR5，其中R5为含1至4个碳原子的低级烷基，被氨基取代了的含2至4个碳原子的低级烷基，或含6至12个碳原子的芳烷基，或(ⅱ)CHR6OH，其中R6为氢原子或含1至4个碳原子的低级烷基；b)R2为-NR7R8，其中R7和R8可以相同或不同，它们是氢原子或含1至4个碳原子的低级烷基；c)R3为(ⅰ)单糖糖残基，其中
R9为氢原子、羟基、或乙酸基，R10为羟基或乙酸基，或R9和R10一起形成二价的亚烷二氧基，R11代表羟基、甲氧基、或乙酸基，以及R12为甲基或羟基-甲基基团，或(ⅱ)OH；d)R4为(ⅰ)OH，或(ⅱ)H，或(ⅲ)OR13，其中R13为所述单糖糖残基；e)Z为(ⅰ)-CH-，其中a和b为单键，或(ⅱ)=C，其中或者a或者b为双键。
2.根据权利要求1中14-氨基甾族化合物的应用，其特征在于R1为COOR5，R2为-NR7R8，R3为单糖糖残基;优选地，R1、R2和R3基团均在β构型上，R4为OH或H，Z为CH，其中a和b为单键，或Z为＝C，其中双键位于甾核的位置a或b上，以及R5为含1至4个碳原子的低级烷基;优选地为甲基或乙基，或为被氨基取代了的含2至4个碳原子的低级烷基，或为含6至12个碳原子的芳烷基，R7和R8可以相同或不同，它们为氢原子或含1至4个碳原子的低级烷基，R9为氢原子、羟基、或乙酸基;优选地为羟基，R10为羟基或乙酸基;优选地为羟基，或者R9和R10一起形成二价亚烷二氧基;优选地R9和R10相结合而形成亚烷基部分中含1至4个碳原子的亚烷二氧基基团，R11代表羟基、甲氧基、或乙酸基;优选地为羟基，以及R12为甲基或羟基甲基。
3.根据权利要求2中14-氨基甾族化合物的应用，其特征在于所述的14-氨基甾族化合物选自下列一组物质(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-[(6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基)氧]雄甾烷-17-羧酸，甲酯;(3β，5β，14β，17β)-14-甲基氨基-3-[(6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基)氧]雄甾烷-17-羧酸，甲酯和(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-[(6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基)氧]雄甾-4-烯-17-羧酸，甲酯;(3β，5β，14β，20R)-14-氨基-20-羟基孕甾烷-3-基6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖苷及其20S异构体。
4.根据权利要求1中14-氨基甾族化合物的应用，其特征在于R1为CHR6OH，R2为NH2，Z为CH，以及R4为H或OH。
5.根据权利要求4中14-氨基甾族化合物的应用，其特征在于R3为OH。
6.根据权利要求5中14-氨基甾族化合物的应用，其特征在于R6为氢原子或甲基。
7.根据权利要求4中14-氨基甾族化合物的应用，其特征在于R3为单糖糖残基;优选地R3为被取代或未被取代的戊糖、己糖、葡萄糖、鼠李糖、半乳糖或洋地黄毒糖的残基。
8.根据权利要求7中14-氨基甾族化合物的应用，其特征在于R6代表氢原子或甲基。
9.根据权利要求7中14-氨基甾族化合物的应用，其特征在于所述的14-氨基甾族化合物选自下列一组物质(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-17-(羟基甲基)雄甾烷-3-基6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖苷;(3β，5β，14β，20S)-14-氨基-20-羟基孕甾烷-3-基6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖苷及其20R异构体;(3β，5β，14β，20S)-14-氨基-20-羟基孕甾烷-3-基2，6-二脱氧-β-D-核-己吡喃糖苷及其20R异构体;(3β，5β，14β，20S)-14-氨基-20-羟基孕甾烷-3-基4-氨基-2，4，6-三脱氧-α-L-来苏-己吡喃糖苷及其20R异构体;(3β，5β，12β，14β，17β)-14-氨基-12-羟基-17-(羟基甲基)雄甾烷-3-基6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖苷;(3β，5β，12β，14β，20β)-14-氨基-12，20-二羟基孕甾烷-3-基6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖苷及其20S异构体;3β，5β，12β，14β，20S)-14-氨基-12，20-二羟基孕甾烷-3-基，2，6-二脱氧-β-D-核-己吡喃甘露糖苷及其20R异构体;(3β，5β，12β，14β，20R)-14-氨基-20-羟基孕甾烷-3，12-二基双[6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖苷]及其20S异构体。
全文摘要
