4-取代烷基卡巴潘尼姆类抗菌素的制作方法

专利名称：4-取代烷基卡巴潘尼姆类抗菌素的制作方法
专利说明 本发明涉及具有抗菌活性的，在4位带有取代烷基的新的卡巴潘尼姆(Carbapenem)类抗菌素以及它们的无毒的可药用的盐。因此，本发明的卡巴潘尼姆抗菌素及其药物组合物可用于治疗人类以及其它动物的细菌感染;它可以单独使用，也可结合其它抗菌素(514类，210亚类)一起使用。本发明也提供了这类卡巴潘尼姆抗菌素的制备方法以及一些新的中间体。
用于这一类化合物的术语既可以用基于来源名称“卡巴潘尼姆(Carbapenem)”的俗名系统，也可以用化学文摘(Chemical Abstract)上的系统命名法。在本发明中，位置的标志数是按照化学文摘的体系，例如，3-R3，4-R2，6-R1-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸，如下式所示
在这里作为一类化合物使用的术语“卡巴潘尼姆”，是可以和名称7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸互相交换地使用的。但是在所有的例子中，位置的数字标志都是按照化学文摘所应用的体系，如上式所解释的那样。
在这一领域已知有许多卡巴潘尼姆类抗菌素。这类抗菌素中典型的有沙纳霉素(thienamycin)(美国专利号3，950，357，1976年4月13日颁布)，它首次是由发酵析离的，并呈现广谱抗菌活性。Imipenem(美国专利号4，194，047，1980年3月18日颁布)是后来发展的沙纳霉素的化学上更稳定的衍生物。但是，由于它在人体中被肾脱氢肽酶(DHP)快速地分解，因此临床使用受到限制。为此，imipenem在临床应用时要和一种DHP抑制剂一起服用。

虽然imipenem具有广谱抗菌活性，但仍然需求更有效的卡巴潘尼姆类抗菌素，它们在治疗感染疾病过程中在化学方面和生物方面都比imipenem更稳定。寻求改进的卡巴潘尼姆类抗菌素的努力一直在继续着，这表现在这一领域中大量被授予和公开的专利文献中。以下的公开和专利是最近期在卡巴潘尼姆领域进展的代表。
1981年6月10日公布的欧洲专利公开EP-30，032公开了大量具有下式的卡巴潘尼姆类化合物
其中的R1，R2，R6，R7和R8独立地选自尤其是由氢(R1和R2不是氢)，取代和未取代的具有1至10个碳原子的烷基、烯基和炔基构成的一组基团。该一般公开中除要求R1和R2不是氢以外，并没有提供不同的取代基R1，R2，R6，R7和R8之间的区别。
1982年2月3日公布的欧洲专利公开EP-45，198中描述了一系列具有下式的卡巴潘尼姆类化合物
其中R1是烷基，芳基，烷硫基，芳硫基或酰氨基烷硫基;R2和R3独立地选自烷氧羰基或氰基或式COR1的基团;R3还可以是烷基或芳基。该公开中提到4位有两个取代基，其中至少有一个不是烷基。
1983年2月16日公布的欧洲专利公开EP-71，908中公开了一系列具有下式的卡巴潘尼姆化合物
其中R6和R7，R9和R10是不必区分的取代基团，并且这两个基团是相同的取代基团。虽然在第57页中有R9和R10的优选的取代基的列表，可是在实施例中却只举出了甲基。
1985年11月6日公布的欧洲专利公开EP-160，391中叙述了一系列具有下式的卡巴潘尼姆类化合物
其中R1和R2是相同的或不同的基团，各自代表氢原子(条件是R1和R2不都代表氢原子)，卤原子，C2-C7烷氧羰基，取代或未取代的C1-10烷基，C2-C6链烯基，C2-C6炔基，C1-C6烷氧基，C1-C6烷硫基，C3-C8环烷基，C6-C10碳环芳基，芳烷基，芳烯基或芳炔基，特别是其中被各种取代基所取代的基团，或者R1和R2和它们所连接的碳原子一起，形成C3-C8脂环。但在实施例中列举的R1和R2取代基仅限于那些R1和R2是甲基，甲氧基，氟和1，1-二甲基等基团。
1985年11月13日公布的欧洲专利公开EP-160，876公开了一系列具有下式的卡巴潘尼姆类化合物
其中R9是卤素，OR，OSO2R，

，SH，SR，

SO2R，NH2，NHR，N(R)2，

其中的R是氢，C1-6烷基，C2-6链烯基，C2-6炔基，苯基，具有7-12个碳原子的苯基烷基，具有3-6个碳原子的环烷基，具有3-6个碳原子在环上，并有1-6个碳原子在烷基部份的环烷基，杂环基类(包括杂环基，杂环基烷基，杂芳基和杂芳基烷基;其中在杂环基中还列有许多取代基。幸亏，在第29页上提供了有代表性的R9取代基的表，它指明R9是通过卤素，硫，氧，氮和磷而连接到卡巴潘尼姆环上的。
1986年2月5日公布的欧洲专利公开EP-170，019公开了一系列在4位被醚基取代并具有下式的卡巴潘尼姆类化合物
其中R1是低级烷基，芳基或芳基-低级烷基，R3和R4是通常存在于卡巴潘尼姆化合物中的取代基。实施例中所列举的取代基是那些R1是甲基，乙基，异戊基和苯基等基团。但是，1987年10月4日至7日召开的关于抗菌剂和化学治疗的27届国际科学会议摘要759中，EP-170，019发明者之一的E.Goetschi公开了一些1β-烷氧基卡巴潘尼姆类化合物，其中Ro 19-8928被具体地列举出来，它的R1是羟乙基。
这样，本发明的目的是提供一类新的抗菌素，它具有抗菌活性并可用于治疗人类及其它动物的感染性疾病。本发明的进一步的目的是提供制备这类抗菌素及它们的无毒的可药用的盐类和衍生物的化学方法和中间体，以及含有这类抗菌素的药物组合物和在需要时给人类或动物服用这类抗菌素和组合物的治疗方法。
本发明提供新的具有下式的4-取代烷基-卡巴潘尼姆抗菌素或其无毒的可药用的盐
其中R1，R2，R3，R4，A和B将在下面给予定义，这类化合物是微生物的强有力的抑制剂，并可在人类和其它动物的感染疾病的治疗中用作抗菌剂。本发明也包括含有所说的卡巴潘尼姆抗菌素的药物组合物，以及包括服用所说的卡巴潘尼姆抗菌素或其药物组合物的治疗方法。本发明也提供有用的中间体，它们的制备方法，以及制备具有上式Ⅰ的化合物的方法。
本发明提供新的4-取代烷基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸类化合物或其无毒的可药用的盐，它们是可用于治疗人类和其它动物的感染性疾病的抗菌剂，具有下式Ⅰ结构
其中 R1是氢，C1-2烷基，-CH2OH，-CH2NH2，

A为未取代的或羟基取代的直链或支链C1-10亚烷基或间插有选自氧、硫和氮的杂原子的直链或支链C1-10亚烷基; R2是羟基，卤素，C1-4烷氧基，氰基，叠氮基，季铵基，-NR5R6，

，氮杂环丁烷基或选自通过其碳原子来连接的杂芳基和杂脂环基的5或6员杂环基; B是一个直链或支链的C1-6亚烷基，或者当R3通过它的碳原子连接到硫原子上时它就代表一个直接的化学键; R3是一个有机基团的残基; R4是氢，一个可除去的羧基保护基或是一个生理上可水解的酯基; R5和R6各自独立地是氢，C1-6烷基，C1-4烷氧基，羟乙基，叠氮基乙基，氨基乙基，并且当R5是氢或C1-4烷基时，R6是羟基，C1-4烷氧基，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，取代的C1-4烷基(其中所说的烷基取代基选自羟基，叠氮基，氨基，胍基，氰基，羧基，亚胺甲基和苯基)或一种氨基酸或肽的酰基残基;或者R5，R6和它们所连接的氮原子一起是一个未取代的或取代的杂环基，它具有1至2个环，每个环上可以有多至4个杂原子，这些杂原子可独立地选自氧、氮和硫，其中所说的取代基选自C1-4烷基，C1-4烷氧基，三氟甲基，羟基，卤素，氨基，氰基，羧基，亚胺甲基，脲基，氨基甲酰基，C1-4烷氨基和氨基(C1-4)烷基; W是一个直接的键，氧，硫或NR10; Y是氧或NR10; Z是氢，羟基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，-NR7R8，氨基(C1-4)烷基，叠氮基(C1-4)烷基或羟基(C1-4)烷基; R7和R8各自独立地是氢，C1-4烷基，羟基，苄氧基或链烷酰基; R10是氢，C1-4烷基，C1-4烷基氨基或二(C1-4)烷基氨基。
本发明也提供制备式Ⅰ化合物的立体选择性方法以及在制备式Ⅰ化合物过程中涉及的新的中间体。
术语“C1-2烷基”，“C1-4烷基”，“C1-6烷基”和“C1-4烷氧基”在这里和在权利要求中应用时(除非在文中另外指明)意指直链或支链的烷基或烷氧基，诸如甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，异丁基，叔丁基，戊基，己基等。优选的是，这些基团含有1至4个碳原子，更好是它们含有1至2个碳原子。术语“低级”是用来指1至6个碳原子，除非另外指明。在这里和在权利要求中应用的术语“C3-6环烷基”意指一个碳环环系，诸如环丙基，环丁基，环戊基，环庚基和环己基。在这里和在权利要求中应用的术语“C5-6环烷烯”意指一个环系，它含有不饱和键，比如环戊烯和环己烯等。对“A”和“B”来说，在这里和在权利要求中应用的术语“直链或支链的C1-10亚烷基”和“直链或支链的C1-6亚烷基”各自意指直链或支链的亚烷基，诸如亚甲基，亚乙基，亚丙基，甲基亚乙基，亚丁基，甲基亚丙基，乙基亚乙基，二甲基亚乙基，亚戊基，甲基亚丁基，乙基亚丙基，亚己基，甲基亚戊基，亚庚基等等。对于“A”来说，在这里和在权利要求中应用的术语“羟基取代的直链或支链的C1-10亚烷基”意指被羟基取代的直链或支链的亚烷基，诸如2-羟基亚乙基，2或3-羟基亚丙基，2，3或4-羟基亚丁基，2或3-羟基-甲基亚丁基，2，3，4或5-羟基亚戊基等等。对“A”来说，在这里和在权利要求中应用的术语“间插有选自氧，硫或氮的杂原子的直链或支链亚烷基”意指直链或支链的亚烷基，在其中含有氧，硫或氮原子，诸如-(CH2)-1-6O-(CH2)2-6-，-(CH2)1-6-S-(CH2)2-6-，-(CH2)1-6-NH-(CH2)2-6-，-(CH2)1-6-NCH3-(CH2)2-6-等等。除非另外专门指明，在这里和在权利要求中所用的术语“卤素”是指包括溴，氯，碘和氟，而术语“卤化物”则指溴化物，氯化物和碘化物阴离子。在这里和在权利要求中所用的术语“季铵基”意指一个季铵基，它可以是非环状的，环状的或二者的结合，并可包含一个或多个另外的选自氮、硫和氧的杂原子。合适的非环状的，环状的和结合的非环状/环状季铵基是那些在这里以及1984年12月4日公布的美国专利4，486，586中用-N≡Q定义的那些季铵基，该专利在此引入作为参考。
非环状季铵基的实例是具有

