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您当前的位置： 包含裸藻粉和酵母粉的组合物、制法和应用的制作方法
2021-01-07 10:01:15|
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起点商标网 本发明涉及食品或保健食品
技术领域：
，具体涉及一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物、制法和应用。
背景技术：
：酵母中含有丰富的蛋白质、维生素、矿物质、功能酶等营养素。其氨基酸包括人体所需的8种必需氨基酸；不仅含有b族维生素，锌、硒、镁、铬等矿物质，还含有酵母葡聚糖。它是以β-1,3-d-葡聚糖为主链，短的β-1,6-d-葡聚糖为支链的多糖。能够激活人体的免疫系统、包括增加天然杀伤细胞的活性和t细胞介导的细胞毒性、增强外周单核细胞的增殖应答产生分裂素，刺激释放白介素以及诱导嗜中性粒细胞的吞噬作用。裸藻粉是一种单细胞生物，含有丰富的营养物质有维生素、矿物质、氨基酸、不饱和脂肪酸、叶绿素、玉米黄质等59中人体必需的营养元素。其中最重要的是含有50％以上的裸藻粉β(1,3)-葡聚糖，它可激活免疫应答，作为非特异性免疫的一部分，保护人体免受病原体入侵。且可降低肠道炎症，显著改善肠道健康，保持肠道菌群稳定。近年来，酵母粉和裸藻粉被广泛研究，主要集中在营养机理方面，也有部分产品涌现，但是以酵母粉和裸藻粉为组合物的产品并不多见。cn107348299a涉及食品领域，具体提供了一种含有裸藻粉和酵母β-葡聚糖及其它成分的组合物，是一种具有护肝解酒功效的固体饮料，其主要涉及护肝解酒的功效，未涉及增强免疫力与抗辐射功效。cn105687109a涉及日用化妆品领域，具体提供了一种包含细小裸藻和酵母抽提物的祛痘修复精华，cn105707435a涉及动物养殖领域，具体涉及利用天然生物提取物与植物，动物提取物，微量元素，微生物菌为基本原料的一种无抗富硒性饲料添加剂的配制方法，包含裸藻粉、酵母硒、酿酒酵母；其分别涉及化妆品领域和动物养殖领域，不涉及食品领域。技术实现要素：为此，本发明所解决的技术的问题是：本发明提供了一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，所述的组合物具有增强免疫力的性能。本发明提供了一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，所述组合物包含第一活性成分、可选择的第二活性成分和可选择的辅料，所述第一活性成分包含酵母粉和裸藻粉，按其在组合物中所占的质量计，所述酵母粉的含量为5-90％，所述裸藻粉的含量为5-80％。本发明提供了上述所述的组合物的制备方法，其是将所述第一活性成分、可选择的第二活性成分和可选择的辅料进行混合得到。本发明提供了包含裸藻粉和酵母粉的组合物在食品领域中的应用。本发明提供了一种食品组合物，其包含上述所述的组合物，所述组合物在食品组合物中所占的质量含量为0.1-70％。具体来说，本发明提出了如下技术方案。本发明提供了一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其中，所述组合物包含第一活性成分、可选择的第二活性成分和可选择的辅料，所述第一活性成分包含酵母粉和裸藻粉，按其在组合物中所占的质量计，所述酵母粉的含量为5-90％，所述裸藻粉的含量为5-80％。优选的，对于上述所述的组合物，其中，所述酵母粉的含量为10-80％，优选为10-60％，较优选为10-40％；所述裸藻粉的含量为5-60％，优选为5-40％。优选的，对于上述所述的组合物，其中，所述可选择的第二活性成分的质量含量为7.06-90％，优选为10-80％，较优选为10-30％；优选的，所述可选择的第二活性成分选自于1-90％的酵母β-葡聚糖、5-40％骨胶原蛋白、0.01-15％的酵母抽提物、0.05-15％的燕麦β-葡聚糖、0.05-5％的香菇多糖、0.5-40％的维生素c、0.5-40％的维生素e、0-1％的维生素a、0-3％的β胡萝卜素、0-1％的vb1、0-1％的vb2、0-1％的vb3、0-15％的人参提取物、0-10％的灵芝孢子粉和0-20％的姜黄提取物中的一种或两种以上。优选的，对于上述所述的组合物，其中，所述可选择的辅料的质量含量为5-90％，优选为20-72％。优选的，对于上述所述的组合物，其中，所述可选择的辅料选自于1-10％的麦芽糊精、1-80％糖醇、1-60％的微晶纤维素、1-60％的淀粉、1-80％的蔗糖、1-80％葡萄糖、1-15％的糊精、1-60％的乳糖、70-90％的玉米油、1-5％的羧甲基纤维钠、1-3％的羟丙甲纤维素、1-15％的水果粉、0.01-0.08％甜菊糖苷、0.01-1％的硬脂酸镁、10-85％植物油、1-6％蜂蜡、1-6％单双甘油酯、1-30％明胶、1-20％甘油、1-5％香精和1-5％色素中的一种或两种以上；优选的，所述水果粉为甜橙粉或草莓粉。优选的，对于上述所述的组合物，其中，所述组合物的剂型选自于片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊或口服液中的一种。本发明提供了上述所述组合物的制备方法，其是将所述第一活性成分、可选择的第二活性成分和可选择的辅料进行混合得到。本发明提供了上述所述的组合物或上述所述的制备方法制备得到的组合物在食品领域中的应用，优选在压片糖果、饮料或凝胶糖果中的应用。本发明提供了一种食品组合物，其包含上述所述的组合物或上述所述的制备方法制备得到的组合物，所述组合物在食品组合物中所占的质量含量为0.1-70％。本发明所取得的有益效果是：本发明的包含裸藻粉和酵母粉的组合物同时使用了酵母粉和裸藻粉，达到全面协同的作用，所述的组合物具有增强免疫力的技术效果。菌株保藏信息本发明所用的菌种酿酒酵母z2.2(saccharomycescerevisiaez2.2)来自安琪酵母股份有限公司出售的型号为ny005的酿酒酵母，于2005年10月25日保藏在中国典型培养物保藏中心(cctcc)，保藏编号为cctccno:m205128，保藏地址：中国.武汉.武汉大学，邮政编码：430072；电话：(027)-68754052，且在专利文献cn103907767a中已记载。具体实施方式如上所述，本发明提供了一种含有裸藻粉和酵母粉的组合物，所述组合物包含第一活性成分以及可选择的第二活性成分和可选择的辅料，所述第一活性成分包含酵母粉和裸藻粉，按其在组合物中所占的质量计，所述酵母粉的含量为5-90％，所述裸藻粉的含量为5-80％。对于可选择的第二活性成分是指所述的组合物既可以包含第二活性成分，也可以不包含第二活性成分。对于可选择的辅料是指所述的组合物既可以包含辅料，也可以不包含辅料。所述的酵母粉通过下述步骤制备得到：1)菌种活化：挑取菌落一环放入ypd液体培养基中，放入摇床中将菌种活化。2)菌种纯化：将上一步活化后的菌液梯度稀释铺平板，以获取单个菌落。3)菌种扩大培养：挑取上一步平板中单个菌落接种至200mlypd液体培养基，在30℃下，220rpm转速下培养18h；二级种子培养，按照二级培养基体积的10％将一级培养的种子接入1l二级培养基，28℃下，200rpm转速下培养18h；其ph控制在5.5。4)种子富集：5000rpm离心，用钙离子和镁离子含量低的去离子水洗涤3次，富集得到酿酒酵母种子，至酵母湿重为220g/l。5)酵母乳高温干燥成粉：对以上得到的酵母乳升温至90℃，保持1h,使其失活，然后进行离心，离心速度为5000rpm，5min。得到的重相经喷雾干燥塔干燥成酵母粉。在本发明优选的一种具体实施例方式中，其中，所述酵母粉的含量为10-80％，优选为10-60％，较优选为10-40％；所述裸藻粉的含量为5-60％，优选为5-40％。在本发明优选的一种具体实施方式中，其中，所述可选择的第二活性成分的质量含量为7.06-90％，优选为10-80％，较优选为10-30％；优选的，所述可选择的第二活性成分选自于1-90％的酵母β-葡聚糖、5-40％骨胶原蛋白、0.01-15％的酵母抽提物、0.05-15％的燕麦β-葡聚糖、0.05-5％的香菇多糖、0.5-40％的维生素c、0.5-40％的维生素e、0-1％的维生素a、0-3％的β胡萝卜素、0-1％的vb1、0-1％的vb2、0-1％的vb3、0-15％的人参提取物、0-10％的灵芝孢子粉和0-20％的姜黄提取物中的一种或两种以上。在本发明优选的一种具体实施方式中，其中，所述可选择的辅料的质量含量为5-90％，优选为20-72％；优选的，所述可选择的辅料选自于1-10％的麦芽糊精、1-80％的糖醇、1-60％的微晶纤维素、1-60％的淀粉、1-80％的蔗糖、1-80％葡萄糖、1-15％的糊精、1-60％的乳糖、70-90％的玉米油、1-5％的羧甲基纤维钠、1-3％的羟丙甲纤维素、1-15％的水果粉、0.01-0.08％甜菊糖苷、0.01-1％的硬脂酸镁、10-85％植物油、1-6％蜂蜡、1-6％单双甘油酯、1-30％明胶、1-20％甘油、1-5％香精和1-5％色素中的一种或两种以上；优选的，所述水果粉为甜橙粉或草莓粉。优选的，所述组合物的剂型选自于片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊或口服液中的一种。本发明提供了一种上述所述的组合物的制备方法，其是将所述第一活性成分、可选择的第二活性成分和可选择的辅料进行混合得到；优选的，在进行混合后，进行成型，再进行包装得到。本发明提供了上述所述的组合物在食品领域中的应用，优选在压片糖果、饮料或凝胶糖果中的应用。