一种柑橘味澳洲淡水龙虾养殖饲料及其加工工艺的制作方法

本发明属于虾类养殖饲料技术领域，具体涉及一种柑橘味澳洲淡水龙虾养殖饲料及其加工工艺。

背景技术：

澳洲淡水龙虾cheraxquadricarinatus，学名为四脊光壳南鳌虾，肉质鲜嫩滑脆、味道鲜美香甜、风味别具一格、更具丰富营养，是目前世界上最名贵的淡水经济虾类之一。澳洲淡水龙虾体大肥美，一般个体体重100-200g，最大个体体重达500g。该虾食杂性，既吃动物性饲料，也吃人工配合饲料和腐植质。该虾适应性强，能忍耐恶劣的气候环境，在水温5-35℃之间能正常生活，而且还具有极强的耐活力。该虾生长快、产量高、且粗生易养。

目前，我国已经开始大量进口，而且个别地方已经开始试养，每年4-5月放养、10-11月收获，每亩鲜虾产量可以达200kg以上。为了进一步突破澳洲淡水龙虾养殖产业技术，必须在现有试养的基础上，从种质引进、苗种繁育、饲料及投喂、养成技术、养殖装备等多个层面进行研究攻关，采取科学、先进、高效的技术手段，逐步构建起系统高效的澳洲淡水龙虾人工养殖模式，为后续养殖工作的开展提供必要的科学依据与实践经验。在水产养殖中饲料约占整个养殖成本的50-70％。饲料的营养与品质，不仅影响养殖对象的繁殖和生长性能，而且影响养殖对象的免疫性能、抗病效果、安全环境，更是影响养殖对象产品质量(营养、感观以及风味)的重要因素，仅次于种质对其影响。因此，从澳洲淡水龙虾健康生长、生产优质安全的产品、保护生态环境的角度研究开发饲料，对于实施澳洲淡水龙虾健康、高效、环境友好型生产，提供安全、优质的产品非常重要。

多年来，我国柑橘类种植产业发展较快，不仅淘汰品系、品种多，而且采摘后难免有一批次品(含残品以及未成熟品)，还有加工后的下脚料，这些都是水产养殖很好的饲料来源。按照分析测试，柑含有胡萝卡素：890μg/100g、维生素a：148μg/100g、维生素b1：0.08mg/100g、维生素b2：0.04mg/100g、维生素c：28mg/100g、尼克酸：0.4mg/100g、膳食纤维：0.4g/100g；橙含有胡萝卡素：160μg/100g、维生素a：27μg/100g、维生素bl：0.05mg/100g、维生素b2：0.04mg/100g、维生素c：33mg/100g、尼克酸：0.3mg/100g、膳食纤维：0.6g/100g；橘含有胡萝卡素：600μg/l00g、维生素a：100μg/100g、维生素bl：0.05mg/100g、维生素b2：0.02mg/100g、维生素c：11mg/100g、尼克酸：0.3mg/100g、膳食纤维：0.4g/100g。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种拓展了澳洲淡水龙虾养殖饲料来源，能降低成本及保护生态环境的柑橘味澳洲淡水龙虾养殖饲料的加工工艺，制得的养殖饲料诱食效果好，能提高澳洲淡水龙虾品质和口感，获得了全新的柑橘清香型澳洲淡水龙虾产品。

本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：

一种柑橘味澳洲淡水龙虾养殖饲料的加工工艺，将柑橙橘原料和饲料混合物经混合、挤压、成型、干燥、扎扁、匀湿、膨化、包衣、干燥、冷却、包装形成柑橘味澳洲淡水龙虾养殖饲料；其中，

柑橙橘原料选自柑、橙或橘次品、果皮或残渣；

饲料混合物含有发酵豆粕、鱼粉、小麦粉、大豆磷脂、鱼油；

包衣用材料包括矿物混合物、维生素混合物。

本发明加工工艺获得的养殖饲料用于澳洲淡水龙虾养殖，开发了一种全新的柑橘味澳洲淡水龙虾产品，既能使人们在食用过程中闻到一阵柑橘清香、美味溢口、无任何异腥味，又具有充分利用现有资源、诱食效果好、能降低成本及保护生态环境等优点。

优选地，柑橙橘原料选自柑橙橘类次品、果皮以及加工果汁时剩余的残渣。

优选地，柑橙橘原料必须经过分拣、清洗、去除杂质及霉烂品，保持鲜度。柑橘类水果是维生素、矿物质、膳食纤维和植物化学物的重要来源。维生素是维持澳洲淡水龙虾正常生理机能必不可少的一类低分子化合物，也是维持澳洲淡水生命所必需的微量元素。维生素参与新陈代谢过程，是生长、发育、繁殖、抗病不可缺少的微量营养物质，缺乏会引起生长迟缓、抗病能力减弱、甚至死亡。每一种维生素都起着其他物质所不能替代的特殊营养生理作用。研究发现，在饲料中添加柑橘类次品、果皮以及加工果汁时残渣，不仅可以提升澳洲淡水龙虾口感风味，而且可以增加澳洲淡水龙虾食欲、促进生长发育、维持机体健康、增加机体免疫力、减少发病风险。

