一种建立硬脊膜半透膜型骶管囊肿模型的方法与流程
本发明涉及实验动物模型领域,更具体地涉及硬脊膜半透膜型骶管囊肿模型的建立方法。
背景技术:
骶管囊肿属脊膜囊肿的一种类型,大体分为两种:1)naborsib型:不含有脊神经根纤维的硬膜外脊膜囊肿(naborsib型),为先天性硬膜憩室或先天性硬膜缺陷所致蛛网膜疝出,多位于骶管s1-3水平,常见于成年人,男女之间无明显差异;2)naborsii型:含有脊神经根纤维的硬膜外脊膜囊肿,又称之为tarlov神经束膜囊肿或脊神经根憩室(naborsii型),为脊髓神经根袖远端的异常扩张形成囊肿,一般位于s2-3水平脊神经节或其远端,多见于成年人。
随着磁共振检查在县市级医院的普及,骶管囊肿的发现率呈逐年增加的趋势。尽管目前对此疾病的发病机制和治疗方式等方面认识仍存在诸多争议,不过目前一致认同的是:一旦出现临床症状应立即手术,以免发生持久性神经根损伤。在此情况下,需要有效的治疗骶管囊肿,了解其发生发展机制、并针对其发病进程进行逆向性纠正措施才是最为可靠的治疗方式。
然而,令人遗憾的是,目前尚无实验动物模型来模拟骶管囊肿,因此难以比较全面地了解硬脊膜半透膜型骶管囊肿的形成过程及既有发病机制。
因此,在本领域中仍然需要一种能够准确模拟硬脊膜半透膜型骶管囊肿的实验动物模型。
技术实现要素:
针对现有技术存在的不足,本发明的一个目的在于提供一种能够准确模拟硬脊膜半透膜型骶管囊肿的动物模型。
上述目的通过以下方案来实现:
在一方面,本发明提供一种建立硬脊膜半透膜型骶管囊肿模型的方法,所述方法包括以下步骤:步骤1):选择模型动物;步骤2):通过手术暴露出所述模型动物腰骶椎管内硬膜囊末端;步骤3):用刀具慢慢刮擦所述硬膜囊末端的侧壁硬膜,直至其变成半透膜状;步骤4):完成建模。
通过采用上述技术方案,能够建立硬脊膜半透膜型骶管囊肿的动物模型,从而为硬脊膜半透膜型骶管囊肿的治疗找到更有效的预防和治疗方法奠定基础。此方法步骤简单、对模型动物伤害小、建模成功率高。
进一步优选地,所述模型动物选自大鼠或兔中的一种,年龄为4周龄至12周龄。
通过采用该周龄的大鼠或兔,能够提高建模的成功率。
进一步优选地,所述步骤2)中的手术为切除局部椎板。
通过采用该技术方案,能够快速露出硬膜囊末端且不伤及蛛网膜,从而有利于实施后续手术。
此外,在操作步骤3)时,必须保证硬膜完整不破损。如果手术途中发生硬膜破损,则需要进行局部缝合处理,然后选择另外的位置重复步骤3)的步骤。
进一步优选地,所述方法还包括:步骤5):将手术后的模型动物饲养在只允许单向爬行的饲养装置内,其中所述饲养装置呈竖立状态,并且将饲料和水源放置在竖直方向上的高位处。
通过使模型动物每天至少处于直立体位一段时间,能够使脑脊液在重力作用下通过“阀门”进入囊肿内,从而模拟真实的囊肿状态。
进一步优选地,所述饲养装置为竹筒,其直径比所述模型动物的腰部直径大至多20%。
竹筒容易获得,且结构轻质、结实、耐用,易于使模型动物处于直立状态。通过该技术方案,能够使模型动物在竹筒内保持直立状态,且同时能有适度的活动空间。
进一步优选地,所述饲养装置为不锈钢筒,其直径比所述模型动物的腰部直径大至多20%。
不锈钢筒容易制作,且坚固、耐用,易于使模型动物处于直立状态。通过该技术方案,能够使模型动物在不锈钢筒内保持直立状态,且同时能有适度的活动空间。
进一步优选地,保证所述模型动物处于直立体位至少1小时,优选至少2小时。
通过使模型动物每天至少处于直立体位合适的时间长度,能够较好地控制重力作用下通过“阀门”进入囊肿内的脑脊液的量,从而更好地控制建模过程。。
综上所述,通过上述方法,本发明能够实现如下良好的技术效果:
1)成功模拟存活率达60%以上的骶管囊肿动物模型,且其囊肿形态跟真实病例中的囊肿形态非常相似;
2)操作方法简单、可靠,且建模时间短;
3)利用所建立的动物模型,本领域的普通技术人员能更好地了解骶管囊肿形成的过程,有力的诠释既有发病机制,同时以实验的方式探索更好的治疗方案,为骶管囊肿找到更有效的预防和治疗方法奠定基础。
附图说明