的基团，其中的R′，R″和R

可以相同或不同，并且可以是，例如，(低级)烷基，(低级)链烯基或取代的(低级)烷基。环状季铵基的实例有完全不饱和的单环杂环环系以及双环杂环环系(其中至少有一个含氮的环系是完全饱和的)。合适的环状环系有，例如，吡啶基，嘧啶基，吡嗪基，噻唑基，噻二唑基，喹啉基，异喹啉基，噻唑并〔4，5-c〕-吡啶基等等，这些基团均以其氮原子连接形成季铵基。结合的非环状/环状的季铵基的实例包括，例如，1-甲基吡咯烷基，1-甲基六氢吡啶基，1-甲基吗啉基，1-甲基哌嗪基，1-甲基咪唑烷基和1-甲基异二氢吲哚基，这些基团均以其氮原子连接形成季铵基。
术语“氨基酸或肽的酰基残基”意指天然存在的氨基酸或由它们衍生的肽的酰基残基。合适的氨基酸是那些在这里述及的和别的已知的氨基酸，诸如丙氨酸，甘氨酸，精氨酸，半胱氨酸，异亮氨酸，亮氨酸，赖氨酸，蛋氨酸，苯丙氨酸，脯氨酸，苏氨酸等等。合适的肽是那些含有天然存在的氨基酸的肽。但是，本专业的熟练技术人员应当了解，非天然的氨基酸例如那些D构型的氨基酸可以连接到天然存在的L-构型的酰基残基的氨基酸上。最好是，合适的肽是天然存在的氨基酸所组成的二肽，诸如甘氨酰甘氨酸，甘氨酰亮氨酸，丙氨酰丙氨酸，丙氨酰苯丙氨酸，丙氨酰甘氨酸等等。本专业熟练的技术人员也应当理解，其中R2含有天然存在的氨基酸或肽的酰基残基的式Ⅰ所示的卡巴潘尼姆类化合物可以作为一种在体内有活性的前体药物，即氨基酸残基可在宿主体内被肽酶所水解，产生所需的活性更高的卡巴潘尼姆类抗菌素形式。含有氨基酸或肽的酰基残基的本发明的化合物在体内的活性比在体外更高。在这里和在权利要求中应用的术语“无毒的可药用的盐”是用来指那些无毒的酸盐和碱盐，以及两性离子物种的盐。与碱形成的盐包括无机金属盐诸如钠，钾，钙，镁和铵盐，以及与无毒的胺类如三烷基胺，吡啶，甲基吡啶，二苄基胺，乙醇胺，N-甲基吗啉和其它用来与羧酸形成羧酸盐的胺类所形成的盐。与酸形成的盐包括无机酸盐诸如盐酸盐，氢溴酸盐，氢碘酸盐，硫酸盐，磷酸盐等等，以及有机酸盐诸如甲酸盐，乙酸盐，马来酸盐，柠檬酸盐，琥珀酸盐，抗坏血酸盐，乳酸盐，富马酸盐和酒石酸盐等已用来与碱性的胺形成盐的酸盐。因为式Ⅰ化合物在它的R1，R2和R3取代基中也可以有酸性或碱性基团，所以“无毒的可药用的盐”也包括这些官能团与适当的酸或碱的加成盐，诸如盐酸盐，磷酸盐，钠盐，钾盐，铵盐，氯化物，乙酸盐以及上述酸性基团或碱性基团的其它盐类。除非另外专门指出，这里和权利要求中所用的术语“生理上可水解的酯基”是用来指生理上可接受并在生理条件下可被水解的酯基，诸如C1-6烷基，苄基，4-甲氧基苄基，(低级)链烷酰氧(低级)烷基，如乙酰氧基甲基，丙酰氧基甲基或新戊酰氧基甲基，(低级)烷氧羰氧(低级)烷基，如甲氧羰氧甲基，乙氧羰氧甲基或2-甲氧羰氧乙基，(5-甲基-2-氧代-1，3-二氮杂环戊-4-基)甲基等等。
在本发明中被用来封闭或保护羧酸官能团的羧基保护基是那些本专业熟练技术人员所熟知的保护基，并且最好是，所说的保护基如果需要，可用不会导致分子的其它部分出现任何明显破坏的方法，把它除去。例如应用化学或酶水解的方法，在温和反应条件下用化学还原剂处理的方法，用紫外光照射的方法或催化氢化的方法等。这类容易除去的羧基保护基的实例包括C1-6烷基，2，2，2-三氯乙基，甲硅烷基诸如三甲基硅基和叔丁基二甲基硅基，苯基，环上取代的苯基如4-氯苯基，甲苯基和叔丁基苯基，苯基(低级)烷基，环上取代的苯基(低级)烷基如苄基，4-甲氧基苄基，4-硝基苄基，二苯甲基和三苯甲基，甲氧基甲基，2，2，2-三氯乙氧羰基，苄氧基甲基，(低级)链烷酰氧(低级)烷基诸如乙酰氧甲基，丙酰氧甲基，(低级)链烯基如乙烯基和烯丙基，未取代的或取代的苯基(C1-4)烷氧羰基诸如苄氧羰基和4-硝基苄氧羰基，以及(C2-4)链烯氧羰基诸如烯丙氧羰基。特别好的羧基保护基是苄基，4-硝基苄基，2-硝基苄基，2，4-二甲氧基苄基，4-甲氧基苄基等等，更好是烯丙基或取代的烯丙基。其它合适的保护基已在Theodora W.Greene著的“有机合成中的保护基”(“Protective Groups in Organic Syuthesis”)一书(Johm Wiley Sons出版，1981)第五章羧基的保护基中公开，该文献作为参考引入本发明。
在本发明中可被用来封闭或保护氨基的氨基保护基，也是本专业熟练技术人员所熟知的。常规的氨基保护基的实例已在J.W.Barton所著的“有机化学中的保护基”(“Protective Groups in Organic Chemistry”，J.F.W.McOmie编，Plenum Press出版，New York，N.Y.，1973)第二章以及R.A.Boissonnas发表在“有机化学进展”(Advances in Organic Chemistry)3 159-190(1963)的论文中描述过。对于本专业熟练的技术人员，显然知道所用的具体的氨基保护基并不是关键性的，人们只需选择一个基团，它在反应过程的以后的步骤中是稳定的，并且在保持敏感的β-内酰胺核不变的条件下能被除去就可以了。
适当的氨基保护基包括，例如，酰基如甲酰基，乙酰基和取代的乙酰基(如卤代乙酰基)，苯甲酰基和取代的苯甲酰基，烷氧羰基，卤代烷氧羰基，链烯氧羰基，芳烷氧羰基，卤代芳烷氧羰基，苄基和苄基衍生物，三苯甲基和三苯甲基衍生物，亚磺酰基衍生物，磺酰基衍生物，二酰基衍生物如邻苯二甲酰亚氨基或琥珀酰亚氨基或它们的衍生物，以及与醛或酮形成的席夫碱类。合适的氨基保护基的具体实例包括甲酰基，乙酰基，三氟乙酰基，三氯乙酰基，苯甲酰基，甲苯甲酰基，2，2，2-三氯乙氧羰基，异丙氧羰基，叔丁氧羰基，环戊基氧羰基，环己基氧羰基，苄氧羰基，2-硝基苄氧羰基，4-硝基苄氧羰基，4-甲氧基苄氧羰基，4-氯苄氧羰基，烯丙氧羰基，2-呋喃氧羰基，三甲基硅基乙氧羰基，N-苯基氨基甲酰基，苄基，4-硝基苄基，三苯甲基，苯磺酰基，对甲苯磺酰基，2-硝基苯亚磺酰基，苯基硫羰基，三甲基硅基，三乙基硅基，三苯基硅基，叔丁基二甲基硅基，甲基二苯基硅基和二酰基氨基保护基诸如邻苯二甲酰亚氨基，琥珀酰亚氨基及它们的衍生物。
本发明的化合物有一些不对称碳原子，因此可以一些立体化学的形式存在。本发明包括立体异构体的混合物以及单个立体异构体。优选的其中R1不是氢的式Ⅰ化合物，在1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷的环结构上应具有4R，5S，6S的构型，这和抗菌素沙纳霉素的立体化学构型是相同的。此外，取代基R1和A本身还可能含有不对称碳原子。如果合适，R1取代基可以R或S的构型存在。本发明既包括R1的R构型，也包括它的S构型，例如，1-羟基乙基，1-氟乙基和1-氨基乙基取代基的R和S异构体。最好是，R1取代基是R构型的，比如1R-羟基乙基和1R-氨基乙基。在取代基A的亚烷基上带有支链的烷基取代基或羟基取代基时，式Ⅰ化合物将会有额外的不对称碳原子。本发明包括式Ⅰ化合物的两种异构体，例如实例57，58和152的化合物。
在这里和在权利要求中定义R3时所用的术语“有机基团的残基”意指任何一种至少含有一个碳原子的有机残基，诸如甲基。此外，有机基团还包括但不限制于所有那些在这里解释的以及在卡巴潘尼姆领域内已知的3-取代基的那些有机基团。适当的季铵化的含氮杂环己在1987年2月10日颁布的美国专利4，642，341和1987年2月17日颁布的美国专利4，644，061中被公开，这两篇专利文献在此作为参考引入。其它合适的基团已在1988年5月17日颁布的美国专利4，745，188，特别是R8的定义中被公开，该文献在此引入作为参考。别的适当的在R3中定义的有机基团，已在1989年4月18日颁布的美国专利4，822，787，1989年6月20日颁布的美国专利4，840，946，1989年9月5日颁布的美国专利4，863，916，1989年12月19日颁布的美国专利4，888，344，1990年8月28日颁布的美国专利4，952，397和1990年10月9日颁布的美国专利4，962，103中被公开，这些专利文献在此引入作为参考。
R3优选为氢，C3-6环烷基或取代的C3-6环烷基，C5-6环烯基或取代的C5-6环烯基，苯基或取代的苯基，羟基，C1-4烷氧基，C1-4烷硫基，苯硫基或取代的苯硫基，卤素，氰基，硝基，-NR7R8，

，或是一个选自杂芳环或杂环脂环的，未取代或取代的杂环基团
它有1至2个环，在每个环中有4至7个环成员，并在每个环中可含有多至4个杂原子，这些杂原子独立地选自氧，氮和硫;其中所说的杂环基团可通过一个连接在所说杂环基团的碳原子上的硫原子而被连接;其中所说的C3-6环烷基，C5-6环烯基，苯基和杂环取代基可以选自由下列基团构成的一组基团一个或两个C1-4烷基，C1-4烷氧基，三氟甲基，羟基，卤素，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，氰基，羧基，亚胺甲基，脲基，氨基甲酰基，氨基(C1-4)烷基，C1-4烷基氨基(C1-4)烷基，二(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基，C1-4烷氧羰基，C1-4烷氧羰基(C1-4)烷基，氨基(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基和C1-4烷基羰氧基，并且所说的杂环基还可以被

基所取代。
在R2的定义中，这里和权利要求中所用的术语“氮杂环丁烷基”意指未取代的或取代的，并且在式Ⅰ化合物的R2，R3，R5和R6的定义中，术语“杂环基”是未取代的或取代的，包括在这里作解释用的杂环基，并且也包括，但不限制于呋喃基，噻吩基，噻唑基，咪唑基，咪唑啉基，噁唑基，噁二唑基，噻二唑基，三唑基，四唑基，异噁唑基，异噻唑基，吡咯基，3-吡咯烷-1-基吡喃基，四氢呋喃基，吡唑基，吡啶基，嘧啶基，四氢呋喃基，哒嗪基，吡嗪基，三嗪基，氮杂环丁烷基，吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，噻唑烷-5-基，吗啉基，硫代吗啉基，1，4-噻嗪-2-基，苯并噁唑基，吲哚基，苯并咪唑基，喹啉基，异喹啉基，喹喔啉基，喹唑啉基，6，7-二氢-5H-吡唑并〔1，2-a〕〔1，2，4〕三唑鎓-6-基，其中所说的R2，R3，R5和R6的氮杂环丁烷基和杂环取代基是选自包括一个或两个下列基团的一组基团C1-4烷基，C1-4烷氧基，三氟甲基，羟基，卤素，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，氰基，羧基，亚胺甲基，脲基，氨基甲酰基，氨基(C1-4)烷基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基，C1-4烷氧羰基，C1-4烷氧羰基(C1-4)烷基，C1-4烷基羰氧基和

