一种二氢异苯并呋喃类化合物其预防和治疗老年痴呆的应用的制作方法

[0001]
本发明属于医药领域，涉及一种二氢异苯并呋喃类化合物其预防和治疗老年痴呆的应用。


背景技术：

[0002]
老年痴呆症是一种起病隐匿的进行性发展的神经系统退行性疾病。临床上以记忆障碍、失语、失用、失认、视空间技能损害、执行功能障碍以及人格和行为改变等全面性痴呆表现为特征，病因迄今未明。65岁以前发病者，称早老性痴呆；65岁以后发病者称老年性痴呆。该病可能是一组异质性疾病，在多种因素(包括生物和社会心理因素)的作用下才发病。
[0003]
从目前研究来看，该病的可能因素和假说多达30余种，如家族史、女性、头部外伤、低教育水平、甲状腺病、母育龄过高或过低、病毒感染等。该病起病缓慢或隐匿，病人及家人常说不清何时起病。主要表现为认知功能下降、精神症状和行为障碍、日常生活能力的逐渐下降。如有焦虑、激越、失眠症状，可考虑用短效苯二氮卓类药，如阿普唑仑、奥沙西泮(去甲羟安定)、劳拉西泮(罗拉)和三唑仑(海乐神)。剂量应小且不宜长期应用。警惕过度镇静、嗜睡、言语不清、共济失调和步态不稳等副作用。因此，人们迫切需要一种行之有效、安全且副作用小的新型化合物药物。
[0004]
本发明创新性的合成二氢异苯并呋喃类化合物，以期得到治疗老年痴呆的全新化合物，现有技术并未见到相关结构的报道。


技术实现要素：

[0005]
针对上述问题，本发明的目的是提供一种二氢异苯并呋喃类化合物的制备方法和应用，此类化合物对老年痴呆具有良好的治疗作用，可用于制备治疗老年痴呆的药物。为实现上述目的，本发明采用以下技术方案。
[0006]
一种二氢异苯并呋喃类化合物，其结构通式i如下：
[0007]
[0008]
式中：r选自或者
[0009]
本发明另一目的为提供一种二氢异苯并呋喃类化合物式i的合成路线为：
[0010][0011]
进一步地，上述合成路线中各步骤的合成方法如下：
[0012]
1)将氢氧化钠加入1,3-二氢异苯并呋喃-4-醇的甲醇溶液中。搅拌溶解，然后在冰盐浴中冷却至。加入碘化钠后滴加10％的次氯酸钠溶液，滴加过程中保持体系温度不高于0℃。将加入碘化钠和滴加次氯酸钠溶液过程再重复三次，直到总共添加60g碘化钠，滴加完毕后搅拌并保持温度低于0℃，滴加五水合硫代硫酸钠的水溶液。滴加完后，通过逐滴添加浓盐酸将溶液酸。过滤收集沉淀物并用水洗涤。将深色固体尽可能地洗干，并在真空烘箱中干燥，得到5,7-二碘-1,3-二氢异苯并呋喃-4-醇；
[0013]
2)将异丙基碘和50％的氢氧化钠溶液滴加入5,7-二碘-1,3-二氢异苯并呋喃-4-醇的丙酮溶液中，搅拌48小时。将混合物真空浓缩，然后加入庚烷和水，搅拌。静止分层，有机层用饱和氯化钠溶液洗涤。用无水硫酸钠干燥并在真空中浓缩，残余物用甲醇打浆，过滤，干燥，得到5,7-二碘-4-异丙氧基-1,3-二氢异苯并呋喃；
[0014]
3)将5,7-二碘-4-异丙氧基-1,3-二氢异苯并呋喃、尿嘧啶、3-异丙基嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮和磷酸钾加入dmso中搅拌形成悬浮液，体系通氮气鼓泡脱气。将碘化亚铜加入体系中搅拌并继续脱气，接下来搅拌加热。然后将混合物倒入水中并通过添加盐酸溶液酸化。将混合物用乙酸乙酯稀释，并将有机层依次用水，饱和氯化铵溶液和饱和氯化钠溶液
萃取。将溶液干燥并加入(3-巯基丙基)硅胶，搅拌后过滤混合物并真空浓缩。所得固体用乙醚-乙酸乙酯打浆并过滤收集，然后用乙醚洗涤。真空干燥后得到1-(6-碘-7-异丙氧基-1,3-二氢异苯并呋喃-4-基)-3-异丙基嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮；
[0015]