本发明提供了一种食品组合物，其包含上述所述的组合物，所述组合物在食品组合物中所占的质量含量为0.1-70％。下面对本实施例所用的原料及设备的生产厂家，以及产品分析使用的设备和分析方法进行说明如下，其中所述的化学物质没有标明的均为常规试剂的化学纯级别。实施例所用到的原料的信息及实验设备如表1和表2所示表1实施例中所用到的原料的信息表2实施例中所用到的实验设备的信息设备名称型号生产厂家粉碎机40bv江阴市宏达粉体设备有限公司制粒机fl-200c宜春万申制药机械有限公司真空乳化搅拌机tfirj-80l-d温州天富机械有限公司压丸机770sr韩国昌城软胶囊技术有限公司压片机zpt-26北京翰林航宇科技发展有限公司混合机hzd-2000浙江迦南科技股份有限公司胶囊填充机njp-1200北京翰林航宇科技发展有限公司实施例一一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括40wt％酵母粉、30wt％裸藻粉、20wt％维生素e和10wt％维生素c。其制备过程如下：粉碎：将配方量的维生素c和维生素e在混合前用粉碎机粉碎；筛分：将粉碎后的维生素c、维生素e和酵母粉、裸藻粉分别过泰勒60目筛；混合：将过筛之后的物料混合；制剂：混合后的原料直接灌装胶囊，每粒胶囊灌装物料为0.5g；包装：胶囊采用瓶装，每瓶60粒。实施例二一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括30wt％酵母粉、40wt％裸藻粉、10wt％酵母β-葡聚糖、15wt％草莓粉、4.94wt％维生素c和0.06wt％甜菊糖苷；筛分：将配方量的酵母粉、裸藻粉、酵母β-葡聚糖、草莓粉、维生素c和甜菊糖苷分别过泰勒60目筛制剂：将物料按照料液比为1:10((m：v)，g/ml)加入无菌水中溶解混合调制成口服液灌装：将配制好的溶液进行袋装、20ml/袋。实施例三一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括10wt％酵母粉、40wt％裸藻粉、5wt％酵母β-葡聚糖、5wt％香菇多糖、34wt％微晶纤维素、2wt％羟丙甲纤维素、3wt％麦芽糊精、1wt％硬脂酸镁。筛分：将配方量的酵母粉、裸藻粉、酵母β-葡聚糖、香菇多糖、微晶纤维素和麦芽糊精分别过60目筛混合：将过筛之后的酵母粉、酵母β-葡聚糖、香菇多糖预先混合、然后再与裸藻粉、微晶纤维素、麦芽糊精一起混合5分钟制粒：将配方量的羟丙甲纤维素配制成2％浓度，然后与混合之后的物料加入制粒机中进行制粒整粒：将制粒之后的颗粒放入整粒筛整粒总混：然后将硬脂酸镁加入整好的颗粒中混合5分钟压片：总混好的物料用压片机压片包装：采用瓶装或者铝箔泡罩，每片1.0g。实施例四一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括15wt％酵母粉、10wt％裸藻粉和3wt％蜂蜡、72wt％玉米油，胶囊皮成分及比例：明胶、甘油、纯化水、二氧化钛＝1:0.5:1:0.01，其中，胶囊皮0.25-0.30g/粒。溶胶：将配方量中的三分之一甘油和配方量二氧化钛使用胶体研磨机研磨30min，然后将过完胶体磨的混合物与剩余甘油、纯化水、明胶一起投入配料罐溶胶得到胶囊皮。内容物配制：将配方量的玉米油加热至60℃投入蜂蜡，待蜂蜡完全融化成油蜡液，温度降至30℃时投入配方量的酵母粉和裸藻粉混合15分钟均质乳化：将内容物混合液转入均质机乳化20分钟过筛：内容物过泰勒60目筛压丸：将熬好的胶囊皮及过筛之后的内容物使用压丸机进行压丸，0.8g/粒干燥：丸子转入干燥间干燥包装：采用瓶装或者铝箔泡罩，每瓶60粒。实施例五一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括20wt％酵母粉、10wt％裸藻粉、10wt％燕麦β-葡聚糖、40wt％糖醇、15wt％甜橙粉和5wt％麦芽糊精过筛：将配方量的酵母粉、裸藻粉、燕麦β-葡聚糖、糖醇、甜橙粉和麦芽糊精过泰勒60目筛混合：将过完筛之后的物料置入混合机里混合20分钟包装：采用铝箔袋包装，每袋6g。实施例六一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括60wt％酵母粉、15wt％裸藻粉、15wt％骨原胶蛋白和10wt％淀粉。其制备过程如下：粉碎：将配方量的骨原胶蛋白在混合前用粉碎机粉碎；筛分：将粉碎后的骨原胶蛋白、淀粉、酵母粉和裸藻粉分别过泰勒60目筛；混合：将过筛之后的物料混合；制剂：混合后的原料直接灌装胶囊，每粒胶囊灌装物料为0.5g；包装：胶囊采用瓶装，每瓶60粒。实施例七一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括80wt％酵母粉、10wt％裸藻粉和10wt％酵母抽提物；筛分：将酵母粉、裸藻粉和酵母抽提物分别过泰勒60目筛；混合：将过筛之后的物料混合；制剂：混合后的原料经检测合格后包装；包装：使用铝箔袋内包、6g/袋。实施例八一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括90wt％酵母粉、5wt％裸藻粉和5wt％淀粉。其制备过程如下：筛分：将配方量的淀粉、酵母粉和裸藻粉分别过泰勒60目筛；混合：将过筛之后的物料混合；制剂：混合后的原料直接灌装胶囊，每粒胶囊灌装物料为0.5g；包装：胶囊采用瓶装，每瓶60粒。实施例九一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括5wt％酵母粉、80wt％裸藻粉、5wt％灵芝孢子粉和10wt％麦芽糊精。其制备过程如下：粉碎：将配方量的灵芝孢子粉和麦芽糊精在混合前用粉碎机粉碎；筛分：将粉碎后的灵芝孢子粉和麦芽糊精和酵母粉、裸藻粉分别过泰勒60目筛；混合：将过筛之后的物料混合；制剂：混合后的原料直接灌装胶囊，每粒胶囊灌装物料为0.5g；包装：胶囊采用瓶装，每瓶60粒。实施例十一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括5wt％酵母粉、5wt％裸藻粉、10wt％银杏提取物、65wt％糖醇和15wt％糊精。其制备过程如下：筛分：将配方量的酵母粉、裸藻粉和银杏提取物、糖醇、麦芽糊精分别过泰勒60目筛制剂：将物料按照料液比为1:10(m：v)，g/ml)加入无菌水中溶解混合调制成口服液灌装：将配制好的溶液进行袋装、20ml/袋。实施例十一一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括5wt％酵母粉、5wt％裸藻粉和90wt％酵母β-葡聚糖。过筛：将配方量的酵母粉、裸藻粉和酵母β-葡聚糖分别过泰勒60目筛混合：将过完筛之后的物料置入混合机里混合20分钟包装：采用铝箔袋包装，每袋6g。实施例十二一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括80wt％酵母粉和20wt％裸藻粉。其制备过程如下：筛分：将酵母粉、裸藻粉分别过泰勒60目筛；混合：将过筛之后的物料混合；制剂：混合后的原料直接灌装胶囊，每粒胶囊灌装物料为0.5g；包装：胶囊采用瓶装，每瓶60粒。实施例十三一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括10wt％酵母粉、10wt％裸藻粉和80wt％酵母β-葡聚糖。过筛：将配方量的酵母粉、裸藻粉和酵母β-葡聚糖分别过泰勒60目筛混合：将过完筛之后的物料置入混合机里混合20分钟包装：采用铝箔袋包装，每袋6g。对比例一一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括3wt％酵母粉、40wt％裸藻粉、5wt％酵母β-葡聚糖、5wt％香菇多糖、34wt％微晶纤维素、7wt％糖醇、2wt％羟丙甲纤维素、3wt％麦芽糊精、1wt％硬脂酸镁。筛分：将配方量的酵母粉、裸藻粉、酵母β-葡聚糖、香菇多糖、微晶纤维素、糖醇、麦芽糊精分别过60目筛。混合：将过筛之后的酵母粉、酵母β-葡聚糖、香菇多糖、糖醇、麦芽糊精预先混合、然后再与裸藻粉、微晶纤维素一起混合5分钟。制粒：将配方量的羟丙甲纤维素配制成2％浓度，然后与混合之后的物料加入制粒机中进行制粒。整粒：将制粒之后的颗粒放入整粒筛整粒。总混：然后将硬脂酸镁加入整好的颗粒中混合5分钟压片：总混好的物料用压片机压片。包装：采用瓶装或者铝箔泡罩，每片1g。对比例二一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括92wt％酵母粉、5wt％裸藻粉和3wt％淀粉。其制备过程如下：筛分：将配方量的淀粉和酵母粉、裸藻粉分别过泰勒60目筛；混合：将过筛之后的物料混合；制剂：混合后的原料直接灌装胶囊，每粒胶囊灌装物料为0.5g；包装：胶囊采用瓶装，每瓶60粒。对比例三一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括20wt％酵母粉、3wt％裸藻粉、10wt％燕麦β-葡聚糖、40wt％糖醇、15wt％甜橙粉、5wt％麦芽糊精和7wt％糊精过筛：将配方量的酵母粉、裸藻粉、燕麦β-葡聚糖、糖醇、甜橙粉、麦芽糊精和糊精分别过泰勒60目筛混合：将过完筛之后的物料置入混合机里混合20分钟包装：采用铝箔袋包装，每袋6g。对比例四一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括5wt％酵母粉、85wt％裸藻粉、5wt％灵芝孢子粉和5wt％麦芽糊精。