一种高抱卵量红螯螯虾亲本筛选及繁育方法与流程

本发明属于红螯螯虾亲本筛选技术领域，具体涉及一种高抱卵量红螯螯虾亲本筛选及繁育方法。

背景技术：

红螯螯虾（cheraxquadricarinatus），隶属于节肢动物门，甲壳动物亚门，软甲纲，真软甲亚纲，十足目，腹胚亚目，拟螯虾科，滑螯虾属。红螯螯虾的适应性强，生长快速，无明显的摄食偏好性，且成体规格大，离水后可存活时间长，便于长途运输。市场前景可观。我国早在1992年就由湖北水产研究所引进了红螯螯虾，并首先在广东和湖北两省试养成功。目前，国内的红螯螯虾养殖产业仍处于初级阶段，由于苗种获得不易和缺乏优质亲本等问题，红螯螯虾的养殖一直未得到有效推广，存在较大的局限性，因此，选育出高产卵量的红螯螯虾亲本群体对于实现红螯螯虾的遗传改良、推动红螯螯虾的产业化发展具有重要的促进作用。

虾蟹类动物的繁殖习性不同于鱼类，一般情况下亲虾繁殖一次后即被淘汰，因此无法提前测量其抱卵量后再作为亲本使用。此外，红螯螯虾具有抱卵的习性，由于虾卵紧密排列，无法在不破坏抱卵结构的前提下准确测量，而且，因雄虾无抱卵量指标，无法对雄虾进行有效选择。鉴于以上多种原因，建立可行的高抱卵量红螯螯虾亲本的筛选技术意义重大。

技术实现要素：

针对上述现有技术中存在的缺陷，本发明的目的在于设计提供一种高抱卵量红螯螯虾亲本筛选及繁育方法。本方法通过在雌雄亲虾交配前，即通过形态学指标对抱卵量指标进行间接选择，可快速建立稳定的高抱卵量的亲本群体。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种高抱卵量红螯螯虾亲本筛选及繁育方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）亲本的初筛：对红螯螯虾中80g及以上的雌虾和130g及以上的雄虾进行粗选，取肢体完整、健康体表无伤的雌虾1000-2000尾和雄虾300-600尾，放置于室内水泥池内暂养；

（2）以第一腹节宽/全长为指标代替产卵量指标进行亲本筛选：随机选取经步骤（1）暂养的雌雄虾各100只，精确测量其全长和第一腹节宽度，计算第一腹节宽度/全长数值，雌雄虾分别以该数值从大到小排序，选留第一腹节宽/全长排在前30%的雌雄亲本，并分别取雌性和雄性亲本中第30名的数据作为后续亲本的筛选指标选留全部亲本；

（3）亲本的强化培育与催熟：对经步骤（2）选出的亲本使用1mg/l聚维酮碘溶液进行体表消毒后于10月末-11月中旬转移至亲虾培育缸，密度5尾/平方米，雌雄性分开养，进行强化培育，至2月开始催熟，逐渐升高水温，每天提高1℃直至水温25℃，同时增加投饵量，在亲虾培育缸内放置隐蔽物；

（4）亲本的交配与繁殖：3月初，剔除断肢、体表有伤和活力不佳的亲本虾，按照雄虾规格与雌虾规格1.2:1的标准挑选配组亲虾，以3雌1雄的比例进行配组，置于室内水泥池中，并使用0.5m²的塑料漏筐罩住每组亲本虾，保持室内昏暗和安静；

（5）抱卵虾的培育：定期检查漏筐内雌虾的抱卵情况，将抱卵虾转移至孵化池，加强充氧和水体消毒，减少投饵量；

（6）亲本抱卵性能评估：待全部幼虾脱离母体后，将雌虾移出，统计幼虾数量，除以抱卵雌虾的数目，计算每只雌虾的平均抱卵量，与未经选育的亲本抱卵量进行对比，评估亲本选择效果；

（7）幼虾的室内养殖：使用细密气石大量充氧，投喂活的卤虫和小颗粒配合饲料，幼虾褪壳后布置多孔掩蔽体和附着物，补充高钙饲料，第8天起投喂配合饲料早、中、晚各一次，按照12h光亮、12h黑暗调节光照；

（8）苗种下塘：4月底5月初开始放苗，放苗前5天用溴氯海因对水体进行消毒，选取苗种规格1.0cm、肢体完整、体质健壮无伤、反应灵敏、活泼有力的幼虾苗进行放养，放养密度75000尾/公顷，放苗当天开始投喂，每天中午开增氧机2小时，经25-30天，虾苗达2-3cm后撤去围网全池放养。

