一种抗氧化和/或延缓衰老的组合物、其应用和产品的制作方法

本发明涉及保健品
技术领域：
，尤其是涉及一种抗氧化和/或延缓衰老的组合物、其应用和产品。
背景技术：
：生命科学家们深入到细胞分子层面分析发现，人体的衰老与铁生锈的过程相似，是受氧化的结果。由于长期有氧呼吸，经过体内化合，人体代谢过程就会产生大量“自由基”的有害活跃分子，它是导致人体衰老的主要因素。它作用于皮肤便引起“锈斑”，作用于内脏器官形成类似“体锈”。年轻时在正常生理条件下，人体能清除多余的自由基，但随着年龄增长，生活压力、精神紧张、吸烟喝酒、空气污染、电磁辐射、忧郁、失眠等原因引发代谢紊乱，导致体内氧自由基过剩。人体内存在正常限度的自由基，起着维持人体平衡的作用，但是体内自由基一旦过剩，多余的自由基不断攻击细胞内的遗传物质dna，令dna所受到的氧化性损伤越积越重。正常细胞氧化后活力减小，功能衰退体内环境平衡状态遭到破坏，这便是发生衰老以及与衰老有关的退行性疾病的主要原因。人体内自由基过剩，抗氧化能力不足，会出现如下病症：皱纹、色斑、皮肤松弛、眼袋、肤色晦暗、失眠、疲劳、头晕心慌、便秘、血脂血糖升高、关节炎、感冒、中风、老年痴呆症、内分泌失调、视力退化、性功能下降、更年期提前、免疫力低下、癌症等。以色斑为例，过剩的自由基在体内以链式反应的繁殖方式，不断氧化、侵蚀着正常细胞，导致细胞代谢不通，并引起络氨酸酶活性大大升高，色素合成速度加快，色素颗粒难以正常分解排泄，不断沉积，在皮肤表面逐渐形成令人讨厌的色斑，并导致肌肤干裂。而人工合成的抗氧化剂具有一定的毒性和致癌作用。所以评价和筛选具有强抗氧化活性的天然植物已成为医学、生物学和食品科学研究的新趋势。国内学者近年证明，许多中药可以抗氧化，但不同的中草药组合对机体氧化的干扰侧重点不同，发挥的预防效果也不同，有的甚至会带来副作用，仍需要深入研究利用。中国传统医学对抗衰老的研究，有着悠久的历史和丰富的实践经验。《神农本草经》记述了有关抗衰老药物，是抗衰老药物最早最宝贵的文献。汉魏六朝至唐代，抗衰老的医药研究，进一步受到重视，大医学家孙思邈强调抗衰老应以补法、食疗为主，亦为延缓衰老做出了宝贵的贡献，直至明朝，伟大的医药学家李时珍总结了明万历以前传统抗衰老药物的经验，他所著的《本草纲目》收藏了延年益寿药物253种，还选录了延年益寿方89首。其中有些方剂至今仍被用作老年保健品，同时，他还推崇抗衰老药物亦应辨证使用和提倡用无毒动植物药，古人的经验为现代抗衰老研究提供了宝贵的资料。新中国成立后，特别自20世纪70年代以来，我国老年医学崛起，随着中医、中西医结合对老年医学研究的逐步深入，抗衰老药物的研究日益受到重视，各地医药工作者对抗衰老复方药物的研究方兴未艾。当前，我国即将步入老龄化社会，深入研究抗衰老复方药物，必将有利于我国“健康的老龄化”目标的实现。因此，如何运用传统中医思想进行中药配伍组方并提取有效成分，再运用现代科学方法深化对中药复方成分药理、剂量、剂型等方面的研究，合理配以抗衰老生化成分、抗氧化剂等，研究出一种安全、有效的抗衰老产品，是保健产品领域迫切需要解决的问题。技术实现要素：有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种抗氧化和/或延缓衰老的组合物，本发明提供的组合物具有抗氧化和/或延缓衰老的效果。本发明提供了一种抗氧化和/或延缓衰老的组合物，包括如下重量份的原料：优选的，所述组合物包括如下重量份的原料：优选的，所述组合物包括如下重量份的原料：优选的，所述番茄红素、野樱莓与白藜芦醇的重量比为1～1.5：1～1.5：1～2。优选的，所述组合物还包括辅料，所述辅料包括：酸味剂1～10重量份；甜味剂35～140重量份；润滑剂0.1～1重量份。优选的，所述酸味剂为柠檬酸；所述甜味剂为赤藓糖醇和异麦芽酮糖醇中的一种或几种；所述润滑剂为硬脂酸镁。