其制备过程如下：筛分：将配方量的酵母粉、裸藻粉、灵芝孢子粉和麦芽糊精分别过泰勒60目筛；混合：将过筛之后的物料混合；制剂：混合后的原料直接灌装胶囊，每粒胶囊灌装物料为0.5g；包装：胶囊采用瓶装，每瓶60粒。应用实施例1动物试验1.1受试物参照实施例中的配方制备受试物，并用于喂养小鼠，评价其功效性。表3各受试物配方表受试物配方组分(质量比)受试物1实施例一所述的组合物受试物2实施例二所述的组合物受试物3实施例三所述的组合物受试物4实施例四所述的组合物受试物5实施例五所述的组合物受试物6实施例六所述的组合物受试物7实施例七所述的组合物受试物8实施例八所述的组合物受试物9实施例九所述的组合物受试物10实施例十所述的组合物受试物11实施例十一所述的组合物受试物12实施例十二所述的组合物受试物13实施例十三所述的组合物受试物14对比例一所述的组合物受试物15对比例二所述的组合物受试物16对比例三所述的组合物受试物17对比例四所述的组合物1.2试验动物清洁级balb/c小鼠，雄性，18～22g，来自三峡大学实验动物中心。(动物合格证号：scxk<鄂>2017-0012)。饲养环境为(23±2)摄氏度，湿度为40％-60％，明暗交替周期为12小时。1.3试验动物分组及灌胃剂量动物适应性喂养7d后，按体重水平将小鼠随机分为18组，每组10只，分别为阳性对照组、受试物1组-受试物17组。各受试物组以300mg/kg.bw的剂量灌胃对应受试物，阳性对照组不再灌胃受试物。1.4主要仪器与试剂显微镜、离心机、酶标仪、刀豆蛋白a(c0na)、mtt(四唑盐)、dnfb(2,4二硝基氟苯)、丙酮、生理盐水、甲醇、srbc(绵羊红细胞)、鸡红细胞、甲醇、giemsa染液、yac-1细胞、hanks液(ph7.2-7.4)、rpmi1640完全培养液、乳酸锂、碘硝基氯化四氮唑(int)、tris-hcl缓冲液(ph8.2)、1％np40、台盼兰、1mol/l盐酸等。1.5试验方法和结果(所得到的结果采用sas软件进行分析)1.5.1碳廓清实验和脏器/体重比值测定：在灌胃30天后，小鼠称重后，按体重从小鼠尾静脉注入稀释的印度墨汁(100ml/kg)，注入墨汁后2-10min，分别从小鼠内眦静脉丛取血20μl，并立即将其加到2ml0.1％na2co3溶液中，用721分光光度计在600nm处测光密度值(od)，以na2co3溶液做空白对照，第二天采血结束后，立即处死小鼠，取肝脏和脾脏，用滤纸吸干脏器表面血污，称重，计算吞噬指数，其结果如表4所示。表4各受试物组灌胃30天后的吞噬指数*与阳性对照组相比较，p＜0.05从表4可以看出，使用实施例一至十三所述的组合物的受试物1-13的小鼠碳廓清实验吞噬指数较高，而对照组(受试物1)以及使用对比例一至四的组合物的受试物14-17的小鼠碳廓清实验吞噬指数较低，并且，受试物1-13与对照组相比有显著差异，而受试物14-17与对照组相比无显著差异。1.5.2迟发型变态反应(dth)：小鼠连续灌胃30天后，每鼠腹部皮肤用脱毛剂进行脱毛处理，范围约3cmx3cm，后用dnfb(二硝基氟苯)溶液50μl均匀涂抹致敏；5天后在用dnfb溶液10μl均匀涂抹于小鼠右耳两面，24小时后，颈椎脱臼处死小鼠，用打孔器取下直径5mm的耳片称重，其结果如表5所示。表5dnfb诱导dth耳肿的结果组别(g/kg.bw)dnfb诱导dth耳肿程度(mg)阳性对照组7.56±1.31受试物19.59*±0.99受试物29.58*±1.43受试物39.55*±1.30受试物49.35*±1.10受试物59.41*±1.00受试物69.60*±1.01受试物79.64*±1.05受试物89.75*±1.27受试物99.62*±1.07受试物109.20*±1.28受试物119.24*±1.30受试物129.76*±1.22受试物139.31*±2.00受试物148.00±1.11受试物157.89±0.99受试物167.86±1.33受试物177.88±1.00*与阳性对照组相比较，p＜0.05从表5可以看出，与阳性对照组相比，受试物1-13耳肿程度差异显著，而受试物14-17的耳肿程度差异不显著，这表明受试物1-13具有显著增强小鼠免疫细胞的功能。受试物14和受试物3以及受试物15和受试物8相比，其区别在于，所使用的酵母粉均在本发明的酵母粉的范围之外，从表8可以看出，使用受试物3后，dnfb诱导dth耳肿程度为9.55，而使用受试物14后，dnfb诱导dth耳肿程度为8.00；使用受试物8后，dnfb诱导dth耳肿程度为9.75，而使用受试物15后，dnfb诱导dth耳肿程度为7.89，这说明采用本发明特定范围的酵母粉的组合物具有显著增强小鼠免疫细胞的功能。受试物16和受试物5以及受试物17和受试物9相比，其区别在于，所使用的裸藻粉均在本发明的裸藻粉的范围之外，从表8可以看出，使用受试物5后，dnfb诱导dth耳肿程度为9.41，而使用受试物16后，dnfb诱导dth耳肿程度为7.86；使用受试物9后，dnfb诱导dth耳肿程度为9.62，而使用受试物17后，dnfb诱导dth耳肿程度为7.88，这说明采用本发明特定范围的裸藻粉的组合物具有显著增强小鼠免疫细胞的功能。1.5.3半数溶血值(hc50)的测定和抗体生成细胞检测：小鼠连续灌胃30天后，每只鼠腹腔注射2％srbc(绵羊红细胞)的细胞悬液0.2ml进行免疫。5天后，取小鼠血及脾脏分别做hc50的测定和抗体生成细胞检测，其结果如表6所示。其中，半数溶血值(hc50)的测定方法为：小鼠摘除眼球取血于离心管中，放置约1小时，使血清析出，2000r/min离心10分钟，收集血清。用生理盐水稀释血清(300倍)，将稀释后的血清1ml置于试管内，依次加入10％srbc0.5ml，补体1ml(用生理盐水按1:10稀释)，另设不加血清的对照管(以生理盐水代替)，置37℃恒温水浴中保温15-30min后终止。2000r/min离心10min，取上清液1ml，加都氏试剂3ml于试管内，同时取10％srbc0.25ml加都氏试剂至4ml与另一试管内，混合均匀，放置10min后于540nm处以对照管作空白，分别测定各管光密度值；抗体生成细胞检测的方法为：取srbc免疫5天后的小鼠脾脏，放在盛有hanks液的小平皿内，轻轻磨碎脾脏，经200目筛网过滤，制成单细胞悬液。离心10min(1000r/min)，用hanks液洗2次，将细胞悬浮于5mlrpmi1640培养液中，计数细胞，并将细胞浓度调整为5x106个/ml。将表层培养基加热溶解后，与等量ph7.2-7.4、2倍浓度的hanks液混合，分装小试管，每管0.5ml，在向管内加50μl10％srbc，20μl脾细胞悬液，迅速混匀，倾倒于已刷琼脂糖薄层的玻片上，做平行片，待琼脂凝固后，将玻片扣放在片架上，放入co2培养箱中孵育1-1.5小时，然后用sa(链霉亲和素)稀释的补体(1:8)加入玻片架凹槽内，继续温育1-1.5小时后，计数溶血空斑数。表6半数溶血值和抗体生成细胞检测结果组别(g/kg.bw)抗体生成细胞检测溶血空斑数(/106脾细胞)半数溶血值(hc50)阳性对照组290±8019.69±5.95受试物1341*±6128.80*±6.28受试物2337*±7028.00*±6.00受试物3335*±6127.42*±5.24受试物4329*±6625.37*±5.78受试物5332*±6126.61*±6.04受试物6348*±8129.52*±5.87受试物7357*±7531.07*±5.55受试物8360*±8933.90*±5.34受试物9355*±7730.23*±5.86受试物10320*±8323.99*±5.39受试物11324*±9924.87*±5.99受试物12365*±7935.00*±6.37受试物13325*±8725.10*±5.89受试物14298±7919.70±5.94受试物15299±7519.81±6.00受试物16305±7019.89±5.34受试物17300±7319.82±5.87*与阳性对照组相比较，p＜0.05从表6可以看出，在抗体生成细胞实验中，与阳性对照组相比，受试物1-13脾细胞溶血空斑数差异显著以及小鼠半数溶血值差异显著，而受试物14-17的脾细胞溶血空斑数和小鼠半数溶血差异显著，表明受试物1-13对小鼠的体液免疫功能具有显著的增强作用；受试物14和受试物3以及受试物15和受试物8相比，其区别在于，所使用的酵母粉均在本发明的酵母粉的范围之外，从表8可以看出，使用受试物3抗体生成细胞检测溶血空斑数为335，半数溶血值为27.42，而使用受试物14抗体生成细胞检测溶血空斑数为298，半数溶血值为19.70；使用受试物8抗体生成细胞检测溶血空斑数为360，半数溶血值为33.90，而使用受试物15抗体生成细胞检测溶血空斑数为299，半数溶血值为19.81，这说明采用本发明特定范围的酵母粉的组合物对小鼠的体液免疫功能具有显著的增强作用。受试物16和受试物5以及受试物17和受试物9相比，其区别在于，所使用的裸藻粉均在本发明的裸藻粉的范围之外，从表8可以看出，使用受试物5抗体生成细胞检测溶血空斑数为332，半数溶血值为26.61，而使用受试物16抗体生成细胞检测溶血空斑数为305，半数溶血值为19.89；使用受试物9抗体生成细胞检测溶血空斑数为355，半数溶血值为30.23，而使用受试物17抗体生成细胞检测溶血空斑数为300，半数溶血值为19.82，这说明采用本发明特定范围的裸藻粉的组合物对小鼠的体液免疫功能具有显著的增强作用。1.5.4小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验(半体内法)：小鼠连续灌胃30天后，每鼠腹腔注射2％鸡红细胞悬液1ml。