优选地，柑橙橘原料储藏温度为10-15℃，储藏湿度为85-95％。柑橙橘原料储藏应保持一定的温湿度，气温不宜太高也不宜太低，一般为10-15℃；湿度过高，微生物繁殖加快，易遭霉菌的侵染得病腐烂，一般为85-95％。

为了提高防腐保鲜效果，优选地，柑橙橘原料经防腐保鲜剂处理，防腐保鲜剂包括，按重量份计，次氯酸纳50-150份、六偏磷酸钠0.25-0.75份、水1000份。其中，次氯酸钠是强氧化剂，具有优良的杀菌消毒功能；六偏磷酸钠有较强的吸湿性能，主要用于食品添加剂和水质处理剂；因此，该防腐保鲜剂能有效杀菌防腐，延长原料的保鲜期；使用防腐保鲜剂处理柑橙橘原料，可以提高其防腐保鲜效果。更优选地，防腐保鲜剂的配制与使用方法为：将次氯酸钠、六偏磷酸钠依次溶解于水中，即得防腐保鲜剂，喷洒于柑橙橘原料。

优选地，发酵豆粕的制备步骤为：将豆粕研磨至80-120目，加水至含水量为45-53％，混合均匀后高压灭菌20-30min，冷却，接种量为3-5％接种鼠李糖乳杆菌，在35-40℃发酵1-2天，冷冻干燥，粉碎过200-300目筛，即得发酵豆粕。微生物发酵过程中能够提高豆粕中粗脂肪、粗蛋白、氨基酸和磷的含量，并将大分子蛋白质分解成小分子蛋白质及活性肽，提高了澳洲淡水龙虾对蛋白质的消化利用率和机体免疫力，同时，豆粕中的大部分抗营养因子被消除，增加豆粕中生物活性因子的抗菌能力，改善豆粕的适口性。在宿主肠道内产生一些增强宿主消化酶，如淀粉酶、蛋白酶和脂酶，促进宿主有机物质和蛋白质的消化率，还可以提供一些必要的生长因子，维生素或氨基酸，影响机体的能量代谢和能量平衡。因此，发酵豆粕能够提高澳洲淡水龙虾的摄食率、利用率以及机体免疫能力。

为了进一步提高豆粕的发酵效果，更优选地，发酵豆粕的制备步骤中加入柑橙橘果皮和吡哆醇。柑橙橘果皮和吡哆醇的加入能够改善鼠李糖乳杆菌发酵豆粕的效果，提高发酵豆粕中酸溶性蛋白、氨基酸态氮以及乳酸和乙酸的含量，使得发酵豆粕具有较淡的醇香味，同时获得的发酵豆粕中含有较高的总黄酮，用含有该发酵豆粕的养殖饲料养殖澳洲淡水龙虾，不仅能提高澳洲淡水龙虾的摄食率、饲料利用率以及机体免疫能力，而且还能提高澳洲淡水龙虾的出肉率和肌肉中粗蛋白质的含量，改善肌肉中蛋白质的质量和鲜美程度，使得肌肉中必需氨基酸/非必需氨基酸高于0.8，总鲜味氨基酸占总氨基酸的比例高于55％。

进一步优选地，发酵豆粕的制备步骤为：将豆粕和柑橙橘果皮研磨至80-120目，加水至含水量为45-53％，混合均匀后高压灭菌20-30min，冷却，接种量为3-5％接种鼠李糖乳杆菌，同时加入吡哆醇，在35-40℃发酵1-2天，冷冻干燥，粉碎过200-300目筛，即得发酵豆粕。上述豆粕和柑橙橘果皮的重量比为100:5-25；鼠李糖乳杆菌和吡哆醇的重量比为1:0.2-0.6。

优选地，矿物质混合物包括，按重量份计，mgso4·7h2o155-209份；cuso4·5h2o0.83-1.13份；feso4·7h2o10.16-13.74份；znso4·7h2o5.79-9.39份；mnso4·h2o3.74-5.06份；cocl2·6h2o0.17-0.23份；na2seo30.043-0.058份；ca(io3)2·6h2o0.20-0.28份；微晶纤维素673-910份。

优选地，维生素混合物包括，按mg/kg饲料计，va醋酸脂13600-18400iu；vd32125-2875iu；a-生育酚102-138；亚硫酸氢钠钾萘醌(msb)4.34-5.87；盐酸硫胺素20.83-28.18；核黄素30.6-41.4；吡哆醇16.83-22.77；氰钴胺0.09-0.12；d-泛酸钙49.98-67.62；烟酸168.3-227.7；叶酸16.66-22.54；生物素1.02-1.38；肌醇666.4-901.6；vc磷酸酶595-805。

