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2021-02-02 14:02:21|
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起点商标网 专利名称：旋光活性4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰基苯基)吡唑并[1，5-α]-1，3，5-三嗪盐及 ...的制作方法
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本发明涉及旋光活性4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪的碱土金属盐，以及制备该旋光活性化合物及其盐的方法。
众所周知，4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪是有用的药物化合物。有人推荐了将这些化合物进行旋光拆分的方法，即采用旋光活性柱的色谱技术。这一方法中，为了淋洗出1克所需化合物，需要大量体积即约1，300至1，600升的溶剂。因此，要以生产规模将该化合物的旋光活性形式进行馏分分离，涉及许多技术困难，所以，需要大量时间和成本。据本发明人所知，除了上面提到的色谱技术以外，没有其它有关旋光拆分方法的报导。
已经知道，对于几乎不溶解的化合物，可以通过将其转变为一种碱金属盐或其它盐便可增加其溶解度，但对上述三嗪化合物的外消旋体，几乎不能通过将其转变为碱金属或碱土金属盐来使其溶解。换句话说，很难将此化合物加工成为(例如)可注射用溶液，这样就严重地限制了它在药物方面的应用。
本发明的一个目的是提供一种以低成本和短时间来生产和分离一种旋光活性三嗪化合物的新方法，具体地说，就是用不对称合成法制备该化合物。
本发明的另一个目的是提供上述旋光活性三嗪化合物的盐，它克服了上述加工成药物产品时的困难。
由于本申请人在这一技术领域进行刻苦勤奋的研究，结果他们成功地完成了后面所述的不对称合成方法，并且发现所得旋光活性化合物的某些盐类表现良好的溶解性能，从关于通常外消旋化合物的盐的知识，是无法预料到这种溶解性能的。
因此，按照本发明，提供了下式所示的旋光活性的4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪化合物的碱金属盐或碱土金属盐，
式中R为低级烷氧基。
根据本发明，进一步提供了生产上式(1)所示旋光活性形式的三嗪化合物或上述旋光活性化合物的碱金属盐或碱土金属盐的方法，该方法包括在一种下式(3)所示的旋光活性的环状化合物存在下，使式(2)所示4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基硫代苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪与一种含卤氧化剂反应，并且或者将反应物用水或金属氢氧化物处理，或者将反应物加热处理，如果需要的话，接着使反应产物与碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物反应而生成盐。
式中R为低级烷氧基，
式中R′为低级烷基，苯基或苯基低级烷基。
本发明进一步涉及生产旋光活性的4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪化合物或该化合物的碱金属盐或碱土金属盐的方法，该方法包括用只由一种旋光活性形式的上述三嗪化物组成的成晶种接种到三嗪化合物(1)的外消旋混合物的溶液中，以引起相应旋光形式结晶，并分离所得晶体，如果需要，接着用碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物处理分离出的晶体，得到盐。
在上述各结构式中，R′表示的低级烷基包括甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，叔丁基，戊基，异戊基，2，2-二甲基丙基，1-甲基丁基，己基，4-甲基戊基，3-甲基戊基，2-甲基戊基，1-甲基戊基，3，3-二甲基丁基，2，2-二甲基丁基和1，3-二甲基丁基等。苯基-低级烷基包括苄基，α-苯乙基，β-苯乙基，1-苯基丙基，2-苯基丙基，3-苯基丙基，1-甲基-1-苯基乙基，1-甲基-2-苯基乙基，1-苯基丁基，2-苯基丁基，3-苯基丁基，4-苯基丁基，1-甲基-1-苯基丙基，1-甲基-2-苯基丙基，2-甲基-2-苯基丙基，1-甲基-3-苯基丙基，1-苯基戊基，2-苯基戊基，3-苯基戊基，4-苯基戊基，5-苯基戊基，1-甲基-1-苯基丁基，1，2-二甲基-1-苯基丙基，1-甲基-2-苯基丁基，1，2-二甲基-1-苯基丙基，1-甲基-2-苯基丁基，1-甲基-3-苯基丁基，1-甲基-4-苯基丁基，2-甲基-2-苯基丁基，2-甲基-3-苯基丁基，2-甲基-4-苯基丁基，3-甲基-3-苯基丁基，1-苯基己基，2-苯基己基，3-苯基己基，4-苯基己基，5-苯基己基，6-苯基己基，1-甲基-1-苯基戊基，1-乙基-1-苯基丁基，1-甲基-2-苯基戊基，1-甲基-3-苯基戊基，1-甲基-4-苯基戊基，1-甲基-5-苯基戊基，2-甲基-2-苯基戊基，3-甲基-2-苯基戊基，3-乙基-2-苯基戊基，和4-甲基-4-苯基戊基等。
R表示的低级烷氧基包括甲氧基，乙氧基，丙氧基，异丙氧基，丁氧基，叔丁氧基，戊氧基，异戊氧基，2，2-二甲基丙氧基，1-甲基丁氧基，己氧基，4-甲基戊氧基，3-甲基戊氧基，2-甲基戊氧基，1-甲基戊氧基，3，3-二甲基丁氧基，2，2-二甲基丁氧基，和1，3-二甲基丁氧基等。
根据本发明生产一种旋光活性三嗪化合物(1)的方法(不对称合成法)可用下面给出的反应式表示。它有两个反应阶段组成第一阶段包括在一种通式(3)所示的旋光活性环状化合物存在下使4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基硫代苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪[化合物(2)]与含卤氧化剂反应;第二阶段包括或者使第一反应阶段得到的反应混合物与水或一种金属氢氧化物反应，或者将该混合物加热处理。
反应式
式中R和R′分别如前面所限定。
上述反应式所示的第一反应阶段使用的环状化合物(3)是一种醇衍生物，并且该醇衍生物是一种旋光活性的二级醇。该醇衍生物上的取代基R′应在醇羟基(OH)的α-位上，它可以选自前面提到的特定基团。但是，取代基紧密度越高，不对称产率改进也越大。因此，例如，当把上述取代基R′选择为一个低级烷基时，则支链基团就优于直链基团。上述醇衍生物的环状核是4-至8-员环，最好是5-至6-员环，并且可以是双环结构或稠环结构。这一环状核可以是饱和的或不饱和的，只含有碳原子或甚至是符合上面定义的含杂原子的环。所述醇衍生物的具体实例有(-)-薄荷醇，(+)-薄荷醇，(-)-8-苯基薄荷醇，(+)-8-苯基薄荷醇，(+)-2，3-二氢-2-叔丁基-1-茚醇，(-)-冰片，[(1S)-内向]-(-)-冰片，(1S，2S)-(+)-1-羟基-2-甲基-3-环戊烯，(1S，2S)-(+)-1-羟基-2-甲基环己烷，(1S，2R)-(+)-1-羟基-2-苯基环己烷，(1S，2R)-(+)-1-羟基-2-苯基环戊烷和(1S，2R)-(+)-3-羟基-2-苯基四氢呋喃。在这些醇衍生物当中，旋光活性薄荷醇从成本角度考虑是比较好的。
在上述化合物(2)和(3)之间的反应可如下进行，将上述两种化合物和一个有机碱溶解在适当溶剂中，将溶液冷却，加入一种含卤氧化剂，如次氯酸叔丁酯，1-氯苯并三唑，N-氯琥珀酰亚胺等，使其和溶液起反应。
普通惰性溶剂，例如通常的N，N-二甲基甲酰胺，乙腈，二氯甲烷等，可以单独地或结合起来使用。有机碱例如通常可以是吡啶或三乙胺。虽然上述化合物的比率不是很严格的，但相对于化合物(2)来说，化合物(3)的比率可以是约20-0.8摩尔当量。较好是约10-1摩尔当量，而有机碱的比率可以是约1-3摩尔当量，较好是约1-1.5摩尔当量。顺便提及，上述有机碱用来防止反应体系的pH朝酸性方向变化，并且加入有机碱可防止生成最终产物的外消旋体，即是说防止不对称合成产率降低。