30min后，颈椎脱臼处死动物，仰位固定于蜡板上，正中剪开腹部皮肤，经腹腔注入生理盐水2ml，转动鼠板1min，然后吸出腹腔洗液1ml，平均分别滴于2片载玻片上，放入垫有湿纱布的搪瓷盒内，于37℃孵箱温育30min。孵毕，在生理盐水中漂洗，除去未贴片细胞，晾干，以1:1丙酮甲醇溶液固定20min，4％giemsa-磷酸缓冲液染色3min，再用蒸馏水漂洗晾干，显微镜下计数吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数及被吞噬的鸡红细胞数，计算吞噬率和吞噬指数，其结果如表7所示。其中，吞噬率(％)＝(吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/计数的巨噬细胞数)x100吞噬指数＝被吞噬的鸡红细胞总数/计数的巨噬细胞数表7小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的结果*与阳性对照组相比较，p＜0.05从表7可以看出，与阳性对照组相比，受试物1-13小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率、吞噬指数与阳性对照组相比，差异显著，而受试物14-17的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率、吞噬指数与阳性对照组相比，差异不显著，表明受试物1-13对于小鼠巨噬细胞的活性具有显著的增强作用。受试物14和受试物3以及受试物15和受试物8相比，其区别在于，所使用的酵母粉均在本发明的酵母粉的范围之外，从表7可以看出，使用受试物3对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率为34.33，吞噬指数为0.52，而使用受试物14对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率为22.95，吞噬指数为0.36；使用受试物8对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率为35.00，吞噬指数为0.56，而使用受试物15对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率为22.98，吞噬指数为0.36，这说明采用本发明特定范围的酵母粉的组合物对于小鼠巨噬细胞的活性具有显著的增强作用。受试物16和受试物5以及受试物17和受试物9相比，其区别在于，所使用的裸藻粉均在本发明的裸藻粉的范围之外，从表8可以看出，使用受试物5对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率为34.29，吞噬指数为0.50，而使用受试物16对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率为22.95，吞噬指数为0.37；使用受试物9对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率为34.70，吞噬指数为0.54，而使用受试物17对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率为22.93，吞噬指数为0.38，这说明采用本发明特定范围的裸藻粉的组合物对于小鼠巨噬细胞的活性具有显著的增强作用。1.5.5cona(刀豆球蛋白)诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验和小鼠nk细胞活性测定(乳酸脱氢酶ldh测定法)：小鼠连续灌胃30天后，颈椎脱臼处死，无菌取脾，置于盛有适量无菌hanks液的小平皿中，用镊子轻轻将脾撕碎，经200目筛网过滤，制成单细胞悬液，将细胞悬液分为2部分，分别用于cona诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验和小鼠nk细胞活性测定，其结果如表8所示。其中，cona诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验的方法为：用hanks液洗涤细胞悬液2次，每次离心10min(1000r/min)，然后将细胞悬浮于1ml的完全培养液中，台盼兰染色计数活细胞数(在95％以上)，调整细胞浓度为3x106个/ml。将每份细胞悬液分2孔加入24孔培养板中，每孔1ml，一孔加75μlcona液，另一孔作为对照，置培养箱中培养72小试。培养结束前4小时，每孔吸取上清0.7ml，加入0.7ml不含血清的rpmi1640培养液，同时加入mtt50μl/孔，继续培养4小时。培养结束后每孔1ml酸性异丙醇，吹打均匀，使紫色结晶全完溶解。然后分装到96孔培养板，每孔做3个平行孔，用酶标仪以570nm波长测定光密度值。小鼠nk细胞活性测定(乳酸脱氢酶ldh测定法)的方法为：试验前24小时将靶细胞传代培养，应用前以hanks液洗涤3次，用rpmi1640完全培养液调整细胞浓度为4x105个/ml，用hanks液洗涤脾细胞悬液2次，每次离心10min(1000r/min)。弃上清将细胞浆弹起，加入0.5ml生理盐水灭菌20秒，裂解红细胞后再加入8mlhanks液，离心10min(1000r/min)，用1ml完全培养基重悬，用1％冰醋酸稀释后计数，台盼兰染色计数活细胞数(应在95％以上)，调整细胞浓度为1x107个/ml。取靶细胞和效应细胞各100μl(效靶比50:1)，加入96孔板培养板中，靶细胞自然释放孔加靶细胞和培养液各100μl，靶细胞最大释放孔加靶细胞和1％np40各100μl，上述各项均设三个复孔，于37℃、5％co2培养箱中培养4小时，然后将培养板离心(1500r/min)5min，每孔吸取上清100μl置96孔培养板中，同时加入ldh基质液100μl，反应3min，每孔加入1mol/l的hcl30μl，在酶标仪490nm处测定光密度值(od)。表8cona(刀豆球蛋白)诱导的小鼠脾淋巴细胞转化和nk细胞活性测定结果(n＝10)组别(g/kg.bw)cona诱导脾淋巴细胞增殖od差值nk细胞活性％对照组0.410±0.01143.13±11.10受试物10.705*±0.01462.10*±11.35受试物20.700*±0.01361.34*±10.99受试物30.651*±0.01360.89*±11.00受试物40.531*±0.01558.50*±10.80受试物50.623*±0.01259.92*±10.98受试物60.709*±0.02062.49*±11.38受试物70.728*±0.02463.29*±11.40受试物80.745*±0.02365.87*±11.40受试物90.718*±0.01963.00*±11.39受试物100.525*±0.01158.45*±10.80受试物110.529*±0.02258.46*±10.70受试物120.754*±0.01968.39*±11.41受试物130.530*±0.02458.49*±10.80受试物140.430±0.02145.13±10.99受试物150.428±0.01145.30±10.98受试物160.425±0.01745.31±11.01受试物170.427±0.01645.35±11.07*与阳性对照组相比较，p＜0.05从表8可以看出，与阳性对照组相比，受试物1-13在小鼠脾淋巴细胞转化实验中，淋巴细胞增殖实验的od值差异显著，表明受试物1-13具有显著增强小鼠免疫细胞的功能；并且与对照组相比，受试物1-13对小鼠nk细胞活性的影响差异显著，表明受试物1-13对于小鼠nk细胞活性具有显著的增强作用。受试物14和受试物3以及受试物15和受试物8相比，其区别在于，所使用的酵母粉均在本发明的酵母粉的范围之外，从表8可以看出，使用受试物3的cona诱导脾淋巴细胞增殖od差值为0.651，而使用受试物14的cona诱导脾淋巴细胞增殖od差值为0.430；使用受试物8的cona诱导脾淋巴细胞增殖od差值为0.745，而使用受试物15的cona诱导脾淋巴细胞增殖od差值为0.428，这说明采用本发明特定范围的酵母粉的组合物能够显著增强小鼠免疫功能。类似的，使用受试物3对小鼠nk细胞活性为60.89，而使用受试物14对小鼠nk细胞活性为45.13；使用受试物8对小鼠nk细胞活性为65.87，而使用受试物15对小鼠nk细胞活性为45.30，说明采用发明特定范围的酵母粉的组合物对于小鼠nk细胞活性具有显著的增强作用。受试物16和受试物5以及受试物17和受试物9相比，其区别在于，所使用的裸藻粉均在本发明的裸藻粉的范围之外，从表8可以看出，使用受试物5的cona诱导脾淋巴细胞增殖od差值为0.623，而使用受试物16的cona诱导脾淋巴细胞增殖od差值为0.425；使用受试物9的cona诱导脾淋巴细胞增殖od差值为0.718，而使用受试物17的cona诱导脾淋巴细胞增殖od差值为0.427，这说明采用本发明特定范围的裸藻粉的组合物能够显著增强小鼠免疫功能。类似的，使用受试物5对小鼠nk细胞活性为59.92，而使用受试物16对小鼠nk细胞活性为45.31；使用受试物9对小鼠nk细胞活性为63.00，而使用受试物17对小鼠nk细胞活性为45.35，说明采用发明特定范围的裸藻粉的组合物对于小鼠nk细胞活性具有显著的增强作用。综上所述，根据保健食品检验与评价技术规范，在细胞免疫功能、体液免疫功能、单核——巨噬细胞功能、nk细胞活性四个方面任两个方面结果阳性，可判定该受试物具有增强免疫力的功能作用，从上述的实验数据可以看出，本发明所述的组合物具有增强免疫力的作用。以上所述，仅是本发明实施的较佳实施例，并非对本发明做任何形式上的限制，凡在本发明的精神和原则之内所做的修改、等同替换和改进等，均需要包含在本发明的保护范围之内。当前第1页1 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技术领域：
