一种洗发水的制作工艺的制作方法
本发明属于洗浴用品技术领域,具体涉及一种洗发水的制作工艺。
背景技术:
马拉色菌属酵母样真菌,为条件致病菌,是温血动物及人类皮肤上的正常寄生菌,主要生长在人类皮肤角质层,具有嗜脂性。近年认为马拉色菌在头皮上的过度增生是导致头皮脂溢性皮炎的重要原因。头皮上存在的马拉色菌主要为糠秕马拉色菌、球形马拉色菌、合轴马拉色菌。目前针对马拉色菌的西药主要为抗真菌制剂,但治疗不良反应大,易出现耐药性,故寻找作用安全、疗效满意且价格合理的抗菌药物的任务仍然艰巨。
抗真菌中药的筛选研究已开展多年,相比传统的西药抗真菌药物具有不良反应小、价格低廉、较少出现耐药等优点,其中,白鲜皮、苦参能清热利水止痒,增强抑菌止痒作用,白鲜皮中的白鲜碱和苦参中苦参碱对马拉色菌具有较好抑制用。
目前对白鲜碱和苦参碱提取多采用有机溶剂多次提取,耗时长,步骤多,探索一种高效提取方法具有重要意义。
技术实现要素:
本发明的目的在于提供一种提高中药去屑止痒成分的提取效果的、提取量高的、提高时间短的中药去屑止痒成分的提取方法。
本发明为实现上述目的所采取的技术方案为:
一种中药去屑止痒成分的提取方法,包括:
s1,中药粉末于前处理液中处理后得到前处理中药粉末,前处理液为含亚硫酸钠、1-氨基-3-甲基尿素的碱液;含亚硫酸钠、1-氨基-3-甲基尿素的碱液提高了生物碱的提取量,降低提取所需时间,原因可能为前处理液使中药粉末水溶性、碱溶性成分溶出,亚硫酸钠、1-氨基-3-甲基尿素破坏细胞中的交联作用,提高提取液的有效接触面积,使生物碱更多暴露在表面积上,从而在提取过程中得到更好的提取效果。
s2,前处理中药粉末于提取液中提取得到去屑止痒成分提取粗液;
s3,去屑止痒成分提取粗液经抽滤,减压浓缩,溶剂再溶解后经阳离子交换树脂分离纯化得到去屑止痒成分。
优选地,将中药干燥后粉碎,过50-100目筛,将中药粉末加入前处理液中,于60-80℃的温度下处理0.5-1h,离心,弃去上清液,蒸馏水洗涤,在30-50℃的温度下烘干得到前处理中药粉末;前处理液为含亚硫酸钠和1-氨基-3-甲基尿素的碱溶液,中药粉末的添加量为前处理液的6-18wt%。
更优选地,中药为白鲜皮和/或苦参。
更优选地,碱液为0.5-2.5wt%的氢氧化钠溶液,亚硫酸钠的添加量为氢氧化钠溶液的0.4-1.6wt%,1-氨基-3-甲基尿素的添加量为氢氧化钠溶液的0.3-0.9wt%。
更优选地,去屑止痒成分为白鲜碱和/或苦参碱。白鲜碱和/或苦参碱对马拉色菌具有抑制作用,提高去屑止痒效果。
优选地,前处理中药粉末加入乙醇溶液中,于50-70℃的温度下浸提0.5-2h,重复提取二次以上,合并提取液得到去屑止痒成分提取粗液,抽滤,减压浓缩至干,甲醇溶解后经阳离子交换树脂分离纯化得到去屑止痒成分;乙醇溶液的质量分数为70-90wt%,中药粉末的添加量为乙醇溶液的2-5wt%,甲醇溶液的用量为乙醇溶液的10-20wt%。
本发明公开了亚硫酸钠和1-氨基-3-甲基尿素的用途,为如下1)-2)中的至少一种:
1)提高中药去屑止痒成分的提取量;
2)降低中药去屑止痒成分的提取时间。
本发明的目的在于提供一种去屑止痒、对马拉色菌具有较好抑制效果的、质量合格、稳定性好的洗发水的配方。
本发明为实现上述目的所采取的技术方案为:
一种洗发水的配方,包括:月桂醇聚醚硫酸酯铵、椰油酰胺丙基甜菜碱、月桂醇硫酸酯铵、烷基葡萄糖苷、椰油酰胺、乳化硅油、氨基硅油、珠光剂、去屑止痒成分、螯合剂、防腐剂、增强剂、香精、ph调节剂、水。去屑止痒成分为白鲜碱和/或苦参碱。珠光剂为乙二醇单硬脂酸酯。螯合剂为edta二钠。防腐剂为卡松。增强剂为2-氨基-4-氨甲酰基丁酸,乙酰磺胺酸钾。香精为花香果香香精。ph调节剂为柠檬酸和柠檬酸钠。
优选地,白鲜碱和苦参碱共同使用时以质量比1:0.2-5的比例混合。
优选地,增强剂中2-氨基-4-氨甲酰基丁酸和乙酰磺胺酸钾的以质量比1:0.3-2的比例混合。2-氨基-4-氨甲酰基丁酸和乙酰磺胺酸钾与白鲜碱和/或苦参碱共同存在时,2-氨基-4-氨甲酰基丁酸和乙酰磺胺酸钾具有提高白鲜碱和/或苦参碱对马拉色菌的抑制效果,2-氨基-4-氨甲酰基丁酸或乙酰磺胺酸钾在单独使用时并不能提高对马拉色菌的抑制效果。
优选地,ph调节剂为柠檬酸和柠檬酸钠以摩尔比1:0.5-2的比例混合。
优选地,一种洗发水的配方,包括:如下质量份的组分,月桂醇聚醚硫酸酯铵20-30份、椰油酰胺丙基甜菜碱2-4份、月桂醇硫酸酯铵15-25份、烷基葡萄糖苷1-3份、椰油酰胺0.1-1份、乳化硅油2-5份、氨基硅油2-5份、珠光剂1-3份、去屑止痒成分2-5份、螯合剂0.05-0.1份、防腐剂0.05-0.4份、增强剂0.2-1.2份、香精0.3-0.9份、ph调节剂0.3-3份、水50-70份。
本发明公开了2-氨基-4-氨甲酰基丁酸和乙酰磺胺酸钾具有提高白鲜碱和/或苦参碱对马拉色菌的抑制效果。
本发明的目的在于提供一种去屑止痒、对马拉色菌具有较好抑制效果的、质量合格、稳定性好的洗发水的制作工艺。
本发明为实现上述目的所采取的技术方案为:
一种洗发水的制作工艺,包括:
s1、将水加热至80-90℃,依次加入月桂醇聚醚硫酸酯铵、椰油酰胺丙基甜菜碱、月桂醇硫酸酯铵、烷基葡萄糖苷、椰油酰胺、螯合剂搅拌混合均匀;
s2、将水温降至55-65℃,加入乳化硅油、氨基硅油、去屑止痒成分、珠光剂搅拌混合均匀;
s3、将水温降至40-50℃,依次加入防腐剂、增强剂、香精、ph调节剂搅拌混合均匀。
本发明由于采用了含有亚硫酸钠和1-氨基-3-甲基尿素的碱液对白鲜皮或苦参碱进行提取,因而具有如下有益效果:提高了白鲜皮中白鲜碱中的提取量,提取效果好;提高了苦参碱中苦参碱的提取量,提取效果好,相对于未添加亚硫酸钠和1-氨基-3-甲基尿素碱液前处理,白鲜碱的两次总提取量提高了94.31%,苦参碱的两次总提取量提高了108.19%。本发明由于采用增强剂作为洗发水的配方,因而得到一种对马拉色菌具有较好抑制效果的洗发水,去屑止痒效果好。因此,本发明是一种去屑止痒、对马拉色菌具有较好抑制效果的、质量合格、稳定性好的洗发水的制作工艺。
附图说明
图1为中药去屑止痒成分提取量图;
图2为中药去屑止痒成分不同提取时间的提取量图;
图3为中药去屑止痒成分对马拉色菌的48hmic值图;
图4为中药去屑止痒成分对马拉色菌的72hmic值图。
具体实施方式
以下结合具体实施方式和附图对本发明的技术方案作进一步详细描述:
本发明实施例1中白鲜碱与实施例2中的苦参碱通过薄层色谱鉴别,采用硅胶g薄层板,展开剂为甲苯-乙酸乙酯-甲醇-水(2:4:2:1),紫外灯下检测。显色剂为碘化铋钾。
对照品的白鲜碱或苦参碱,来自中国药品生物制品检定所,加甲醇配制成0.2mg/ml。
实施例1:
一种中药去屑止痒成分的提取方法,