本发明提供了上述技术方案任意一项所述的组合物在制备抗氧化和/或延缓衰老的产品中的应用。优选的，所述抗氧化和/或延缓衰老具体为：提高超氧化物歧化酶活性、降低丙二醛含量、降低衰老大脑的脂褐质含量、提高gsh-px含量和降低mao的含量中的一种或几种。本发明提供了一种抗氧化和/或延缓衰老的产品，包括上述技术方案任意一项所述的组合物。优选的，所述产品的剂型为粉剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂。与现有技术相比，本发明提供了一种抗氧化和/或延缓衰老的组合物，包括如下重量份的原料：β-烟酰胺单核苷酸12～18份；弹性蛋白3～15份；番茄红素1～10份；野樱莓8～12份；白藜芦醇3～8份。本发明通过特定组分和配比的β-烟酰胺单核苷酸、弹性蛋白、番茄红素、野樱莓和白藜芦醇的共同作用，能在细胞和分子水平刺激细胞的新陈代谢，帮助清除细胞内有害物质和突变物质。它又像一个启动信号，通过人的神经内分泌系统，使细胞的新陈代谢加强。本发明配伍合理，协同增效，本发明所提供的抗衰老保健品将在不同系统，不同器官，不同水平协同作用。同时本发明抗衰老效果明显：可以使得肌肤有弹性、皮肤光泽度增加、疲劳感减弱、体能增强、思维能力增强等。同时，本发明提供的产品具有抗氧化的功效，有利于机体的健康，适用于抗氧化能力低下者，原料中β-烟酰胺单核苷酸、弹性蛋白、番茄红素、野樱莓和白藜芦醇搭配使用，全方合理配伍，药性平和，适合更多人群长期使用。具体实施方式本发明提供了一种抗氧化和/或延缓衰老的组合物、其应用和产品，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都属于本发明保护的范围。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。本发明提供了一种抗氧化和/或延缓衰老的组合物，包括如下重量份的原料：本发明提供的一种抗氧化和/或延缓衰老的组合物，包括β-烟酰胺单核苷酸12～18重量份；优选包括13～17重量份；更优选包括14～16重量份，具体可以为14重量份、15重量份、16重量份或17重量份，还可以是上述任意两个数值之间的点值。本发明β-烟酰胺单核苷酸：在外周组织器官中，调节机体内分泌，治疗视网膜退行性疾病；改善和修复胰岛敏感性，促进胰岛素分泌，预防和控制ⅱ型糖尿病、肥胖症等代谢性疾病；保护心脏、肾脏，治疗心血管重疾和急性肾损伤；在中枢神经系统中，可以治疗脑损伤和脑卒中，修改大脑的线粒体呼吸功能缺陷。本发明提供的一种抗氧化和/或延缓衰老的组合物，包括弹性蛋白3～15重量份；优选包括4～14重量份；更优选包括5～12重量份，具体可以为5重量份、6重量份、7重量份、8重量份、9重量份、10重量份、11重量份、12重量份，还可以是上述任意两个数值之间的点值。本发明弹性蛋白是一种存在于多个结缔组织中的重要结构，是生皮组织中弹性纤维的主要成分，广泛分布于全身的脏器和组织中。弹性蛋白的肽链含有713个以上的氨基酸残基。不同于胶原和角蛋白，弹性蛋白的氨基酸序列中不存在贯穿整个肽链的连续的重复性周期结构，但是存在交替的疏水和亲水性肤段。由氧化赖氨酰形成的锁链素和开链锁链素是弹性蛋白特有的交联结构。弹性蛋白可增强肌肤弹性，改善皱纹；促进血管弹性纤维生成，增加血管弹性；促进内皮细胞增殖，改善内膜环境；同时抑制血小板增殖，抑制血栓的形成。本发明提供的一种抗氧化和/或延缓衰老的组合物，包括番茄红素1～10重量份；优选包括2～9重量份；更优选包括3～8重量份；具体可以为3重量份、4重量份、5重量份、6重量份、7重量份、8重量份。番茄红素是一种类胡萝卜素，主要存在于植物性食物中，因最早从番茄中分离制得而得名，尤以番茄、胡萝卜、西瓜、木瓜及番石榴等含量最高。