上述化合物(2)、化合物(3)和有机碱的溶液通常冷却到约-40℃至-10℃，较好是约-30℃至-20℃。如果溶液度太高，最终产物的不对称产率会降低，这是不希望的。
如次氯酸叔丁酯等试剂的加入，其目的是为了将化合物(2)转变为锍盐，而它与化合物(2)的比例通常是约1-2摩尔当量，较好是1-1.3摩尔当量。
至于接在上述第一阶段反应之后的第二阶段反应，可以采用下述两种方法A和B中的任一种。
在这两种方法之一(方法A)中，将第一阶段得到的反应混合物在不超过0℃的温度下，最好在约-30℃～-25℃之间，边冷却边搅拌约30分钟至3小时，然后，加入水或金属氢氧化物水溶液。用有机酸将水层调至弱酸性，得到所需化合物。作为在这一方法中使用的金属氢氧化物的实例，可以提及的有碱金属氢氧化物，如氢氧化钠，氢氧化钾等，和碱土金属氢氧化物，如氢氧化钙，氢氧化镁等。上述金属氢氧化物在使用时其浓度通常为约5～30重量百分，较好是绷8-25重量百分。反应温度可以为约-40℃至+20℃，较好是约-30℃至0℃。
反应完成后，往反应混合物中加入水，使产物化合物转移到水层，然后加入有机酸，如乙酸，柠檬酸，酒石酸等，得到所希望的旋光活性的4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪。
实施第二阶段反应的另一方法(方法B)包括将第一阶段得到的反应混合物在约50℃加热约2小时，然后加8-25重量百分的碱水溶液，使产品化合物转移到水层，再加有机酸于该水层中，使之变成弱酸性，从而得到所需化合物。
至于在此方法中所用的有机酸的实例，可以参照前面所述的酸。具体地说，本方法得到的是与上述方法A可得到的化合物相对的另一个对映体。
本发明的发明人发现，4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪的两种对映体的50∶50混合物形成一种外消旋混合物，并且还发现，当将只有该旋光活性化合物(对映体)中的一种组成的籽晶加到这一混合物中进行重结晶时，只有对应于构成籽晶的那种对映体的旋光活性化合物选择性地结晶出来，这样就允许用非常方便地方式、并且以高纯度和高产率，选择性地回收特定的旋光活性化合物。因此，本发明也提供了这样一个分离旋光活性化合物的新方法。
至于本发明中选择性回收旋光活性化合物方法的起始原料，可以采用该外消旋的4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡啶并[1，5-a-]-1，3，5-三嗪在适当溶剂中的溶液。虽然氯仿-甲醇可以作为上述溶剂的典型实例，但也可使用各种其它重结晶溶剂，如二氯乙烷-甲醇，二氯乙烷-乙醇，N，N-二甲基甲酰胺-水，乙酸乙酯-甲醇，等等。至于用来接种上述溶液的籽晶，按照本发明的不对称合成所已得到的任何旋光活性化合物的晶体都可以便利地使用，但也不是唯一的选择。因此，用常规柱色谱方法分离的旋光活性化合物晶体也可以使用。这种接种用的籽晶的量可以为外消旋混合物量的约1/2000至1/100，所生成合适的晶体量通常至多约为外消旋混合物总量的30%。
用这种方式，可以选择性结晶出所需旋光活性化合物。
由上述方法生产的旋光活性化合物可通过常规方法进一步纯化。
由此得到的4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪可通过与适当的碱进一步反应而转变为可药用盐。上述盐包括碱金属盐，如锂盐，钠盐，钾盐等，和碱土金属盐，如铍盐，镁盐，钙盐等。
与相应的外消旋化合物的盐不同，旋光活性化合物的盐表现出明显更高的溶解度，这种溶解度远远超出根据关于外消旋化合物的知识所能想象得到的。因此，发明人进行的实验揭示出，例如，上述外消旋化合物的钠盐在水中的溶解度只不过是约0.2%重量，而旋光活性化合物的钠盐的溶解度高达50%重量或更高。至于在生理盐水中的溶解度，外消旋化合物的钠盐的溶解度只不过是约0.08%重量，而旋光活性化合物钠盐的溶解度高达50%重量或更高。因此，根据本发明，可以提供溶解度非常高的旋光活性化合物的钠盐。
上述盐均可以通过使上面得到的旋光活性化合物与适当的碱反应来制得。作为成盐试剂，所用的碱最好是金属氢氧化物，例如碱金属或碱土金属氢氧化物，当然同样也可使用上述金属的碳酸盐，碳酸氢盐或醇盐。成盐反应可通过常规方式进行，所生成的盐可以通过类似于游离化合物的分离、纯化方法来进行分离和纯化。
旋光活性的4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪及通过本发明方法可得到的盐都具有黄嘌呤氧化酶抑制活性，并且是有价值的药物试剂，例如治痛风的(gout suppression)和其它药物。在药物应用中，上述旋光活性化合物的盐可以比相应的游离化合物更容易、更有利地加工成各种剂量形式，例如浓的注射液，特别是因为盐的溶解度较高。
本发明进一步涉及一种药物组合物，其中含有至少一种上述旋光活性4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a-]-1，3，5-三嗪或其盐作为活性成分，该活性成分与对人类和其它动物来说无毒的药用载体相混合。
所述载体的实例是通常的稀释剂和赋形剂，例如填料，扩充剂，粘合剂，润湿剂，崩解剂，表面活性剂和润滑剂。根据所要制备的单位剂量形式来选择载体。
根据治疗目的选择剂量形式。这类剂量形式的典型实例有片剂，丸剂，粉剂，溶液，悬浮液，乳液，粒剂，胶囊，栓剂，注射(溶液，悬浮液等)及类似剂型。用以使药物制剂成型为片剂的载体是乳糖，精制糖，氯化钠，葡萄糖，尿素，淀粉，碳酸钙，高岭土，结晶纤维素，硅酸，磷酸钾等赋形剂;水，乙醇，丙醇，单糖浆，葡萄糖溶液，淀粉溶液，明胶溶液，羧甲基纤维素，羟丙基纤维素，甲基纤维素，聚乙烯吡咯烷酮等粘合剂;羧甲基纤维素钠，羧甲基纤维素钙，低取代羟丙基纤维素，干淀粉，藻酸钠，琼脂粉，Laminaran粉，碳酸氢钠，碳酸钙等崩解剂;聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯，月桂基硫酸钠，单硬脂酸甘油酯等类似表面活性剂;精制糖，硬脂精，可可脂，氢化油等崩解抑制剂;季铵碱，月桂基硫酸钠等吸收促进剂;甘油，淀粉及类似润湿剂;淀粉，乳糖，高岭，膨润土，胶态氧化硅及类似吸收剂;精制滑石，硬脂酸盐，硼酸粉，聚(乙二醇)等润滑剂，等等。如果需要，这类片剂可进一步用通常的包衣组合物进行包衣，得到包衣片剂，例如糖包衣片剂，明胶包衣片，肠溶片剂，薄膜包衣片剂，或双层片剂，多层片剂等。用于将组合物加工成丸剂的载体有葡萄糖，乳糖，淀粉，可可脂，氢化植物油，高岭土，滑石等类似赋形剂;阿拉伯胶粉，tragacanth胶粉，明胶，乙醇和类似粘合剂;Laminaran，琼脂粉和类似崩解剂等等。
将组合物加工成栓剂的载体有聚乙二醇，可可脂，高级醇，高级醇的酯，明胶，半合成甘油酯等。胶囊通常是由常规方法制成的，例如通过将本发明化合物作为活性成分与上面举例说明的载体相混合，并将此混合物封在硬明胶胶囊、软明胶胶囊或类似物中。在加工注射溶液、悬浮液和乳液时，要将其消毒，并且最好使其与血液等渗。用作此目的的稀释剂例如是水，乙醇，聚乙二醇，丙二醇，乙氧基化的异硬脂基醇，聚氧乙烯化异硬脂基醇，聚氧乙烯化脱水山梨醇脂肪酸酯及其类似物。在制备等渗溶液中，氯化钠，葡萄糖或甘油可按所需量加入，以使该溶液等渗。本发明药物组合物可以含有通常的增溶剂，缓冲剂，增滑剂和其它添加剂。需要时，本发明制剂可进一步含有调色剂，防腐剂，调味剂，增甜剂和其它药物。在模制法制软膏时，包括糊剂，乳剂，胶状制剂等，所用稀释剂是白丸士林，石蜡油，甘油，纤维素衍生物，聚乙二醇，硅油，膨润土，等等。
活性化合物在这些药物组合物中的比例是不严格的，可选自很宽的范围，但通常推荐在药物组合物中加入5-300毫克。特别是因为本发明的旋光活性化合物的盐很易溶解，可以容易地将其制成均匀溶液，例如注射液，其中可含有该活性成分的浓度为约0.1-10%。