基。
其中的R4是氢，阴离子电荷或生理上可水解的酯基的式Ⅰ化合物和其无毒的可药用盐一起，可用作抗菌剂。式Ⅰ的其余化合物是有价值的中间体，可以转化为上述有生物活性的化合物。
式Ⅰ的卡巴潘尼姆类化合物可以用各种方法来制备。在一个具体实施方案中，式Ⅰ化合物优选是由新的具有式Ⅱ的化合物来制备，
其中的R11是氢，C1-2烷基，-CH2OH，-CH2O-P2，-CH2NH2，-CH2N-P4，
A是一个未取代的或被羟基取代的直链或支链的C1-10亚烷基或者间插有选自氧、硫和氮的杂原子的、直链或支链的C1-10亚烷基;P1是一个通常容易除去的羧基保护基;R12是羟基，卤素，C1-4烷氧基，叠氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4，或一个任意的带保护基的氮杂环丁烷基或选自杂环芳基和杂环脂环基的5或6员杂环基，它们通过它们的碳原子连接;P2和P3各自独立地是一个常规的羟基保护基;P4是一个常规的氨基保护基。
在另一个具体实施方案中，式Ⅱ化合物可以由新的具有式Ⅲ的中间体来制备，
其中R11，A，R12和P1的定义同上，R18是氢或P4，而P4是一个通常的氨基保护基。
在另外一个具体实施方案中，式Ⅲ化合物可由新的具有式Ⅳ的中间体来制备，
其中R11，A，R12和R18的定义同上。
式Ⅳ化合物可通过各种方法制备，并且作为解释，将制备较优选的一类式Ⅳ化合物的具体实例的方法总结为通过反应式1所解释的反应系列制备具有式Ⅳa的中间体化合物。
在这一反应系列中，在步骤(A)中由硫醇Ⅴ制备的硫酯Ⅵ在步骤(B)中被转化为甲硅烷基烯醇醚Ⅶ，无需分离，即在步骤(C)中通过在4位的离去基团L的亲核取代而被偶联成氮杂环丁酮Ⅷ。得到的中间体Ⅸ(例举的是β-异构体的形式)然后在步骤(D)中被皂化产生相应的羧酸Ⅳa。在反应式1中解释的反应的一般过程和方法，已在由本发明者在1988年9月20日颁布的美国专利4，772，683中叙述过，该专利在此引入作为参考。
反应式1
现在参看反应式1，步骤(A)说明硫醇Ⅴ转化为硫酯Ⅵ的酯化反应。步骤(A)对于本专业熟练的技术人员是众所周知的，它可用其中R是氢或甲基的2-吡啶甲硫醇和适当的经活化的羧基部分，像这里描述的那样来进行反应，其中A和R12的定义同上。
步骤(B)说明硫酯Ⅵ与三氟甲磺酸三有机基硅基酯甲硅烷基化试剂之间反应而形成甲硅烷基烯醇醚Ⅶ。步骤(B)的反应是在一种惰性有机溶剂中，在一种有机碱存在的条件下进行的。可以应用的合适的惰性有机溶剂包括二氯甲烷，四氢呋喃，四氯化碳，环己烷，二噁烷，二甲氧基乙烷，乙醚和氯仿。反应温度可在大约-40℃至+30℃范围内。最方便地是，在冷却条件下，最好在大约-15℃至0℃之间把反应物进行混合，然后让它们逐渐温热到室温。
三氟甲磺酸三有机基硅基酯甲硅烷基化试剂是众所周知的，它包括三氟甲磺酸三甲基硅基酯，三氟甲磺酸三异丙基硅基酯，三氟甲磺酸三乙基硅基酯，三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯，三氟甲磺酸叔丁基二苯基硅基酯或三氟甲磺酸2，4，6-三(叔丁基苯氧基)二甲基硅基酯。用三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯已经获得优良的结果。这样，P将是所用的具体的三氟甲磺酸三有机基硅基酯甲硅烷基化试剂的三有机基硅基残基。
合适的有机胺碱包括二异丙基乙胺，DBU(1，8-二氮杂双环〔5.4.0〕十一-7-烯)，DBN(1，5-二氮杂双环〔4.3.0〕壬-5-烯)，但特别优选的是三(C1-C4)烷基胺诸如三甲胺，三乙胺，三丁胺和三丙胺。但是已经发现，在有一些情况下为进行步骤(A)的反应可能必需用更强的碱。
一般，有机碱和三氟甲磺酸三有机基硅基酯甲硅烷基化试剂存在的量比硫酯Ⅵ要过量差不多两倍摩尔数，而有机碱又稍为比三氟甲磺酸三有机基硅基酯甲硅烷基化试剂过量一些。反应时间一般在大约1小时至大约5小时之间变化，不过一般在大约3小时即可获得最高的收率。最好是，反应在惰性气氛下进行。
在步骤(C)中，甲硅烷基烯醇醚Ⅶ和4-位取代的氮杂环丁酮Ⅷ反应而产生中间体Ⅸ。反应是在一种路易斯酸催化剂存在的条件下在一种在路易斯酸催化剂存在时是惰性的溶剂中进行的，并且最好是在惰性气氛下进行。
适当的上面讨论的惰性溶剂最好是干燥的，并且一般含有大约10%体积的总的反应混合物。已发现，二氯甲烷能提供满意的结果。
适当的路易斯酸催化剂包括卤化锌，卤化锆和三氟化硼。已发现，氯化锌能提供满意的结果。
甲硅烷基烯醇醚Ⅶ被基团“-A-R12”所取代，其中的A是一个未取代的或羟基取代的直链或支链的C1-10亚烷基，或一个带有插入的，选自氧，硫和氮这类杂原子的直链或支链的C1-10亚烷基;R12是羟基，卤素，C1-4烷氧基，叠氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4，或一个任意地经保护的氮杂环丁烷基或选自杂环芳基或杂环脂环的5或6员杂环基，它们通过它们的碳原子而连接，其中P3是常规的羟基保护基，P4是常规的氨基保护基。
诸如式Ⅷ那样的3，4-二取代氮杂环丁酮中间体，其中P2代表常规的羟基保护基而L代表常规的离去基团，本身是已知的，并且在卡巴潘尼姆或潘尼姆(penem)核的6位带有(R)-羟乙基取代基的卡巴潘尼姆或潘尼姆类抗菌素的合成中是关键性的中间体。
具有式Ⅷ的化合物中的4位上的取代基被标明为“L”，它代表一个离去基团，在甲硅烷基烯醇醚Ⅶ的亲核取代反应中能够被置换。这类离去基团包括酰氧基(如，乙酰氧基，丙酰氧基或叔丁酰氧基)，卤素(如氯)，芳基磺酰基(如苯磺酰基)，甲磺酰基和对甲苯磺酰基。最好是，“L”是乙酰氧基，因为4-乙酰氧基氮杂环丁酮是容易得到的原料。
氮杂环丁酮Ⅷ中的羟基保护基“P2”和具有式Ⅶ的甲硅烷基烯醇醚的取代基“R12”中的羟基保护基“P3”可以相同，也可以是不同的。较好是，“P2”和“P3”是相同的，并且更好是，“P”，“P2”和“P3”都是相同的。
对于本专业熟练的技术人员是已知的羟基保护基是所希望的，因为它们能防止副反应的发生并在反应系列的以后各步提供增加的收率。合适的羟基保护基可以是，例如，酰基诸如苄氧羰基，二苯甲氧羰基，三苯甲氧羰基，对硝基-苄氧羰基和2，2，2-三氯乙氧羰基;芳基烷基诸如苄基，二苯甲基，三苯甲基或对硝基苄基;或三有机基硅基诸如三(C1-C6)烷基硅基(如三甲基硅基，三乙基硅基，三异丙基硅基，异丙基二甲基硅基，叔丁基二甲基硅基，甲基二异丙基硅基或甲基二叔丁基硅基)，三芳基硅基(如三苯基硅基，三(对二甲苯基)硅基)或三芳烷基硅基(如，三苄基硅基)。这些和别的合适的羟基保护基的实例以及它们的形成和除去的方法，在本专业领域中是已知的，例如，可参看T.W.Greene所著的“有机合成中的保护基”(“Protective Groups in Organic Synthesis”)中的第2章，John Wiley Sons，New York，1981出版。
为“P2”和“P3”选择的羟基保护基最好是一种可在以后的反应步骤中除去的保护基。最好应用庞大的三有机基硅基，诸如三异丙基硅基，叔丁基二苯基硅基或叔丁基二甲基硅基等，因为它们提供了基本是立体控制的还原步骤。这类基团可在很温和的条件下容易地除去，比如用HCl甲醇溶液处理或用氟化物离子处理(如用氟化四正丁基铵/四氢呋喃)，它们可保持敏感的β-内酰胺核不变。
反应步骤(C)最好是在惰性气氛下进行反应，反应温度在大约-30℃至大约室温之间。最好是，在冷却条件下，即在大约-15℃至大约+5℃时加入反应物，让它们在大约0-5℃进行反应，然后，如果需要，允许它们逐渐温热至室温。如果需要，反应可搅拌进行多至30小时以达到最高的收率。
得到的中间体Ⅸ的β-异构体，可通过通常的层析方法或高压液相层析(HPLC)与相应的α-异构体分离，或更好是通过结晶法来分离。另外，β-异构体可在中间体Ⅸ的皂化一步(如下面步骤(D)中讨论的那样，步骤(D)产生相应的羧酸Ⅳa)中与α-异构体分离，因为β-异构体当β/α比例为大约2/1或更大时即率先结晶析出。
在步骤(D)中，式Ⅸ化合物被皂化而产生相应的羧酸Ⅳa。皂化对本专业熟练的技术人员是众所周知的，它可按下面的步骤进行。首先将式Ⅸ化合物溶解在一种溶剂如四氢呋喃和含水的四氢呋喃中，然后在冷却下，加入过量的无机碱如氢氧化钠。也可以加入过氧化氢。较好是往皂化反应中加入过氧化氢，更好是，在加入无机碱之前就先加入过氧化氢。在大约0℃至大约室温，反应一般在1-2小时内完成，在下一步用无机酸如盐酸进行酸化时就产生羧酸Ⅳa。
制备具有式Ⅲa的重氮基中间体的方法可以方便地总结于反应式2中。简单地说，在这个反应系列中的步骤(E)中，氮杂环丁酮Ⅳa的羧酸部份被活化并被单羧基保护的丙二酸酯镁盐所置换，产生β-酮酯Ⅹ，然后它在步骤(F)中被重氮化而产生相应的重氮基中间体Ⅲa。
反应式2
现在参看反应式2，在步骤(E)中，羧酸Ⅳa形成酮酯Ⅹ的反应可方便地通过一个两步过程来进行。即先把羧酸部份用本专业熟练技术人员所熟知的普通羧酸活化基团来活化，优选地，用羰基二咪唑在一种惰性溶剂诸如四氢呋喃，二甲氧基乙烷，乙腈，苯和甲苯中并且最好是在苯或甲苯或乙腈-苯的混合物中进行。反应温度可在大约-15℃至大约70℃，并且最好是在大约0℃-20℃之间的范围内。经活化的羧基中间体可被析离，但最好是这中间体在惰性气氛下就地在第二步中与丙二酸酯镁盐反应，后者最好在应用之前用迪安-斯达克分水器恒沸蒸馏进行干燥以除去任何残存的水份。最好是所用的丙二酸酯镁盐是一种丙二酸单烷基或单芳基酯的镁盐，诸如丙二酸单烯丙基酯或取代的烯丙基酯及丙二酸的单苄酯、2-硝基苄酯、4-硝基苄酯、4-甲氧基苄酯或2，4-二甲氧基苄酯的镁盐。
丙二酸酯镁盐与已活化的羧基部份的反应，可在大约0℃至大约80℃的温度下，在一种惰性有机溶剂，诸如四氢呋喃，二噁烷，二氯甲烷，乙腈，苯和甲苯中，最好是在苯或乙腈中进行。最好是让反应在大约60℃进行，直到反应基本完全，这一般约需18小时。通常，丙二酸酯镁盐的用量最好是每当量的羧酸Ⅳa用大约1.1至大约3.0摩尔当量的过量丙二酸酯镁盐。这过量的丙二酸酯镁盐可一次加入反应液中，或者，如果需要，也可以分步加入，直到反应完成并达到最高的收率。
