一种航天郁证动物模型的制备方法与流程

本发明属于动物模型制备技术领域，尤其涉及一种航天郁证动物模型的制备方法。

背景技术：

在航天飞行过程中，航天员面临特殊而又复杂的航天环境，其中有运载工具和航天器一路平安的超重、失重、噪声、振动、冲击和曲线加速度所造成的影响，有来自航天器内外环境因素的影响，如舱内狭小环境、大气压力、有害气体、辐射、流星、陨石等，所有这些因素都可单一地、综合地、间接或直接地对人体的身心两方面造成影响。这些都会不同程度的增加航天员的精神负担，影响其身心健康，另一方面，长期停留在太空，单调、重复的工作也会使航天员感到抑郁。出现疲乏虚弱、懒言少动、心悸健忘、失眠多梦、胸闷不舒、不思饮食、体重减轻等郁证的表现。

航天过程中，郁证一旦发生不仅直接影响航天员的健康，甚至影响航天飞行任务的完成，随着我国载人航天事业的不断发展，人类在太空停留时间不断延长，航天郁证的防治将成为航天医学专家高度关注的问题，因此，开展航天郁证的相关研究势在必行。

技术实现要素：

本发明的目的在于通过模型建立，研究不同情况对航天员郁证的影响。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种航天郁证动物模型的制备方法，步骤如下：

s1、航天郁证模型塑造，采用密闭孤养、模拟失重、噪声、昼夜节律来验证成年sd雄性大鼠接受模拟航天应激刺激情况；

s2、航天郁证模型行为学评价：通过糖水偏好实验、旷场实验、morris水迷宫实验、跳台实验、强迫游泳实验来检测来检测郁证状态情况。

进一步地，模拟失重的方式是采用陈杰改良式尾吊，躯体与水平呈30°角。

进一步地，昼夜节律的改变：通过灯光控制，实现90分钟一明暗周期模拟空间飞行昼夜更替。

进一步地，跳台实验为反应箱底铺有通电的铜栅，动物受到电击，其正常反应是跳上箱内绝缘的平台以避免伤害性刺激。

与现有技术相比，本发明采用的技术方案为：

通过简单的模型，可以推测航天环境对航天员的影响，从而可以事先预防相关事情发生。

附图说明

图1为航天郁证动物模型的制备方法的郁证空白组行走曲线示意图。

图2为航天郁证动物模型的制备方法的郁证模型组行走曲线示意图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

1.一种航天郁证动物模型的制备

2.1.1材料与方法

a.试剂与设备

旷场实验计算机图像实时检测分析处理系统(由中国医学科学院药用植物研究所、中国航天员科研训练中心、北京三维拓盟数字影像技术有限公司联合研制开发)、直径1m左右的黑色圆形敞箱；morris水迷宫计算机自动控制和图像分析处理系统(中国航天员中心和中国医学科学院药用植物研究所联合研制开发)；跳台实验sss-1型穿梭避暗跳台测试箱(中国航天员训练中心和中国医学科学院药用植物研究所、北京鑫海华仪科技有限公司联合研制开发)；悬尾实验计算机实时检测分析处理系统(中国航天员训练中心和中国医学科学院药用植物研究所联合研制开发)；盐酸佛西汀分散片(百忧解)，patheonfrance(法国)。

b.实验动物

成年sd雄性大鼠，体重200g左右，适应性喂养10d，随机分成空白对照组和模型组，每组8只。对照组共养，假尾吊，不接受特殊刺激，模型组接受模拟航天应激刺激。

c.航天郁证模型塑造

采用经典孤养抑郁模型，加以航天模拟失重(尾吊)、昼夜节律的改变(昼夜颠倒)、噪声刺激等刺激因素造成航天郁证模型。造模6周：

(1)密闭孤养：单笼饲养，笼四周使用毛玻璃，造成幽闭环境；

(2)模拟失重：采用陈杰改良式尾吊，躯体与水平呈30°角；

(3)噪声：稳态噪声，声级65db(a)左右；

(4)昼夜节律改变：通过灯光控制，实现90分钟一明暗周期模拟空间飞行昼夜更替。

2.1.2航天郁证模型行为学评价

2.1.2.1航天郁证模型建立6w后大鼠行为学评价及结果

a.糖水偏好实验

实验共3天。第—个24h，两瓶均装有1％蔗糖水各200ml。随后的24h，—个瓶装有1％蔗糖水200ml，—个瓶装纯净水200ml。24h的禁食禁水后，在暗光环境进行动物的基础糖水/纯水消耗实验，同时给予每只大鼠事先定量好的两瓶水(1瓶1％蔗糖水，1瓶纯水，各200ml)，30min后调换蔗糖水和纯水的位置，1h后取走两瓶并称量，计算糖水偏好率(糖水消耗/总液体消耗*100％)。

