一种银耳寡糖的生产工艺的制作方法

[0001]
本发明涉及糖类化合物加工领域，具体而言，涉及一种银耳寡糖的生产工艺。


背景技术：

[0002]
寡糖是指由2-20个相同或不同单糖构成的直链或支链低度聚合糖类物质，又称低聚糖，包括普通寡糖和功能性寡糖两大类。普通寡糖中有人们熟悉的蔗糖、麦芽糖、乳糖等，这些糖可以被机体消化吸收，对肠道有益菌并无生长促进作用，另一类是功能性寡糖，例如果寡糖、低聚木糖、大豆低聚糖、壳寡糖、银耳寡糖、褐藻胶寡糖等，它们本身不能被机体消化吸收，但具有多种生理活性，在食品、农业、医药等领域有着广阔的市场空间。
[0003]
银耳是一种经济价值高、营养丰富的药食两用菌，具有滋补生津、润肺养胃之功效。银耳中含有丰富的银耳多糖，但该银耳多糖分子量巨大，结构复杂，难溶于水，在热水中方可溶解，且其溶解后粘稠性很强，限定了其应用范畴，因此对银耳多糖进行降解，制备分子量小、水溶性好的银耳寡糖，以提高其生理活性，扩大其应用范围具有重要的应用价值。


技术实现要素：

[0004]
针对现有技术中银耳多糖分子量巨大，结构复杂，难溶于水，粘稠性很强及应用范畴受限地问题，本发明公开一种银耳寡糖的生产工艺，具体方案如下：
[0005]
步骤一，菌株筛选及培养，选取腐烂银耳在培养液中震荡培养后，取震荡后的培养液稀释后涂布于筛选培养基的平板上，平板在25-30℃环境下倒置培养24-60小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0006]
步骤二，选取凹陷较大同时菌落直径较大的菌落，点植到新鲜筛选培养基中培养24-60小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0007]
步骤三，重复步骤二步骤进行筛选，直到分离出纯化的菌株；并将筛选出的菌株放入培养液中进行扩种培养；
[0008]
步骤四，在灭菌后的银耳中加入步骤三中培养的菌种进行发酵，并将发酵后的银耳晒干、提胶、酸处理、高温处理、粉碎过筛，得到所需的银耳寡糖。
[0009]
优选的，步骤一中震荡前的培养液中各组份及其浓度分别为：银耳多糖1-3g/l、蛋白胨3-8g/l、酵母粉0.5-2.5g/l、磷酸铁0.01-0.02g/l，溶剂为自来水，培养液ph＝7.2-7.6，在115-130℃灭菌10-30min。
[0010]
优选的，步骤一中，筛选培养基各组份及其浓度分别为：银耳多糖10-20g/l、琼脂糖3-9g/l，蛋白胨3-8g/l、酵母粉0.5-2.5g/l、磷酸铁0.01-0.02g/l，溶剂为自来水，培养液ph＝7.2-7.6，在115-130℃灭菌10-30min。
[0011]
优选的，步骤一中震荡培养温度为25-30℃，震荡转速为150-200rpm。
[0012]
优选的，步骤一中取震荡后的培养液取一个以上稀释度涂布在筛选培养基的平板上，每个稀释度做三个以上平行样。
[0013]
优选的，步骤四中银耳灭菌采用将银耳置于灭菌锅中，65℃灭菌12-14小时。
[0014]
优选的，步骤四中灭菌后的银耳冷却至常温，撒上菌种发酵3-4天。
[0015]
优选的，步骤四中提胶工艺包括浸泡、煮胶及过滤；
[0016]
其中浸泡为用2.5％的盐酸浸泡5min，立即倒干酸化液用蒸馏水洗至中性；
[0017]
煮胶及过滤为将水洗后的银耳投入煮胶罐中进行煮胶，煮胶后加入助滤剂进行过滤提胶。
[0018]
优选的，步骤四中酸处理为将提胶得到的琼胶溶液，用浓度为0.5％的硫酸在60℃恒温锅中搅拌水解4-5h，并调ph至中性。
[0019]
优选的，步骤四中高温处理为将酸处理后得到的银耳寡糖溶液减压浓缩后，倒入130-140℃滚筒中进行干燥。
[0020]
优选的，步骤四中粉碎过筛为将从滚筒中出来的产品进行粉碎并过80目筛。
[0021]
有益效果：
[0022]
采用本发明技术方案产生的有益效果如下：
[0023]
(1)应用生物、化学和物理方法来降解银耳多糖，实现了高效、可控降解银耳多糖。
[0024]
(2)通过选取腐烂银耳培养纯化菌株，降低了菌种存在的生产环境要求、生产成本以及产业化难度，适合在工业上运用。
[0025]
(3)菌株的培养基组成简单，易于配制。
具体实施方式
[0026]