前处理:将白鲜皮干燥后粉碎,过50目筛,将白鲜皮粉末加入前处理液中,于70℃的温度下处理0.5h,离心,弃去上清液,蒸馏水洗涤,在40℃的温度下烘干得到前处理白鲜皮粉末;前处理液为1.5wt%的氢氧化钠溶液,前处理液中含有亚硫酸钠和1-氨基-3-甲基尿素,亚硫酸钠的添加量为氢氧化钠溶液的0.8wt%,1-氨基-3-甲基尿素的添加量为氢氧化钠溶液的0.6wt%,白鲜皮粉末的添加量为前处理液的12wt%。
提取及分离纯化:前处理白鲜皮粉末加入乙醇溶液中,于60℃的温度下浸提1h,重复提取二次,合并提取液得到去屑止痒成分提取粗液,抽滤,减压浓缩至干,甲醇溶解后经阳离子交换树脂分离纯化得到白鲜碱,洗脱组分中采用薄层色谱法鉴别白鲜碱,然后收集所需组分;乙醇溶液的质量分数为80wt%,白鲜皮粉末的添加量为乙醇溶液的4wt%,甲醇溶液的用量为乙醇溶液的12wt%。
阳离子交换树脂为732型强酸性阳离子交换树脂,国药集团化学试剂有限公司。
阳离子交换树脂处理:取阳离子交换树脂50g,以300ml去离子水浸泡过夜,多次清洗至去离子水近无色;加入250ml7%盐酸溶液浸泡1h,并随时搅拌。倾倒溶液,以去离子水洗至近中性后,加入2mol/l氢氧化钠溶液250ml浸泡1h。以去离子水洗至近中性,最后加入7%盐酸溶液250ml浸泡2h左右,并用去离子水洗调节ph为6之后,装柱使用,柱高530mm。
洗脱剂为15%的盐酸溶液,洗脱流速0.7ml/min,水浴挥干,加甲醇复溶后过0.2μm过滤膜过滤后除去甲醇得到产物白鲜碱。
实施例2:
一种中药去屑止痒成分的提取方法,
前处理:将苦参干燥后粉碎,过50目筛,将苦参粉末加入前处理液中,于70℃的温度下处理0.5h,离心,弃去上清液,蒸馏水洗涤,在40℃的温度下烘干得到前处理苦参粉末;前处理液为1.5wt%的氢氧化钠溶液,前处理液中含有亚硫酸钠和1-氨基-3-甲基尿素,亚硫酸钠的添加量为氢氧化钠溶液的0.8wt%,1-氨基-3-甲基尿素的添加量为氢氧化钠溶液的0.6wt%,苦参粉末的添加量为前处理液的12wt%。
提取及分离纯化:前处理苦参粉末加入乙醇溶液中,于60℃的温度下浸提1h,重复提取二次,合并提取液得到去屑止痒成分提取粗液,抽滤,减压浓缩至干,甲醇溶解后经阳离子交换树脂分离纯化得到苦参碱,洗脱组分中采用薄层色谱法鉴别苦参碱,然后收集所需组分;乙醇溶液的质量分数为80wt%,苦参粉末的添加量为乙醇溶液的4wt%,甲醇溶液的用量为乙醇溶液的12wt%。
阳离子交换树脂为732型强酸性阳离子交换树脂,国药集团化学试剂有限公司。
阳离子交换树脂处理:取阳离子交换树脂50g,以300ml去离子水浸泡过夜,多次清洗至去离子水近无色;加入250ml7%盐酸溶液浸泡1h,并随时搅拌。倾倒溶液,以去离子水洗至近中性后,加入2mol/l氢氧化钠溶液250ml浸泡1h。以去离子水洗至近中性,最后加入7%盐酸溶液250ml浸泡2h左右,并用去离子水洗调节ph为6之后,装柱使用,柱高530mm。
洗脱剂为15%的盐酸溶液,洗脱流速0.7ml/min,水浴挥干,加甲醇复溶后过0.2μm过滤膜过滤后除去甲醇得到产物苦参碱。
实施例3:
一种洗发水的配方,其质量分如下,
月桂醇聚醚硫酸酯铵25份、椰油酰胺丙基甜菜碱3份、月桂醇硫酸酯铵20份、烷基葡萄糖苷2份、椰油酰胺0.5份、乳化硅油4份、氨基硅油3份、珠光剂2份、去屑止痒成分4份、螯合剂0.05份、防腐剂0.2份、增强剂0.5份、香精0.6份、ph调节剂1.2份、水60份。