4.1)将水和thf的溶液用氮气鼓泡，然后通过套管和氮气压力转移到含有1-(6-碘-7-异丙氧基-1,3-二氢异苯并呋喃-4-基)-3-异丙基嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮，n-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧环戊硼烷-2-基)萘-2-基)甲磺酰胺和磷酸钾的烧瓶中，其中烧瓶用氮气吹扫过。将thf用氮气鼓泡，然后通过套管和氮气压力转移到含有pd
2
dba
3
和1,3,5,7-四甲基-6-苯基-2,4,8-三氧杂-6-磷烷的烧瓶中，其中烧瓶用氮气吹扫过。通过套管和氮气压力将两个体系混合。将体系加热并在氮气正压下搅拌过夜。液相检测反应完成后，将反应冷却至室温，并分三部分用l-半胱氨酸和氯化钠的水溶液洗涤，所用的水脱气。通过硅藻土垫过滤thf溶液。用热thf冲洗，两份thf溶液合并。将thf溶液在旋转蒸发器上浓缩至。在白色浆液中加入乙酸乙酯并充分搅拌。搅拌过夜后过滤浆液。将湿滤饼用乙酸乙酯洗涤，真空干燥得到n-(6-(4-异丙氧基-7-(3-异丙基-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-1,3-二氢异苯并呋喃-5-基)萘-2-基)甲磺酰胺(化合物1)；
[0016]
4.2)将水和thf的溶液用氮气鼓泡，然后通过套管和氮气压力转移到含有1-(6-碘-7-异丙氧基-1,3-二氢异苯并呋喃-4-基)-3-异丙基嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮，1-甲基-3-苯基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧环戊硼烷-2-基)-1h-吡咯和磷酸钾的烧瓶中，其中烧瓶用氮气吹扫过。将thf用氮气鼓泡，然后通过套管和氮气压力转移到含有pd
2
dba
3
和1,3,5,7-四甲基-6-苯基-2,4,8-三氧杂-6-磷烷的烧瓶中，其中烧瓶用氮气吹扫过。通过套管和氮气压力将两个体系混合。将体系加热并在氮气正压下搅拌过夜。液相检测反应完成后，将反应冷却至室温，并分三部分用l-半胱氨酸和氯化钠的水溶液洗涤，所用的水脱气。通过硅藻土垫过滤thf溶液。用热thf冲洗，两份thf溶液合并。将thf溶液在旋转蒸发器上浓缩。在白色浆液中加入乙酸乙酯并充分搅拌。搅拌过夜后过滤浆液。将湿滤饼用乙酸乙酯洗涤，真空干燥得到1-(7-异丙基-6-(1-甲基-3-苯基-1h-吡唑-4-基)-1,3-二氢异苯并呋喃-4-基)-3-异丙基-2,4(1h,3h)-嘧啶二酮(化合物2)；
[0017]
4.3)将水和thf的溶液用氮气鼓泡，然后通过套管和氮气压力转移到含有1-(6-碘-7-异丙氧基-1,3-二氢异苯并呋喃-4-基)-3-异丙基嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮，4,4,5,5-四甲基-2-(萘-2-基)-1,3,2-二氧环戊硼烷和磷酸钾的烧瓶中，其中烧瓶用氮气吹扫过。将thf用氮气鼓泡，然后通过套管和氮气压力转移到含有pd
2
dba
3
和1,3,5,7-四甲基-6-苯基-2,4,8-三氧杂-6-磷烷的烧瓶中，其中烧瓶用氮气吹扫过。通过套管和氮气压力将两个体系混合。将体系加热并在氮气正压下搅拌过夜。液相检测反应完成后，将反应冷却至室温，并分三部分用l-半胱氨酸和氯化钠的水溶液洗涤，所用的水脱气。通过硅藻土垫过滤thf溶液。用热thf冲洗，两份thf溶液合并。将thf溶液在旋转蒸发器上浓缩。在白色浆液中加入乙酸乙酯并充分搅拌。搅拌过夜后过滤浆液。将湿滤饼用乙酸乙酯洗涤，真空干燥得到1-(7-异丙基-6-(萘-2-基)-1,3-二氢异苯并呋喃-4-基)-3-异丙基-2,4(1h,3h)-嘧啶二酮(化合物3)；