为使本发明实施方式的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明的实施例，对本发明实施方式中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施方式是本发明一部分实施方式，而不是全部的实施方式。基于本发明中的实施方式，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施方式，都属于本发明保护的范围。因此，以下对在实施例中提供的本发明的实施方式的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施方式。基于本发明中的实施方式，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施方式，都属于本发明保护的范围。
[0027]
本实施方式通过选取腐烂银耳筛选纯化菌种，并对所述菌种进行扩种，再接种于灭菌后的银耳上进行发酵处理，最后将发酵后的银耳晒干、提胶、酸处理、高温处理、粉碎过筛，得到所需的银耳寡糖。具体方案如下：
[0028]
步骤一，菌株筛选及培养，配制各组份及其浓度分别为：银耳多糖1-3g/l、蛋白胨3-8g/l、酵母粉0.5-2.5g/l、磷酸铁0.01-0.02g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝7.2-7.6，在115-130℃灭菌10-30min地培养液，在温度为25-30℃，震荡转速为150-200rpm条件下，选取腐烂银耳在培养液中震荡培养后，取震荡后的培养液稀释后涂布于各组份及其浓度分别为：银耳多糖10-20g/l、琼脂糖3-9g/l，蛋白胨3-8g/l、酵母粉0.5-2.5g/l、磷酸铁0.01-0.02g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝7.2-7.6，在115-130℃灭菌10-30min地筛选培养基的平板上，平板在25-30℃环境下倒置培养24-60小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0029]
步骤二，选取凹陷较大同时菌落直径较大的菌落，点植到新鲜筛选培养基中培养24-60小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0030]
步骤三，重复步骤二步骤进行筛选，直到分离出纯化的菌株；并将筛选出的菌株放
入培养液中进行扩种培养；
[0031]
步骤四，将银耳置于灭菌锅中，65℃灭菌12-14小时，灭菌后的银耳冷却至常温，在所述灭菌后的银耳中加入步骤三中培养的菌种进行发酵处理，发酵3-4天，最后将发酵后的银耳晒干、提胶、酸处理、高温处理、粉碎过筛，得到所需的银耳寡糖。
[0032]
作为一种优选的实施方式，步骤一中取震荡后的培养液取一个以上稀释度涂布在筛选培养基的平板上，每个稀释度做三个以上平行样。
[0033]
作为一种优选的实施方式，步骤四中提胶工艺包括浸泡、煮胶及过滤；
[0034]
其中浸泡为用2.5％的盐酸浸泡5min，立即倒干酸化液用蒸馏水洗至中性；
[0035]
煮胶及过滤为将水洗后的银耳投入煮胶罐中进行煮胶，煮胶后加入助滤剂进行过滤提胶。
[0036]
作为一种优选的实施方式，步骤四中酸处理为将提胶得到的琼胶溶液，用浓度为0.5％的硫酸在60℃恒温锅中搅拌水解4-5h，并调ph至中性。
[0037]
作为一种优选的实施方式，步骤四中高温处理为将酸处理后得到的银耳寡糖溶液减压浓缩后，倒入130-140℃滚筒中进行干燥。
[0038]
作为一种优选的实施方式，步骤四中粉碎过筛为将从滚筒中出来的产品进行粉碎并过80目筛。
[0039]
下面通过几组实施例和对比例对采用本实施方式技术方案得到的银耳寡糖的有益效果进行进一步的说明。
[0040]
实施例一：
[0041]
本实施例中银耳寡糖的制备方法，具体步骤如下：
[0042]