优选地，饲料混合物还含有复合诱食剂，复合诱食剂包括，按重量占比计，甜莱碱34-46％；二甲-丙酸噻亭17-23％；甘氨酸17-23％；丙氨酸8.5-10.15％；5-磷酸肌苷8.5-10.15％。

在匀湿过程中，水的添加量为柑橙橘原料和饲料混合物总重量的10-20％，该部分水在膨化过程中大部分被蒸发，最终留在养殖饲料内的水分占饲料重量的1-5％。

优选地，包衣用材料还包括抗应激能力剂，抗应激能力剂包括珍珠母粉，添加量为饲料重量的0.75-1.57％。珍珠母粉为蚌科动物三角帆蚌hyriopsiscumingii、褶纹冠蚌cristariaplicata或珍珠贝科动物马氏珍珠贝pterimartensii的贝壳粉。珍珠母粉，主要含磷脂酰乙醇胺、羟基脂肪酸、半乳糖神经酰胺、碳酸钙、氧化钙等尚含锌、铁、镁、铝、铜等多种微量元素及多种氨基酸等成份，具有安神定惊等作用，可显著增强澳洲淡水龙虾常压耐缺氧能力以及抗氧化的抗应激能力。

优选地，一种柑橘味澳洲淡水龙虾养殖饲料的加工工艺，具体步骤为：

1)将柑橙橘原料和饲料混合物以及水置于混料机中，于转速为500-1000r/min条件下，高速搅拌30-60min，得混合料；

2)通过挤压装置将混合料挤压成型饼状，再通过成型模具成型为呈柱形长条形状、长度为1-4cm的饲料，干燥、扎扁；

3)将扎扁后混合料中加水匀湿，水的添加量为混合料总重量的10-20％；

4)将匀湿后混合料进入挤压膨化制粒机、膨化温度为100-120℃进行膨化处理；

5)膨化后的饲料经过切刀处理得到颗粒状，然后降至50-60℃送入喷涂器，将包衣用材料喷涂到颗粒上，在90-100℃条件下干燥，冷却至常温后进行包装，形成柑橘味澳洲淡水龙虾养殖饲料。

本发明还公开了上述加工工艺制得的柑橘味澳洲淡水龙虾养殖饲料。

优选地，养殖饲料还包括微晶纤维素、丙氨酸、甘氨酸、防霉剂、抗氧化剂、氨基酸混合物。

更优选地，抗氧化剂为乙氧基喹啉。

更优选地，氨基酸混合物，包括精氨酸、赖氨酸、酪氨酸、苏氨酸、色氨酸、组氨酸、半胱氨酸或谷氨酸中的几种混合。

更优选地，养殖饲料用原料包括，按重量份计，柑橙橘原料60-100份，发酵豆粕20-28份、鱼粉18-26份、小麦粉16-24份、大豆磷脂1.5-2.5份、鱼油5-9份、矿物混合物1.5-2.5份、维生素混合物1.5-2.5份、微晶纤维素5.0-7.5份、丙氨酸2.0-4.0份、甘氨酸2.0-4.0份、复合诱食剂0.4-0.6份、防霉剂0.05-0.15份、抗氧化剂0.025-0.075份、氨基酸混合物5.0-8.0份，水适量。进一步优选地，养殖饲料还包括饲料用原料重量0.75-1.57％的珍珠母粉。

本发明还公开了养殖饲料在用于养殖柑橘味澳洲淡水龙虾中的用途。利用本发明养殖饲料进行澳洲淡水龙虾的养殖，能提供一种全新的柑橘清香型澳洲淡水龙虾产品，养成的澳洲淡水龙虾，无论是生吃、还是烹饪吃、尤其是烧烤吃，能够闻到一阵柑橘清香、美味溢口，尤其用烧烤烹饪方式食用，柑橘味会更浓，完全感觉不到异腥味。因此，利用本发明养殖饲料进行澳洲淡水龙虾的养殖，能拓宽市场营销渠道，促进澳洲淡水龙虾养殖产生的健康发展。

本发明由于采用了柑橙橘原料，因而具有如下有益效果：本发明加工工艺有效利用柑橙橘次品、果皮以及加工果汁时剩余残渣，变废为宝、充分利用现有资源，拓展了澳洲淡水龙虾养殖饲料来源，能降低成本及保护生态环境；本发明加工工艺制得的养殖饲料诱食效果好，能提高澳洲淡水龙虾品质和口感，获得了全新的柑橘清香型澳洲淡水龙虾产品，拓宽市场营销渠道，促进澳洲淡水龙虾养殖产生的健康发展。因此，本发明提供一种拓展了澳洲淡水龙虾养殖饲料来源，能降低成本及保护生态环境的柑橘味澳洲淡水龙虾养殖饲料的加工工艺，制得的养殖饲料诱食效果好，能提高澳洲淡水龙虾品质和口感，获得了全新的柑橘清香型澳洲淡水龙虾产品。

