一种大鼠心衰模型建立方法与流程

2021-01-06 18:01:16|

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本发明是一种大鼠心衰模型建立方法，属于医学模型技术领域。

背景技术：

心室重塑是慢性心力衰竭发生、发展的核心机制，其中心肌成纤维细胞在心室重塑中扮演着关键的角色，已成为心衰治疗的新靶标；心力衰竭(心衰)是临床上各种心血管疾病发展的终末阶段,该疾病年病死率约为5％-10％，严重威胁人类健康。通过简单可靠的方法建立心衰动物模型，非常有利于心衰治疗药物的临床前药效评价及作用机制研究。目前，普遍采用外科手术开胸植入心脏起搏器，快速右心室起搏的方法，构建心衰动物模型，起搏器的安装方法则是建立心衰动物模型的关键技术。

近年来，随着生活水平的提高，人们饮食结构的改变高脂血症发病率越来越高，因为长期血脂过高会引发机体代谢紊乱，进而产生动脉粥样硬化、冠心病、心肌梗死等心脑血管疾病，hlp严重危害着人类的身体健康。然而，在临床上，很大部分心衰人群并非是由冠心病、心肌梗死、心肌病等引起的心力衰竭，但此类病人大都存在高脂血症，因此为明确此类人群明发病病因，现在急需一种大鼠心衰模型建立方法来解决上述出现的问题。

技术实现要素：

针对现有技术存在的不足，本发明目的是提供一种大鼠心衰模型建立方法，以解决上述背景技术中提出的问题，本发明心衰模型重复性好，简单客观，适用范围广。

为了实现上述目的，本发明是通过如下的技术方案来实现：一种大鼠心衰模型建立方法，其特征在于，所述大鼠心衰模型建立方法包括以下步骤：

第一步，取8周龄雄性spf级c57/bl6大鼠，将大鼠置于净化笼中，温度为20-25℃，相对湿度40％-50％，保持光照明暗各12h，以大鼠标准饲料进行饲喂，自由饮水；

第二步，适应性饲喂2周后植入载有ox-ldl的微渗透压泵4周即得；

第三步，麻醉，给大鼠静脉推注戊巴比妥钠30mg/kg的麻醉剂；

第四步，安装起搏器电极大鼠右侧颈部平行于身体皮肤切开约2cm切口，分离右颈总静脉血管，穿刺颈总静脉，插入5f导管鞘建立血管通管；用缝合线完全结扎右颈总静脉远心端，用缝合线轻微将近心端右颈总静脉血管壁与导管鞘扎紧固定，在介入设备血管造影x射线机引导下，顺导管鞘插入起搏器电极至右心室心尖部位；

第五步，继续送入起搏器电极，至电极接头完全接触右心室内膜后，继续插入电极导线，使电极导线在右心室内形成环状结构；连通起搏器电极导线与起搏器接头，确认起搏器正常工作，取出导管鞘，将颈总静脉近心端同插入的电极导线结扎完全，纱布止血；

第六步，安装起搏器选取大鼠颈背部皮下作为起搏器埋入部位，切开皮肤2-3cm，钝性分离皮下组织形成大小约为起搏器体积的空腔，将右颈总静脉切口处起搏器电极导线通过皮下隧道与起搏器接头连接并固定，再次确定起搏器正常工作；然后进行右颈部皮肤皮下切口和囊袋切口的皮下缝合；切口处皮肤外表面均使用碘伏消毒处理；

第七步，术后护理术后每天使用碘伏消毒处理切口处皮肤，每天肌肉注射80万单位青霉素钠，连续护理3天，大鼠体能基本恢复。

进一步地，植入载有ox-ldl200ng/kg/min的微渗透压泵。

进一步地，所述大鼠模型建模完成后，对模型的左心室舒张期内径、左心室缩期内径、左心室缩短分数、心重指数、bnp信息进行分析，并对分析后的指标采用盲法检测。

进一步地，对模型的左心室舒张期内径、左心室收缩期内径、左心室缩短分数、心重指数、bnp信息进行分析方法包括：

(1)在建模前、后分别测量左心室舒张期内径、左心室收缩期内径、左心室缩短分数；

(2)建模结束后，腹主动脉取血后，分离血清，并在-90℃的条件下保持，剖取心脏，洗去残血，滤纸吸干，称量后计算出心重指数；

(3)通过elisa法检测血清bnp。

进一步地，所述左心室舒张期内径、左心室收缩期内径、左心室缩短分数采用心超测量。

进一步地，所述麻醉使用的麻醉剂包括3％戊巴比妥钠溶液、舒泰-50、丙泊酚和氯胺酮。

本发明的有益效果：简化了麻醉方案，不需要复杂的呼吸监护及血氧浓度监护；仅做颈部皮肤切口，分离右颈总静脉，安装起搏器电极。整个微创操作中，大鼠仅有少量出血，避免了胸骨正中开胸重大手术创伤引起的大量出血风险、气胸及呼吸衰竭风险；微创手术缝合切口皮肤后，比重大开胸手术更容易术后抗感染处理，更有利于大鼠伤口愈合及体能恢复，通过介入方法引导安装并固定起搏器电极，保证了电极接头与右心室内壁紧密接触，进而保障了起搏器的正常工作，微创介入手术的大鼠术后更容易护理，比开胸手术安装起搏器的大鼠存活率更高通过超声心动图及血浆bnp水平等确定心力衰竭程度，本发明的心力衰竭模型与以往压力负荷型、容量负荷型、心肌缺血型、心脏毒性药物等引起的心力衰竭模型不同，填补了不明原因心力衰竭大鼠模型的空白，属于高脂血症引起心力衰竭的新型大鼠心衰模型，本发明心衰模型重复性好，简单客观，适用范围广。

具体实施方式

为使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。

作为本发明的一个实施例：一种大鼠心衰模型建立方法，包括以下步骤：

第二步，适应性饲喂2周后植入载有ox-ldl的微渗透压泵4周即得；

第三步，麻醉，给大鼠静脉推注戊巴比妥钠30mg/kg的麻醉剂；

第七步，术后护理术后每天使用碘伏消毒处理切口处皮肤，每天肌肉注射80万单位青霉素钠，连续护理3天，大鼠体能基本恢复。

本实施例中：植入载有ox-ldl200ng/kg/min的微渗透压泵。

本实施例中：大鼠模型建模完成后，对模型的左心室舒张期内径、左心室缩期内径、左心室缩短分数、心重指数、bnp信息进行分析，并对分析后的指标采用盲法检测。

本实施例中：对模型的左心室舒张期内径、左心室收缩期内径、左心室缩短分数、心重指数、bnp信息进行分析方法包括：

(1)在建模前、后分别测量左心室舒张期内径、左心室收缩期内径、左心室缩短分数；

(2)建模结束后，腹主动脉取血后，分离血清，并在-90℃的条件下保持，剖取心脏，洗去残血，滤纸吸干，称量后计算出心重指数；

(3)通过elisa法检测血清bnp。

本实施例中：左心室舒张期内径、左心室收缩期内径、左心室缩短分数采用心超测量。

本实施例中：麻醉使用的麻醉剂包括3％戊巴比妥钠溶液、舒泰-50、丙泊酚和氯胺酮。

以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点，对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。

此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

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