研究发现，一个番茄红素分子可以猝灭上万个自由基，抗氧化能力是是β-胡萝卜素的2倍多，维生素e的100倍，维生素c的1000倍。因此，番茄红素被誉为自然界最强的延缓衰老的抗氧化剂之一，被誉为“植物黄金”；番茄红素可活化免疫细胞，保护吞噬细胞免受自身的氧化损伤，促进t、b淋巴细胞增殖，刺激效应t细胞的功能，促进某些白介素产生及抑制炎症介质生成。研究发现，中等剂量服用番茄红素，可提高人体的免疫力，减轻急性运动对机体免疫力的损害；番茄红素可深入清除血管垃圾，调节血浆胆固醇浓度，保护低密度脂蛋白(ldl)不受氧化，还可修复被氧化的细胞，促进细胞间胶质形成，增强血管柔韧度，降低动脉硬化风险及心血管疾病发生率。同时，当紫外线照射皮肤时，皮肤中的番茄红素与紫外线照射产生的自由基结合，保护皮肤组织免受破坏。大量研究证明，摄入番茄红素，可以避免紫外线照射产生红斑，对老年斑有明显的褪色作用，具有美白护肤的效果；番茄红素能显著提高谷胱甘肽过氧化物酶的活性，增强机体的免疫力和抗氧化、抗疲劳能力，延缓运动性疲劳的发生，有助于提高运动能力和快速恢复体能。被越来越多的人们，尤其是健身爱好者所熟知和喜爱，成为当今时尚的营养保健品。本发明提供的一种抗氧化和/或延缓衰老的组合物，包括野樱莓8～12重量份；优选包括野樱莓9～11重量份；更优选包括10～11重量份。黑果腺肋花楸(aroniamelanocarpa),又名野樱莓,不老莓,蔷薇科腺肋花楸属黑果腺肋花楸种，原产于北美洲东部湿树林和沼泽。野樱莓含有丰富的维生素、矿物质、抗氧化物和一些其他重要的多酚类物质。因为它的深紫色，几乎是黑色的色素沉着是来自密集的多酚含量，尤其是花青素。总多酚含量为每100克新鲜果实1752毫克，花青素含量为每100克1480毫克，而原花青素浓度为每100克664毫克。这些数值都是至今为止所有植物(含蔬菜及水果)中最高的量测值。野樱莓也含有对人体有益矿物质和维生素，即：维生素b6、b12、e、c，叶酸，奎宁酸，多酚酸，单宁，儿茶素，槲黄素，芸香素，橙皮苷等等。在抗氧化强度的标准测量中，野樱莓的氧自由基吸收能力和抗氧化能力指数是所有水果中数值最高的。本发明提供的一种抗氧化和/或延缓衰老的组合物，包括白藜芦醇3～8重量份；优选包括白藜芦醇4～7重量份；更优选包括5～6重量份。白藜芦醇在《抗衰老圣典》一书中被列为“100种最热门的有效抗衰老物质”之一,是一种具有很强生物活性的天然多酚类化合物,是由日本学者高岗1940年从白藜芦中分离出来并命名的。白藜芦醇是存在于植物中的天然抗氧化剂,主要通过清除或抑制自由基生成,抑制脂质过氧化、调节抗氧化相关酶活性等机制发挥抗氧化作用。近年来,越来越多的研究发现,白藜芦醇具有明显的抗衰老效果。现有研究显示,线粒体是介导白藜芦醇抗衰老作用的重要细胞器,白藜芦醇可通过foxo和过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(pgc-1α)等分子稳定线粒体功能。进一步研究发现,白藜芦醇只对sirt1存在的细胞发挥线粒体保护作用,敲除sirt1可明显逆转白藜芦醇对线粒体功能的保护作用。在本发明其中一部分优选实施方式中，所述组合物包括如下重量份的原料：在本发明其中一部分优选实施方式中，所述组合物包括如下重量份的原料：在本发明其中一部分优选实施方式中，所述番茄红素、野樱莓与白藜芦醇的重量比优选为1～1.5：1～1.5：1～2。按照本发明，所述组合物还包括辅料，所述辅料包括：酸味剂1～10重量份；甜味剂35～140重量份；润滑剂0.1～1重量份。本发明所述辅料包括酸味剂1～10重量份；更优选包括2～8重量份；最优选包括3～6重量份。本发明所述酸味剂为柠檬酸。本发明所述辅料优选包括甜味剂35～140重量份；更优选包括40～130重量份；最优选包括50～120重量份。