商标分类 
商标转让 
您当前的位置： 取代的n-(咪唑基)烷基丙氨酸衍生物的制作方法
2021-02-02 13:02:09|
396|
起点商标网 专利名称：取代的n-(咪唑基)烷基丙氨酸衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的取代的N-(咪唑基)烷基丙氨酸衍生物，这类衍生物是血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂，可用于调节由血管紧张素Ⅱ引起的或加重的高血压，也可用于治疗充血性心衰、肾衰和青光眼。本发明还涉及含有取代的N-(咪唑基)烷基丙氨酸衍生物的药用组合物和用这些化合物作为血管紧张素Ⅱ的拮抗剂、抗高血压剂和充血性心衰、肾衰及青光眼的治疗剂的方法。
称之为肽加压激素类具有血管加压作用，这一作用与人类高血压的病因学有关。肾素一血管紧张素系统的不适当的活性似乎是自发性高血压、充血性心衰和某些肾病的关键因素。除了直接作用于动脉和小动脉外，作为已知的最有效的内源性血管收缩剂之一的血管紧张素Ⅱ(AⅡ)能刺激肾上腺皮质的醛甾酮释放。因此，由于它参与肾钠处理的控制，肾素-血管紧张素系统在心血管的内环境稳定中起重要作用。
用转换酶抑制剂(例如Captopril)阻断肾素-血管紧张素系统已经证明在高血压和充血性心衰的临床治疗中是有效的〔Abrams，W.B.，et al.，(1984)，Federation Proc.，43，1314〕。抑制肾素-血管紧张素系统的最直接的途径是阻断AⅡ对受体的作用。令人信服的证据表明AⅡ也引起肾血管收缩和钠潴留，后者是许多失调(如心衰、肝硬变和妊娠综合症)的特征〔Hollenberg，N.K.，(1984)，J.Cardiovas.Pharmacol.，6，S176〕。此外，最近的动物研究表明肾素-血管紧张素系统的抑制可以有益于停止或减慢慢性肾衰的发展〔Anderson，S.，et al.，(1985)，J.Clin.Invest.，76，612〕。最近的专利申请(南非专利，申请号为87/01，653)要求授权AⅡ拮抗剂用于降低和控制哺乳动物升高的眼内压，特别是青光眼。
本发明化合物能抑制、阻断和拮抗激素AⅡ的作用，因此用于调节和改善血管紧张素诱导的高血压、充血性心衰、肾衰、青光眼和由于AⅡ引起的其它疾病。当将本发明化合物给予哺乳动物时，可降低AⅡ导致的高血压，并能减小或控制AⅡ导致的其它症状。预计本发明化合物也可能有利尿作用。
阻断和抑制AⅡ作用的重要性的认识激励人们努力合成AⅡ拮抗剂。下述文献公开了咪唑衍生物，它们具有AⅡ阻断活性，用作抗高血压剂。
美国专利4，340，598号公开了取代的咪唑-5-基烷酸及其酰胺和低级烷基酯衍生物，其结构式如下
式中R1是低级烷基或任意被卤素或硝基取代的苯基C1-2烷基;
R2是低级烷基，环烷基或任意取代的苯基;
R3和R4中之一是-(CH2)nCOR5，其中R5是氨基、低级烷氧基或羟基，n是0-2;R3和R4的另一个是氢或卤素。
实例包括1-苄基-2-正丁基-4-氯咪唑-5-乙酰胺和1-苄基-2-正丁基-5-氯咪唑-4-乙酸。
美国专利4，355，040号公开了1-苄基咪唑-5-基乙酸衍生物，其结构式为
式中R1是低级烷基、环烷基或任意取代的苯基;X1、X2和X3分别是氢，卤素，硝基，氨基，低级烷基，低级烷氧基，苄氧基或羟基;Y是卤素和R2是氢或低级烷基。具体化合物是1-(2-氯苄基)-2-正丁基-4-氯咪唑-5-乙酸。
欧洲专利申请103，647号公开了下式所示取代的1-苄基-2-苯基-4-氯-咪唑-5-基乙酸衍生物
式中R是低级烷基。具体公开的化合物是4-氯-1-(4-甲氧基-3-甲基苄基)-2-苯基咪唑-5-乙酸。
欧洲专利申请245，637号公开了下式的取代的4，5，6，7-四氢-1H-咪唑并〔4，5-C〕吡啶衍生物
式中
是单键或双键;有一个R1存在并代表下述基团，例如任意取代的(CH2)1-6萘基、(CH2)1-6杂芳基或(CH2)1-6苯基;R3包括下述基团，例如COC1-15烷基或任意取代的(CH2)1-6Ph;R4包括CO2R9，其中R9是氢、低级烷基或苄基;n是0-3。公开的具体化合物是5-〔(4-硝基苯基)乙酰基〕-1-(苯甲基)-4，5，6，7-四氢-1H-咪唑并〔4，5-C〕吡啶-6-羧酸。
欧洲专利申请253，310号公开了下式的取代的1-芳基咪唑
式中R1包括下述基团，例如任意取代的苯基或金刚烷基甲基;R2包括下列基团，例如氢、卤素、NO2、C1-4烷基、或C1-4烷氧基;R3是氢、卤素、C1-4烷基，或C1-4烷氧基;R6包括下列基团，例如C2-10烷基、C3-10链烯基、C3-8环烷基、任意取代的苄基或Z(CH2)1-5R5，其中Z是0或S，R5是氢、C1-6烷基、C3-6环烷基或链烯基;R7是氢、卤素、NO2、CF3或CN;和R8包括下列基团例如C1-10烷酸、酯和酰胺和烷基N-烷基氨基甲酸酯。实例包括2-正丁基-5-氯-1-(4-硝基苄基)咪唑-4-乙酸，1-〔(2′-羧基联苯基-4-基)甲基〕-正丁基-4-氯咪唑-5-羧酸甲酯。
英国专利1，341，375号描述了一系列取代的咪唑化合物，由于它们对H-1，H-2和/或其他组胺受体有活性，所以它们是有用的。在该专利中公开的取代的氨基烷基咪唑化合物的结构式如下
式中A是任意被烷基或芳烷基取代的C1-6烷基;R是取代或未取代的烷基，芳基或芳烷基;R1是氢，烷基，苯基，苯烷基或咪唑烷基;R20是氢，可任意被卤素、OH、CN、CO2H、NH2或CONH2取代的烷基，或COY，其Y是R11O或R11NH，R11是取代或未取代的烷基、芳基、芳烷基或氨基;X是0-3。实例包括N-〔2-〔4(5)-咪唑基〕乙基〕甘氨酸和1-苄基-5-(2-氨乙基)咪唑。
下式代表的本发明化合物及其药学上可接受的盐是血管紧张素Ⅱ受体的阻断剂
式中R是金刚烷基甲基，或苯基，联苯基或萘基，上述的每个芳基可以是未取代芳基或者被1-3个下列基团取代，这些基团选自Cl、Br、F、I、C1-6烷基、硝基、CO2R7、C1-6烷氧基、羟基、SC1-6烷基、SO2C1-6烷基、四唑-5-基、SO2NHR7、NHSO2R7、SO3H、PO(OR7)2、CONR7R7、CN、NR7R7、NR7COH、NR7COC1-6烷基、NR7CON(R7)2、NR7COW、SO2W或W;
R1是C2-10烷基，C3-10链烯基，(CH2)0-8C3-6环烷基，或被下述1-3个基团取代或未取代的(CH2)0-8苯基，所述基团选自C1-6烷基、硝基、Cl、Br、F、I、羟基、C1-6烷氧基、NR7R7、CO2R7、CN、CONR7R7、W、NR7COH、NR7COC1-6烷基、NR7COW、SC1-6烷基、SO2W或SO2C1-6烷基;
R2是氢，Cl，Br，F，I，CHO，羟甲基，C1-6烷基，NR7R7，CO2R7，CONR7R7，NO2，CN，苯基或W;
X是单键，S或0;
R3是H，C1-6烷基，C3-6链烯基，COC1-5烷基或(CH2)0-3苯基;
R4是H，C1-6烷基，C3-6链烯基，或(CH2)0-3苯基;
R5是CO2R7，CONR7R7或四唑-5-基;
每个n分别是0-4;
R6是苯基，萘基，2-或3-噻吩基，2-或3-呋喃基，2-，3-或4-吡啶基，嘧啶基，咪唑基，噻唑基，三唑基，四唑基，吡唑基，吡咯基，噁唑基或异噁唑基，上述每个芳基或杂芳基可以是未取代的或者被下列基团取代C1-6烷基、C1-6烷氧基、Cl、Br、F、I、NR7R7、CO2R7、CONR7R7、SO3H、SO2NHR7、OH、NO2、W、SO2C1-6烷基、SO2W、SC1-6烷基、NR7COH、NR7COW或NR7COC1-6烷基;
W是CmF2m+1，其中m是1-4;和每个R7分别是H或C1-6烷基。
式(Ⅰ)代表的本发明优选化合物是下述化合物及其药学上可接受的盐或水合物，即其中R是未取代或取代苯基，若被取代时则可被1-3个下列基团取代氯、氟、硝基、甲基、三氟甲基、甲氧基、羟基、磺酰氨基、氨磺酰基、羧基、羰C1-4烷氧基、氨甲酰基、氰基或四唑-5-基;
R1是C2-8烷基;
X是单键或S;
R2是氢，氯，氟或三氟甲基;
R3是氢，甲基，或COC1-5烷基;
R4是氢，或C1-3烷基;
R5是CO2H或四唑-5-基;
R6是苯基或2-噻吩基;和每个n分别是1或2。
本文采用的烷基、链烯基、烷氧基和链炔基等词的含义是直链或支链碳链，其长度由位于该词前面的数字标出。式(Ⅰ)化合物的范围包括它们的外消旋混合物和单一的对映体化合物，D对映体的活性一般较强，因此，D对映体优于L对映体。
本发明的具体化合物包括(但不是限制于)下列化合物及其药学上可接受的盐和水合物N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基苯基丙氨酸，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯基丙氨酸，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯基丙氨酸，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-N-丁酰基苯基丙氨酸，N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸，N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸，
N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-乙基苯基丙氨酸，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-丙基苯基丙氨酸，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-N-乙酰基苯基丙氨酸，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕高苯基丙氨酸，N-〔｛1-〔(4-羧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯基丙氨酸，N-〔｛1-〔(4-羧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩)丙氨酸，和N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-N-甲基苯基丙氨酸。
本发明还涉及含有药用载体和有效量式(Ⅰ)化合物的药用组合物。
本发明还包括拮抗血管紧张素Ⅱ受体的方法，它包括将有效量的式(Ⅰ)化合物给予需要该化合物的受试者。本发明还包括产生抗高血压活性的方法和用本发明化合物治疗充血性心衰、肾衰和青光眼的方法。
本发明的化合物和药用组合物及本发明方法按本文描述的方法制备或实施，并用实例解释之。试剂、咪唑环上的保护基和官能团及分子的其它部分必须与指出的化学位移一致。合成的步骤必须符合咪唑环及分子的其它部分上的官能团和保护基。
下面的方法可用于制备式(Ⅰ)化合物，具体地讲用于制备下述化合物即式中R是2-氯苯基或4-羧基苯基;R1是正丙基或正丁基;X是单键或S;R2是氢、氯或氟;R3是氢、甲基或COC1-5烷基;R4是氢或C1-3烷基;R5是CO2H或四唑-5-基;R6是苯基或2-噻吩基;每一个n分别是1或2。
起始原料2-R1X-咪唑是本专业熟知的(J.Org.Chem.454038，1980)，可按已知方法合成。例如，按下法可将咪唑转变成2-正丁基咪唑，即，将咪唑与原甲酸三乙酯和对甲苯磺酸反应得二乙氧基原甲酰胺咪唑，然后用正丁基锂处理得该原甲酰胺咪唑的2-锂衍生物，再用正丁基碘于适宜溶剂〔如四氢呋喃(THF)〕中烷基化。
通过已知方法将1-R(CH2)1-4基团连于2-R1X-咪唑上，例如，用R-(CH2)1-4溴化物、甲磺酸酯或乙酸酯(如2-氯苄基溴)，于适宜溶剂〔如二甲基甲酰胺(DMF)〕中，在适宜的酸受体(如烷基钠、碳酸钠或钾、金属氢化物，最好是氢化钠)存在下，于25-100℃(最好是50℃)反应。得到的1-R(CH2)1-4-2-R1X-咪唑按下法进行5-位的羟甲基化例如，在乙酸钠存在下于乙酸中与甲醛反应，得到1-R(CH2)1-4-2-R1X-5-羟甲基咪唑中间体。
另外，按下法可制得1-R(CH2)1-4-2-R1-5-羟甲基咪唑中间体将亚氨基醚，R1-C(＝NH)-O-烷基(例如正戊脒甲基醚)于液氨中加压下与二羟基丙酮反应，得2-R1-5-羟甲基咪唑。二乙酸酯中间体用三氟乙酸(triflate)2-氯苄酯进行N-烷基化，再用碱水(如10%NaOH液)处理得到的1-R(CH2)1-4-2-R1-5-乙酰氧基甲基咪唑，得1-R(CH2)1-4-2-R1-5-羟甲基咪唑中间体。
按美国专利4，194，049号中描述的方法可制得式中R基团直接与咪唑环氮原子相连接的化合物。例如，在路易斯酸(如盐酸，氯化锌或氯化铝)存在下，于惰性溶剂(如四氢呋喃，二氯甲烷或甲苯)中，在25-150℃下将适宜取代的苄胺与R1-腈(如戊腈)反应。得到的脒在适宜溶剂(如C1-4烷醇)与卤代丙醛(如溴代丙醛)反应，被转变成1-R-2-R1-咪唑5-甲醛衍生物。在有机溶剂(如C1-4烷醇)中，用金属氢化物还原剂(如硼氢化钠)将5-甲醛化合物还原，可制得5-羟甲基咪唑。
此外，按下法可制备2-R1S-咪唑化合物在碱(如三乙胺)存在下，于适宜溶剂(如二甲基甲酰胺)中用氯乙酸C1-6烷基酯(如氯乙酸甲酯)使被1-3个取代基取代的苄胺烷基化、所述取代基选自卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、NO2、SC1-6烷基、SO2C1-6烷基、或CmF2m+1，式中m是1-4。制得的烷氨基烷基酯化合物在适宜溶剂(如二甲苯)中用甲酸对氨基和酯基进行N-处理，然后进行α-碳原子的C-处理。该中间体在惰性有机溶剂(如C1-4烷醇)中与酸性硫代氰酸盐(最好是硫代氰酸钾)反应产生1-RCH2-2-巯基-5-烷酸酯咪唑化合物。在适宜碱(如碳酸钠)存在下，于适宜溶剂中，将酯基咪唑化合物的游离巯基与卤素-R8化合物(最好是正丙基溴)反应，其中R8是C2-10烷基、C3-10链烯基、(CH2)0-8C3-6环烷基或适宜取代的(CH2)0-8苯基。在适宜的溶剂(如四氢呋喃)中，于-78℃至25℃(最好低于-10℃)下，用适宜试剂(最好是氢化二异丁基铝)将上述的酯还原成5-羟甲基咪唑中间体。
上述中间体的5-羟甲基与卤化剂(如亚硫酰氯)反应得取代的5-氯甲基咪唑，它再与式(Ⅱ)的胺反应
式中R4、R6和n的定义同式(Ⅰ)化合物。所述胺是D，L-，D-或L-β-芳基或β-杂芳基丙氨酸酯，它与5-氯甲基化合物在碱的存在下(如三乙胺)于适宜溶剂(最好是二甲基甲酰胺)中，在0-110℃(最好在90℃)反应。当与氮原子连接的R4取代基是H时，上述产物胺在碱(如三乙胺)存在下，于惰性溶剂(最好是二氯甲烷)中任意与C1-5C(O)卤化物(如丁酰氯)反应，得酰胺。得到的取代的式(Ⅰ)酯化合物在适宜溶剂(最好是C1-4烷醇)中用碱水(如NaOH或KOH水溶液)水解成相应的式(Ⅰ)羧酸。
此外，在四氢呋喃中用适宜试剂(如脱水铬酸-硅胶)处理，最好是在适宜溶剂(如苯，二氯甲烷，二甲苯，优选的是甲苯)中于25-140℃(优选的是约100℃)下用活化的二氧化锰处理，1-R(CH2)n-2R1X-5-羟甲基咪唑中间体的羟甲基可被氧化成醛基。1-R(CH2)n-2-R1X-咪唑-5-甲醛按上述方法与式(Ⅱ)胺化合物反应，得亚胺化合物，后者于适宜溶剂(如C1-4烷醇)中用适当的试剂(如碱性硼氢化物，优选的是氰基硼氢化钠)还原，可得到式(Ⅰ)的酯化合物。按上述方法也可制得式(Ⅰ)的N-酰化和羧酸化合物。
用上述方法，以相应的烷酸酯(参见美国专利4，340，598号)为原料可制得咪唑环5-位的亚烷基桥n为2或3的式(Ⅰ)化合物。
用醚裂解剂(如三溴化硼或硼酸)可将R为C1-6烷氧基的式(Ⅰ)化合物转变成R为羟基的式(Ⅰ)化合物。
R为CO2C1-6烷基的式(Ⅰ)化合物于甲醇或乙醇中用氢氧化钠或钾水溶液碱水解，或于盐酸水溶液中酸水解，可制备R为羧基的式(Ⅰ)化合物。
式(Ⅰ)的四唑化合物按下法制备将上述的式(Ⅰ)的酸化合物于适宜溶剂(如苯)中与卤化剂(如亚硫酰氯)反应，得相应的酰卤化合物。后者与浓氨水反应被转变成伯酰胺化合物，接着该酰胺于乙腈/二甲基甲酰胺中用草酰氯/二甲基甲酰胺脱氢得腈类化合物，它是合成式(Ⅰ)的四唑化合物的前体。该腈于适宜溶剂(四氢呋喃)中与叠氮化物(最好是由叠氮化钠和氯化铝反应直接制备的叠氮化铝)反应，得到四唑化合物。
按本专业已知的方法，用适宜的有机或无机酸，可制得式(Ⅰ)化合物药学上可接受的酸成盐。例如，本发明的碱在水混溶的溶剂(如乙醇)中与适宜的无机或有机酸反应，然后除去溶剂，分离出生成的盐，或者在酸能溶的水不混溶溶剂(如乙醚或氯仿)中反应，直接分离或除去溶剂后分离出生成的盐。适宜酸的代表实例是马来酸，富马酸，苯甲酸，抗坏血酸，Pamoic acid，琥珀酸，双亚甲基水杨酸，甲磺酸，乙二磺酸，乙酸，丙酸，酒石酸，水杨酸，柠檬酸，葡萄糖酸，天冬氨酸，硬脂酸，棕榈酸，衣康酸，乙醇酸，对氨基苯甲酸，谷氨酸，苯磺酸，盐酸，溴氢酸，硫酸，环己基氨磺酸，磷酸和硝酸。
按已知方法，用有机或无机碱，包括无毒的碱金属和碱土金属碱(例如钙、锂、钠和钾氢氧化物)、氢氧化铵和无毒的有机碱(如三乙胺，二环己基胺，丁胺，哌嗪，麦格鲁胺(meglumine)，胆碱，二乙醇胺和三甲胺)，可制得具有羧基的式(Ⅰ)化合物的药学上接受的碱成盐。
用体外和体内方法评价了式(Ⅰ)化合物的抗血管紧张素Ⅱ的活性。用本发明化合物与125Ⅰ-血管紧张素Ⅱ竞争性键合于血管的血管紧张素Ⅱ受体上的能力和它们阻断兔离体主动脉对血管紧张素Ⅱ的收缩反应的能力来测定体外拮抗活性。体内活性是用本发明化合物抑制清醒大鼠对外源性血管紧张素Ⅱ的升压反应和降低肾素依赖的高血压型大鼠血压的效率来评价的。
键合放射标记的键合测定是对前人描述方法(参见Cunther et al.，CirC.ReS.47278，1980)的改良。将大鼠肠系膜动脉的特定部分于Tris缓冲液中与80PM125Ⅰ-血管紧张素Ⅱ在25℃保温1小时，溶液中加有或不加血管紧张素Ⅱ拮抗剂。迅速过滤保温液，用r-计数器将收集于滤纸上的键合125Ⅰ-血管紧张素Ⅱ受体定量，用IC50表示血管紧张素Ⅱ拮抗剂的效力，即替代50%的特异性键合血管紧张素Ⅱ所需的拮抗剂浓度。本发明化合物的IC50实例是约0.6-30μM。
主动脉用兔主动脉测量本发明化合物对血管紧张素Ⅱ诱导的血管收缩的拮抗能力。切一段兔胸主动脉管，放于装有生理盐水的器官浴中。将主动脉管固定于金属支承物上，并与连有记录器的力量转换器相接。记录无拮抗剂情况下或与拮抗剂一起保温30分钟后对血管紧张素Ⅱ的累积浓度反应曲线。用平均有效浓度通过剂量比率方法计算拮抗剂的解离常数(KB)。本发明化合物的KB举例是约0.15-15μM。
清醒大鼠对血管紧张素Ⅱ的升压反应的抑制对大鼠的中心股动脉和股静脉以及胃分别插管(参见Cellai et al.，Kidney Int.1549，1977)。手术2-3天后将大鼠放于固定笼中，用压力换能器连续地监测血压并用多种波动记录仪记录。比较在静注或口服(剂量为3-300mg/kg)本发明化合物前后的不同时间大鼠对静注血管紧张素Ⅱ(剂量为250mg/kg)所引起的平均动脉压变化。对血管紧张素Ⅱ产生50%抑制作用所需的化合物剂量(即IC50)被用来评价该化合物的效力。N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸的IC50是11mg/kg(静注)和45mg/kg(口服)。