对于上述药物组合物的给药方法，实际上没有什么限制，可以根据剂量形式，病人年龄，性别和其它特征，病情等情况来选择合适的治疗方案。例如，片剂，丸剂，溶液，悬浮液，乳液，粒剂和胶囊经口服给药，注射溶液可通过静脉与普通替代流体或输送液如葡萄糖，氨基酸和其它输送液混合给药。如果需要，注射液可经肌肉内，经真皮内，经皮下或经腹膜内给药，栓剂可经直肠内给药。
剂量随着给药途径，病人年龄、性别和其它特征，病情严重程度和其它情况变化。然而，通常本发明活性化合物的剂量可在约0.5-20毫克/千克体重/天范围内变化，并且可按每天1-4个分剂量给药。
生产本发明旋光活性化合物和盐的下述实施例以及下述工作实施例是要用来更详细地说明本发明。
实施例1在600毫升N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中溶解60克4-羟基-8-(3-甲氧基-4-苯基硫代苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪，110克1-(-)-薄荷醇和17.2毫升吡啶，将混合物冷却至-25℃～-30℃。然后，滴入21.2克次氯酸叔丁酯并将混合物在-25℃～-30℃搅拌1小时。接着750毫升20%氢氧化钠水溶液在-30℃～-10℃下加入，再加入2升水。将反应混合物用乙酸乙酯洗涤，水层用500克柠檬酸调至弱酸性，使发生结晶。过滤收集晶体，用水漂洗，再用乙醇洗涤，空气干燥。得到57克4-羟基-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪结晶粗品。该产品的旋光度是[α]20D＝-75°(C＝0.5，DMF)。
将上述晶体用氯仿-甲醇(1∶1)重结晶三次，然后与乙酸乙酯一起加热回流30分钟。冷却后，过滤收集分离出的结晶。得到16克(-)-4-羟基-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪(产率25.5%，光学纯度≥99%)。
该产品旋光度是[α]20D＝-174°(c＝0.5，DMF)。
熔点为265-268℃(分解)，元素分析(C18H14O3N4S，摩尔重366.40)如下计算值C，59.00;H，3.85;N，15.29测定值C，58.74;H，3.55;N，14.99按上述同样方法，但是用d-(+)-薄荷醇代替1-(-)-薄荷醇，得15克(+)-4-羟基-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪(产率24%，光学纯度≥99%)。
旋光度，[α]20D＝+174°(C＝0.5，DMF)熔点265-268℃(分解)元素分析(C18H14O3N4S1，摩尔重366.40)计算值C，59.00;H，3.85;N，15.29测定值C，58.74;H，3.64;N，14.93实施例2在由50毫升乙醇、10毫升水和145毫克氢氧化钠制得的混合溶液中在搅拌下溶解1.3克(-)-4-羟基-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪，然后减压蒸出溶剂。加入100毫升乙酸乙酯后，将混合物回流30分钟。冷却后，将晶体过滤回收并干燥，得(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水合物。
旋光度，[α]20D＝-245°(C＝0.5，DMF)熔点228-235℃(分解)按照上述同样方法，用(+)-4-羟基-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪，得到(+)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水化物。
旋光度，[α]20D＝+242°(C＝0.5，DMF)熔点228-235℃(分解)实施例3按照实施例2的同样方法，但是用氢氧化锂、氢氧化钾和氢氧化钙水溶液分别代替氢氧化钠水溶液，得到(-)和(+)形式的4-羟基-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪的锂、钾和钙盐。
所有这些盐在220℃或更高温度下都分解。
实施例4在氯仿和甲醇的40毫升1∶1混合物中，于回流下溶入1克(±)-4-羟基-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪并加入5毫克实施例1得到的旋光纯的(-)-4-羟基-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪作为籽晶。使体系在室温下冷却5小时，过滤收集所产生的晶体(220毫克)。
旋光度，[α]20D＝-45°(C＝0.5，DMF)将上述晶体用氯仿-甲醇(1∶1)重结晶4次，得到44毫克(-)-4-羟基-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪，其旋光度为[α]20D＝-174°(C＝0.5，DMF)对本发明的旋光活性三嗪的盐进行了下述试验。
试验实施例1溶解度试验用下面所列化合物(在实施例2和3中得到的旋光活性化合物的盐和作为对照物用的相应的外消旋化合物的盐)作为试验样品。
样品Ⅰ(外消旋体)(±)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐-水合物。
样品Ⅱ[(-)-形式](-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水合物样品Ⅲ[(+)-形式](+)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水合物样品Ⅳ[(-)-形式]双[(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟根(olste)]钙盐二水合物样品Ⅴ[(+)-形式]双[(+)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a1，3，5-三嗪-4-羟根]钙盐二水合物按下述方法用水(注射用蒸馏水)和生理盐水作溶剂对上述样品分别做溶解度试验。
将各样品0.1克放入10毫升试管中，然后加入适量的溶剂(水或生理盐水，对于外消旋化合物加0.5毫升，对旋光活性化合物加0.1毫升)。用培养器(Taiyo Kagaku Kogyo，M-100)，将试管在25℃摇动。4小时后，将内容物用0.45μM过滤器过滤，滤液用流动相稀释100倍，制备试验溶液。分别地，精确称出40.0毫克样品Ⅰ(外消旋体)，加水补足为准确的200毫升。然后，准确地取出1毫升该溶液，并用流动相稀释到准确的20毫升(10μg/毫升)，作为标准溶液。用上述试验溶液和核标准溶液，分别测定这些样品的溶解度。
装置[HPLC(系统A)]泵510(Waters)检测器UVIDEC-100-V(日本Bunko)
数据处理器Data Module 741(Waters)自动取样器As-8000(Tohso)条件柱TSKgel ODS-120T(4.6毫米直径×150毫米)流动相乙腈-磷酸盐缓冲液(35∶65)流速1.0毫升/分波长323毫微米注入量20微升结果示于下面表1表1试验样品 水 生理盐水样品Ⅰ 0.221%重量 0.0083%重量样品Ⅱ ≥50%重量 ≥50%重量样品Ⅲ ≥50%重量 ≥50%重量样品Ⅳ ≥50%重量 ≥50%重量样品Ⅴ ≥50%重量 ≥50%重量对于样品Ⅱ至Ⅴ，0.1克的物质完全溶解在0.1毫升溶剂中。因此，将结果表达为≥50%重量。
从表1中可清楚地看出，两种异构体的盐在水和生理盐水中远比相应的外消旋化合物的盐容易溶解。
试验实施例2黄嘌呤脱氢酶抑制活性试验该试验是用雄性ICR大鼠(6周龄，体重28.0-40.6克)进行的。将实施例2中得到的本发明化合物分别悬浮在0.5%羧甲基纤维素(CMC)溶液中，将悬浮液按10毫升/千克(试验组1和试验组2)量口服给药。在各试验组中使用的本发明化合物和其剂量表示如下。
试验组1实施例2中得到的旋光活性三嗪化合物[(-)-形式]的钠盐，5毫克/千克试验组2实施例2中得到的旋光活性三嗪化合物[(+)-形式]的钠盐，5毫克/千克。
还准备了一个对照组，仅用0.5%CMC溶液处理(对照组)。
