一种对枸杞及其干制品包装材料表面病毒的控制方法与流程

2021-02-02 03:02:04|

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[0001]
本发明属于食品消毒技术领域，涉及一种针对枸杞及其包装材料（玻璃、塑料）表面病毒的控制方法。

背景技术：

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枸杞属于最少加工类食品，最常见的处理方式有鲜果冷藏和干制两种，枸杞很符合现代人对天然、健康食品的追求和消费，格外适宜现代生活人们对健康养生的追求，产业带动性强，有明显的经济效益。但是近年来最少加工果蔬导致的食源性安全事件已经引起社会的广泛关注, 预示了果蔬采摘后品质控制的重要性。然而，国内的消毒剂多体现在杀菌，很少有关于对食源性病毒及沾染到食品表面可以引起人畜共患的非食源性病毒的消杀方法，更没有针对枸杞及其包装表面病毒的控制方法。

技术实现要素：

[0003]
本发明的目的在于提供一种枸杞及其包装（玻璃、塑料）表面病毒的有效消杀方法，以增加在枸杞及其包装表面病毒消杀领域的方法。
[0004]
本发明是采用以下技术方案实现的:通过人为建立病毒污染模型，来替代可能在收获前用已被病毒污染的水源灌溉，致使病毒在枸杞表面沉积或在采摘、运输、加工、销售和食用过程的各个环节中都有可能被病毒污染的枸杞，简化了操作流程，能有效控制枸杞表面病毒含量，用次氯酸钠处理后病毒滴度有明显降低。并且消毒剂剂量对枸杞产品品质无影响，为枸杞表面病毒消杀提供了参考价值。但目前对枸杞表面病毒消杀的研究还很少，还有很多方面可以继续深入。
[0005]
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种对枸杞及其包装表面病毒的控制方法，其特征在于主要包括噬菌体选择，噬菌体及其宿主菌株（atcc13706-b1）生长特性的研究：通过 moi=10接种病毒，确定了获得高滴度模式病毒φx174的时间，培养宿主对其对数生长期进行确定且按如下的步骤进行：（1）选取了一种具有代表性的模式病毒φx174，该病毒可以作为肠道病毒等的替代病毒；（2）按照 moi=10的病毒接种量，φx174潜伏期为20 min，培养3h即可获得高滴度噬菌体液，宿主菌株（atcc13706-b1)以10%的接种量在37℃，220rmp的摇床进行培养，确定1.5-2.5h为其对数生长期；培养基选用lb无抗液体培养基。lb无抗液体培养基主要成分如下:1%nacl、1%trypton、0.5%yeast。
[0006]
（3）通过悬液试验确定了常温条件下次氯酸钠对滴度为1~2
×
107pfu/ml的φx174进行10min混匀处理达到消毒效果的浓度为150mg/l，其可将悬液中φx174的滴度降低6.94个对数级，去除率达到100.00%。本发明所述的包装表面指的是：玻璃、塑料的表面。
[0007]
本发明进一步公开了对枸杞及其包装表面病毒控制方法在有效降低枸杞表面病毒含量方面的应用。实验结果显示:用150mg/l的次氯酸钠溶液作为消毒液，其可将悬液中
φx174的滴度降低6.94个对数级，去除率达到100.00%，对枸杞及其包装（玻璃、塑料）表面病毒进行消杀（其中模型枸杞、玻璃、塑料沾染病毒滴度对数值分别为：5.99、5.35、6.07），结果可使枸杞、玻璃、塑料表面φx174的滴度分别降低4.18、5.35和6.07个对数级，对应消杀率均为99.98%、100.00%和100.00%。
[0008]
本发明更加详细的描述如下：（1）选取一种具有代表性的模式病毒φx174，该病毒可以作为肠道病毒等的替代病毒。
[0009]
（2）对φx174及其宿主的生长周期等特性进行研究，按照 moi=10添加病毒，确认了φx174潜伏期为20 min，培养3h即可获得高滴度噬菌体液。宿主菌株（atcc13706-b1)以10%的接种量在37℃，220rmp的摇床进行培养，培养基选用lb无抗液体培养基，在1.5-2.5h生长曲线呈快速增长，菌株以几何级数快速生长，此时间段为对数生长期。
[0010]
（3）利用模式病毒代替真实病毒污染枸杞及其包装（玻璃、塑料），建立模型。
[0011]
（4）常温条件下用不同浓度梯度的次氯酸钠溶液对滴度为1~2
×
107pfu/ml的φx174进行10min混匀处理，150mg/l的次氯酸钠溶液可使悬液中噬菌体φx174的滴度降低6.94个对数级，去除率为100.00%，因此选用150mg/l的次氯酸钠溶液作为载体存在情况下的消毒液。
[0012]
（5）用150mg/l的次氯酸钠溶液作为消毒液对枸杞及其包装（玻璃、塑料）表面病毒进行消杀，结果可使枸杞、玻璃、塑料表面φx174的滴度分别降低4.18、5.35和6.07个对数级，对应消杀率均为99.98%、100.00%和100.00%。
