引起性传播疾病的细菌和免疫T细胞检测的制作方法

交叉引用本申请要求于2017年10月26日提交的美国临时申请第62/577,440号的权益，其公开内容出于所有目的以其整体并入本文。其中，本发明涉及进行生物和化学测定(如免疫测定)的装置和方法。
背景技术：
：沙眼衣原体(引起衣原体)、淋病奈瑟氏球菌(引起淋病)或梅毒螺旋体(引起梅毒)的细菌感染是常见的性传播疾病(std)，其可对人的健康造成严重、永久的损害。疾病控制和预防中心(cdc)估计每年有超过2.5百万美国人感染衣原体。std在15-24岁的性活跃人群中尤其普遍。许多std患者没有症状，因此cdc和其他卫生组织建议定期筛查风险较高的人群。然而，对这些细菌中的许多细菌例如衣原体的传统测试(例如，细胞培养)是耗时的(5-7天)并且难以实施。免疫t细胞在细胞介导的免疫中起关键作用。几个t细胞亚群各自具有不同的功能。cd4(分化簇4)是在免疫细胞如t辅助细胞、单核细胞、巨噬细胞和树突细胞表面发现的糖蛋白。cd4+细胞分泌称为细胞因子的小蛋白，其调节或帮助主动免疫应答。已经广泛接受cd4表达细胞的数量作为hiv(人免疫缺陷病毒)感染和aids(获得性免疫缺陷综合征)的指示。cd8+t细胞在其表面表达cd8糖蛋白，其识别与mhci类分子相关的抗原。cd8细胞破坏病毒感染的细胞和肿瘤细胞，并且还涉及移植排斥。一直需要更快速和更简单的衣原体测试，以及快速和可靠的cd3+、cd8+和cd4+细胞测试。本发明提供执行测定的装置和方法，所述测定可用于以高速和高效检测样品中的std和/或量化t细胞(例如cd4表达细胞)的细菌。技术实现要素：在一个方面，本发明提供了一种方法，包含以下步骤：提供包含第一板和第二板的装置，所述第一板和/或所述第二板在其内表面上包含被配置为接触样品的样品接触区域，其中所述样品含有或疑似含有引起性传播疾病(std)的细菌；将所述样品沉积到所述样品接触区域上；向所述沉积的样品中加入染色介质以形成混合物，其中所述染色介质包含对所述细菌具有特异性的抗体；用所述第二板压缩所述第一板，使得至少一部分所述混合物形成薄层；孵育混合物，使得抗体与引起std的细菌结合并产生信号；以及检测所述信号，其中所检测的信号指示所述样品中细菌的存在。本公开的任何实施例的方法，其中引起std的细菌选自由以下各项组成的组：沙眼衣原体、淋病奈瑟氏球菌和梅毒螺旋体。本公开的任何实施例的方法，其中所述孵育步骤执行约60秒或更短时间。本公开的任何实施例的方法，其中所述孵育步骤执行约30秒或更短时间。本公开的任何实施例的方法，其中所述孵育步骤进行约15秒或更短时间。本公开的任何实施例的方法，其中所述抗体是荧光标记的。本公开的任何实施例的方法，其中所述薄层具有小于100μm的均匀厚度。本公开的任何实施例的方法，其中所述薄层具有小于50μm的均匀厚度。本公开的任何实施例的方法，其中所述薄层具有约30μm或以下的均匀厚度。本公开的任何实施例的方法，其中所述信号是通过对所述孵育的样品进行成像步骤(f)来检测的。在一个方面，本发明提供了一种方法，包含以下步骤：提供包含第一板和第二板的装置，所述板中的一个或两个在其内表面上包含具有结合位点的样品接触区域，其中所述样品接触区域被配置为接触样品，其中所述样品含有或疑似包含引起性传播疾病(std)的细菌，并且其中所述结合位点包含与所述样品中的所述细菌结合的固定化捕获抗体；提供所述板中的一个或两个，所述板在其内表面上包含具有储存位点的样品接触区域，其中所述储存位点包含检测抗体，所述检测抗体在接触所述样品时能够在所述样品中扩散，并且其中所述捕获抗体和所述检测抗体结合至所述细菌上的不同位点以形成捕获抗体-细菌-检测抗体夹心；将所述样品沉积到所述板的所述样品接触区域中的一个或两个上；使这两个板处于闭合构造，其中，在该闭合构造中，(c)中至少一部分沉积的样品被限定在两个板的样品接触区域之间，并且该第一板和该第二板具有在0.01μm至200μm范围内的平均厚度；以及检测信号，其中所述信号在所述捕获抗体-细菌-检测抗体形成后产生，并且所检测的信号指示所述样品中存在引起性传播疾病(std)的细菌。本公开的任何实施例的方法，其中所述样品来自人。本公开的任何实施例的方法，其中所述细菌选自由以下各项组成的组：沙眼衣原体、淋病奈瑟氏球菌和梅毒螺旋体。本公开的任何实施例的方法，其中所述捕获抗体具有包含蛋白质稳定剂的捕获位点。本公开的任何实施例的方法，其中所述储存位点还包含蛋白质稳定剂。本公开的任何实施例的方法，其中所述检测抗体包含荧光标签。本公开的任何实施例的方法，其中所述两个板之间的所述样品具有在0.5μm至50μm的范围内的均匀厚度。本公开的任何实施例的方法，其中所述两个板之间的所述样品具有在1μm至35μm的范围内的均匀厚度。本公开的任何实施例的方法，进一步包含步骤(g)：确定是否存在引起std的细菌。本公开的任何实施例的方法，其中所述步骤(a)-(e)是在小于10分钟内执行的。本公开的任何实施例的方法，其中所述步骤(e)-(e)是在小于3分钟内执行的。本公开的任何实施例的方法，其中所述步骤(a)-(e)是在小于2分钟内执行的。本公开的任何实施例的方法，其中样品接触区域中的一个或两个包含多个间隔件，其中当板处于闭合构造中时，多个间隔件调节板的样品接触区域之间的间距。本公开的任何实施例的方法，其中所述第一板包含多个结合位点并且所述第二板包含多个对应的储存位点，其中当板处于闭合构造中时，每个结合位点都面向一个对应的储存位点。本公开的任何实施例的方法和装置，其中所述检测抗体在所述储存位点上干燥。本公开的任何实施例的方法，其中所述结合位点处的所述捕获抗体位于扩增所述捕获的检测抗体的光信号的扩增表面上。本公开的任何实施例的方法，其中所述结合位点处的所述捕获抗体位于扩增所述捕获的检测抗体的光信号的扩增表面上，其中所述扩增是邻近依赖性的，因为所述扩增随着所述捕获抗体与所述检测抗体之间的距离增加而显著减少。本公开的任何实施例的方法，其中所述信号是通过电子方式、光学方式，或两者来检测的。本公开的任何实施例的方法，其中所述信号是通过荧光或spr检测的。在一个方面，本发明提供一种方法，包含以下步骤：提供包含第一板和第二板的装置，所述板中的一个或两个在其内表面上包含具有结合位点的样品接触区域，其中所述样品接触区域被配置为接触液体样品，其中所述液体样品含有或疑似含有表达生物标记物的细胞，提供了板中的一个或两个，所述板在其内表面上包含具有储存位点的样品接触区域，其中所述储存位点包含位于其中的检测剂，其中所述检测剂被配置为结合所述生物标记物，将所述样品沉积到所述板的所述样品接触区域中的一个或两个上；其中所述沉积的液体样品与所述检测剂接触；使这两个板处于闭合构造，其中，在该闭合构造中，(c)中至少一部分沉积的样品被限定在两个板的样品接触区域之间，并且该第一板和该第二板具有在0.01μm至200μm范围内的平均厚度；孵育所述沉积的液体样品一段时间；通过对沉积的样品层成像并计数表达生物标记物的细胞来量化表达生物标记物的细胞。在一个方面，本发明提供了一种方法，包含提供第一板和第二板，其中每个板在其各自的内表面上包含被配置为接触液体样品的样品接触区域，其中检测剂位于板中的一个或两个的样品接触区域上，并且其中检测剂被配置为特异性结合生物标记物；将所述样品沉积到所述样品接触区域上，其中所述沉积的样品包含表达所述生物标记物的细胞；按压所述第一板和所述第二板以将所沉积的样品压缩成薄层，所述薄层至少部分地由彼此面对的两个样品接触区域限定；孵育约60秒或更短时间段；以及通过对沉积的样品层成像并计数表达生物标记物的细胞来量化表达生物标记物的细胞。在一个方面，本发明提供了一种方法，包含提供第一板和第二板，每个板在其各自的内表面上包含样品接触区域，该样品接触区域被配置为接触血液样品，其中检测剂被定位在板中的一个或两个上的样品接触区域上，并且其中检测剂被配置为特异性结合选自由以下各项组成的组的抗原：cd3、cd4和cd8，将血液样品沉积在样品接触区域中，其中所述血液样品包含表达cd3、cd4或cd8的细胞；按压所述第一板和所述第二板以将所述血液样品压缩成薄层，所述薄层至少部分地由彼此面对的两个样品接触区域限定；孵育约60秒或更短时间段；以及通过对所述压缩血液样品成像并计数表达cd3、cd4或cd8的细胞来量化表达cd3、cd4或cd8的细胞。在一个方面，本发明提供了一种设备，该设备包含可相对于彼此移动成不同构造的第一板和第二板，包括闭合构造和开放构造，其中每个板在其各自的内表面上包含样品接触区域，其被配置为接触表达或预期表达生物标记物的液体样品，其中检测剂位于所述板中的一个或两个上并且被配置为特异性结合至所述生物标记物；以及适配器，被配置为当处于闭合构造时容纳所述第一板和第二板并且可附接到移动装置，其中所述移动装置包含成像器，所述适配器被配置为当所述适配器附接到移动装置时将所述液体样品定位在所述成像器的视野(fov)中，所述成像器被配置为捕获所述液体样品的图像，从而在所述样品与所述检测剂孵育约60秒或更短时间段之后，检测/测量由所述生物标记物与所述检测剂的结合产生的信号。本公开的任何实施例的方法或设备，其中所述时间段是约30秒或更短。本公开的任何实施例的方法或设备，其条件是在所述孵育步骤(d)之后不冲洗所述样品接触区域。本公开的任何实施例的方法或设备，其中所述检测剂是抗体。本公开的任何实施例的方法或设备，其中所述抗体用荧光团标记。本公开的任何实施例的方法或设备，其中所述检测剂是用在激发时发射信号的信号分子标记的。本公开的任何实施例的方法或设备，其中所述薄层具有大约等于或小于10μm的均匀厚度。本公开的任何实施例的方法或设备，其中所述薄层具有大约等于或小于2μm的均匀厚度。本公开的任何实施例的方法或设备，其中所述样品是全血。本公开的任何实施例的方法或设备，其中所述生物标记物是cd3(分化簇3)。本公开的任何实施例的方法或设备，其中所述生物标记物是cd4(分化簇4)。本公开的任何实施例的方法或设备，其中所述生物标记物是cd8(分化簇8)。本公开的任何实施例的方法或设备，其中所述细胞是t细胞。本公开的任何实施例的方法或设备，其中所述检测剂被固定在所述样品接触区域上。本公开的任何实施例的方法或设备，其中所述染色的细胞或细菌在不冲洗掉染色溶液的情况下成像。附图说明本领域技术人员将理解，下面描述的附图仅用于说明的目的。附图不旨在以任何方式限制本发明的范围。在一些附图中，附图是按比例绘制的。在给出实验数据点的图中，连接数据点的线仅用于引导观察数据，而没有其它意义。图1是衣原体感染细胞染色方法的示意图。图(a)示出了常规方法(现有技术)；图(b)示出了本发明的实施例，其中采用qmax装置。图2示出了使用qmax装置进行衣原体染色的示例性图片。图(a)说明了使用衣原体抗体孵育15秒的实验结果；图(b)说明了使用衣原体抗体孵育30秒的实验结果。图3示出了在没有可选的冲洗步骤的情况下用qmax装置进行衣原体染色的示例性图片。图4提供了常规染色和使用qmax装置染色的结果的总结。图5示出了衣原体感染细胞的染色的示意图和结果。图(a)示出了染色方法的设计；图(b)示出了用智能手机的相机拍摄的衣原体感染细胞的免疫染色图像，其中一步冲洗；图(c)示出了用智能手机相机拍摄的衣原体感染细胞的免疫染色图像，其中没有冲洗。图6示出了qmax装置的示意图，其制备用于衣原体检测的一步夹心测定。图(a)示出了附着有检测抗体的x-板的图示；图(b)示出了说明如何将抗体印刷在x-板上的图示；图(c)示出了附着有捕获抗体的pmma基底的图示。图7示出了说明了进行夹心测定以检测衣原体的方法的示例性流程图。