抗高血压活性通过测定本发明化合物降低清醒大鼠平均动脉压的能力来评价它们的抗高血压活性，所述清醒大鼠是通过结扎左肾动脉而获得肾素依赖型高血压模型的(参见Cangiano et al.，J.Pharmacol.Exp.Ther.208310，1979)。按上述方法将肾动脉结扎的大鼠进行中心插管，在肾动脉结扎7-8天后，此时血浆肾素浓度最高，将清醒大鼠放于固定器中，连续地记录静注或口服本发明化合物前后的平均动脉血压。降低平均动脉血压30mmHg所需的化合物剂量(IC30)被用作药效的评价指标。N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基咪唑-5-基｝甲基-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸的IC30为15mg/kg(静注)和70mg/kg(口服)。
本发明采用的眼内压降低作用可按Watkins等人描述的方法测定，参见J.Ocular Pharmacol.，1(2)161-168(1985)。
式(Ⅰ)化合物被掺入方便的剂型中，例如注射剂，对于口服的活性化合物而言，制成胶囊或片剂。采用固体或液体的药用载体。固体载体包括淀粉，乳糖，硫酸钙二水合物，石膏粉，蔗糖，滑石粉，明胶，琼脂，果胶，阿拉伯树胶，硬脂酸镁和硬脂酸。液体载体包括糖浆，花生油，橄榄油，食盐水和水。同样，载体或稀释剂也可包括各种延长释放物质，例如甘油单硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯，单独使用或与蜡混合使用。固体载体的用量是可变的，但最好是每剂量单位含约25mg至1g。用液体载体时，剂型最好是糖浆，酏剂，乳化剂，软明胶胶囊，灭菌注射液(如安瓿)，或水的或非水的液体混悬液。
就局部的眼科给药而言，适用的药用组合物包括溶液，混悬液，油膏和固体插入物。典型的药学上可接受的载体是例如，水，水与水可混溶溶剂(如低级烷醇或植物油)的混合物，水溶的眼科学可接受的无毒聚合物(如纤维素衍生物，例如甲基纤维素)。药用制剂也可含有无毒的辅剂，例如乳化剂，防腐剂，润湿剂，稠化剂(如聚乙二醇)，抗菌剂(如季铵化合物)，缓冲剂(如碱金属氯化物)，抗氧化剂(如偏亚硫酸氢钠)，和其它常规成分(如山梨醇单月桂酸酯)。
此外，就本发明目的而言，适宜的眼用载体可用作载体介质，包括常用的磷酸盐缓冲载体系统。
药用制剂也可以是固体插入剂型，例如可采用水溶的固体聚合物作为药物载体。还可采用水不溶的固体插入剂，例如由亚乙基乙烯乙酸酯共聚物制备的固体插入剂。
药用制剂可按下述的常规制药技术制得就片剂而言，必要时包括混合、制粒和压片;或者是通过混合，填充和溶解各成分，以得到理想的口服、非肠道或局部应用的产品。
在药物剂量单位中，如上所述，式(Ⅰ)化合物的剂量是一个有效无毒量，其范围是0.01-200mg活性化合物/kg体重，最好为0.1-100mg/kg。选定的剂量通过口服、直肠、局部、注射或连续灌输，给予需要拮抗血管紧张素受体的病人，每天1-6次。人用的口服剂量单位最好含有10-500mg活性化合物。一般非肠道给药的剂量较低。采用口服给药对病人来说是安全、有效和方便的。局部用制剂含有0.0001-0.1(W/V%)的活性成分，最好含0.0001-0.01(W/V%)。作为用于人眼的局部剂量单元剂型，其活性化合物的含量在50ng至0.05mg之间，最好为50ng-5μg。
本发明拮抗哺育动物(包括人)的血管紧张素Ⅱ受体的方法包括将有效量的式(Ⅰ)化合物施予需要这种拮抗的受试者。本发明产生抗高血压活性的方法和治疗充血性心衰、青光眼及肾衰的方法包括将有效量的式(Ⅰ)化合物给予需要预定活性的受试者，以产生所述的活性。
下述实施例解释本发明化合物和药用组合物的制备。这些实施例对上述的和下面要求授权的本发明范围并不构成限制。
实施例1N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸(ⅰ)5-羧甲基-1-(2-氯苯基)甲基-2-硫代-1H-咪唑用氯乙酸甲酯(10.9g，0.1mol)处理2-氯苄胺(14.2g，0.1mol)和三乙胺(13.9ml，0.1mol)的二甲基甲酰胺(100ml)溶液，并于50℃加热3.5小时，冷却该反应液，并用乙醚稀释，滤除固体，浓缩的滤液于硅胶上闪层析，用己烷和乙酸乙酯(6∶5)洗脱，得15.3g(71%)2-〔N-(2-氯苯基)甲基〕氨基乙酸甲酯。该产物(15.2g，0.071mol)溶于混合二甲苯(100ml)中，用98%甲酸(2.74ml，0.0711mol)处理，回流2.5小时，并用Dean-Stark分水器分水。蒸发，得17.1(99%)2-〔N-(2-氯苯基)甲基-N-甲酰基〕氨基乙酸甲酯。将该甲酰化产物(17g，0.071mol)溶于甲酸甲酯(13.3ml，0.216mol)，并滴入甲醇钠混合物中，后者是将金属钠(1.79g，0.0778mol)置于四氢呋喃(325ml)中，然后慢慢地加入甲醇(3.15ml，0.0778mol)而制得的。上述合并的混合物于室温下搅拌18小时，蒸干。将粗产物溶于50%的甲醇水溶液(200ml)中，用炭处理，过滤，滤液用冰浴冷却，慢慢地加入浓盐酸(12N14.3ml，0.171mol)，然后加入硫代氰酸钾(8.6g，0.0885mol)的水(20ml)溶液。反应混合物于油浴中90℃保温2.5小时，冷却至-10℃，生成的沉淀滤出，用冷的乙醇-水洗沉淀，于60℃干燥得14.7g(74%)5-羧甲基-1-(2-氯苯基)甲基-2-硫代-1H-咪唑，mp72-74℃。
(ⅱ)1-(2-氯苯基)甲基-5-羧甲基-2-硫代丙基-1H-咪唑将5-羧甲基-1-(2-氯苯基)甲基-2-硫代-1H-咪唑(2g，7.08mmol)、乙酸乙酯(20ml)、5%碳酸钠溶液(40ml)和丙基溴(4ml，44mmol)于60℃加热18小时，分出有机层，用硫酸镁干燥，浓缩得2.23g粗产物，用乙醚研磨，得1.63g(71%)5-羧甲基-1-(2-氯苯基)甲基-2-硫代丙基-1H-咪唑，mp68-71℃(己烷中结晶)。
(ⅲ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯将5-羧甲基-1-(2-氯苯基)甲基-2-硫代丙基-1H-咪唑(3.74g，11.5mmol)溶于无水四氢呋喃(50ml)中，充氩下冷却至-78℃，滴入氢化二异丁基铝甲苯液(1M，30ml)，于-78℃搅拌1.5小时，慢慢升温至室温，将反应液倒于冰冷的稀乙酸中，用二氯甲烷提取产物，用水、50%碳酸钠溶液和食盐水依次洗有机提取液，干燥，浓缩，得产物，淡褐色固体(3.32g)，于乙醇/水中结晶，得1-(2-氯苯基)甲基-5-羟甲基-2-硫代丙基-1H-咪唑，mp98-101℃。
将1-(2-氯苯基)甲基-5-羟甲基-2-硫代丙基-1H-咪唑(10g，0.0337mol)和亚硫酰氯(75ml)的混合物回流1小时，减压蒸发，残余物用甲苯共沸蒸馏3次，用乙醚研磨固体，收集得10.4g(88%)1-(2-氯苯基)甲基-5-氯甲基-2-硫代丙基-1H-咪唑盐酸盐。
将苯丙氨酸甲酯盐酸盐(0.863g，4mmol)溶于无水二甲基甲酰胺(20ml)中，先用三乙胺(1.04g，10.2mmol)，再用1-(2-氯苯基)甲基-5-氯甲基-2-硫代丙基-1H-咪唑盐酸盐(1g，2.8mmol)的二甲基甲酰胺(10ml)溶液处理，充氩下于蒸汽浴上加热3小时，倒入水中，用乙酸乙酯提取产物，水洗，干燥，浓缩，用含15%乙酸乙酯的二氯甲烷于硅胶上闪层析，得0.78g(61%)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯，油状物，其NMR与结构完全一致。
(ⅳ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸将氢氧化钾(0.29g，5.1mmol)的水(4ml)溶液加入N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯(0.78g，1.7mmol)的乙醇(10ml)溶液中，短暂地加热至回流，于室温下搅拌1小时，蒸去乙醇，用乙醚提取水层，用10%的盐酸酸化至pH4，收集沉淀，干燥，得0.4g(51%)L-N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸半盐酸盐，mp130-132℃。
实施例2N-丁酰基-N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸(ⅰ)N-丁酰基-N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯将丁酰氯(0.38g，3.57mmol)加入N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯(1.35g，2.95mmol)、二氯甲烷(50ml)和三乙胺(0.448g，4.43mmol)的混合物中，于室温下搅拌48小时后，蒸发溶剂，残余物用乙酸乙酯处理，滤除不溶物，分别用5%碳酸氢钠液和水洗乙酸乙酯液，干燥，浓缩，于硅胶层析纯化，用乙酸乙酯/二氯甲烷作梯度洗脱，得0.81g(52%)标题化合物甲基酯，油状物。
(ⅱ)N-丁酰基-N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸将N-丁酰基-N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯(1.36g，2.58mmol)的乙醇(20ml)溶液和氢氧化钾(0.436g，7.75mmol)的水(10ml)溶液于室温下搅拌2小时，减压浓缩，用乙醚洗水层，并用活性炭处理，用稀盐酸酸化至pH3.5，将胶状产物提取入乙酸乙酯中，用无水硫酸镁干燥，浓缩得0.7g(53%)N-丁酰基-N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸，mp70-74℃。
此外，在中和之前，直接从反应混合物中可分离出所述酸的钠盐。该粗碱反应溶液用于用水平衡的反相闪柱层析，用水(3次排空体积)洗去柱中的无机物，产物用乙腈/水(50∶50)洗脱，减压移去乙腈，冻干，得理想的钠盐。
实施例3N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸(ⅰ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯方法A用Curtis和Brown〔J.Org.Chem.，45，20(1980)〕的方法将咪唑转变成1-二乙氧基-原酰胺衍生物。在1g对甲苯磺酸存在下，将咪唑(12.8g，0.19mol)与118.4g(0.8mol)原甲酸三乙酯反应，得20.6g(61%)1-二乙氧基原酰胺咪唑，bp65-70℃(0.1mm)。将该产物(17.0g，0.1mol)溶于无水四氢呋喃(250ml)中，冷却至-40℃，于-40℃至-35℃，加入正丁基锂(2.5M己烷溶液，40ml，0.1mol)，15分钟后于-40℃加入碘代正丁烷(22.1g，0.12mol)，室温下搅拌过夜，用乙醚和0.3N盐酸提取，用稀盐酸反复提取有机层，合并水提液，用碳酸氢钠液中和，用二氯甲烷提取，硫酸镁干燥，浓缩，用Kugelrohr装置闪蒸馏得14.8g(85%)2-正丁基咪唑。
将2-正丁基咪唑(9.7g，0.078mol)溶于甲醇(50ml)中，并滴入甲醇钠的甲醇液(250ml，用2.31g，0.0934mol氢化钠制得)中，1小时后蒸干，将钠盐溶于无水二甲基甲酰胺(150ml)中，加入2-氯苄基溴(16.3g，0.079mol)，充氩下于50℃加热17小时，注入冰水中，用乙酸乙酯提取，将提取液洗涤，干燥，浓缩，得18.5g粗产物，于硅胶上层析，用乙酸乙酯/己烷(2∶1)洗脱，得11.9(61%)2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑，油状物，经硅胶薄层析，用4∶1乙酸乙酯/己烷层开，Rf值0.59。
充氩下，将2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑(95.5g，0.384mol)，37%甲醛(500ml)，乙酸钠(80g)和乙酸(60ml)的混合物加热回流40小时，减压浓缩，残余物与500ml20%氢氧化钠液一起搅拌4小时，用水稀释，二氯甲烷提取，水洗提取液，干燥，浓缩，粗产物(117g)于600g硅胶上闪层析，用乙酸乙酯至含10%甲醇的乙酸乙酯梯度洗脱，得8.3g起始原料，24.5g起始原料和产物的混合物及44g(41%)2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-5-羟甲基-1H-咪唑，mp86-88℃(乙酸乙酯中结晶)，再洗脱得双(4，5-羟甲基)衍生物，mp138-140℃(乙酸乙酯中结晶)。
将按实施例1(ⅲ)方法由2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-5-羟甲基-1H-咪唑制得的2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-5-氯甲基-1H-咪唑盐酸盐(0.6g，1.18mmol)的溶液按实施例1(ⅲ)描述的方法与苯丙氨酸甲酯盐酸盐反应，经硅胶层析，用二氯甲烷/乙酸乙酯(2∶1)洗脱，得0.244g(31%)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯，油状物。
方法B将方法A制备的2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-5-羟甲基-1H-咪唑(5.4g，0.0194mol)的甲苯(25ml)溶液加入活性的二氧化锰(27g)和甲苯(325ml)混悬液中，安装Dean Stark分水器，加热回流1小时，在100℃保温17小时，滤出固体，滤液浓缩，粗产物于硅胶上闪层析，用6∶4烷/乙酸乙酯洗脱，得4.16g(78%)2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑-5-甲醛，油状物。
充氩下，并安装上Dean-Stark分水器，将2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑-5-甲醛(6.03g，22mmol)，苯丙氨酸甲酯盐酸盐(4.93g，23mmol)，二异丙基乙胺(2.97g，23mmol)和甲苯(300ml)加热回流18小时，蒸发溶剂，加入乙醚，过滤除去二异丙基乙胺盐酸盐，蒸去乙醚，得9.81g粗亚胺，N-〔｛2-正丁基-1-〔(2-氯苯基)甲基〕-1H-咪唑-5-基｝亚甲基〕苯丙氨酸甲酯。
将上述的亚胺溶于用冰水预冷却的甲醇(50ml)中，在25℃一点一点地加入氰基硼氢化钠(0.92g，14.62mmol)，几小时内加完，蒸去溶剂，残余物溶于乙酸乙酯和水中，用5%碳酸氢钠液和水依次洗有机层，干燥，浓缩，得3.24g产物，其NMR和TLC与方法A制备的产物一致。
方法C将方法B制备的2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑-5-甲醛(10mmol)溶于甲醇(50ml)中，用苯丙氨酸甲酯游离碱(10mmol)和氰基硼氢化钠(20mmol)处理，并用含氯化氢气体的乙醚调pH至6.5，于25℃搅拌3天，后处理与方法B相同。
(ⅱ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例2(ⅱ)的方法，用0.232g(0.53mmol)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯为原料，经后处理和干燥，得0.185g(82%)标题化合物，白色固体，mp141-143℃。
实施例4N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基苯丙氨酸(ⅰ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基苯丙氨酸甲酯方法A将正丁基锂的己烷溶液(2.5M5ml，12.6mmol)于0℃加入二异丙基胺(1.27g，12.6mmol)的四氢呋喃(50ml)溶液中，于0℃搅拌15分钟，冷却至-78℃，将实施例3(ⅰ)方法B制备的亚胺，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝亚甲基〕苯丙氨酸甲酯(5.51g，12.6mmol)的四氢呋喃(35ml)溶液滴入，充氩下于-78℃搅拌30分钟，于-78℃加入碘甲烷(2.06g，14.5mmol)的四氢呋喃(15ml)溶液，缓慢升温至室温，搅拌18小时，蒸去溶剂，残余物溶于乙酸乙酯中，滤除不溶物，浓缩得产物8.18gN-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝亚甲基〕-α-甲基苯丙氨酸甲酯，不纯化，直接用于反应。
将上述产物(8.18g)溶于甲醇(75ml)中，冷却至0℃，一点一点地加入氰基硼氢化钠(1.4g，2.2mmol)，于室温下搅拌48小时，浓缩，残余物溶于乙酸乙酯中，用5%碳酸氢钠液和水分洗，干燥，浓缩，得5.5g粗产物，经硅胶闪层析，用乙酸乙酯/己烷(9∶1)洗脱，得1.4gN-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基苯丙氨酸甲酯。
方法B将2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑-5-甲醛(0.264g，0.995mmol)溶于甲醇(5ml)，于-10℃加入α-甲基苯丙氨酸甲酯盐酸盐(0.44g，1.91mmol)，三乙胺(97mg，0.955mmol)，氰基硼氢化钠(252mg，4mmol)和甲醇(10ml)的混合物中，在25℃搅拌4天，用乙酸乙酯常规处理，得粗产物(30%收率)，其TLC和NMR与方法A制备物一致。
(ⅱ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基苯丙氨酸按实施例3(ⅱ)的方法，用N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基苯丙氨酸甲酯代替N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯，得标题化合物，白色固体，mp157-159℃。
实施例5N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸(ⅰ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝亚甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯安装Dean-Stark分水器，充氩下将2-正丁基-1-〔(2-氯苯基)甲基〕-1H-咪唑-5-甲醛(0.6g，2.12mmol)，β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯(0.4g，2.16mmol)和甲苯(25ml)的溶液回流8小时，蒸去溶剂，得1.1g标题亚胺化合物，桔红色油，其NMR与结构相符。