去屑止痒成分为实施例1得到的白鲜碱。珠光剂为乙二醇单硬脂酸酯。螯合剂为edta二钠。防腐剂为卡松。增强剂为2-氨基-4-氨甲酰基丁酸,乙酰磺胺酸钾。香精为花香果香香精。ph调节剂为柠檬酸和柠檬酸钠。
增强剂中2-氨基-4-氨甲酰基丁酸和乙酰磺胺酸钾的以质量比1:1的比例混合。
ph调节剂为柠檬酸和柠檬酸钠以摩尔比1:1的比例混合。
一种洗发水的制作工艺,
s1、将水加热至90℃,依次加入月桂醇聚醚硫酸酯铵、椰油酰胺丙基甜菜碱、月桂醇硫酸酯铵、烷基葡萄糖苷、椰油酰胺、螯合剂搅拌混合均匀;
s2、将水温降至60℃,加入乳化硅油、氨基硅油、去屑止痒成分、珠光剂搅拌混合均匀;
s3、将水温降至40℃,依次加入防腐剂、增强剂、香精、ph调节剂搅拌混合均匀。
实施例4:
一种洗发水的配方,其质量分如下,
月桂醇聚醚硫酸酯铵25份、椰油酰胺丙基甜菜碱3份、月桂醇硫酸酯铵20份、烷基葡萄糖苷2份、椰油酰胺0.5份、乳化硅油4份、氨基硅油3份、珠光剂2份、去屑止痒成分4份、螯合剂0.05份、防腐剂0.2份、增强剂0.5份、香精0.6份、ph调节剂1.2份、水60份。
去屑止痒成分为实施例2得到的苦参碱。珠光剂为乙二醇单硬脂酸酯。螯合剂为edta二钠。防腐剂为卡松。增强剂为2-氨基-4-氨甲酰基丁酸,乙酰磺胺酸钾。香精为花香果香香精。ph调节剂为柠檬酸和柠檬酸钠。
增强剂中2-氨基-4-氨甲酰基丁酸和乙酰磺胺酸钾的以质量比1:1的比例混合。
ph调节剂为柠檬酸和柠檬酸钠以摩尔比1:1的比例混合。
一种洗发水的制作工艺,
s1、将水加热至90℃,依次加入月桂醇聚醚硫酸酯铵、椰油酰胺丙基甜菜碱、月桂醇硫酸酯铵、烷基葡萄糖苷、椰油酰胺、螯合剂搅拌混合均匀;
s2、将水温降至60℃,加入乳化硅油、氨基硅油、去屑止痒成分、珠光剂搅拌混合均匀;
s3、将水温降至40℃,依次加入防腐剂、增强剂、香精、ph调节剂搅拌混合均匀。
实施例5:
一种洗发水的配方,其质量分如下,
月桂醇聚醚硫酸酯铵25份、椰油酰胺丙基甜菜碱3份、月桂醇硫酸酯铵20份、烷基葡萄糖苷2份、椰油酰胺0.5份、乳化硅油4份、氨基硅油3份、珠光剂2份、去屑止痒成分5份、螯合剂0.05份、防腐剂0.2份、增强剂0.5份、香精0.6份、ph调节剂1.2份、水60份。
去屑止痒成分为实施例1得到的白鲜碱和实施例2得到的苦参碱,白鲜碱和苦参碱以质量比1:1的比例添加。珠光剂为乙二醇单硬脂酸酯。螯合剂为edta二钠。防腐剂为卡松。增强剂为2-氨基-4-氨甲酰基丁酸,乙酰磺胺酸钾。香精为花香果香香精。ph调节剂为柠檬酸和柠檬酸钠。
增强剂中2-氨基-4-氨甲酰基丁酸和乙酰磺胺酸钾的以质量比1:1的比例混合。
ph调节剂为柠檬酸和柠檬酸钠以摩尔比1:1的比例混合。
一种洗发水的制作工艺,
s1、将水加热至90℃,依次加入月桂醇聚醚硫酸酯铵、椰油酰胺丙基甜菜碱、月桂醇硫酸酯铵、烷基葡萄糖苷、椰油酰胺、螯合剂搅拌混合均匀;
s2、将水温降至60℃,加入乳化硅油、氨基硅油、去屑止痒成分、珠光剂搅拌混合均匀;
s3、将水温降至40℃,依次加入防腐剂、增强剂、香精、ph调节剂搅拌混合均匀。
实施例6:
一种洗发水的配方,其质量分如下,
月桂醇聚醚硫酸酯铵25份、椰油酰胺丙基甜菜碱3份、月桂醇硫酸酯铵20份、烷基葡萄糖苷2份、椰油酰胺0.5份、乳化硅油4份、氨基硅油3份、珠光剂2份、去屑止痒成分5份、螯合剂0.05份、防腐剂0.2份、增强剂0.8份、香精0.6份、ph调节剂1.2份、水60份。