图8示出了检测衣原体的夹心测定结果的示例。图9提供了示出根据本发明一些实施例对cd4表达细胞进行染色的方法的示意图。图10示出了在明场和荧光中使用qmax装置的cd4染色的示例性图片。用倒置显微镜捕获图像。图(a)示出了使用具有2μm间隙的qmax装置的实验的结果；图(b)示出了使用具有10μm间隙的qmax装置的实验的结果。图11示出了根据本发明的一些实施例的用于捕获样品的图像的设备的示意图。图12示出了使用qmax装置的cd4染色的示例性图片，其中所述图片是使用iphone-激光装置捕获的。图13示出了的示例性流程图，展示了对cd4表达细胞进行染色测定的流程。图14示出了crof(压缩调节开放流)实施例的图示。图(a)示出了第一板和第二板，其中第一板具有间隔件。图(b)示出了以开放构造将样品沉积在第一板(示出)或第二板(未示出)或两者(未示出)上。图(c)示出了(i)使用两个板展开样品(样品在板之间流动)并减小样品厚度，以及(ii)在闭合构造中使用间隔件和板调节样品厚度。每个板的内表面具有一个或多个结合位点和或储存位点(未示出)。示例性实施例的详细说明以下详细描述通过示例而非限制的方式示出了本发明的一些实施例。本文使用的章节标题和任何副标题仅用于组织目的，而不应被解读为以任何方式限制所描述的主题。章节标题和/或字幕下的内容不限于章节标题和/或字幕，而是适用于本发明的整个描述。任何出版物的引用是为了在申请日之前公开，并且不应被解读为承认本权利要求无权凭借在先发明而先于此类出版物。此外，所提供的公开日期可以不同于实际的公开日期，实际的公开日期可能需要被独立地确认。应当注意，附图并不旨在以严格的比例示出元件。为了清楚起见，一些元件在图中示出时被放大。元件的尺寸应当根据本文提供的描述描绘，并通过引用结合于此。在一个方面，本发明提供了对引起性传播疾病(std)的细菌的检测。细菌std通常可以通过抗生素治疗而治愈。早期检测代表了一种方案，并允许患者继续进行药物治疗。因为细菌感染经常没有警告迹象或症状，所以使用本装置的早期检测可以预防由细菌std引起的严重并发症，导致生殖器官的不可逆损害。由细菌引起的常见性传播感染包括淋病、梅毒和衣原体。在一个示例性实施例中，本发明提供了检测引起衣原体或性淋巴肉芽肿的细菌沙眼衣原体的方法和装置。在另一个示例性实施例中，本发明提供了检测引起淋病的淋病奈瑟球菌的方法和装置。在另一个示例性实施例中，本发明提供了检测引起梅毒的细菌梅毒螺旋体的方法和装置。在某些实施例中，提供了一种检测选自由以下各项组成的组的引起std的细菌的方法：沙眼衣原体、淋病奈瑟氏球菌和梅毒螺旋体。仅出于说明的目的，提供了用于衣原体染色的新装置和方法的以下细节。a.衣原体染色提供了示出衣原体感染细胞的染色方法的示意图(参见图1)。图1的图(a)示出了常规方法(现有技术)；图(b)示出了本发明的实施例，其中采用qmax装置。在图1所示的实验中，用小鼠抗衣原体(abcam，cat#ab41196)用于染色，且用衣原体抗原对照载玻片(mblbion，cat#qche-4502)作为保持样品的装置。如图(a)所示，将20μldylight633标记的抗衣原体抗体(abcam)加入到携带被衣原体感染的固定的人体组织细胞的样品载玻片中。将反应物孵育预定的时间段。建议的预定时间段为30分钟。然后冲洗载玻片并通过显微镜对细胞成像。图1的图(b)示出了qmax染色：将1uldylight633标记的抗衣原体抗体加入到携带被衣原体感染的固定的人体组织细胞的样品载玻片中。然后用x-平板(30μm柱高度)覆盖标记的抗体15秒(或更长时间)。在一些实验中，作为任选的步骤，除去x-板并通过浸渍到pbst中3次冲洗染色的载玻片并风干。在一些实验中，不冲洗载玻片。染色的载玻片和细胞用显微镜成像。对于常规方法，与使用qmax方法的1μl相比，20μl的标记ab是有效染色的最小量。图2示出了使用qmax装置进行衣原体染色的示例性图片。图(a)说明了使用衣原体抗体孵育15秒的实验结果；图(b)说明了使用衣原体抗体孵育30秒的实验结果。dl633是指经标记的dylight633；bf是指明场。“μg/ml”数字是指抗体浓度。在图2所示的实验中，将具有被衣原体感染的固定的人体组织细胞的载玻片与1μl的不同浓度的dylight633标记的抗衣原体抗体孵育15秒(图a)或30秒(图b)。在qmax免疫染色中使用具有30μm柱高度的x-板。然后用pbst冲洗载玻片并通过显微镜拍摄图像。bf：明场。dl633：dylight633荧光。图3示出了在没有可选的冲洗步骤的情况下用qmax装置进行衣原体染色的示例性图片。在图3所示的实验中，将具有被衣原体感染的固定的人体组织细胞的载玻片与1μl的dylight633标记的抗衣原体抗体(40μg/ml)孵育2分钟。在qmax免疫染色中使用具有30μm柱高度的x-板。图像通过显微镜拍摄而不冲洗。bf：明场。dl633：dylight633荧光。图4提供了常规染色和使用qmax装置染色的结果的总结。请注意在15秒(40μg/ml)后可以检测到衣原体的qmax免疫染色。图5示出了衣原体感染细胞的染色的示意图和结果。图(a)示出了染色方法的设计。在一些实施例中，将样品放置在板上。在某些实施例中，样品包括疑似被衣原体感染的细胞。在某些实施例中，将样品固定在板上。在某些实施例中，样品是固定的和/或渗透化的。在某些实施例中，样品是固定化的。图(b)示出了用智能手机相机拍摄的衣原体感染细胞的免疫染色图像，其中有一步冲洗。图(c)示出了用智能手机相机拍摄的衣原体感染细胞的免疫染色图像，其中没有冲洗。图6示出了qmax装置的示意图，其制备用于衣原体检测的一步夹心测定。图(a)示出了附着有检测抗体的x-板的图示；图(b)示出了说明如何将抗体印刷在x-板上的图示；图(c)示出了附着有捕获抗体的pmma基底的图示。如图6的图(b)所示，在pbst中的nanoprintdylight633-抗衣原体检测抗体(100μg/ml)和1∶100商业来源获得蛋白质稳定剂在预切割的x-板上，在室温下干燥。设置：8×2阵列，24×24点/阵列，5×250pl/点。阵列尺寸：7.2mm×7.2mm。点之间的间隙：300μm。作为结合位点的pmma：100μl蛋白a的20μg/ml的pbs溶液涂覆基底过夜/用pbst冲洗3次；100μl捕获ab的20μg/ml的pbs溶液涂覆基底3小时/用pbst冲洗3次；100μl4％bsa的pbs溶液阻断基底2小时/用pbst冲洗3次；在室温下，将100μlstabilcoat稳定剂孵育1小时/移液管过量/干燥。注意，在pmma上使用6.5×6.5mm的flexwell。在夹心测定中示出的实验中使用的抗体列于下表。表1图7示出了说明了进行夹心测定以检测衣原体的方法的示例性流程图。在一些实验中，将含有不同浓度的衣原体分析物，体积都是0.8μl的一系列样品，沉积在涂覆的基底上的不同位置处。用手将用检测抗体纳米印刷的x-板按压在液体上面。孵育反应物2min。在一些实验中，执行一步冲洗：剥离x-板；用pbst冲洗基板结合位点1分钟，然后简单水洗。结果用拉曼显微镜测量。图8示出了检测衣原体的夹心测定结果的示例。图8提供了衣原体qmax夹心免疫测定的标准曲线。在qmax测定中使用1μl纯化的衣原体原体(eb)。检测限(lod)：2×10e+05ifu/ml，或200ifu/测试。在一个实施例中，本发明提供了对引起衣原体、淋病或梅毒的细菌进行染色测定的一步法。在一个优选的实施例中，本发明提供了检测样品中衣原体的方法，包含：(a)获得第一板，所述第一板在其内表面上包含被配置为接触样品的样品接触区域；(b)将样品沉积于样品接触区域，其中所述样品包含或疑似包含感染衣原体、淋病或梅毒的细胞；以及(c)在所述样品上沉积衣原体、淋病或梅毒染色介质，所述染色介质包含结合细菌的抗体，且所述染色介质与所述样品形成混合物；(d)用第二板覆盖所述样品和所述染色介质的混合物，(e)按压所述第一板和所述第二板，使得至少一部分所述混合物压缩成薄层；(f)孵育约60秒或更短时间段；以及(g)检测来自所述混合物的衣原体、淋病或梅毒相关信号。在某些实施例中，所述预定时间段为约30秒或更短。在某些实施例中，时间段为约15秒或更短。在某些实施例中，衣原体、淋病或梅毒抗体是荧光标记的。在某些实施例中，该薄层具有小于100μm的均匀厚度。在某些实施例中，该薄层具有小于50μm的均匀厚度。在某些实施例中，该薄层具有约30μm或以下的均匀厚度。在某些实施例中，通过对样品成像来检测衣原体相关信号。在一个实施例中，本发明提供了用于测试衣原体、淋病或梅毒的一步夹心测定。在一个优选的实施例中，本发明提供了检测样品中衣原体、淋病或梅毒的方法，包含：(a)提供第一板，所述第一板在其内表面上包含具有结合位点的样品接触区域，其中所述结合位点包含固定化的捕获抗体，所述捕获抗体结合含有或疑似含有衣原体、淋病或梅毒的样品中的衣原体；(b)提供第二板，所述第二板在其内表面上包含样品接触区域，所述样品接触区域具有储存位点，其中所述储存位点包含检测抗体，所述检测抗体在接触所述样品时能够在所述样品中扩散，并且其中所述捕获抗体和所述检测抗体结合至所述衣原体中的不同位点以形成捕获抗体-细菌-检测抗体夹心；(c)将样品沉积到所述板的所述样品接触区域中的一个或两个上；(d)在(c)之后，使两个板处于闭合构造，其中在闭合构造中，沉积在(c)中的至少一部分样品被限定在两个板的样品接触区域之间，并且具有在0.01μm至200μm范围内的平均厚度；以及(e)检测所述捕获抗体捕获的与衣原体相关的信号。在某些实施例中，样品来自人体对象。在某些实施例中，捕获位点还包含蛋白质稳定剂。在某些实施例中，储存位点还包含蛋白质稳定剂。在某些实施例中，检测抗体包含荧光标签。在某些实施例中，所述两个板之间的所述样品具有在0.5μm至50μm范围内的均匀厚度。在某些实施例中，所述两个板之间的所述样品具有在1μm至35μm范围内的均匀厚度。在某些实施例中，所述方法还包含确定衣原体、淋病或梅毒的存在或不存在。在某些实施例中，步骤(a)-(e)的总时间小于10分钟。在某些实施例中，步骤(e)-(e)的总时间小于3分钟。在某些实施例中，步骤(a)-(e)的总时间小于2分钟。抗衣原体、淋病或梅毒的抗体可以通过商业来源获得。示例性抗梅毒抗体包括来自meridianlife的抗tpi7(cat#r8a201)，或抗tp15(cat#r8a101)或抗tp47(cat#r8a403)。示例性抗衣原体包括abcam(cat#ab41196)。示例性抗淋病abcam(cat#ab62964；ab19962)。附加特征在某些实施例中，其中样品接触区域中的一个或两个包含间隔件，其中当板处于闭合构造中时，间隔件调节板的样品接触区域之间的间距。在某些实施例中，所述第一板包含多个结合位点并且所述第二板包含多个对应的储存位点，其中当板处于闭合构造中时，每个结合位点都面向一个对应的储存位点。在某些实施例中，检测抗体在储存位点上干燥。在某些实施例中，结合位点处的捕获抗体在扩增表面上，所述扩增表面在任一前述实施例中扩增分析物或捕获的检测剂的光信号。在某些实施例中，结合位点处的捕捉剂在扩增表面上，所述扩增表面在任一前述实施例中扩增分析物或所捕捉的检测剂的光信号，其中扩增是邻近依赖性的，因为扩增随着捕捉剂与分析物或检测剂之间的距离增加而显著减少。在某些实施例中，信号的检测是电的、光的或两者。(包括但不限于荧光、spr等。)在一个方面，本发明提供了免疫细胞(如t-免疫细胞)的染色。具体地，本发明提供了用于检测和量化cd3+、cd4+和cd8+细胞的新装置和方法。