[0013]
本发明主要解决了用真实病毒进行污染实验建立模型带来的安全隐患，噬菌体φx174属于感染细菌的病毒，具有病毒的共性、培养和计数方法比真实病毒容易、试验程序上的简便性、操作性和安全性都较强，重点考察了次氯酸钠对病毒的消杀效果，主要的难点在于从材料处理、模型建立以及消杀结束后进行双平板测滴度步骤紧凑，过程有严格的时间要求。
附图说明
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图1为本发明中模式病毒消杀工艺流程图。
具体实施方式
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下面通过具体的实施方案叙述本发明。除非特别说明，本发明中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。另外，实施方案应理解为说明性的，而非限制本发明的范围，本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言，在不背离本发明实质和范围的前提下，对这些实施方案中的物料成分和用量进行的各种改变或改动也属于本发明的保护范围。本发明中所使用的原料，如无特殊说明，均为常规的市售产品，例如trypton、yeast；本发明中所使用的方法，如无特殊说明，均为本领域的常规方法。
[0016]
其中噬菌体φx174、宿主菌株（atcc13706-b1)分别购自atcc（american type culture collection，美国模式培养物集存库）和 nbrc（ nitebiological resource center 日本技术评价研究所生物资源中心）。
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实施例1（1）选取噬菌体病毒φx174，该病毒可以作为肠道病毒等的替代病毒。
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（2）对φx174及其宿主的生长周期等特性进行研究，按照 moi=10添加病毒，确认了φx174潜伏期为20 min，培养3h即可获得高滴度噬菌体液。宿主菌株（atcc13706-b1)以10%的接种量在37℃，220rmp的摇床进行培养，培养基选用lb无抗液体培养基，在1.5-2.5h生长曲线呈快速增长，菌株以几何级数快速生长，此时间段为对数生长期。
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lb无抗液体培养基主要成分如下:1%nacl、1%trypton、0.5%yeast。
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（3）利用模式病毒代替真实病毒污染枸杞及其包装（玻璃、塑料），建立模型。
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（4）选用150mg/l的次氯酸钠溶液作为消毒液，其可将悬液中φx174的滴度降低6.94个对数级，去除率达到100.00%。
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（5）用150mg/l的次氯酸钠溶液作为消毒液对枸杞及其包装（玻璃、塑料）表面病毒进行消杀，结果：对表面沾染的噬菌体φx174有很明显的消除作用，其中对枸杞表面噬菌体消杀率达到99.98%，对包装材料表面噬菌体的消杀率达到100.00%。常规的枸杞消毒杀菌多体现在处理后菌群数量，本发明针对病毒的消杀。
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结论：从实施例1，实施例2的结果可以看出150mg/l的次氯酸钠溶液作为消毒液对枸杞及其包装（玻璃、塑料）表面病毒进行消杀，去除指示病毒效果明显且对枸杞色泽，口感无影响，不会造成采后损伤。
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实施例2实际生产中对枸杞进行的消毒杀菌侧重于杀菌。用1%的次氯酸钠处理10min的枸杞鲜果，经检测微生物指标（细菌总数、大肠菌群、霉菌、酵母菌、致病菌）全部达到企业标准。
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本发明所采用的消毒剂剂量对枸杞产品品质无影响, 消毒后的枸杞产品质量如下：（1）色泽、口感与处理前无差别。
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（2）对枸杞没有造成生理损伤。

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