本发明是关于一种减缓患有CHF人体中心肌结构损伤发展速率的方法，该方法包括将具有如下通式的安全有效量的14-氨基甾族化合物给予所述患者其中各取代基定义如说明书中所述。优选地，14-氨基甾族化合物以含14-氨基甾族化合物和一种药物上能接受的载体的药物组合物服用。
文档编号C07J3/00GK1089268SQ9310032
公开日1994年7月13日 申请日期1993年1月2日 优先权日1993年1月2日
发明者B·M·哈尔普林 申请人:普罗格特甘布尔药品有限公司
技术领域：
本发明是关于14-氨基甾族化合物在减缓充血性心力衰竭(CHF)心肌结构损伤特性的发展速度方面的新用途。
CHF是一种进行性疾病，心力逐渐不能提供足够的心脏输出(CO)以输送充氧血液到末梢组织，所述心脏输出就是心脏每次泵送的血液体积。在心力衰竭的初期，身体的其余部位补偿CO的损失，这种补偿过程最终导致人们熟知的CHF并发症。随着CHF的发展，结构及血液动力损伤就发生了。这种结构损伤在心肌层上宏观地表现为心室肥大，在心室壁上微观地表现为间质性血管周移位性纤维变性、心肌毛细密度下降及心肌细胞死亡。当心肌组织纤维变性发生时，因为剩余存活心肌细胞的工作负荷加大，故损害心脏功能。
在血流动力学上，衰竭心脏在收缩期(心脏循环中血液从心室排出期)产生压力的能力减小。这样，为了完成任何给定的外部功，需要更大的未期舒张量(在心脏循环的舒张过程中，血液充入心室中)。在心脏衰竭中，由作功能与载荷失谐形成的降低了的血液排出会导致未期舒张压力及肺的毛细压力升高。紧接着常会发生肺充血和未梢水肿。由病人的观点可知，当CHF发展时，病人将经历逐渐恶化的疲劳和呼吸困难症状。
如果可能的话，CHF的有效治疗方法需要确定其病源，因为有些CHF病源具有其独特的治疗方式。CHF具有大量的病源，包括心肌疾病，如冠状动脉疾病或心肌炎;瓣膜疾病，如僧帽状瓣膜下垂或主动脉瓣狭窄;心包疾病;充血性心力疾病;肺病，心律不齐，高血压，以及糖尿病。例如，如果CHF的病源是心肌炎或心律不齐，那么分别利用消炎药或抗心律失常药治疗可以使病人的心功能恢复正常。
但是，一旦排除了与其他治疗方法不相适的病源，即可开始进行下列三种形式的治疗方法中的一种或多种1)通过服用影响肌体收缩力的药物以提高心脏的泵送能力，如洋地黄，2)通过休息和/或服用血管舒张药以降低心脏工作负荷，如甲巯丙脯酸，和3)通过低钠饮食或服用利尿药以控制钠和水的潴留，如氯苯并噻二嗪磺酰胺二氧化物。根据病人的病状及对一定药物的耐药量，CHF的治疗很个别。例如，有些病人对产生洋地黄毒性的趋向很强，而另一些具有轻微症状的病人则得益于利尿药，此药具有更大的治疗指数。再者，目前的贤明人士建议利尿药适合于最严重的CHF治疗，而且还建议先用利尿药治疗，接着用血管舒张药和洋地黄治疗。人们还注意到洋地黄对患有严重CHF的病人最有效。一般可见，Braunwald，Heart DiseaseA Textbook of Cardiovascular Medicine Vol.(3rded.1988)，Chung，E.K.，Quick Reference to Cardiovascular Disease，Chapter 27(2d ed.1983)和Fowler，N.O.，Cardiac Diagnosis and Treatment，Chapter12(2d ed.1976)。
目前的CHF治疗仅限于改善与CHF的血流动力学问题有关的症状。尽管洋地黄对改善与严重CHF的血流动力学问题有关的症状有用，但实际上其低治疗指数限制了其治疗应用。一般可见，Braunwald，Heart DiseaseA Textbook of Cardiovascular Medicine Vol.(3rd ed.1988)，Chung，E.K.，Quick Reference to Cardiovascular Disease，Chapter 27(2d ed.1983)，Fowler，N.O.，Cardic Diagnosis and Treatment，Chapter 12(2d ed.1976)和Goodman和Gilman，The Pharmacological Basis of Therapeutics，Chapter 34(8th ed.，1990)。
已知治疗血流动力学问题疗法的毒性问题，故需要一种能改善与CHF有关的心肌结构损伤的化合物。尽管洋地黄具有毒性问题，但是对能够减缓CHF发展时结构病状的化合物研究仍然是从影响肌体收缩力的洋地黄开始的。可见于Williams J.F.和Braunwald，E.，“Studies on Digitalis-Effects of Digitoxin on the Development of Cardiac Hypertrophy in the Rat Subjected to Aortic Constriction”，16Am.J.Cardiol.534(1965)(下文称Willioms和Braunwald)。Williams和Braunwald的结论是，在主动脉狭窄之前和之后服用洋地黄毒苷可以认为是对心脏施加了保护作用，这是由于该药消除了由长期负荷引起的心室肥大。然而，Williams和Braunwald的研究从没有证实洋地黄毒苷能够减缓心肌移位性纤维变性的速率。