在给药后4和8小时后，将各组的动物杀死，切除肝脏，用下述通用方法试验黄嘌呤脱氢酶在肝脏中的活性。
肝匀浆用100 mM Tris-HCl缓冲液(以后只称为缓冲液)稀释5倍。将50微升该稀释液、25微升NAD+缓冲稀释液(20mM)和25微升1，4，5，6-四氢-4，6-二氧-1，3，5-三嗪-2-羧酸钾缓冲溶液加到300微升缓冲液中(在总的溶液中NAD+和1，4，5，6-四氢-4，6-二氧-1，3，5-三嗪-2-羧酸钾的浓度各为1mM)，将混合物在25℃培养5分钟。将培养液离心分离，将上清液中的尿酸用高效液相色谱法评估。这一数值作为处理前基线。
另一方面，往用上述同样方法得到的预培养液中加入100微升黄呤的缓冲溶液(1mM)，将混合物在25℃培养5分钟。用50微升6M高氯酸使反应停止，将反应混合物按上述同样方法离心分离。用磷酸二氢钠水溶液中和上清液，通过HPLC分析生成的尿酸。这一数值作为处理后的值。
从尿酸的上述处理后数值和处理前基线之间的差别可以测定出黄嘌呤脱氢酶的活性。
结果列于表2。
表2组别 4小时后分离的肝脏 8小时后分离的肝脏中的酶活性(mU/g) 中的酶活性(mU/g)
试验组1 7±4＊＊(n＝7) 17±7＊＊(n＝7)试验组2 33±16＊＊(n＝7) 22±10＊＊(n＝7)对照组 152±21(n＝8) 137±31(n＝8)表中，符号＊＊表示与对照组相比P＜0.01。
下面的制剂实施例说明用本发明化合物制备某些药物组合物的方法。
制剂实施例1(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰 100克苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水合物Avicel[商标，Asahi化学工业公司制造 40克玉米淀粉 30克硬脂酸镁 2克TC-5[商标，Shin-Etsu化学公司 10克制造，羟丙基甲基纤维素]聚乙二醇-6000 3克蓖麻油 40克乙醇 40克将(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水合物，Avicel，玉米淀粉和硬脂酸镁一起研磨并用R 10毫米药丸冲床压模。得到的药片用TC-5、聚乙二醇6000，蓖麻油和乙醇组成的薄膜包衣组合物包衣，得到具有上述组成的薄膜包衣药片。
制剂实施例2和3采用制剂实施例1中的同样步骤，但是分别用(+)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水合物和双[(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟根]钙盐二水合物代替(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水合物，得到薄膜包衣的片剂。
制剂实施例4(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水合物 100克结晶纤维素[J.P.] 104克玉米淀粉[J.P.] 92克滑石[J.P.] 2克硬脂酸镁[J.P] 2克按照上面的配方，制得各含100克(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐作为活性成分的硬明胶胶囊。
将各成分磨细，各种粉末均匀混合在一起，装在口服用的明胶胶囊中。
制剂实施例5(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰 350毫克苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水合物0.1当量氢氧化钠 调节pH至11.5注射用蒸馏水 使总量达25毫升往含23毫升注射用蒸馏水的氢氧化钠溶液中加入(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水合物，并用0.1当量氢氧化钠水溶液调至pH11.5。该溶液用注射用蒸馏水稀释到25毫升，用滤菌器过滤并冻干。将冻干物无菌密封于小瓶中，提供一种干粉制剂，以便临时配制使用。
该制剂在临给病人用药以前溶解在注射用蒸馏水中。
制剂实施例6-10按照制剂实施例5的同样步骤，但用(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钾盐二水合物(制剂实施例6)，双[(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5，-a]-1，3，5-三嗪-4-羟根]钙盐二水合物(制剂实施例7)，双[(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5，-a]-1，3，5-三嗪-4-羟根]镁盐二水合物(制剂实施例8)，(+)8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水合物(制剂实施例9)，和双[(+)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5，-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钙盐二水合物(制剂实施例10)分别代替(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5，-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水合物，制得临时配制用的冻干粉末。
权利要求
1.选自下式所示的旋光活性化合物4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪的碱金属盐或碱土金属盐的一种盐，
式中R是低级烷氧基。
2.下式所示的旋光活性化合物4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪或者其碱金属盐或碱土金属盐的制备方法，
式中R是低级烷氧基，该方法包括使下式所示的4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基硫代苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪
式中R是低级烷氧基，与含卤氧化剂在旋光活性环状化合物(用下面通式表示)存在下反应，
其中R′是低级烷基，苯基或苯基-低级烷基;并且，或者用水或金属氢氧化物处理反应产物，或者将反应产物进行加热处理;如果需要，再使该产物与一种碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物反应，以制得一种盐。
3.4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪旋光活性体或其碱金属盐或碱土金属盐的制备方法，该方法包括用只有上述三嗪化合物的一种旋光活性体组成的籽晶接种到4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪的外消旋混合物的溶液中，使得相对应的旋光活性体结晶出来，并且分离所生成的晶体，如果需要，再用碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物处理上述晶体，得到一种盐。
4.具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的药物组合物，包括有效量的权利要求1所述的盐和药物上可接受的无毒载体。
5.权利要求4所述的药物组合物，是一种治痛风剂。
6.权利要求4或5所述的药物组合物，是一种注射溶液。
7.治疗痛风病的方法，包括给患者使用有效量的权利要求1所述的盐。
全文摘要
本发明涉及4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并(1，5-a)-1，3，5-三嗪旋光活性体的碱金属盐或碱土金属盐，生产上述旋光活性化合物或其盐的方法，以及一种药物组合物，如治痛风剂，其中包括有效量的上述盐和药物上可接受的无毒载体。
