一种微生物絮凝剂的制备方法及其应用与流程

min，上清液为微生物絮凝剂。1 l的发酵培养基中含有蔗糖20 g、甘油5 g、酵母膏0.5g、乙酸铵0.8g、k2hpo
4 4 g、kh2po
4 7 g、feso4·
7h2o 0.4g、nacl 0.1g、nh4cl0.4g、edta 0.03 g，余量为蒸馏水，ph 7.2。
[0019]
上述方法制备的微生物絮凝剂絮凝能力的测定：取4 ml本实施例微生物絮凝剂溶液加入至95 ml 0.5%的高岭土悬液中，以1% cacl2作为助凝剂，调节ph至7.5，200 r/min搅拌10 min，静置10 min，以滴加去离子水为对照，吸取液面1~2 cm处的液体，用uv-754型紫外分光光度计在波长550 nm处测定吸光度值，计算微生物絮凝剂对高岭土悬液的絮凝率，计算公式为：絮凝率=（对照的od
550nm
值-样品的od
550nm
值/对照的od
550nm
值）
×
100%，测得本实施例微生物絮凝剂对高岭土悬液的絮凝率为99.5%。
[0020]
实施例3用接种环取一环斜面保存的红平红球菌，接种至装有100 ml种子培养基的三角瓶中，30℃条件下，130 r/min振荡培养48 h。
[0021]
将上述种子液接种于发酵培养基中，按照5%的接种量接种，于35℃，150 r/min，振荡培养72 h，收集培养液，用纱布将菌体过滤除去，取发酵液，10000 r/min冷冻离心10 min，上清液为微生物絮凝剂。1 l的发酵培养基中含有蔗糖25 g、甘油7 g、酵母膏1g、乙酸铵1g、k2hpo
4 5 g、kh2po
4 10 g、feso4·
7h2o 0.5g、nacl 0.3g、nh4cl0.5g、edta 0.02 g，余量为蒸馏水，ph 8.0。
[0022]
上述方法制备的微生物絮凝剂絮凝能力的测定：取4 ml本实施例微生物絮凝剂溶液加入至95 ml 0.5%的高岭土悬液中，以1% cacl2作为助凝剂，调节ph至7.5，200 r/min搅拌10 min，静置10 min，以滴加去离子水为对照，吸取液面1~2 cm处的液体，用uv-754型紫外分光光度计在波长550 nm处测定吸光度值，计算微生物絮凝剂对高岭土悬液的絮凝率，计算公式为：絮凝率=（对照的od
550nm
值-样品的od
550nm
值/对照的od
550nm
值）
×
100%，测得本实施例微生物絮凝剂对高岭土悬液的絮凝率为95%。
[0023]
实施例4用接种环取一环斜面保存的红平红球菌，接种至装有100 ml种子培养基的三角瓶中，30℃条件下，130 r/min振荡培养48 h。
[0024]
将上述种子液接种于发酵培养基中，按照5%的接种量接种，于30℃，130 r/min，振荡培养72 h，收集培养液，用纱布将菌体过滤除去，取发酵液，10000 r/min冷冻离心10 min，上清液为微生物絮凝剂。1 l的发酵培养基中含有蔗糖20 g、甘油5 g、酵母膏0.5g、乙酸铵0.8g、k2hpo
4 4 g、kh2po
4 7 g、feso4·
7h2o 0.4g、nacl 0.1g、nh4cl0.4g、edta 0.03 g，余量为蒸馏水，ph 6.0。
[0025]
对照组：实施例2方法制备的微生物絮凝剂，不同之处在于将培养基ph调整为6.0。
[0026]
上述方法制备的微生物絮凝剂絮凝能力的测定：取4 ml本实施例微生物絮凝剂溶液加入至95 ml 0.5%的高岭土悬液中，以1% cacl2作为助凝剂，调节ph至7.5，200 r/min搅拌10 min，静置10 min，以实施例2制备的微生物絮凝剂为对照，吸取液面1~2 cm处的液体，用uv-754型紫外分光光度计在波长550 nm处测定吸光度值，计算微生物絮凝剂对高岭土悬液的絮凝率。
[0027]
测得本实施例微生物絮凝剂对高岭土悬液的絮凝率为88%。