正如本领域技术人员所知，在医学教课书中还公开了洋地黄处理“能够降低心脏疾病的发展速率”。可见于Goodman和Gilman，The Pharmacological Basis of Therapeutics，Chapter 34，(8thed.，1990)(下文称Goodman和Cilman)。但是，采用洋地黄降低CHF的发展速率仍然存疑。为了确定是萘心安还是异羟基洋地黄毒苷能够保护火鸡以免左心室膨胀，另外，研究者比较了异羟基洋地黄毒苷和萘心安，研究的结果是萘心安，而不是异羟基洋地黄毒苷，能预防左心室膨胀。可见Gwathmey，J.和Hamlin，R.，“Protection of Turkeys Against Furazolidone Induced Cardiomyopathy”Am.J.Cardiol.52626(1983)。
采用洋地黄减缓CHF的发展的可疑性以及其毒性问题激发研究者们去研制更安全的作用于心脏的化合物。下列专利描述了含对心脏速效的甾核化合物。1987年7月16日出版的Chiodini等人的世界专利公报WO87/04167描述了氨基配糖甾族衍生物，其位置3由氨基-糖基取代及位置14由乙缩醛连接。该公报指出此化合物对治疗高血压有用。1990年8月17日出版的Guina的法国专利2，642，973描述了一种与洋地黄类似的化合物，2，3-二氧甲基-6-甲基-3-β-D-葡萄糖-毒毛旋花苷，该化合物含甾核，其位置3由葡萄糖部分取代，位置17由内酯部分取代及位置14由羟基取代。此专利指出该化合物可用在预防由心力不足引起的病症上，也可用于预防由动脉钙化高血压引起的病症，心力不足引起的病症可服用洋地黄。Guina化合物还被声称是增强肌体收缩力的药物、未梢血管舒张剂及抗心律失常药。但是，不管是Chiodini还是Guina都没有公开一种能减缓与CHF有关的结构损伤发展的化合物。
另外，血管紧张肽转变酶抑制剂(ACEI)已显示出通过改善血流动力症状可降低CHF病人的死亡率。然而，服用ACEI并没有显示出能够减缓心肌层移位性纤维变性的沉积从而减缓与CHF有关的结构损伤的扩展。可见于Nicklas，J.M.和Pitt，B.，等人(SOLVD研究人员)“Effect of Enalapril on Surviual in Patients with Reduced Left Ventricular Ejection Fractions and Congestive Heart Failure”，N，Engl.J.Med.325(5)293(1991)。
清楚地，现有技术没有公开一种能够减缓与CHF有关的结构损伤发展的化合物。四百万人患有CHF及诊断CHF后五年内的死亡率男性为60%、女性为45%的事实表明当前改善血流动力障碍的疗法并不能减缓无情的CHF并发症的结构症状。可见于Parmley，W.W.，“Pathphysiology and Current Therapy of Congesfive Heart Failure”，J.Am.Col.Cardiol.13771-785(1989)。因此，本发明提供了一种减缓与CHF有关的结构损伤不可避免发展的新的治疗方法。
人们已经使用发现，服用一定的14-氨基甾族化合物可通过减缓心肌上间质性血管周移位性纤维变性的沉积从而减缓与CHF有关的结构畸形的发展。在下列三篇专利中描述了14-氨基甾族化合物，这里将它们引作参考1985年11月12日出版的Jarreau等人的美国专利4，552，868;1986年4月22日出版的Jarreau等人的美国4，584，289;1989年12月5日出版的Jarreau等人的美国专利4，885，280。这三篇专利描述了具有增强肌体收缩力作用的14-氨基甾族化合物。但是，从来没有人建议这些14-氨基甾族化合物能够改变与CHF有关的结构损伤的发展。本发明的化合物不仅能影响肌体的收缩力，而且当CHF发展时还能减缓结构损伤，正如心肌上移位性纤维变性量减少所表明的那样。心肌移位性纤维变性的减少表明心肌细胞死亡较少。此外，本发明的化合物可在CHF早期安全服用，其毒性比洋地黄大大减小。因此，如果CHF的发展减缓，那么对于严重病症的大量药物，如血管舒张剂、利尿药及其他纯影响肌体收缩力的药物或手术均要减少。
本发明是关于减缓以患有CHF的人为对象的心肌结构损伤的发展速度之方法，该方法包括所述对象服用具有如下通式的安全有效剂量的14-氨基甾族化合物或其酸盐
其中a)R1为(ⅰ)COOR5，其中R5为含1至4个碳原子的低级烷基、被氨基取代了的含2至4个碳原子的低级烷基、或含6至12个碳原子的芳烷基，或(ⅱ)CHR6OH，其中R6为氢原子或含1至4个碳原子的低级烷基;
b)R2为-NR7R8，其中R7和R8可以相同也可不同，它们是氢原子或含1至4个碳原子的低级烷基;
c)R3为(ⅰ)单糖糖残基，其中
R9为氢原子、羟基、或乙酸基，R10为羟基或乙酸基，或R9和R10一起形成二价亚烷二氧基，R11代表羟基、甲氧基、或乙酸基，以及R12为甲基或羟基-甲基，或(ⅱ)OH;
d)R4为(ⅰ)OH，或(ⅱ)H，或(ⅲ)OR13，其中R13为所述的单糖糖残基;
e)Z为(ⅰ)-CH-，其中a和b为单键，或(ⅱ)＝C，其中或者a或者b为双键。
14-氨基甾族化合物优选地以含14-氨基甾族化合物和药学上能接受的载体的药物组合物的形式服用。
本发明提供了一种减缓与CHF有关的心肌结构损伤的发展速度的方法，该方法包括服用14-氨基甾族化合物。
活性物质本发明的方法包括服用14-氨基甾族化合物。14-氨基甾族化合物包括具有如下通式的一种或多种化合物