附图说明

图1为本发明养殖饲料的加工工艺流程图；

图2为实施例3养殖饲料的加工工艺流程图；

图3为豆粕的发酵效果；

图4为密封件试样的摩擦系数；

图5为发酵豆粕中乳酸和乙酸的含量；

图6为澳洲淡水龙虾中脂肪酶、超氧化物歧化酶和碱性磷酸酶活性。

具体实施方式

以下结合具体实施方式和附图对本发明的技术方案作进一步详细描述：

实施例1：

1.柑橙橘原料：选自柑橙橘类次品、果皮以及加工果汁时剩余的残渣，经过分拣、清洗、去除杂质及霉烂品，保持鲜度；柑橙橘原料经防腐保鲜剂处理，防腐保鲜剂包括，按重量份计，次氯酸纳115份、六偏磷酸钠0.48份、水1000份；柑橙橘原料储藏温度为10-15℃，储藏湿度为85-95％。

2.发酵豆粕：将豆粕研磨至100目，加水至含水量为48％，混合均匀后高压灭菌25min，冷却，接种量为4％接种鼠李糖乳杆菌，在38℃发酵1.5天，冷冻干燥，粉碎过250目筛，即得发酵豆粕。

3.矿物质混合物包括，按重量份计，mgso4·7h2o180份；cuso4·5h2o1.05份；feso4·7h2o11.95份；znso4·7h2o7.64份；mnso4·h2o4.56份；cocl2·6h2o0.2份；na2seo30.051份；ca(io3)2·6h2o0.24份；微晶纤维素810份。

4.维生素混合物包括，按mg/kg饲料计，va醋酸脂16500iu；vd32530iu；a-生育酚122；亚硫酸氢钠钾萘醌(msb)5.04；盐酸硫胺素24.22；核黄素35.80；吡哆醇19.50；氰钴胺0.11；d-泛酸钙56.44；烟酸195.33；叶酸19.88；生物素1.18；肌醇780.5；vc磷酸酶682。

5.复合诱食剂的成份及其重量比例份为：甜莱碱40％；二甲-丙酸噻亭21％；甘氨酸19％；丙氨酸10.0％；5-磷酸肌苷10.0％。

6.氨基酸混合物包括，按重量份计，精氨酸3-7份、赖氨酸5-9份、酪氨酸1-3份。于本实施例中氨基酸混合物包括，按重量份计，精氨酸4份、赖氨酸7份、酪氨酸2份。

7.一种柑橘味澳洲淡水龙虾养殖饲料，所用原料包括，按重量份计，柑橙橘原料60份，发酵豆粕22份、鱼粉20份、小麦粉18份、大豆磷脂2.0份、鱼油6份、矿物混合物2.0份、维生素混合物2.0份、微晶纤维素6.0份、丙氨酸3.0份、甘氨酸3.0份、复合诱食剂0.5份、防霉剂0.1份、抗氧化剂(乙氧基喹啉)0.05份、氨基酸混合物6.0份。

8.一种柑橘味澳洲淡水龙虾养殖饲料的加工工艺，按照图1所示，具体为：

1)将柑橙橘原料和饲料混合物以及水置于混料机中，于转速为800r/min条件下，高速搅拌45min，得混合料；

2)通过挤压装置将混合料挤压成型饼状，再通过成型模具成型为呈柱形长条形状、长度为1-4cm的饲料，干燥、扎扁；

3)将扎扁后混合料中加水匀湿，水的添加量为混合料总重量的15％；

4)将匀湿后混合料进入挤压膨化制粒机、膨化温度为115℃进行膨化处理；

5)膨化后的饲料经过切刀处理得到颗粒状，然后降至60℃送入喷涂器，将包衣用材料喷涂到颗粒上，在95℃条件下干燥，冷却至常温后进行包装，形成柑橘味澳洲淡水龙虾养殖饲料，最终留在养殖饲料内的水分占饲料重量的2.37％。

实施例2：

1.柑橙橘原料：同实施例1。

2.发酵豆粕：将豆粕研磨至120目，加水至含水量为53％，混合均匀后高压灭菌30min，冷却，接种量为5％接种鼠李糖乳杆菌，在40℃发酵2天，冷冻干燥，粉碎过300目筛，即得发酵豆粕。

3.矿物质混合物包括，按重量份计，mgso4·7h2o209份；cuso4·5h2o1.13份；feso4·7h2o12.84份；znso4·7h2o9.39份；mnso4·h2o5.06份；cocl2·6h2o0.23份；na2seo30.058份；ca(io3)2·6h2o0.28份；微晶纤维素910份。