(ⅱ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯将N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝亚甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯(1.1g)溶于甲醇(15ml)中，冷却至0℃，一点一点地加入氰基硼氢化钠(0.55g)，升温至室温，搅拌18小时，加水终止反应，用二氯甲烷提取，水洗，干燥，浓缩，得0.84g粗产物，经硅胶层析，用二氯甲烷洗脱，得0.46g(按醛计算，收率49%)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯，油状物。
(ⅲ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸将实施例5(ⅱ)制备的甲酯(0.46g)、氢氧化钾(0.18g)，水(2ml)和乙醇(3ml)于25℃搅拌2天，蒸去乙醇，加入水(6ml)，慢慢滴入稀盐酸液至有沉淀生成，冷却，过滤，用水洗产物，空气干燥，得0.34g标题化合物，白色固体，mp89-91℃。
实施例6N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸(ⅰ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯用6.45g(14.5mmol)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝亚甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯(实施例5(ⅰ))，按实施例4(ⅰ)(方法A)的方法制得了6gN-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝亚甲基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯粗产物，按所述方法，但用硼氢化钠(1.1g)代替氰基硼氢化钠将上述亚胺还原，经硅胶层析，用乙酸乙酯洗脱后，得2.8g(两步计算，收率34%)产物，油状物，其NMR符合下述结构N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯(ⅱ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸用N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯代替N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯，按实施例5(ⅲ)的方法制得了标题化合物，白色固体，mp109-112℃(乙腈中结晶)。
实施例7N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕苯丙氨酸(ⅰ)2-正丁基-1-〔(2-氯苯基)甲基〕-5-(2-羟乙基)-1H-咪唑将〔2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑-5-基〕乙酸甲酯(按美国专利4，340，598号的方法制备)(1.06g，3.3mmol)的四氢呋喃(40ml)溶液冷却至-78℃，滴入氢化二异丁基铝的四氢呋喃溶液(9.24mmol)，充氩下于-78℃搅拌2小时，再于室温搅拌18小时，在冷却下加入甲醇，然后加入乙酸(5ml)和水(20ml)，浓缩，用二氯甲烷提取，用5%碳酸氢钠液和水洗提取液，干燥，浓缩液于硅胶上层析，用乙酸乙酯/己烷梯度洗脱，得0.657g(68%)2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-5-(2-羟基)乙基-1H-咪唑，油状物。
(ⅱ)N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕苯丙氨酸甲酯充氮下，将三氟甲磺酸酐(0.954g，3.38mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液冷却至-78℃，滴入2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-5-(2-羟乙基)-1H-咪唑(0.9g，3.07mmol)、二异丙基乙胺(0.44g，3.38mmol)和二氯甲烷(10ml)的溶液，于-78℃搅拌15分钟，加入苯丙氨酸甲酯的游离碱(由1.33g(6.15mmol)盐酸盐制得)的二氯甲烷(10ml)溶液，于-78℃搅拌2小时，再于室温下搅拌18小时，用水洗反应混合物，干燥，浓缩，得粗产物，经闪层析，用含5%甲醇的乙酸乙酯洗脱，得0.9g(65%)N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕苯丙氨酸甲酯(ⅲ)N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕苯丙氨酸按实施例2(ⅱ)的方法，用0.9g(1.99mmol)N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕苯丙氨酸甲酯，0.33g氢氧化钾和15ml水及25ml乙醇，反应后得0.54g产物，用乙醚研磨得标题化合物，mp78-80℃(游离碱)，mp232-233℃(二盐酸盐)。
实施例8N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-4-氯-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸(ⅰ)2-正丁基-4-氯-1-(2-氯苯基)甲基-5-羟甲基-1H-咪唑将2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-5-羟甲基-1H-咪唑(按实施例3(ⅰ)方法A制备)(10.2g，0.0368mol)的四氢呋喃(100ml)溶液一点一点地用N-氯代琥珀酰亚胺(NCS)(4.92g，0.0368mol)处理，加入NCS后，于45℃搅拌3小时，蒸去四氢呋喃，用水和乙酸乙酯分配残余物，用水洗有机层，干燥，浓缩，残余物用乙醚搅拌结晶，得5.1g(44%)2-正丁基-4-氯-1-(2-氯苯基)甲基-5-羟甲基-1H-咪唑，mp134-135℃(乙腈中结晶)。
(ⅱ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-4-氯-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3(ⅰ)方法A的方法制备中间体甲酯。用2-正丁基-4-氯-1-(2-氯苯基)甲基〕-5-氯苯基-1H-咪唑盐酸盐代替2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基〕-5-氯甲基-1H-咪唑盐酸盐，制得了N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-4-氯-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯。该酯按实施例3(ⅱ)的方法水解，即用N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-4-氯-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯代替N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯，制得了标题化合物。
实施例9N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(3-噻吩基)丙氨酸用β-(3-噻吩基)丙氨酸甲酯代替β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯，按实施例5的方法，制得了标题化合物。
实施例10N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基-β-(2-呋喃基)丙氨酸用β-(2-呋喃基)丙氨酸甲酯代替β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯，按实施例5的方法制得了标题化合物。
实施例11N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕酪氨酸用酪氨酸甲酯代替β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯，按实施例5的方法制得了标题化合物。
实施例12N-〔｛1-〔(2-氯-6-氟苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸将2-正丁基咪唑(3.75g，0.03mol)的无水二甲基甲酰胺(4ml)溶液加入氢化钠(0.95g)的二甲基甲酰胺(18ml)溶液中，无气体逸出后，充氩下搅拌1小时，慢慢加入2-氯-6-氟苄基氯(5.5g，0.031mol)的二甲基甲酰胺(7ml)溶液，室温下搅拌17小时，用冰水稀释，乙酸乙酯提取，有机层经洗涤，干燥和浓缩，得7.63g(94%)2-正丁基-1-(2-氯-6-氟苯基)甲基-1H-咪唑，其NMR与结构一致。产物不经纯化用于下步反应。
按实施例1(ⅱ-ⅲ)的方法，用7.63g2-正丁基-1-(2-氯-6-氟苯基)甲基-1H-咪唑粗产物制得了2.8g2-正丁基-1-(2-氯-6-氟苯基)甲基-5-羟甲基-1H-咪唑，mp106-108℃(乙酸乙酯中结晶)。上述产物用二氧化锰氧化，并按上述的方法后处理，得0.88(63%)2-正丁基-1-(2-氯-6-氟苯基)甲基-1H-咪唑-5-甲醛，mp88-90℃(乙酸乙酯中结晶)。
用2-正丁基-1-(2-氯-6-氟苯基)甲基-1H-咪唑-5-甲醛代替2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑-5-甲醛，按实施例3的方法制得了标题化合物。
实施例13N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸用β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯代替苯丙氨酸甲酯，按实施例7的方法制得了标题化合物二盐酸盐，mp227-228℃。
实施例14N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸用α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯代替苯丙氨酸甲酯，按实施例7的方法制备了标题化合物。
实施例15N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-α-乙基苯丙氨酸按实施例4(ⅰ)方法A的方法，用α-乙基苯丙氨酸甲酯代替α-甲基苯丙氨酸甲酯，制得了N-〔｛1-(2-氯苯基)甲基-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基-α-乙基苯丙氨酸甲酯，该酯用实施例2(ⅱ)的方法水解，然后用盐酸处理，得标题化合物二盐酸盐，mp209-211℃。
实施例16N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-α-丙基苯丙氨酸按实施例15的方法，用α-丙基苯丙氨酸甲酯代替α-乙基苯丙氨酸甲酯，制得标题化合物的二盐酸盐，mp208-210℃。
实施例17N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-N-乙酰基苯丙氨酸用乙酸酐在室温下处理N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基〕乙基〕苯丙氨酸甲酯(按实施例3(ⅰ)方法A制备)，得标题化合物的N-乙酰基苯丙氨酸甲酯，按实施例2(ⅱ)的方法将该酯水解得标题化合物，非晶形固体。
实施例18N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕高苯基丙氨酸按实施例3(ⅰ)方法B和实施例2(ⅱ)的方法，用高苯基丙氨酸甲酯盐酸盐代替苯丙氨酸甲酯盐酸盐，得标题化合物的单水合物，mp123℃(软化)。
实施例19N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-α-甲基苯丙氨酸按实施例7的方法，用α-甲基苯丙氨酸甲酯代替苯丙氨酸甲酯，制得了标题化合物的二盐酸盐，mp253.5-255℃。
实施例20N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-N-甲基苯丙氨酸将N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯(按实施例3(ⅰ)方法B制备)(0.52g，1.18mmol)，88%甲酸(0.31g)和37%甲醛水溶液(0.44g)于蒸汽浴上加热18小时后，注入10%的盐酸溶液中，用乙醚提取，用10%氢氧化钠液酸化水层至pH10，用乙酸乙酯提取，用无水硫酸镁干燥，减压除去溶剂，粗产物经硅胶层析，用含50%乙酸乙酯的己烷洗脱，得0.377g(70%)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-N-甲基苯丙氨酸甲酯，按实施例2(ⅱ)的方法将其水解，得标题化合物，发泡体(0.265g，77%)，mp59-61℃。
实施例21N-〔｛1-〔(2-甲基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用2-甲基苄基溴代替2-氯苄基溴，制得了标题化合物。
实施例22N-〔｛1-〔(3-甲氧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用3-甲氧基苄基溴代替2-氯苄基溴，制得了标题化合物。
实施例23N-〔｛1-〔(4-苯基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用4-苯基苄基溴代替2-氯苄基溴，制得了标题化合物。
实施例24N-〔｛1-〔(4-甲氧基-3-甲基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用4-甲氧基-3-甲基苄基溴代替2-氯苄基溴，制得了标题化合物。
实施例25N-〔｛1-〔2-(1-金刚烷基)乙基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基苯丙氨酸于-78℃用45分钟将2-(1-金刚烷基)乙醇(10.7g)、二异丙基乙胺(11ml)和二氯甲烷(70ml)的混合物加入三氟乙(Triflic)酸酐(16.75g)的二氯甲烷(70ml)溶液中，再加入1-乙酰基-2-正丁基-5-乙酰氧甲基咪唑的二氯甲烷(50ml)溶液，于室温下放置4天，浓缩，加入10%氢氧化钠液(250ml)，于蒸汽浴上加热，用300ml水稀释，二氯甲烷提取，干燥，过滤，浓缩，得油状物，经硅胶层析，甲醇/氯仿洗脱，得5-乙酰氧甲基1-〔2-(1-金刚烷基)乙基〕-2-正丁基咪唑。将此乙酰氧基化合物(5.4g)在室温下与氢氧化钾(5.2g)的乙醇(200ml)溶液一道搅拌1小时，浓缩，倒入水中，搅拌，过滤得1-〔2-(1-金刚烷基)乙基〕-2-正丁基-5-羟甲基-1H-咪唑。
按实施例3(ⅰ)方法A的方法，用1-〔2-(1-金刚烷基)乙基〕-2-正丁基-5-羟甲基-1H-咪唑代替2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-5-羟甲基-1H-咪唑，制得了标题化合物。
实施例26N-〔｛1-〔(3-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法用3-氯苄基溴代替2-氯苄基溴制备了标题化合物。
实施例27N-〔｛1-〔(2-溴苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用2-溴苄基溴代替2-氯苄基溴，制得了标题化合物。
实施例28N-〔｛1-(2-氰基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用2-氰基苄基溴代替2-氯苄基溴，制得了标题化合物。
实施例29N-〔｛1-〔(4-氰基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用对氰基苄基溴代替2-氯苄基溴，制得了标题化合物。
实施例30N-〔｛1-〔(2-硝基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用2-硝基苄基溴代替2-氯苄基溴，制得了标题化合物。
实施例31N-〔｛1-〔(3-三氟甲基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用3-三氟甲基苄基溴代替2-氯苄基溴，制得了标题化合物。
实施例32N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例1的方法，用稀丙基溴代替丙基溴制得了标题化合物。
实施例33N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-丙烯基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用稀丙基碘化物代替正丁基碘化物制得了标题化合物。
实施例34N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代戊基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例1的方法，用1-溴戊烷代替1-溴丙烷，制得了标题化合物。
实施例35N-〔｛1-〔(2-溴苯基)甲基〕-2-硫代苄基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例1的方法，用苄基溴代替丙基溴制得了标题化合物。
实施例36N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代环己基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例1的方法，用环己基溴化物代替丙基溴制得了标题化合物。