分化簇3(cd3)是一种多聚蛋白复合物，历史上称为t3复合物，由四条不同的多肽链组成；ε(epsilon)、γ(gamma)、δ(delta)和ζ(zeta)，其组装并作为三对二聚体(εγ、εδ、ζζ)。cd3复合物作为t细胞协同受体与t细胞受体(tcr)非共价结合。cd3蛋白复合物是t细胞谱系的限定特征，因此抗cd3抗体可有效地用作t细胞标记物。在cd3细胞群体中，cd4和cd8代表具有不同tcr基因重排模式、组织分布和抗原识别机制的两个t细胞亚群。cd4+t细胞在其表面表达cd4糖蛋白。当cd4辅助t细胞被mhcii类分子呈递给肽抗原时，它们被激活，其在抗原呈递细胞(apc)表面表达。一旦被激活，它们迅速分裂并分泌被称为细胞因子的小蛋白，其调节或帮助主动免疫应答。cd8+t细胞因为它们在其表面表达cd8糖蛋白。这些细胞通过结合与mhci类分子相关的抗原来识别它们的靶标，其存在于所有有核细胞的表面上。在某些实施例中，提供了检测选自由以下各项组成的组的t细胞的方法：cd4t细胞、cd3t细胞和cd8t细胞。仅出于说明的目的，提供了用于t免疫细胞的cd4染色的新装置和方法的以下细节。b.量化cd4表达细胞提供了示意图(参见图9)，其示出了根据本发明的一些实施例对cd4表达细胞进行染色的方法。如图9所示，在一些实施例中，获得第一板(称为“x板”)和第二板(例如由玻璃或丙烯酸制成)，其中第一板和第二板可相对于彼此移动。在某些实施例中，第一板和第二板是不连接的。在某些实施例中，第一板和第二板通过转动结构(例如铰链)连接。每个板具有两个表面：一个内表面和一个外表面，其中当板彼此挤压时，内表面彼此面对。在内表面上，每个板包含用于接触液体样品的样品接触区域。在一些实施例中，将检测剂(例如标记的抗cd4抗体)固定在板中的一个或两个的样品接触区域上。在某些实施例中，所述检测剂包含抗cd4抗体。在某些实施例中，检测剂用荧光团标记。在某些实施例中，如图9所示，抗cd4抗体用alex647标记。在步骤2中，当板处于板被分开的开放构造时，液体样品沉积在板中的一个或两个的样品接触区域上。在某些实施例中，如图9中所示，所述样品是全血。在步骤3中，板彼此挤压成闭合构造。在某些实施例中，用人手进行按压。在闭合构造中，板彼此挤压，其间具有间隙，并且样品被压缩成薄层。在某些实施例中，薄层具有均匀的厚度。在某些实施例中，板中的一个或两个包含固定在样品接触区域中的一个或两个上的间隔件。当板被按压入闭合构造时，间隔件调节样品层的厚度。在某些实施例中，间隔件具有柱状形状。在步骤4中，使样品层成像并量化cd4表达细胞的数目。在图9所示的实验中，qmax装置具有两个板。第一板是具有2μm或10μm柱高度，30×40um柱尺寸，80um间距的x-板，并且由175um厚的pmma制成。第二板是1mm厚的玻璃或丙烯酸。带有标签alex647的抗cd4抗体以液体形式或干燥形式位于第二平板上。在其液体形式中，抗cd4抗体是5至50μg/ml，体积为0.5至1μl。将抗cd4抗体印刷成300um固定间隔的阵列并干燥，干燥后表面浓度为1至100ng/cm2。在图9所示的实验中，对于步骤2，样品是体积为～1μl的新鲜全血。在图9所示的实验中，对于步骤3，在将板彼此挤压之后，将样品层与检测剂一起孵育约60秒。在图9所示的实验中，对于步骤4，用实验室显微镜或用移动装置-适配器系统对染色的全血样品层成像。图10示出了在明场和荧光中使用qmax装置的cd4染色的示例性图片。用倒置显微镜捕获图像。图(a)示出了使用具有2μm间隙的qmax装置的实验的结果；图(b)示出了使用具有10μm间隙的qmax装置的实验的结果。如图10所示，对于图(a)，明场照片示出了红血球和白血球；荧光照片示出了染色的cd4t细胞的清楚荧光。如图10所示，对于图(b)，明场照片示出了聚集的红血球和白血球；荧光照片示出了染色的cd4t细胞的清楚荧光。图10示出了根据本发明的一些实施例的用于捕获样品的图像的设备的示意图。以iphone为例，图11示出了以激光二极管作为光源的iphone/读取器设置。激光二极管中心波长638nm，功率10至20mw。光源前激发滤光片是650nm短通。光被铝镜反射到qmax器件的背面，典型的照明面积为1mm×4mm。观测系统位于qmax装置的前方，iphone加装了发射滤光片和透镜。发射滤光片是长通670nm。该透镜具有大约4mm的焦距和0.2的n.a.。图12示出了使用qmax装置的cd4染色的示例性图片，其中所述图片是使用图11所示的iphone-激光装置捕获的。在电话/读取器系统下在2μm厚qmax卡中对cd4染色的全血的荧光照片。左侧照片使用50μg/ml的相对高抗体浓度，右侧照片使用10μg/ml的抗体浓度。荧光照片示出染色的cd4t细胞的清楚荧光。(b)在电话/读取器系统下在10μm厚qmax卡中对cd4染色的全血的荧光照片。左侧照片使用50ug/l相对高浓度的抗体，右侧照片使用10μg/ml浓度的抗体。在10μmqmax下没有观察到cd4t细胞，这可能是由于与倒置显微镜系统相比，iphone读取器灵敏度和动态范围更低。在下表中列出了用图11所示的qmax装置和iphone-激光装置计数的cd4表达t细胞的数目。表2：从qmax/most(移动自检)反算cd4t细胞浓度。qmax/most值对照值cd4t细胞900/μl500-1600/μl图13示出了说明了对cd4表达细胞进行染色测定的方法的示例性流程图。可以通过商业来源方便地获得针对cd3、cd4或cd8的抗体。示例性cd4抗体包括fitzgeraldindustriesinternational(cat#10r-cd4khup)或thermofisher(cat#ma1-81407)。示例性cd8抗体包括thermofisher(cat#mhcd0800)，或fitzgeraldindustriesinternational(cat#10r-1881)。示例性cd3抗体包括thermofisher(cat#mhcd0300)和fitzgeraldindustriesinternational(cat#uch-t1)。在一些实施例中，染色包含以下步骤：(a)获得第一板和第二板，其中每个板在其各自的内表面上包含被配置为接触液体样品的样品接触区域，其中检测剂位于板中的一个或两个的样品接触区域上，且其中所述检测剂被配置为特异性结合所述生物标记物；(b)将所述样品沉积在所述样品接触区域中，其中所述样品包含表达所述生物标记物的细胞；(c)按压所述第一板和所述第二板以将所述样品压缩成薄层，所述薄层至少部分地由彼此面对的两个样品接触区域限定；(d)孵育约60秒或更短的预定时间段；以及(e)通过对样品层成像并计数表达生物标记物的细胞来量化表达生物标记物的细胞。对没有冲洗的全血中的cd3、cd4或cd8t细胞进行一步染色测定在某些实施例中，本发明提供了一种用于对样品中表达生物标记物(cd3、cd4或cd8)的细胞进行量化的方法，该方法包含：(a)获得样品保持器，所述样品保持器被配置为保持包含分析物的液体样品，其中检测剂被定位在所述样品保持器中并且被配置为特异性结合生物标记物；(b)将所述样品沉积在所述样品接触区域中，其中所述样品包含表达所述生物标记物的细胞；且样品与样品保持器中的检测剂接触；(c)调节该样品保持器以将该样品压缩成薄层，(d)孵育预定时间段；以及(e)通过对样品层成像并计数表达生物标记物的细胞来量化表达生物标记物的细胞。在某些实施例中，本发明提供了用于量化样品中表达生物标记物的细胞的方法，包含：(a)获得第一板和第二板，其中每个板在其各自的内表面上包含被配置为接触液体样品的样品接触区域，其中检测剂位于板中的一个或两个的样品接触区域上，且其中所述检测剂被配置为特异性结合所述生物标记物；(b)将所述样品沉积在所述样品接触区域中，其中所述样品包含表达所述生物标记物(cd3、cd4或cd8)的细胞；(c)按压所述第一板和所述第二板以将所述样品压缩成薄层，所述薄层至少部分地由彼此面对的两个样品接触区域限定；(d)孵育约60秒或更短的预定时间段；以及(e)通过对样品层成像并计数表达生物标记物的细胞来量化表达生物标记物的细胞。在某些实施例中，本发明提供了一种用于对血液样品中表达cd3、cd4或cd8(分化簇3、4或8)的细胞进行量化的方法，该方法包含：(a)获得第一板和第二板，其中每个板在其各自的内表面上包含被配置为接触血液样品的样品接触区域，其中检测剂位于板中的一个或两个的样品接触区域上，且其中所述检测剂被配置为特异性结合cd3、cd4或cd8，(b)将所述血液样品沉积在所述样品接触区域中，其中所述血液样品包含表达cd3、cd4或cd8的细胞；(c)按压所述第一板和所述第二板以将所述血液样品压缩成薄层，所述薄层至少部分地由彼此面对的两个样品接触区域限定；(d)孵育约60秒或更短的预定时间段；以及通过对样品层成像并计数cd3、cd4或cd8表达细胞来量化cd3、cd4或cd8表达细胞。在某些实施例中，本发明提供了用于量化样品中表达生物标记物的细胞的设备，包含：样品保持器，被配置为保持包含表达生物标记物的细胞的液体样品，其中检测剂被定位在所述样品保持器中并且被配置为特异性结合所述生物标记物；以及适配器，被配置为容纳该样品保持器并且可附接到移动装置上，其中：i.所述移动装置包含成像器，ii.所述适配器被配置为当该适配器被附接到所述移动装置上时将所述样品定位在所述成像器的视野(fov)中，并且iii.所述成像器被配置为捕获所述样品的图像，由此在所述样品与所述检测剂孵育约60秒或更短时间段之后，检测/测量由所述生物标记物与所述检测剂的结合产生的信号。优选地，所述预定时间段为约30秒或更短。优选地，本测定在步骤(d)之后不涉及冲洗样品接触区域。优选地，检测剂为抗体。优选地，抗体用荧光团标记。优选地，检测剂是用在激发时发射信号的信号分子标记的。优选地，薄层具有大约等于或小于10μm的均匀厚度。更优选地，薄层具有大约等于或小于2μm的均匀厚度。优选地，样品为全血。优选地，生物标记物为cd3、cd4或cd8(分化簇3、4或8)。更优选地，细胞是t细胞。优选地，检测剂被固定在所述样品接触区域上。具有高均匀性的装置和测定柱间隔件平顶在本发明的某些实施例中，间隔件是具有平顶和固定在一个板上的脚部的柱，其中平顶具有表面变化小的平滑度，且变化小于5、10nm、20nm、30nm、50nm、100nm、200nm、300nm、400nm、500nm、600nm、700nm。800nm、1000nm，或在任何两个值之间的范围内。优选的平柱顶部平滑度是50nm或以下的表面变化。此外，表面变化是相对于间隔件高度的，且柱平顶表面变化与间隔件高度的比例小于0.5％、1％、3％、5％、7％、10％、15％、20％、30％、40％，或在任何两个值之间的范围内。优选的平柱顶平滑度的柱平顶表面变化与间隔件高度的比例小于2％、5％或10％。柱间隔件侧壁角在本发明的某些实施例中，间隔件是具有侧壁角的柱。在一些实施例中，侧壁角小于5度(从表面的法线测量)、10度、20度、30度、40度、50度、70度，或在任何两个值之间的范围内。在优选实施例中，侧壁角小于5度、10度或20度。通过不精确力按压形成均匀的薄流体层在本发明的某些实施例中，通过使用具有不精确力的按压形成均匀的薄流体样品层。术语“不精确按压力”没有增加细节，然后增加不精确按压力的定义。