文档编号C07D487/04GK1049664SQ90107308
公开日1991年3月6日 申请日期1990年8月24日 优先权日1989年8月25日
发明者桥本谨治, 稻井正敏 申请人:株式会社大制药工场
技术领域：
本发明涉及旋光活性4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪的碱土金属盐，以及制备该旋光活性化合物及其盐的方法。
众所周知，4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪是有用的药物化合物。有人推荐了将这些化合物进行旋光拆分的方法，即采用旋光活性柱的色谱技术。这一方法中，为了淋洗出1克所需化合物，需要大量体积即约1，300至1，600升的溶剂。因此，要以生产规模将该化合物的旋光活性形式进行馏分分离，涉及许多技术困难，所以，需要大量时间和成本。据本发明人所知，除了上面提到的色谱技术以外，没有其它有关旋光拆分方法的报导。
已经知道，对于几乎不溶解的化合物，可以通过将其转变为一种碱金属盐或其它盐便可增加其溶解度，但对上述三嗪化合物的外消旋体，几乎不能通过将其转变为碱金属或碱土金属盐来使其溶解。换句话说，很难将此化合物加工成为(例如)可注射用溶液，这样就严重地限制了它在药物方面的应用。
本发明的一个目的是提供一种以低成本和短时间来生产和分离一种旋光活性三嗪化合物的新方法，具体地说，就是用不对称合成法制备该化合物。
本发明的另一个目的是提供上述旋光活性三嗪化合物的盐，它克服了上述加工成药物产品时的困难。
由于本申请人在这一技术领域进行刻苦勤奋的研究，结果他们成功地完成了后面所述的不对称合成方法，并且发现所得旋光活性化合物的某些盐类表现良好的溶解性能，从关于通常外消旋化合物的盐的知识，是无法预料到这种溶解性能的。
因此，按照本发明，提供了下式所示的旋光活性的4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪化合物的碱金属盐或碱土金属盐，
式中R为低级烷氧基。
根据本发明，进一步提供了生产上式(1)所示旋光活性形式的三嗪化合物或上述旋光活性化合物的碱金属盐或碱土金属盐的方法，该方法包括在一种下式(3)所示的旋光活性的环状化合物存在下，使式(2)所示4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基硫代苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪与一种含卤氧化剂反应，并且或者将反应物用水或金属氢氧化物处理，或者将反应物加热处理，如果需要的话，接着使反应产物与碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物反应而生成盐。
式中R为低级烷氧基，
式中R′为低级烷基，苯基或苯基低级烷基。
本发明进一步涉及生产旋光活性的4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪化合物或该化合物的碱金属盐或碱土金属盐的方法，该方法包括用只由一种旋光活性形式的上述三嗪化物组成的成晶种接种到三嗪化合物(1)的外消旋混合物的溶液中，以引起相应旋光形式结晶，并分离所得晶体，如果需要，接着用碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物处理分离出的晶体，得到盐。
在上述各结构式中，R′表示的低级烷基包括甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，叔丁基，戊基，异戊基，2，2-二甲基丙基，1-甲基丁基，己基，4-甲基戊基，3-甲基戊基，2-甲基戊基，1-甲基戊基，3，3-二甲基丁基，2，2-二甲基丁基和1，3-二甲基丁基等。苯基-低级烷基包括苄基，α-苯乙基，β-苯乙基，1-苯基丙基，2-苯基丙基，3-苯基丙基，1-甲基-1-苯基乙基，1-甲基-2-苯基乙基，1-苯基丁基，2-苯基丁基，3-苯基丁基，4-苯基丁基，1-甲基-1-苯基丙基，1-甲基-2-苯基丙基，2-甲基-2-苯基丙基，1-甲基-3-苯基丙基，1-苯基戊基，2-苯基戊基，3-苯基戊基，4-苯基戊基，5-苯基戊基，1-甲基-1-苯基丁基，1，2-二甲基-1-苯基丙基，1-甲基-2-苯基丁基，1，2-二甲基-1-苯基丙基，1-甲基-2-苯基丁基，1-甲基-3-苯基丁基，1-甲基-4-苯基丁基，2-甲基-2-苯基丁基，2-甲基-3-苯基丁基，2-甲基-4-苯基丁基，3-甲基-3-苯基丁基，1-苯基己基，2-苯基己基，3-苯基己基，4-苯基己基，5-苯基己基，6-苯基己基，1-甲基-1-苯基戊基，1-乙基-1-苯基丁基，1-甲基-2-苯基戊基，1-甲基-3-苯基戊基，1-甲基-4-苯基戊基，1-甲基-5-苯基戊基，2-甲基-2-苯基戊基，3-甲基-2-苯基戊基，3-乙基-2-苯基戊基，和4-甲基-4-苯基戊基等。
R表示的低级烷氧基包括甲氧基，乙氧基，丙氧基，异丙氧基，丁氧基，叔丁氧基，戊氧基，异戊氧基，2，2-二甲基丙氧基，1-甲基丁氧基，己氧基，4-甲基戊氧基，3-甲基戊氧基，2-甲基戊氧基，1-甲基戊氧基，3，3-二甲基丁氧基，2，2-二甲基丁氧基，和1，3-二甲基丁氧基等。
根据本发明生产一种旋光活性三嗪化合物(1)的方法(不对称合成法)可用下面给出的反应式表示。它有两个反应阶段组成第一阶段包括在一种通式(3)所示的旋光活性环状化合物存在下使4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基硫代苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪[化合物(2)]与含卤氧化剂反应;第二阶段包括或者使第一反应阶段得到的反应混合物与水或一种金属氢氧化物反应，或者将该混合物加热处理。
反应式
式中R和R′分别如前面所限定。
上述反应式所示的第一反应阶段使用的环状化合物(3)是一种醇衍生物，并且该醇衍生物是一种旋光活性的二级醇。该醇衍生物上的取代基R′应在醇羟基(OH)的α-位上，它可以选自前面提到的特定基团。但是，取代基紧密度越高，不对称产率改进也越大。因此，例如，当把上述取代基R′选择为一个低级烷基时，则支链基团就优于直链基团。上述醇衍生物的环状核是4-至8-员环，最好是5-至6-员环，并且可以是双环结构或稠环结构。这一环状核可以是饱和的或不饱和的，只含有碳原子或甚至是符合上面定义的含杂原子的环。所述醇衍生物的具体实例有(-)-薄荷醇，(+)-薄荷醇，(-)-8-苯基薄荷醇，(+)-8-苯基薄荷醇，(+)-2，3-二氢-2-叔丁基-1-茚醇，(-)-冰片，[(1S)-内向]-(-)-冰片，(1S，2S)-(+)-1-羟基-2-甲基-3-环戊烯，(1S，2S)-(+)-1-羟基-2-甲基环己烷，(1S，2R)-(+)-1-羟基-2-苯基环己烷，(1S，2R)-(+)-1-羟基-2-苯基环戊烷和(1S，2R)-(+)-3-羟基-2-苯基四氢呋喃。在这些醇衍生物当中，旋光活性薄荷醇从成本角度考虑是比较好的。
在上述化合物(2)和(3)之间的反应可如下进行，将上述两种化合物和一个有机碱溶解在适当溶剂中，将溶液冷却，加入一种含卤氧化剂，如次氯酸叔丁酯，1-氯苯并三唑，N-氯琥珀酰亚胺等，使其和溶液起反应。
普通惰性溶剂，例如通常的N，N-二甲基甲酰胺，乙腈，二氯甲烷等，可以单独地或结合起来使用。有机碱例如通常可以是吡啶或三乙胺。虽然上述化合物的比率不是很严格的，但相对于化合物(2)来说，化合物(3)的比率可以是约20-0.8摩尔当量。较好是约10-1摩尔当量，而有机碱的比率可以是约1-3摩尔当量，较好是约1-1.5摩尔当量。顺便提及，上述有机碱用来防止反应体系的pH朝酸性方向变化，并且加入有机碱可防止生成最终产物的外消旋体，即是说防止不对称合成产率降低。
上述化合物(2)、化合物(3)和有机碱的溶液通常冷却到约-40℃至-10℃，较好是约-30℃至-20℃。如果溶液度太高，最终产物的不对称产率会降低，这是不希望的。