去屑止痒成分为实施例1得到的白鲜碱和实施例2得到的苦参碱,白鲜碱和苦参碱以质量比1:1的比例添加。珠光剂为乙二醇单硬脂酸酯。螯合剂为edta二钠。防腐剂为卡松。增强剂为2-氨基-4-氨甲酰基丁酸,乙酰磺胺酸钾。香精为花香果香香精。ph调节剂为柠檬酸和柠檬酸钠。
增强剂中2-氨基-4-氨甲酰基丁酸和乙酰磺胺酸钾的以质量比1:1的比例混合。
ph调节剂为柠檬酸和柠檬酸钠以摩尔比1:1的比例混合。
一种洗发水的制作工艺,
s1、将水加热至90℃,依次加入月桂醇聚醚硫酸酯铵、椰油酰胺丙基甜菜碱、月桂醇硫酸酯铵、烷基葡萄糖苷、椰油酰胺、螯合剂搅拌混合均匀;
s2、将水温降至60℃,加入乳化硅油、氨基硅油、去屑止痒成分、珠光剂搅拌混合均匀;
s3、将水温降至40℃,依次加入防腐剂、增强剂、香精、ph调节剂搅拌混合均匀。
对比例1:
本对比例与实施例1相比,不同之处仅在于,前处理中未添加1-氨基-3-甲基尿素,提取次数为二次。
对比例2:
本对比例与实施例1相比,不同之处仅在于,前处理中未添加亚硫酸钠,提取次数为二次。
对比例3:
本对比例与实施例1相比,不同之处仅在于,前处理中未添加亚硫酸钠和1-氨基-3-甲基尿素,提取次数为二次。
对比例4:
本对比例与实施例2相比,不同之处仅在于,前处理中未添加1-氨基-3-甲基尿素,提取次数为二次。
对比例5:
本对比例与实施例2相比,不同之处仅在于,前处理中未添加亚硫酸钠,提取次数为二次。
对比例6:
本对比例与实施例2相比,不同之处仅在于,前处理中未添加亚硫酸钠和1-氨基-3-甲基尿素,提取次数为二次。
试验例1:
1.中药去屑止痒成分的提取效果测试
提取量的测试样本来自实施例1-2和对比例1-6。
提取量hplc检测对照样为白鲜碱或苦参碱,来自中国药品生物制品检定所,加甲醇配制成20μg/ml。
hplc检测中实施例或对比例得到的样品及对照样的取样量为10μl。
通过外标法计算白鲜皮中白鲜碱及苦参中苦参碱的含量。
白鲜碱的hplc检测条件:
试样进样前过0.45μm的滤膜。
依利特十八烷基键合硅胶色谱柱(200mm×4.6mm,5μm),柱温30℃,流动相乙腈-水(40:60),流速1.0ml/min,检测波长240nm。
苦参碱的hplc检测条件:
试样进样前过0.45μm的滤膜。
kromasi1c18e25744(200mm×4.6mm,5μm),柱温30℃,流动相乙-磷酸三乙胺(22:78),磷酸三乙胺:0.1%磷酸用三乙胺调节ph7.6,流速1.0ml/min,检测波长220nm。
提取量测试如图1所示,其中实施例1与对比例1-3为白鲜皮中提取白鲜碱,实施例2与对比例4-6为苦参中提取苦参碱;分别得到了对白鲜碱、苦参碱的一次提取量、二次提取量和总提取量,其中,对白鲜皮中提取到白鲜碱的结果中,实施例1的提取量最高,达到了0.0672mg/g,对比例1的提取量达到了0.0474mg/g,对比例2的提取量达到0.0387mg/g,对比例3的提取量达到0.0386mg/g;实施例1与实施例1相比,表明1-氨基-3-甲基尿素的使用提高了对白鲜碱的提取量;实施例1与对比例2相比,表明亚硫酸钠的使用提高了对白鲜碱的提取量;实施例1与实施例3相比,表明1-氨基-3-甲基尿素和亚硫酸钠的使用可以提高白鲜碱的提取量;对比例2与对比例3相比,表明碱液中仅含有1-氨基-3-甲基尿素进行前处理并不能提高白鲜碱的提取量;结合实施例1、对比例1-3,可以得到,碱液中添加亚硫酸钠可以提高白鲜碱的提取量,1-氨基-3-甲基尿素与亚硫酸钠共同使用可以进一步提高白鲜碱的提取量。