如本文所用，在力(例如，“不精确按压力”)的上下文中，术语“不精确”是指力(a)具有在施加力时未精确知道或精确预测的量值；(b)具有在0.01kg/cm2(平方厘米)至100kg/cm2范围内的压强，(c)大小随着力的一次到下一次的施加而变化；(d)(a)和(c)中的力的不精确度(即变化)是实际施加的总力的至少20％。不精确的力可以由人手施加，例如，通过在拇指和食指之间将物体夹在一起，或者通过在拇指和食指之间将物体夹在一起并摩擦在一起。在一些实施例中，手动按压的不精确力具有0.01kg/cm2、0.1kg/cm2、0.5kg/cm2、1kg/cm2、2kg/cm2、kg/cm2、5kg/cm2、10kg/cm2、20kg/cm2、30kg/cm2、40kg/cm2、50kg/cm2、60kg/cm2、100kg/cm2、150kg/cm2、200kg/cm2，或任何两个值之间的范围；以及0.1kg/cm2至0.5kg/cm2、0.5kg/cm2至1kg/cm2、1kg/cm2至5kg/cm2或5kg/cm2至10kg/cm2(压强)的优选范围的压强。间隔件填充因子.术语“间隔件填充因子”或“填充因子”是指间隔件接触区域与总板区域的比例，其中间隔件接触区域在闭合构造下是指间隔件的顶表面接触到板的内表面的接触区域，总板区域是指间隔件平顶接触的板内表面的总区域。由于存在两个板并且每个间隔件具有两个接触表面，每个接触表面接触一个板，所以填充因子是指最小的填充因子。例如，如果间隔件是具有正方形(10um×10um)的平顶、几乎均匀的横截面和2μm高的柱，并且间隔件是固定间隔的，固定间隔为100μm，则间隔件的填充因子是1％。如果在上述示例中，柱间隔件的脚部是15um×15um的正方形，则填充因子按定义仍是1％。ids^4/he在一个实施例中，提供了一种用于通过按压形成具有均匀预定厚度的薄流体样品层的装置，包含：第一板、第二板以及间隔件，其中：i.所述板可相对于彼此移动成不同的构造；ii.一个或两个板是柔性的；iii.每个板包含具有用于接触流体样品的样品接触区域的内表面；iv.每个板在其各自的外表面上包含受力区域，该受力区域用于施加按压力，该按压力迫使板在一起；v.板中的一个或两个包含永久固定在相应板的内表面上的间隔件；vi.间隔件具有等于或小于200微米的预定的基本上均匀的高度和预定的固定间隔件间距；vii.间隔件间距(isd)的四次方除以柔性板的厚度(h)和杨氏模量(e)(isd4/(he))为5×106μm3/gpa或以下；以及viii.间隔件中的至少一个位于样品接触区域内；其中一个构造是开放构造，在开放构造中：两个板是部分或完全分开的，板之间的间距不由间隔件调节，并且样品沉积在板中的一个或两个上；其中构造中的另一个是闭合构造，闭合构造是在样品沉积在开放构造并且通过在力区上施加按压力迫使板达到闭合构造之后配置的；并且在闭合构造中：至少一部分样品被两个板压缩成厚度非常均匀的层并且相对于板基本上是停滞的，其中层的均匀厚度是由两个板的样品接触区域限定的并且由板和间隔件调节。在一个实施例中，提供了一种通过按压形成具有均匀预定厚度的薄流体样品层的方法，包含以下步骤：(a)获得前述实施例所述的装置；(b)将流体样品沉积在板中的一个或两个上；当所述板被配置为开放构造时，其中所述开放构造是其中所述两个板部分地或完全地分开并且所述板之间的间距不受所述间隔件调节的构造；(c)在(b)之后，迫使两个板进入闭合构造，其中：至少一部分样品被两个板压缩成厚度基本上均匀的层，其中该层的均匀厚度被板的样品接触表面限定并且由板和间隔件调节。在一个实施例中，提供了一种用于分析流体样品的装置，包含：第一板、第二板以及间隔件，其中：i.所述板可相对于彼此移动成不同的构造；ii.一个或两个板是柔性的；iii.每个板在其各自的内表面上具有用于接触流体样品的样品接触区域，iv.一个或两个板包含间隔件，并且间隔件固定在相应板的内表面上；v.间隔件具有等于或小于200微米的预定的基本上均匀的高度，并且间隔件间距是预先确定的；vi.间隔件的杨氏模量乘以间隔件的填充因子至少为2mpa；以及vii.间隔件中的至少一个位于样品接触区域内；以及其中所述构造中的一个是开放构造，其中：两个板是部分或完全分开的，板之间的间距不由间隔件调节，并且样品沉积在板中的一个或两个上；并且其中所述构造中的另一个是在所述样品沉积在所述开放构造之后配置的闭合构造；以及在闭合构造中：至少一部分样品被两个板压缩为厚度非常均匀的层，其中层的均匀厚度被板的样品接触表面限定并且由板和间隔件调节。在一个实施例中，提供了一种通过按压形成具有均匀预定厚度的薄流体样品层的方法，包含以下步骤：(a)获得前述实施例所述的装置；(b)将流体样品沉积在板中的一个或两个上；当所述板被配置为开放构造时，其中所述开放构造是其中所述两个板部分地或完全地分开并且所述板之间的间距不受所述间隔件调节的构造；(c)在(b)之后，迫使两个板进入闭合构造，其中：至少一部分样品被两个板压缩成基本上均匀厚度的层，其中该层的均匀厚度被板的样品接触表面限定并且由板和间隔件调节。在一个实施例中，提供了一种用于分析流体样品的装置，包含：第一板和第二板，其中：i.所述板可相对于彼此移动成不同的构造；ii.一个或两个板是柔性的；iii.每个板在其各自的表面上具有用于接触包含分析物的样品的样品接触区域；iv.板中的一个或两个包含永久固定于样品接触区域内的板上的间隔件，其中间隔件具有基本上均匀的预定高度和预定的固定间隔件间距，间隔件间距比分析物的尺寸大至少约2倍，至多200μm，并且其中间隔件中的至少一个在样品接触区域内；其中构造中的一个是开放构造，其中：两个板是分开的，板之间的间距不受间隔件调节，并且样品被沉积在板中的一个或两个上；以及其中所述构造中的另一个是在所述样品沉积在所述开放构造之后配置的闭合构造；以及在闭合构造中：至少一部分样品被两个板压缩为厚度非常均匀的层，其中层的均匀厚度被板的样品接触表面限定并且由板和间隔件调节。在一个实施例中，提供了一种通过按压形成具有均匀预定厚度的薄流体样品层的方法，包含以下步骤：(a)获得前述实施例所述的装置；(b)将流体样品沉积在板中的一个或两个上；当所述板被配置为开放构造时，其中所述开放构造是其中所述两个板部分地或完全地分开并且所述板之间的间距不受所述间隔件调节的构造；(c)在(b)之后，迫使两个板进入闭合构造，其中：至少一部分样品被两个板压缩成基本上均匀厚度的层，其中该层的均匀厚度被板的样品接触表面限定并且由板和间隔件调节。在一个实施例中，提供了一种用于通过按压形成具有均匀预定厚度的薄流体样品层的装置，包含：第一板、第二板以及间隔件，其中：i.所述板可相对于彼此移动成不同的构造；ii.一个或两个板是柔性的；iii.每个板在其各自的内表面上包含用于接触和/或压缩流体样品的样品接触区域；iv.每个板在其各自的外表面上包含用于施加迫使板在一起的力的区域；v.板中的一个或两个包含永久固定在相应板的内表面上的间隔件；vi.间隔件具有等于或小于200微米的预定的基本上均匀的高度、预定的宽度和预定的间隔件间距；vii.所述间隔件间距与所述间隔件宽度之比为1.5或更大；以及viii.间隔件中的至少一个位于样品接触区域内；其中一个构造是开放构造，在开放构造中：两个板是部分或完全分开的，板之间的间距不由间隔件调节，并且样品沉积在板中的一个或两个上；其中所述构造中的另一个是在所述样品沉积在所述开放构造之后配置的闭合构造；以及在闭合构造中：至少一部分样品被两个板压缩为厚度非常均匀的层，并且相对于板基本上是停滞的，其中层的均匀厚度由两个板的样品接触区域限定并且由板和间隔件调节。在一个实施例中，提供了一种通过用不精确按压力按压而形成具有均匀的预定厚度的薄流体样品层的方法，包含以下步骤：(a)获得前述实施例的装置；(b)获得流体样品；(c)将所述样品沉积在板中的一个或两个上；当所述板被配置为开放构造时，其中所述开放构造是其中所述两个板部分地或完全地分开并且所述板之间的间距不受所述间隔件调节的构造；(d)在(c)之后，迫使两个板进入闭合构造，其中：至少一部分样品被两个板压缩成基本上均匀厚度的层，其中该层的均匀厚度被板的样品接触表面限定并且由板和间隔件调节。优选地，间隔件为柱的形状，该柱具有固定于其中一个板上的脚部和用于接触另一个板的平顶表面。优选地，间隔件为柱的形状，该柱具有固定于其中一个板上的脚部，用于接触另一板的平顶表面，基本上均匀的横截面。优选地，间隔件为柱的形状，该柱具有固定于其中一个板上的脚部和用于接触另一个板的平顶表面，其中柱的平顶表面的变化小于10nm。更优选地，间隔件为柱的形状，该柱具有固定于其中一个板上的脚部和用于接触另一个板的平顶表面，其中柱的平顶表面的变化小于50nm。更优选地，间隔件为柱的形状，该柱具有固定于其中一个板上的脚部和用于接触另一个板的平顶表面，其中柱的平顶表面的变化小于10nm、20nm、30nm、100nm、200nm，或在任两个值范围内。优选地，间隔件的杨氏模量乘以间隔件的填充因子至少为2mpa。更优选地，间隔件的杨氏模量乘以间隔件的填充因子至少为20mpa。优选地，样品包含分析物，并且预定恒定间隔件间距比分析物的尺寸大至少约2倍，至多200μm。更优选地，样品包含分析物，预定恒定间隔件间距比分析物的尺寸大至少约2倍，至多200μm，并且间隔件的杨氏模量乘以间隔件的填充因子至少为2mpa。优选地，提供了间隔件间距(ids)的四次方除以柔性板的厚度(h)和杨氏模量(e)(isd^4/(he))为5×106μm3/gpa或以下。更优选地，提供了间隔件间距(ids)的四次方除以柔性板的厚度(h)和杨氏模量(e)(isd^4/(he))为1×106μm3/gpa或以下。更优选地，提供了间隔件间距(ids)的四次方除以柔性板的厚度(h)和杨氏模量(e)(isd^4/(he))为5×105μm3/gpa或以下。优选地，间隔件的杨氏模量乘以间隔件的填充因子至少为2mpa，间隔件间距(ids)的四次方除以柔性板的厚度(h)和杨氏模量(e)(isd^4/(he))为1×105μm3/gpa或以下。更优选地，间隔件的杨氏模量乘以间隔件的填充因子至少为2mpa，间隔件间距(ids)的四次方除以柔性板的厚度(h)和杨氏模量(e)(isd^4/(he))为1×104μm3/gpa或以下。优选地，间隔件间距与间隔件的平均宽度的比例为2或更大。优选地，间隔件间距与间隔件的平均宽度的比例为2或更大，并且间隔件的杨氏模量乘以间隔件的填充因子至少为2mpa。优选地，间隔件间距比分析物的尺寸大至少约2倍，至多200μm。优选地，提供了间隔件间距与间隔件宽度的比例为1.5或更大。优选地，提供了间隔件的宽度与高度的比例为1或更大。更优选地，提供了间隔件的宽度与高度的比例为1.5或更大。优选地，间隔件的宽度与高度的比例为2或更大。更优选地，间隔件的宽度与高度的比例为大于2、3、5、10、20、30、50，或在任两个值的范围内。优选地，将两个板按压成闭合构造的力是不精确的按压力。优选地，将两个板按压成闭合构造的力是由人手提供的不精确的按压力。优选地，迫使两个板将至少一部分样品压缩成具有基本上均匀厚度的层包含平行地或顺序地适形按压所述板中的至少一个板的区域以将板按压在一起至闭合构造，其中适形按压在至少一部分样品上的板上产生基本上均匀的压力，并且按压使至少一部分样品在板的样品接触表面之间横向地展开，并且其中闭合构造是其中在均匀厚度区域层中的板之间的间距是由间隔件调节的构造；并且其中样品的减小的厚度减少了用于将储存位点上的试剂与样品混合的时间。优选地，按压力是不精确力，不精确力具有在施加力时(a)未知并且不可预测，或(b)不能知道并且不能在等于或优于所施加的平均按压力的20％的精度内预测的量值。