[0018]
4.4)将水和thf的溶液用氮气鼓泡，然后通过套管和氮气压力转移到含有1-(6-碘-7-异丙氧基-1,3-二氢异苯并呋喃-4-基)-3-异丙基嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧环戊硼烷-2-基)乙酰苯酯和磷酸钾的烧瓶中，其中烧瓶用氮气吹扫
过。将thf用氮气鼓泡，然后通过套管和氮气压力转移到含有pd
2
dba
3
和1,3,5,7-四甲基-6-苯基-2,4,8-三氧杂-6-磷烷的烧瓶中，其中烧瓶用氮气吹扫过。通过套管和氮气压力将两个体系混合。将体系加热并在氮气正压下搅拌过夜。液相检测反应完成后，将反应冷却至室温，并分三部分用l-半胱氨酸和氯化钠的水溶液洗涤，所用的水脱气。通过硅藻土垫过滤thf溶液。用热thf冲洗，两份thf溶液合并。将thf溶液在旋转蒸发器上浓缩。在白色浆液中加入乙酸乙酯并充分搅拌。搅拌过夜后过滤浆液。将湿滤饼用乙酸乙酯洗涤，真空干燥得到1-(7-异丙基-6-(对乙酰氧基苯基)-1,3-二氢异苯并呋喃-4-基)-3-异丙基-2,4(1h,3h)-嘧啶二酮(化合物4)。
[0019]
部分化合物的
1
h-nmr(400mhz)和
13
c-nmr(125mhz)如下：
[0020]
化合物1：
1
h-nmr(400mhz,cdcl
3
)δ:1.31(d,6h),1.41(d,6h),3.22(s,3h),4.41(m,1h),4.69(m,1h),4.92(s,4h),5.80(d,1h),5.88(s,1h),7.11(d,1h),7.17(s,1h),7.32(s,1h),7.40(d,1h),7.56(d,1h),7.62(s,1h),7.84(d,1h),9.44(d,1h).
13
c-nmr(125mhz,cdcl
3
)δ:21.19,21.81,42.91,48.88,70.46,71.19,75.65,94.98,111.70,111.75,124.91,125.62,126.20,126.86,129.94,132.26,132.45,132.52,135.71,136.23,136.81,138.02,143.25,144.84,147.52,148.22,160.81；
[0021]
化合物2：
1
h-nmr(400mhz,cdcl
3
)δ:1.33(d,6h),1.39(d,6h),3.91(s,3h),4.63-4.68(m,2h),4.95(s,2h),5.04(s,1h),5.16(s,1h),5.92(d,1h),7.29-7.40(m,5h),7.62(s,1h),7.64(s,1h),7.84(d,1h).
13
c-nmr(125mhz,cdcl
3
)δ:20.01,22.44,39.35,45.50,69.19,70.92,74.79,103.47,118.80,122.15,123.76,127.87,128.01,128.38,128.99,129.33,132.44,133.41,136.30,145.17,147.60,151.52,153.80,163.08；
[0022]
化合物3：
1
h-nmr(400mhz,cdcl
3
)δ:1.33(d,6h),1.38(d,6h),4.63-4.68(m,2h),4.91(s,2h),5.04(s,1h),5.16(s,1h),5.93(d,1h),7.47-7.49(m,2h),7.63(dd,1h),7.74(s,1h),7.82-7.85(m,3h),7.88(m,1h),7.97(d,1h).