4.维生素混合物包括，按mg/kg饲料计，va醋酸脂18400iu；vd32875iu；a-生育酚138；亚硫酸氢钠钾萘醌(msb)5.87；盐酸硫胺素28.18；核黄素41.4；吡哆醇22.77；氰钴胺0.12；d-泛酸钙67.62；烟酸227.7；叶酸22.54；生物素1.38；肌醇901.6；vc磷酸酶805。

5.复合诱食剂的成份及其重量比例份为：同实施例1。

6.氨基酸混合物包括，同实施例1。

7.一种柑橘味澳洲淡水龙虾养殖饲料，所用原料包括，按重量份计，柑橙橘80份，发酵豆粕28份、鱼粉26份、小麦粉24份、大豆磷脂2.5份、鱼油8份、矿物混合物2.5份、维生素混合物2.5份、微晶纤维素7.5份、丙氨酸4.0份、甘氨酸4.0份、复合诱食剂0.6份、防霉剂0.15份、抗氧化剂(乙氧基喹啉)0.075份、氨基酸混合物8.0份。

8.一种柑橘味澳洲淡水龙虾养殖饲料的加工工艺，同实施例1，最终留在养殖饲料内的水分占饲料重量的2.51％。

实施例3：

1.柑橙橘原料：同实施例1。

2.发酵豆粕：同实施例1。

3.矿物质混合物包括，同实施例1。

4.维生素混合物包括，同实施例1。

5.复合诱食剂的成份及其重量比例份为：同实施例1。

6.氨基酸混合物包括，同实施例1。

7.一种柑橘味澳洲淡水龙虾养殖饲料，所用原料包括，同实施例1。

8.一种柑橘味澳洲淡水龙虾养殖饲料的加工工艺，按照图2所示，与实施例1的不同之处在于：

包衣用材料还包括抗应激能力剂，抗应激能力剂包括珍珠母粉，添加量为饲料重量的1.2％，最终留在养殖饲料内的水分占饲料重量的2.46％。

实施例4：

本实施例与实施例3的不同之处在于：

发酵豆粕：将豆粕和柑橙橘果皮研磨至100目，加水至含水量为48％，混合均匀后高压灭菌30min，冷却，接种量为3.8％接种鼠李糖乳杆菌，同时加入吡哆醇，在37℃发酵1.5天，冷冻干燥，粉碎过250目筛，即得发酵豆粕。上述豆粕和柑橙橘果皮的重量比为100:12；鼠李糖乳杆菌和吡哆醇的重量比为1:0.38。

最终留在养殖饲料内的水分占饲料重量的2.53％。

实施例5：

本实施例与实施例3的不同之处在于：

发酵豆粕：将豆粕和柑橙橘果皮研磨至100目，加水至含水量为48％，混合均匀后高压灭菌30min，冷却，接种量为3.8％接种鼠李糖乳杆菌，在37℃发酵1.5天，冷冻干燥，粉碎过250目筛，即得发酵豆粕。上述豆粕和柑橙橘果皮的重量比为100:12。

最终留在养殖饲料内的水分占饲料重量的2.48％。

实施例6：

本实施例与实施例3的不同之处在于：

发酵豆粕：将豆粕研磨至100目，加水至含水量为48％，混合均匀后高压灭菌30min，冷却，接种量为3.8％接种鼠李糖乳杆菌，同时加入吡哆醇，在37℃发酵1.5天，冷冻干燥，粉碎过250目筛，即得发酵豆粕。上述鼠李糖乳杆菌和吡哆醇的重量比为1:0.38。

最终留在养殖饲料内的水分占饲料重量的2.52％。

实施例7：

本实施例提供一种更佳的技术方案，在饲料混合物还加入花生酸和木犀草素，花生酸和木犀草素的加入能够提高脂肪酶、超氧化物歧化酶和碱性磷酸酶活力，进一步提升澳洲淡水龙虾的存活率、增重率和特定生长率；花生酸和木犀草素的加入还能有效地提高澳洲淡水龙虾肌肉中粗脂肪含量，尤其是高效地提高其中不饱和脂肪酸epa、dha、dpa的总含量，从而提升澳洲淡水龙虾的品质。优选地，养殖饲料用原料包括，按重量份计，柑橙橘原料60-100份，发酵豆粕20-28份、鱼粉18-26份、小麦粉16-24份、大豆磷脂1.5-2.5份、鱼油5-9份、矿物混合物1.5-2.5份、维生素混合物1.5-2.5份、微晶纤维素5.0-7.5份、丙氨酸2.0-4.0份、甘氨酸2.0-4.0份、复合诱食剂0.4-0.6份、防霉剂0.05-0.15份、抗氧化剂0.025-0.075份、氨基酸混合物5.0-8.0份、花生酸0.03-0.06份、木犀草素0.01-0.03份。