步骤一，菌株筛选及培养，配制各组份及其浓度分别为：银耳多糖2g/l、蛋白胨5g/l、酵母粉1g/l、磷酸铁0.01g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝7.4，在121℃灭菌20min地培养液，在温度为28℃，震荡转速为180rpm条件下，选取腐烂银耳在培养液中震荡培养后，取震荡后的培养液稀释一个以上稀释度后涂布于各组份及其浓度分别为：银耳多糖15g/l、琼脂糖6g/l，蛋白胨5g/l、酵母粉1g/l、磷酸铁0.01g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝7.4，在121℃灭菌20min地筛选培养基的平板上，每个稀释度做三个以上平行样，平板在28℃环境下倒置培养48小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0043]
步骤二，选取凹陷较大同时菌落直径较大的菌落，点植到新鲜筛选培养基中培养48小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0044]
步骤三，重复步骤二步骤进行筛选，直到分离出纯化的菌株；并将筛选出的菌株放入培养液中进行扩种培养；
[0045]
步骤四，将银耳置于灭菌锅中，65℃灭菌13小时，灭菌后的银耳冷却至常温，在所述灭菌后的银耳中加入步骤三中培养的菌种进行发酵处理，发酵4天，最后将发酵后的银耳晒干；之后用2.5％的盐酸浸泡5min，立即倒干酸化液用蒸馏水洗至中性，将水洗后的银耳投入煮胶罐中进行煮胶，煮胶后加入助滤剂进行过滤提胶；将提胶得到的琼胶溶液，用浓度为0.5％的硫酸在60℃恒温锅中搅拌水解5h，并调ph至中性；将酸处理后得到的银耳寡糖溶液减压浓缩后，倒入130-140℃滚筒中进行干燥；将从滚筒中出来的产品进行粉碎并过80目筛，得到所需的银耳寡糖。
[0046]
实施例二：
[0047]
本实施例中银耳寡糖的制备方法，具体步骤如下：
[0048]
步骤一，菌株筛选及培养，配制各组份及其浓度分别为：银耳多糖1g/l、蛋白胨3g/l、酵母粉0.5g/l、磷酸铁0.01g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝7.4，在121℃灭菌20min地培养液，在温度为28℃，震荡转速为180rpm条件下，选取腐烂银耳在培养液中震荡培养后，取震荡后的培养液稀释一个以上稀释度后涂布于各组份及其浓度分别为：银耳多糖10g/l、琼脂糖6g/l，蛋白胨3g/l、酵母粉0.5g/l、磷酸铁0.01g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝7.4，在121℃灭菌20min地筛选培养基的平板上，每个稀释度做三个以上平行样，平板在28℃环境下倒置培养48小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0049]
步骤二，选取凹陷较大同时菌落直径较大的菌落，点植到新鲜筛选培养基中培养48小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0050]
步骤三，重复步骤二步骤进行筛选，直到分离出纯化的菌株；并将筛选出的菌株放入培养液中进行扩种培养；
[0051]
步骤四，将银耳置于灭菌锅中，65℃灭菌13小时，灭菌后的银耳冷却至常温，在所述灭菌后的银耳中加入步骤三中培养的菌种进行发酵处理，发酵4天，最后将发酵后的银耳晒干；之后用2.5％的盐酸浸泡5min，立即倒干酸化液用蒸馏水洗至中性，将水洗后的银耳投入煮胶罐中进行煮胶，煮胶后加入助滤剂进行过滤提胶；将提胶得到的琼胶溶液，用浓度为0.5％的硫酸在60℃恒温锅中搅拌水解5h，并调ph至中性；将酸处理后得到的银耳寡糖溶液减压浓缩后，倒入130-140℃滚筒中进行干燥；将从滚筒中出来的产品进行粉碎并过80目筛，得到所需的银耳寡糖。
[0052]
实施例三：
[0053]
本实施例中银耳寡糖的制备方法，具体步骤如下：
[0054]
步骤一，菌株筛选及培养，配制各组份及其浓度分别为：银耳多糖3g/l、蛋白胨8g/l、酵母粉2.5g/l、磷酸铁0.02g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝7.4，在121℃灭菌20min地培养液，在温度为28℃，震荡转速为180rpm条件下，选取腐烂银耳在培养液中震荡培养后，取震荡后的培养液稀释一个以上稀释度后涂布于各组份及其浓度分别为：银耳多糖20g/l、琼脂糖9g/l，蛋白胨8g/l、酵母粉2.5g/l、磷酸铁0.02g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝7.4，在121℃灭菌20min地筛选培养基的平板上，每个稀释度做三个以上平行样，平板在28℃环境下倒置培养48小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0055]