，具体涉及一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物、制法和应用。
背景技术：
：酵母中含有丰富的蛋白质、维生素、矿物质、功能酶等营养素。其氨基酸包括人体所需的8种必需氨基酸；不仅含有b族维生素，锌、硒、镁、铬等矿物质，还含有酵母葡聚糖。它是以β-1,3-d-葡聚糖为主链，短的β-1,6-d-葡聚糖为支链的多糖。能够激活人体的免疫系统、包括增加天然杀伤细胞的活性和t细胞介导的细胞毒性、增强外周单核细胞的增殖应答产生分裂素，刺激释放白介素以及诱导嗜中性粒细胞的吞噬作用。裸藻粉是一种单细胞生物，含有丰富的营养物质有维生素、矿物质、氨基酸、不饱和脂肪酸、叶绿素、玉米黄质等59中人体必需的营养元素。其中最重要的是含有50％以上的裸藻粉β(1,3)-葡聚糖，它可激活免疫应答，作为非特异性免疫的一部分，保护人体免受病原体入侵。且可降低肠道炎症，显著改善肠道健康，保持肠道菌群稳定。近年来，酵母粉和裸藻粉被广泛研究，主要集中在营养机理方面，也有部分产品涌现，但是以酵母粉和裸藻粉为组合物的产品并不多见。cn107348299a涉及食品领域，具体提供了一种含有裸藻粉和酵母β-葡聚糖及其它成分的组合物，是一种具有护肝解酒功效的固体饮料，其主要涉及护肝解酒的功效，未涉及增强免疫力与抗辐射功效。cn105687109a涉及日用化妆品领域，具体提供了一种包含细小裸藻和酵母抽提物的祛痘修复精华，cn105707435a涉及动物养殖领域，具体涉及利用天然生物提取物与植物，动物提取物，微量元素，微生物菌为基本原料的一种无抗富硒性饲料添加剂的配制方法，包含裸藻粉、酵母硒、酿酒酵母；其分别涉及化妆品领域和动物养殖领域，不涉及食品领域。技术实现要素：为此，本发明所解决的技术的问题是：本发明提供了一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，所述的组合物具有增强免疫力的性能。本发明提供了一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，所述组合物包含第一活性成分、可选择的第二活性成分和可选择的辅料，所述第一活性成分包含酵母粉和裸藻粉，按其在组合物中所占的质量计，所述酵母粉的含量为5-90％，所述裸藻粉的含量为5-80％。本发明提供了上述所述的组合物的制备方法，其是将所述第一活性成分、可选择的第二活性成分和可选择的辅料进行混合得到。本发明提供了包含裸藻粉和酵母粉的组合物在食品领域中的应用。本发明提供了一种食品组合物，其包含上述所述的组合物，所述组合物在食品组合物中所占的质量含量为0.1-70％。具体来说，本发明提出了如下技术方案。本发明提供了一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其中，所述组合物包含第一活性成分、可选择的第二活性成分和可选择的辅料，所述第一活性成分包含酵母粉和裸藻粉，按其在组合物中所占的质量计，所述酵母粉的含量为5-90％，所述裸藻粉的含量为5-80％。优选的，对于上述所述的组合物，其中，所述酵母粉的含量为10-80％，优选为10-60％，较优选为10-40％；所述裸藻粉的含量为5-60％，优选为5-40％。优选的，对于上述所述的组合物，其中，所述可选择的第二活性成分的质量含量为7.06-90％，优选为10-80％，较优选为10-30％；优选的，所述可选择的第二活性成分选自于1-90％的酵母β-葡聚糖、5-40％骨胶原蛋白、0.01-15％的酵母抽提物、0.05-15％的燕麦β-葡聚糖、0.05-5％的香菇多糖、0.5-40％的维生素c、0.5-40％的维生素e、0-1％的维生素a、0-3％的β胡萝卜素、0-1％的vb1、0-1％的vb2、0-1％的vb3、0-15％的人参提取物、0-10％的灵芝孢子粉和0-20％的姜黄提取物中的一种或两种以上。优选的，对于上述所述的组合物，其中，所述可选择的辅料的质量含量为5-90％，优选为20-72％。优选的，对于上述所述的组合物，其中，所述可选择的辅料选自于1-10％的麦芽糊精、1-80％糖醇、1-60％的微晶纤维素、1-60％的淀粉、1-80％的蔗糖、1-80％葡萄糖、1-15％的糊精、1-60％的乳糖、70-90％的玉米油、1-5％的羧甲基纤维钠、1-3％的羟丙甲纤维素、1-15％的水果粉、0.01-0.08％甜菊糖苷、0.01-1％的硬脂酸镁、10-85％植物油、1-6％蜂蜡、1-6％单双甘油酯、1-30％明胶、1-20％甘油、1-5％香精和1-5％色素中的一种或两种以上；优选的，所述水果粉为甜橙粉或草莓粉。优选的，对于上述所述的组合物，其中，所述组合物的剂型选自于片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊或口服液中的一种。本发明提供了上述所述组合物的制备方法，其是将所述第一活性成分、可选择的第二活性成分和可选择的辅料进行混合得到。本发明提供了上述所述的组合物或上述所述的制备方法制备得到的组合物在食品领域中的应用，优选在压片糖果、饮料或凝胶糖果中的应用。本发明提供了一种食品组合物，其包含上述所述的组合物或上述所述的制备方法制备得到的组合物，所述组合物在食品组合物中所占的质量含量为0.1-70％。本发明所取得的有益效果是：本发明的包含裸藻粉和酵母粉的组合物同时使用了酵母粉和裸藻粉，达到全面协同的作用，所述的组合物具有增强免疫力的技术效果。菌株保藏信息本发明所用的菌种酿酒酵母z2.2(saccharomycescerevisiaez2.2)来自安琪酵母股份有限公司出售的型号为ny005的酿酒酵母，于2005年10月25日保藏在中国典型培养物保藏中心(cctcc)，保藏编号为cctccno:m205128，保藏地址：中国.武汉.武汉大学，邮政编码：430072；电话：(027)-68754052，且在专利文献cn103907767a中已记载。具体实施方式如上所述，本发明提供了一种含有裸藻粉和酵母粉的组合物，所述组合物包含第一活性成分以及可选择的第二活性成分和可选择的辅料，所述第一活性成分包含酵母粉和裸藻粉，按其在组合物中所占的质量计，所述酵母粉的含量为5-90％，所述裸藻粉的含量为5-80％。对于可选择的第二活性成分是指所述的组合物既可以包含第二活性成分，也可以不包含第二活性成分。对于可选择的辅料是指所述的组合物既可以包含辅料，也可以不包含辅料。所述的酵母粉通过下述步骤制备得到：1)菌种活化：挑取菌落一环放入ypd液体培养基中，放入摇床中将菌种活化。2)菌种纯化：将上一步活化后的菌液梯度稀释铺平板，以获取单个菌落。3)菌种扩大培养：挑取上一步平板中单个菌落接种至200mlypd液体培养基，在30℃下，220rpm转速下培养18h；二级种子培养，按照二级培养基体积的10％将一级培养的种子接入1l二级培养基，28℃下，200rpm转速下培养18h；其ph控制在5.5。4)种子富集：5000rpm离心，用钙离子和镁离子含量低的去离子水洗涤3次，富集得到酿酒酵母种子，至酵母湿重为220g/l。5)酵母乳高温干燥成粉：对以上得到的酵母乳升温至90℃，保持1h,使其失活，然后进行离心，离心速度为5000rpm，5min。得到的重相经喷雾干燥塔干燥成酵母粉。在本发明优选的一种具体实施例方式中，其中，所述酵母粉的含量为10-80％，优选为10-60％，较优选为10-40％；所述裸藻粉的含量为5-60％，优选为5-40％。在本发明优选的一种具体实施方式中，其中，所述可选择的第二活性成分的质量含量为7.06-90％，优选为10-80％，较优选为10-30％；优选的，所述可选择的第二活性成分选自于1-90％的酵母β-葡聚糖、5-40％骨胶原蛋白、0.01-15％的酵母抽提物、0.05-15％的燕麦β-葡聚糖、0.05-5％的香菇多糖、0.5-40％的维生素c、0.5-40％的维生素e、0-1％的维生素a、0-3％的β胡萝卜素、0-1％的vb1、0-1％的vb2、0-1％的vb3、0-15％的人参提取物、0-10％的灵芝孢子粉和0-20％的姜黄提取物中的一种或两种以上。在本发明优选的一种具体实施方式中，其中，所述可选择的辅料的质量含量为5-90％，优选为20-72％；优选的，所述可选择的辅料选自于1-10％的麦芽糊精、1-80％的糖醇、1-60％的微晶纤维素、1-60％的淀粉、1-80％的蔗糖、1-80％葡萄糖、1-15％的糊精、1-60％的乳糖、70-90％的玉米油、1-5％的羧甲基纤维钠、1-3％的羟丙甲纤维素、1-15％的水果粉、0.01-0.08％甜菊糖苷、0.01-1％的硬脂酸镁、10-85％植物油、1-6％蜂蜡、1-6％单双甘油酯、1-30％明胶、1-20％甘油、1-5％香精和1-5％色素中的一种或两种以上；优选的，所述水果粉为甜橙粉或草莓粉。优选的，所述组合物的剂型选自于片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊或口服液中的一种。本发明提供了一种上述所述的组合物的制备方法，其是将所述第一活性成分、可选择的第二活性成分和可选择的辅料进行混合得到；优选的，在进行混合后，进行成型，再进行包装得到。本发明提供了上述所述的组合物在食品领域中的应用，优选在压片糖果、饮料或凝胶糖果中的应用。本发明提供了一种食品组合物，其包含上述所述的组合物，所述组合物在食品组合物中所占的质量含量为0.1-70％。