本实施例与实施例3的不同之处在于：

一种柑橘味澳洲淡水龙虾养殖饲料，所用原料包括，按重量份计，柑橙橘原料60份，发酵豆粕22份、鱼粉20份、小麦粉18份、大豆磷脂2.0份、鱼油6份、矿物混合物2.0份、维生素混合物2.0份、微晶纤维素6.0份、丙氨酸3.0份、甘氨酸3.0份、复合诱食剂0.5份、防霉剂0.1份、抗氧化剂(乙氧基喹啉)0.05份、氨基酸混合物6.0份、花生酸0.04份、木犀草素0.02份。

最终留在养殖饲料内的水分占饲料重量的2.57％。

实施例8：

本实施例与实施例4的不同之处在于：

一种柑橘味澳洲淡水龙虾养殖饲料，所用原料包括，按重量份计，柑橙橘原料60份，发酵豆粕22份、鱼粉20份、小麦粉18份、大豆磷脂2.0份、鱼油6份、矿物混合物2.0份、维生素混合物2.0份、微晶纤维素6.0份、丙氨酸3.0份、甘氨酸3.0份、复合诱食剂0.5份、防霉剂0.1份、抗氧化剂(乙氧基喹啉)0.05份、氨基酸混合物6.0份、花生酸0.04份、木犀草素0.02份。

最终留在养殖饲料内的水分占饲料重量的2.59％。

实施例9：

本实施例与实施例4的不同之处在于：

一种柑橘味澳洲淡水龙虾养殖饲料，所用原料包括，按重量份计，柑橙橘原料60份，发酵豆粕22份、鱼粉20份、小麦粉18份、大豆磷脂2.0份、鱼油6份、矿物混合物2.0份、维生素混合物2.0份、微晶纤维素6.0份、丙氨酸3.0份、甘氨酸3.0份、复合诱食剂0.5份、防霉剂0.1份、抗氧化剂(乙氧基喹啉)0.05份、氨基酸混合物6.0份、花生酸0.04份。

最终留在养殖饲料内的水分占饲料重量的2.54％。

实施例10：

本实施例与实施例4的不同之处在于：

一种柑橘味澳洲淡水龙虾养殖饲料，所用原料包括，按重量份计，柑橙橘原料60份，发酵豆粕22份、鱼粉20份、小麦粉18份、大豆磷脂2.0份、鱼油6份、矿物混合物2.0份、维生素混合物2.0份、微晶纤维素6.0份、丙氨酸3.0份、甘氨酸3.0份、复合诱食剂0.5份、防霉剂0.1份、抗氧化剂(乙氧基喹啉)0.05份、氨基酸混合物6.0份、木犀草素0.02份。

最终留在养殖饲料内的水分占饲料重量的2.55％。

试验例1：

1.发酵豆粕中酸溶性蛋白含量的测试

称取1.5g发酵豆粕样品(精确至0.0001g)至离心管中，加入15ml15％三氯乙酸溶液，混合均匀，再加入5ml15％三氯乙酸溶液，静置沉降5min(静置前先进行离心平衡)后转到离心管中，在4000r/min下离心10min，取上清液并转到50ml比色管中定容。取10ml该溶液进行消化，按凯氏定氮法测定酸溶性蛋白含量。

2.发酵豆粕中氨基酸态氮含量的测试

精确称量5g左右的发酵豆粕样品，加入45ml水溶解后在磁力搅拌器上搅拌20min，过滤后取5ml滤液于250ml烧杯中，加入150ml蒸馏水与10ml甲醛，在磁力搅拌器的搅拌下，用0.05mol/l氢氧化钠溶液滴定至ph9.2。按魏炳栋等方法计算氨基酸态氮含量。

3.发酵豆粕ph的测定

精确称量5g左右的发酵豆粕样品，加入45ml水溶解后在磁力搅拌器上搅拌20min，过滤后用酸度计直接测定溶液的ph。

4.发酵豆粕中有机酸含量的测试

取1g发酵豆粕加入至9ml无菌生理盐水，漩涡振荡10min，在4500r/min条件下离心10min，取上清液经0.22μm水系滤膜过滤后得到的滤液用于高效液相色谱中。色谱条件：进样量20μl，流动相5mm/l硫酸溶液，流速0.6m/min，色谱柱87h有机酸色谱柱，柱温35℃，紫外检测波长210nm，示差检测温度35℃。选用紫外检测器检测乳酸、乙酸含量。

5.发酵豆粕液中总黄酮含量的测试

精密称取烘干恒重的芦丁标准品5mg(纯度≥95％)，用60％乙醇溶解，并定容到25ml，配成0.2mg/ml的芦丁标准溶液，准确量取0ml、1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml的对照品储备溶液分别置于25ml容量瓶中，各加入60％的乙醇至10ml，再向每个容量瓶中加入浓度为5％的nano2溶液1ml摇匀，放置6min后加入浓度为10％的al(no3)3溶液1ml，放置6min，然后加入4％的naoh溶液10ml，放置15min，蒸馏水定容到25ml。在波长为510nm下测吸光度(a)。以吸光度(a)为横坐标，以芦丁质量浓度c(mg/ml)为纵坐标，绘制标准曲线，得c＝0.0979a+0.0004，r²＝0.9994，在0.008-0.05mg/ml范围内呈良好的线性关系)。