步骤二，选取凹陷较大同时菌落直径较大的菌落，点植到新鲜筛选培养基中培养48小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0056]
步骤三，重复步骤二步骤进行筛选，直到分离出纯化的菌株；并将筛选出的菌株放入培养液中进行扩种培养；
[0057]
步骤四，将银耳置于灭菌锅中，65℃灭菌13小时，灭菌后的银耳冷却至常温，在所述灭菌后的银耳中加入步骤三中培养的菌种进行发酵处理，发酵4天，最后将发酵后的银耳晒干；之后用2.5％的盐酸浸泡5min，立即倒干酸化液用蒸馏水洗至中性，将水洗后的银耳投入煮胶罐中进行煮胶，煮胶后加入助滤剂进行过滤提胶；将提胶得到的琼胶溶液，用浓度为0.5％的硫酸在60℃恒温锅中搅拌水解5h，并调ph至中性；将酸处理后得到的银耳寡糖溶液减压浓缩后，倒入130-140℃滚筒中进行干燥；将从滚筒中出来的产品进行粉碎并过80目筛，得到所需的银耳寡糖。
[0058]
实施例四：
[0059]
本实施例中银耳寡糖的制备方法，具体步骤如下：
[0060]
步骤一，菌株筛选及培养，配制各组份及其浓度分别为：银耳多糖2g/l、蛋白胨5g/l、酵母粉1g/l、磷酸铁0.01g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝7.4，在121℃灭菌20min地培养液，在温度为28℃，震荡转速为180rpm条件下，选取腐烂银耳在培养液中震荡培养后，取震荡后的培养液稀释一个以上稀释度后涂布于各组份及其浓度分别为：银耳多糖15g/l、琼脂糖6g/l，蛋白胨5g/l、酵母粉1g/l、磷酸铁0.01g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝7.4，在121℃灭菌20min地筛选培养基的平板上，每个稀释度做三个以上平行样，平板在28℃环境下倒置培养48小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0061]
步骤二，选取凹陷较大同时菌落直径较大的菌落，点植到新鲜筛选培养基中培养60小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0062]
步骤三，重复步骤二步骤进行筛选，直到分离出纯化的菌株；并将筛选出的菌株放入培养液中进行扩种培养；
[0063]
步骤四，将银耳置于灭菌锅中，65℃灭菌14小时，灭菌后的银耳冷却至常温，在所述灭菌后的银耳中加入步骤三中培养的菌种进行发酵处理，发酵3天，最后将发酵后的银耳晒干；之后用2.5％的盐酸浸泡5min，立即倒干酸化液用蒸馏水洗至中性，将水洗后的银耳投入煮胶罐中进行煮胶，煮胶后加入助滤剂进行过滤提胶；将提胶得到的琼胶溶液，用浓度为0.5％的硫酸在60℃恒温锅中搅拌水解5h，并调ph至中性；将酸处理后得到的银耳寡糖溶液减压浓缩后，倒入130-140℃滚筒中进行干燥；将从滚筒中出来的产品进行粉碎并过80目筛，得到所需的银耳寡糖。
[0064]
对比例一：
[0065]
本对比例中银耳寡糖的制备方法，具体步骤如下：
[0066]
步骤一，菌株筛选及培养，配制各组份及其浓度分别为：银耳多糖2g/l、蛋白胨5g/l、酵母粉1g/l、磷酸铁0.01g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝8.0，在121℃灭菌20min地培养液，在温度为28℃，震荡转速为180rpm条件下，选取腐烂银耳在培养液中震荡培养后，取震荡后的培养液稀释一个以上稀释度后涂布于各组份及其浓度分别为：银耳多糖15g/l、琼脂糖6g/l，蛋白胨5g/l、酵母粉1g/l、磷酸铁0.01g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝8.0，在121℃灭菌20min地筛选培养基的平板上，每个稀释度做三个以上平行样，平板在28℃环境下倒置培养48小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0067]