其中a)R1为(ⅰ)COOR5，其中R5为含1至4个碳原子的低级烷基，优选地为甲基或乙基，或为被氨基取代的含2至4个碳原子的低级烷基，从而形成2-氨基乙基、3-氨基丙基，或为含6至12个碳原子的芳烷基，优选地为苯基、苯甲基或甲苯基，或(ⅱ)CHR6OH，其中R6为氢原子或含1至4个碳原子的低级烷基;优选地为甲基;
b)R2为-NR7R8，其中R7和R8可以相同也可不同，它们是氢原子或含1至4个碳原子的低级烷基;优选地为甲基;
c)R3为(ⅰ)单糖糖残基，其中
R9为氢原子、羟基、或乙酸基，优选地为羟基，R10为羟基或乙酸基，优选地为羟基，或R9和R10一起形成二价的亚烷二氧基，如亚甲基二氧基、亚乙基二氧基或异亚丙基二氧基，R11代表羟基、甲氧基、或乙酸基，优选地为羟基，以及R12为甲基或羟基-甲基，或(ⅱ)OH;
d)R4为(ⅰ)OH，或(ⅱ)H，或(ⅲ)OR13，其中R13为所述单糖糖残基;
e)Z为(ⅰ)-CH-，其中a和b为单键，或(ⅱ)＝C，其中或者a或者b为双键。
一组优选的化合物是14-氨基甾族化合物，其中R1为CHR6OH，R2为NH2，R3为单糖糖残基，R4为OH或H，Z为CH，其中a和b为单键。特别地，优选的化合物有(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-17-(羟基甲基)雄甾烷-3-基6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖苷;(3β，5β，14β，20S)-14-氨基-20-羟基孕甾烷-3-基6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖苷及其20R异构体;(3β，5β，14β，20S)-14-氨基-20-羟基孕甾烷-3-基2，6-二脱氧-β-D-核-己吡喃糖苷及其20R异构体;(3β，5β，14β，20S)-14-氨基-20-羟基孕甾烷-3-基4-氨基-2，4，6-三脱氧-α-L-来苏-己吡喃糖苷及其20R异构体;(3β，5β，12β，14β，17β)-14-氨基-12-羟基-17-(羟基甲基)雄甾烷-3-基6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖苷;(3β，5β，12β，14β，20R)-14-氨基-12，20-二羟基孕甾烷-3-基6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖苷及其20S异构体;(3β，5β，12β，14β，20S)-14-氨基-12，20-二羟基孕甾烷-3-基，2，6-二脱氧-β-D-核-己吡喃甘露糖苷及其20R异构体;(3β，5β，12β，14β，20R)-14-氨基-20-羟基孕甾烷-3，12-二基双[6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖苷]及其20S异构体。这些化合物及其合成方法公开在1985年11月12日出版的Jarreau等人的美国专利4，552，868中，该文献在此引作参考。
另一组优选的化合物是14-氨基甾族化合物，其R3为OH基团。R3为OH基团的特殊化合物有(3β，5β，12β，14β，20R)-14-氨基-孕甾烷-3，12，20-三醇及其20S异构体和(3β，5β，12β，14β，17β)-14-氨基-3，12-二羟基-雄甾烷-17-甲醇。这些化合物及其合成方法公开在1986年4月22日出版的Jarreau等人的美国专利4，584，289中，该文献在此引作参考。
特别优选的化合物是14-氨基甾族化合物，其R1为COOR5，其中R5为含1至4个碳原子的低级烷基、被氨基取代了的含2至4个碳原子的低级烷基、或含6至12个碳原子的芳烷基，R2为NR7R8，其中R7和R8可以相同也可不同，它们均是氢原子或含1至4个碳原子的低级烷基，以及R3为单糖糖残基，而且R1、R2和R3位于药理学上最活泼的β位置。R4或者是-OH或者是H。Z可以是-CH，其中a和b为单键，或者是＝C，其中双键位于甾核上位置a或b上。尤其特别优选的化合物有(3β，5β，14β，17β)-14-甲基氨基-3-[(6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基)氧]雄甾烷-17-羧酸，甲酯;(3β，14β，17β)-14-氨基-3-[(6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基)氧]雄甾烷-4-烯-17-羧酸，甲酯;(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-[(6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基)氧]雄甾烷-17-羧酸，甲酯和(3β，5β，14β，20R)-14-氨基-20-羟基孕甾烷-3-基-6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖苷及其20S异构体。这些化合物及其制造方法公开在1989年12月5日出版的Jarreau等人的美国专利4，885，280中，该文献在此引作参考。
组合物本发明的化合物是以药物组合物的形式服用，该组合物包含一种安全有效量的14-氨基甾族化合物活性组分和一种药物上可接受的载体。