在步骤(F)中，酮酯Ⅹ被重氮化而产生相应的重氮基中间体Ⅲa。重氮化反应在本专业领域中是众所周知的，它可以在一种惰性溶剂诸如乙腈，二氯甲烷，甲苯，苯等这类溶剂中进行。最好是，反应在乙腈中用一种叠氮化物诸如4-羧基苯磺酰基叠氮，对甲苯磺酰基叠氮，甲磺酰基叠氮等来进行。反应是在一种碱，诸如三乙胺，二乙胺，吡啶，二甲基吡啶等存在的条件下在大约0℃至50℃的温度条件下，进行大约1至30小时。
在反应式3中，R12，A，P1和P2的定义和前面相同。一般，具有式Ⅲa的重氮化合物在步骤(G)中被直接环化形成具有式Ⅱa的双环酮。另外，如果需要，具有式Ⅲa的重氮化合物也可在步骤(H)中，在环化成为具有式Ⅱb的双环酮之前先脱去在6位的保护基。
反应式3
在步骤(G)中把具有式Ⅲa的重氮化合物环化形成具有式Ⅱa的双环化合物的反应，可以在一种惰性有机溶剂诸如四氢呋喃，乙酸乙酯，苯，甲苯，己烷，环己烷等溶剂中进行;反应温度为大约室温至大约110℃;反应时间15分钟至约5小时;反应在一种催化剂存在下进行，催化剂可用诸如双(乙酰丙酮)化铜(Ⅱ)，硫酸铜，铜粉，醋酸铑〔Rh2(OAc)4〕，辛酸铑(Ⅱ)，Pd(OAc)2，Pb(OAc)4等等，最好是用醋酸铑(Ⅱ)或辛酸铑(Ⅱ)。另外，环化反应也可以这样进行，即把具有式Ⅲa的化合物在一种溶剂诸如苯，乙醚等中，在大约0℃至大约室温的温度下，用一种通过Pyrex滤光片的光源(波长大于300nm)照射大约30分钟至大约2小时。
在另一种反应途径中，其中P2优选是三有机基硅基保护基、最好是叔丁基二甲基硅基的具有式Ⅲa的重氮化合物，在步骤(H)中通过下述方法脱去保护基，即把式Ⅲa化合物在一种溶剂诸如乙腈，甲醇，乙醇，四氢呋喃，二噁烷等中，在一种酸诸如盐酸，硫酸或醋酸存在的条件下(最好用大约3当量的1N盐酸水溶液)，在大约-10℃至大约30℃进行酸性水解。最好是，反应在大约0℃至大约室温下进行大约6至18小时，更好是在室温下进行18小时。然后把具有式Ⅲb的重氮化合物在步骤(Ⅰ)中置于环化的反应条件下，这条件和上面讨论的步骤(G)相同，从而产生具有式Ⅱb的双环酮。
按照反应式4中解释的反应系列，由具有式Ⅱa或Ⅱb的双环酮即可制得具有式Ⅰa的化合物，其中A，B，R3，R4和R12的定义与前面相同。本专业熟练的技术人员应该认识到，下述两条反应途径都适合于制备式Ⅰa化合物，但是，反应途径的选择将依赖于所用的原料诸如化合物Ⅱa或Ⅱb，以及取代基A，B，R3和R12的定义。这样，步骤(J)和(K)是在卡巴潘尼姆核上的6位带有羟基保护基时选用来进行反应的途径，而步骤(J′)和(K′)则是6位不带羟基保护基时进行反应的途径。
反应式4
现详尽叙述反应式4中的过程，步骤(J)和(J′)说明酮酯Ⅱa和Ⅱb的酰化或活化，步骤(J)和(J′)的反应对于本专业熟练的技术人员是众所周知的，它可以用适当的酰化试剂来进行以提供一种适合于步骤(K)和(K′)的置换反应的离去基团L1。
制备L1的合适的酰化试剂可包括酸酐，诸如醋酸酐，甲磺酸酐，对甲苯磺酸酐，对硝基苯磺酸酐，2，4，6-三异丙基苯磺酸酐，三氟甲磺酸酐等等;或者酰卤，诸如乙酰氯，丙酰氯，氯磷酸二乙酯，氯磷酸二苯酯，甲苯磺酰氯，对溴苯磺酰氯等等;或者其它的本专业领域中熟知的那些通过通常的步骤提供离去基团L1的试剂。最好是，酰化反应用氯磷酸二苯酯进行，它在中间体Ⅺ和Ⅻ的2位建立起二苯基磷酰氧基离去基团。
一般来说，酰化反应步骤(J)或(J′)是在一种惰性有机溶剂诸如二氯甲烷，乙腈，二甲基甲酰胺，四氢呋喃等中，在一种碱诸如二异丙基乙胺，三乙胺，4-二甲氨基吡啶，咪唑，二甲基吡啶，N-甲基吗啉，N-甲基哌啶，1，8-二氮杂双环〔5.4.0〕十一-7-烯，1，5-二氮杂双环〔4.3.0〕壬-5-烯等存在的条件下，在大约-20℃至大约40℃的温度条件下进行0.5至18小时，最好是在0℃至室温反应1至3小时。如果需要，中间体Ⅺ和Ⅻ可被析离，但是也可不经析离和提纯即方便地用于下一步反应中。
在下一个步骤(K)和(K′)中，具有式Ⅺ和Ⅻ的中间体通过通常的置换反应分别被转化为中间体ⅩⅢ和ⅩⅣ。即，具有式Ⅺ或Ⅻ的中间体可以和至少等摩尔量的具有下式的硫醇试剂反应 HS-B-R3 其中B的定义和前面相同，R3是一个有机基团的残基，反应是在一种惰性有机溶剂诸如二氯甲烷，二噁烷，四氢呋喃，乙腈，二甲基甲酰胺，二甲亚砜，六亚甲基磷酰胺等中，并且最好是在一种碱诸如二异丙基乙胺，三乙胺，4-二甲氨基吡啶，碳酸氢钠，碳酸钾等存在的条件下进行的，温度对于置换反应不是关键性的，不过最好是在大约-40℃至30℃之间反应30分钟至24小时。最方便的是，反应在大约0℃至5℃进行2至4小时。在步骤(K′)的置换反应中，在加入所说的硫醇试剂之前，可任意地先往反应混合物中加入大约等摩尔量的三甲基硅基氯以便暂时地保护1R-羟乙基。在置换反应完成之后，三甲基硅基保护基可按这里描述的除去P2保护基的方法容易地被除去，最好是在大约0℃至室温的温度下在四氢呋喃，四氢呋喃-水等这类溶剂中用醋酸处理大约1至4小时。
在步骤(L)中，具有式ⅩⅢ的化合物被脱去保护基，产生具有式ⅩⅣ的化合物。脱去保护基的反应是用通常的方法进行的，当羟基保护基是三有机基硅基诸如叔丁基二甲基硅基时，脱保护基的反应最好是在一种氟化四(低级)烷基铵诸如氟化四丁基铵存在的条件下进行。虽然反应条件不是关键性的，但最好是用大约三当量的氟化铵衍生物及任意地在大约六当量冰醋酸存在的条件下，在一种惰性有机溶剂诸如甲醇，乙醇，二噁烷，乙腈，二氯甲烷，四氢呋喃等溶剂或它们的混合物中进行反应。脱保护基反应通常是在大约-40℃至30℃，最好是-15℃至0℃之间反应大约4小时至一周，最好是反应大约3天。
本专业熟练的技术人员应该认识到，最后脱保护基的一步，即步骤(M)，自然会随着存在于取代基P1，R12和R13中的保护基而变化。脱保护基的步骤(M)是脱去具有式ⅩⅣ的中间体的羧基保护基P1，而产生具有式Ⅰa的化合物，其中R4是氢或一种无毒的药物上可接受的阳离子，诸如钠，钾，铵以及这里叙述的别的盐的阳离子，该反应是用通常的方法诸如水解，化学还原或氢化来完成的。当所用的保护基是可以被催化氢化除去的，诸如对硝基苄基，苄基，二苯甲基或2-萘甲基等时，则具有式ⅩⅣ的中间体可以在一种合适的包含缓冲溶液诸如磷酸盐缓冲液，磷酸氢二钾缓冲液，碳酸氢钠，醋酸盐缓冲液等的溶剂诸如水，二噁烷，四氢呋喃，乙醇，异丙醇，正丁醇或它们的混合物中，在一种氢化催化剂诸如钯/碳，氢氧化钯/碳，氧化铂，钯/硫酸钡，阮内镍等存在的条件下，在0℃至50℃的温度下，在1至4个大气压的氢气压下处理15分钟至4小时。当P1是诸如邻-硝基苄基这类基团时，也可用光解的方法来脱保护基。诸如2，2，2-三氯乙基这类保护基则可用温和的锌还原方法来除去。
当羧基保护基P1是烯丙基时，它可以用一种含有钯化合物的催化剂来除去，这种催化剂最好是钯-配位体配合物，诸如四(三苯膦)钯〔0〕，双(二苄叉丙酮)钯〔0〕，二〔1，2-双(二苯膦基)乙烷〕钯〔0〕，四(三苯基亚磷酸酯)钯〔0〕等等。还原最好是在一种烯丙基清除剂存在的条件下进行，例如一种胺，诸如N-甲基苯胺或吗啉，一种活泼亚甲基化合物诸如苯甲酰基乙酸酯或2-甲基-3-氧代-戊酸，一种链烷酸或它的盐诸如醋酸钠，2-乙基己酸钠等。
该反应通常是在一种非还原性的溶剂诸如四氢呋喃，水，乙醇，二噁烷，乙腈，二氯甲烷，乙酸乙酯或它们的混合物中，在0℃至50℃的温度下进行大约15分钟至4小时。最好是，催化还原反应在乙酸乙酯或二氯甲烷中，在大约0℃，在含有大约1.1摩尔当量的乙基-2-己酸钾的四(三苯膦)钯〔0〕存在的条件下进行。相似地，其它常规的羧基保护基可用本专业熟练技术人员所熟知的方法除去。最后，如上所述，当具有式Ⅰa的化合物中的R4是生理上可水解的酯基诸如乙酰氧基甲基，新戊酰氧基甲基和甲氧基甲基等基团时，它可直接给主体服用而无需脱去保护基，因为这类酯基在生理条件下在体内即可被水解。
如上所述，具有式ⅩⅣ的化合物可任意地包含另外的羟基保护基O-P3和/或氨基保护基N-P4，其中P3和P4的定义和前面相同。这样，在反应步骤(M)中可能，如果需要，还包含另外的除去所说的这类保护基的去保护基过程。该反应可用通常的本身是已知的那些除去保护基的方法来进行，诸如水解，还原等，也包括那些用于除去羧基保护基P1和羟基保护基P2的方法。
在特别的情况下，即当式ⅩⅣ化合物中的R12是叠氮基时，可能希望在步骤(M)中脱保护基时把所说的叠氮基还原为氨基。该还原反应可在pH值约为6-9的水溶液或缓冲水溶液中，最好是在水溶液中，在大约-10℃至30℃，最好是大约0-5℃的温度条件下，在1至4个大气压的氢气压力下，在一种氢化催化剂诸如30%钯/硅藻土，10%钯/碳，氢氧化钯/碳，氧化铂，5%钯/硫酸钡，5%钯/氧化铝等存在的条件下，最好是用5%钯/硫酸钡和5%钯/氧化铝，进行大约30分钟至3小时，直到还原反应完成。
本专业熟练的技术人员应当了解，在步骤(M)中，羧基和/或羟基和/或氨基保护基在反应过程中可以同时被脱去。另外，或者如果必需，保护基也可以选择性地逐步脱去。无论如何，对本专业熟练的技术人员很明显的是，除去保护基的次序将依赖于保护基的性质和选择，以及是否想要制备其中含有一些保护基诸如P1，P2，O-P3和N-P4的具有式ⅩⅣ或式Ⅰa的中间体，以便制备其它的式Ⅰ化合物。
在另外的具体实施方案中，式Ⅰ化合物可以由新的具有式ⅩⅥ的中间体来制备
其中A，B，R3和R11的定义和前面相同，P1是一个常规的容易除去的羧基保护基，L2是一个常规的离去基团。
式ⅩⅥ化合物可用来制备式Ⅰ化合物，并且，作为说明，制备多种优选的具体式Ⅰ化合物中的一种化合物的方法，在反应式5中被用来说明化合物Ⅰb的制备。简单地说，其中R12是O-P3的带保护基的具有式ⅩⅢ的中间体，在步骤(N)中被选择性地脱去保护基形成具有式ⅩⅤ的醇。位于卡巴潘尼姆ⅩⅤ的4位的醇基在步骤(O)中被转化为具有式ⅩⅥa的带有常规离去基团“L2”的化合物，它对于在步骤(P)中被亲核体置换而产生式ⅩⅧ化合物的反应是敏感的。在步骤(L+M)中脱去保护基将产生化合物Ⅰb，其中A，B，R3和R4的定义和前面相同，R13是亲核体残基，其中R13可以是叠氮基，-NR5R6，