更优选地，按压力是不精确力，不精确力具有在施加力时(a)未知并且不可预测，或(b)不能知道并且不能在等于或优于所施加的平均按压力的30％的精度内预测的量值。优选地，按压力是不精确力，不精确力具有在施加力时(a)未知并且不可预测，或(b)不能知道并且不能在等于或优于所施加的平均按压力的30％的精度内预测的量值；并且其中厚度非常均匀的层具有20％或以下的均匀厚度变化。优选地，按压力是不精确力，不精确力具有在施加力时不能在等于或优于30％、40％、50％、70％、100％、200％、300％、500％、1,000％、2,000％或在任两个值之间的范围内确定的量值。优选地，柔性板的厚度在10μm到200μm的范围内。优选地，柔性板的厚度在20μm到100μm的范围内。更优选地，柔性板的厚度在25μm到180μm的范围内更优选地，柔性板的厚度在200μm到260μm的范围内更优选地，柔性板的厚度等于或小于250μm、225μm、200μm、175μm、150μm、125μm、100μm、75μm、50μm、25μm、10μm、5μm、1μm，或在任两个值之间的范围内。优选地，样品具有的粘度在0.1至4(mpas)范围内。优选地，柔性板的厚度在200μm到260μm的范围内。更优选地，柔性板的厚度在20μm到200μm范围内和杨氏模量在0.1到5gpa范围内。在一个实施例中，步骤(b)的样品沉积是在不使用任何转移装置的情况下直接从对象到板的沉积。在一个实施例中，在步骤(b)的沉积期间，沉积在所述板上的样品的量是未知的。在一个实施例中，方法还包含分析样品的分析步骤(e)。在一个实施例中，分析步骤(e)包含通过测量相关样品体积的横向区域并从横向区域和预定间隔件高度计算体积来计算相关样品体积的体积。在一个实施例中，分析步骤(e)包含测量：(i)成像，(ii)选自光致发光、电致发光和电化学发光的发光，(iii)表面拉曼散射，(iv)选自电阻、电容和电感的电阻抗，或(v)i-iv的任何组合。优选地，分析步骤(e)包含读取，图像分析，或计数分析物，或其组合。在一个实施例中，样品包含一种或多种分析物，并且一个或两个板样品接触表面包含一个或多个结合位点，每个结合位点结合并固定各自的分析物。在一个实施例中，一个或两个板样品接触表面包含一个或多个储存位点，每个储存位点储存一种或多种试剂，其中试剂在步骤(c)期间或之后在样品中溶解和扩散。在一个实施例中，一个或两个板样品接触表面包含一个或多个扩增位点，当分析物或标签距离扩增位点500nm内时，扩增位点各自能够扩增来自分析物或分析物的标签的信号。在一个实施例中，提供了：(i)一个或两个板样品接触表面包含一个或多个结合位点，每个结合位点结合并固定相应的分析物；或(ii)一个或两个板样品接触表面包含一个或多个储存位点，每个储存位点储存一种或多种试剂；其中所述试剂在步骤(c)期间或之后溶解并扩散在所述样品中，并且其中所述样品含有一种或多种分析物；或(iii)一个或多个扩增位点，当所述分析物或标签距离所述扩增位点500nm时，扩增位点各自能够扩增来自所述分析物或所述分析物的标签的信号；或(iv)(i)-(iii)的任何组合。在一个实施例中，液体样品是生物样品，生物样品选自羊水、房水、玻璃体液、血液(例如，全血、分馏的血液、血浆或血清)、母乳、脑脊髓液(csf)、耳垢(耳屎)、乳糜、食糜、内淋巴、外淋巴、粪便、呼吸、胃酸、胃液、淋巴液、粘液(包括鼻引流液和痰液)、心包液、腹膜液、胸膜液、脓液、风湿液、唾液、呼出的冷凝物、皮脂、精液、痰液、汗液、滑液、泪液、呕吐物和尿液。在一个实施例中，在闭合构造中均匀厚度层小于150μm。在一个实施例中，按压由加压液体、加压气体或保形材料提供。在一个实施例中，分析包含计数均匀厚度层中的细胞。在一个实施例中，分析包含在均匀厚度的层中进行测定。在一个实施例中，测定是结合测定或生物化学测定。在一个实施例中，沉积的样品具有小于0.5μl的总体积。在一个实施例中，将多滴样品沉积在板中的一个或两个上。在一个实施例中，间隔件间距在1μm到120μm的范围内。在一个实施例中，间隔件间距在120μm到50μm的范围内。在一个实施例中，间隔件间距在120μm到200μm的范围内。在一个实施例中，柔性板的厚度在20μm至250μm范围内和杨氏模量在0.1至5gpa范围内。在一个实施例中，对于柔性板，柔性板的厚度乘以柔性板的杨氏模量在60到750gpa-μm的范围内。在一个实施例中，均匀厚度样品层在至少1mm2的横向区域上是均匀的。在一个实施例中，均匀厚度样品层在至少3mm2的横向区域上是均匀的。优选地，均匀厚度样品层在至少5mm2的横向区域上是均匀的。优选地，均匀厚度样品层在至少10mm2的横向区域上是均匀的。更优选地，均匀厚度样品层在至少20mm2的横向区域上是均匀的。在一个实施例中，均匀厚度样品层在20mm2至100mm2范围内的横向区域上是均匀的。在一个实施例中，厚度均匀的样品层的厚度均匀性高达+/-5％或更高。优选地，厚度均匀的样品层的厚度均匀性高达+/-10％或更高。优选地，厚度均匀的样品层的厚度均匀性高达+/-20％或更高。优选地，厚度均匀的样品层的厚度均匀性高达+/-30％或更高。优选地，厚度均匀的样品层的厚度均匀性高达+/-40％或更高。优选地，厚度均匀的样品层的厚度均匀性高达+/-50％或更高。在一个实施例中，间隔件是截面形状选自圆形、多边形、环形、正方形、矩形、卵形、椭圆形或其任何组合的柱。在一个实施例中，间隔件具有柱状形状，具有基本上平顶表面，且具有基本上均匀的横截面，其中对于每一间隔件，所述间隔件的横向尺寸与其高度的比例至少为1。在一个实施例中，间隔件间距是固定间隔的。在一个实施例中，间隔件具有1％或更高的填充因子，其中填充因子是间隔件接触区域与总板区域的比例。在一个实施例中，间隔件的杨氏模量乘以间隔件的填充因子等于或大于20mpa，其中填充因子是间隔件接触区域与所述总板区域的比例。在一个实施例中，在闭合构造下两个板之间的间距小于200μm。在一个实施例中，在闭合构造下两个板之间的间距是选自1.8μm和3.5μm之间的值。在一个实施例中，其中间隔件通过直接压印板或注塑成型板而固定在板上。在一个实施例中，板和间隔件的材料选自聚苯乙烯、pmma、pc、coc、cop或另一塑料。在一个实施例中，间隔件具有柱状形状，且间隔件的侧壁拐角具有曲率半径至少为1μm的圆形形状。在一个实施例中，间隔件具有至少1,000/mm2的密度。在一个实施例中，板中的至少一个是透明的。在一个实施例中，用于制造间隔件的模具由含有特征的模具制造，特征通过(a)直接反应性离子蚀刻或离子束蚀刻或(b)通过重复或多次重复反应性离子蚀刻或离子束蚀刻的特征来制造。在一个实施例中，间隔件被配置为使得填充因子在1％到5％的范围内。在一个实施例中，表面变化是相对于间隔件高度的，且柱平顶表面变化与间隔件高度的比例小于0.5％、1％、3％、5％、7％、10％、15％、20％、30％、40％，或在任何两个值之间的范围内。优选的平柱顶平滑度具有小于2％、5％或10％的柱平顶表面变化与间隔件高度的比例。在一个实施例中，间隔件被配置为使得填充因子在1％到5％的范围内。优选地，间隔件被配置为使得填充因子在5％到10％的范围内。优选地，间隔件被配置为使得填充因子在10％到20％的范围内。优选地，间隔件被配置为使得填充因子在20％到30％的范围内。优选地，间隔件被配置为使得填充因子为5％、10％、20％、30％、40％、50％，或在任何两个值之间的范围内。优选地，间隔件被配置为使得填充因子为50％、60％、70％、80％，或在任何两个值之间的范围内。在一个实施例中，间隔件被配置为使得填充因子乘以间隔件的杨氏模量在2mpa与10mpa的范围内。优选地，间隔件被配置为使得填充因子乘以间隔件的杨氏模量在10mpa与20mpa的范围内。优选地，间隔件被配置为使得填充因子乘以间隔件的杨氏模量在20mpa与40mpa的范围内。优选地，间隔件被配置为使得填充因子乘以间隔件的杨氏模量在40mpa与80mpa的范围内。优选地，间隔件被配置为使得填充因子乘以间隔件的杨氏模量在80mpa与120mpa的范围内。优选地，间隔件被配置为使得填充因子乘以间隔件的杨氏模量在120mpa到150mpa的范围内。在一个实施例中，装置进一步包含涂覆在一个或两个板上的干燥试剂。在一个实施例中，装置在一个或两个板上进一步包含具有预定区域的干结合位点，其中干结合位点结合并固定样品中的分析物。在一个实施例中，装置在一个或两个板上进一步包含可释放干燥试剂和释放时间控制材料，释放时间控制材料延迟可释放干燥试剂释放到样品中的时间。在一个实施例中，释放时间控制材料将干燥试剂开始释放到样品中的时间延迟至少3秒。在一个实施例中，试剂包含抗凝血剂和/或染色试剂。在一个实施例中，试剂包含细胞裂解试剂。在一个实施例中，装置在一个或两个板上进一步包含一个或多个干结合位点和/或一个或多个试剂位点。在一个实施例中，分析物包含分子(例如，蛋白质、肽、dna、rna、核酸或其它分子)、细胞、组织、病毒和具有不同形状的纳米颗粒。在一个实施例中，分析物包含白细胞、红细胞和血小板。优选地，分析物被染色。在一个实施例中，调节所述均匀厚度的层的所述间隔件具有至少1％的填充因子，其中所述填充因子是与所述均匀厚度的层接触的所述间隔件区域跟与所述均匀厚度的层接触的所述总板区域的比例。在一个实施例中，对于调节均匀厚度层的间隔件，间隔件的杨氏模量乘以间隔件的填充因子等于或大于10mpa，其中填充因子是与均匀厚度的层接触的间隔件区域跟与均匀厚度的层接触的总板区域的比例。在一个实施例中，对于柔性板，柔性板的厚度乘以柔性板的杨氏模量在60到750gpa-μm的范围内。在一个实施例中，对于柔性板，间隔件间距(isd)的四次方除以柔性板的厚度(h)和柔性板的杨氏模量(e)，isd4/(he)等于或小于106μm3/gpa。在一个实施例中，一个或两个板包含位于板的表面上或内部的位置标记物，位置标记物提供板的位置的信息。在一个实施例中，一个或两个板可以包含在板的表面上或内部的刻度标记物，其提供样品和/或板的结构的横向尺寸的信息。在一个实施例中，一个或两个板在板的表面上或内部包含成像标记物，其有助于样品的成像。在一个实施例中，间隔件可用作位置标记物、比例标记物、成像标记物或其任何组合。在一个实施例中，均匀厚度层的平均厚度约等于样品中分析物的最小尺寸。在一个实施例中，所述间隔件间距在7μm至50μm的范围内。优选地，间隔件间距在50μm到120μm的范围内。优选地，间隔件间距在120μm至200μm(微米)的范围内。在一个实施例中，间隔件间距基本上是固定间隔的。在一个实施例中，间隔件是截面形状选自圆形、多边形、环形、正方形、矩形、卵形、椭圆形或其任何组合的柱。在一个实施例中，间隔件具有柱状形状并且具有基本上平顶表面。在一个实施例中，对于每一间隔件，所述间隔件的横向尺寸与其高度的比例至少为1。在一个实施例中，间隔件的最小横向尺寸小于或基本上等于样品中分析物的最小尺寸。优选地，间隔件的最小横向尺寸在0.5μm至100μm的范围内。优选地，间隔件的最小横向尺寸在0.5μm至10μm的范围内。在一个实施例中，样品是血液。在一个实施例中，样品是未经液体稀释的全血。在另一个实施例中，样品是稀释的血液。在一个实施例中，样品是生物样品，生物样品选自羊水、房水、玻璃体液、血液(例如，全血、分馏的血液、血浆或血清)、母乳、脑脊髓液(csf)、耳垢(耳屎)、乳糜、食糜、内淋巴、外淋巴、粪便、呼吸、胃酸、胃液、淋巴液、粘液(包括鼻引流液和痰液)、心包液、腹膜液、胸膜液、脓液、风湿液、唾液、呼出的冷凝物、皮脂、精液、痰液、汗液、滑液、泪液、呕吐物和尿液。