13
c-nmr(125mhz,cdcl
3
)δ:20.06,22.47,45.53,69.01,70.92,74.89,103.74,124.61,125.88,126.07,126.3,127.8,129.36,130.29,131.74,132.5,133.58,134.25,136.27,145.82,147.66,154,163.12；
[0023]
化合物4：
1
h-nmr(400mhz,cdcl
3
)δ:1.32(d,6h),1.39(d,6h),2.28(s,3h),4.65(m,2h),4.91(s,2h),5.06(s,1h),5.16(s,1h),5.92(d,1h),7.18(dt,2h),7.35(dt,2h),7.67(s,1h),7.83(d,1h).
13
c-nmr(125mhz,cdcl
3
)δ:20.08,21.08,22.44,45.53,69.05,70.92,74.89,103.74,122.16,125.02,128.41,129.23,129.34,130.96,132.47,136.27,146.16,147.66,151.92,153.96,163.12,169.26。
[0024]
本发明所述的一种二氢异苯并呋喃类化合物对老年痴呆大鼠海马区相关炎性因子il-1β，tnf-a的含量增高有抑制作用，并且在morris水迷宫实验中能明显缩短老年痴呆大鼠的逃避潜伏期。说明本发明所述的二氢异苯并呋喃类化合物在老年痴呆的治疗中具有积极意义，可以进行更加深入的研究。
[0025]
本发明的另一目的在于提供一种二氢异苯并呋喃类化合物式-在老年痴呆的治疗中的应用。
[0026]
所述的治疗老年痴呆的药物或其药学上可接受的盐或溶剂化物在研制预防或治疗老年痴呆的药物中的应用，特别是提供了二氢异苯并呋喃类化合物在预防老年痴呆中的应用。
[0027]
与现有技术比，本发明的有益效果如下：
[0028]
本发明的化合物对老年痴呆具有很好的预防或治疗效果。进一步地，从本发明提供的研究结果可以看出：本发明的化合物对老年痴呆大鼠海马区相关炎性因子il-1β，tnf-a的含量增高有抑制作用，并且在morris水迷宫实验中能明显缩短老年痴呆大鼠的逃避潜伏期。。
[0029]
综上所述，将本发明所述的二氢异苯并呋喃类化合物用于制备预防或治疗老年痴呆具有很好的开发前景。
[0030]
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其他多种形式的修改、替换或变更。
附图说明
[0031]
图1：实施例1-4所得二氢异苯并呋喃类化合物对老年痴呆大鼠对照组、治疗组、青年大鼠对照组的平均逃避潜伏期。
[0032]
图2：实施例2所得二氢异苯并呋喃类化合物对老年痴呆大鼠海马区相关炎性因子il-1β，tnf-a表达的影响。
具体实施方式
[0033]
下列合成实例、生物测试结果可用来进一步说明本发明，但不意味着限制本发明。
[0034]
合成实例
[0035]
实施例1、化合物1的制备
[0036]
(1)、5,7-二碘-1,3-二氢异苯并呋喃-4-醇的合成
[0037][0038]
将氢氧化钠颗粒(6.39g，160.0mmol)加入1,3-二氢异苯并呋喃-4-醇(20.0g，146.9mmol)的甲醇(256ml)溶液中。搅拌混合物直到所有的氢氧化钠溶解，然后在冰盐浴中冷却至-5℃。加入碘化钠(15.0g，100.0mmol)，然后缓慢滴加10％的次氯酸钠溶液(45ml，66.5mmol)，滴加过程中保持体系温度不高于0℃。将加入碘化钠和滴加次氯酸钠溶液过程再重复三次，直到总共添加60g碘化钠(400mmol)，滴加完毕后搅拌反应直至溶液颜色从浅黄绿色变为弱冰茶色。继续保持温度低于0℃，在20分钟内滴加完五水合硫代硫酸钠(20g，80.6mmol)的水溶液(100ml)。滴加完后，通过逐滴添加浓盐酸(约35ml)将溶液酸化至ph＝3。过滤收集沉淀物并用水(>1升)洗涤。将深色固体尽可能地洗干，并在50℃的真空烘箱中干燥18小时。最终得到呈黄色的固体产物5,7-二碘-1,3-二氢异苯并呋喃-4-醇，53.0g，产率为93％。
[0039]
1
h-nmr(400mhz,cdcl
3
)δ:4.62(s,2h),4.74(s,2h),5.43(s,1h),7.77(s,1h).