实施例37N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-4-苯基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕苯丙氨酸按实施例7的方法，用〔2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-4-苯基-1H-咪唑-5-基〕乙酸甲酯(按美国专利4，340，598号方法制备)代替〔2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑-5-基〕乙酸甲酯，制得了标题化合物。
实施例38N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代庚基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例1的方法，用1-溴庚烷代替1-溴丙烷，制得了标题化合物。
实施例39N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代己烯基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例1的方法，用6-溴己烯代替溴丙烷制得了标题化合物。
实施例40N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代环丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例1的方法，用溴代环丙烷代替溴代丙烷制得了标题化合物。
实施例41N-〔｛1-〔(2-硝基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯基丙氨酸按实施例3的方法，用2-硝基苄基溴代替2-氯苄基溴制得了标题化合物。
实施例42N-〔｛1-〔(2-三氟甲基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用2-三氟甲基苄基溴代替2-氯苄基溴，制得了标题化合物。
实施例43N-〔｛1-〔(2，3-二氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用2，3-二氯苄基溴代替2-氯苄基溴制得了标题化合物。
实施例44N-〔｛1-〔(2-甲氧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用2-甲氧基苄基溴代替2-氯苄基溴，制得了标题化合物。
实施例45N-〔｛1-〔(3-甲氧苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用3-甲氧基苄基溴代替2-氯苄基溴，制得了标题化合物。
实施例46N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-(2-噻吩基)甲基-α-(1H-四唑-5-基)甲胺将实施例5制备的N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸(4.3mmol)混悬于苯(20ml)中，加入亚硫酰氯(12.9mmol)，加热至50℃反应90分钟，蒸发至油状残余物。将残余物溶于己烷，再蒸发，用浓氢氧化铵(40ml)处理该酰氯，于室温下搅拌16小时，滤出固体，水洗，于50℃真空干燥，得伯酰胺。
充氩下于0℃将草酰氯(98%，13.5mmol)加入二甲基甲酰胺(14.2mmol)的乙腈(50ml)溶液中，3分钟后，通过漏斗将上述制备的酰胺的二甲基甲酰胺(20ml)溶液加入。5分钟后，加入吡啶(27.2mmol)，于0℃再搅拌5分钟，用乙酸乙酯和50%的氯化铵水溶液提取。用水和食盐水洗乙酸乙酯层，用无水硫酸钠干燥，蒸发得相应的腈衍生物。
充氩和搅拌下，将四氢呋喃(16ml)加入上述制备的腈(6.44mmol)和氯化铝(13.0mmol)的混合物中，一次加入叠氮化钠(58.3mmol)，然后用2ml四氢呋喃冲洗，加热至65℃反应22小时，冷却至室温，用乙酸乙酯(20ml)稀释反应混合物，并用10%盐酸(20ml)处理，同时剧烈搅拌5分钟，用水和食盐水洗乙酸乙酯层，用无水硫酸钠干燥，蒸发得N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-(2-噻吩基)甲基-α-(1H-四唑-5-基)甲胺实施例47N-〔｛1-〔(2，3-二氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-(苯基)甲基-α-(1H-四唑-5-基)甲胺按实施例46的方法，用N-〔｛1-〔2，3-二氯苯基)甲基-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸(实施例43制备)代替N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸，制得了标题化合物。
实施例48N-〔｛1-〔(2-硝基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-(苯基)甲基-α-(1H-四唑-5-基)甲胺按实施例46的方法，用N-〔｛1-〔(2-硝基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸(实施例41制备)代替N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸制得了标题化合物。
实施例49N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-α-(苯基)甲基-α-(1H-四唑-5-基)甲胺按实施例46的方法，用N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕苯丙氨酸(实施例7制备)代替N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(噻吩基)丙氨酸，制得了标题化合物。
实施例50N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-(3-噻吩基)甲基-α-(1H-四唑-5-基)甲胺按实施例46的方法，用N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(3-噻吩基)丙氨酸(由实施例9制备)代替N-〔(1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸，制得了标题化合物。
实施例51N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-(苯基)甲基-α-(1H-四唑-5-基)甲胺按实施例46的方法，用N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸(实施例3制备)代替N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸制得了标题化合物。
实施例52N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-(2-呋喃基)甲基-α-(1H-四唑-5-基)甲胺按实施例46的方法，用N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝-β-(2-呋喃基)丙氨酸(实施例10制备)代替N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸，制得了标题化合物。
实施例53N-〔｛1-〔(4-羧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸按实施例3〔(ⅰ)方法B和(ⅱ)〕的方法，用4-甲酯基苄基溴代替2-氯苄基溴，β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯和硼氢化钠分别代替苯丙氨酸甲酯和氰基硼氢化钠，制得了标题化合物，mp151-152℃。
实施例54L-N-〔｛1-〔(4-羧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝〕苯丙氨酸按实施例3〔(ⅰ)方法A和(ⅱ)〕的方法，用4-甲酯基苄基溴和L-苯丙氨酸甲酯代替2-氯苯甲基溴化物和苯丙氨酸甲酯，制得了标题化合物，〔α〕25＝+32.5°(甲醇)，mp231-232℃(盐酸盐)。
实施例55D-N-〔｛1-〔(4-羧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3〔(ⅰ)方法A和(ⅱ)〕的方法，用4-甲酯基苄基溴和D-苯丙氨酸甲酯分别代替2-氯苄基溴和苯丙氨酸甲酯，制得了标题化合物，〔α〕25＝-28.9°(甲醇)，mp232-233℃(盐酸盐)实施例56N-〔2-｛1-〔(4-羧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸按实施例7的方法，用〔2-正丁基-1-(4-甲酯基苯基)甲基-1H-咪唑-5-基〕乙酸甲酯代替〔2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑-5-基〕乙酸甲酯，制得了标题化合物。
实施例57给予活性的式(Ⅰ)化合物的口服剂型按下法制备将配比的各成份过筛，混合并填充入硬胶囊中，所述配比各成份举例如下成份 用量N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基- 100mg1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸硬脂酸镁 10mg乳糖 100mg实施例58将蔗糖、硫酸钙二水合物和口服的活性式(Ⅰ)化合物混合，用10%明胶溶液制粒，将湿粒过筛，干燥，与淀粉、滑石粉和硬脂酸混合，过筛，压成片。
成份 用量N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕- 75mg2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸硫酸钙二水合物 100mg蔗糖 15mg淀粉 8mg滑石粉 4mg硬脂酸 2mg实施例59将N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基苯丙氨酸(50mg)分散于25ml生理盐水中，制备注射剂。
实施例60在无菌条件下混合下述成份，制得给予式(Ⅰ)化合物的局部眼科用溶液成份 含量(mg/ml)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕 1.0-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸磷酸氢二钠 10.4磷酸二氢钠 2.4
成份 含量(mg/ml)氯代丁醇 5.0羟丙醇甲基纤维素 5.0灭菌水 加至 1.0ml1.0N氢氧化钠 调pH至7.4应该指出的是本发明范围和权利并不局限于上述的实施例，它包括下述权利要求范围内的所有改良。
权利要求
1.制备式(Ⅰ)化合物及其药学上可接受盐的方法，式(Ⅰ)为
式中R是金刚烷基甲基，或苯基，联苯基或萘基，上述的每个芳基可以是未取代芳基或者被1-3个下列基团取代，这些基团选自Cl、Br、F、I、C1-6烷基、硝基、CO2R7、C1-6烷氧基、羟基、SC1-6烷基、SO2C1-6烷基、四唑-5-基、SO2NHR7、NHSO2R7、SO3H、PO(OR7)2、CONR7R7、CN、NR7R7、NR7COH、NR7COC1-6烷基、NR7CON(R7)2、NR7COW、SO2W或W；R1是C2-10烷基，C3-10链烯基，(CH2)0-8C3-6环烷基，或被下述1-3个基团取代或未取代的(CH2)0-8苯基，所述基团选自C1-6烷基、硝基、Cl、Br、F、I、羟基、C1-6烷氧基、NR7R7、CO2R7、CN、CONR7R7、W、NR7COH、NR7COC1-6烷基、NR7COW、SC1-6烷基、SO2W或SO2C1-6烷基；R2是氢，Cl，Br，F，I，CHO，羟甲基，C1-6烷基，NR7R7，CO2R7，CONR7R7，NO2，CN，苯基或W；X是单键，S或O；R3是H，C1-6烷基，C3-6链烯基，COC1-5烷基或(CH2)0-3苯基；R4是H，C1-6烷基，C3-6链烯基，或(CH2)0-3苯基；R5是CO2R7，CONR7R7或四唑-5-基；每个n分别是0-4；R6是苯基，萘基，2-或3-噻吩基，2-或3-呋喃基，2-，3-或4-吡啶基，嘧啶基，咪唑基，噻唑基，三唑基，四唑基，吡唑基，吡咯基，噁唑基或异噁唑基，上述每个芳基或杂芳基可以是未取代的或者被下列基团取代C1-6烷基、C1-6烷氧基、Cl、Br、F、I、NR7R7、CO2R7、CONR7R7、SO3H、SO2NHR7、OH、NO2、W、SO2C1-6烷基、SO2W、SC1-6烷基、NR7COH、NR7COW或NR7COC1-6烷基；W是CmF2m+1，其中m是1-4；和每个R7分别是H或C1-6烷基，该方法包括在碱的存在下将式(Ⅱ)化合物与式(Ⅲ)化合物反应，式(Ⅱ)为
式中R4、R6和n的定义同前，式(Ⅲ)为
式中R1、R2、X和n的定义同前，R的定义除了不包括四唑-5-基、OH或CO2H外，其余同前；然后，必要时进行下述反应(ⅰ)将氮原子上的R3取代基是H的式(Ⅰ)化合物在碱的存在下与C1-5C(O)卤化物反应，制备R3是COC1-5烷基的式(Ⅰ)化合物；(ⅱ)将R取代基是C1-6烷氧基的式(Ⅰ)化合物去保护，制备R取代基是羟基的式(Ⅰ)化合物；(ⅲ)将R取代基是CO2C1-6烷基的式(Ⅰ)化合物水解，制备R取代基是羧基的式(Ⅰ)化合物；(ⅳ)将R取代基是氰基的式(Ⅰ)化合物与叠氮化物反应，制备R取代基是四唑-5-基的式(Ⅰ)化合物；(Ⅴ)将R5取代基是CO2C1-6烷基的式(Ⅰ)化合物水解，制备R5取代基是羧基的式(Ⅰ)化合物；(ⅵ)用卤化剂处理R5是CO2H的式(Ⅰ)化合物，然后再与适宜的取代胺反应，制备R5是CONR7R7的式(Ⅰ)化合物，式中R7是氢或C1-6烷基；(ⅶ)用草酰氯/二甲基甲酰胺处理R5是CONH2的式(Ⅰ)化合物，然后再与叠氮化物反应，制备R5是四唑-5-基的式(Ⅰ)化合物；和最后，将制得的式(Ⅰ)化合物任意地制成药学上可以接受的盐。
2.按照权利要求1的方法，制备下述化合物及其药学上可接受的盐，即式(Ⅰ)中R是苯基或由1至3个下述基团取代的苯基，所述基团选自氯、氟、硝基、甲基、三氟甲基、甲氧基、羟基、磺酰氨基、氨磺酰基、氰基、羧基、羰基C1-6烷氧基、氨甲酰基、或四唑-5-基;R1是C2-8烷基;X是单键或S;R2是氢、氯、氟或三氟甲基;R3是氢、甲基、或COC1-5烷基;R4是氢或C1-3烷基;R5是CO2H或四唑-5-基;R6是苯基或2-噻吩基;每个n分别是1或2。
3.按照权利要求1的方法，制备N-〔｛1-〔(4-羧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸和其药学上可接受的盐。
4.按照权利要求1的方法，制备N-〔｛1-〔(4-羧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸及其药学上可接受的盐。
5.按照权利要求1的方法，制备下列化合物及其药学上可接受的盐N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸;N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基苯丙氨酸N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸;N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-N-丁酰基苯丙氨酸;N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕苯丙氨酸N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸;N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸;N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-乙基苯丙氨酸;N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-丙基苯丙氨酸;N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-N-乙酰基苯丙氨酸;N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕高苯丙氨酸;N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-α-甲基苯丙氨酸;N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-N-甲基苯丙氨酸。
6.制备N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸的方法，该方法包括将2-正丁基-1-(4-甲酯基苯基)甲基-5-氯甲基-1H-咪唑与苯丙氨酸甲酯反应，然后进行酯水解。
7.制备N-〔｛1-〔(4-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸的方法，该方法包括将2-正丁基-1-(4-甲酯基苯基)甲基-5-氯甲基-1H-咪唑与β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯反应，然后进行酯水解反应。
8.制备药用组合物的方法，该方法包括将权利要求1的式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受盐与药学上可接受的载体混合。
9.将权利要求1的式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐用于制备治疗疾病的药物，所述疾病包括需要拮抗血管紧张素Ⅱ受体来治疗的疾病。
10.将权利要求1的式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐用于制备治疗高血压的药物。
全文摘要
本发明公开了具有式(I)结构的血管紧张素II受体拮抗剂及含有这些拮抗剂的药用组合物和用这些化合物对哺乳动物产生血管紧张素II受体拮抗作用的方法。本发明化合物用于调节高血压和治疗充血性心衰、肾衰和青光眼。式(I)为
文档编号C07D405/14GK1051555SQ9010894
公开日1991年5月22日 申请日期1990年11月6日 优先权日1989年11月6日
发明者杰拉尔德·罗伯特·吉拉德, 戴维·泰勒·希尔, 约瑟夫·温斯托克 申请人:史密丝克莱恩比彻姆公司