氰基，取代的烷氧基或取代的烷硫基，其中R5，R6，Y和Z的定义和前面相同。
反应式5
现在参看反应式5，步骤(N)说明由其中R12是O-P3，而P3是一个常规的羟基保护基的具有式ⅩⅢ的中间体除去羟基保护基的反应。最好是，保护基P3是三有机基硅基保护基，并且最好是叔丁基二甲基硅基。步骤(N)的反应是在一种惰性有机溶剂诸如四氢呋喃，二噁烷，乙酸乙酯，二甲氧基乙烷，二氯甲烷，四氯化碳，甲苯，环己烷等溶剂中，用大约1至10摩尔当量的氟化四(低级)烷基铵，三氟化硼或氟化钾以及任意地包含大约1至20摩尔当量的低级烷基有机酸，芳香酸或杂环芳香酸，在大约-40℃至40℃的温度下进行大约1至60小时。最好是，反应在四氢呋喃中用大约3当量的氟化四丁基铵，在大约6当量的醋酸存在的条件下，在-15℃至0℃的温度下进行大约18至24小时。
步骤(O)说明醇ⅩⅤ和一种适当的酰化试剂或活化试剂之间进行反应，以形成带有能被亲核体置换的离去基团“L2”的具有式ⅩⅥa的中间体。在步骤(O)中应用的合适的酰化试剂可以和那些用于反应式4中的步骤(K)中制备离去基团“L1”的试剂相同，也可以是用常规方法提供离去基团的和专业中熟知的其它试剂。最好是，L2包括氯，溴，碘，氟磺酰基，-OSO2R14，和