这里使用的“安全有效量”短语的意思是在正常的医学判断范围内，化合物或组合物的量高到足以使所治疗的症状和/或疾病得到显著的积极改善，低到足以避免严重的副作用(合理的利益/危险比)。本发明的方法中所用的安全有效量的活性组分随着接受治疗的病人的年龄和体质条件、疾病的严重程度、治疗的期限、共同疗法的性质、所使用的药物上能接受的特定赋形剂、以及在主治医师知识和专业范围内的类似因素的变化而变化。
本发明的组合物以单位剂量形式提供为优选。正如在此所用的，“单位剂量形式”是指本发明的组合物含有一定量的14-氨基甾族化合物，该量适于以单一剂量按良好的医学惯例给予人体。优选地，这些组合物含大约0.001mg(毫克)至约5mg 14-氨基甾族化合物，更优选地含约0.01mg至约2.0mg。
本发明的组合物可以是任何一种形式，适合于(例如)口服、舌下、颊腔、直肠、局部、吸入或非肠道给药或者以皮下植入方式给药。根据特殊给药途径的需要，可以采用大量现有技术公知的药物上能接受的载体。这些包括固体或液体的填充剂、稀释剂、水溶助长剂、表面活性剂和胶囊物质。下列文献中描述了本发明方法有用的制备剂量形式的技术和组合物，这些文献这里引作参考7Modern Pharmaceutics，第9和10章(Baker & Rhodes，editors，1979);Lieberman等人，Pharmaceutical Dosage FormsTablets(1981);和Ansel，Introdssction to Pharmaceutical Dosage Forms 2d Edition(1976)。
特别地，用于全身性给药可接受的载体包括糖、淀粉、纤维素及其衍生物、麦芽、明胶、滑石、硫酸钙、植物油、合成油、多元醇、藻酸、磷酸缓冲剂、乳化剂，等渗盐水、和无热原水。用于非肠道服药的优选载体包括丙二醇、油酸乙酯、吡咯烷酮、乙醇及芝麻油。优选地，在非肠道服药的组合物中，药物上能接受的载体含量至少为组合物总重量的大约95%。
可采用的口服剂型有多种，包括固体剂型，如片剂、胶囊剂、颗粒剂和大量粉剂。这些口服剂型包含有安全有效量14-氨基甾族化合物，优选的含量约从0.5mg到2.0mg。更优选的口服剂型含1.0mg14-氨基甾族化合物。片剂可以是压制片、研制片、肠溶衣片、糖衣片、薄膜衣片、或多层压制片，它们含有适当的粘合剂、润滑剂、稀释剂、崩解剂、着色剂、香味剂、引流剂、及助熔剂。液体口服剂型包括水溶液、乳浊液、悬浊液、由非泡腾颗粒重组的溶液和/或悬浊液、及由泡腾颗粒重组的泡腾制剂，它们包含合适的溶剂、防腐剂、乳化剂、悬浮剂、稀释剂、甜味剂、助熔剂、着色剂及香味剂。适用于口服的优选载体包括明胶、丙二醇、棉子油及芝麻油。
本发明的组合物也可局部给予受体，即通过直接将组合物敷于或喷于受体的表皮或上皮组织上。这种组合物包括，例如，洗剂，霜剂、溶液剂、胶剂和固体制剂。这些局部使用的组合物包含安全有效量14-氨基甾族化合物，优选的含量约为0.5mg到2.0mg。更优选的局部使用的组合物含1.0mg的14-氨基甾族化合物。局部施用的合适载体优选地以连续膜形式保留在皮肤的位置上，并阻止由出汗或在水中浸渍而被除去。一般地，此载体本质是有机的和能够分散或溶解14-氨基甾族化合物的物质。该载体可以包括药物上能够接受的润肤剂、乳化剂、增稠剂和溶剂。
本发明的组合物也可通过吸入的途径给药。此组合物被制备成一种基质，该基质包含一种溶剂，如水或乙二醇，还包含防腐剂如羟苯甲酸甲酯或丙酯，以及喷射剂如氮气或二氧化碳。
另外，本发明的组合物能够通过由硅氧烷弹性体、乙烯乙酸乙烯酯的共聚物或乳酸-乙二醇的共聚物所构成的皮下植入剂给药。
治疗方法这里使用的述语“CHF”指的是一种进行性疾病，在该疾病中，血流动力能力以及心脏本身的结构逐渐地不可避免地被损害。根据病人的症状，纽约心脏协会(NYHA)将CHF的发展分为四个机能性级别。
纽约心脏协会机能分类级别Ⅰ.病人患有心脏疾病，但不引起体力活动的限制。一般的体力活动不会产生过度疲劳、心悸、呼吸困难、或心绞痛。
Ⅱ.病人患有心脏疾病，能引起体力活动的轻微限制。他们在休息时感到舒适。一般的体力活动会产生疲劳、心悸、呼吸困难、或心绞痛。
Ⅲ.病人患有心脏疾病，能引起体力活动的显著限制。他们在休息时感到舒适。少于一般的体力活动便引起疲劳、心悸、呼吸困难、或心绞痛。
Ⅳ.病人患有心脏疾病，未感不适时无力进行任何体力活动。即使在休息时也会发生心机能不足或心绞痛并发症。如果从事任何体力活动，不适便会增加。
NYHA级别Ⅲ和Ⅳ，也就是指明显的充血性心力衰竭，通过经常服用由产生增强收缩力效果而增强心脏收缩力的化合物来进行治疗。增强心脏收缩力的供参考的化合物为口服异羟基洋地黄毒苷原。为满足机体代谢的需要，可通过服用影响肌体收缩力而增加CO的方法治疗明显的CHF症状，从而提高CHF病人的生命力，这是因为心脏能更好地满足机体代谢的需要。然而，常规知识表明，因为收缩力作用使心脏产生额外的工作负荷，所以影响肌体收缩力的药物如洋地黄增加了死亡率。更进一步，洋地黄的疗效与毒性剂量之比率很窄，而且在早于NYHA机能分类级别Ⅲ时服用洋地黄可能是不谨重的。
另外，二吡啶影响肌体收缩力的药物，二联吡啶酮，已经显示出加重心室心律失常，而且可能会增加死亡率。可见于DiBianco，R.等人，“A Comparison of Oral Milrinone，Digoxin，and Their Combination in the Treatment of Patients with Chronic Heart Failure”，N.Engl.J.Med.320677(1989)。