苦参中苦参碱的提取结果中,实施例2的提取量最高,达到了0.0782mg/g,对比例4的提取量达到了0.0514mg/g,对比例5的提取量达到0.0415mg/g,对比例6的提取量达到0.0412mg/g;实施例2与实施例4相比,表明1-氨基-3-甲基尿素的使用提高了对苦参碱的提取量;实施例2与对比例5相比,表明亚硫酸钠的使用提高了对苦参碱的提取量;实施例2与实施例6相比,表明1-氨基-3-甲基尿素和亚硫酸钠的使用可以提高苦参碱的提取量;对比例5与对比例6相比,表明碱液中仅含有1-氨基-3-甲基尿素进行前处理并不能提高苦参碱的提取量;结合实施例2、对比例4-6,可以得到,碱液中添加亚硫酸钠可以提高苦参碱的提取量,1-氨基-3-甲基尿素与亚硫酸钠共同使用可以进一步提高苦参碱的提取量。
对白鲜碱和苦参碱的二次提取量的变化与一次提取量的变化基本一致,同样可以证明1-氨基-3-甲基尿素和/或亚硫酸钠在提取中的作用。
对白鲜碱两次提取的总提取量中,实施例1的总提取量达到了0.1024mg/g,对比例1的提取量达到0.0655mg/g,对比例3的提取量达到0.0527mg/g,对比例1相对于对比例3的提取量提高了24.29%,即亚硫酸钠的添加提高了24.29%的白鲜碱提取量;实施例1相对于对比例3的提取量提高了94.31%,即亚硫酸钠和1-氨基-3-甲基尿素的添加提高了94.31%的白鲜碱提取量。
对苦参碱两次提取的提取总量中,实施例2的总提取量达到了0.1297mg/g,对比例4的提取量达到0.0759mg/g,对比例6的提取量达到0.0623mg/g,对比例4相对于对比例6的提取量提高了21.83%,即亚硫酸钠的添加提高了21.83%的苦参碱提取量;实施例2相对于对比例6的提取量提高了108.19%,即亚硫酸钠和1-氨基-3-甲基尿素的添加提高了108.19%的苦参碱提取量。
2.提取时间对提取量的影响
提取方法采用实施例1和实施例2的方法,提取时间分别设置为15、30、45、60、75min。
测试结果如图2所示,白鲜碱的提取量在45min基本达到最大值,提取时间的再延长,提取量基本不再增加,苦参碱的提取量同样在45min基本达到最大值,提取时间的再延长,提取量同样基本不再增加。
试验例2:
马拉色菌体外药敏测试
菌株为糠秕马拉色菌标准菌株(cbs1878)购于中国医学科学院皮肤病研究所真菌室。
1.培养基
(1)马拉色菌液体培养基:麦芽糖20g/l酵母浸膏2g/l葡萄糖20g/l橄榄油20g/l、蛋白胨20g/l。加蒸馏水溶解后121℃15min高压灭菌。
(2)橄榄油斜面固体培养基:葡萄糖40g/l,琼脂14g/l,蛋白胨10g/l,酵母浸膏0.1g/l,单硬脂酸甘油酯2.5g/l吐温-802mg/l,橄榄油20g/l,加蒸馏水溶解后121℃15min高压灭菌。
2.去屑止痒成分加样
将去屑止痒成分直接用马拉色菌液体培养基稀释成实验浓度,分别为1、0.8、0.5、0.4、0.38、0.3、0.29、0.25、0.22、0.21、0.2、0.18、0.16、0.1mg/l,加入96孔圆底酶标板,每孔100μl。同时设不加菌的阴性对照组和不加药液的正常生长对照,-20℃保存备用,每种重复做2次。