13
c-nmr(125mhz,cdcl
3
)δ:70.30,70.47,75.64,97.44,132.97,144.68,151.74,153.32.lc-ms(esi,pos,ion)m/z:389[m+h]。
[0040]
(2)、5,7-二碘-4-异丙氧基-1,3-二氢异苯并呋喃的合成
[0041][0042]
将异丙基碘(7.6ml，10.96g，64.5mmol)和50％(w/w)的氢氧化钠溶液(3.10ml，4.74g，59.3mmol)滴加入5,7-二碘-1,3-二氢异苯并呋喃-4-醇(20.0g，51.5mmol)的丙酮(140ml)溶液中，再在环境温度下搅拌48小时。将混合物真空浓缩至体积约为50-60ml，然后加入庚烷(80ml)和水(50ml)，搅拌10分钟。静止分层，有机层用饱和氯化钠溶液洗涤。用无水硫酸钠干燥并在真空中浓缩，残余物用100ml甲醇打浆两小时，过滤，干燥，得到淡黄色固体5,7-二碘-4-异丙氧基-1,3-二氢异苯并呋喃，19.7g，产率为89％。
[0043]
1
h-nmr(400mhz,cdcl
3
)δ:1.31(d,6h),4.66(s,2h),4.69(m,1h),4.76(s,2h),7.95(s,1h).
13
c-nmr(125mhz,cdcl
3
)δ:21.81,70.30,70.46,75.64,75.65,96.61,136.99,146.06,149.44,150.61.lc-ms(esi,pos,ion)m/z:431[m+h]。
[0044]
(3)、1-(6-碘-7-异丙氧基-1,3-二氢异苯并呋喃-4-基)-3-异丙基嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮的合成
[0045][0046]
将5,7-二碘-4-异丙氧基-1,3-二氢异苯并呋喃(12.04g，28.0mmol)、尿嘧啶(3.89g，34.7mmol)、3-异丙基嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(1.29g，8.4mmol)和磷酸钾(12.9g，60.8mmol)加入dmso(181ml)中搅拌形成悬浮液，体系通氮气鼓泡脱气1.5小时。将碘化亚铜(551mg，2.89mmol)加入体系中搅拌并继续脱气10分钟，接下来在60℃下搅拌加热20小时。然后将混合物倒入水(600ml)中并通过添加4mol/l的盐酸溶液酸化至ph＝3。将混合物用乙酸乙酯(200ml)稀释，并将有机层依次用水(3
×
100ml)，饱和氯化铵溶液(1
×
100ml)和饱和氯化钠溶液(100ml)萃取。将溶液干燥并加入(3-巯基丙基)硅胶，搅拌2.5小时。过滤混合物并真空浓缩。所得固体用乙醚-乙酸乙酯(10:1)打浆两小时并过滤收集，然后用乙醚(100ml)洗涤。在50℃真空干燥2.5小时后，得到类白色固体1-(6-碘-7-异丙氧基-1,3-二氢异苯并呋喃-4-基)-3-异丙基嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮，7.80g，产率为61％。
[0047]
1
h-nmr(400mhz,cdcl
3
)δ:1.31(d,6h),1.41(d,6h),4.41(m,1h),4.69(m,1h),4.77(s,2h),4.79(s,2h),5.80(d,1h),7.62(s,1h),9.38(d,1h).