这里使用的述语“血流动力的”指的是心脏的力学性能。心力衰竭的初期血流动力结果是血液的冲程量下降，该冲程量是每次心跳排出血液量的量度。这样，心脏需得到补偿以增加CO来维持血液流向生命器官。当心力衰竭加重时，心内填充压力以及肺部压力和静脉压力都将升高。心力逐渐不能提供所需的CO。
这里使用的述语“结构损伤”指的是CHF患者的心脏中的微观和宏观变化。在结构上，发生了下列微观水平上的变化心脏肥大的早期形态特征是，肌原纤维和线粒体的体积增大，而且线粒体和细胞核肿大。肌肉细胞比正常偏大，但细胞组织受到了大大地保护。在肥大的更高发展阶段，由病菌引起的细胞器如线粒体的体积和数量优先增加，而且在细胞局部面积上，新的有收缩力的单元无规则的增加，这些导致了细胞组织和外形的微妙的畸形。相邻细胞的肿大程度可能会不同。在此阶段服用14-氨基甾族化合物可以减缓以心脏持续肥大为特征的心肌上移位性纤维变性的不可避免的沉积。
持续肥大的细胞在其细胞组织上显示出更明显的紊乱，如细胞核显著地肿大并分成许多小叶膜，因此，邻近肌原纤维移位并破坏了正常Z-带区域。线粒体的早期优先增加被占优势的纤维变性量所取代。肥大后期的特征是细胞死亡及失去收缩力单元和Z带被显著破坏、肌节的正常并行分布严重破坏、T形子管的曲折膨胀并增加、以及具有纤维组织的收缩力单元移位。可见于Braunwald，Heart DiseaseA Textbook of Cardiovascular Medicine，Vol.1(3rd ed.1988)。这些微观变化在宏观上表现为心脏肥大或心脏肿大。由于微观变化引起了收缩力单元损失和纤维沉积，所以肥大心脏的心功能变差，而且当病人通过各个NYHA机能分类发展时，其临床症状将会加重。
本发明的化合物通过减缓与CHF有关的心肌结构损伤而改变CHF的发展。主治医生可根据服药方式、CHF的严重性和治疗期限确定剂量范围为每天0.001mg到5mg/Kg之间。在优选的服药方法中，人体心肌中移位性纤维变性的沉积速率可得到减缓。为了减缓与CHF有关的结构损伤的发展，优选的服药方式为口服，因为口服可进行长期治疗。
因为化合物的效力处于细胞水平，所以尽管没有广泛采用，但心肌内膜的活组织检查是一种监视与CHF有关的结构损伤减缓的有效诊断工具。一般可见于Braunwald，Heart DiseaseA Textbook of Cardiovascular Medicine，Vol.(3rd ed.1988)，Chung，E.K.，Quick Reference to Cardiovascular Disease，第27章(2d ed.1983)和Fowler，N.O.，Cardiac Diagnosis and Treatment，第12章(2d ed.1976)。14-氨基甾族化合物减缓与CHF有关的结构损伤发展的效力是通过下列未侵入性诊断工具(但并不限于此)进行更广泛的监视的超声波心动描记术和放射照相术确定左心室肥大是否正在被减缓。这种宏观的改善可表明单个心细胞的微观操作的减缓。一般可见于Braunwald，Heart DiseaseA Textbook of Cardiovascular Medicine，Vol.(3rd ed.1988)，Chung，E.K.，Quick Reference to Cardiovascular Disease，第27章(2d ed.1983)和Fowler，N.O.，Cardac Diagnosis and Treatment，第12章(2d ed.1976)。另外，化合物减缓CHF结构发展的效力可通过评估病人的症状进行监视。当结构损伤被减缓时，病人将感到症状不太严重并且不会按NYHA机能分类那样快速发展。一般可见于Braunwald，Heart DiseaseA Textbook of Cardiovascular Medicine，Vol.(3rd ed.1988)，Chung，E.K.，Quick Reference to Cardiovascular Disease，第27章(2d ed.1983)和Fowler，N.O.，Cardiac Diagnosis and Treatment，第12章(2d ed.1976)。
为了阐明这些独特的14-氨基甾族化合物的特殊效用，提供了下列非限定性实施例。
例1根据本发明制备的即释口服药剂形式包括成分 量(mg)(3β，5β，14β，17β)-14- 1.0mg氨基-3-[(6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基)羟基]雄甾烷-17-羧酸甲酯微晶纤维素 70.0mg乳糖 30.0mgcrospovidone 3.0mg硬脂酸镁 0.3mg制备方法(对10，000片)1)将10.0g药剂、700.0g微晶纤维素、300.0g乳糖和30.0g crospovidone在Patterson-Kelly或其它适合的掺合器中混合。
2)在适当的掺合器中将上述混合物与3.0g的硬脂酸镁混合。
3)将上述最终混合物用适当的压片机压制成104.3mg的药片。