技术领域：
本发明涉及新的取代的N-(咪唑基)烷基丙氨酸衍生物，这类衍生物是血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂，可用于调节由血管紧张素Ⅱ引起的或加重的高血压，也可用于治疗充血性心衰、肾衰和青光眼。本发明还涉及含有取代的N-(咪唑基)烷基丙氨酸衍生物的药用组合物和用这些化合物作为血管紧张素Ⅱ的拮抗剂、抗高血压剂和充血性心衰、肾衰及青光眼的治疗剂的方法。
称之为肽加压激素类具有血管加压作用，这一作用与人类高血压的病因学有关。肾素一血管紧张素系统的不适当的活性似乎是自发性高血压、充血性心衰和某些肾病的关键因素。除了直接作用于动脉和小动脉外，作为已知的最有效的内源性血管收缩剂之一的血管紧张素Ⅱ(AⅡ)能刺激肾上腺皮质的醛甾酮释放。因此，由于它参与肾钠处理的控制，肾素-血管紧张素系统在心血管的内环境稳定中起重要作用。
用转换酶抑制剂(例如Captopril)阻断肾素-血管紧张素系统已经证明在高血压和充血性心衰的临床治疗中是有效的〔Abrams，W.B.，et al.，(1984)，Federation Proc.，43，1314〕。抑制肾素-血管紧张素系统的最直接的途径是阻断AⅡ对受体的作用。令人信服的证据表明AⅡ也引起肾血管收缩和钠潴留，后者是许多失调(如心衰、肝硬变和妊娠综合症)的特征〔Hollenberg，N.K.，(1984)，J.Cardiovas.Pharmacol.，6，S176〕。此外，最近的动物研究表明肾素-血管紧张素系统的抑制可以有益于停止或减慢慢性肾衰的发展〔Anderson，S.，et al.，(1985)，J.Clin.Invest.，76，612〕。最近的专利申请(南非专利，申请号为87/01，653)要求授权AⅡ拮抗剂用于降低和控制哺乳动物升高的眼内压，特别是青光眼。
本发明化合物能抑制、阻断和拮抗激素AⅡ的作用，因此用于调节和改善血管紧张素诱导的高血压、充血性心衰、肾衰、青光眼和由于AⅡ引起的其它疾病。当将本发明化合物给予哺乳动物时，可降低AⅡ导致的高血压，并能减小或控制AⅡ导致的其它症状。预计本发明化合物也可能有利尿作用。
阻断和抑制AⅡ作用的重要性的认识激励人们努力合成AⅡ拮抗剂。下述文献公开了咪唑衍生物，它们具有AⅡ阻断活性，用作抗高血压剂。
美国专利4，340，598号公开了取代的咪唑-5-基烷酸及其酰胺和低级烷基酯衍生物，其结构式如下
式中R1是低级烷基或任意被卤素或硝基取代的苯基C1-2烷基;
R2是低级烷基，环烷基或任意取代的苯基;
R3和R4中之一是-(CH2)nCOR5，其中R5是氨基、低级烷氧基或羟基，n是0-2;R3和R4的另一个是氢或卤素。
实例包括1-苄基-2-正丁基-4-氯咪唑-5-乙酰胺和1-苄基-2-正丁基-5-氯咪唑-4-乙酸。
美国专利4，355，040号公开了1-苄基咪唑-5-基乙酸衍生物，其结构式为
式中R1是低级烷基、环烷基或任意取代的苯基;X1、X2和X3分别是氢，卤素，硝基，氨基，低级烷基，低级烷氧基，苄氧基或羟基;Y是卤素和R2是氢或低级烷基。具体化合物是1-(2-氯苄基)-2-正丁基-4-氯咪唑-5-乙酸。
欧洲专利申请103，647号公开了下式所示取代的1-苄基-2-苯基-4-氯-咪唑-5-基乙酸衍生物
式中R是低级烷基。具体公开的化合物是4-氯-1-(4-甲氧基-3-甲基苄基)-2-苯基咪唑-5-乙酸。
欧洲专利申请245，637号公开了下式的取代的4，5，6，7-四氢-1H-咪唑并〔4，5-C〕吡啶衍生物
式中
是单键或双键;有一个R1存在并代表下述基团，例如任意取代的(CH2)1-6萘基、(CH2)1-6杂芳基或(CH2)1-6苯基;R3包括下述基团，例如COC1-15烷基或任意取代的(CH2)1-6Ph;R4包括CO2R9，其中R9是氢、低级烷基或苄基;n是0-3。公开的具体化合物是5-〔(4-硝基苯基)乙酰基〕-1-(苯甲基)-4，5，6，7-四氢-1H-咪唑并〔4，5-C〕吡啶-6-羧酸。
欧洲专利申请253，310号公开了下式的取代的1-芳基咪唑
式中R1包括下述基团，例如任意取代的苯基或金刚烷基甲基;R2包括下列基团，例如氢、卤素、NO2、C1-4烷基、或C1-4烷氧基;R3是氢、卤素、C1-4烷基，或C1-4烷氧基;R6包括下列基团，例如C2-10烷基、C3-10链烯基、C3-8环烷基、任意取代的苄基或Z(CH2)1-5R5，其中Z是0或S，R5是氢、C1-6烷基、C3-6环烷基或链烯基;R7是氢、卤素、NO2、CF3或CN;和R8包括下列基团例如C1-10烷酸、酯和酰胺和烷基N-烷基氨基甲酸酯。实例包括2-正丁基-5-氯-1-(4-硝基苄基)咪唑-4-乙酸，1-〔(2′-羧基联苯基-4-基)甲基〕-正丁基-4-氯咪唑-5-羧酸甲酯。
英国专利1，341，375号描述了一系列取代的咪唑化合物，由于它们对H-1，H-2和/或其他组胺受体有活性，所以它们是有用的。在该专利中公开的取代的氨基烷基咪唑化合物的结构式如下
式中A是任意被烷基或芳烷基取代的C1-6烷基;R是取代或未取代的烷基，芳基或芳烷基;R1是氢，烷基，苯基，苯烷基或咪唑烷基;R20是氢，可任意被卤素、OH、CN、CO2H、NH2或CONH2取代的烷基，或COY，其Y是R11O或R11NH，R11是取代或未取代的烷基、芳基、芳烷基或氨基;X是0-3。实例包括N-〔2-〔4(5)-咪唑基〕乙基〕甘氨酸和1-苄基-5-(2-氨乙基)咪唑。
下式代表的本发明化合物及其药学上可接受的盐是血管紧张素Ⅱ受体的阻断剂
式中R是金刚烷基甲基，或苯基，联苯基或萘基，上述的每个芳基可以是未取代芳基或者被1-3个下列基团取代，这些基团选自Cl、Br、F、I、C1-6烷基、硝基、CO2R7、C1-6烷氧基、羟基、SC1-6烷基、SO2C1-6烷基、四唑-5-基、SO2NHR7、NHSO2R7、SO3H、PO(OR7)2、CONR7R7、CN、NR7R7、NR7COH、NR7COC1-6烷基、NR7CON(R7)2、NR7COW、SO2W或W;
R1是C2-10烷基，C3-10链烯基，(CH2)0-8C3-6环烷基，或被下述1-3个基团取代或未取代的(CH2)0-8苯基，所述基团选自C1-6烷基、硝基、Cl、Br、F、I、羟基、C1-6烷氧基、NR7R7、CO2R7、CN、CONR7R7、W、NR7COH、NR7COC1-6烷基、NR7COW、SC1-6烷基、SO2W或SO2C1-6烷基;
R2是氢，Cl，Br，F，I，CHO，羟甲基，C1-6烷基，NR7R7，CO2R7，CONR7R7，NO2，CN，苯基或W;
X是单键，S或0;
R3是H，C1-6烷基，C3-6链烯基，COC1-5烷基或(CH2)0-3苯基;
R4是H，C1-6烷基，C3-6链烯基，或(CH2)0-3苯基;
R5是CO2R7，CONR7R7或四唑-5-基;
每个n分别是0-4;
R6是苯基，萘基，2-或3-噻吩基，2-或3-呋喃基，2-，3-或4-吡啶基，嘧啶基，咪唑基，噻唑基，三唑基，四唑基，吡唑基，吡咯基，噁唑基或异噁唑基，上述每个芳基或杂芳基可以是未取代的或者被下列基团取代C1-6烷基、C1-6烷氧基、Cl、Br、F、I、NR7R7、CO2R7、CONR7R7、SO3H、SO2NHR7、OH、NO2、W、SO2C1-6烷基、SO2W、SC1-6烷基、NR7COH、NR7COW或NR7COC1-6烷基;
W是CmF2m+1，其中m是1-4;和每个R7分别是H或C1-6烷基。
式(Ⅰ)代表的本发明优选化合物是下述化合物及其药学上可接受的盐或水合物，即其中R是未取代或取代苯基，若被取代时则可被1-3个下列基团取代氯、氟、硝基、甲基、三氟甲基、甲氧基、羟基、磺酰氨基、氨磺酰基、羧基、羰C1-4烷氧基、氨甲酰基、氰基或四唑-5-基;
R1是C2-8烷基;
X是单键或S;
R2是氢，氯，氟或三氟甲基;
R3是氢，甲基，或COC1-5烷基;
R4是氢，或C1-3烷基;
R5是CO2H或四唑-5-基;
R6是苯基或2-噻吩基;和每个n分别是1或2。
本文采用的烷基、链烯基、烷氧基和链炔基等词的含义是直链或支链碳链，其长度由位于该词前面的数字标出。式(Ⅰ)化合物的范围包括它们的外消旋混合物和单一的对映体化合物，D对映体的活性一般较强，因此，D对映体优于L对映体。
本发明的具体化合物包括(但不是限制于)下列化合物及其药学上可接受的盐和水合物N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基苯基丙氨酸，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯基丙氨酸，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯基丙氨酸，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-N-丁酰基苯基丙氨酸，N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸，N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸，
N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-乙基苯基丙氨酸，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-丙基苯基丙氨酸，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-N-乙酰基苯基丙氨酸，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕高苯基丙氨酸，N-〔｛1-〔(4-羧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯基丙氨酸，N-〔｛1-〔(4-羧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩)丙氨酸，和N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-N-甲基苯基丙氨酸。
本发明还涉及含有药用载体和有效量式(Ⅰ)化合物的药用组合物。
本发明还包括拮抗血管紧张素Ⅱ受体的方法，它包括将有效量的式(Ⅰ)化合物给予需要该化合物的受试者。本发明还包括产生抗高血压活性的方法和用本发明化合物治疗充血性心衰、肾衰和青光眼的方法。
本发明的化合物和药用组合物及本发明方法按本文描述的方法制备或实施，并用实例解释之。试剂、咪唑环上的保护基和官能团及分子的其它部分必须与指出的化学位移一致。合成的步骤必须符合咪唑环及分子的其它部分上的官能团和保护基。
下面的方法可用于制备式(Ⅰ)化合物，具体地讲用于制备下述化合物即式中R是2-氯苯基或4-羧基苯基;R1是正丙基或正丁基;X是单键或S;R2是氢、氯或氟;R3是氢、甲基或COC1-5烷基;R4是氢或C1-3烷基;R5是CO2H或四唑-5-基;R6是苯基或2-噻吩基;每一个n分别是1或2。
起始原料2-R1X-咪唑是本专业熟知的(J.Org.Chem.454038，1980)，可按已知方法合成。例如，按下法可将咪唑转变成2-正丁基咪唑，即，将咪唑与原甲酸三乙酯和对甲苯磺酸反应得二乙氧基原甲酰胺咪唑，然后用正丁基锂处理得该原甲酰胺咪唑的2-锂衍生物，再用正丁基碘于适宜溶剂〔如四氢呋喃(THF)〕中烷基化。
通过已知方法将1-R(CH2)1-4基团连于2-R1X-咪唑上，例如，用R-(CH2)1-4溴化物、甲磺酸酯或乙酸酯(如2-氯苄基溴)，于适宜溶剂〔如二甲基甲酰胺(DMF)〕中，在适宜的酸受体(如烷基钠、碳酸钠或钾、金属氢化物，最好是氢化钠)存在下，于25-100℃(最好是50℃)反应。得到的1-R(CH2)1-4-2-R1X-咪唑按下法进行5-位的羟甲基化例如，在乙酸钠存在下于乙酸中与甲醛反应，得到1-R(CH2)1-4-2-R1X-5-羟甲基咪唑中间体。
另外，按下法可制得1-R(CH2)1-4-2-R1-5-羟甲基咪唑中间体将亚氨基醚，R1-C(＝NH)-O-烷基(例如正戊脒甲基醚)于液氨中加压下与二羟基丙酮反应，得2-R1-5-羟甲基咪唑。二乙酸酯中间体用三氟乙酸(triflate)2-氯苄酯进行N-烷基化，再用碱水(如10%NaOH液)处理得到的1-R(CH2)1-4-2-R1-5-乙酰氧基甲基咪唑，得1-R(CH2)1-4-2-R1-5-羟甲基咪唑中间体。
按美国专利4，194，049号中描述的方法可制得式中R基团直接与咪唑环氮原子相连接的化合物。例如，在路易斯酸(如盐酸，氯化锌或氯化铝)存在下，于惰性溶剂(如四氢呋喃，二氯甲烷或甲苯)中，在25-150℃下将适宜取代的苄胺与R1-腈(如戊腈)反应。得到的脒在适宜溶剂(如C1-4烷醇)与卤代丙醛(如溴代丙醛)反应，被转变成1-R-2-R1-咪唑5-甲醛衍生物。在有机溶剂(如C1-4烷醇)中，用金属氢化物还原剂(如硼氢化钠)将5-甲醛化合物还原，可制得5-羟甲基咪唑。
此外，按下法可制备2-R1S-咪唑化合物在碱(如三乙胺)存在下，于适宜溶剂(如二甲基甲酰胺)中用氯乙酸C1-6烷基酯(如氯乙酸甲酯)使被1-3个取代基取代的苄胺烷基化、所述取代基选自卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、NO2、SC1-6烷基、SO2C1-6烷基、或CmF2m+1，式中m是1-4。制得的烷氨基烷基酯化合物在适宜溶剂(如二甲苯)中用甲酸对氨基和酯基进行N-处理，然后进行α-碳原子的C-处理。该中间体在惰性有机溶剂(如C1-4烷醇)中与酸性硫代氰酸盐(最好是硫代氰酸钾)反应产生1-RCH2-2-巯基-5-烷酸酯咪唑化合物。在适宜碱(如碳酸钠)存在下，于适宜溶剂中，将酯基咪唑化合物的游离巯基与卤素-R8化合物(最好是正丙基溴)反应，其中R8是C2-10烷基、C3-10链烯基、(CH2)0-8C3-6环烷基或适宜取代的(CH2)0-8苯基。在适宜的溶剂(如四氢呋喃)中，于-78℃至25℃(最好低于-10℃)下，用适宜试剂(最好是氢化二异丁基铝)将上述的酯还原成5-羟甲基咪唑中间体。
上述中间体的5-羟甲基与卤化剂(如亚硫酰氯)反应得取代的5-氯甲基咪唑，它再与式(Ⅱ)的胺反应
式中R4、R6和n的定义同式(Ⅰ)化合物。所述胺是D，L-，D-或L-β-芳基或β-杂芳基丙氨酸酯，它与5-氯甲基化合物在碱的存在下(如三乙胺)于适宜溶剂(最好是二甲基甲酰胺)中，在0-110℃(最好在90℃)反应。当与氮原子连接的R4取代基是H时，上述产物胺在碱(如三乙胺)存在下，于惰性溶剂(最好是二氯甲烷)中任意与C1-5C(O)卤化物(如丁酰氯)反应，得酰胺。得到的取代的式(Ⅰ)酯化合物在适宜溶剂(最好是C1-4烷醇)中用碱水(如NaOH或KOH水溶液)水解成相应的式(Ⅰ)羧酸。
此外，在四氢呋喃中用适宜试剂(如脱水铬酸-硅胶)处理，最好是在适宜溶剂(如苯，二氯甲烷，二甲苯，优选的是甲苯)中于25-140℃(优选的是约100℃)下用活化的二氧化锰处理，1-R(CH2)n-2R1X-5-羟甲基咪唑中间体的羟甲基可被氧化成醛基。1-R(CH2)n-2-R1X-咪唑-5-甲醛按上述方法与式(Ⅱ)胺化合物反应，得亚胺化合物，后者于适宜溶剂(如C1-4烷醇)中用适当的试剂(如碱性硼氢化物，优选的是氰基硼氢化钠)还原，可得到式(Ⅰ)的酯化合物。按上述方法也可制得式(Ⅰ)的N-酰化和羧酸化合物。
用上述方法，以相应的烷酸酯(参见美国专利4，340，598号)为原料可制得咪唑环5-位的亚烷基桥n为2或3的式(Ⅰ)化合物。
用醚裂解剂(如三溴化硼或硼酸)可将R为C1-6烷氧基的式(Ⅰ)化合物转变成R为羟基的式(Ⅰ)化合物。
R为CO2C1-6烷基的式(Ⅰ)化合物于甲醇或乙醇中用氢氧化钠或钾水溶液碱水解，或于盐酸水溶液中酸水解，可制备R为羧基的式(Ⅰ)化合物。
式(Ⅰ)的四唑化合物按下法制备将上述的式(Ⅰ)的酸化合物于适宜溶剂(如苯)中与卤化剂(如亚硫酰氯)反应，得相应的酰卤化合物。后者与浓氨水反应被转变成伯酰胺化合物，接着该酰胺于乙腈/二甲基甲酰胺中用草酰氯/二甲基甲酰胺脱氢得腈类化合物，它是合成式(Ⅰ)的四唑化合物的前体。该腈于适宜溶剂(四氢呋喃)中与叠氮化物(最好是由叠氮化钠和氯化铝反应直接制备的叠氮化铝)反应，得到四唑化合物。
按本专业已知的方法，用适宜的有机或无机酸，可制得式(Ⅰ)化合物药学上可接受的酸成盐。例如，本发明的碱在水混溶的溶剂(如乙醇)中与适宜的无机或有机酸反应，然后除去溶剂，分离出生成的盐，或者在酸能溶的水不混溶溶剂(如乙醚或氯仿)中反应，直接分离或除去溶剂后分离出生成的盐。适宜酸的代表实例是马来酸，富马酸，苯甲酸，抗坏血酸，Pamoic acid，琥珀酸，双亚甲基水杨酸，甲磺酸，乙二磺酸，乙酸，丙酸，酒石酸，水杨酸，柠檬酸，葡萄糖酸，天冬氨酸，硬脂酸，棕榈酸，衣康酸，乙醇酸，对氨基苯甲酸，谷氨酸，苯磺酸，盐酸，溴氢酸，硫酸，环己基氨磺酸，磷酸和硝酸。
按已知方法，用有机或无机碱，包括无毒的碱金属和碱土金属碱(例如钙、锂、钠和钾氢氧化物)、氢氧化铵和无毒的有机碱(如三乙胺，二环己基胺，丁胺，哌嗪，麦格鲁胺(meglumine)，胆碱，二乙醇胺和三甲胺)，可制得具有羧基的式(Ⅰ)化合物的药学上接受的碱成盐。
用体外和体内方法评价了式(Ⅰ)化合物的抗血管紧张素Ⅱ的活性。用本发明化合物与125Ⅰ-血管紧张素Ⅱ竞争性键合于血管的血管紧张素Ⅱ受体上的能力和它们阻断兔离体主动脉对血管紧张素Ⅱ的收缩反应的能力来测定体外拮抗活性。体内活性是用本发明化合物抑制清醒大鼠对外源性血管紧张素Ⅱ的升压反应和降低肾素依赖的高血压型大鼠血压的效率来评价的。
键合放射标记的键合测定是对前人描述方法(参见Cunther et al.，CirC.ReS.47278，1980)的改良。将大鼠肠系膜动脉的特定部分于Tris缓冲液中与80PM125Ⅰ-血管紧张素Ⅱ在25℃保温1小时，溶液中加有或不加血管紧张素Ⅱ拮抗剂。迅速过滤保温液，用r-计数器将收集于滤纸上的键合125Ⅰ-血管紧张素Ⅱ受体定量，用IC50表示血管紧张素Ⅱ拮抗剂的效力，即替代50%的特异性键合血管紧张素Ⅱ所需的拮抗剂浓度。本发明化合物的IC50实例是约0.6-30μM。
主动脉用兔主动脉测量本发明化合物对血管紧张素Ⅱ诱导的血管收缩的拮抗能力。切一段兔胸主动脉管，放于装有生理盐水的器官浴中。将主动脉管固定于金属支承物上，并与连有记录器的力量转换器相接。记录无拮抗剂情况下或与拮抗剂一起保温30分钟后对血管紧张素Ⅱ的累积浓度反应曲线。用平均有效浓度通过剂量比率方法计算拮抗剂的解离常数(KB)。本发明化合物的KB举例是约0.15-15μM。
清醒大鼠对血管紧张素Ⅱ的升压反应的抑制对大鼠的中心股动脉和股静脉以及胃分别插管(参见Cellai et al.，Kidney Int.1549，1977)。手术2-3天后将大鼠放于固定笼中，用压力换能器连续地监测血压并用多种波动记录仪记录。比较在静注或口服(剂量为3-300mg/kg)本发明化合物前后的不同时间大鼠对静注血管紧张素Ⅱ(剂量为250mg/kg)所引起的平均动脉压变化。对血管紧张素Ⅱ产生50%抑制作用所需的化合物剂量(即IC50)被用来评价该化合物的效力。N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸的IC50是11mg/kg(静注)和45mg/kg(口服)。