13
c-nmr(125mhz,cdcl
3
)δ:21.19,21.81,48.88,70.46,71.19,72.39,75.65,94.98,130.96,134.81,136.00,143.25,147.52,150.71,151.10,160.81.lc-ms(esi,pos,ion)m/z:457[m+h]。
[0048]
(4)、化合物1的合成
[0049][0050]
将100ml水和300ml thf的溶液用氮气鼓泡，然后通过套管和氮气压力转移到含有1-(6-碘-7-异丙氧基-1,3-二氢异苯并呋喃-4-基)-3-异丙基嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮(43.8mmol)，n-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧环戊硼烷-2-基)萘-2-基)甲磺酰胺(52.6mmol，1.20当量)和(90.2mmol，2.06当量)磷酸钾的烧瓶中，其中烧瓶用氮气吹扫过。将thf(100ml)用氮气鼓泡，然后通过套管和氮气压力转移到含有pd
2
dba
3
(0.44mmol，0.01当量)和1,3,5,7-四甲基-6-苯基-2,4,8-三氧杂-6-磷烷(2.19mmol，0.05当量)的烧瓶中，其中烧瓶用氮气吹扫过。通过套管和氮气压力将两个体系混合。将体系加热至50℃，并在氮气正压下搅拌过夜。液相检测反应完成后，将反应冷却至室温，并分三部分用l-半胱氨酸(5.84g)和氯化钠(81.4g)的水(550ml)溶液洗涤，所用的水脱气。通过硅藻土垫过滤thf溶液。用热thf(100ml)冲洗，两份thf溶液合并。将thf溶液在旋转蒸发器上浓缩至约100ml。在白色浆液中加入乙酸乙酯(400ml)并充分搅拌。搅拌过夜后过滤浆液。将湿滤饼用乙酸乙酯(2
×
50ml)洗涤，50℃真空干燥得到类白色固体n-(6-(4-异丙氧基-7-(3-异丙基-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-1,3-二氢异苯并呋喃-5-基)萘-2-基)甲磺酰胺(化合物1)，20.3g，产率为84.1％。
[0051]
实施例2、化合物2的制备
[0052][0053]
将100ml水和300ml thf的溶液用氮气鼓泡，然后通过套管和氮气压力转移到含有1-(6-碘-7-异丙氧基-1,3-二氢异苯并呋喃-4-基)-3-异丙基嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮(50mmol)，1-甲基-3-苯基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧环戊硼烷-2-基)-1h-吡咯(60mmol)和(100mmol)磷酸钾的烧瓶中，其中烧瓶用氮气吹扫过。将thf(100ml)用氮气鼓泡，然后通过套管和氮气压力转移到含有pd
2
dba
3
(0.5mmol)和1,3,5,7-四甲基-6-苯基-2,
4,8-三氧杂-6-磷烷(2.5mmol)的烧瓶中，其中烧瓶用氮气吹扫过。通过套管和氮气压力将两个体系混合。将体系加热至50℃，并在氮气正压下搅拌过夜。液相检测反应完成后，将反应冷却至室温，并分三部分用l-半胱氨酸(6g)和氯化钠(85g)的水(550ml)溶液洗涤，所用的水脱气。通过硅藻土垫过滤thf溶液。用热thf(100ml)冲洗，两份thf溶液合并。将thf溶液在旋转蒸发器上浓缩至约100ml。在白色浆液中加入乙酸乙酯(400ml)并充分搅拌。搅拌过夜后过滤浆液。将湿滤饼用乙酸乙酯(2
×
50ml)洗涤，50℃真空干燥得到类白色固体1-(7-异丙基-6-(1-甲基-3-苯基-1h-吡唑-4-基)-1,3-二氢异苯并呋喃-4-基)-3-异丙基-2,4(1h,3h)-嘧啶二酮(化合物2)，20.9g，产率为86％。