如次氯酸叔丁酯等试剂的加入，其目的是为了将化合物(2)转变为锍盐，而它与化合物(2)的比例通常是约1-2摩尔当量，较好是1-1.3摩尔当量。
至于接在上述第一阶段反应之后的第二阶段反应，可以采用下述两种方法A和B中的任一种。
在这两种方法之一(方法A)中，将第一阶段得到的反应混合物在不超过0℃的温度下，最好在约-30℃～-25℃之间，边冷却边搅拌约30分钟至3小时，然后，加入水或金属氢氧化物水溶液。用有机酸将水层调至弱酸性，得到所需化合物。作为在这一方法中使用的金属氢氧化物的实例，可以提及的有碱金属氢氧化物，如氢氧化钠，氢氧化钾等，和碱土金属氢氧化物，如氢氧化钙，氢氧化镁等。上述金属氢氧化物在使用时其浓度通常为约5～30重量百分，较好是绷8-25重量百分。反应温度可以为约-40℃至+20℃，较好是约-30℃至0℃。
反应完成后，往反应混合物中加入水，使产物化合物转移到水层，然后加入有机酸，如乙酸，柠檬酸，酒石酸等，得到所希望的旋光活性的4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪。
实施第二阶段反应的另一方法(方法B)包括将第一阶段得到的反应混合物在约50℃加热约2小时，然后加8-25重量百分的碱水溶液，使产品化合物转移到水层，再加有机酸于该水层中，使之变成弱酸性，从而得到所需化合物。
至于在此方法中所用的有机酸的实例，可以参照前面所述的酸。具体地说，本方法得到的是与上述方法A可得到的化合物相对的另一个对映体。
本发明的发明人发现，4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪的两种对映体的50∶50混合物形成一种外消旋混合物，并且还发现，当将只有该旋光活性化合物(对映体)中的一种组成的籽晶加到这一混合物中进行重结晶时，只有对应于构成籽晶的那种对映体的旋光活性化合物选择性地结晶出来，这样就允许用非常方便地方式、并且以高纯度和高产率，选择性地回收特定的旋光活性化合物。因此，本发明也提供了这样一个分离旋光活性化合物的新方法。
至于本发明中选择性回收旋光活性化合物方法的起始原料，可以采用该外消旋的4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡啶并[1，5-a-]-1，3，5-三嗪在适当溶剂中的溶液。虽然氯仿-甲醇可以作为上述溶剂的典型实例，但也可使用各种其它重结晶溶剂，如二氯乙烷-甲醇，二氯乙烷-乙醇，N，N-二甲基甲酰胺-水，乙酸乙酯-甲醇，等等。至于用来接种上述溶液的籽晶，按照本发明的不对称合成所已得到的任何旋光活性化合物的晶体都可以便利地使用，但也不是唯一的选择。因此，用常规柱色谱方法分离的旋光活性化合物晶体也可以使用。这种接种用的籽晶的量可以为外消旋混合物量的约1/2000至1/100，所生成合适的晶体量通常至多约为外消旋混合物总量的30%。
用这种方式，可以选择性结晶出所需旋光活性化合物。
由上述方法生产的旋光活性化合物可通过常规方法进一步纯化。
由此得到的4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪可通过与适当的碱进一步反应而转变为可药用盐。上述盐包括碱金属盐，如锂盐，钠盐，钾盐等，和碱土金属盐，如铍盐，镁盐，钙盐等。
与相应的外消旋化合物的盐不同，旋光活性化合物的盐表现出明显更高的溶解度，这种溶解度远远超出根据关于外消旋化合物的知识所能想象得到的。因此，发明人进行的实验揭示出，例如，上述外消旋化合物的钠盐在水中的溶解度只不过是约0.2%重量，而旋光活性化合物的钠盐的溶解度高达50%重量或更高。至于在生理盐水中的溶解度，外消旋化合物的钠盐的溶解度只不过是约0.08%重量，而旋光活性化合物钠盐的溶解度高达50%重量或更高。因此，根据本发明，可以提供溶解度非常高的旋光活性化合物的钠盐。
上述盐均可以通过使上面得到的旋光活性化合物与适当的碱反应来制得。作为成盐试剂，所用的碱最好是金属氢氧化物，例如碱金属或碱土金属氢氧化物，当然同样也可使用上述金属的碳酸盐，碳酸氢盐或醇盐。成盐反应可通过常规方式进行，所生成的盐可以通过类似于游离化合物的分离、纯化方法来进行分离和纯化。
旋光活性的4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪及通过本发明方法可得到的盐都具有黄嘌呤氧化酶抑制活性，并且是有价值的药物试剂，例如治痛风的(gout suppression)和其它药物。在药物应用中，上述旋光活性化合物的盐可以比相应的游离化合物更容易、更有利地加工成各种剂量形式，例如浓的注射液，特别是因为盐的溶解度较高。
本发明进一步涉及一种药物组合物，其中含有至少一种上述旋光活性4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a-]-1，3，5-三嗪或其盐作为活性成分，该活性成分与对人类和其它动物来说无毒的药用载体相混合。
所述载体的实例是通常的稀释剂和赋形剂，例如填料，扩充剂，粘合剂，润湿剂，崩解剂，表面活性剂和润滑剂。根据所要制备的单位剂量形式来选择载体。
根据治疗目的选择剂量形式。这类剂量形式的典型实例有片剂，丸剂，粉剂，溶液，悬浮液，乳液，粒剂，胶囊，栓剂，注射(溶液，悬浮液等)及类似剂型。用以使药物制剂成型为片剂的载体是乳糖，精制糖，氯化钠，葡萄糖，尿素，淀粉，碳酸钙，高岭土，结晶纤维素，硅酸，磷酸钾等赋形剂;水，乙醇，丙醇，单糖浆，葡萄糖溶液，淀粉溶液，明胶溶液，羧甲基纤维素，羟丙基纤维素，甲基纤维素，聚乙烯吡咯烷酮等粘合剂;羧甲基纤维素钠，羧甲基纤维素钙，低取代羟丙基纤维素，干淀粉，藻酸钠，琼脂粉，Laminaran粉，碳酸氢钠，碳酸钙等崩解剂;聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯，月桂基硫酸钠，单硬脂酸甘油酯等类似表面活性剂;精制糖，硬脂精，可可脂，氢化油等崩解抑制剂;季铵碱，月桂基硫酸钠等吸收促进剂;甘油，淀粉及类似润湿剂;淀粉，乳糖，高岭，膨润土，胶态氧化硅及类似吸收剂;精制滑石，硬脂酸盐，硼酸粉，聚(乙二醇)等润滑剂，等等。如果需要，这类片剂可进一步用通常的包衣组合物进行包衣，得到包衣片剂，例如糖包衣片剂，明胶包衣片，肠溶片剂，薄膜包衣片剂，或双层片剂，多层片剂等。用于将组合物加工成丸剂的载体有葡萄糖，乳糖，淀粉，可可脂，氢化植物油，高岭土，滑石等类似赋形剂;阿拉伯胶粉，tragacanth胶粉，明胶，乙醇和类似粘合剂;Laminaran，琼脂粉和类似崩解剂等等。
将组合物加工成栓剂的载体有聚乙二醇，可可脂，高级醇，高级醇的酯，明胶，半合成甘油酯等。胶囊通常是由常规方法制成的，例如通过将本发明化合物作为活性成分与上面举例说明的载体相混合，并将此混合物封在硬明胶胶囊、软明胶胶囊或类似物中。在加工注射溶液、悬浮液和乳液时，要将其消毒，并且最好使其与血液等渗。用作此目的的稀释剂例如是水，乙醇，聚乙二醇，丙二醇，乙氧基化的异硬脂基醇，聚氧乙烯化异硬脂基醇，聚氧乙烯化脱水山梨醇脂肪酸酯及其类似物。在制备等渗溶液中，氯化钠，葡萄糖或甘油可按所需量加入，以使该溶液等渗。本发明药物组合物可以含有通常的增溶剂，缓冲剂，增滑剂和其它添加剂。需要时，本发明制剂可进一步含有调色剂，防腐剂，调味剂，增甜剂和其它药物。在模制法制软膏时，包括糊剂，乳剂，胶状制剂等，所用稀释剂是白丸士林，石蜡油，甘油，纤维素衍生物，聚乙二醇，硅油，膨润土，等等。
活性化合物在这些药物组合物中的比例是不严格的，可选自很宽的范围，但通常推荐在药物组合物中加入5-300毫克。特别是因为本发明的旋光活性化合物的盐很易溶解，可以容易地将其制成均匀溶液，例如注射液，其中可含有该活性成分的浓度为约0.1-10%。
对于上述药物组合物的给药方法，实际上没有什么限制，可以根据剂量形式，病人年龄，性别和其它特征，病情等情况来选择合适的治疗方案。例如，片剂，丸剂，溶液，悬浮液，乳液，粒剂和胶囊经口服给药，注射溶液可通过静脉与普通替代流体或输送液如葡萄糖，氨基酸和其它输送液混合给药。如果需要，注射液可经肌肉内，经真皮内，经皮下或经腹膜内给药，栓剂可经直肠内给药。
剂量随着给药途径，病人年龄、性别和其它特征，病情严重程度和其它情况变化。然而，通常本发明活性化合物的剂量可在约0.5-20毫克/千克体重/天范围内变化，并且可按每天1-4个分剂量给药。