抗高血压活性通过测定本发明化合物降低清醒大鼠平均动脉压的能力来评价它们的抗高血压活性，所述清醒大鼠是通过结扎左肾动脉而获得肾素依赖型高血压模型的(参见Cangiano et al.，J.Pharmacol.Exp.Ther.208310，1979)。按上述方法将肾动脉结扎的大鼠进行中心插管，在肾动脉结扎7-8天后，此时血浆肾素浓度最高，将清醒大鼠放于固定器中，连续地记录静注或口服本发明化合物前后的平均动脉血压。降低平均动脉血压30mmHg所需的化合物剂量(IC30)被用作药效的评价指标。N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基咪唑-5-基｝甲基-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸的IC30为15mg/kg(静注)和70mg/kg(口服)。
本发明采用的眼内压降低作用可按Watkins等人描述的方法测定，参见J.Ocular Pharmacol.，1(2)161-168(1985)。
式(Ⅰ)化合物被掺入方便的剂型中，例如注射剂，对于口服的活性化合物而言，制成胶囊或片剂。采用固体或液体的药用载体。固体载体包括淀粉，乳糖，硫酸钙二水合物，石膏粉，蔗糖，滑石粉，明胶，琼脂，果胶，阿拉伯树胶，硬脂酸镁和硬脂酸。液体载体包括糖浆，花生油，橄榄油，食盐水和水。同样，载体或稀释剂也可包括各种延长释放物质，例如甘油单硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯，单独使用或与蜡混合使用。固体载体的用量是可变的，但最好是每剂量单位含约25mg至1g。用液体载体时，剂型最好是糖浆，酏剂，乳化剂，软明胶胶囊，灭菌注射液(如安瓿)，或水的或非水的液体混悬液。
就局部的眼科给药而言，适用的药用组合物包括溶液，混悬液，油膏和固体插入物。典型的药学上可接受的载体是例如，水，水与水可混溶溶剂(如低级烷醇或植物油)的混合物，水溶的眼科学可接受的无毒聚合物(如纤维素衍生物，例如甲基纤维素)。药用制剂也可含有无毒的辅剂，例如乳化剂，防腐剂，润湿剂，稠化剂(如聚乙二醇)，抗菌剂(如季铵化合物)，缓冲剂(如碱金属氯化物)，抗氧化剂(如偏亚硫酸氢钠)，和其它常规成分(如山梨醇单月桂酸酯)。
此外，就本发明目的而言，适宜的眼用载体可用作载体介质，包括常用的磷酸盐缓冲载体系统。
药用制剂也可以是固体插入剂型，例如可采用水溶的固体聚合物作为药物载体。还可采用水不溶的固体插入剂，例如由亚乙基乙烯乙酸酯共聚物制备的固体插入剂。
药用制剂可按下述的常规制药技术制得就片剂而言，必要时包括混合、制粒和压片;或者是通过混合，填充和溶解各成分，以得到理想的口服、非肠道或局部应用的产品。
在药物剂量单位中，如上所述，式(Ⅰ)化合物的剂量是一个有效无毒量，其范围是0.01-200mg活性化合物/kg体重，最好为0.1-100mg/kg。选定的剂量通过口服、直肠、局部、注射或连续灌输，给予需要拮抗血管紧张素受体的病人，每天1-6次。人用的口服剂量单位最好含有10-500mg活性化合物。一般非肠道给药的剂量较低。采用口服给药对病人来说是安全、有效和方便的。局部用制剂含有0.0001-0.1(W/V%)的活性成分，最好含0.0001-0.01(W/V%)。作为用于人眼的局部剂量单元剂型，其活性化合物的含量在50ng至0.05mg之间，最好为50ng-5μg。
本发明拮抗哺育动物(包括人)的血管紧张素Ⅱ受体的方法包括将有效量的式(Ⅰ)化合物施予需要这种拮抗的受试者。本发明产生抗高血压活性的方法和治疗充血性心衰、青光眼及肾衰的方法包括将有效量的式(Ⅰ)化合物给予需要预定活性的受试者，以产生所述的活性。
下述实施例解释本发明化合物和药用组合物的制备。这些实施例对上述的和下面要求授权的本发明范围并不构成限制。
实施例1N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸(ⅰ)5-羧甲基-1-(2-氯苯基)甲基-2-硫代-1H-咪唑用氯乙酸甲酯(10.9g，0.1mol)处理2-氯苄胺(14.2g，0.1mol)和三乙胺(13.9ml，0.1mol)的二甲基甲酰胺(100ml)溶液，并于50℃加热3.5小时，冷却该反应液，并用乙醚稀释，滤除固体，浓缩的滤液于硅胶上闪层析，用己烷和乙酸乙酯(6∶5)洗脱，得15.3g(71%)2-〔N-(2-氯苯基)甲基〕氨基乙酸甲酯。该产物(15.2g，0.071mol)溶于混合二甲苯(100ml)中，用98%甲酸(2.74ml，0.0711mol)处理，回流2.5小时，并用Dean-Stark分水器分水。蒸发，得17.1(99%)2-〔N-(2-氯苯基)甲基-N-甲酰基〕氨基乙酸甲酯。将该甲酰化产物(17g，0.071mol)溶于甲酸甲酯(13.3ml，0.216mol)，并滴入甲醇钠混合物中，后者是将金属钠(1.79g，0.0778mol)置于四氢呋喃(325ml)中，然后慢慢地加入甲醇(3.15ml，0.0778mol)而制得的。上述合并的混合物于室温下搅拌18小时，蒸干。将粗产物溶于50%的甲醇水溶液(200ml)中，用炭处理，过滤，滤液用冰浴冷却，慢慢地加入浓盐酸(12N14.3ml，0.171mol)，然后加入硫代氰酸钾(8.6g，0.0885mol)的水(20ml)溶液。反应混合物于油浴中90℃保温2.5小时，冷却至-10℃，生成的沉淀滤出，用冷的乙醇-水洗沉淀，于60℃干燥得14.7g(74%)5-羧甲基-1-(2-氯苯基)甲基-2-硫代-1H-咪唑，mp72-74℃。
(ⅱ)1-(2-氯苯基)甲基-5-羧甲基-2-硫代丙基-1H-咪唑将5-羧甲基-1-(2-氯苯基)甲基-2-硫代-1H-咪唑(2g，7.08mmol)、乙酸乙酯(20ml)、5%碳酸钠溶液(40ml)和丙基溴(4ml，44mmol)于60℃加热18小时，分出有机层，用硫酸镁干燥，浓缩得2.23g粗产物，用乙醚研磨，得1.63g(71%)5-羧甲基-1-(2-氯苯基)甲基-2-硫代丙基-1H-咪唑，mp68-71℃(己烷中结晶)。
(ⅲ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯将5-羧甲基-1-(2-氯苯基)甲基-2-硫代丙基-1H-咪唑(3.74g，11.5mmol)溶于无水四氢呋喃(50ml)中，充氩下冷却至-78℃，滴入氢化二异丁基铝甲苯液(1M，30ml)，于-78℃搅拌1.5小时，慢慢升温至室温，将反应液倒于冰冷的稀乙酸中，用二氯甲烷提取产物，用水、50%碳酸钠溶液和食盐水依次洗有机提取液，干燥，浓缩，得产物，淡褐色固体(3.32g)，于乙醇/水中结晶，得1-(2-氯苯基)甲基-5-羟甲基-2-硫代丙基-1H-咪唑，mp98-101℃。
将1-(2-氯苯基)甲基-5-羟甲基-2-硫代丙基-1H-咪唑(10g，0.0337mol)和亚硫酰氯(75ml)的混合物回流1小时，减压蒸发，残余物用甲苯共沸蒸馏3次，用乙醚研磨固体，收集得10.4g(88%)1-(2-氯苯基)甲基-5-氯甲基-2-硫代丙基-1H-咪唑盐酸盐。
将苯丙氨酸甲酯盐酸盐(0.863g，4mmol)溶于无水二甲基甲酰胺(20ml)中，先用三乙胺(1.04g，10.2mmol)，再用1-(2-氯苯基)甲基-5-氯甲基-2-硫代丙基-1H-咪唑盐酸盐(1g，2.8mmol)的二甲基甲酰胺(10ml)溶液处理，充氩下于蒸汽浴上加热3小时，倒入水中，用乙酸乙酯提取产物，水洗，干燥，浓缩，用含15%乙酸乙酯的二氯甲烷于硅胶上闪层析，得0.78g(61%)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯，油状物，其NMR与结构完全一致。
(ⅳ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸将氢氧化钾(0.29g，5.1mmol)的水(4ml)溶液加入N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯(0.78g，1.7mmol)的乙醇(10ml)溶液中，短暂地加热至回流，于室温下搅拌1小时，蒸去乙醇，用乙醚提取水层，用10%的盐酸酸化至pH4，收集沉淀，干燥，得0.4g(51%)L-N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸半盐酸盐，mp130-132℃。
实施例2N-丁酰基-N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸(ⅰ)N-丁酰基-N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯将丁酰氯(0.38g，3.57mmol)加入N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯(1.35g，2.95mmol)、二氯甲烷(50ml)和三乙胺(0.448g，4.43mmol)的混合物中，于室温下搅拌48小时后，蒸发溶剂，残余物用乙酸乙酯处理，滤除不溶物，分别用5%碳酸氢钠液和水洗乙酸乙酯液，干燥，浓缩，于硅胶层析纯化，用乙酸乙酯/二氯甲烷作梯度洗脱，得0.81g(52%)标题化合物甲基酯，油状物。
(ⅱ)N-丁酰基-N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸将N-丁酰基-N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯(1.36g，2.58mmol)的乙醇(20ml)溶液和氢氧化钾(0.436g，7.75mmol)的水(10ml)溶液于室温下搅拌2小时，减压浓缩，用乙醚洗水层，并用活性炭处理，用稀盐酸酸化至pH3.5，将胶状产物提取入乙酸乙酯中，用无水硫酸镁干燥，浓缩得0.7g(53%)N-丁酰基-N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸，mp70-74℃。
此外，在中和之前，直接从反应混合物中可分离出所述酸的钠盐。该粗碱反应溶液用于用水平衡的反相闪柱层析，用水(3次排空体积)洗去柱中的无机物，产物用乙腈/水(50∶50)洗脱，减压移去乙腈，冻干，得理想的钠盐。
实施例3N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸(ⅰ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯方法A用Curtis和Brown〔J.Org.Chem.，45，20(1980)〕的方法将咪唑转变成1-二乙氧基-原酰胺衍生物。在1g对甲苯磺酸存在下，将咪唑(12.8g，0.19mol)与118.4g(0.8mol)原甲酸三乙酯反应，得20.6g(61%)1-二乙氧基原酰胺咪唑，bp65-70℃(0.1mm)。将该产物(17.0g，0.1mol)溶于无水四氢呋喃(250ml)中，冷却至-40℃，于-40℃至-35℃，加入正丁基锂(2.5M己烷溶液，40ml，0.1mol)，15分钟后于-40℃加入碘代正丁烷(22.1g，0.12mol)，室温下搅拌过夜，用乙醚和0.3N盐酸提取，用稀盐酸反复提取有机层，合并水提液，用碳酸氢钠液中和，用二氯甲烷提取，硫酸镁干燥，浓缩，用Kugelrohr装置闪蒸馏得14.8g(85%)2-正丁基咪唑。
将2-正丁基咪唑(9.7g，0.078mol)溶于甲醇(50ml)中，并滴入甲醇钠的甲醇液(250ml，用2.31g，0.0934mol氢化钠制得)中，1小时后蒸干，将钠盐溶于无水二甲基甲酰胺(150ml)中，加入2-氯苄基溴(16.3g，0.079mol)，充氩下于50℃加热17小时，注入冰水中，用乙酸乙酯提取，将提取液洗涤，干燥，浓缩，得18.5g粗产物，于硅胶上层析，用乙酸乙酯/己烷(2∶1)洗脱，得11.9(61%)2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑，油状物，经硅胶薄层析，用4∶1乙酸乙酯/己烷层开，Rf值0.59。
充氩下，将2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑(95.5g，0.384mol)，37%甲醛(500ml)，乙酸钠(80g)和乙酸(60ml)的混合物加热回流40小时，减压浓缩，残余物与500ml20%氢氧化钠液一起搅拌4小时，用水稀释，二氯甲烷提取，水洗提取液，干燥，浓缩，粗产物(117g)于600g硅胶上闪层析，用乙酸乙酯至含10%甲醇的乙酸乙酯梯度洗脱，得8.3g起始原料，24.5g起始原料和产物的混合物及44g(41%)2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-5-羟甲基-1H-咪唑，mp86-88℃(乙酸乙酯中结晶)，再洗脱得双(4，5-羟甲基)衍生物，mp138-140℃(乙酸乙酯中结晶)。
将按实施例1(ⅲ)方法由2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-5-羟甲基-1H-咪唑制得的2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-5-氯甲基-1H-咪唑盐酸盐(0.6g，1.18mmol)的溶液按实施例1(ⅲ)描述的方法与苯丙氨酸甲酯盐酸盐反应，经硅胶层析，用二氯甲烷/乙酸乙酯(2∶1)洗脱，得0.244g(31%)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯，油状物。
方法B将方法A制备的2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-5-羟甲基-1H-咪唑(5.4g，0.0194mol)的甲苯(25ml)溶液加入活性的二氧化锰(27g)和甲苯(325ml)混悬液中，安装Dean Stark分水器，加热回流1小时，在100℃保温17小时，滤出固体，滤液浓缩，粗产物于硅胶上闪层析，用6∶4烷/乙酸乙酯洗脱，得4.16g(78%)2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑-5-甲醛，油状物。
充氩下，并安装上Dean-Stark分水器，将2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑-5-甲醛(6.03g，22mmol)，苯丙氨酸甲酯盐酸盐(4.93g，23mmol)，二异丙基乙胺(2.97g，23mmol)和甲苯(300ml)加热回流18小时，蒸发溶剂，加入乙醚，过滤除去二异丙基乙胺盐酸盐，蒸去乙醚，得9.81g粗亚胺，N-〔｛2-正丁基-1-〔(2-氯苯基)甲基〕-1H-咪唑-5-基｝亚甲基〕苯丙氨酸甲酯。
将上述的亚胺溶于用冰水预冷却的甲醇(50ml)中，在25℃一点一点地加入氰基硼氢化钠(0.92g，14.62mmol)，几小时内加完，蒸去溶剂，残余物溶于乙酸乙酯和水中，用5%碳酸氢钠液和水依次洗有机层，干燥，浓缩，得3.24g产物，其NMR和TLC与方法A制备的产物一致。
方法C将方法B制备的2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑-5-甲醛(10mmol)溶于甲醇(50ml)中，用苯丙氨酸甲酯游离碱(10mmol)和氰基硼氢化钠(20mmol)处理，并用含氯化氢气体的乙醚调pH至6.5，于25℃搅拌3天，后处理与方法B相同。
(ⅱ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例2(ⅱ)的方法，用0.232g(0.53mmol)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯为原料，经后处理和干燥，得0.185g(82%)标题化合物，白色固体，mp141-143℃。
实施例4N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基苯丙氨酸(ⅰ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基苯丙氨酸甲酯方法A将正丁基锂的己烷溶液(2.5M5ml，12.6mmol)于0℃加入二异丙基胺(1.27g，12.6mmol)的四氢呋喃(50ml)溶液中，于0℃搅拌15分钟，冷却至-78℃，将实施例3(ⅰ)方法B制备的亚胺，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝亚甲基〕苯丙氨酸甲酯(5.51g，12.6mmol)的四氢呋喃(35ml)溶液滴入，充氩下于-78℃搅拌30分钟，于-78℃加入碘甲烷(2.06g，14.5mmol)的四氢呋喃(15ml)溶液，缓慢升温至室温，搅拌18小时，蒸去溶剂，残余物溶于乙酸乙酯中，滤除不溶物，浓缩得产物8.18gN-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝亚甲基〕-α-甲基苯丙氨酸甲酯，不纯化，直接用于反应。
将上述产物(8.18g)溶于甲醇(75ml)中，冷却至0℃，一点一点地加入氰基硼氢化钠(1.4g，2.2mmol)，于室温下搅拌48小时，浓缩，残余物溶于乙酸乙酯中，用5%碳酸氢钠液和水分洗，干燥，浓缩，得5.5g粗产物，经硅胶闪层析，用乙酸乙酯/己烷(9∶1)洗脱，得1.4gN-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基苯丙氨酸甲酯。
方法B将2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑-5-甲醛(0.264g，0.995mmol)溶于甲醇(5ml)，于-10℃加入α-甲基苯丙氨酸甲酯盐酸盐(0.44g，1.91mmol)，三乙胺(97mg，0.955mmol)，氰基硼氢化钠(252mg，4mmol)和甲醇(10ml)的混合物中，在25℃搅拌4天，用乙酸乙酯常规处理，得粗产物(30%收率)，其TLC和NMR与方法A制备物一致。
(ⅱ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基苯丙氨酸按实施例3(ⅱ)的方法，用N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基苯丙氨酸甲酯代替N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯，得标题化合物，白色固体，mp157-159℃。
实施例5N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸(ⅰ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝亚甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯安装Dean-Stark分水器，充氩下将2-正丁基-1-〔(2-氯苯基)甲基〕-1H-咪唑-5-甲醛(0.6g，2.12mmol)，β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯(0.4g，2.16mmol)和甲苯(25ml)的溶液回流8小时，蒸去溶剂，得1.1g标题亚胺化合物，桔红色油，其NMR与结构相符。