[0054]
实施例3、化合物3的制备
[0055][0056]
将100ml水和300ml thf的溶液用氮气鼓泡，然后通过套管和氮气压力转移到含有1-(6-碘-7-异丙氧基-1,3-二氢异苯并呋喃-4-基)-3-异丙基嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮(50mmol)，4,4,5,5-四甲基-2-(萘-2-基)-1,3,2-二氧环戊硼烷(60mmol)和(100mmol)磷酸钾的烧瓶中，其中烧瓶用氮气吹扫过。将thf(100ml)用氮气鼓泡，然后通过套管和氮气压力转移到含有pd
2
dba
3
(0.5mmol)和1,3,5,7-四甲基-6-苯基-2,4,8-三氧杂-6-磷烷(2.5mmol)的烧瓶中，其中烧瓶用氮气吹扫过。通过套管和氮气压力将两个体系混合。将体系加热至50℃，并在氮气正压下搅拌过夜。液相检测反应完成后，将反应冷却至室温，并分三部分用l-半胱氨酸(6g)和氯化钠(85g)的水(550ml)溶液洗涤，所用的水脱气。通过硅藻土垫过滤thf溶液。用热thf(100ml)冲洗，两份thf溶液合并。将thf溶液在旋转蒸发器上浓缩至约100ml。在白色浆液中加入乙酸乙酯(400ml)并充分搅拌。搅拌过夜后过滤浆液。将湿滤饼用乙酸乙酯(2
×
50ml)洗涤，50℃真空干燥得到类白色固体1-(7-异丙基-6-(萘-2-基)-1,3-二氢异苯并呋喃-4-基)-3-异丙基-2,4(1h,3h)-嘧啶二酮(化合物3)，20.8g，产率为91％。
[0057]
实施例4、化合物4的制备
[0058][0059]
将100ml水和300ml thf的溶液用氮气鼓泡，然后通过套管和氮气压力转移到含有1-(6-碘-7-异丙氧基-1,3-二氢异苯并呋喃-4-基)-3-异丙基嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮(50mmol)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧环戊硼烷-2-基)乙酰苯酯(60mmol)和(100mmol)磷酸钾的烧瓶中，其中烧瓶用氮气吹扫过。将thf(100ml)用氮气鼓泡，然后通过套管和氮气压力转移到含有pd
2
dba
3
(0.5mmol)和1,3,5,7-四甲基-6-苯基-2,4,8-三氧杂-6-磷烷(2.5mmol)的烧瓶中，其中烧瓶用氮气吹扫过。通过套管和氮气压力将两个体系混合。将体系加热至50℃，并在氮气正压下搅拌过夜。液相检测反应完成后，将反应冷却至室温，并分三部分用l-半胱氨酸(6g)和氯化钠(85g)的水(550ml)溶液洗涤，所用的水脱气。通过硅藻土垫过滤thf溶液。用热thf(100ml)冲洗，两份thf溶液合并。将thf溶液在旋转蒸发器上浓缩至约100ml。在白色浆液中加入乙酸乙酯(400ml)并充分搅拌。搅拌过夜后过滤浆液。将湿滤饼用乙酸乙酯(2
×
50ml)洗涤，50℃真空干燥得到类白色固体1-(7-异丙基-6-(对乙酰氧基苯基)-1,3-二氢异苯并呋喃-4-基)-3-异丙基-2,4(1h,3h)-嘧啶二酮(化合物4)，19.7g，产率为85％。
[0060]
试验例1、本发明所得化合物在预防或治疗老年痴呆中的应用
[0061]
本发明采用了自然衰老认知障碍(老年痴呆)动物模型，通过动物本身的自然衰老来获得老年痴呆的动物模型。对60个月龄在21～22的大鼠适应性饲养10天，动物自由摄水，室温控制22-25度，湿度为50％-70％，光照12小时，黑12小时。通过morris水迷宫定位实验训练来筛选认知障碍的大鼠(老年痴呆大鼠)。
[0062]