在一个实施例中，样品是生物样品、环境样品、化学样品或临床样品。在一个实施例中，间隔件具有柱状形状，且间隔件的侧壁拐角具有曲率半径至少为1μm的圆形形状。在一个实施例中，间隔件具有至少100/mm2的密度。优选地，间隔件具有至少1,000/mm2的密度。在一个实施例中，板中的至少一个是透明的。在一个实施例中，板中的至少一个是由柔性聚合物制成。在一个实施例中，对于压缩板的压力，间隔件是不可压缩和/或独立地，板中只有一个是柔性的。在一个实施例中，柔性板的厚度在10μm到200μm的范围内。在一个实施例中，变化小于30％。在一个实施例中，变化小于10％。在一个实施例中，变化小于5％。在一个实施例中，第一板和第二板连接且被配置为通过折叠板而从开放构造改变到闭合构造。在一个实施例中，第一板和第二板通过铰链连接且被配置为通过沿着铰链折叠板而从开放构造改变到闭合构造。在一个实施例中，第一板和第二板通过铰链连接到板，铰链是单独材料，且被配置为通过沿着铰链折叠板而从开放构造改变到闭合构造。在一个实施例中，第一板和第二板由单片材料制成且被配置为通过折叠板而从开放构造改变到闭合构造。在一个实施例中，均匀厚度样品层在至少1mm2的横向区域上是均匀的。在一个实施例中，装置被配置为在60秒或更短时间内分析样品。在一个实施例中，在闭合构造下，最终样品厚度装置被配置为在60秒或更短时间内分析样品。在一个实施例中，在闭合构造下，最终样品厚度装置被配置为在10秒或更短时间内分析样品。在一个实施例中，干结合位点包含捕获剂。在一个实施例中，干结合位点包含抗体或核酸。在一个实施例中，可释放的干燥试剂是标记的试剂。在一个实施例中，可释放的干燥试剂是荧光标记的试剂。在一个实施例中，可释放的干燥试剂是荧光标记的抗体。在一个实施例中，可释放的干燥试剂是细胞染色剂。在一个实施例中，可释放的干燥试剂是细胞裂解剂。在一个实施例中，检测器是检测光信号的光检测器。在一个实施例中，检测器是检测电信号的电检测器。在一个实施例中，其中间距通过直接压印板或注塑成型板而固定在板上。在一个实施例中，板和间隔件的材料选自聚苯乙烯、pmma、pc、coc、cop或另一塑料。在一个方面，提供了一种使用移动电话快速分析样品的系统，包含：(a)如任一前述实施例的装置；(b)移动通信装置，包含：i.一个或多个相机，其用于检测和/或成像样品；ii.用于接收和/或处理所检测的信号和/或样品的图像并且用于远程通信的电子器件、信号处理器、硬件和软件；以及(c)来自移动通信装置或外部源的光源；其中如任一前述实施例的装置或方法的检测器由移动通信装置提供，并且在闭合构造中检测样品中的分析物。在一个实施例中，板中的一个具有结合分析物的结合位点，其中至少一部分均匀样品厚度层在结合位点上方，且基本上小于结合位点的平均横向线性尺寸。在一个实施例中，该系统进一步包含：(d)壳体，该壳体被配置为用于保持该样品并且有待安装到该移动通信装置上。在一个实施例中，该壳体包含用于促进移动通信装置对样品的成像和/或信号处理的光学器件，以及被配置为将光学器件保持在移动通信装置上的底座。在一个实施例中，壳体中的光学器件的元件可相对于壳体移动。在一个实施例中，移动通信装置可以被配置为将测试结果传送到医学专业人员、医疗机构或保险公司。在一个实施例中，移动通信装置进一步被配置为将关于测试和对象的信息传送到医学专业人员、医疗机构或保险公司。在一个实施例中，移动通信装置进一步被配置为将测试的信息传送到云网络，且云网络处理该信息以改进测试结果。在一个实施例中，移动通信装置进一步被配置为将测试和对象的信息传送到云网络，云网络处理该信息以改进测试结果，且改进的测试结果将发送回对象。在一个实施例中，移动通信装置被配置为从医学专业人员接收处方、诊断或建议。在一个实施例中，移动通信装置配置有硬件和软件以：(a)捕获样品的图像；(b)分析图像中的测试位置和对照位置；以及(c)将从测试位置的分析获得的值与表征快速诊断测试的阈值进行比较。在一个实施例中，板中的至少一个包含储存测定试剂的储存位点。在一个实施例中，至少一个相机从装置读取信号。在一个实施例中，移动通信装置经由wifi或蜂窝网络与远程位置通信。在一个实施例中，移动通信装置是移动电话。在一个方面，提供了一种使用移动电话快速分析样品中的分析物的方法，包含：(a)将样品沉积在任一前述系统实施例的装置上；(b)测定沉积在装置上的样品中的分析物以产生结果；以及(c)将结果从移动通信装置传送到远离移动通信装置的位置。在一个实施例中，分析物包含分子(例如，蛋白质、肽、dna、rna、核酸或其它分子)、细胞、组织、病毒和具有不同形状的纳米颗粒。在一个实施例中，分析物包含白细胞、红细胞和血小板。在一个实施例中，测定包含进行白细胞差异测定。在一个实施例中，本方法包含：(a)在远程位置分析结果以提供分析结果；以及(b)将分析结果从远程位置传送到移动通信装置。在一个实施例中，分析由远程位置处的医学专业人员完成。在一个实施例中，移动通信装置可以从远程位置处的医学专业人员接收处方、诊断或建议。在一个实施例中，样品是体液。在一个实施例中，体液是血液、唾液或尿液。在一个实施例中，样品是未经液体稀释的全血。在一个实施例中，测定步骤包含检测样品中的分析物。在一个实施例中，分析物是生物标记物。在一个实施例中，分析物是蛋白质、核酸、细胞或代谢物。在一个实施例中，本方法包含计数红细胞的数目。在一个实施例中，本方法包含计数白细胞的数目。在一个实施例中，本方法包含染色样品中的细胞并计数嗜中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞的数目。在一个实施例中，步骤(b)中进行的本测定是结合测定或生物化学测定。在一个方面，提供了一种用于分析样品的方法，包含：(a)获得如任一前述装置实施例所述的装置；(b)将样品沉积到装置的一个或两个板上；(c)将板置于闭合构造并且向板的至少一部分施加外力；以及(d)在板处于闭合构造时分析均匀厚度层。在一个实施例中，第一板在其表面上还包含第一预定测定位点和第二预定测定位点，其中当板处于闭合位置时，测定位点的边缘之间的距离基本上大于均匀厚度层的厚度，其中至少一部分均匀厚度层在预定的测定位点上，并且其中样品具有一种或多种能够在样品中扩散的分析物。在一个实施例中，第一板在其表面上具有至少三个分析物测定位点，以及当板处于闭合位置时，任何两个相邻测定位点的边缘之间的距离远大于均匀厚度层的厚度，其中至少一部分均匀厚度层在测定位点上，并且其中样品具有一种或多种能够在样品中扩散的分析物。在一个实施例中，第一板在其表面上具有至少两个相邻的分析物测定位点(没有分开一定距离)，当板处于闭合位置时，该距离基本上大于均匀厚度层的厚度，其中至少一部分均匀厚度层在测定位点上，并且其中样品具有一种或多种能够在样品中扩散的分析物。在一个实施例中，分析物测定区域位于一对电极之间。在一个实施例中，测定区域由干燥试剂贴片界定。在一个实施例中，测定区域结合并固定分析物。在一个实施例中，测定区域由结合试剂贴片界定，结合试剂贴片在接触样品时，溶解到样品中，扩散到样品中并结合到分析物。在一个实施例中，间隔件间距在14μm至200μm的范围内。在一个实施例中，间隔件间距在7μm至20μm的范围内。在一个实施例中，间隔件是截面形状选自圆形、多边形、环形、正方形、矩形、卵形、椭圆形或其任何组合的柱。在一个实施例中，间隔件具有柱状形状且具有基本上平顶表面，其中对于每一间隔件，间隔件的横向尺寸与其高度的比例至少为1。在一个实施例中，间隔件具有柱状形状，且间隔件的侧壁拐角具有曲率半径至少为1μm的圆形形状。在一个实施例中，间隔件具有至少1,000/mm2的密度。在一个实施例中，板中的至少一个是透明的。在一个实施例中，板中的至少一个是由柔性聚合物制成。在一个实施例中，板中只有一个是柔性的。在一个实施例中，区域确定装置是相机。在一个实施例中，区域确定装置包含板的样品接触区域中的区域，其中该区域小于样品接触区域的1/100、1/20、1/10、1/6、1/5、1/4、1/3、1/2、2/3，或在任两个值之间的范围内。在一个实施例中，区域确定装置包含相机和板的样品接触区域中的区域，其中该区域与样品接触。在一个实施例中，可变形样品包含液体样品。在一个实施例中，不精确力的变化为实际施加的总力的至少30％。在一个实施例中，不精确力的变化为实际施加的总力的至少20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、150％、200％、300％、500％，或在任何两个值之间的范围内。在一个实施例中，间隔件具有平顶。在一个实施例中，装置进一步被配置为在移除按压力之后具有厚度和均匀性与施加力时的厚度和均匀性基本上相同的样品厚度。在一个实施例中，不精确力由人手提供。在一个实施例中，间隔件间距基本上恒定。在一个实施例中，间隔件间距在均匀样品厚度区域的区域中基本上是固定间隔的。在一个实施例中，填充因子与所述间隔件的杨氏模量的乘积为2mpa或更大。在一个实施例中，力通过手直接或间接施加。在一个实施例中，施加的力在1n到20n的范围内。在一个实施例中，施加的力在20n至200n的范围内。在一个实施例中，非常均匀层的厚度变化小于平均厚度的15％、10％或5％。在一个实施例中，不精确力通过将装置夹在拇指和食指之间而施加。在一个实施例中，预定样品厚度大于间隔件高度。在一个实施例中，装置在移除按压力之后将其自身保持在闭合构造中。在一个实施例中，均匀厚度样品层区域大于施加按压力的区域。在一个实施例中，间隔件在施加按压力的过程中不显著变形。在一个实施例中，按压力不是预先确定的并且不被测量。在一些实施例中，流体样品由可变形样品代替，并且用于使至少一部分流体样品制成均匀厚度层的实施例可以使至少一部分可变形样品制成均匀厚度层。在一个实施例中，间隔件间距是固定间隔的。在一个实施例中，间隔件具有平顶。在一个实施例中，间隔件间距比样品中目标分析物的尺寸大至少两倍。在一个方面，提供了一种制造q卡的方法。在一个实施例中，q卡的一个实施例包含：第一板、第二板，以及铰链，其中i.第一板，其厚为约200nm至1500nm，在其内表面上包含(a)用于接触样品的样品接触区域，以及(b)围绕样品接触区域的样品溢流坝，配置为阻止坝外的样品流；ii.第二板，其厚10um至250um，并且在其内表面上包含(a)用于接触样品的样品接触区域，以及(b)在样品接触区域上的间隔件；iii.连接第一板和第二板的铰链；以及其中第一板和第二板是围绕铰链的轴线相对于彼此可移动的。在一个实施例中，q卡的一个实施例包含：第一板、第二板，以及铰链，其中i.第一板，其厚为约200nm至1500nm，在其内表面上包含(a)用于接触样品的样品接触区域，(b)围绕样品接触区域的样品溢流坝，配置为阻止坝外的样品流，以及(c)在样品接触区域上的间隔件；ii.第二板，其厚10um至250um，在其内表面上包含用于接触样品的样品接触区域；iii.连接第一板和第二板的铰链；以及其中第一板和第二板是围绕铰链的轴线相对于彼此可移动的。在一个实施例中，q卡的一个实施例包含：第一板、第二板，以及铰链，其中i.第一板，其厚为约200nm至1500nm，在其内表面上包含(a)用于接触样品的样品接触区域，以及(b)在样品接触区域上的间隔件；ii.第二板，其厚为10um至250um，在其内表面上包含(a)用于接触样品的样品接触区域，以及(b)围绕样品接触区域的样品溢流坝，配置为阻止坝外的样品流，以及；iii.