下面对本实施例所用的原料及设备的生产厂家，以及产品分析使用的设备和分析方法进行说明如下，其中所述的化学物质没有标明的均为常规试剂的化学纯级别。实施例所用到的原料的信息及实验设备如表1和表2所示表1实施例中所用到的原料的信息表2实施例中所用到的实验设备的信息设备名称型号生产厂家粉碎机40bv江阴市宏达粉体设备有限公司制粒机fl-200c宜春万申制药机械有限公司真空乳化搅拌机tfirj-80l-d温州天富机械有限公司压丸机770sr韩国昌城软胶囊技术有限公司压片机zpt-26北京翰林航宇科技发展有限公司混合机hzd-2000浙江迦南科技股份有限公司胶囊填充机njp-1200北京翰林航宇科技发展有限公司实施例一一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括40wt％酵母粉、30wt％裸藻粉、20wt％维生素e和10wt％维生素c。其制备过程如下：粉碎：将配方量的维生素c和维生素e在混合前用粉碎机粉碎；筛分：将粉碎后的维生素c、维生素e和酵母粉、裸藻粉分别过泰勒60目筛；混合：将过筛之后的物料混合；制剂：混合后的原料直接灌装胶囊，每粒胶囊灌装物料为0.5g；包装：胶囊采用瓶装，每瓶60粒。实施例二一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括30wt％酵母粉、40wt％裸藻粉、10wt％酵母β-葡聚糖、15wt％草莓粉、4.94wt％维生素c和0.06wt％甜菊糖苷；筛分：将配方量的酵母粉、裸藻粉、酵母β-葡聚糖、草莓粉、维生素c和甜菊糖苷分别过泰勒60目筛制剂：将物料按照料液比为1:10((m：v)，g/ml)加入无菌水中溶解混合调制成口服液灌装：将配制好的溶液进行袋装、20ml/袋。实施例三一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括10wt％酵母粉、40wt％裸藻粉、5wt％酵母β-葡聚糖、5wt％香菇多糖、34wt％微晶纤维素、2wt％羟丙甲纤维素、3wt％麦芽糊精、1wt％硬脂酸镁。筛分：将配方量的酵母粉、裸藻粉、酵母β-葡聚糖、香菇多糖、微晶纤维素和麦芽糊精分别过60目筛混合：将过筛之后的酵母粉、酵母β-葡聚糖、香菇多糖预先混合、然后再与裸藻粉、微晶纤维素、麦芽糊精一起混合5分钟制粒：将配方量的羟丙甲纤维素配制成2％浓度，然后与混合之后的物料加入制粒机中进行制粒整粒：将制粒之后的颗粒放入整粒筛整粒总混：然后将硬脂酸镁加入整好的颗粒中混合5分钟压片：总混好的物料用压片机压片包装：采用瓶装或者铝箔泡罩，每片1.0g。实施例四一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括15wt％酵母粉、10wt％裸藻粉和3wt％蜂蜡、72wt％玉米油，胶囊皮成分及比例：明胶、甘油、纯化水、二氧化钛＝1:0.5:1:0.01，其中，胶囊皮0.25-0.30g/粒。溶胶：将配方量中的三分之一甘油和配方量二氧化钛使用胶体研磨机研磨30min，然后将过完胶体磨的混合物与剩余甘油、纯化水、明胶一起投入配料罐溶胶得到胶囊皮。内容物配制：将配方量的玉米油加热至60℃投入蜂蜡，待蜂蜡完全融化成油蜡液，温度降至30℃时投入配方量的酵母粉和裸藻粉混合15分钟均质乳化：将内容物混合液转入均质机乳化20分钟过筛：内容物过泰勒60目筛压丸：将熬好的胶囊皮及过筛之后的内容物使用压丸机进行压丸，0.8g/粒干燥：丸子转入干燥间干燥包装：采用瓶装或者铝箔泡罩，每瓶60粒。实施例五一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括20wt％酵母粉、10wt％裸藻粉、10wt％燕麦β-葡聚糖、40wt％糖醇、15wt％甜橙粉和5wt％麦芽糊精过筛：将配方量的酵母粉、裸藻粉、燕麦β-葡聚糖、糖醇、甜橙粉和麦芽糊精过泰勒60目筛混合：将过完筛之后的物料置入混合机里混合20分钟包装：采用铝箔袋包装，每袋6g。实施例六一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括60wt％酵母粉、15wt％裸藻粉、15wt％骨原胶蛋白和10wt％淀粉。其制备过程如下：粉碎：将配方量的骨原胶蛋白在混合前用粉碎机粉碎；筛分：将粉碎后的骨原胶蛋白、淀粉、酵母粉和裸藻粉分别过泰勒60目筛；混合：将过筛之后的物料混合；制剂：混合后的原料直接灌装胶囊，每粒胶囊灌装物料为0.5g；包装：胶囊采用瓶装，每瓶60粒。实施例七一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括80wt％酵母粉、10wt％裸藻粉和10wt％酵母抽提物；筛分：将酵母粉、裸藻粉和酵母抽提物分别过泰勒60目筛；混合：将过筛之后的物料混合；制剂：混合后的原料经检测合格后包装；包装：使用铝箔袋内包、6g/袋。实施例八一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括90wt％酵母粉、5wt％裸藻粉和5wt％淀粉。其制备过程如下：筛分：将配方量的淀粉、酵母粉和裸藻粉分别过泰勒60目筛；混合：将过筛之后的物料混合；制剂：混合后的原料直接灌装胶囊，每粒胶囊灌装物料为0.5g；包装：胶囊采用瓶装，每瓶60粒。实施例九一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括5wt％酵母粉、80wt％裸藻粉、5wt％灵芝孢子粉和10wt％麦芽糊精。其制备过程如下：粉碎：将配方量的灵芝孢子粉和麦芽糊精在混合前用粉碎机粉碎；筛分：将粉碎后的灵芝孢子粉和麦芽糊精和酵母粉、裸藻粉分别过泰勒60目筛；混合：将过筛之后的物料混合；制剂：混合后的原料直接灌装胶囊，每粒胶囊灌装物料为0.5g；包装：胶囊采用瓶装，每瓶60粒。实施例十一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括5wt％酵母粉、5wt％裸藻粉、10wt％银杏提取物、65wt％糖醇和15wt％糊精。其制备过程如下：筛分：将配方量的酵母粉、裸藻粉和银杏提取物、糖醇、麦芽糊精分别过泰勒60目筛制剂：将物料按照料液比为1:10(m：v)，g/ml)加入无菌水中溶解混合调制成口服液灌装：将配制好的溶液进行袋装、20ml/袋。实施例十一一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括5wt％酵母粉、5wt％裸藻粉和90wt％酵母β-葡聚糖。过筛：将配方量的酵母粉、裸藻粉和酵母β-葡聚糖分别过泰勒60目筛混合：将过完筛之后的物料置入混合机里混合20分钟包装：采用铝箔袋包装，每袋6g。实施例十二一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括80wt％酵母粉和20wt％裸藻粉。其制备过程如下：筛分：将酵母粉、裸藻粉分别过泰勒60目筛；混合：将过筛之后的物料混合；制剂：混合后的原料直接灌装胶囊，每粒胶囊灌装物料为0.5g；包装：胶囊采用瓶装，每瓶60粒。实施例十三一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括10wt％酵母粉、10wt％裸藻粉和80wt％酵母β-葡聚糖。过筛：将配方量的酵母粉、裸藻粉和酵母β-葡聚糖分别过泰勒60目筛混合：将过完筛之后的物料置入混合机里混合20分钟包装：采用铝箔袋包装，每袋6g。对比例一一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括3wt％酵母粉、40wt％裸藻粉、5wt％酵母β-葡聚糖、5wt％香菇多糖、34wt％微晶纤维素、7wt％糖醇、2wt％羟丙甲纤维素、3wt％麦芽糊精、1wt％硬脂酸镁。筛分：将配方量的酵母粉、裸藻粉、酵母β-葡聚糖、香菇多糖、微晶纤维素、糖醇、麦芽糊精分别过60目筛。混合：将过筛之后的酵母粉、酵母β-葡聚糖、香菇多糖、糖醇、麦芽糊精预先混合、然后再与裸藻粉、微晶纤维素一起混合5分钟。制粒：将配方量的羟丙甲纤维素配制成2％浓度，然后与混合之后的物料加入制粒机中进行制粒。整粒：将制粒之后的颗粒放入整粒筛整粒。总混：然后将硬脂酸镁加入整好的颗粒中混合5分钟压片：总混好的物料用压片机压片。包装：采用瓶装或者铝箔泡罩，每片1g。对比例二一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括92wt％酵母粉、5wt％裸藻粉和3wt％淀粉。其制备过程如下：筛分：将配方量的淀粉和酵母粉、裸藻粉分别过泰勒60目筛；混合：将过筛之后的物料混合；制剂：混合后的原料直接灌装胶囊，每粒胶囊灌装物料为0.5g；包装：胶囊采用瓶装，每瓶60粒。对比例三一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括20wt％酵母粉、3wt％裸藻粉、10wt％燕麦β-葡聚糖、40wt％糖醇、15wt％甜橙粉、5wt％麦芽糊精和7wt％糊精过筛：将配方量的酵母粉、裸藻粉、燕麦β-葡聚糖、糖醇、甜橙粉、麦芽糊精和糊精分别过泰勒60目筛混合：将过完筛之后的物料置入混合机里混合20分钟包装：采用铝箔袋包装，每袋6g。对比例四一种包含裸藻粉和酵母粉的组合物，其包括5wt％酵母粉、85wt％裸藻粉、5wt％灵芝孢子粉和5wt％麦芽糊精。其制备过程如下：筛分：将配方量的酵母粉、裸藻粉、灵芝孢子粉和麦芽糊精分别过泰勒60目筛；混合：将过筛之后的物料混合；制剂：混合后的原料直接灌装胶囊，每粒胶囊灌装物料为0.5g；包装：胶囊采用瓶装，每瓶60粒。应用实施例1动物试验1.1受试物参照实施例中的配方制备受试物，并用于喂养小鼠，评价其功效性。