[0028]
实施例5
用接种环取一环斜面保存的红平红球菌，接种至装有100 ml种子培养基的三角瓶中，30℃条件下，130 r/min振荡培养48 h。
[0029]
将上述种子液接种于发酵培养基中，按照5%的接种量接种，于30℃，130 r/min，振荡培养72 h，收集培养液，用纱布将菌体过滤除去，取发酵液，10000 r/min冷冻离心10 min，上清液为微生物絮凝剂。1 l的发酵培养基中含有蔗糖20 g、蛋白胨0.5g、乙酸铵0.8g、k2hpo
4 4 g、kh2po
4 7 g、feso4·
7h2o 0.4g、nacl 0.1g、nh4cl0.4g 0.03 g，余量为蒸馏水，ph 7.2。
[0030]
对照组：实施例2方法制备的微生物絮凝剂，不同之处在于培养基组分不同。
[0031]
上述方法制备的微生物絮凝剂絮凝能力的测定：取4 ml本实施例微生物絮凝剂溶液加入至95 ml 0.5%的高岭土悬液中，以1% cacl2作为助凝剂，调节ph至7.5，200 r/min搅拌10 min，静置10 min，以实施例2制备的微生物絮凝剂为对照，吸取液面1~2 cm处的液体，用uv-754型紫外分光光度计在波长550 nm处测定吸光度值，计算微生物絮凝剂对高岭土悬液的絮凝率。
[0032]
测得本实施例微生物絮凝剂对高岭土悬液的絮凝率为86.7%。
[0033]
实施例6用接种环取一环斜面保存的红平红球菌，接种至装有100 ml种子培养基的三角瓶中，30℃条件下，130 r/min振荡培养48 h。
[0034]
将上述种子液接种于发酵培养基中，按照5%的接种量接种，于30℃，130 r/min，振荡培养72 h，收集培养液，用纱布将菌体过滤除去，取发酵液，10000 r/min冷冻离心10 min，上清液为微生物絮凝剂。1 l的发酵培养基中含有乳糖30 g、尿素7.5 g、cacl
2 0.5 g
、
mgso430 g、nacl 0.2 g，ph8.5。
[0035]
对照组：实施例2方法制备的微生物絮凝剂，不同之处在于培养基组分不同。
[0036]
上述方法制备的微生物絮凝剂絮凝能力的测定：取4 ml本实施例微生物絮凝剂溶液加入至95 ml 0.5%的高岭土悬液中，以1% cacl2作为助凝剂，调节ph至7.5，200 r/min搅拌10 min，静置10 min，以实施例2制备的微生物絮凝剂为对照，吸取液面1~2 cm处的液体，用uv-754型紫外分光光度计在波长550 nm处测定吸光度值，计算微生物絮凝剂对高岭土悬液的絮凝率。
[0037]
测得本实施例微生物絮凝剂对高岭土悬液的絮凝率为84.3%。
[0038]
在研制本发明微生物絮凝剂的过程中，研发人员发现ph、氮源、碳源以及碳氮的比例、金属离子、无机盐等都会对红平红球菌菌种的增殖以及微生物絮凝产生很重要影响。研发人员经过大量创造性的试验，得到了本发明的发酵培养基成分，本发明发酵培养基的碳源、氮源的来源物质，以及碳/氮的比例能高效促进细菌生长的同时，还能保证微生物絮凝剂的活性。絮凝剂的产生菌在不同的ph值条件下，增殖速度完全不同，本发明的ph值范围适合红平红球菌的增殖及促进絮凝剂的活性。本发明的发酵培养基中加入的edta能抑制铁离子沉淀，也能调节菌的生长。本发明方法制备微生物絮凝剂对高岭土悬液的絮凝率均达大于90%。
[0039]
以上所述仅是本发明的优选实施方式，本发明的保护范围并不仅局限于上述实施例，凡属于本发明思路下的技术方案均属于本发明的保护范围。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理前提下的若干改进和润饰，这些改进和润饰也
应视为本发明的保护范围。

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