生产本发明旋光活性化合物和盐的下述实施例以及下述工作实施例是要用来更详细地说明本发明。
实施例1在600毫升N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中溶解60克4-羟基-8-(3-甲氧基-4-苯基硫代苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪，110克1-(-)-薄荷醇和17.2毫升吡啶，将混合物冷却至-25℃～-30℃。然后，滴入21.2克次氯酸叔丁酯并将混合物在-25℃～-30℃搅拌1小时。接着750毫升20%氢氧化钠水溶液在-30℃～-10℃下加入，再加入2升水。将反应混合物用乙酸乙酯洗涤，水层用500克柠檬酸调至弱酸性，使发生结晶。过滤收集晶体，用水漂洗，再用乙醇洗涤，空气干燥。得到57克4-羟基-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪结晶粗品。该产品的旋光度是[α]20D＝-75°(C＝0.5，DMF)。
将上述晶体用氯仿-甲醇(1∶1)重结晶三次，然后与乙酸乙酯一起加热回流30分钟。冷却后，过滤收集分离出的结晶。得到16克(-)-4-羟基-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪(产率25.5%，光学纯度≥99%)。
该产品旋光度是[α]20D＝-174°(c＝0.5，DMF)。
熔点为265-268℃(分解)，元素分析(C18H14O3N4S，摩尔重366.40)如下计算值C，59.00;H，3.85;N，15.29测定值C，58.74;H，3.55;N，14.99按上述同样方法，但是用d-(+)-薄荷醇代替1-(-)-薄荷醇，得15克(+)-4-羟基-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪(产率24%，光学纯度≥99%)。
旋光度，[α]20D＝+174°(C＝0.5，DMF)熔点265-268℃(分解)元素分析(C18H14O3N4S1，摩尔重366.40)计算值C，59.00;H，3.85;N，15.29测定值C，58.74;H，3.64;N，14.93实施例2在由50毫升乙醇、10毫升水和145毫克氢氧化钠制得的混合溶液中在搅拌下溶解1.3克(-)-4-羟基-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪，然后减压蒸出溶剂。加入100毫升乙酸乙酯后，将混合物回流30分钟。冷却后，将晶体过滤回收并干燥，得(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水合物。
旋光度，[α]20D＝-245°(C＝0.5，DMF)熔点228-235℃(分解)按照上述同样方法，用(+)-4-羟基-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪，得到(+)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水化物。
旋光度，[α]20D＝+242°(C＝0.5，DMF)熔点228-235℃(分解)实施例3按照实施例2的同样方法，但是用氢氧化锂、氢氧化钾和氢氧化钙水溶液分别代替氢氧化钠水溶液，得到(-)和(+)形式的4-羟基-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪的锂、钾和钙盐。
所有这些盐在220℃或更高温度下都分解。
实施例4在氯仿和甲醇的40毫升1∶1混合物中，于回流下溶入1克(±)-4-羟基-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪并加入5毫克实施例1得到的旋光纯的(-)-4-羟基-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪作为籽晶。使体系在室温下冷却5小时，过滤收集所产生的晶体(220毫克)。
旋光度，[α]20D＝-45°(C＝0.5，DMF)将上述晶体用氯仿-甲醇(1∶1)重结晶4次，得到44毫克(-)-4-羟基-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪，其旋光度为[α]20D＝-174°(C＝0.5，DMF)对本发明的旋光活性三嗪的盐进行了下述试验。
试验实施例1溶解度试验用下面所列化合物(在实施例2和3中得到的旋光活性化合物的盐和作为对照物用的相应的外消旋化合物的盐)作为试验样品。
样品Ⅰ(外消旋体)(±)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐-水合物。
样品Ⅱ[(-)-形式](-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水合物样品Ⅲ[(+)-形式](+)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水合物样品Ⅳ[(-)-形式]双[(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟根(olste)]钙盐二水合物样品Ⅴ[(+)-形式]双[(+)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a1，3，5-三嗪-4-羟根]钙盐二水合物按下述方法用水(注射用蒸馏水)和生理盐水作溶剂对上述样品分别做溶解度试验。
将各样品0.1克放入10毫升试管中，然后加入适量的溶剂(水或生理盐水，对于外消旋化合物加0.5毫升，对旋光活性化合物加0.1毫升)。用培养器(Taiyo Kagaku Kogyo，M-100)，将试管在25℃摇动。4小时后，将内容物用0.45μM过滤器过滤，滤液用流动相稀释100倍，制备试验溶液。分别地，精确称出40.0毫克样品Ⅰ(外消旋体)，加水补足为准确的200毫升。然后，准确地取出1毫升该溶液，并用流动相稀释到准确的20毫升(10μg/毫升)，作为标准溶液。用上述试验溶液和核标准溶液，分别测定这些样品的溶解度。
装置[HPLC(系统A)]泵510(Waters)检测器UVIDEC-100-V(日本Bunko)
数据处理器Data Module 741(Waters)自动取样器As-8000(Tohso)条件柱TSKgel ODS-120T(4.6毫米直径×150毫米)流动相乙腈-磷酸盐缓冲液(35∶65)流速1.0毫升/分波长323毫微米注入量20微升结果示于下面表1表1试验样品 水 生理盐水样品Ⅰ 0.221%重量 0.0083%重量样品Ⅱ ≥50%重量 ≥50%重量样品Ⅲ ≥50%重量 ≥50%重量样品Ⅳ ≥50%重量 ≥50%重量样品Ⅴ ≥50%重量 ≥50%重量对于样品Ⅱ至Ⅴ，0.1克的物质完全溶解在0.1毫升溶剂中。因此，将结果表达为≥50%重量。
从表1中可清楚地看出，两种异构体的盐在水和生理盐水中远比相应的外消旋化合物的盐容易溶解。
试验实施例2黄嘌呤脱氢酶抑制活性试验该试验是用雄性ICR大鼠(6周龄，体重28.0-40.6克)进行的。将实施例2中得到的本发明化合物分别悬浮在0.5%羧甲基纤维素(CMC)溶液中，将悬浮液按10毫升/千克(试验组1和试验组2)量口服给药。在各试验组中使用的本发明化合物和其剂量表示如下。
试验组1实施例2中得到的旋光活性三嗪化合物[(-)-形式]的钠盐，5毫克/千克试验组2实施例2中得到的旋光活性三嗪化合物[(+)-形式]的钠盐，5毫克/千克。
还准备了一个对照组，仅用0.5%CMC溶液处理(对照组)。
在给药后4和8小时后，将各组的动物杀死，切除肝脏，用下述通用方法试验黄嘌呤脱氢酶在肝脏中的活性。
肝匀浆用100 mM Tris-HCl缓冲液(以后只称为缓冲液)稀释5倍。将50微升该稀释液、25微升NAD+缓冲稀释液(20mM)和25微升1，4，5，6-四氢-4，6-二氧-1，3，5-三嗪-2-羧酸钾缓冲溶液加到300微升缓冲液中(在总的溶液中NAD+和1，4，5，6-四氢-4，6-二氧-1，3，5-三嗪-2-羧酸钾的浓度各为1mM)，将混合物在25℃培养5分钟。将培养液离心分离，将上清液中的尿酸用高效液相色谱法评估。这一数值作为处理前基线。