一位病人患有严重CHF(NYHA Ⅳ)，该病继发于慢性高血压、糖尿病和几种轻微的心肌梗塞。病人的症状包括不能直立、呼吸困难、四肢端部浮肿以及不能进行甚至有限的锻炼。病人正经历着频率不断加快的急性心力衰竭发作，而且最近十五周内三次急救住院。病人服用了标准摄入量的利尿药、地高辛以及ACE-抑制血管舒张药。但病症没有得到充分缓解。心脏病医生使病人从服用地高辛改为口服(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-[(6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基)氧]雄甾烷-17-羧酸甲酯，按上述组合物口服，剂量为每天1mg。病人的症状显著减轻，生活的本领相应提高。在由地高辛改服(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-[(6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基)氧]雄甾烷-17-羧酸甲酯之后14天内，浮肿消退，病人不再显示出不能直立。超声波心动描记分析表明，血液排出分数由18%提高到42%。一个月之后，病人能自己下床并能进行日常生活的简单功能性活动，如去卫生间和吃饭。一年之后患严重CHF病人的平均死亡率为50%，然而，采用本发明的疗法，该病人仍然活着，他们的CHF两年后得到了控制。
例2根据本发明制备的非肠道给药剂量形式包括成分 量(mg/ml)(3β，5β，14β，20R)-14- 1.0mg氨基-20-羟基孕甾烷-3-基-6-脱氧-α-L吡喃甘露糖苷甘露糖醇 200.0mg制备方法(对1000瓶)1)将1.0g药剂和200.0g甘露糖醇溶解在1200.0ml的去离子水中。
2)将上述溶液通过0.22微米孔径的无菌膜过滤器过滤。
3)将1.2ml上述无菌溶液注入Ⅰ型玻璃小瓶中，然后在适当的冻干器中冷冻干燥。
4)在冷冻干燥后，小瓶用氯丁橡胶或其它适合的塞子塞住并封口。
一位抱怨疲劳的病人，经详细身体检查后确认患有轻度CHF(NYHA Ⅱ)。该病人具有冠状局部缺血病史，因此冠状动脉粥样硬化。核心室造影术表明具有重复扩散性心肌梗塞病史。胸腔X-光显示出一轻微扩大的左心室，而且核心室造影术表明其血液排出分数为32%。该病人被开了利尿药和(3β，5β，14β，20R)-14-氨基-20-羟基孕甾烷-3-基6-脱氧-α-L吡喃甘露糖苷药方，并以每天1.0mg的剂量将上述组合物溶于盐水中以皮下注射方式给药，而且要求在六个星期内病症充分减缓。从初步诊断的结果来看，服用利尿药、地高辛和血管舒张药的病人的病情不断恶化，而且需要急救住院的急性代偿失调周期性发作，五年内的平均死亡率为50%。心脏组织检查表明，当疾病发展时，心肌细胞死亡的数量不断增加并被疤痕组织代替。这位病人在被诊断患有现在认为是中等(NYHA Ⅲ)CHF的五年后死于一次交通事故。到目前为止。一般的病人都将发展到严重CHF(NYHA Ⅳ)。但是，服用这种(3β，5β，14β，20R)-14-氨基-20-羟基孕甾烷-3-基6-脱氧-α-L吡喃甘露糖苷治疗的病人的尸检表明，患CHF五年的病人的细胞死亡及移位性纤维变性(＜30%)的速率大大减慢。五年之后，人们可以预计，多于50%的心肌会被疤痕组织代替。
例3根据本发明制备的舌下药剂形式包括成分 量(mg)(3β，5β，14β，17β)-14-氨基 0.5mg[(6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基)氧]雄甾烷-4-烯-17-羧酸甲酯乳糖 35.0mg蔗糖 1.5mg醇-水(60∶40) 适量制备方法1)筛选5.0g药剂、350g乳糖和15.0g蔗糖，在适合的掺合器中混合。
2)加入适量的醇-水(60∶40)溶液浸湿上述混合物。
3)将上述湿润的混合物置于药片的模具中，并在热空气炉上干燥。
4)重量37mg的干燥药片从模具中取出，包装待用。
一位病人被诊断为NYHA中等Ⅲ级患者，其血液排出分数低于35%，运动的能力有限，超声波心动描记术或胸透X-光表明心室肿大，而且肺毛细边缘压力大于25mmHg。病人起初用利尿药、血管舒张药和地高辛标准疗法治疗。当标准疗法证明无效时，病人被改服(3β，14β，17β)-14-氨基-3-[(6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基)氧]雄甾烷-4-烯-17-羧酸甲酯，并以舌下方式服用，上述组合物的剂量为每天0.5mg。在利用(3β，14β，17β)-14-氨基-3-[(6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基)氧]雄甾烷-4-烯-17-羧酸甲酯治疗三个月后进行心肌内膜活组织检查。该病人纤维组织沉积和收缩力单元的损失比预期的要少。作为减缓与CHF有关的结构损伤的结果，这位病人由NYHA中等Ⅲ级症状向Ⅳ级症状的发展减慢了。
权利要求
1.14-氨基甾族化合物及其酸盐在制备一种能减慢患有CHF人体中的心肌结构损伤的发展的药剂中的应用，其特征在于将具如下通式的安全有效量的所述14-氨基甾族化合物给予患者
其中a)R1为(ⅰ)COOR5，其中R5为含1至4个碳原子的低级烷基，被氨基取代了的含2至4个碳原子的低级烷基，或含6至12个碳原子的芳烷基，或(ⅱ)CHR6OH，其中R6为氢原子或含1至4个碳原子的低级烷基；b)R2为-NR7R8，其中R7和R8可以相同或不同，它们是氢原子或含1至4个碳原子的低级烷基；c)R3为(ⅰ)单糖糖残基，其中