将实施例3-6豆粕发酵后过滤，得到豆粕发酵液，精密吸取豆粕发酵液5ml，利用标准曲线制作法测定吸光值，然后按照标准曲线法计算豆粕发酵液中总黄酮的含量。

图3为豆粕的发酵效果，可以看出，实施例4发酵豆粕中酸溶性蛋白含量达到8.24％，氨基酸态氮含量达到3.08％，明显高于实施例3、实施例5-6，实施例4发酵豆粕ph较低，为3.89，低于实施例3、实施例5-6，以上结果说明柑橙橘果皮和吡哆醇的加入能够改善鼠李糖乳杆菌发酵豆粕的效果，提高发酵豆粕中酸溶性蛋白、氨基酸态氮以及降低发酵豆粕的ph。

图4为发酵豆粕中乳酸和乙酸的含量，可以看出实施例4发酵豆粕中乳酸和乙酸的含量明显高于实施例3、实施例5-6，说明柑橙橘果皮和吡哆醇的加入能够改善鼠李糖乳杆菌发酵豆粕的效果，提高乳酸和乙酸的含量，从而降低发酵豆粕的ph，这与图3中ph结果一致。

图5为发酵豆粕中总黄酮的含量，可以看出实施例4发酵豆粕中总黄酮的含量明显高于实施例3、实施例5-6，说明柑橙橘果皮和吡哆醇的加入使获得的发酵豆粕中含有较高的总黄酮。

试验例2：

养殖饲料对澳洲淡水龙虾的影响

选择健康无患病并处于蜕皮间期的红螯螯幼虾进行养殖试验，平均初始体重为2g，随机分为试验1-10组，每组3个重复，每个重复100只虾。养殖试验在室内循环过滤养殖系统中进行，每个养殖池规格为425cm×115cm×90cm，每个养殖箱底部放置30个pvc管作为遮蔽物。养殖期间水温控制在27-31℃，水深控制在50-60cm，溶解氧含量保证在5mg/l以上。每天清理投料台上的残食和排泄物，每隔一周换1/3的水，每隔一周放入500ml的微生态抑制剂，保证水质不变坏，每天的饲料投喂量为虾体重的6％，试验1组投喂本发明实施例1养殖饲料，试验2组投喂本发明实施例2养殖饲料，试验3组投喂本发明实施例3养殖饲料，试验4组投喂本发明实施例4养殖饲料，试验5组投喂本发明实施例5养殖饲料，试验6组投喂本发明实施例6养殖饲料，试验7组投喂本发明实施例7养殖饲料，试验8组投喂本发明实施例8养殖饲料，试验9组投喂本发明实施例9养殖饲料，试验10组投喂本发明实施例10养殖饲料，按实际摄食情况进行调整，每天分两次投喂，时间分别为07:00、18:00，养殖周期为8周。

1.澳洲淡水龙虾的生长性能测定，养殖试验结束时，按以下公式进行计算：

存活率＝终末虾数量/初始虾数量×100％；

增质量率＝(wf-wi)/wi×100％；

特定生长率＝(lnwf-lnwi)/t×100％；

饲料效率＝(wf-wi)/摄入饲料质量×100％。

式中：wf为平均末量；wi为平均初重；t为试验天数。

表1澳洲淡水龙虾的生长性能

表1为澳洲淡水龙虾生长性能，试验1组-试验3组澳洲淡水龙虾的增重率大于800％，特定生长率大于3.9％，存活率大于90％，饲料效率大于60，这说明本发明实施例1-3养殖饲料可以提高澳洲淡水龙虾的摄食率、饲料利用率以及机体免疫能力，促进生长发育、维持机体健康、增加机体免疫力、减少发病风险；试验4组澳洲淡水龙虾的增重率、特定生长率、存活率、饲料效率均高于试验3组、试验5组-试验6组，这说明本发明实施例4养殖饲料中发酵豆粕的使用能进一步提高澳洲淡水龙虾的摄食率、饲料利用率以及机体免疫能力；试验7组澳洲淡水龙虾的增重率、特定生长率、存活率、饲料效率均高于试验3组，试验8组澳洲淡水龙虾的增重率、特定生长率、存活率、饲料效率均高于试验4组、试验9组-试验10组，这说明本发明实施例7养殖饲料和实施例8养殖饲料中花生酸和木犀草素的共同存在时能进一步提升澳洲淡水龙虾的存活率、增重率和特定生长率。