表1航天郁证大鼠模型糖水偏好率的变化(x±s，n＝8)

注：与空白组比较，△△△p<0.001

b.旷场实验

使用黑色圆形旷场，直径80cm，高30cm。将大鼠置于旷场中央，同时开始观察记录5min，过后清洗旷场内壁及底面，以免上次动物余留的气味影响下次测试结果。通过旷场上部的摄像头，数据自动采集和处理系统记录大鼠的运动时间，人工观察大鼠的活动情况，记录直立次数(两前肢离开水平地面1cm以上的次数，反映动物对新异环境探究程度、适应能力)。

结果显示，模型组运动时间和直立次数都显著减少，模型大鼠在新奇环境中自主行为和探究行为的减少，显示航天郁证行为。

表2航天郁证大鼠模型旷场探索行为的变化(x±s，n＝8)

注：与空白组比较△△p<0.01

c.morris水迷宫实验

测试分为定位航行和空间探索两个阶段。水迷宫直径120cm，高50cm，水池水深30cm(高出平台1cm)，水温23-24℃，平台置于第三象限，水中加入适量墨汁使平台不可视，迷宫正上方安装摄像头，安静、暗光环境。首先进行定位航行实验，用于测量大鼠对水迷宫学习和记忆的获取能力。历时4天，每天每只动物分别从第一、二象限面朝池壁放入水池1次，动物将在水池内游泳，直到找到在水平面下的平台为止，放入水中前和找到平台后分别让动物在平台上适应10s。如果动物在60s内没有找到平台，则用杆引导动物找到平台。数据自动采集和处理系统自动观察和记录大鼠的运动轨迹、游程、游速及所需时间。第五天撤去平台，进行空间探索实验，考察动物对原平台空间位置的记忆能力。从第一象限将动物面朝池壁放入水中，记录60s内动物在第三象限总游程、总时间。

如图1、图2所示，定位航行第四天，模型组大鼠达到平台的路程比空白组增加，定位航行时间各组间没有显著变化。撤掉平台进行的空间搜索实验中，模型组大鼠在平台象限游泳路程和游泳时间均较空白组减少，表明航天郁证模型大鼠学习记忆能力下降。

表3航天郁证大鼠模型定位航行实验和空间搜索实验的变化(x±s，n＝8)

注：与空白组比较，△△p<0.01

d.跳台实验

反应箱底铺有通65v电的铜栅，动物受到电击，其正常反应是跳上箱内绝缘的平台以避免伤害性刺激。多数动物可能再次或多次跳至铜栅上，受到电击又迅速跳回平台，如此训练5min。24h后重作测验4min，此即记忆保持测验,记录第一次跳上平台的潜伏期、错误次数。

结果显示，模型组跳台潜伏期和错误次数都增加，表明航天郁证模型的被动学习记忆能力减退。

表4航天郁证大鼠模型定位航行实验和空间搜索实验的变化(x±s，n＝8)

注：与空白组比较，△p<0.05，△△p<0.01

e.强迫游泳实验

采用白色圆柱形桶，底部直径21cm，高46cm，水温23-25℃，水深30cm。将大鼠放入桶中6min，观察记录后4min内大鼠的不动时间、攀爬次数。

实验结果显示，模型组强迫游泳不动时间延长，攀爬次数减少，这些绝望行为的产生说明郁证状态的存在。

表5航天郁证大鼠模型强迫游泳实验不动时间和攀爬次数

注：与空白组比较，△p<0.05，△△p<0.01

以上公开的本发明优选实施例只是用于帮助阐述本发明。优选实施例并没有详尽叙述所有的细节，也不限制该发明仅为所述的具体实施方式。显然，根据本说明书的内容，可作很多的修改和变化。本说明书选取并具体描述这些实施例，是为了更好地解释本发明的原理和实际应用，从而使所属技术领域人员能很好的理解和利用本发明。本发明仅受权利要求书及其全部范围和等效物的限制。

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