本发明所述甜味剂为赤藓糖醇和异麦芽酮糖醇中的一种或几种。本发明所述辅料优选包括润滑剂0.1～1重量份；更优选0.2～0.9重量份；最优选为0.3～0.8重量份。本发明所述润滑剂为硬脂酸镁。本发明组分选择合理，尤其是β-烟酰胺单核苷酸和弹性蛋白的添加，使得本发明对抗衰老的效果得到显著提高；本发明各组分间的配比科学，尤其是将番茄红素、野樱莓与白藜芦醇的比例控制在1～1.5：1～1.5：1～2之间，可以大大提高本发明产品的抗衰老作用；配伍使用，降低单一原料成本，效果显著增加。本发明还提供了一种抗氧化和/或延缓衰老的组合物的制备方法，包括：β-烟酰胺单核苷酸、弹性蛋白、番茄红素、野樱莓和白藜芦醇混合，得到。本发明提供了一种上述抗氧化和/或延缓衰老的组合物的组分和配比上述已经有了清楚的描述，在此不再赘述。本发明提供了上述技术方案任意一项所述的组合物在制备抗氧化和/或延缓衰老的产品中的应用。本发明所述抗氧化和/或延缓衰老具体为：提高超氧化物歧化酶活性、降低丙二醛含量、降低衰老大脑的脂褐质含量、提高gsh-px含量和降低mao的含量中的一种或几种。其中，具体为提高血清中超氧化物歧化酶活性、降低血清丙二醛含量、降低d-半乳糖所致衰老大鼠衰老大脑的脂褐质含量、提高血清和脑组织中gsh-px含量和降低血清中mao的含量中的一种或几种。本发明提供了一种抗氧化和/或延缓衰老的产品，包括上述技术方案任意一项所述的组合物。本发明提供的一种抗氧化和/或延缓衰老的产品，所述产品可以为食品、保健品等。还可以包括食品或者保健品领域常规的辅料。本发明所述产品的剂型为粉剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂。本发明对于所述产品的制备方法，以及上述粉剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂的制备方法不进行限定，本领域技术人员熟知的即可。本发明提供了一种抗氧化和/或延缓衰老的组合物，包括辅料和如下重量份的原料：β-烟酰胺单核苷酸12～18份；弹性蛋白3～15份；番茄红素1～10份；野樱莓8～12份；白藜芦醇3～8份。本发明通过特定组分和配比的β-烟酰胺单核苷酸、弹性蛋白、番茄红素、野樱莓和白藜芦醇的共同作用，能在细胞和分子水平刺激细胞的新陈代谢，帮助清除细胞内有害物质和突变物质。它又像一个启动信号，通过人的神经内分泌系统，使细胞的新陈代谢加强。本发明配伍合理，协同增效，本发明所提供的抗衰老保健品将在不同系统，不同器官，不同水平协同作用。同时本发明抗衰老效果明显：可以使得肌肤有弹性、皮肤光泽度增加、疲劳感减弱、体能增强、思维能力增强等。同时，本发明提供的产品具有抗氧化的功效，有利于机体的健康，适用于抗氧化能力低下者，原料中β-烟酰胺单核苷酸、弹性蛋白、番茄红素、野樱莓和白藜芦醇搭配使用，全方合理配伍，药性平和，适合更多人群长期使用。为了进一步说明本发明，以下结合实施例对本发明提供的一种抗氧化和/或延缓衰老的组合物、其应用和产品进行详细描述。本发明所有实施例和比较例总重量一致，下述仅仅是重量份的差异。实施例1～6对比例1：与实施例2相比，不含有β-烟酰胺单核苷酸，其余不变。对比例2：与实施例2相比，不含有白藜芦醇，其余不变。对比例3：与实施例2相比，不含有野樱莓，其余不变。对比例4：与实施例2相比，不含有白藜芦醇和野樱莓，其余不变。对比例5：与实施例2相比，不含有番茄红素和白藜芦醇，其余不变。对比例6：与实施例2相比，不含有番茄红素、野樱莓和白藜芦醇，其余不变。对比例7：与实施例2相比，不含有弹性蛋白，其余不变。对比例8：与实施例2相比，不含有β-烟酰胺单核苷酸和弹性蛋白，其余不变。对比例9：β-烟酰胺单核苷酸3重量份、弹性蛋白25重量份、番茄红素30重量份、野樱莓2重量份和白藜芦醇1重量份。