2.澳洲淡水龙虾出肉率的测定

将试验虾去头去螯，剪去附肢，左手持虾，右手轻轻转动虾尾取出虾线，再用剪刀沿腹部两侧由下至上小心剪开，用镊子剥离腹部底壁，用量勺将腹部肌肉小心取出，再用镊子剥离剩余甲壳上的肌肉，用拧干的湿纱布吸干表面水分，用精确度为0.01g的电子天平测定腹部肌肉重量。

出肉率(％)＝(腹部肌肉质量/虾体总质量)×100。

3.澳洲淡水龙虾营养成分含量的测定

对澳洲淡水龙虾进行计数并称质量后，取肝胰腺和肌肉，用液氮进行速冻后于-80℃保存备用。

粗脂肪含量采用gb/t5009.6-2016索氏抽提法测定，粗蛋白质含量采用gb/t5009.5-2016微量凯氏定氮法测定，氨基酸含量使用l-8900氨基酸自动分析仪测定，除测定色氨酸含量时采用碱水解处理外，测定其余氨基酸含量时采用酸水解处理；脂肪酸含量采用gb5009.168-2016方法测定。每个样品重复取样3次进行测定。

表2澳洲淡水龙虾的出肉率和营养成分含量

表2为澳洲淡水龙虾的出肉率和营养成分含量，其中，weaa/wneaa表示必需氨基酸/非必需氨基酸的比值；wdaa/wtaa表示鲜味氨基酸/氨基酸总量的比值。从表2可以得出如下结论：

试验1组-试验3组澳洲淡水龙虾的出肉率大于18％，粗蛋白含量大于16％，粗脂肪含量大于0.65％，必需氨基酸/非必需氨基酸的比值大于0.65，鲜味氨基酸占总氨基酸的比例高于48％，epa+dha+dpa含量高于15.5％，这说明本发明实施例1-3养殖饲料可以提高澳洲淡水龙虾品质；

试验4组澳洲淡水龙虾的出肉率、粗蛋白均高于试验3组、试验5组-试验6组，这说明本发明实施例4养殖饲料中发酵豆粕的使用能提高澳洲淡水龙虾的出肉率和肌肉中粗蛋白质的含量；试验4组澳洲淡水龙虾肌肉中必需氨基酸/非必需氨基酸高于0.8，鲜味氨基酸占总氨基酸的比例高于55％，均高于试验3组、试验5组-试验6组，这说明本发明实施例4养殖饲料中发酵豆粕的使用可以改善肌肉中蛋白质的质量和鲜美程度；

试验7组澳洲淡水龙虾的出肉率、粗蛋白、肌肉中必需氨基酸/非必需氨基酸、鲜味氨基酸占总氨基酸的比例与试验3组相当，试验8组澳洲淡水龙虾的出肉率、粗蛋白、肌肉中必需氨基酸/非必需氨基酸、鲜味氨基酸占总氨基酸的比例与试验4组、试验9组-试验10组相当，这说明本发明实施例7养殖饲料和实施例8养殖饲料中花生酸和木犀草素的共同存在时对澳洲淡水龙虾的出肉率、粗蛋白、肌肉中必需氨基酸/非必需氨基酸、鲜味氨基酸占总氨基酸的比例物不良影响；试验7组澳洲淡水龙虾的粗脂肪含量以及不饱和脂肪酸epa、dha、dpa的总含量高于试验3组，试验8组澳洲淡水龙虾的粗脂肪含量以及不饱和脂肪酸epa、dha、dpa的总含量高于试验4组、试验9组-试验10组相当，这说明本发明实施例7养殖饲料和实施例8养殖饲料中花生酸和木犀草素的共同存在时能有效地提高澳洲淡水龙虾肌肉中粗脂肪含量，尤其是高效地提高其中不饱和脂肪酸epa、dha、dpa的总含量，从而提升澳洲淡水龙虾的品质。

4.澳洲淡水龙虾中脂肪酶、超氧化物歧化酶和碱性磷酸酶活力

肝胰腺的脂肪酶、超氧化物歧化酶和碱性磷酸酶均采用南京建成生物工程研究所的试剂盒进行检测。

图6为澳洲淡水龙虾中脂肪酶、超氧化物歧化酶和碱性磷酸酶活性，可以看出，试验7组澳洲淡水龙虾的脂肪酶、超氧化物歧化酶和碱性磷酸酶活性高于试验3组，试验8组澳洲淡水龙虾的脂肪酶、超氧化物歧化酶和碱性磷酸酶活性高于试验4组、试验9组-试验10组相当，这说明本发明实施例7养殖饲料和实施例8养殖饲料中花生酸和木犀草素的共同存在时能够提高脂肪酶、超氧化物歧化酶和碱性磷酸酶活力。

本发明的操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知，在此不进行赘述。

以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明，应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等，均应包含在本发明的保护范围之内。

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