3.菌悬液制备及接种
将受试菌在橄榄油培养基连续传代培养两次,以确保菌落纯化和活力,第2次32℃传代培养4天后,用无菌生理盐水洗脱纯化菌落,制成菌悬液,用比浊仪调整其至麦氏4号比浊管浓度。经血细胞计数板计数其菌含量为1×107cfu/ml,用液体培养基稀释菌液10倍,其菌含量为1×106cfu/ml。取制备好的微孔板于室温下融开,在微孔板中每孔(除了阴性对照组外)加入菌液100μl,使其最总菌浓度为0.5×106cfu/m1。阴性对照组加入等量的液体培养基。
4.培养及结果评定
将接种好的微孔培养板置35℃恒温箱内(加湿)孵育,48h、72h后分别观察结果,由于马拉色菌为嗜脂性的,菌落浮在液体表面,微黄色,薄薄一层漂浮在透明的液基表面,肉眼观察非常清晰,采用直接法读取数据。结果判断的前提是生长对照良好,空白对照无菌生长清晰,其它孔随药物浓度梯度升高而菌的生长受限制。由于有拖尾现象,将每孔内生长情况与生长对照比较,以生长被抑制80%判定为mic值。
数值大于最高浓度按上一级浓度计算。
a组中添加有2-氨基-4-氨甲酰基丁酸和乙酰磺胺酸钾,去屑止痒成分的使用量与增强剂的比例关系同实施例6中相应的比例关系,去屑止痒成分分为单一组和混合组,混合组的比例关系同实施例6,2-氨基-4-氨甲酰基丁酸和乙酰磺胺酸钾的比例关系同实施例6;b、c、d组的成分关系与a组相同,不同之处在于2-氨基-4-氨甲酰基丁酸和乙酰磺胺酸钾的添加,b组中仅添加2-氨基-4-氨甲酰基丁酸,c组中仅添加乙酰磺胺酸钾,d组中未添加2-氨基-4-氨甲酰基丁酸和乙酰磺胺酸钾。
对马拉色菌体外药敏测试结果如图3和图4所示,图3的测试时间为48h,图4的测试时间为72h。图3,采用白鲜碱的测试结果中,a组与c组、d组的mic一致,b组的mic小于a组、c组和d组,表明2-氨基-4-氨甲酰基丁酸和乙酰磺胺酸钾仅在共同使用的条件下可以增强白鲜碱对马拉色菌的抑制效果,2-氨基-4-氨甲酰基丁酸或乙酰磺胺酸钾的单独使用并不能产生增强白鲜碱对马拉色菌的抑制效果。采用苦参碱的测试结果中,2-氨基-4-氨甲酰基丁酸和/或乙酰磺胺酸钾的使用对苦参碱抑制马拉色菌的效果变化与在白鲜碱中的效果基本一致。并且混合组的a组测试结果的mic值小于白鲜碱组与苦参碱组,表明白鲜碱与苦参碱共同使用时效果优于白鲜碱或苦参碱的分别使用。
72h的测试结果的变化与48h的测试结果变化相一致,表明2-氨基-4-氨甲酰基丁酸和/或乙酰磺胺酸钾的效果。
试验例3:
洗发水质量内控标准
测试样品为实施例6得到的洗发水。
根据gb/t29679-2013对配制洗发水进行微生物指标测试,测试结果如下所示。
表1微生物指标及检测结果
本发明的洗发水微生物指标合格。
根据gb/t29679-2013对配制洗发水进行感官指标测试,测试结果如下所示。
表2感官指标测试结果
测试结果表明本发明洗发水感官指标达标,并且达到优级产品级别。
在不同温度下放置一定时间,观察稳定性。
表3稳定性测试结果
本发明得到的洗发水的稳定性好。
以上实施方式仅用于说明本发明,而并非对本发明的限制,本领域的普通技术人员,在不脱离本发明的精神和范围的情况下,还可以做出各种变化和变型。因此,所有等同的技术方案也属于本发明的范畴,本发明的专利保护范围应由权利要求限定。
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