对比例10：β-烟酰胺单核苷酸30重量份、弹性蛋白2重量份、番茄红素20重量份、野樱莓25重量份和白藜芦醇20重量份。对比例11：β-烟酰胺单核苷酸2重量份、弹性蛋白30重量份、番茄红素25重量份、野樱莓3重量份和白藜芦醇15重量份。对比例12：β-烟酰胺单核苷酸32重量份、弹性蛋白5重量份、番茄红素23重量份、野樱莓1重量份和白藜芦醇25重量份。β-烟酰胺单核苷酸、弹性蛋白、番茄红素、野樱莓和白藜芦醇对其具体来源不做限定，市售即可。对比例13：与实施例2相比，不含有β-烟酰胺单核苷酸、弹性蛋白、番茄红素和野樱莓，其余不变。制备方法：按重量份数称取实施例1-6以及对比例1-13中的粉体混合均匀，辅以辅料制备成粉剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂。以下通过试验例具体说明本发明的有益效果。试验例1.本发明组合物抗氧化研究1.对自然老龄小鼠代谢产物和相关酶的影响1.1实验材料①动物北京种小鼠，全雄，12月龄以上，体重45～55g，6周龄少龄小鼠，全雄，平均体重19.3±1.2g。由北京实验动物研究中心提供。②药品与主要试剂a.实验药品：实施例1-6以及对比例1-13制得的保健药品。b.实验试剂：超氧化物歧化酶(sod)试剂盒，南京建成生物工程研究所；谷胱甘肽过氧化物酶(gsh－px)试剂盒，南京建成生物工程研究所；丙二醛(mda)试剂盒，南京建成生物工程研究所。③仪器7560紫外分光光度计，上海精密科学仪器有限公司；恒温水浴箱，北京国华医疗器械厂；离心机，上海安亭科学仪器厂。1.2实验方法与结果1.2.1分组与给药本实验选取12月龄的北京种小鼠200只，随机分为20组，分别为老龄鼠对照组，实施例1-6以及对比例1-13组；每组10只。另选用8周龄少龄小鼠10只，设为少龄鼠对照组。实施例1-6以及对比例1-13组均按8.0g/kg的生药量灌胃给药(相当于人体每日用量的10倍)每日1次；老龄鼠对照组和少龄鼠对照组给予等体积的生理盐水；连续给药(或生理盐水)30天。1.3血清超氧化物歧化酶(sod)活性的测定黄嘌呤及黄嘌吟氧化酶反应系统产生(02)，后者氧化羟胺形成亚硝酸盐，在显色剂作用下呈现紫红色，而sod则抑制此反应，根据抑制率的高低计算出sod含量。于停药后第2天，股动脉取血，4000转/分，离心10分钟，取血清备用。采用sod测定试剂盒，取血清30ul，依次加入试剂盒中的试剂，室温10分钟，于550nm处测od值，计算各组sod，比较各组间的差异性。结果见表1-1：表1-1对血清超氧化物歧化酶(sod)活性的影响与老龄鼠对照组相比：*p＜0.05，**p＜0.01注：本实验统计方法采用spss13.0统计软件进行方差统计分析。数据均用表示。以下实验同。结果显示，老龄鼠对照组sod活性明显低于少龄鼠对照组，差异非常显著(p<0.01)，给药各样品组的sod活性均显著高于老龄鼠对照组(p<0.05)。与对比例样品给药组相比，本发明组合物实施例样品给药组可显著升高sod活性(p<0.05)，表明本发明药物中各味药组合起到了协同增效的效果。因此，说明本发明组合物具有增强血清sod活性的作用，且有一定的量效关系。1.4血清丙二醛(mda)含量的测定机体通过酶系统和非酶系统产生氧自由基，后者能攻击生物膜中的多种不饱和脂肪酸引发脂质过氧化作用，并因此形成脂质过氧化物。过氧化脂质降解产物中的mda可与硫代巴比妥酸结合，形成红色产物。此红色产物在532nm有极大吸收峰。测试mda的量常常可反映机体内脂质过氧化的程度，间接地反映出细胞受自由基攻击的严重程度。采用丙二醛测定试剂盒，取血清0.1ml，依次加人试剂盒中的试剂，混匀，置沸水浴40分钟，取出后流水冷却，4000转/分，离心10分钟，取上清液，于532nm处测od值，计算各组mda含量，比较各组有无显著性差异。