连接第一板和第二板的铰链；以及其中第一板和第二板是围绕铰链的轴线相对于彼此可移动的。在一个实施例中，q卡的一个实施例包含：第一板、第二板，以及铰链，其中i.第一板，其厚为约200nm至1500nm，在其内表面上包含(a)用于接触样品的样品接触区域；ii.第二板，其厚为10um至250um，在其内表面上包含(a)用于接触样品的样品接触区域，(b)围绕样品接触区域的样品溢流坝，配置为阻止坝外的样品流，以及(c)样品接触区域上的间隔件；以及iii.连接第一板和第二板的铰链；以及其中第一板和第二板是围绕铰链的轴线相对于彼此可移动的。在一个实施例中，提供一种用于制造q卡的方法，其包含：(a)第一板的注塑成型；以及(b)第二板的纳米压印或挤压印刷。在一个实施例中，提供一种用于制造q卡的方法，其包含：(a)激光切割第一板；以及(b)第二板的纳米压印或挤压印刷。在一个实施例中，提供一种用于制造q卡的方法，其包含：(a)注塑成型并激光切割第一板；以及(b)第二板的纳米压印或挤压印刷。在一个实施例中，提供一种用于制造q卡的方法，包含：纳米压印或挤压印刷以制造第一板和第二板两者。在一个实施例中，提供一种用于制造q卡的方法，包含：使用注塑成型，激光切割第一板，纳米压印，挤压印刷或其组合来制造第一板或第二板。在一个实施例中，方法进一步包含在制造第一板和第二板之后将铰链附接到第一板和第二板上的步骤。压缩调节开放流(crof)在测定中，样品或试剂的操作可导致测定的改进。操纵包括但不限于操纵样品和/或试剂的几何形状和位置、样品和试剂的混合或结合，以及试剂样品与板的接触区域。本发明的许多实施例使用称为“压缩调节开放流(crof)”的方法和执行crof的装置来操纵样品和/或试剂的几何尺寸、位置、接触区域以及混合。术语“压缩开放流(cof)”是指通过以下方式改变沉积在板上的可流动样品的形状的方法：(i)将另一个板放置在至少一部分样品的上面，和(ii)然后通过将两个板朝向彼此推动而在两个板之间压缩样品；其中该压缩减小了至少一部分该样品的厚度并且使得该样品流入这些板之间的开放空间中。术语“压缩调节开放流”或“crof”(或“自校准压缩开放流”或“scof”或“sccof”)是指特定类型的cof，其中压缩后部分或全部样品的最终厚度由间隔件“调节”，其中间隔件放置于两个板之间。在crof中的术语“部分或整个样品的最终厚度由间隔件调节”是指在crof期间，一旦达到特定的样品厚度，两个板的相对运动以及因此样品厚度的变化停止，其中特定厚度由间隔件确定。在一个实施例中，crof的方法包含：(a)获得可流动的样品；(b)获得可相对于彼此移动成不同构造的第一板和第二板，其中每个板具有基本上平坦的样品接触表面，其中所述板中的一个或两个包含间隔件并且所述间隔件具有预定高度，并且所述间隔件在相应的样品接触表面上；(c)当板被配置为开放构造时，将样品沉积在板中的一个或两个上；其中该开放构造是这样一种构造，其中这两个板部分地或完全地分开并且板之间的间距不受间隔件调节；以及(d)在(c)之后，通过将该板带到闭合构造中来展开该样品，其中在该闭合构造中：板是彼此面对的，该间隔件和该样品的相关体积是在该板之间，该样品的相关体积的厚度由板和间隔件调节，其中相关体积是该样品的整个体积的至少一部分，并且其中在样品展开期间，样品在两个板之间横向流动。(1)铰链、开放凹口、凹槽边缘和滑块本文公开的装置/设备、系统和方法可以包括或使用用于样品检测、分析和量化的q卡。在一些实施例中，q卡包括铰链、凹口、凹槽和滑块，其有助于促进q卡的操纵和样品的测量。在本文中公开了，在分别于2016年8月10日和2016年9月14日提交的pct申请(指定美国)第pct/us2016/045437号和第pct/us2016/051775号、2016年12月9日提交的美国临时申请第62/431639号、2017年2月7日提交的美国临时申请第62/456065号、2017年2月8日提交的美国临时申请第62/456287号和第62/456504号、2017年8月1日提交的美国临时申请第62/539660号中列出、描述和/或总结了铰链、凹口、凹槽和滑动件的结构、材料、功能、变化和尺寸，所有这些申请的全部内容出于所有目的并入本文。在一些实施例中，qmax装置包含开放机构，例如但不限于板边缘上的凹口或附接到板的条带，使得用户更容易操纵板的定位，例如但不限于用手分离板。在一些实施例中，qmax装置包含在板中的一个或两个上的沟槽。在某些实施例中，沟槽限制板上样品的流动。(2)q卡和适配器本文公开的装置/设备、系统和方法可以包括或使用用于样品检测、分析和量化的q卡。在一些实施例中，q卡与适配器一起使用，该适配器被配置为容纳q卡并连接到移动装置，使得q卡中的样品可以由移动装置成像、分析和/或测量。在本文中公开了，在分别于2016年8月10日和2016年9月14日提交的pct申请(指定美国)第pct/us2016/045437号和第pct/us2016/051775号、2017年2月7日提交的美国临时申请第62/456065号、2017年2月8日提交的美国临时申请第62/456287号和第62/456590号、2017年2月8日提交的美国临时申请第62/456504号、2017年2月15日提交的美国临时申请第62/459,544号、2017年2月16日提交的美国临时申请第62/460075号和第62/459920号中列出、描述和/或总结了q卡、适配器和移动的结构、材料、功能、变化、尺寸和连接，所有这些申请的全部内容出于所有目的并入本文。在一些实施例中，适配器包含插座插槽，该插座插槽被配置为当装置处于闭合构造时容纳qmax装置。在某些实施例中，qmax装置具有沉积在其中的样品，并且适配器可以连接到移动装置(例如智能电话)，使得样品可以由移动装置读取。在某些实施例中，移动装置可以检测和/或分析来自样品的信号。在某些实施例中，当样品位于qmax装置中并且位于相机的视野(fov)中时，移动装置可以捕获样品的图像，在某些实施例中，相机是移动装置的一部分。在一些实施例中，该适配器包含多个光学组件，这些光学组件被配置为用于增强、放大和/或优化来自该样品的信号的产生。在一些实施例中，这些光学组件包括被配置为用于增强、放大和/或优化提供给该样品的照明的部分。在某些实施例中，照明由作为移动装置一部分的光源提供。在一些实施例中，这些光学组件包括被配置为用于增强、放大和/或优化来自该样品的信号的部分。(3)智能手机检测系统本文公开的装置/设备、系统和方法可以包括或使用用于样品检测、分析和量化的q卡。在一些实施例中，q卡与能够将q卡与智能电话检测系统连接的适配器一起使用。在一些实施例中，智能电话包含相机和/或照明源。在本文中公开了，在分别于2016年8月10日和2016年9月14日提交的pct申请(指定美国)第pct/us2016/045437号和第pct/us2016/051775号、2017年2月7日提交的美国临时申请第62/456065号、2017年2月8日提交的美国临时申请第62/456287号和第62/456590号、2017年2月8日提交的美国临时申请第62/456504号、2017年2月15日提交的美国临时申请第62/459,544号、2017年2月16日提交的美国临时申请第62/460075号和第62/459920号中列出、描述和/或总结了智能电话检测系统以及相关联的硬件和软件，所有这些申请的全部内容出于所有目的并入本文。在一些实施例中，智能电话包含相机，当样品位于相机的视野中时(例如通过适配器)，相机可用于捕获图像或样品。在某些实施例中，相机包括一组透镜(例如，如在iphonetm6中)。在某些实施例中，相机包括至少两组透镜(例如，如在iphonetm7中)。在一些实施例中，智能电话包含相机，但是相机不用于图像捕获。在一些实施例中，智能电话包含光源，例如但不限于led(发光二极管)。在某些实施例中，当样品位于相机的视野中时(例如通过适配器)，光源用于向样品提供照明。在一些实施例中，来自光源的光被适配器的光学组件增强、放大、改变和/或优化。在一些实施例中，智能电话包含被配置为处理来自样品的信息的处理器。智能电话包括软件指令，当由处理器执行时，该软件指令可以增强、放大和/或优化来自样品的信号(例如图像)。处理器可包括一个或多个硬件组件，例如中央处理单元(cpu)、专用集成电路(asic)、专用指令集处理器(asip)、图形处理单元(gpu)、物理处理单元(ppu)、数字信号处理器(dsp)、现场可编程门阵列(fpga)、可编程逻辑装置(pld)、控制器、微控制器单元、精简指令集计算机(risc)、微处理器等，或其任何组合。在一些实施例中，智能电话包含通信单元，其被配置和/或用于将与样品相关的数据和/或图像传输到另一装置。仅作为示例，通信单元可以使用电缆网络、有线网络、光纤网络、电信网络、内联网、因特网、局域网(lan)、广域网(wan)、无线局域网(wlan)、城域网(man)、广域网(wan)、公共电话交换网络(pstn)、蓝牙网络、zigbee网络、近场通信(nfc)网络等，或其任何组合。在一些实施例中，智能电话是iphonetm、androidtm电话或windowstm电话。(4)检测方法本文公开的装置/设备、系统和方法可包括或用于各种类型的检测方法。在本文中公开了，在分别于2016年8月10日和2016年9月14日提交的pct申请(指定美国)第pct/us2016/045437号和第pct/us2016/051775号、2017年2月7日提交的美国临时申请第62/456065号、2017年2月8日提交的美国临时申请第62/456287号、第62/456528号、第62/456631号、第62/456522号、第62/456598号、第62/456603号和第62/456628号、2017年2月9日提交的美国临时申请第62/459276号、第62/456904号、第62/457075号和第62/457009号，和2017年2月15日提交的美国临时申请第62/459303号、第62/459337号和第62/459598号，和2017年2月16日提交的美国临时申请第62/460083号、第62/460076号中列出、描述和/或总结了检测方法，所有这些申请的全部内容出于所有目的并入本文。(5)标签、捕获剂和检测剂本文公开的装置/设备、系统和方法可以使用各种类型的用于分析物检测的标签、捕获剂和检测剂。在本文中公开了，在分别于2016年8月10日和2016年9月14日提交的pct申请(指定美国)第pct/us2016/045437号和第pct/us2016/051775号、2017年2月7日提交的美国临时申请第62/456065号、2017年2月8日提交的美国临时申请第62/456287号、2017年2月8日提交的美国临时申请第62/456504号中列出、描述和/或总结了标签，所有这些申请的全部内容出于所有目的并入本文。在一些实施例中，标签是光学可检测的，例如但不限于荧光标签。在一些实施例中，标签是光学可检测的，例如但不限于荧光标签。