表3各受试物配方表受试物配方组分(质量比)受试物1实施例一所述的组合物受试物2实施例二所述的组合物受试物3实施例三所述的组合物受试物4实施例四所述的组合物受试物5实施例五所述的组合物受试物6实施例六所述的组合物受试物7实施例七所述的组合物受试物8实施例八所述的组合物受试物9实施例九所述的组合物受试物10实施例十所述的组合物受试物11实施例十一所述的组合物受试物12实施例十二所述的组合物受试物13实施例十三所述的组合物受试物14对比例一所述的组合物受试物15对比例二所述的组合物受试物16对比例三所述的组合物受试物17对比例四所述的组合物1.2试验动物清洁级balb/c小鼠，雄性，18～22g，来自三峡大学实验动物中心。(动物合格证号：scxk<鄂>2017-0012)。饲养环境为(23±2)摄氏度，湿度为40％-60％，明暗交替周期为12小时。1.3试验动物分组及灌胃剂量动物适应性喂养7d后，按体重水平将小鼠随机分为18组，每组10只，分别为阳性对照组、受试物1组-受试物17组。各受试物组以300mg/kg.bw的剂量灌胃对应受试物，阳性对照组不再灌胃受试物。1.4主要仪器与试剂显微镜、离心机、酶标仪、刀豆蛋白a(c0na)、mtt(四唑盐)、dnfb(2,4二硝基氟苯)、丙酮、生理盐水、甲醇、srbc(绵羊红细胞)、鸡红细胞、甲醇、giemsa染液、yac-1细胞、hanks液(ph7.2-7.4)、rpmi1640完全培养液、乳酸锂、碘硝基氯化四氮唑(int)、tris-hcl缓冲液(ph8.2)、1％np40、台盼兰、1mol/l盐酸等。1.5试验方法和结果(所得到的结果采用sas软件进行分析)1.5.1碳廓清实验和脏器/体重比值测定：在灌胃30天后，小鼠称重后，按体重从小鼠尾静脉注入稀释的印度墨汁(100ml/kg)，注入墨汁后2-10min，分别从小鼠内眦静脉丛取血20μl，并立即将其加到2ml0.1％na2co3溶液中，用721分光光度计在600nm处测光密度值(od)，以na2co3溶液做空白对照，第二天采血结束后，立即处死小鼠，取肝脏和脾脏，用滤纸吸干脏器表面血污，称重，计算吞噬指数，其结果如表4所示。表4各受试物组灌胃30天后的吞噬指数*与阳性对照组相比较，p＜0.05从表4可以看出，使用实施例一至十三所述的组合物的受试物1-13的小鼠碳廓清实验吞噬指数较高，而对照组(受试物1)以及使用对比例一至四的组合物的受试物14-17的小鼠碳廓清实验吞噬指数较低，并且，受试物1-13与对照组相比有显著差异，而受试物14-17与对照组相比无显著差异。1.5.2迟发型变态反应(dth)：小鼠连续灌胃30天后，每鼠腹部皮肤用脱毛剂进行脱毛处理，范围约3cmx3cm，后用dnfb(二硝基氟苯)溶液50μl均匀涂抹致敏；5天后在用dnfb溶液10μl均匀涂抹于小鼠右耳两面，24小时后，颈椎脱臼处死小鼠，用打孔器取下直径5mm的耳片称重，其结果如表5所示。表5dnfb诱导dth耳肿的结果组别(g/kg.bw)dnfb诱导dth耳肿程度(mg)阳性对照组7.56±1.31受试物19.59*±0.99受试物29.58*±1.43受试物39.55*±1.30受试物49.35*±1.10受试物59.41*±1.00受试物69.60*±1.01受试物79.64*±1.05受试物89.75*±1.27受试物99.62*±1.07受试物109.20*±1.28受试物119.24*±1.30受试物129.76*±1.22受试物139.31*±2.00受试物148.00±1.11受试物157.89±0.99受试物167.86±1.33受试物177.88±1.00*与阳性对照组相比较，p＜0.05从表5可以看出，与阳性对照组相比，受试物1-13耳肿程度差异显著，而受试物14-17的耳肿程度差异不显著，这表明受试物1-13具有显著增强小鼠免疫细胞的功能。受试物14和受试物3以及受试物15和受试物8相比，其区别在于，所使用的酵母粉均在本发明的酵母粉的范围之外，从表8可以看出，使用受试物3后，dnfb诱导dth耳肿程度为9.55，而使用受试物14后，dnfb诱导dth耳肿程度为8.00；使用受试物8后，dnfb诱导dth耳肿程度为9.75，而使用受试物15后，dnfb诱导dth耳肿程度为7.89，这说明采用本发明特定范围的酵母粉的组合物具有显著增强小鼠免疫细胞的功能。受试物16和受试物5以及受试物17和受试物9相比，其区别在于，所使用的裸藻粉均在本发明的裸藻粉的范围之外，从表8可以看出，使用受试物5后，dnfb诱导dth耳肿程度为9.41，而使用受试物16后，dnfb诱导dth耳肿程度为7.86；使用受试物9后，dnfb诱导dth耳肿程度为9.62，而使用受试物17后，dnfb诱导dth耳肿程度为7.88，这说明采用本发明特定范围的裸藻粉的组合物具有显著增强小鼠免疫细胞的功能。1.5.3半数溶血值(hc50)的测定和抗体生成细胞检测：小鼠连续灌胃30天后，每只鼠腹腔注射2％srbc(绵羊红细胞)的细胞悬液0.2ml进行免疫。5天后，取小鼠血及脾脏分别做hc50的测定和抗体生成细胞检测，其结果如表6所示。其中，半数溶血值(hc50)的测定方法为：小鼠摘除眼球取血于离心管中，放置约1小时，使血清析出，2000r/min离心10分钟，收集血清。用生理盐水稀释血清(300倍)，将稀释后的血清1ml置于试管内，依次加入10％srbc0.5ml，补体1ml(用生理盐水按1:10稀释)，另设不加血清的对照管(以生理盐水代替)，置37℃恒温水浴中保温15-30min后终止。2000r/min离心10min，取上清液1ml，加都氏试剂3ml于试管内，同时取10％srbc0.25ml加都氏试剂至4ml与另一试管内，混合均匀，放置10min后于540nm处以对照管作空白，分别测定各管光密度值；抗体生成细胞检测的方法为：取srbc免疫5天后的小鼠脾脏，放在盛有hanks液的小平皿内，轻轻磨碎脾脏，经200目筛网过滤，制成单细胞悬液。离心10min(1000r/min)，用hanks液洗2次，将细胞悬浮于5mlrpmi1640培养液中，计数细胞，并将细胞浓度调整为5x106个/ml。将表层培养基加热溶解后，与等量ph7.2-7.4、2倍浓度的hanks液混合，分装小试管，每管0.5ml，在向管内加50μl10％srbc，20μl脾细胞悬液，迅速混匀，倾倒于已刷琼脂糖薄层的玻片上，做平行片，待琼脂凝固后，将玻片扣放在片架上，放入co2培养箱中孵育1-1.5小时，然后用sa(链霉亲和素)稀释的补体(1:8)加入玻片架凹槽内，继续温育1-1.5小时后，计数溶血空斑数。表6半数溶血值和抗体生成细胞检测结果组别(g/kg.bw)抗体生成细胞检测溶血空斑数(/106脾细胞)半数溶血值(hc50)阳性对照组290±8019.69±5.95受试物1341*±6128.80*±6.28受试物2337*±7028.00*±6.00受试物3335*±6127.42*±5.24受试物4329*±6625.37*±5.78受试物5332*±6126.61*±6.04受试物6348*±8129.52*±5.87受试物7357*±7531.07*±5.55受试物8360*±8933.90*±5.34受试物9355*±7730.23*±5.86受试物10320*±8323.99*±5.39受试物11324*±9924.87*±5.99受试物12365*±7935.00*±6.37受试物13325*±8725.10*±5.89受试物14298±7919.70±5.94受试物15299±7519.81±6.00受试物16305±7019.89±5.34受试物17300±7319.82±5.87*与阳性对照组相比较，p＜0.05从表6可以看出，在抗体生成细胞实验中，与阳性对照组相比，受试物1-13脾细胞溶血空斑数差异显著以及小鼠半数溶血值差异显著，而受试物14-17的脾细胞溶血空斑数和小鼠半数溶血差异显著，表明受试物1-13对小鼠的体液免疫功能具有显著的增强作用；受试物14和受试物3以及受试物15和受试物8相比，其区别在于，所使用的酵母粉均在本发明的酵母粉的范围之外，从表8可以看出，使用受试物3抗体生成细胞检测溶血空斑数为335，半数溶血值为27.42，而使用受试物14抗体生成细胞检测溶血空斑数为298，半数溶血值为19.70；使用受试物8抗体生成细胞检测溶血空斑数为360，半数溶血值为33.90，而使用受试物15抗体生成细胞检测溶血空斑数为299，半数溶血值为19.81，这说明采用本发明特定范围的酵母粉的组合物对小鼠的体液免疫功能具有显著的增强作用。受试物16和受试物5以及受试物17和受试物9相比，其区别在于，所使用的裸藻粉均在本发明的裸藻粉的范围之外，从表8可以看出，使用受试物5抗体生成细胞检测溶血空斑数为332，半数溶血值为26.61，而使用受试物16抗体生成细胞检测溶血空斑数为305，半数溶血值为19.89；使用受试物9抗体生成细胞检测溶血空斑数为355，半数溶血值为30.23，而使用受试物17抗体生成细胞检测溶血空斑数为300，半数溶血值为19.82，这说明采用本发明特定范围的裸藻粉的组合物对小鼠的体液免疫功能具有显著的增强作用。1.5.4小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验(半体内法)：小鼠连续灌胃30天后，每鼠腹腔注射2％鸡红细胞悬液1ml。30min后，颈椎脱臼处死动物，仰位固定于蜡板上，正中剪开腹部皮肤，经腹腔注入生理盐水2ml，转动鼠板1min，然后吸出腹腔洗液1ml，平均分别滴于2片载玻片上，放入垫有湿纱布的搪瓷盒内，于37℃孵箱温育30min。