以下将结合附图来具体描述本发明的一些优选实施方式。本领域的普通技术人员将会理解,这些附图仅用于举例说明的目的,而无意于以任何方式来限制本发明的范围。
图1是显示骶管囊肿的形成示意图。
图2是在手术中观察到的疑似半透膜型硬膜囊的照片。
具体实施方式
以下将结合附图和实施例来描述本发明的一些具体实施方式。本领域的普通技术人员会理解,提供这些实施例的目的仅仅是为了举例说明如何能够实施本发明的方案,而非以任何方式限制本发明的范围。
图1显示骶管囊肿的形成示意图。如图1可见,骶管包括两层,外膜即外层的硬膜囊和位于其内的蛛网膜层。一种可能的机制包括,囊肿通过一个活瓣(阀门)与蛛网膜下隙相通,活瓣只允许脑脊液进入,但是脑脊液无法流出,这样液体逐渐蓄积成为囊肿。
不拘泥于理论,在大量的手术实践中,本发明人推测硬膜囊半透膜型骶管囊肿的形成机制可能为:硬脊膜应分为脏层和壁层,因先天薄弱和/或后天损伤的原因而出现壁层缺失,壁层缺失后,骶管内硬膜囊末端在脑脊液搏动和直立位静水压的持久作用下,脏层硬脊膜可逐渐演变为半透膜,所述半透膜具有水渗透能力,导致脑脊液自终池慢慢往外渗出而逐渐形成囊肿。支持依据是骶管囊肿术中经常在囊肿内发现菲薄的硬脊膜侧壁,其表现出一定的半透膜渗出能力,如图2所示出的。
基于上述推测机制,本发明提出了一种硬脊膜半透膜型骶管囊肿模型建立方法。该方法主要包括通过手术暴露出所述模型动物腰骶椎管内硬膜囊末端;用刀具慢慢刮擦所述硬膜囊末端的侧壁硬膜,直至其变成半透膜状,从而成模。手术后,将模型动物饲养在只允许单向爬行的饲养装置内,其中所述饲养装置呈竖立状态,并且将饲养模型动物的饲料和水源放置在竖直方向上的高位处。不拘泥于任何理论,通过直立饲养术后的动物模型,能够使脑脊更快地液通过该“半透膜”渗出,从而快速建立囊肿模型。
下面将结合实施例对建模方法进行更为详细的描述和说明。本领域的普通技术人员将会理解,提供这些实施例的目的只是用于示例性说明的目的,即使本领域的普通技术人员能够更好地理解本发明是如何实施的,而不是对本发明的范围构成任何限制。
实验方法
1)实验动物及分组从北京医学实验动物中心获得4周龄和12周龄spf级sd雄性大鼠各20只,体重分别为(260±10)和(340±10)克,进行普通喂养。饮食自由,室温20-25℃,空气湿度40-60%,自然昼夜节律。饮水量和摄食量每天记录一次。
2)手术方法取4周龄和12周龄大鼠各10只进行实验,另外10只分别留作对照。
术前停止饲喂及饮水8小时进行术前准备。用10%水合氯醛溶液腹腔注射麻醉。确认麻醉后对大鼠进行备皮、消毒。之后进行局部椎板切除手术,通过手术暴露出所述模型动物腰骶椎管内硬膜囊末端,用刀具慢慢刮擦所述硬膜囊末端的侧壁硬膜,直至其变成半透膜状,从而完成硬脊膜半透膜型骶管囊肿大鼠模型。
3)术后处理手术1天后将大鼠饲养在只允许单向爬行的竹筒内,将其放置为呈竖立状态,并且将饲养用的饲料和水源放置在竖直方向上的高位,使大鼠必须以直立状态休息和进食。每天使大鼠直立3个小时,连续观察14天,每天通过mri观察骶管囊肿情况。
4)影像学结果分析方法利用photoshopcs4.0软件进行图像处理,并且测量囊肿的最宽维度尺寸。
5)实验结果所有实验大鼠均顺利度过手术期,无手术并发症或死亡。囊肿尺寸见下表1。
表1:4周龄和12周龄大鼠中的囊肿尺寸表
由上可见,根据本发明的方法建模的成功率较高,4周龄和12周龄的建模成功率分别达到了60%和80%。另外,在通过mri获得的图像可见,所得模型大鼠的骶管囊肿清晰可见,呈卵圆形或不规则形状,囊液信号与脑脊液信号相似,其证明是脑脊液进入囊中形成囊肿。在没有成功建模的大鼠中,据推测从半透膜渗出的液体均被周围组织快速吸收,因此没有形成囊肿。
本具体实施例仅仅是对本发明的解释,其并不是对本发明的限制,本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改,但只要在本发明的权利要求范围内都受到专利法的保护。
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