步骤二，选取凹陷较大同时菌落直径较大的菌落，点植到新鲜筛选培养基中培养48小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0068]
步骤三，重复步骤二步骤进行筛选，直到分离出纯化的菌株；并将筛选出的菌株放入培养液中进行扩种培养；
[0069]
步骤四，将银耳置于灭菌锅中，65℃灭菌13小时，灭菌后的银耳冷却至常温，在所述灭菌后的银耳中加入步骤三中培养的菌种进行发酵处理，发酵4天，最后将发酵后的银耳晒干；之后用2.5％的盐酸浸泡5min，立即倒干酸化液用蒸馏水洗至中性，将水洗后的银耳投入煮胶罐中进行煮胶，煮胶后加入助滤剂进行过滤提胶；将提胶得到的琼胶溶液，用浓度为0.5％的硫酸在60℃恒温锅中搅拌水解5h，并调ph至中性；将酸处理后得到的银耳寡糖溶液减压浓缩后，倒入130-140℃滚筒中进行干燥；将从滚筒中出来的产品进行粉碎并过80目
筛，得到所需的银耳寡糖。
[0070]
对比例二：
[0071]
本对比例中银耳寡糖的制备方法，具体步骤如下：
[0072]
步骤一，菌株筛选及培养，配制各组份及其浓度分别为：银耳多糖2g/l、蛋白胨5g/l、酵母粉1g/l、磷酸铁0.01g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝7.4，在121℃灭菌20min地培养液，在温度为28℃，震荡转速为180rpm条件下，选取腐烂银耳在培养液中震荡培养后，取震荡后的培养液稀释一个以上稀释度后涂布于各组份及其浓度分别为：银耳多糖15g/l、琼脂糖6g/l，蛋白胨5g/l、酵母粉1g/l、磷酸铁0.01g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝7.4，在121℃灭菌20min地筛选培养基的平板上，每个稀释度做三个以上平行样，平板在28℃环境下培养48小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0073]
步骤二，选取凹陷较大同时菌落直径较大的菌落，点植到新鲜筛选培养基中培养48小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0074]
步骤三，重复步骤二步骤进行筛选，直到分离出纯化的菌株；并将筛选出的菌株放入培养液中进行扩种培养；
[0075]
步骤四，将银耳置于灭菌锅中，65℃灭菌13小时，灭菌后的银耳冷却至常温，在所述灭菌后的银耳中加入步骤三中培养的菌种进行发酵处理，发酵4天，最后将发酵后的银耳晒干；之后用2.5％的盐酸浸泡5min，立即倒干酸化液用蒸馏水洗至中性，将水洗后的银耳投入煮胶罐中进行煮胶，煮胶后加入助滤剂进行过滤提胶；将提胶得到的琼胶溶液，用浓度为0.5％的硫酸在60℃恒温锅中搅拌水解5h，并调ph至中性；将酸处理后得到的银耳寡糖溶液减压浓缩后，倒入130-140℃滚筒中进行干燥；将从滚筒中出来的产品进行粉碎并过80目筛，得到所需的银耳寡糖。
[0076]
对比例三：
[0077]
本对比例中银耳寡糖的制备方法，具体步骤如下：
[0078]
步骤一，菌株筛选及培养，配制各组份及其浓度分别为：银耳多糖2g/l、蛋白胨5g/l、酵母粉1g/l、磷酸铁0.01g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝7.4，在121℃灭菌20min地培养液，在温度为28℃，震荡转速为180rpm条件下，选取腐烂银耳在培养液中震荡培养后，取震荡后的培养液稀释一个以上稀释度后涂布于各组份及其浓度分别为：银耳多糖15g/l、琼脂糖6g/l，蛋白胨5g/l、酵母粉1g/l、磷酸铁0.01g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝7.4，在121℃灭菌20min地筛选培养基的平板上，每个稀释度做三个以上平行样，平板在28℃环境下倒置培养48小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0079]