结果见表1-2：表1-2对血清丙二醛(mda)含量的影响组别mda含量(u/ml)少龄鼠对照组3.01±0.51**e老龄鼠对照组7.11±0.12a实施例1样品组3.57±0.24*d实施例2样品组2.55±0.19**e实施例3样品组3.42±0.38**d实施例4样品组3.37±0.46**d实施例5样品组3.51±0.11*d实施例6样品组3.53±0.22*d对比例1样品组5.61±0.17c对比例2样品组5.34±0.02c对比例3样品组5.01±0.08c对比例4样品组5.19±0.22c对比例5样品组5.57±0.35c对比例6样品组5.83±0.24c对比例7样品组6.28±0.19ab对比例8样品组6.37±0.36ab对比例9样品组6.15±0.27ab对比例10样品组6.89±0.52a对比例11样品组6.06±0.1abc对比例12样品组6.54±0.34ab对比例13样品组6.41±0.11ab与老龄鼠对照组相比：*p＜0.05，**p＜0.05。结果显示，老龄鼠对照组mda含量显著高于少龄鼠对照组，给药各样品组的mda含量与老龄鼠对照组比较，实施例样品给药组的mda含量显著降低。说明本发明组合物能降低血清mda含量。实验结果说明，本发明药物组合物可以提高sod活性，降低血清mda含量，具有抗氧化的作用，且效果明显优于对比例样品给药组，说明本发明组合物中各组分具有协同增效的作用。试验例2本发明组合物抗衰老研究1.对d-半乳糖所致衰老大鼠代谢产物和相关酶的影响1.1实验材料①动物sd大鼠，雌雄各半，6～7月龄，体重150～200g。由北京实验动物研究中心提供。②药品与主要试剂本实验及下方各实验中，各给药组的提取制备方法均与试验1相同，而且为同一批次。d-半乳糖，上海恒信化学试剂有限公司，用生理盐水配制成1％浓度备用；单胺氧化酶试剂盒(mao)试剂盒，南京建成生物工程研究所；脂褐质试剂盒，南京建成生物工程研究所。③仪器960crt荧光分光光度计，上海精密科学仪器有限公司。7560紫外分光光度计，上海精密科学仪器有限公司；恒温水浴箱，北京国华医疗器械厂；离心机，上海安亭科学仪器厂；dt500电子称，常熟衡器厂。1.2实验方法与结果1.2.1分组与给药本实验选取6-7月龄的sd大鼠210只，雌雄各半，体重150－200g,随机分为21组，分别为空白对照组、模型对照组、实施例1-6以及对比例1-13给药组，每组10只。实施例1-6以及对比例1-13组均按8.0g/kg的生药量灌胃给药(相当于人体每日用量的10倍)，每日1次，空白对照组和模型对照组给予同体积生理盐水(1ml/100g)，连续给药30天。1.2.2动物建模给药的同时，按照文献方法建立衰老动物模型，模型对照组和给药组每天均颈背部皮下注射1％d-半乳糖注射液50mg/kg，空白对照组每天在颈背部皮下注射等量的生理盐水，连续注射30天。1.2.3大脑脂褐质(lpf)含量的测定(荧光法)过氧化脂质的代谢产物丙二醛与氨基酸、核酸、蛋白质和磷脂的氨基反应，生成具有荧光的化合物，这类化合物的荧光光谱与不同动物组织中提取的脂褐质一致。脂褐质的化学本质是膜脂质和蛋白质过氧化后的一种复合产物，即schiff碱，测定schiff碱的含量，可知道细胞被自由基损伤的程度，可推断细胞衰老的程度。于停药后第2天，大鼠脱脊柱处死，迅速取大脑皮层200mg，加氯仿-甲醇(2：1)4ml匀浆，3090转/分，振荡3分钟，离心10分钟，取下层液，转移到另一试管，加氯仿至5ml，紫外灯下照射30秒，采用荧光光度计测定其荧光强度，激发波长360nm，发射波长450nm，以0.1ug/ml的奎宁液为标准，测定样本的荧光强度，再计算脂褐质的含量，比较各组有无显著性差异。结果见表1-3：表1-3对大脑脂褐质的影响与空白对照组相比，##p＜0.01，与模型对照组相比*p＜0.05，**p＜0.01。