另一方面，往用上述同样方法得到的预培养液中加入100微升黄呤的缓冲溶液(1mM)，将混合物在25℃培养5分钟。用50微升6M高氯酸使反应停止，将反应混合物按上述同样方法离心分离。用磷酸二氢钠水溶液中和上清液，通过HPLC分析生成的尿酸。这一数值作为处理后的值。
从尿酸的上述处理后数值和处理前基线之间的差别可以测定出黄嘌呤脱氢酶的活性。
结果列于表2。
表2组别 4小时后分离的肝脏 8小时后分离的肝脏中的酶活性(mU/g) 中的酶活性(mU/g)
试验组1 7±4＊＊(n＝7) 17±7＊＊(n＝7)试验组2 33±16＊＊(n＝7) 22±10＊＊(n＝7)对照组 152±21(n＝8) 137±31(n＝8)表中，符号＊＊表示与对照组相比P＜0.01。
下面的制剂实施例说明用本发明化合物制备某些药物组合物的方法。
制剂实施例1(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰 100克苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水合物Avicel[商标，Asahi化学工业公司制造 40克玉米淀粉 30克硬脂酸镁 2克TC-5[商标，Shin-Etsu化学公司 10克制造，羟丙基甲基纤维素]聚乙二醇-6000 3克蓖麻油 40克乙醇 40克将(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水合物，Avicel，玉米淀粉和硬脂酸镁一起研磨并用R 10毫米药丸冲床压模。得到的药片用TC-5、聚乙二醇6000，蓖麻油和乙醇组成的薄膜包衣组合物包衣，得到具有上述组成的薄膜包衣药片。
制剂实施例2和3采用制剂实施例1中的同样步骤，但是分别用(+)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水合物和双[(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟根]钙盐二水合物代替(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水合物，得到薄膜包衣的片剂。
制剂实施例4(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水合物 100克结晶纤维素[J.P.] 104克玉米淀粉[J.P.] 92克滑石[J.P.] 2克硬脂酸镁[J.P] 2克按照上面的配方，制得各含100克(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐作为活性成分的硬明胶胶囊。
将各成分磨细，各种粉末均匀混合在一起，装在口服用的明胶胶囊中。
制剂实施例5(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰 350毫克苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水合物0.1当量氢氧化钠 调节pH至11.5注射用蒸馏水 使总量达25毫升往含23毫升注射用蒸馏水的氢氧化钠溶液中加入(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水合物，并用0.1当量氢氧化钠水溶液调至pH11.5。该溶液用注射用蒸馏水稀释到25毫升，用滤菌器过滤并冻干。将冻干物无菌密封于小瓶中，提供一种干粉制剂，以便临时配制使用。
该制剂在临给病人用药以前溶解在注射用蒸馏水中。
制剂实施例6-10按照制剂实施例5的同样步骤，但用(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钾盐二水合物(制剂实施例6)，双[(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5，-a]-1，3，5-三嗪-4-羟根]钙盐二水合物(制剂实施例7)，双[(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5，-a]-1，3，5-三嗪-4-羟根]镁盐二水合物(制剂实施例8)，(+)8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水合物(制剂实施例9)，和双[(+)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5，-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钙盐二水合物(制剂实施例10)分别代替(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5，-a]-1，3，5-三嗪-4-羟基钠盐二水合物，制得临时配制用的冻干粉末。
权利要求
1.选自下式所示的旋光活性化合物4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪的碱金属盐或碱土金属盐的一种盐，
式中R是低级烷氧基。
2.下式所示的旋光活性化合物4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪或者其碱金属盐或碱土金属盐的制备方法，
式中R是低级烷氧基，该方法包括使下式所示的4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基硫代苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪
式中R是低级烷氧基，与含卤氧化剂在旋光活性环状化合物(用下面通式表示)存在下反应，
其中R′是低级烷基，苯基或苯基-低级烷基;并且，或者用水或金属氢氧化物处理反应产物，或者将反应产物进行加热处理;如果需要，再使该产物与一种碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物反应，以制得一种盐。
3.4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪旋光活性体或其碱金属盐或碱土金属盐的制备方法，该方法包括用只有上述三嗪化合物的一种旋光活性体组成的籽晶接种到4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪的外消旋混合物的溶液中，使得相对应的旋光活性体结晶出来，并且分离所生成的晶体，如果需要，再用碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物处理上述晶体，得到一种盐。
4.具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的药物组合物，包括有效量的权利要求1所述的盐和药物上可接受的无毒载体。
5.权利要求4所述的药物组合物，是一种治痛风剂。
6.权利要求4或5所述的药物组合物，是一种注射溶液。
7.治疗痛风病的方法，包括给患者使用有效量的权利要求1所述的盐。
全文摘要
本发明涉及4-羟基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亚磺酰苯基)吡唑并(1，5-a)-1，3，5-三嗪旋光活性体的碱金属盐或碱土金属盐，生产上述旋光活性化合物或其盐的方法，以及一种药物组合物，如治痛风剂，其中包括有效量的上述盐和药物上可接受的无毒载体。
文档编号C07D487/04GK1049664SQ90107308
公开日1991年3月6日 申请日期1990年8月24日 优先权日1989年8月25日
发明者桥本谨治, 稻井正敏 申请人:株式会社大制药工场
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