，其中R14是低级烷基，三氟甲基，苯基或取代的苯基，R15是苯基或取代的苯基，其中所说的取代基可以是甲基，异丙基，氯，溴或硝基。
步骤(O)的反应可以在一种惰性有机溶剂诸如四氢呋喃，二甲氧基乙烷，二噁烷，乙酸乙酯，二氯甲烷，氯仿，四氯化碳，甲苯，苯，环己烷等溶剂中，用一种酰化或活化试剂，在一种非亲核性的碱诸如三乙胺，二异丙基乙胺，2，6-二甲基吡啶，1，8-二氮杂双环〔5.4.0〕十一-7-烯，1，5-二氮杂双环〔4.3.0〕壬-5-烯等存在的条件下，在大约-78℃至室温的温度下来进行。最好是，反应在二氯甲烷中，用大约1.2当量的三氟甲磺酸酐，在大约1.5至2当量二异丙基乙胺存在的条件下，在大约-78℃温度下进行，或是在四氢呋喃中，用三苯膦和偶氮二羧酸二乙酯的混合物，在大约-40℃的温度下进行。
所需的式ⅩⅦ化合物的制备是在步骤(P)中进行的，它是通过把中间体ⅩⅥa的L2离去基团用所需的含有氮，碳，氧，硫的亲核体R13进行亲核置换反应而制得的，其中R13最好是前面定义的那些基团。具有式ⅩⅥa的中间体与至少一当量，最好是过量的所需亲核试剂，在一种惰性有机溶剂诸如二氯甲烷，四氢呋喃，氯仿，四氯化碳，二噁烷，乙酸乙酯，二甘醇二甲醚，二甲氧基乙烷，环己烷，甲苯等溶剂中，在从-78℃至大约30℃的宽温度范围内，但最好是在大约-15℃至5℃的温度下进行反应，直到反应完成，这可用普通的检测方法如薄层层析或高压液相层析来监测。
所需的具有式Ⅰb的卡巴潘尼姆类化合物的制备是通过用常规方法脱去中间体ⅩⅦ的保护基而完成的。适当的脱去羟基，羧基和氨基上的保护基的方法就是那些以前在步骤(L)和(M)的过程中讨论过的方法。
在另外一条反应途径中，式Ⅰc化合物可以从步骤(Q)中的式ⅩⅧ化合物来制备，如反应式6所解释的那样，其中A，B，R3，R4和P2的定义和以前相同，R16是氢或C1-4烷基，R17是C1-4烷基或

一般，式ⅩⅧ化合物或它的盐的氨基的衍生化反应是在步骤(Q)中用适当的亚胺酰基化试剂，酰化试剂或烷基化试剂来进行的。反应可以任意地用式ⅩⅧ化合物来进行，其中的P2是一个常规的羟基保护基，R4是一个常规的羧基保护基。最好是，该反应用不带羟基保护基(即P2是氢)，并且R4是氢的式ⅩⅧ化合物或它的盐来进行。
合适的亚胺酰基化试剂包括甲亚胺酸酯和低级烷基亚胺酸酯，诸如甲亚胺酸甲酯，甲亚胺酸乙酯，甲亚胺酸苄酯，乙亚胺酸甲酯，丙亚胺酸乙酯，丁亚胺酸乙酯，戊亚胺酸乙酯和低级烷亚胺酰基卤，诸如甲亚胺酰基氯(又称氯甲亚胺)，乙亚胺酰基氯，丙亚胺酰基氯，丁亚胺酰基氯等等。该反应一般是在一种普通的溶剂诸如四氢呋喃，二噁烷，甲醇，乙醇，水，缓冲溶液或它们的混合物中，在大约-20℃至40℃的温度下进行大约10分钟至18小时。最好是，反应在磷酸盐缓冲水溶液中，在稍为碱性的pH值条件下，在大约5℃进行大约10至30分钟。
制备式Ⅰc化合物的合适的酰化试剂包括酰卤，酸酐，混合酸酐，活化酯，硫羟酸酯等，诸如乙酰氯，叠氮基乙酰氯，乙酸酐，异氰酸甲酯，异氰酸乙酯，N，N-二甲基氨基甲酰氯，N-保护的氨基酸活化酯，氨基亚氨基甲磺酸，甲基氨基亚氨基甲磺酸等等。该酰化反应可在各种溶剂体系中进行，其中包括的溶剂有诸如四氢呋喃，二噁烷，乙腈，乙醇，甲醇，二甲基甲酰胺，水等以及它们的混合物。本专业熟练的技术人员应当了解，当必要时，本反应可在一种碱或酸的受体存在的条件下进行，诸如氧化镁，碳酸钾，碳酸氢钾，吡啶，二甲基吡啶，2，6-二甲基吡啶，4-二甲氨基吡啶，三乙胺，N，N-二异丙基乙胺等等。最好是，反应在一种含水有机混合物或缓冲水溶液中，在-20℃至50℃的温度下进行15分钟至18小时。
合适的烷基化试剂是本专业领域中众所周知的，包括低级卤代烷或取代的(低级)卤代烷，低级烷基或三氟甲基磺酸酯，甲醛，低级烷基或取代的(低级)烷基醛，芳香或杂环芳香醛，杂环烷基或取代的杂环烷基醛，其中所说的醛在还原剂诸如氰基硼氢化钠，硼氢化钠等存在的条件下起反应。反应可在多种溶剂体系中进行，包括四氢呋喃，二噁烷，乙腈，乙醇，甲醇，二甲基甲酰胺和水等，以及它们的混合物。反应温度大约在-20℃至50℃，反应时间15分钟至20小时。最好是，当烷基化试剂是甲醛时，反应用37%的甲醛，在氰基硼氢化钠存在下，在乙腈水溶液或缓冲水溶液中，在稍为酸性的条件下，在大约0-5℃进行15分钟至10小时。
如上所述，式ⅩⅧ化合物可任意地包含羟基保护基和/或羧基保护基。因而，反应式6可包含另外的为除去所说的保护基的脱保护基步骤。合适的脱保护基步骤可用本身已知的方法来进行，或者用前面已在步骤(L)和(M)中叙述过的除去保护基的步骤来进行。
想要制备其中R2是

的式Ⅰ化合物时，还有另外一种反应途径，即最好是如这里所述的那样或采用众所周知的普通氧化方法，把式ⅩⅤ化合物通过受控的或分步的氧化反应，转化为相应的其中R2是-CHO的具有式Ⅰ的醛类或相应的其中R2是-CO2H的具有式Ⅰ的羧酸类。此外，具有式Ⅰ的醛类或羧酸类可通过本专业熟练的技术人员所熟知的一般化学方法转化为R2的别的衍生物，诸如肟，腈，腙，酯，酰胺，肽，以及它们的其它变种等。
在本发明中式Ⅰ化合物的制备是基于一些用于合成沙纳霉素系列中的卡巴潘尼姆类化合物的可得到的β-内酰胺中间体中的任何一种。作为说明，前面的那些反应式解释了一些式Ⅰ化合物的制备，其中的R1是β-内酰胺环状结构的6位上的一个1-羟基乙基。
当所要制备的式Ⅰ化合物中的R1是1-氨基乙基时，在反应式7中给出了在氮杂双环的环结构的6位，通过1-叠氮乙基中间体把1-羟基乙基转化为1-氨基乙基的方法，它可制得所需的具有1(S)和1(R)构型的化合物。