结果表示：d-半乳糖所致衰老大鼠模型对照组脑组织lpf含量升高，十分显著高于空白对照组，给药各实施例样品组的lpf含量与模型对照组比较均显著降低。说明本发明组合物能降低d-半乳糖衰老大鼠大脑中lpf的含量。1.2.4血清和脑组织中超氧化物歧化酶(sod)含量的测定(黄瞟呤氧化酶法)于停药后第2天，眼眶取血，取血清备用，大鼠脱脊柱处死，迅速取出大脑，去除丘脑、小脑、延髓，以ph7.4磷酸盐缓冲液冰浴下配制成1％脑组织匀浆，离心1500转/分，取上清液备用。取血清和上清液各30ul，依次加入试剂盒中的试剂，室温10分钟，于550nm处测od值，计算各组sod，比较各组有无显著性差异。结果见表1-4：表1-4对血清和脑组织中sod含量的影响与空白对照组相比，#p＜0.05，##p＜0.01，与模型对照组相比*p＜0.05，**p＜0.01。结果表示：d-半乳糖所致衰老大鼠模型对照组血清和脑组织sod含量下降，显著低于空白对照组，给药各实施例样品组与模型对照组比较，给药各实施例样品组血清和脑组织sod含量均显著增高。说明本发明组合物具有提高d-半乳糖衰老大鼠血清和脑组织sod活性的作用。1.2.5血清和脑组织中谷胱甘肽过氧化物酶(gsh-px)含量的测定(dtnb法)谷胱甘肽过氧化物酶(gsh-px)是体内存在的一种含硒清除自由基和抑制自由基反应的系统。谷胱甘肽(gsh)和5.5一二硝基苯甲酸(dtnb)反应在gsh-px催化下可生成黄色的5-硫代2-硝基苯甲酸阴离子，通过dtnb法测gsh的消耗可表示gsh-px的活性。取gsh-px测定试剂盒，取血清和i％脑组织匀浆上清液各0.2ml，依次加入试剂盒中的试剂，混匀1分钟后，于422nm处测od值，计算各组gsh-px，比较各组无显著性差异。结果见表1-5：表1-5对血清和脑组织中gsh-px含量的影响与空白对照组相比，##p＜0.01，与模型对照组相比*p＜0.05，**p＜0.01。结果表示：d-半乳糖所致衰老大鼠模型对照组血清和脑组织gsh-px活性降低，显著高于空白对照组，给药各实施例样品组与模型对照组比较，给药各实施例样品组血清gsh-px活性均显著增高。说明本发明组合物有提高d-半乳糖衰老大鼠血清和脑组织gsh-px活性的作用。1.2.6血清中单胺氧化酶(mao)的测定血清中mao和结缔组织中的mao性质相似，能促进结缔组织的成熟，在胶原形成过程中，参与胶原成熟的最后阶段架桥形成，使胶原和弹性硬蛋白结合，苄胺经mao氧化生成苄醛，苄醛与二硝基肼反应生成醛腙，在碱性溶液中呈红棕色。于停药后第2天，眼眶取血，采用mao测定试剂盒，取血清200ul，依次加入试剂盒中的试剂，56℃保温30分钟，于470nm处测od值，计算各组mao，比较各组有无显著性差异。结果见表1-6：表1-6对血清mao的影响与空白对照组相比，##p＜0.01，与模型对照组相比*p＜0.05,**p＜0.01。结果表示：d-半乳糖所致衰老大鼠模型对照组血清mao活性升高，十分显著高于空白对照组，给药各实施例样品组与模型对照组比较，给药各实施例样品组活性显著降低。说明本发明组合物能降低血清中mao的含量。实验结果说明，本发明药物组合物可以降低衰老大鼠大脑中lpf的含量、提高大鼠血清和脑组织sod活性、提高衰老大鼠血清和脑组织gsh-px活性、降低血清中mao的含量，具有抗衰老的作用。以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本
技术领域：
的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。当前第1页1 2 3 

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