所述的一种高抱卵量红螯螯虾亲本筛选及繁育方法，其特征在于所述步骤（3）中强化培育具体为：除日常饲料外，增加动物性饵料，配合植物性饵料，孵化池水温保持18℃。

所述的一种高抱卵量红螯螯虾亲本筛选及繁育方法，其特征在于所述步骤（5）中定期检查具体为：轻轻将雌虾拿起，用大拇指和食指抓紧头胸甲，其他三指牢牢按住尾节，观察抱卵情况。

所述的一种高抱卵量红螯螯虾亲本筛选及繁育方法，其特征在于所述步骤（8）中放苗具体为：选择晴朗天气的早晨或傍晚放苗，虾苗先置于培育池进行泡袋调温，水温温差不超过2℃。

所述的一种高抱卵量红螯螯虾亲本筛选及繁育方法，其特征在于所述步骤（8）中投喂具体为：使用对虾配合饲料的0号饲料，每天傍晚投喂1次，投喂系数为虾体重15%，15天后，投喂对虾配合饲料的1号破碎料，投喂系数为10%，25天后，投喂对虾配合饲料的1号饲料，投喂系数为5%，2个月后，投喂对虾配合饲料的2号和3号饲料，虾体7cm之前投喂系数为3%，虾体达到10cm之后投喂系数为1%。

本申请中对虾配合饲料为现有饲料，具体为通威南美白对虾配合饲料，其中0号、1号、2号和3号为本领域对饲料粒径分类的常规命名。

本发明通过对小样本群体进行测量，确定选育标准，快速有效筛选亲虾规格，使用与产卵量相关的形态性状作为选育指标，间接对红螯螯虾的产卵量性状进行选择，并通过对雌雄亲虾规格比例与配组数目的调整，解决了实际生产中产卵量无法提前测量、抱卵亲虾不宜过度操作以及抱卵率低等困难，为建立红螯螯虾的高产亲本群体提供技术方案，为实现红螯螯虾的规模化养殖奠定基础。

具体实施方式

以下将通过具体实施例对本发明作进一步说明。

实施例1：

1.亲本的筛选：

亲本的初筛：按照亲本规格要求雌虾达到80g以上，雄虾达到130g以上进行粗选，肢体完整、健康体表无伤的雌虾2000尾，雄虾600尾作为候选亲虾，于室内水泥池内进行暂养。

使用第一腹节宽/全长指标代替产卵量指标进行亲本筛选：首先随机选取暂养的雌雄红螯螯虾各100只，使用游标卡尺精确测量其全长和第一腹节宽度。计算出亲虾的第一腹节宽/全长数值，按照雌雄分别将数据从大到小排序后，选留第一腹节宽/全长排在前30%的雌性亲本和雄性亲本，并分别取雌性亲本和雄性亲本中第30名的数据作为后续亲本的筛选指标，选留后续测量中达到该指标的亲虾作为一代亲本。

亲本的强化培育与催熟：选出的亲虾使用1mg/l的聚维酮碘溶液进行体表消毒后于10月末-11月中旬转移至亲虾培育缸，按照密度为5尾/平方米，雌雄分开放养。亲虾进行强化培育，除日常饲料外，需增加鱼肉螺肉等动物性饵料，并配合以植物性饵料。严格控制饵料来源，防止引入病菌。为促使亲虾同步产卵，孵化池内的水温保持在18℃，温度过低会导致亲虾死亡，过高会导致雌虾卵巢发育不同步。于每年的2月开始催熟，逐渐升高水温，每天提高水温1℃，直至水温升高至25℃，并增加投饵量，此操作可以促进雌虾卵巢的同步发育，雌虾在卵巢发育过程中会蜕一次壳，因此需在养殖池中放置瓦片等隐蔽物，实现对软壳虾的保护。

2.亲虾的交配与繁殖：

雌雄亲虾配组规格比例与数目比例：3月初，将培育好的候选的亲虾进行雌雄配组。剔除断肢、体表有伤和活力不佳的亲虾，按照雄虾规格：雌虾规格=1.2：1的标准挑选配组亲虾，并将亲虾采用每组3雌1雄的比例进行配组。分组后，在室内水泥池中使用0.5m²的塑料漏筐罩住每组亲虾，塑料漏框能够限制每组亲虾的活动范围，但不会阻碍水体交流提高雌虾的抱卵比率。相比传统的群体交配，以上方法能够显著提高雌虾的抱卵比率，并且能够使雌虾的抱卵时间尽量靠近，使苗种孵化时间趋于一致，便于苗种下塘。同时，如此操作可以延缓子代遗传多样性降低速度，极大程度避免了近郊衰退。分组后，室内保持昏暗的光线，尽量避免惊扰，使其自然交配。