步骤二，选取凹陷较大同时菌落直径较大的菌落，点植到新鲜筛选培养基中培养48小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0080]
步骤三，重复步骤二步骤进行筛选，直到分离出纯化的菌株；并将筛选出的菌株放入培养液中进行扩种培养；
[0081]
步骤四，在银耳中加入步骤三中培养的菌种进行发酵处理，发酵4天，最后将发酵后的银耳晒干；之后用2.5％的盐酸浸泡5min，立即倒干酸化液用蒸馏水洗至中性，将水洗后的银耳投入煮胶罐中进行煮胶，煮胶后加入助滤剂进行过滤提胶；将提胶得到的琼胶溶液，用浓度为0.5％的硫酸在60℃恒温锅中搅拌水解5h，并调ph至中性；将酸处理后得到的银耳寡糖溶液减压浓缩后，倒入130-140℃滚筒中进行干燥；将从滚筒中出来的产品进行粉
碎并过80目筛，得到所需的银耳寡糖。
[0082]
对比例四：
[0083]
本对比例中银耳寡糖的制备方法，具体步骤如下：
[0084]
步骤一，菌株筛选及培养，配制各组份及其浓度分别为：银耳多糖2g/l、蛋白胨5g/l、酵母粉1g/l、磷酸铁0.01g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝7.4，在121℃灭菌20min地培养液，在温度为28℃，震荡转速为180rpm条件下，选取腐烂银耳在培养液中震荡培养后，取震荡后的培养液稀释一个以上稀释度后涂布于各组份及其浓度分别为：银耳多糖15g/l、琼脂糖6g/l，蛋白胨5g/l、酵母粉1g/l、磷酸铁0.01g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝7.4，在121℃灭菌20min地筛选培养基的平板上，每个稀释度做三个以上平行样，平板在28℃环境下倒置培养48小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0085]
步骤二，选取凹陷较大同时菌落直径较大的菌落，点植到新鲜筛选培养基中培养48小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0086]
步骤三，重复步骤二步骤进行筛选，直到分离出纯化的菌株；并将筛选出的菌株放入培养液中进行扩种培养；
[0087]
步骤四，将银耳置于灭菌锅中，65℃灭菌13小时，灭菌后的银耳冷却至常温，在所述灭菌后的银耳中加入步骤三中培养的菌种进行发酵处理，发酵4天，最后将发酵后的银耳晒干；之后用5.0％的盐酸浸泡5min，立即倒干酸化液用蒸馏水洗至中性，将水洗后的银耳投入煮胶罐中进行煮胶，煮胶后加入助滤剂进行过滤提胶；将提胶得到的琼胶溶液，用浓度为0.5％的硫酸在60℃恒温锅中搅拌水解5h，并调ph至中性；将酸处理后得到的银耳寡糖溶液减压浓缩后，倒入130-140℃滚筒中进行干燥；将从滚筒中出来的产品进行粉碎并过80目筛，得到所需的银耳寡糖。
[0088]
对比例五：
[0089]
本对比例中银耳寡糖的制备方法，具体步骤如下：
[0090]
步骤一，菌株筛选及培养，配制各组份及其浓度分别为：银耳多糖2g/l、蛋白胨5g/l、酵母粉1g/l、磷酸铁0.01g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝7.4，在121℃灭菌20min地培养液，在温度为28℃，震荡转速为180rpm条件下，选取腐烂银耳在培养液中震荡培养后，取震荡后的培养液稀释一个以上稀释度后涂布于各组份及其浓度分别为：银耳多糖15g/l、琼脂糖6g/l，蛋白胨5g/l、酵母粉1g/l、磷酸铁0.01g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝7.4，在121℃灭菌20min地筛选培养基的平板上，每个稀释度做三个以上平行样，平板在28℃环境下倒置培养48小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0091]
步骤二，选取凹陷较大同时菌落直径较大的菌落，点植到新鲜筛选培养基中培养48小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0092]