该方法包括用普通的羟基，羧基和/或氨基保护基把别的对反应敏感的取代基保护起来。然后使这合适的已保护的1-羟基乙基原料与三苯膦，叠氮酸及偶氮二羧酸二乙酯(DEAD)进行反应。得到的叠氮基取代了羟基并使构型相对于1-羟基乙基原料发生反转。这样，例如由1(S)-OH原料产生1(R)-N3产物，而1(R)-OH原料则产生1(S)-N3产物。该方法最早是被D.F.Corbett等人所采用，并发表在J.Chem.Soc.Perkin Trans.I，3011(1982)和Tetrahedron Letters 24 No.49，5543-5546(1983)上。把适当的1-叠氮乙基中间体还原成相应的1-氨基乙基产物最好是通过本专业领域众所周知的方法来进行，也可以用这里叙述的还原叠氮基的方法。最后，如果合适，可用众所周知的普通程序和这里叙述的程序把保护基除去。
在所需的1(S)-或1(R)-构型的羟乙基原料不容易得到，而只能得到具有相反构型的有关原料的情况下，可应用O.Mitsunobu在Synthesis，1-28(1981)或O.Mitsunobu等人在Bull.Chem.Soc.Japan 49 510(1976)所发表的方法，把后者转化为前者。该方法和上面的方法类似，包括使羟基化合物与三苯膦，甲酸而不是叠氮酸，以及偶氮二羧酸二乙酯进行反应而产生具有相反构型的甲酸酯，例如，由1(S)-OH产生1(R)-OCHO，由1(R)-OH产生1(S)-OCHO。然后把甲酸酯水解而产生所需的羟乙基原料。
当所需制备的具有式Ⅰ的化合物中的R1是氨甲基时，上述把1-羟乙基转化为1-氨乙基的方法也可以用来把R1是羟甲基的β-内酰胺中间体转化为R1是氨甲基的中间体。不过在这情况下没有相对构型的差别。
制备R1是1-氟乙基的式Ⅰ化合物，是通过使适当的已保护的1-羟乙基原料与二乙氨基三氟化硫(DAST)进行反应，得到的氟取代了羟基并使构型相对于1-羟基乙基原料发生反转。例如1(S)-OH原料产生1(R)-F产生，而1(R)-OH原料产生1(S)-F产物。当所需的1(S)-或1(R)-构型的羟乙基原料不容易得到，而只能得到具有相反构型的有关原料时，可通过前面讲过的方法把后者转化为前者。该方法在“氟化卡巴潘尼姆类化合物的合成”(Synthesis of florinated Carbapenems)一文中被C.P.Mak和K.Wagner更充分地加以描述。单环和双环β-内酰胺与二乙氨基三氟化硫的反应也可参看“β-内酰胺抗菌素化学的最新进展”一书(Recent Advances in the Chemistry of β-Lactam Antibiotics”，Eds.A.G.Brown and S.M.Roberts，Third International Symposium)第366-370页(1984)。皇家化学协会，Burlington House，London出版，以及该文所引的参考文献。更近期有T.Yoshioka等在Journal of Antibiotics，42，No.10，1520-1522(1989)所描述的DAST方法以及一种新的，用二乙氨基六氟丙烷和二乙氨基五氟丙烯的混合物的方法。这两种方法都作为参考引入本发明。
制备其中R1是氢，C1-2烷基或羟甲基的式Ⅰ中间体的其它方法本身是已知的，并可在下列参考资料中找到，诸如S.Oida在“β-内酰胺抗菌素的化学的最新进展”(G.I.Gregory编，Second International Symposium，1980)中的文章“Penem，Symthetic approach to thienamycin analogs”，以及R.W.Ratcliffe和G.Alkers-Schonberg在“β-内酰胺抗菌素的化学和生物学”(R.B.Morin和M.Gorman编，Vol 2，Acadmic Press，1982)一书中的文章“The Chemistry of Thienamycin and Other Carbapenem Antibiotics”，它们作为参考引入本发明。
为说明本发明的卡巴潘尼姆类化合物有力的抗菌活性和优良的化学和生物稳定性，一些本发明有代表性的实例化合物成员被作为说明的目的而列在表Ⅰ中，同时列出它们的体外活性(MIC)，化学稳定性(T 1/2 )和生物稳定性(DHPI)。
体外抗菌活性测定，是通过制备化合物在Mueller-Hinton琼脂中的连续2倍稀释液，并用适当稀释的18-24小时液体培养物对琼脂表面或液体进行接种进行的。将琼脂培养皿及试管在37℃培养17小时，把引起可见细菌生长抑制的最低浓度定作最小抑制浓度(MIC)。
在水溶液中，pH值为7.4，温度37℃时的化学稳定性，以用小时表示的半衰期(T 1/2 )来报告。这些数值是按Woodward等人在J.Amer.Chem.Soc.，102，2042(1980)中提出的方法来测定的。
还测定了对肾脱氢酶Ⅰ〔肾二肽酶(EC3.4.13.11)〕分解的生物稳定性，这些值以相对于用imipenem观测的值报告。纯的猪肾二肽酶是按Hitchcock等人在J.Anal.Biochem.，163，219(1987)中所描述的方法来制备的，而人肾二肽酶是按Campbell等人在J.Biol.Chem.，259，14586-14590(1984)中所描述的方法制备的。
新鲜制备出卡巴潘尼姆(0.10mM)在缓冲的(50mM)4-吗啉丙烷磺酸中的溶液，pH值为7.1。测量2.5毫升等分试样的紫外/可见光谱，然后加入0.025ml 1M的NH2OH溶液去溶解β-内酰胺键。用猪二肽酶在25℃，人二肽酶在37℃作用30分钟后再测量溶液的光谱，以后每5-10分钟间隔测量一次直到不再能观测到吸光度的降低。用未经酶解和已经酶降解的β-内酰胺之间的差谱来计算λmax和ε值。相似等分的卡巴潘尼姆溶液对猪二肽酶在25℃，对人二肽酶在37℃进行保温，并且测定在λmax处吸光度的变化率。然后加入酶以使每秒钟吸光度的变化率至少为10-4吸光度单位。酶水解的速率经自发水解项的校正之后，用ε转化为nmol分钟-1(毫升酶)-1，所有报告的速率都是相对于用imipenem试验时观测到的值。
如表Ⅰ所示，本发明的化合物很不容易被肾脱氢肽酶(DHP)所降解。但是，如果需要或必需DHP抑制，则可将本发明的化合物与已知的DHP抑制剂诸如Cilastatin结合或使用。至然这类应用只是供选择用的，但它仍然是本发明的一部份。
表Ⅰ 有代表性化合物的生物活性和稳定性 抗菌活性MICa(ug/mL) 实施例 肺炎双 半衰期e 二肽酶水解f 编号 球菌b 大肠杆菌c绿脓杆菌d (T 1/2) (相对速率) 3 0.13 0.016 2 3.2 0.04g 19 0.06 0.004 1 117 0.05g 24 0.13 0.016 1 3.5 0.08g 32 0.25 0.004 0.25 76 36 0.13 0.008 0.25 3.8 0.02g 40 0.06 0.008 1.0 32.5 41 0.25 0.008 0.5 70 0.7h 44 0.03 0.03 8.0 89 47 0.5 0.03 1 2.5 0.3h 49 0.008 0.03 63 33.5 63 0.008 0.016 1 18 0.07h 73 0.03 0.008 0.25 37 91 0.5 0.016 4.0 150 92 2.0 0.06 2.0 247 94 0.06 0.008 8.0 88 100 0.25 0.008 2.0 180 117 0.13 0.13 0.25 33 120 0.03 0.13 0.25 23 121 0.13 0.004 1 136 124 0.016 0.03 2 21 126 0.016 0.008 2 47 127 0.06 0.13 1 31 130 0.13 0.13 0.06 16 131 0.25 0.13 2 46 表Ⅰ(续) 抗菌活性MICa(ug/mL) 实施例 肺炎双 半衰期e 二肽酶水解f 编号 球菌b 大肠杆菌c绿脓杆菌d (T 1/2) (相对速率) 135 0.03 0.015 0.06 37 136 0.015 0.007 4 17 145 0.125 0.125 8 146 0.25 0.125 128 154 0.5 0.25 1 79 177 0.03 0.13 1 17 196 0.06 0.016 1 58 215 0.03 0.015 0.5 49 263 0.03 0.015 1 9.7 294 0.03 0.125 0.25 45 310 0.06 0.03 0.125 27 315 0.015 0.015 16 137.5 316 0.015 0.06 0.25 40.5 Imipenem 0.002 0.03 2 15 1g，h a)在Mueller-Hinton液体培养基中的最小抑制浓度 b)肺炎双球菌，A9585 c)大肠杆菌，A15119 d)绿脓杆菌A9843 e)37℃，10-4M，pH7.4，半衰期，以小时表示 f)相对于Imipenem＝1时的被脱氢肽Ⅰ型酶降解的速率(数值愈小，对降解愈稳定) g)用猪肾二肽酶的相对速率 h)用人肾二肽酶的相对速率 如其它β-内酰胺抗菌素那样，具有通式Ⅰ的化合物可用已知的方法转化为可药用的盐类，对于本发明的目的，它们基本上和未成盐的化合物等价。为此，例如，可把R4是负电荷的式Ⅰ化合物溶解于一种惰性溶剂中，然后加入等当量的药学上可接受的酸。希望得到的酸加成盐可用常规方法诸如溶剂沉淀，冷冻干燥等方法来收回。当在式Ⅰ化合物中存在别的碱性或酸性的官能团时，也可用已知的方法相似地制备它们的可药用的碱加成盐和酸加成盐。
R4是氢或负电荷的式Ⅰ化合物或其可药用的盐，可用常规方法转化为相应的R4是生理上可水解的酯基的化合物，或者R4是常规的羧基保护基的式Ⅰ化合物可转化为相应的R4是氢，负电荷或生理上可水解的酯基的化合物，或它们的可药用的盐。
具有通式Ⅰ的其中R4是氢，负电荷或生理上可水解的羧基保护基的新的卡巴潘尼姆衍生物，或它们的可药用的盐类，是对各种革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌强有效的抗菌剂，它们可以用作，例如，促进生长的动物饲料添加剂，食物的防腐剂，工业应用中的杀菌剂，例如用于水基涂料和造纸厂白水中以抑制有害细菌的生长，以及用作消毒剂来消灭或抑制医疗或牙科设备上有害细菌的生长。但是，它们在治疗被革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌引起的人类和其它动物的感染疾病方面，是特别有用的。
本发明的药物活性化合物可以单独使用，也可配制成药物组合物，其中除活性的卡巴潘尼姆成份以外，还含有可药用的载体或稀释剂。这类化合物可通过许多方法服用，主要包括口服，局部或非肠道给药(静脉注射或肌内注射)。药物组合物可制成固体形式，诸如胶囊，片剂，粉剂等，也可制成液体形式，诸如溶液，悬浮液或乳液。注射用组合物(即经优选的给药途径)可以制成含有单位剂量的安瓿或含多次剂量的容器，其中包含配制剂诸如悬浮剂，稳定剂和分散剂等。组合物可制成随时可用的形式，也可制成粉剂形式，在给药时用适当的载体例如无菌水进行配制。
服药剂量在很大程度上依赖于所用的具体化合物，具体配制的组合物，给药途径，主体的性质和状况，以及被治疗的具体部位和组织。优选的具体用药剂量和给药途径应由医生选择。但是一般而言，给哺乳类动物非肠道或口服时，这类化合物的用量约为5至200mg/千克/体重/天。给药一般是分几次进行，例如一天服2至4次。
下面给出解释本发明具体实施方案的一些实施例，它是用作解释的，而不是限制本发明的范围。用于本发明中的缩写是一些普通的缩写，它对本专业熟练的技术人员是众所周知的，其中的一些列举在下面。
缩写 TBDMS叔丁基二甲基硅基 TBDMS-OTf三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯 Pet-ether石油醚(沸程20-60℃) TsN3(TosN3)对甲苯磺酰基叠氮 DPCPClPO(OPh)2即氯磷酸二苯酯 DIPEAN，N-二异丙基乙胺 TMSCl三甲基硅基氯(氯代三甲基甲硅烷) DMAP4-N，N-二甲基氨基吡啶 TsNH2对甲苯磺酰胺 TBAF氟化四丁基铵 DEAD偶氮二羧酸二乙酯 HOBT1-羟基苯并三唑水合物 DCC1，3-二环己基碳二亚胺 HN3叠氮酸 在下面的实施例中，所有的温度是指摄氏度数。熔点是在Gallenkamp型毛细管熔点仪上测定的，沸点是在某具体压力(mmHg)下测定的，二者的温度均未经校正。质子核磁共振谱(1H-NMR)是在Bruker AC-200上测定的，所有光谱都在所指出的溶剂中测定，化学位移用δ单位，由内标四甲基硅(TMS)起始往低场方向计数，质子间的偶合常数以赫兹(Hz)计。分裂图形指定如下s，单峰;d，双峰;t，三重峰;q，四重峰;m，多重峰;br，宽峰;dd，双二重峰;bd，宽的双峰;dt，双三重峰;bs，宽的单峰;dq，双四重峰。红外光谱(IR)是在一台Perkin-Elmer 781型光谱计上测定的，由4000cm-1至400cm-1，用聚苯乙烯膜的1601cm-1特征峰进行校正，并用倒易厘米(cm-1)报告峰的位置。相对强度用下面的符号指示s(强)，m(中等)，w(弱)。比旋光度〔α〕25D是用Perkin-Elmer 41旋光仪，在所指出的溶剂中测定的。紫外光谱是在一台Hewlett Packard 8451 A型二极管陈列光度计在所指出的溶剂和浓度条件下测定的。
分析用的薄板层析(TLC)是在预先涂布好的硅胶板(60F-254，0.25mm)上进行的，用紫外光照射，碘蒸气和/或下列试剂中的一种使斑点显色而便于目测(a)磷钼酸甲醇溶液(2%)并加热;(b)试剂(a)再加2%硫酸钴在5M H2SO4中的溶液，并加热。柱层析，也称为闪式柱层析，是在玻璃柱中用粉细的硅胶(40-63m硅胶-H)及稍高于大气压的条件下用所指出的溶剂完成的。制备性薄板层析是在预先涂布好的硅胶板(60F-254，2mm)上进行的，用紫外光使斑点显色。
反相分析用薄板层析是在Analtech公司生产的预先涂布好的反向F(250微米)板上进行的，用紫外光或碘蒸气使斑点显色。
反相柱层析是在玻璃柱中用μ Bondapak C18(55-100m)prep 500完成的。高压液相层析是在一台Waters 501型高压液相层析泵上用Varian 2550紫外检测器和Varian 4290积分器完成的。层析柱的说明如下填充μ Bondapak C18，30厘米长，3.9毫米内径，颗粒大小10μ，流动相是CH3CN/0.01M K2HPO4水溶液，pH7.4。
所有溶剂的蒸发操作都是在减压下完成的，像这里应用的，术语己烷类是指各种异构的C6烃类的混合物，如美国化学协会说明的那样;石油醚是指30-60℃沸程馏份;术语“惰性”气氛是指氩气或氮气氛，除非另外指明。
实施例1 (4R，5S，6S)-4-(2″-氟乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
A.4-氟-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕丁酸酯
在冰浴冷却下，向2-巯甲基吡啶(5.26g，4.2mmol)和吡啶(4.1ml，50mmol)在CH2Cl2(50ml)中的溶液中滴加4-氟丁酰氯(5.23g，4.2mmol，按照F.L.Pattison等人在J.Org.Chem.，21，887(1956)中的方法制得)。将混合物在0℃下搅拌1小时，用乙酸乙酯(100ml)稀释，用冷水(3×100ml)和盐水(100ml)洗涤，干燥(MgSO4)。使混合物粗品(9g)通过硅胶(250g)垫，得到油状的标题化合物(7.6g，85%)。
IR(CH2Cl2)νmax1690cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3)δ8.55-8.51(1H，m，吡啶 -H)，7.67-7.58(1H，m，吡啶 -H)，7.35-7.31(1H，bd，J＝7.8Hz，吡啶 -H)，7.2-7.12(1H，m，吡啶 -H)，4.61，4.58，4.55，4.37，4.34，4.3(2H，dt，J＝5.8Hz，J＝47.1Hz，CH2-F)，4.27(2H，s，CH2-S)，2.74(2H，t，J＝7.2Hz，CH2C＝O)和2.2-1.92ppm(2H，m，CH2). B.4-氟-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕丁酸酯的烯醇硅烷醚
在冰浴冷却下，向4-氟-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕丁酸酯(427mg，2.0mmol)和三乙胺(0.6ml，4mmol)在CH2Cl2(10ml)中的溶液中滴加三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯(0.7ml，3mmol)。撤去冰浴，将混合物搅拌5小时，用石油醚(50ml)稀释，用冰水(3×25ml)和盐水(25ml)洗涤，干燥(MgSO4)。用中性活性炭处理所得溶液，得到红色油状的标题化合物(0.68g，100%)。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.56-8.52(1H，m，芳族 H)，7.67-7.58(1H，m，芳族 -H)，7.28-7.23(1H，m，芳族 H)，7.18-7.11(1H，m，芳族 -H)，5.02(0.4H，t，J＝7.5Hz，乙烯 H)，4.85(0.6H，t，J＝7.2Hz，乙烯 H)，4.40和4.16(d，2H，dt，J＝6.7Hz，J＝47.2Hz，CH2F)，4.28，4.05(0.8H，dt，J＝6.4Hz，J＝47.2Hz，CH2F)，4.05(0.8H，s，CH2-吡啶)，3.98(1.2H，s，CH2-吡啶)，2.5-2.2(2H，m，CH2)，0.98和0.97(9H，2s，叔丁基)，0.25和0.21ppm(6H，2s，二甲基). C.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-3″-氟丙基〕氮杂环丁烷-2-酮
向在氩气氛下用冰浴冷却的新熔融过的ZnCl2(5.45g，40mmol)中加入在CH2Cl2(60ml)中的(3S，4R)-4-乙酰氧基-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮(5.75g，20mmol)，然后滴加在CH2Cl2(20ml)中的步骤B制得的硅烷烯醇醚(14g，40mmol)。将混合物在5℃(冷室)搅拌20小时，然后倒入冷的饱和NaHCO3水溶液中，用乙酸乙酯(2×100ml)提取。将乙酸乙酯提取液用饱和NH4Cl和盐水洗涤后，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂后，残留物用石油醚研制，过滤，得到产物(4.0g，45%)。用乙酸乙酯重结晶，得到标题化合物;m.p.＝114-115℃。
IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，1770和1680cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3)δ8.55-8.52(1H，m，芳族 -H)，7.68，7.59(1H，m，芳族 -H)，7.33-7.29(1H，bd，J＝7.8Hz，芳族 -H)，7.21-7.14(1H，m，芳族 -H)，5.86(1H，bs，NH)，5.71-4.29(2H，2 组 m，CH2F)，4.277(2H，s，CH2S)，4.22-4.11(1H，m，H-1′)，3.88(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝6.7Hz，H-4)，3.075-2.97(2H，m，H＝3和H-1″)，2.3-1.8(2H，2 组 m，CH2-2″)，1.01(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.855(9H，s，叔丁基)和0.048ppm(6H，s，二甲基); 分析计算值 C21H33N2O3SSiF C，57.24;H，7.55;N，6.36;S，7.28. 实测值 C，57.01;H，7.74;N，6.17;S，7.24. D.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-3″-氟丙基〕氮杂环丁烷-2-酮
在冰浴冷却下，用30%H2O2(45μl，0.5mmol)和1.0N NaOH水溶液(0.5ml，0.5mmol)处理(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-3″-氟丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(110mg，0.25mmol)在THF(5ml)中的溶液。撤去冰浴，将混合物搅拌1小时，然后用乙酸乙酯(20ml)稀释。混合物用1N HCl水溶液(1×40ml)、水(3×20ml)和盐水(1×20ml)洗涤，然后干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到固状标题化合物(82mg，100%)。