在一些实施例中，标签包括但不限于irdye800cw、alexa790、dylight800、荧光素、异硫氰酸荧光素、羧基荧光素的琥珀酰亚胺基酯、荧光素的琥珀酰亚胺基酯、荧光素二氯三嗪的5-异构体、笼状羧基荧光素-丙氨酸-甲酰胺、oregongreen488、oregongreen514；荧光黄、吖啶橙、罗丹明、四甲基罗丹明、德克萨斯红、碘化丙啶、jc-1(5，5′，6，6′-四氯-1，1′，3，3′-四乙基苯并咪唑羰花菁碘化物)、四溴罗丹明123、罗丹明6g、tmrm(四甲基罗丹明甲酯)、tmre(四甲基罗丹明乙酯)、四甲基罗斯胺(tetramethylrosamine)、罗丹明b和4-二甲基氨基四甲基罗斯胺、绿色荧光蛋白、蓝移绿色荧光蛋白、蓝绿移绿色荧光蛋白、红移绿色荧光蛋白、黄移绿色荧光蛋白、4-乙酰氨基-4′-异硫氰酸二苯乙烯-2，2′-二磺酸；吖啶和衍生物，例如吖啶、异硫氰酸吖啶；5-(2′-氨基乙基)氨基萘-1-磺酸(edans)；4-氨基-n-[3-乙烯基磺酰基)苯基]萘酰胺-3，5二磺酸盐；n-(4-苯胺基-1-萘基)马来酰亚胺；邻氨基苯甲酰胺；4，4-二氟-5-(2-噻吩基)-4-硼-3a，4a二氮杂-5-引达省-3-丙酸bodipy；级联蓝；亮黄色；香豆素和衍生物：香豆素、7-氨基-4-甲基香豆素(amc，香豆素120)、7-氨基-4-三氟甲基香豆素(香豆素151)；花青染料；四氯四溴荧光素；4′，6-二氨基-2-苯基吲哚(dapi)；5′，5″-二溴邻苯三酚-磺酞(溴邻苯三酚红)；7-二乙氨基-3-(4′-异硫氰酸苯基)-4-甲基香豆素；二亚乙基三胺五乙酸酯；4，4′-二异氰硫基二苯乙烯-2，2′-二磺酸；4，4′-二异氰硫基二苯乙烯-2，2′-二磺酸；5-(二甲基氨基)萘-1-磺酰氯(dns，丹磺酰氯)；4-二甲基氨基苯基偶氮苯基-4′-异硫氰酸酯(dabitc)；伊红和衍生物：伊红、伊红异硫氰酸酯，藻红和衍生物：藻红b、藻红、异硫氰酸酯；乙锭；荧光素和衍生物：5-羧基荧光素(fam)、5-(4，6-二氯三嗪-2-基)氨基-荧光素(dtaf)、2′，7′-二甲氧基-4′，5′-二氯-6-羧基荧光素(joe)、荧光素、异硫氰酸荧光素、qfitc、(xritc)；荧光胺；ir144；ir1446；孔雀绿异硫氰酸酯；4-甲基伞形-酚酮邻甲酚酞；硝基酪氨酸；碱性副品红；酚红；b-藻红蛋白；邻苯二甲醛；芘和衍生物：芘、丁酸芘、琥珀酰亚胺基1-芘；丁酸酯量子点；活性红4(cibacrontmbrilliantred3b-a)罗丹明和衍生物：6-羧基-x-罗丹明(rox)、6-羧基罗丹明(r6g)、丽丝胺罗丹明b磺酰氯罗丹明(rhod)、罗丹明b、罗丹明123、罗丹明x异硫氰酸酯、磺基罗丹明b、磺基罗丹明101、磺基罗丹明101的磺酰氯衍生物(德克萨斯红)；n，n，n′，n′-四甲基-6-羧基罗丹明(tamra)；四甲基罗丹明；四甲基罗丹明异硫氰酸酯(tritc)；核黄素；5-(2′-氨基乙基)氨基萘-1-磺酸(edans)、4-(4′-二甲基氨基苯基偶氮)苯甲酸(dabcyl)、玫红酸；cal荧光橙560；铽螯合物衍生物；cy3；cy5；cy5.5；cy7；ird700；ird800；lajolla蓝；酞菁；和萘酞菁、香豆素和相关染料，吨染料，例如罗多尔(rhodols)、试卤灵(resorufins)、bimanes、吖啶、异吲哚、丹酰染料，氨基邻苯二甲酰肼，例如鲁米诺，和异鲁米诺衍生物、氨基邻苯二甲酰亚胺、氨基萘二甲酰亚胺、氨基苯并呋喃、氨基喹啉、二氰基氢醌、荧光铕和铽络合物；其组合等。合适的荧光蛋白和显色蛋白包括但不限于绿色荧光蛋白(gfp)，包括但不限于衍生自维多利亚水母(aequoriavictoria)的gfp或其衍生物，例如“人源化”衍生物(如增强的gfp)；来自另一物种的gfp，所述另一物种例如海肾renillareniformis、renillamulleri或ptilosarcusguernyi；“人源化”重组gfp(hrgfp)；来自珊瑚虫(anthozoan)物种的多种荧光和有色蛋白中的任一种；其组合；等等。在任何实施例中，qmax装置可含有各自结合选自美国临时申请第62/234,538号和pct申请第pct/us2016/054025号的表b1、b2、b3和/或b7的生物标记物的多种捕获剂和/或检测剂，其中读取步骤d)包括获得样品中多种生物标记物的量的测量，并且其中样品中多种生物标记物的量是疾病或状况的诊断。在任何实施例中，捕获剂和/或检测剂可以是抗体表位，生物标记物可以是结合抗体表位的抗体。在一些实施例中，抗体表位包括选自美国临时申请第62/234,538号和/或pct申请第pct/us2016/054025号中的表b4、b5或b6的生物分子或其片段。在一些实施例中，抗体表位包括选自表b5的过敏原或其片段。在一些实施例中，抗体表位包括选自美国临时申请第62/234,538号和/或pct申请第pct/us2016/054025号中的表b6的传染原衍生的生物分子或其片段。在任何实施例中，qmax装置可以含有选自美国临时申请第62/234,538号和/或pct申请第pct/us2016/054025号中的表b4、b5和/或b6的多个抗体表位，其中读取步骤d)包括获得样品中多个表位结合抗体的量的测量，并且其中样品中多个表位结合抗体的量是疾病或状况的诊断。(6)分析物本文公开的装置/设备、系统和方法可用于操纵和检测各种类型的分析物(包括生物标记物)。在本文中公开了或在分别于2016年8月10日和2016年9月14日提交的pct申请(指定美国)第pct/us2016/045437号和第pct/us2016/051775号、2017年2月7日提交的美国临时申请第62/456065号、2017年2月8日提交的美国临时申请第62/456287号、2017年2月8日提交的美国临时申请第62/456504号中列出、描述和总结了分析物，所有这些申请的全部内容出于所有目的并入本文。本文还提供了用于实践本发明中的装置、系统和方法的试剂盒。样品的量可以是约一滴样品。样品的量可以是从刺破的手指或手指针刺收集的量。样品的量可以是从微针或静脉抽吸中收集的量。样品可在从来源获得后无需进一步处理而使用，或可被处理，例如以富集感兴趣的分析物、除去大颗粒物质、溶解或再悬浮固体样品等。可以采用将样品施加到qmax装置的任何合适的方法。合适的方法可包括使用移液管、滴管、注射器等。在某些实施例中，当qmax装置位于量计形式的支架上时，如下所述，可以通过将量计的样品接收区域浸入样品中来将样品施加到qmax装置上。可以一次或多次收集样品。可以单独聚集和/或处理随时间收集的样品(如本文所述，通过应用于qmax装置并获得样品中分析物的量的测量)。在一些情况下，随时间获得的测量可被聚集并且可用于随时间的纵向分析以促进筛选、诊断、治疗和/或疾病预防。冲洗qmax装置以除去未结合的样品组分可以以任何方便的方式进行，如上所述。在某些实施例中，使用结合缓冲液冲洗qmax装置的表面以除去未结合的样品组分。分析物的可检测标记可以通过任何方便的方法进行。分析物可以直接或间接标记。在直接标记中，在将样品施加到qmax装置之前标记样品中的分析物。在间接标记中，样品中的未标记分析物在样品施加到qmax装置以捕获未标记分析物后被标记，如下所述。(7)应用本文公开的装置/设备、系统和方法可以用于各种应用(领域和样品)。在本文中公开了或在分别于2016年8月10日和2016年9月14日提交的pct申请(指定美国)第pct/us2016/045437号和第pct/us2016/051775号、2017年2月7日提交的美国临时申请第62/456065号、2017年2月8日提交的美国临时申请第62/456287号、2017年2月8日提交的美国临时申请第62/456504号中列出、描述和总结了应用，所有这些申请的全部内容出于所有目的并入本文。在一些实施例中，本文公开的装置、设备、系统和方法用于各种领域的各种不同应用中，其中需要确定样品中一种或多种分析物的存在或不存在、量化和/或扩增。例如，在某些实施例中，题述装置、设备、系统和方法用于检测蛋白质、肽、核酸、合成化合物、无机化合物、有机化合物、细菌、病毒、细胞、组织、纳米颗粒及其它分子、化合物、混合物及其物质。可以使用题述装置、设备、系统和方法的各种领域包括但不限于：人类疾病和状况的诊断、管理和/或预防、兽医疾病和状况的诊断、管理和/或预防、植物疾病和状况的诊断、管理和/或预防、农业用途、兽医用途、食品测试、环境测试和净化、药物测试和预防等。本发明的应用包括但不限于：(a)与某些疾病或疾病的某些阶段相关的化合物或生物分子的检测、纯化、量化和/或扩增，所述疾病例如感染性和寄生虫病、损伤、心血管疾病、癌症、精神障碍、神经精神障碍和器质性疾病(例如肺病、肾病)，(b)来自环境(例如水、土壤)的细胞和/或微生物(例如病毒、真菌和细菌)或生物样品(例如组织、体液)的检测、纯化、量化和/或扩增，(c)对食品安全、人类健康或国家安全构成危害的化合物或生物样品(例如有毒废物、炭疽)的检测、量化，(d)在医学或生理监测中的生理参数(例如葡萄糖、血氧水平、总血细胞计数)的检测和量化，(e)来自生物样品(例如细胞、病毒、体液)的特异性dna或rna的检测和量化，(f)用于基因组分析的染色体和线粒体中dna的遗传序列的测序和比较，或(g)反应产物(例如在药物的合成或纯化期间)的检测和量化。在一些实施例中，题述装置、设备、系统和方法用于检测样品中的核酸、蛋白质或其它分子或化合物。在某些实施例中，所述装置、设备、系统和方法用于快速、临床检测和/或量化生物样品中的一种或以上、两种或以上，或三种或以上疾病生物标记物，例如用于诊断、预防和/或管理对象中的疾病状况。在某些实施例中，所述装置、设备、系统和方法用于检测和/或量化环境样品中的一种或以上、两种或以上，或三种或以上环境标记物，所述环境样品例如获自河流、海洋、湖泊、雨、雪、污水、污水处理径流、农业径流、工业径流、自来水或饮用水的样品。在某些实施例中，所述装置、设备、系统和方法用于检测和/或量化来自食物样品的一种或以上、两种或以上，或三种或以上食物标记物，所述食物样品获自自来水、饮用水、制备的食品、处理的食品或生食品。在一些实施例中，题述装置是微流体装置的一部分。在一些实施例中，题述装置、设备、系统和方法用于检测荧光或发光信号。在一些实施例中，题述装置、设备、系统和方法包括通信装置或与通信装置一起使用，通信装置例如但不限于：移动电话、平板计算机和膝上型计算机。在一些实施例中，题述装置、设备、系统和方法包括标识符或与标识符一起使用，所述标识符例如但不限于光学条形码、射频id标志或其组合。在一些实施例中，样品是获自对象的诊断样品，分析物是生物标记物，并且样品中分析物的测量量是疾病或状况的诊断。在一些实施例中，题述装置、系统和方法还包括向所述对象接收或提供报告，所述报告指示在没有患有所述疾病或状况或处于患有所述疾病或状况的低风险的个体中所述生物标记物的测量量和所述生物标记物的测量值范围，其中相对于所述测量值范围的所述生物标记物的测量量是疾病或状况的诊断。在一些实施例中，样品是环境样品，并且其中分析物是环境标记物。在一些实施例中，所述题述装置、系统和方法包括接收或提供报告，所述报告指示暴露于从中获得样品的环境的对象的安全性或危害性。在一些实施例中，本题述装置、系统和方法包括将包含所测量的环境标记物的量的数据发送到远程位置，并且接收指示对暴露于从中获得样品的环境的对象的安全性或危害性的报告。在一些实施例中，样品是食物样品，其中分析物是食物标记物，并且其中样品中食物标记物的量与供食用的食物的安全性相关。在一些实施例中，题述装置、系统和方法包括接收或提供报告，该报告指示对象食用从中获得样品的食物的安全性或危害性。在一些实施例中，题述装置、系统和方法包括将包含所测量的该食物标记物的量的数据发送到远程位置并且接收指示对象食用从中获得样品的食物的安全性或危害性的报告。当前第1页1 2 3 

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