步骤三，重复步骤二步骤进行筛选，直到分离出纯化的菌株；并将筛选出的菌株放入培养液中进行扩种培养；
[0093]
步骤四，将银耳置于灭菌锅中，65℃灭菌13小时，灭菌后的银耳冷却至常温，在所述灭菌后的银耳中加入步骤三中培养的菌种进行发酵处理，发酵4天，最后将发酵后的银耳晒干；之后将水洗后的银耳投入煮胶罐中进行煮胶，煮胶后加入助滤剂进行过滤提胶；将提胶得到的琼胶溶液，用浓度为0.5％的硫酸在60℃恒温锅中搅拌水解5h，并调ph至中性；将酸处理后得到的银耳寡糖溶液减压浓缩后，倒入130-140℃滚筒中进行干燥；将从滚筒中出
来的产品进行粉碎并过80目筛，得到所需的银耳寡糖。
[0094]
对比例六：
[0095]
本对比例中银耳寡糖的制备方法，具体步骤如下：
[0096]
步骤一，菌株筛选及培养，配制各组份及其浓度分别为：银耳多糖2g/l、蛋白胨5g/l、酵母粉1g/l、磷酸铁0.01g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝7.4，在121℃灭菌20min地培养液，在温度为28℃，震荡转速为180rpm条件下，选取腐烂银耳在培养液中震荡培养后，取震荡后的培养液稀释一个以上稀释度后涂布于各组份及其浓度分别为：银耳多糖15g/l、琼脂糖6g/l，蛋白胨5g/l、酵母粉1g/l、磷酸铁0.01g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝7.4，在121℃灭菌20min地筛选培养基的平板上，每个稀释度做三个以上平行样，平板在28℃环境下倒置培养48小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0097]
步骤二，选取凹陷较大同时菌落直径较大的菌落，点植到新鲜筛选培养基中培养48小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0098]
步骤三，重复步骤二步骤进行筛选，直到分离出纯化的菌株；并将筛选出的菌株放入培养液中进行扩种培养；
[0099]
步骤四，将银耳置于灭菌锅中，65℃灭菌13小时，灭菌后的银耳冷却至常温，在所述灭菌后的银耳中加入步骤三中培养的菌种进行发酵处理，发酵4天，最后将发酵后的银耳晒干；之后用2.5％的盐酸浸泡5min，立即倒干酸化液用蒸馏水洗至中性，将水洗后的银耳投入煮胶罐中进行煮胶，煮胶后进行过滤提胶；将提胶得到的琼胶溶液，用浓度为0.5％的硫酸在60℃恒温锅中搅拌水解5h，并调ph至中性；将酸处理后得到的银耳寡糖溶液减压浓缩后，倒入130-140℃滚筒中进行干燥；将从滚筒中出来的产品进行粉碎并过80目筛，得到所需的银耳寡糖。
[0100]
对比例七：
[0101]
本对比例中银耳寡糖的制备方法，具体步骤如下：
[0102]
步骤一，菌株筛选及培养，配制各组份及其浓度分别为：银耳多糖2g/l、蛋白胨5g/l、酵母粉1g/l、磷酸铁0.01g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝7.4，在121℃灭菌20min地培养液，在温度为28℃，震荡转速为180rpm条件下，选取腐烂银耳在培养液中震荡培养后，取震荡后的培养液稀释一个以上稀释度后涂布于各组份及其浓度分别为：银耳多糖15g/l、琼脂糖6g/l，蛋白胨5g/l、酵母粉1g/l、磷酸铁0.01g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝7.4，在121℃灭菌20min地筛选培养基的平板上，每个稀释度做三个以上平行样，平板在28℃环境下倒置培养48小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0103]
步骤二，选取凹陷较大同时菌落直径较大的菌落，点植到新鲜筛选培养基中培养48小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0104]
步骤三，重复步骤二步骤进行筛选，直到分离出纯化的菌株；并将筛选出的菌株放入培养液中进行扩种培养；
[0105]