(ⅱ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯将N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝亚甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯(1.1g)溶于甲醇(15ml)中，冷却至0℃，一点一点地加入氰基硼氢化钠(0.55g)，升温至室温，搅拌18小时，加水终止反应，用二氯甲烷提取，水洗，干燥，浓缩，得0.84g粗产物，经硅胶层析，用二氯甲烷洗脱，得0.46g(按醛计算，收率49%)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯，油状物。
(ⅲ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸将实施例5(ⅱ)制备的甲酯(0.46g)、氢氧化钾(0.18g)，水(2ml)和乙醇(3ml)于25℃搅拌2天，蒸去乙醇，加入水(6ml)，慢慢滴入稀盐酸液至有沉淀生成，冷却，过滤，用水洗产物，空气干燥，得0.34g标题化合物，白色固体，mp89-91℃。
实施例6N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸(ⅰ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯用6.45g(14.5mmol)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝亚甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯(实施例5(ⅰ))，按实施例4(ⅰ)(方法A)的方法制得了6gN-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝亚甲基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯粗产物，按所述方法，但用硼氢化钠(1.1g)代替氰基硼氢化钠将上述亚胺还原，经硅胶层析，用乙酸乙酯洗脱后，得2.8g(两步计算，收率34%)产物，油状物，其NMR符合下述结构N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯(ⅱ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸用N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯代替N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯，按实施例5(ⅲ)的方法制得了标题化合物，白色固体，mp109-112℃(乙腈中结晶)。
实施例7N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕苯丙氨酸(ⅰ)2-正丁基-1-〔(2-氯苯基)甲基〕-5-(2-羟乙基)-1H-咪唑将〔2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑-5-基〕乙酸甲酯(按美国专利4，340，598号的方法制备)(1.06g，3.3mmol)的四氢呋喃(40ml)溶液冷却至-78℃，滴入氢化二异丁基铝的四氢呋喃溶液(9.24mmol)，充氩下于-78℃搅拌2小时，再于室温搅拌18小时，在冷却下加入甲醇，然后加入乙酸(5ml)和水(20ml)，浓缩，用二氯甲烷提取，用5%碳酸氢钠液和水洗提取液，干燥，浓缩液于硅胶上层析，用乙酸乙酯/己烷梯度洗脱，得0.657g(68%)2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-5-(2-羟基)乙基-1H-咪唑，油状物。
(ⅱ)N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕苯丙氨酸甲酯充氮下，将三氟甲磺酸酐(0.954g，3.38mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液冷却至-78℃，滴入2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-5-(2-羟乙基)-1H-咪唑(0.9g，3.07mmol)、二异丙基乙胺(0.44g，3.38mmol)和二氯甲烷(10ml)的溶液，于-78℃搅拌15分钟，加入苯丙氨酸甲酯的游离碱(由1.33g(6.15mmol)盐酸盐制得)的二氯甲烷(10ml)溶液，于-78℃搅拌2小时，再于室温下搅拌18小时，用水洗反应混合物，干燥，浓缩，得粗产物，经闪层析，用含5%甲醇的乙酸乙酯洗脱，得0.9g(65%)N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕苯丙氨酸甲酯(ⅲ)N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕苯丙氨酸按实施例2(ⅱ)的方法，用0.9g(1.99mmol)N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕苯丙氨酸甲酯，0.33g氢氧化钾和15ml水及25ml乙醇，反应后得0.54g产物，用乙醚研磨得标题化合物，mp78-80℃(游离碱)，mp232-233℃(二盐酸盐)。
实施例8N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-4-氯-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸(ⅰ)2-正丁基-4-氯-1-(2-氯苯基)甲基-5-羟甲基-1H-咪唑将2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-5-羟甲基-1H-咪唑(按实施例3(ⅰ)方法A制备)(10.2g，0.0368mol)的四氢呋喃(100ml)溶液一点一点地用N-氯代琥珀酰亚胺(NCS)(4.92g，0.0368mol)处理，加入NCS后，于45℃搅拌3小时，蒸去四氢呋喃，用水和乙酸乙酯分配残余物，用水洗有机层，干燥，浓缩，残余物用乙醚搅拌结晶，得5.1g(44%)2-正丁基-4-氯-1-(2-氯苯基)甲基-5-羟甲基-1H-咪唑，mp134-135℃(乙腈中结晶)。
(ⅱ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-4-氯-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3(ⅰ)方法A的方法制备中间体甲酯。用2-正丁基-4-氯-1-(2-氯苯基)甲基〕-5-氯苯基-1H-咪唑盐酸盐代替2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基〕-5-氯甲基-1H-咪唑盐酸盐，制得了N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-4-氯-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯。该酯按实施例3(ⅱ)的方法水解，即用N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-4-氯-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯代替N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯，制得了标题化合物。
实施例9N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(3-噻吩基)丙氨酸用β-(3-噻吩基)丙氨酸甲酯代替β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯，按实施例5的方法，制得了标题化合物。
实施例10N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基-β-(2-呋喃基)丙氨酸用β-(2-呋喃基)丙氨酸甲酯代替β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯，按实施例5的方法制得了标题化合物。
实施例11N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕酪氨酸用酪氨酸甲酯代替β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯，按实施例5的方法制得了标题化合物。
实施例12N-〔｛1-〔(2-氯-6-氟苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸将2-正丁基咪唑(3.75g，0.03mol)的无水二甲基甲酰胺(4ml)溶液加入氢化钠(0.95g)的二甲基甲酰胺(18ml)溶液中，无气体逸出后，充氩下搅拌1小时，慢慢加入2-氯-6-氟苄基氯(5.5g，0.031mol)的二甲基甲酰胺(7ml)溶液，室温下搅拌17小时，用冰水稀释，乙酸乙酯提取，有机层经洗涤，干燥和浓缩，得7.63g(94%)2-正丁基-1-(2-氯-6-氟苯基)甲基-1H-咪唑，其NMR与结构一致。产物不经纯化用于下步反应。
按实施例1(ⅱ-ⅲ)的方法，用7.63g2-正丁基-1-(2-氯-6-氟苯基)甲基-1H-咪唑粗产物制得了2.8g2-正丁基-1-(2-氯-6-氟苯基)甲基-5-羟甲基-1H-咪唑，mp106-108℃(乙酸乙酯中结晶)。上述产物用二氧化锰氧化，并按上述的方法后处理，得0.88(63%)2-正丁基-1-(2-氯-6-氟苯基)甲基-1H-咪唑-5-甲醛，mp88-90℃(乙酸乙酯中结晶)。
用2-正丁基-1-(2-氯-6-氟苯基)甲基-1H-咪唑-5-甲醛代替2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑-5-甲醛，按实施例3的方法制得了标题化合物。
实施例13N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸用β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯代替苯丙氨酸甲酯，按实施例7的方法制得了标题化合物二盐酸盐，mp227-228℃。
实施例14N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸用α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯代替苯丙氨酸甲酯，按实施例7的方法制备了标题化合物。
实施例15N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-α-乙基苯丙氨酸按实施例4(ⅰ)方法A的方法，用α-乙基苯丙氨酸甲酯代替α-甲基苯丙氨酸甲酯，制得了N-〔｛1-(2-氯苯基)甲基-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基-α-乙基苯丙氨酸甲酯，该酯用实施例2(ⅱ)的方法水解，然后用盐酸处理，得标题化合物二盐酸盐，mp209-211℃。
实施例16N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-α-丙基苯丙氨酸按实施例15的方法，用α-丙基苯丙氨酸甲酯代替α-乙基苯丙氨酸甲酯，制得标题化合物的二盐酸盐，mp208-210℃。
实施例17N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-N-乙酰基苯丙氨酸用乙酸酐在室温下处理N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基〕乙基〕苯丙氨酸甲酯(按实施例3(ⅰ)方法A制备)，得标题化合物的N-乙酰基苯丙氨酸甲酯，按实施例2(ⅱ)的方法将该酯水解得标题化合物，非晶形固体。
实施例18N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕高苯基丙氨酸按实施例3(ⅰ)方法B和实施例2(ⅱ)的方法，用高苯基丙氨酸甲酯盐酸盐代替苯丙氨酸甲酯盐酸盐，得标题化合物的单水合物，mp123℃(软化)。
实施例19N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-α-甲基苯丙氨酸按实施例7的方法，用α-甲基苯丙氨酸甲酯代替苯丙氨酸甲酯，制得了标题化合物的二盐酸盐，mp253.5-255℃。
实施例20N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-N-甲基苯丙氨酸将N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯(按实施例3(ⅰ)方法B制备)(0.52g，1.18mmol)，88%甲酸(0.31g)和37%甲醛水溶液(0.44g)于蒸汽浴上加热18小时后，注入10%的盐酸溶液中，用乙醚提取，用10%氢氧化钠液酸化水层至pH10，用乙酸乙酯提取，用无水硫酸镁干燥，减压除去溶剂，粗产物经硅胶层析，用含50%乙酸乙酯的己烷洗脱，得0.377g(70%)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-N-甲基苯丙氨酸甲酯，按实施例2(ⅱ)的方法将其水解，得标题化合物，发泡体(0.265g，77%)，mp59-61℃。
实施例21N-〔｛1-〔(2-甲基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用2-甲基苄基溴代替2-氯苄基溴，制得了标题化合物。
实施例22N-〔｛1-〔(3-甲氧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用3-甲氧基苄基溴代替2-氯苄基溴，制得了标题化合物。
实施例23N-〔｛1-〔(4-苯基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用4-苯基苄基溴代替2-氯苄基溴，制得了标题化合物。
实施例24N-〔｛1-〔(4-甲氧基-3-甲基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用4-甲氧基-3-甲基苄基溴代替2-氯苄基溴，制得了标题化合物。
实施例25N-〔｛1-〔2-(1-金刚烷基)乙基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基苯丙氨酸于-78℃用45分钟将2-(1-金刚烷基)乙醇(10.7g)、二异丙基乙胺(11ml)和二氯甲烷(70ml)的混合物加入三氟乙(Triflic)酸酐(16.75g)的二氯甲烷(70ml)溶液中，再加入1-乙酰基-2-正丁基-5-乙酰氧甲基咪唑的二氯甲烷(50ml)溶液，于室温下放置4天，浓缩，加入10%氢氧化钠液(250ml)，于蒸汽浴上加热，用300ml水稀释，二氯甲烷提取，干燥，过滤，浓缩，得油状物，经硅胶层析，甲醇/氯仿洗脱，得5-乙酰氧甲基1-〔2-(1-金刚烷基)乙基〕-2-正丁基咪唑。将此乙酰氧基化合物(5.4g)在室温下与氢氧化钾(5.2g)的乙醇(200ml)溶液一道搅拌1小时，浓缩，倒入水中，搅拌，过滤得1-〔2-(1-金刚烷基)乙基〕-2-正丁基-5-羟甲基-1H-咪唑。
按实施例3(ⅰ)方法A的方法，用1-〔2-(1-金刚烷基)乙基〕-2-正丁基-5-羟甲基-1H-咪唑代替2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-5-羟甲基-1H-咪唑，制得了标题化合物。
实施例26N-〔｛1-〔(3-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法用3-氯苄基溴代替2-氯苄基溴制备了标题化合物。
实施例27N-〔｛1-〔(2-溴苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用2-溴苄基溴代替2-氯苄基溴，制得了标题化合物。
实施例28N-〔｛1-(2-氰基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用2-氰基苄基溴代替2-氯苄基溴，制得了标题化合物。
实施例29N-〔｛1-〔(4-氰基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用对氰基苄基溴代替2-氯苄基溴，制得了标题化合物。
实施例30N-〔｛1-〔(2-硝基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用2-硝基苄基溴代替2-氯苄基溴，制得了标题化合物。
实施例31N-〔｛1-〔(3-三氟甲基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用3-三氟甲基苄基溴代替2-氯苄基溴，制得了标题化合物。
实施例32N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例1的方法，用稀丙基溴代替丙基溴制得了标题化合物。
实施例33N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-丙烯基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用稀丙基碘化物代替正丁基碘化物制得了标题化合物。
实施例34N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代戊基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例1的方法，用1-溴戊烷代替1-溴丙烷，制得了标题化合物。
实施例35N-〔｛1-〔(2-溴苯基)甲基〕-2-硫代苄基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例1的方法，用苄基溴代替丙基溴制得了标题化合物。
实施例36N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代环己基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例1的方法，用环己基溴化物代替丙基溴制得了标题化合物。