孵毕，在生理盐水中漂洗，除去未贴片细胞，晾干，以1:1丙酮甲醇溶液固定20min，4％giemsa-磷酸缓冲液染色3min，再用蒸馏水漂洗晾干，显微镜下计数吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数及被吞噬的鸡红细胞数，计算吞噬率和吞噬指数，其结果如表7所示。其中，吞噬率(％)＝(吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/计数的巨噬细胞数)x100吞噬指数＝被吞噬的鸡红细胞总数/计数的巨噬细胞数表7小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的结果*与阳性对照组相比较，p＜0.05从表7可以看出，与阳性对照组相比，受试物1-13小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率、吞噬指数与阳性对照组相比，差异显著，而受试物14-17的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率、吞噬指数与阳性对照组相比，差异不显著，表明受试物1-13对于小鼠巨噬细胞的活性具有显著的增强作用。受试物14和受试物3以及受试物15和受试物8相比，其区别在于，所使用的酵母粉均在本发明的酵母粉的范围之外，从表7可以看出，使用受试物3对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率为34.33，吞噬指数为0.52，而使用受试物14对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率为22.95，吞噬指数为0.36；使用受试物8对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率为35.00，吞噬指数为0.56，而使用受试物15对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率为22.98，吞噬指数为0.36，这说明采用本发明特定范围的酵母粉的组合物对于小鼠巨噬细胞的活性具有显著的增强作用。受试物16和受试物5以及受试物17和受试物9相比，其区别在于，所使用的裸藻粉均在本发明的裸藻粉的范围之外，从表8可以看出，使用受试物5对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率为34.29，吞噬指数为0.50，而使用受试物16对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率为22.95，吞噬指数为0.37；使用受试物9对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率为34.70，吞噬指数为0.54，而使用受试物17对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率为22.93，吞噬指数为0.38，这说明采用本发明特定范围的裸藻粉的组合物对于小鼠巨噬细胞的活性具有显著的增强作用。1.5.5cona(刀豆球蛋白)诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验和小鼠nk细胞活性测定(乳酸脱氢酶ldh测定法)：小鼠连续灌胃30天后，颈椎脱臼处死，无菌取脾，置于盛有适量无菌hanks液的小平皿中，用镊子轻轻将脾撕碎，经200目筛网过滤，制成单细胞悬液，将细胞悬液分为2部分，分别用于cona诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验和小鼠nk细胞活性测定，其结果如表8所示。其中，cona诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验的方法为：用hanks液洗涤细胞悬液2次，每次离心10min(1000r/min)，然后将细胞悬浮于1ml的完全培养液中，台盼兰染色计数活细胞数(在95％以上)，调整细胞浓度为3x106个/ml。将每份细胞悬液分2孔加入24孔培养板中，每孔1ml，一孔加75μlcona液，另一孔作为对照，置培养箱中培养72小试。培养结束前4小时，每孔吸取上清0.7ml，加入0.7ml不含血清的rpmi1640培养液，同时加入mtt50μl/孔，继续培养4小时。培养结束后每孔1ml酸性异丙醇，吹打均匀，使紫色结晶全完溶解。然后分装到96孔培养板，每孔做3个平行孔，用酶标仪以570nm波长测定光密度值。小鼠nk细胞活性测定(乳酸脱氢酶ldh测定法)的方法为：试验前24小时将靶细胞传代培养，应用前以hanks液洗涤3次，用rpmi1640完全培养液调整细胞浓度为4x105个/ml，用hanks液洗涤脾细胞悬液2次，每次离心10min(1000r/min)。弃上清将细胞浆弹起，加入0.5ml生理盐水灭菌20秒，裂解红细胞后再加入8mlhanks液，离心10min(1000r/min)，用1ml完全培养基重悬，用1％冰醋酸稀释后计数，台盼兰染色计数活细胞数(应在95％以上)，调整细胞浓度为1x107个/ml。取靶细胞和效应细胞各100μl(效靶比50:1)，加入96孔板培养板中，靶细胞自然释放孔加靶细胞和培养液各100μl，靶细胞最大释放孔加靶细胞和1％np40各100μl，上述各项均设三个复孔，于37℃、5％co2培养箱中培养4小时，然后将培养板离心(1500r/min)5min，每孔吸取上清100μl置96孔培养板中，同时加入ldh基质液100μl，反应3min，每孔加入1mol/l的hcl30μl，在酶标仪490nm处测定光密度值(od)。表8cona(刀豆球蛋白)诱导的小鼠脾淋巴细胞转化和nk细胞活性测定结果(n＝10)组别(g/kg.bw)cona诱导脾淋巴细胞增殖od差值nk细胞活性％对照组0.410±0.01143.13±11.10受试物10.705*±0.01462.10*±11.35受试物20.700*±0.01361.34*±10.99受试物30.651*±0.01360.89*±11.00受试物40.531*±0.01558.50*±10.80受试物50.623*±0.01259.92*±10.98受试物60.709*±0.02062.49*±11.38受试物70.728*±0.02463.29*±11.40受试物80.745*±0.02365.87*±11.40受试物90.718*±0.01963.00*±11.39受试物100.525*±0.01158.45*±10.80受试物110.529*±0.02258.46*±10.70受试物120.754*±0.01968.39*±11.41受试物130.530*±0.02458.49*±10.80受试物140.430±0.02145.13±10.99受试物150.428±0.01145.30±10.98受试物160.425±0.01745.31±11.01受试物170.427±0.01645.35±11.07*与阳性对照组相比较，p＜0.05从表8可以看出，与阳性对照组相比，受试物1-13在小鼠脾淋巴细胞转化实验中，淋巴细胞增殖实验的od值差异显著，表明受试物1-13具有显著增强小鼠免疫细胞的功能；并且与对照组相比，受试物1-13对小鼠nk细胞活性的影响差异显著，表明受试物1-13对于小鼠nk细胞活性具有显著的增强作用。受试物14和受试物3以及受试物15和受试物8相比，其区别在于，所使用的酵母粉均在本发明的酵母粉的范围之外，从表8可以看出，使用受试物3的cona诱导脾淋巴细胞增殖od差值为0.651，而使用受试物14的cona诱导脾淋巴细胞增殖od差值为0.430；使用受试物8的cona诱导脾淋巴细胞增殖od差值为0.745，而使用受试物15的cona诱导脾淋巴细胞增殖od差值为0.428，这说明采用本发明特定范围的酵母粉的组合物能够显著增强小鼠免疫功能。类似的，使用受试物3对小鼠nk细胞活性为60.89，而使用受试物14对小鼠nk细胞活性为45.13；使用受试物8对小鼠nk细胞活性为65.87，而使用受试物15对小鼠nk细胞活性为45.30，说明采用发明特定范围的酵母粉的组合物对于小鼠nk细胞活性具有显著的增强作用。受试物16和受试物5以及受试物17和受试物9相比，其区别在于，所使用的裸藻粉均在本发明的裸藻粉的范围之外，从表8可以看出，使用受试物5的cona诱导脾淋巴细胞增殖od差值为0.623，而使用受试物16的cona诱导脾淋巴细胞增殖od差值为0.425；使用受试物9的cona诱导脾淋巴细胞增殖od差值为0.718，而使用受试物17的cona诱导脾淋巴细胞增殖od差值为0.427，这说明采用本发明特定范围的裸藻粉的组合物能够显著增强小鼠免疫功能。类似的，使用受试物5对小鼠nk细胞活性为59.92，而使用受试物16对小鼠nk细胞活性为45.31；使用受试物9对小鼠nk细胞活性为63.00，而使用受试物17对小鼠nk细胞活性为45.35，说明采用发明特定范围的裸藻粉的组合物对于小鼠nk细胞活性具有显著的增强作用。综上所述，根据保健食品检验与评价技术规范，在细胞免疫功能、体液免疫功能、单核——巨噬细胞功能、nk细胞活性四个方面任两个方面结果阳性，可判定该受试物具有增强免疫力的功能作用，从上述的实验数据可以看出，本发明所述的组合物具有增强免疫力的作用。以上所述，仅是本发明实施的较佳实施例，并非对本发明做任何形式上的限制，凡在本发明的精神和原则之内所做的修改、等同替换和改进等，均需要包含在本发明的保护范围之内。当前第1页1 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