morris水迷宫实验是一种强迫动物游泳，寻找水下平台的实验，主要用于评价动物空间学习记忆能力，提供的实验指标敏感可靠，操作简便，是测试和评价大鼠老年痴呆指标的经典实验。水迷宫水深50cm，水温控制在22-25度，水池中央设平台。水池中放入奶粉，充分混匀至水呈乳白色，使大鼠无法通过视觉辨认平台位置。正式试验前训练日将大鼠面向池壁放入水中，训练其寻找逃避平台，若大鼠找到并站在平台上3秒后不再滑落，可中止此次训练，记录其抵达平台所用时间及所游距离，并让其在平台上停留10秒，由此让大鼠学习记忆。不能找到者持续记录120s后将其引至平台并放置30秒，培训其学习记忆。每天4次训练，间隔15～30秒进行下一次训练，从4个不同方向入水，连续4天。第5天正式试验测试，实时图像系统自动记录大鼠的活动情况，并计算大鼠首次穿越平台(中心区域)的平均时间，评价动物的学习记忆情况。以青年(4月龄)大鼠平均逃避潜伏期99％正常值范围上限值为标准，将逃避潜伏期大于99％上限值的老年大鼠定为知障碍老年大鼠。标签每个大鼠，以便在完成最后试验后能计算出每组大鼠用药前平均逃避潜伏期。
[0063]
老年痴呆大鼠对照组(不给药，灌胃等体积的生理盐水)和治疗组(实施例1、实施例2、实施例3和实施例4中所得化合物，按45μg/kg配成液态，连续濯胃给药，每天2次，连续8周)；同时设青年大鼠对照组(不给药，灌胃等体积的生理盐水)。在实验过程中，保持每组10个大鼠。给药8周后，再次连续训练5天，记录每天各组动物在水中寻找平台的平均时间，第6天直接进行morris水迷宫测试。测定各组动物在水中寻找平台的时间。在训练过程中仍继续给药。
[0064]
结果如图1所示，给药前，老年认痴呆大鼠对照组和治疗组之间无显著性差异，###表示它们与青年大鼠对照组存在显著性差异，p＜0.001。给药8周后，再次进行morris水迷宫定位实验训练，第六天老年痴呆大鼠对照组和治疗组(化合物1-4)之间存在着显著性差异，***表示p＜0.001。结果表明：实施例1-4所得化合物均可一定程度改善老年痴呆大鼠组的平均逃避潜伏期，改善老年痴呆大鼠的学习记忆能力。其中化合物2的给药的保护作用最具有显著性。
[0065]
试验例2、蛋白质免疫印迹法测定老年痴呆大鼠海马区相关炎性因子tnf-α的表达。
[0066]
实验结束后，选取10％水合氯醛腹腔麻醉，按照0.3ml/100g的剂量，麻醉完毕后断头处死，然后在操作台上迅速分离出海马区组织。使用全细胞裂解液(whole cell lysates，wcl)裂解后离心，加入样品缓冲液煮沸，进行sds-page电泳，电泳结束后将蛋白转移到pvdf膜上，5％bsa封闭后，一抗tnf-α和内参蛋白(gapdh))孵育过夜，冲洗后hpr-标记的二抗室温孵育两个小时，冲洗后化学发光法检测enhanced chemiluminescence(ecl)detection system。
[0067]
有证据表明老年痴呆患者脑内存在着强烈的局灶性炎症反应，老年斑附近有激活的小胶质细胞和星形胶质细胞，研究发现这些激活的细胞可以表达白细胞介素炎性因子，如肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factors，tnf-α)。近年来，在此领域的研究发现证实了位于脑组织老年斑附近炎性因子的免疫反应呈阳性，并导致淀粉样蛋白合成的增加。因此抑制过度的免疫炎性反应成为治疗老年痴呆的另一种探索。
[0068]
结果如图2所示，本发明所得化合物2可以通过抑制老年痴呆大鼠海马区脑组织中的炎性因子水平，减轻海马区神经元损伤，达到改善老年痴呆大鼠的学习记忆能力。
[0069]
以上说明本发明所制备的化合物在老年痴呆的预防和治疗中有积极意义，为老年痴呆的药物研发提供了一条新的研究思路。

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