实施例37N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-4-苯基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕苯丙氨酸按实施例7的方法，用〔2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-4-苯基-1H-咪唑-5-基〕乙酸甲酯(按美国专利4，340，598号方法制备)代替〔2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑-5-基〕乙酸甲酯，制得了标题化合物。
实施例38N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代庚基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例1的方法，用1-溴庚烷代替1-溴丙烷，制得了标题化合物。
实施例39N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代己烯基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例1的方法，用6-溴己烯代替溴丙烷制得了标题化合物。
实施例40N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代环丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例1的方法，用溴代环丙烷代替溴代丙烷制得了标题化合物。
实施例41N-〔｛1-〔(2-硝基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯基丙氨酸按实施例3的方法，用2-硝基苄基溴代替2-氯苄基溴制得了标题化合物。
实施例42N-〔｛1-〔(2-三氟甲基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用2-三氟甲基苄基溴代替2-氯苄基溴，制得了标题化合物。
实施例43N-〔｛1-〔(2，3-二氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用2，3-二氯苄基溴代替2-氯苄基溴制得了标题化合物。
实施例44N-〔｛1-〔(2-甲氧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用2-甲氧基苄基溴代替2-氯苄基溴，制得了标题化合物。
实施例45N-〔｛1-〔(3-甲氧苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3的方法，用3-甲氧基苄基溴代替2-氯苄基溴，制得了标题化合物。
实施例46N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-(2-噻吩基)甲基-α-(1H-四唑-5-基)甲胺将实施例5制备的N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸(4.3mmol)混悬于苯(20ml)中，加入亚硫酰氯(12.9mmol)，加热至50℃反应90分钟，蒸发至油状残余物。将残余物溶于己烷，再蒸发，用浓氢氧化铵(40ml)处理该酰氯，于室温下搅拌16小时，滤出固体，水洗，于50℃真空干燥，得伯酰胺。
充氩下于0℃将草酰氯(98%，13.5mmol)加入二甲基甲酰胺(14.2mmol)的乙腈(50ml)溶液中，3分钟后，通过漏斗将上述制备的酰胺的二甲基甲酰胺(20ml)溶液加入。5分钟后，加入吡啶(27.2mmol)，于0℃再搅拌5分钟，用乙酸乙酯和50%的氯化铵水溶液提取。用水和食盐水洗乙酸乙酯层，用无水硫酸钠干燥，蒸发得相应的腈衍生物。
充氩和搅拌下，将四氢呋喃(16ml)加入上述制备的腈(6.44mmol)和氯化铝(13.0mmol)的混合物中，一次加入叠氮化钠(58.3mmol)，然后用2ml四氢呋喃冲洗，加热至65℃反应22小时，冷却至室温，用乙酸乙酯(20ml)稀释反应混合物，并用10%盐酸(20ml)处理，同时剧烈搅拌5分钟，用水和食盐水洗乙酸乙酯层，用无水硫酸钠干燥，蒸发得N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-(2-噻吩基)甲基-α-(1H-四唑-5-基)甲胺实施例47N-〔｛1-〔(2，3-二氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-(苯基)甲基-α-(1H-四唑-5-基)甲胺按实施例46的方法，用N-〔｛1-〔2，3-二氯苯基)甲基-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸(实施例43制备)代替N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸，制得了标题化合物。
实施例48N-〔｛1-〔(2-硝基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-(苯基)甲基-α-(1H-四唑-5-基)甲胺按实施例46的方法，用N-〔｛1-〔(2-硝基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸(实施例41制备)代替N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸制得了标题化合物。
实施例49N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-α-(苯基)甲基-α-(1H-四唑-5-基)甲胺按实施例46的方法，用N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕苯丙氨酸(实施例7制备)代替N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(噻吩基)丙氨酸，制得了标题化合物。
实施例50N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-(3-噻吩基)甲基-α-(1H-四唑-5-基)甲胺按实施例46的方法，用N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(3-噻吩基)丙氨酸(由实施例9制备)代替N-〔(1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸，制得了标题化合物。
实施例51N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-(苯基)甲基-α-(1H-四唑-5-基)甲胺按实施例46的方法，用N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸(实施例3制备)代替N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸制得了标题化合物。
实施例52N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-(2-呋喃基)甲基-α-(1H-四唑-5-基)甲胺按实施例46的方法，用N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝-β-(2-呋喃基)丙氨酸(实施例10制备)代替N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸，制得了标题化合物。
实施例53N-〔｛1-〔(4-羧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸按实施例3〔(ⅰ)方法B和(ⅱ)〕的方法，用4-甲酯基苄基溴代替2-氯苄基溴，β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯和硼氢化钠分别代替苯丙氨酸甲酯和氰基硼氢化钠，制得了标题化合物，mp151-152℃。
实施例54L-N-〔｛1-〔(4-羧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝〕苯丙氨酸按实施例3〔(ⅰ)方法A和(ⅱ)〕的方法，用4-甲酯基苄基溴和L-苯丙氨酸甲酯代替2-氯苯甲基溴化物和苯丙氨酸甲酯，制得了标题化合物，〔α〕25＝+32.5°(甲醇)，mp231-232℃(盐酸盐)。
实施例55D-N-〔｛1-〔(4-羧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按实施例3〔(ⅰ)方法A和(ⅱ)〕的方法，用4-甲酯基苄基溴和D-苯丙氨酸甲酯分别代替2-氯苄基溴和苯丙氨酸甲酯，制得了标题化合物，〔α〕25＝-28.9°(甲醇)，mp232-233℃(盐酸盐)实施例56N-〔2-｛1-〔(4-羧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸按实施例7的方法，用〔2-正丁基-1-(4-甲酯基苯基)甲基-1H-咪唑-5-基〕乙酸甲酯代替〔2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑-5-基〕乙酸甲酯，制得了标题化合物。
实施例57给予活性的式(Ⅰ)化合物的口服剂型按下法制备将配比的各成份过筛，混合并填充入硬胶囊中，所述配比各成份举例如下成份 用量N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基- 100mg1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸硬脂酸镁 10mg乳糖 100mg实施例58将蔗糖、硫酸钙二水合物和口服的活性式(Ⅰ)化合物混合，用10%明胶溶液制粒，将湿粒过筛，干燥，与淀粉、滑石粉和硬脂酸混合，过筛，压成片。
成份 用量N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕- 75mg2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸硫酸钙二水合物 100mg蔗糖 15mg淀粉 8mg滑石粉 4mg硬脂酸 2mg实施例59将N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基苯丙氨酸(50mg)分散于25ml生理盐水中，制备注射剂。
实施例60在无菌条件下混合下述成份，制得给予式(Ⅰ)化合物的局部眼科用溶液成份 含量(mg/ml)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕 1.0-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸磷酸氢二钠 10.4磷酸二氢钠 2.4
成份 含量(mg/ml)氯代丁醇 5.0羟丙醇甲基纤维素 5.0灭菌水 加至 1.0ml1.0N氢氧化钠 调pH至7.4应该指出的是本发明范围和权利并不局限于上述的实施例，它包括下述权利要求范围内的所有改良。
权利要求
1.制备式(Ⅰ)化合物及其药学上可接受盐的方法，式(Ⅰ)为
式中R是金刚烷基甲基，或苯基，联苯基或萘基，上述的每个芳基可以是未取代芳基或者被1-3个下列基团取代，这些基团选自Cl、Br、F、I、C1-6烷基、硝基、CO2R7、C1-6烷氧基、羟基、SC1-6烷基、SO2C1-6烷基、四唑-5-基、SO2NHR7、NHSO2R7、SO3H、PO(OR7)2、CONR7R7、CN、NR7R7、NR7COH、NR7COC1-6烷基、NR7CON(R7)2、NR7COW、SO2W或W；R1是C2-10烷基，C3-10链烯基，(CH2)0-8C3-6环烷基，或被下述1-3个基团取代或未取代的(CH2)0-8苯基，所述基团选自C1-6烷基、硝基、Cl、Br、F、I、羟基、C1-6烷氧基、NR7R7、CO2R7、CN、CONR7R7、W、NR7COH、NR7COC1-6烷基、NR7COW、SC1-6烷基、SO2W或SO2C1-6烷基；R2是氢，Cl，Br，F，I，CHO，羟甲基，C1-6烷基，NR7R7，CO2R7，CONR7R7，NO2，CN，苯基或W；X是单键，S或O；R3是H，C1-6烷基，C3-6链烯基，COC1-5烷基或(CH2)0-3苯基；R4是H，C1-6烷基，C3-6链烯基，或(CH2)0-3苯基；R5是CO2R7，CONR7R7或四唑-5-基；每个n分别是0-4；R6是苯基，萘基，2-或3-噻吩基，2-或3-呋喃基，2-，3-或4-吡啶基，嘧啶基，咪唑基，噻唑基，三唑基，四唑基，吡唑基，吡咯基，噁唑基或异噁唑基，上述每个芳基或杂芳基可以是未取代的或者被下列基团取代C1-6烷基、C1-6烷氧基、Cl、Br、F、I、NR7R7、CO2R7、CONR7R7、SO3H、SO2NHR7、OH、NO2、W、SO2C1-6烷基、SO2W、SC1-6烷基、NR7COH、NR7COW或NR7COC1-6烷基；W是CmF2m+1，其中m是1-4；和每个R7分别是H或C1-6烷基，该方法包括在碱的存在下将式(Ⅱ)化合物与式(Ⅲ)化合物反应，式(Ⅱ)为
式中R4、R6和n的定义同前，式(Ⅲ)为
式中R1、R2、X和n的定义同前，R的定义除了不包括四唑-5-基、OH或CO2H外，其余同前；然后，必要时进行下述反应(ⅰ)将氮原子上的R3取代基是H的式(Ⅰ)化合物在碱的存在下与C1-5C(O)卤化物反应，制备R3是COC1-5烷基的式(Ⅰ)化合物；(ⅱ)将R取代基是C1-6烷氧基的式(Ⅰ)化合物去保护，制备R取代基是羟基的式(Ⅰ)化合物；(ⅲ)将R取代基是CO2C1-6烷基的式(Ⅰ)化合物水解，制备R取代基是羧基的式(Ⅰ)化合物；(ⅳ)将R取代基是氰基的式(Ⅰ)化合物与叠氮化物反应，制备R取代基是四唑-5-基的式(Ⅰ)化合物；(Ⅴ)将R5取代基是CO2C1-6烷基的式(Ⅰ)化合物水解，制备R5取代基是羧基的式(Ⅰ)化合物；(ⅵ)用卤化剂处理R5是CO2H的式(Ⅰ)化合物，然后再与适宜的取代胺反应，制备R5是CONR7R7的式(Ⅰ)化合物，式中R7是氢或C1-6烷基；(ⅶ)用草酰氯/二甲基甲酰胺处理R5是CONH2的式(Ⅰ)化合物，然后再与叠氮化物反应，制备R5是四唑-5-基的式(Ⅰ)化合物；和最后，将制得的式(Ⅰ)化合物任意地制成药学上可以接受的盐。
2.按照权利要求1的方法，制备下述化合物及其药学上可接受的盐，即式(Ⅰ)中R是苯基或由1至3个下述基团取代的苯基，所述基团选自氯、氟、硝基、甲基、三氟甲基、甲氧基、羟基、磺酰氨基、氨磺酰基、氰基、羧基、羰基C1-6烷氧基、氨甲酰基、或四唑-5-基;R1是C2-8烷基;X是单键或S;R2是氢、氯、氟或三氟甲基;R3是氢、甲基、或COC1-5烷基;R4是氢或C1-3烷基;R5是CO2H或四唑-5-基;R6是苯基或2-噻吩基;每个n分别是1或2。
3.按照权利要求1的方法，制备N-〔｛1-〔(4-羧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸和其药学上可接受的盐。
4.按照权利要求1的方法，制备N-〔｛1-〔(4-羧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸及其药学上可接受的盐。
5.按照权利要求1的方法，制备下列化合物及其药学上可接受的盐N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸;N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基苯丙氨酸N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸;N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-N-丁酰基苯丙氨酸;N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕苯丙氨酸N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸;N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸;N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-乙基苯丙氨酸;N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-丙基苯丙氨酸;N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-N-乙酰基苯丙氨酸;N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕高苯丙氨酸;N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-α-甲基苯丙氨酸;N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-N-甲基苯丙氨酸。
6.制备N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸的方法，该方法包括将2-正丁基-1-(4-甲酯基苯基)甲基-5-氯甲基-1H-咪唑与苯丙氨酸甲酯反应，然后进行酯水解。
7.制备N-〔｛1-〔(4-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸的方法，该方法包括将2-正丁基-1-(4-甲酯基苯基)甲基-5-氯甲基-1H-咪唑与β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯反应，然后进行酯水解反应。
8.制备药用组合物的方法，该方法包括将权利要求1的式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受盐与药学上可接受的载体混合。
9.将权利要求1的式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐用于制备治疗疾病的药物，所述疾病包括需要拮抗血管紧张素Ⅱ受体来治疗的疾病。
10.将权利要求1的式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐用于制备治疗高血压的药物。
全文摘要
本发明公开了具有式(I)结构的血管紧张素II受体拮抗剂及含有这些拮抗剂的药用组合物和用这些化合物对哺乳动物产生血管紧张素II受体拮抗作用的方法。本发明化合物用于调节高血压和治疗充血性心衰、肾衰和青光眼。式(I)为
文档编号C07D405/14GK1051555SQ9010894
公开日1991年5月22日 申请日期1990年11月6日 优先权日1989年11月6日
发明者杰拉尔德·罗伯特·吉拉德, 戴维·泰勒·希尔, 约瑟夫·温斯托克 申请人:史密丝克莱恩比彻姆公司
起点商标作为专业知识产权交易平台，可以帮助大家解决很多问题，如果大家想要了解更多知产交易信息请点击 【在线咨询】或添加微信 【19522093243】
与客服一对一沟通，为大家解决相关问题。
此文章来源于网络,如有侵权,请联系删除
热门咨询
tips