抱卵虾的培育：定期检查漏框内雌虾的抱卵情况，雌虾在交配后24h开始产卵，产卵后的雌虾时刻蜷缩腹节以保护受精卵，对受精卵进行观察时需要轻轻将雌虾拿起，并按住其尾节，防止雌虾挣扎时弹动尾节导致受精卵脱落。将抱卵虾转移至孵化池中，抱卵虾对溶氧的需求更高，需增强充氧，并加强对水体的消毒，防止受精卵感染霉菌，抱卵虾摄食量减少，甚至停止摄食，应减少投饵量，避免残饵过多引起的水质恶化。

3.幼虾的培育：

亲本抱卵性能的评估：受精卵发育至42-45天形成幼虾，幼虾全部脱离母体需3d左右。待全部幼虾脱离母体后，将雌虾移出。统计幼虾的数量，并除以抱卵雌虾的数目，计算每只雌虾的平均抱卵量。并与未经选育的亲本抱卵量进行比较，评估亲本选择效果。

幼虾的室内养殖：幼虾耗氧量高，应使用细密气石大量充氧。幼虾脱离母体后即开始摄食，投喂活的卤虫幼体并辅以小颗粒的配合饲料。抱卵虾体质差、幼虾前期饵料不足、饲料中钙质缺乏等原因均会导致幼虾蜕壳不全而死亡。红螯螯虾的幼虾在脱离母体后1-3天脱壳一次，随着虾的增长蜕壳期逐渐延长，蜕壳过程中虾较脆弱，应布置多孔的掩蔽体和附作物，同时补充高钙饲料，幼虾蜕壳后会摄食蜕下的空壳，此行为有助于其能量补充，不能摄食空壳的软壳虾往往更容易死亡。幼虾孵化第8天开始投喂配合饲料，早、中、晚各一次。按照12h光照、12h黑暗的昼夜节律调节光照，若养殖环境光线过强，虾的壳色变浅，甚至白色，不利于藏匿。

苗种下塘：4月底5月初开始放苗，放苗前5天用溴氯海因对水体进行消毒。选取苗种规格1.0cm左右、肢体完整、体质健壮、无伤、反应灵敏、活泼有力的虾苗进行放养，放养密度为75000尾/公顷。经25至30天，虾苗培育达2cm至3cm后撤去围网再进行全池放养。需要注意的是，应选择晴朗天气的早晨或傍晚投苗，避免阳光直射，虾苗运到培育池应进行泡袋调温，避免水温相差超过2℃而引起幼苗应激反应。放苗时应开启增氧泵进行增氧，放苗后，每天中午开增氧机2小时。投苗当天即要开始投喂，使用通威南美白对虾配合饲料的0号饲料，每天傍晚投喂1次，投喂系数为虾体重15%，15天后，投喂通威南美白对虾配合饲料的1号破碎料，投喂系数为10%，25天后，投喂通威南美白对虾配合饲料的1号饲料，投喂系数为5%，2个月后，投喂通威南美白对虾配合饲料的2号和3号饲料，虾体7cm之前投喂系数为3%，虾体达到10cm之后投喂系数为1%。

实施例2：

按照实施例1的方法，红螯螯虾候选亲本到达车间后，筛选出健康，体表无伤，规格大的亲本雌虾1000尾、雄虾300尾，之后按照第一腹节宽/全长指标对亲本进行评测，以前30%的数据为筛选标准，制定雌虾筛选标准为第一腹节宽/全长大于等于0.216，雄虾筛选标准为第一腹节宽/全长大于等于0.203，以此筛选出前30%的雄虾60只，雌虾180只作为亲本，同时随机选取雄虾60只、雌虾180只作为对照组，实验组与对照组亲虾的第一腹节宽长/全长比例数据见表1。按照雌雄比例3:1配组，共60组使用塑料漏筐隔离养殖等待抱卵。同时，将未经选留的对照组雌雄亲虾按照3：1配组，在与实验组相同的条件下进行繁殖。

表1红螯螯虾高产亲本与对照组的第一腹节宽/全长对比

最终，高产实验组获得150尾抱卵虾，抱卵率为83%，对照组获得120尾抱卵虾，抱卵率为67%，高产实验组抱卵率相比对照组显著提高。经统计，高产实验组获得3.5万尾虾苗，平均抱卵量为233颗/尾雌虾，对照组产苗2万尾，平均抱卵量为167颗/尾雌虾。高产实验组的雌虾抱卵量显著高于对照组，说明使用第一腹节宽/全长指标间接选择抱卵量的方法切实有效。

幼虾下塘3月后，随机捕捉高抱卵组幼虾200尾，对照组幼虾200尾，使用游标卡尺精确测量其第一腹节宽与全长，进行比较后发现，高抱卵组的幼虾的第一腹节宽/全长显著高于对照组（表2），说明子代的第一腹节宽指标/全长受到了明显的选择，同时也证明了该指标与抱卵量密切相关。

表2子一代红螯螯虾的第一腹节宽/全长对比

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