R9为氢原子、羟基、或乙酸基，R10为羟基或乙酸基，或R9和R10一起形成二价的亚烷二氧基，R11代表羟基、甲氧基、或乙酸基，以及R12为甲基或羟基-甲基基团，或(ⅱ)OH；d)R4为(ⅰ)OH，或(ⅱ)H，或(ⅲ)OR13，其中R13为所述单糖糖残基；e)Z为(ⅰ)-CH-，其中a和b为单键，或(ⅱ)=C，其中或者a或者b为双键。
2.根据权利要求1中14-氨基甾族化合物的应用，其特征在于R1为COOR5，R2为-NR7R8，R3为单糖糖残基;优选地，R1、R2和R3基团均在β构型上，R4为OH或H，Z为CH，其中a和b为单键，或Z为＝C，其中双键位于甾核的位置a或b上，以及R5为含1至4个碳原子的低级烷基;优选地为甲基或乙基，或为被氨基取代了的含2至4个碳原子的低级烷基，或为含6至12个碳原子的芳烷基，R7和R8可以相同或不同，它们为氢原子或含1至4个碳原子的低级烷基，R9为氢原子、羟基、或乙酸基;优选地为羟基，R10为羟基或乙酸基;优选地为羟基，或者R9和R10一起形成二价亚烷二氧基;优选地R9和R10相结合而形成亚烷基部分中含1至4个碳原子的亚烷二氧基基团，R11代表羟基、甲氧基、或乙酸基;优选地为羟基，以及R12为甲基或羟基甲基。
3.根据权利要求2中14-氨基甾族化合物的应用，其特征在于所述的14-氨基甾族化合物选自下列一组物质(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-[(6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基)氧]雄甾烷-17-羧酸，甲酯;(3β，5β，14β，17β)-14-甲基氨基-3-[(6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基)氧]雄甾烷-17-羧酸，甲酯和(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-[(6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基)氧]雄甾-4-烯-17-羧酸，甲酯;(3β，5β，14β，20R)-14-氨基-20-羟基孕甾烷-3-基6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖苷及其20S异构体。
4.根据权利要求1中14-氨基甾族化合物的应用，其特征在于R1为CHR6OH，R2为NH2，Z为CH，以及R4为H或OH。
5.根据权利要求4中14-氨基甾族化合物的应用，其特征在于R3为OH。
6.根据权利要求5中14-氨基甾族化合物的应用，其特征在于R6为氢原子或甲基。
7.根据权利要求4中14-氨基甾族化合物的应用，其特征在于R3为单糖糖残基;优选地R3为被取代或未被取代的戊糖、己糖、葡萄糖、鼠李糖、半乳糖或洋地黄毒糖的残基。
8.根据权利要求7中14-氨基甾族化合物的应用，其特征在于R6代表氢原子或甲基。
9.根据权利要求7中14-氨基甾族化合物的应用，其特征在于所述的14-氨基甾族化合物选自下列一组物质(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-17-(羟基甲基)雄甾烷-3-基6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖苷;(3β，5β，14β，20S)-14-氨基-20-羟基孕甾烷-3-基6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖苷及其20R异构体;(3β，5β，14β，20S)-14-氨基-20-羟基孕甾烷-3-基2，6-二脱氧-β-D-核-己吡喃糖苷及其20R异构体;(3β，5β，14β，20S)-14-氨基-20-羟基孕甾烷-3-基4-氨基-2，4，6-三脱氧-α-L-来苏-己吡喃糖苷及其20R异构体;(3β，5β，12β，14β，17β)-14-氨基-12-羟基-17-(羟基甲基)雄甾烷-3-基6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖苷;(3β，5β，12β，14β，20β)-14-氨基-12，20-二羟基孕甾烷-3-基6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖苷及其20S异构体;3β，5β，12β，14β，20S)-14-氨基-12，20-二羟基孕甾烷-3-基，2，6-二脱氧-β-D-核-己吡喃甘露糖苷及其20R异构体;(3β，5β，12β，14β，20R)-14-氨基-20-羟基孕甾烷-3，12-二基双[6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖苷]及其20S异构体。
全文摘要
本发明是关于一种减缓患有CHF人体中心肌结构损伤发展速率的方法，该方法包括将具有如下通式的安全有效量的14-氨基甾族化合物给予所述患者其中各取代基定义如说明书中所述。优选地，14-氨基甾族化合物以含14-氨基甾族化合物和一种药物上能接受的载体的药物组合物服用。
文档编号C07J3/00GK1089268SQ9310032
公开日1994年7月13日 申请日期1993年1月2日 优先权日1993年1月2日
发明者B·M·哈尔普林 申请人:普罗格特甘布尔药品有限公司
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