步骤四，将银耳置于灭菌锅中，65℃灭菌13小时，灭菌后的银耳冷却至常温，在所述灭菌后的银耳中加入步骤三中培养的菌种进行发酵处理，发酵4天，最后将发酵后的银耳晒干；之后用2.5％的盐酸浸泡5min，立即倒干酸化液用蒸馏水洗至中性，将水洗后的银耳投入煮胶罐中进行煮胶，煮胶后加入助滤剂进行过滤提胶；将提胶得到的琼胶溶液，用浓度为0.2％的硫酸在60℃恒温锅中搅拌水解5h，并调ph至中性；将酸处理后得到的银耳寡糖溶
液减压浓缩后，倒入130-140℃滚筒中进行干燥；将从滚筒中出来的产品进行粉碎并过80目筛，得到所需的银耳寡糖。
[0106]
对比例八：
[0107]
本对比例中银耳寡糖的制备方法，具体步骤如下：
[0108]
步骤一，菌株筛选及培养，配制各组份及其浓度分别为：银耳多糖2g/l、蛋白胨5g/l、酵母粉1g/l、磷酸铁0.01g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝7.4，在121℃灭菌20min地培养液，在温度为28℃，震荡转速为180rpm条件下，选取腐烂银耳在培养液中震荡培养后，取震荡后的培养液稀释一个以上稀释度后涂布于各组份及其浓度分别为：银耳多糖15g/l、琼脂糖6g/l，蛋白胨5g/l、酵母粉1g/l、磷酸铁0.01g/l，且溶剂为自来水，混合液ph＝7.4，在121℃灭菌20min地筛选培养基的平板上，每个稀释度做三个以上平行样，平板在28℃环境下倒置培养48小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0109]
步骤二，选取凹陷较大同时菌落直径较大的菌落，点植到新鲜筛选培养基中培养48小时，观察菌落形态以及形成的凹陷；
[0110]
步骤三，重复步骤二步骤进行筛选，直到分离出纯化的菌株；并将筛选出的菌株放入培养液中进行扩种培养；
[0111]
步骤四，将银耳置于灭菌锅中，65℃灭菌13小时，灭菌后的银耳冷却至常温，在所述灭菌后的银耳中加入步骤三中培养的菌种进行发酵处理，发酵4天，最后将发酵后的银耳晒干；之后用2.5％的盐酸浸泡5min，立即倒干酸化液用蒸馏水洗至中性，将水洗后的银耳投入煮胶罐中进行煮胶，煮胶后加入助滤剂进行过滤提胶；将提胶得到的琼胶溶液，用浓度为1.0％的硫酸在60℃恒温锅中搅拌水解5h，并调ph至中性；将酸处理后得到的银耳寡糖溶液减压浓缩后，倒入130-140℃滚筒中进行干燥；将从滚筒中出来的产品进行粉碎并过80目筛，得到所需的银耳寡糖。
[0112]
对上述四组实施例和八组对比例在工艺耗费、提取率、银耳寡糖聚合度和生产效益方面进行比较，具体数据如下：
[0113]
表1各组实施例和对比例的相关数据
[0114][0115]
工艺耗费＝材料费+人工成本+水电费；银耳寡糖提取率的测量方法为：称量发酵后并晒干的银耳记录质量为m
0
，将提胶得到的琼胶溶液干燥粉碎过筛，记录银耳寡糖粉为m
1
，银耳寡糖提取率＝m
1
/m
0
*100％、银耳寡糖聚合度采用质谱与核磁共振仪器测定、生产效益＝银耳寡糖提取量-工艺耗费。
[0116]
由表1可知，通过采用腐烂银耳对菌株进行筛选及培养，将菌种种入灭菌的银耳进行发酵处理，最后将发酵后的银耳晒干、提胶、酸处理、高温处理、粉碎过筛的工艺，实现了高效、可控降解银耳多糖；通过将种菌后地筛选培养基的平板在28℃环境下进行倒置培养，能够有效的抑制好氧菌的生长，避免杂菌地干扰以及对之后地发酵处理的影响，有助于对银耳进行降解；对新鲜的银耳进行灭菌处理，能够避免在发酵工序中引入杂菌导致降解菌的生长受到抑制，进而影响银耳的降解导致极大的提高了银耳寡糖的聚合度；在提胶工序中，提高盐酸浓度，反而降低了银耳寡糖的提取率，影响生产效益，而不进行浸泡处理，则会导致银耳寡糖聚合度提高；通过添加食品级助滤剂，能够有效的减少灰分，避免对产品的污染；酸处理时，银耳寡糖提取率随着硫酸浓度提高而提升，但当硫酸浓度大于0.5％时，对银耳寡糖提取率影响不大。
[0117]
以上所述仅为本发明的优选实施方式而已，并不用于限制本发明，对于本领域的
技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

起点商标作为专业知识产权交易平台，可以帮助大家解决很多问题，如果大家想要了解更多知产交易信息请点击 【在线咨询】或添加微信 【19522093243】与客服一对一沟通，为大家解决相关问题。

此文章来源于网络,如有侵权,请联系删除