m.p.＝104-105℃(EtOAc); IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，1770，1750和1715cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.34(1H，bs，NH)，4.8-4.6和4.6-4.35(2H，2 组 m，CH2F)，4.35-4.1(1H，m，H-1′)，3.95(1H，dd，J＝1.9Hz，J＝6.0Hz，H-4)，3.15-3.12(1H，m，H-3)，2.95-2.8(1H，m，H＝1″)，2.3-1.8(2H，m，CH2)，1.18(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.87(9H，s，叔丁基)，0.072和0.063ppm(6H，2s，二甲基); 分析计算值 C15H28NO4SiF C，54.03;H，8.46;N，4.20. 实测值 C，53.75;H，8.55;N，4.05. E.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-氟乙基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮
在22℃下将(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-3″-氟丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(0.75g，2.3mmol)在CH3CN(15ml)中的悬浮液用羰基二咪唑(0.39g，2.4mmol)处理并搅拌1小时。在22℃下将所得的酰基咪唑用无水丙二酸单烯丙基酯镁盐(0.73g，2.4mmol)处理并搅拌50小时。将混合物用EtOAc(60ml)稀释，用冷的1N HCl水溶液(1×60ml)、水(2×60ml)、饱和NaHCO3水溶液(1×60ml)、水(2×60ml)和盐水(60ml)洗涤，然后干燥(MgSO4)。蒸发溶剂后，使残留物通过硅胶(100g)垫(己烷→20%EtOAc/己烷)，得到油状标题化合物(96mg，10%)。
IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，1770，1715，1655和1630cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.01，6.00(1H，2 bs，NH)，6.0-5.8(1H，m，乙烯 H)，5.4-5.15(2H，m，乙烯 H)，5.14(0.5H，s，烯醇的乙烯基H)，4.7-4.6(2H，m，CH2-乙烯)，4.7-4.2(2H，2 组 m，CH2F)，4.21-4.13(1H，m，H-1′)，3.91(0.5H，dd，J＝2.1Hz，J＝4.4Hz，H4)，3.88(0.5H，dd，J＝2.1Hz，J＝6.9Hz，H-4)，3.60(1H，s，CH2CO)，3.26-3.17(0.5H，m，H-1″)，2.99(0.5H，dd，J＝2.2Hz，J＝4.4Hz，H-3)，2.95-2.92(0.5H，m，H-3)，2.55-2.35(0.5H，m，H-1″)，2.3-1.7(2H，m，CH2)，1.175和1.12(3H，2d，J＝6.28Hz和J＝6.34Hz，CH3)，0.86(9H，s，叔丁基)，0.067和0.055(6H，2s，二甲基). F.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-氟乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮
在冰浴冷却下，用三乙胺(64ml，0.48mmol)和对甲苯磺酰基叠氮(95mg，0.48mmol)处理(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-氟乙基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(0.20g，0.48mmol)在CH3CN中的溶液。撤去冰浴，将混合物搅拌1小时。蒸发CH3CN，得到半固状残留物，用石油醚(10ml)研制。滤除固体，将溶液通过硅胶柱(6g，10%EtOAc-己烷)，得到标题化合物(190mg，90%)。
IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，2150(N2)，1777，1715和1650cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.03-5.83(1H，m，乙烯 H)，5.90(1H，bs，NH)，5.40-5.28(2H，m，乙烯 H)，4.73-4.7(2H，m，CH2乙烯)4.7-4.4，4.4-4.2(2H，2 组 m，CH2-F)，4.3-4.1(2H，m，H-1′和H-1″)，3.90(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝5.2Hz，H-4)，3.06-3.03(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝3.5Hz，H-3)，2.2-2.0，2.0-1.8(2H，2 组 m，CH2)，1.18(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.86(9H，s，叔丁基)，0.061和0.051ppm(6H，2s，二甲基). G.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-氟乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮
在冰浴冷却下，用1N HCl水溶液(0.78ml，0.78mmol)处理(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-氟乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(170mg，0.390mmol)在CH3CN(2ml)中的溶液。撤去冰浴，将混合物搅拌4小时。减压下除去溶剂，用EtOAc(15ml)稀释残留物。有机相用0.1M NaHCO3水溶液(10ml)、水(10ml)和盐水(10ml)洗涤，然后干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，使残留物通过硅胶(5g)垫(1∶1乙酸乙酯∶己烷)，得到标题化合物(130mg，100%)。
IR(CH2Cl2)νmax3680，3600(OH)，3400(NH)，2150(N2)，1765，1715和1650cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.04(1H，bs，NH)，6.0-5.8(1H，m，乙烯基 -H)，5.4-5.29(2H，m，乙烯基 -H)，4.75-4.71(2H，m，CH2-乙烯基)，4.7-4.5，4.5-4.3(2H，2 组 m，CH2F)，2.2-2.0(2H，m H-1′和H-1″)，3.88(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝6.5Hz，H-4)，2.98(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝7.2Hz，H-3)，2.34(1H，d，J＝3.6Hz，OH)，2.4-1.8(2H，2 组 m，CH2)，和1.31ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). H.(2R，4R，5R，6S)-4-(2″-氟乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯
用Rh(OAc)2作为催化剂将(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-氟乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(150mg，0.46mmol)在25%己烷-乙酸乙酯(5ml)中的溶液回流2.5小时。蒸发溶剂，得到标题双环酮(140mg，100%)。
IR(CH2Cl2)νmax3680，3600(OH)，1770，1745和1735cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.0-5.80(1H，m，乙烯基 -H)，5.4-5.26(2H，m，乙烯基 H)，4.79-4.68(1H，m，HCH-F)，4.69-4.65(2H，m，CH2-乙烯)，4.68(1H，s，H-2)，4.57-4.44(1H，m，HCHF)，4.37(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝8.6Hz，H-5)，4.38-4.24(1H，m，H-1′)，3.29(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝7.2Hz，H-6)，3.02-2.9(1H，m，H-4)，2.3-1.7(3H，2 组 of m和bs，CH2和OH)和1.39(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). I.(4R，5S，6S)-4-(2″-氟乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰浴冷却下，将(2R，4R，5R，6S)-4-(2″-氟乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(0.14g，0.55mmol)在CH3CN(2ml)中的溶液用ClPO(OPh)2(0.11ml，0.50mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.098ml，0.55mmol)处理并搅拌2小时。然后将所得的烯醇磷酸酯用TMSCl(0.065ml，0.5mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.098ml，0.55mmol)处理，搅拌15分钟，最后用2-吡啶甲基硫醇(63mg，0.55mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.098ml，0.55mmol)处理。将混合物搅拌3小时，用乙酸乙酯(20ml)稀释，用H2O(3×10ml)洗涤，然后干燥(MgSO4)。蒸发溶剂后，使所得残留物通过硅胶(10g)柱(1/1乙酸乙酯/己烷)。将所得的三甲基硅醚中间体(170mg)用THF(2ml)和水(1ml)稀释，用AcOH(30μl，0.46mmol)处理，然后搅拌1小时。混合物用乙酸乙酯(20ml)稀释，用1M NaHCO3水溶液(10ml)、水(10ml)和盐水(10ml)洗涤，然后干燥(MgSO4)，得到油状标题物质(0.125g，69%)。
IR(CH2Cl2)νmax3600(OH)，1775和1715cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.53-8.51(1H，bd，芳族 H)，7.71-7.62(1H，m，芳族 H)，7.38，7.34(1H，bd，J＝7.8z，芳族 -H)，7.23-7.16(1H，m，芳族 -H)，6.0-5.85(1H，m，乙烯基 -H)，5.47-5.21(2H，m，乙烯基 H)，4.86-4.6(3H，m，CH2-乙烯基和HCHF)，4.52-4.44(1H，m，HCHF)，4.26-4.19，4.06，3.99(2H，ABq，J＝13.9Hz，CH2-吡啶)，4.28-4.18(2H，m，H-1′和H-5)，3.85-3.73(1H，m，H-4)，3.23(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.3Hz，H-6)，2.4-1.6(3H，m和bs，CH2和OH)和1.36ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). J.(4R，5S，6S)-4-(2″-氟乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
在冰浴冷却下，用Pd(PPh3)4(10mg)和N-甲基苯胺(60μl，0.55mmol)处理(4R，5S，6S)-4-(2″-氟乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(125mg，0.320mmol)在THF(3ml)中的溶液。撤去冰浴，将混合物搅拌1.5小时。混合物用EtOAc(20ml)稀释，用0.05M的磷酸盐水溶液缓冲液(pH7.0，1×10ml和1×5ml)提取。合并水相，用乙酸乙酯(10ml)洗涤，然后通过μ-Bondapak C18柱(20g，H2O，2%，5%，7%，10%，CH3CN/H2O)，得到标题化合物(50mg，40%)。
HPLC测得的纯度99.23%，保留时间15.90分钟(10%CH3CN/KH2PO4，0.01M，pH7.4); UV(H2O)λmax266(6300)，304(8700); IR(液体石蜡)νmax1750和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.47-8.45(1H，m，芳族 -H)，7.89-7.81(1H，m，芳族 -H)，7.53-7.49(1H，bd，J＝7.9Hz，芳族 H)，7.39-7.32(1H，m，芳族 -H)，4.8-4.6，4.55-4.35(2H，2 组 m，CH2-F)，4.24，4.17，4.10，4.03(2H，ABq，J＝13.8Hz，CH2- 吡啶)，4.3-4.17(1H，m，H-1′)，4.10(1H，dd，J＝9.5Hz，J＝2.6Hz，H-5)，3.43(1H，dd，J＝6.1Hz，J＝2.6Hz，H-6)，3.41-3.29(1H，m，H-4)和1.27ppm(1H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例2 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.4-叠氮基-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕丁酸酯
在冰浴冷却下，将2-巯甲基吡啶(46.5g，0.372mol)在CH2Cl2中的溶液用吡啶(37.5ml，0.465mol)处理，接着滴加在CH2Cl2(100ml)中的4-叠氮基丁酰氯(54.9g，0.372mol)。将混合物在5℃下搅拌1小时，用EtOAc(2l)稀释，用冷水(500ml)、1M NaHSO3水溶液(500ml)和水(500ml)洗涤后，再用1M NaHCO3水溶液、水(500ml)和盐水洗涤。残留物通过硅胶(900g)垫，得到油状的标题化合物(88.9g，91%)。
IR′(CH2Cl2)νmax2100(N3)，和1690cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.55-8.52(1H，m，芳族 H)，7.66-7.58(1H，m，芳族 H)，7.34-7.31(1H，bd，芳族 H)，7.19-7.12(1H，m，芳族 H)，4.26(2H，s，CH2-吡啶)，3.335(2H，t，J＝6.6Hz，CH2N3)，2.688(2H，t，J＝7.2Hz，CH2CO)和2.03-1.87ppm(2H，m，CH2). B.4-叠氮基-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕丁酸酯的叔丁基二甲基硅基烯醇醚
在冰浴冷却下，将4-叠氮基-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕丁酸酯(191g，0.809mol)在CH2Cl2(1l)中的溶液用三乙胺(141ml，1.01mol)处理，接着滴加三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯(223ml，0.970mol)，然后在大约22℃下搅拌45分钟。将混合物冷却(冰浴)，以同样的方式用三乙胺和三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯处理并搅拌45分钟。重复该过程一次，将混合物搅拌1小时。将混合物冷却(冰浴)，用冷的石油醚(2l)稀释，用冷水(4×1l)、1M NaHCO3水溶液(5×1l)和水(1l)洗涤，然后干燥(MgSO4)。用活性炭处理有机相，过滤，得到标题化合物(327g，100%)。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.56-8.53(1H，m，芳族 H)，7.67-7.59(1H，m，芳族 H)，7.28-7.25(1H，bd，芳族 H)，7.18-7.12(1H，m，芳族 H)，3.989(0.45H，t，J＝7.6Hz，乙烯 H)，4.828(0.55H，t，J＝7.2Hz，乙烯 H)，4.048(0.9H，s，CH2-吡啶)，3.978(1.1H，s，CH2-吡啶)，3.128(1.1H，t，J＝7.2Hz，CH2N3)，3.004(0.9H，t，J＝6.9Hz，CH2N3)，2.35-2.22(2H，m，CH2)，0.985，0.969(9H，2s，叔丁基)，0.251和0.215ppm(6H，2s，二甲基). C.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-3″-叠氮基丙基〕氮杂环丁烷-2-酮
先在0℃(冰浴)和氩气氛下向新熔融过的ZnCl2(38.6g，0.284mol)中加入在CH2Cl2(500ml)中的(3S，4R)-4-乙酰氧基-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮(40.75g，0.142mol)，然后滴加步骤B制得的4-叠氮基-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕丁酸酯的叔丁基二甲基硅基烯醇醚(100g，0.248mol)在CH2Cl2(140ml)中的溶液。将混合物在冰浴中搅拌1小时，然后在5℃(冷室)下放置15小时。再将混合物在大约22℃下搅拌4小时，然后用饱和NH4Cl水溶液(700ml)稀释，用EtOAc(2×1l)提取两次。合并有机相，用水(3×500ml)和盐水(500ml)洗涤，然后干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到残留物。将残留物用石油醚(200ml)稀释，用标题化合物接种，并在5℃(冷室)下结晶18小时。收集晶体，母液通过硅胶(500g)垫闪式层析〔8/2 CH2Cl2/己烷→50%EtOAc/CH2Cl2〕纯化，共得到50.5g(74%)标题化合物;m.p.＝95-6℃(石油醚)。
IR(CH2Cl2)νmax3400(NH)，2100(N3)，1770和1680cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.55-8.52(1H，m，芳族 H)，7.67-7.59(1H，m，芳族 H)，7.34-7.30(1H，bd，芳族 H)，7.21-7.14(1H，m，芳族 H)，5.93(1H，bs，NH)，4.278(2H，s，CH2-吡啶)，4.2-4.09(1H，m，H-1′)3.839(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝6.7Hz，H-4)，3.47-3.22(2H，m，CH2-N3)，3.053(1H，dd，J＝2.3Hz，J＝3.3Hz，H-3)，2.99-2.89(1H，m，H-1″)，2.09-1.97(1H，m，HCH)，1.79-1.65(1H，m，HCH)，1.009(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.852(9H，s，叔丁基)和0.044(6H，s，二甲基). D.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-3″-叠氮基丙基〕氮杂环丁烷-2-酮
在冰浴冷却下，将(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-3″-叠氮基丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(4.79g，10mmol)在THF(50ml)中的溶液用30%H2O2(2.58ml，30.0mmol)处理，然后滴加1N NaOH水溶液(30ml，30mmol)。撤去冰浴，将混合物搅拌1小时，然后再次冷却(冰浴)。将反应混合物用1N HCl水溶液(60ml，60mmol)酸化，用EtOAc(3×50ml)提取。合并有机提取液，用水(50ml)、1M NaHSO3水溶液、水(50ml)和盐水(50ml)洗涤，然后干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到白色固状的标题化合物(3.64g，98%);m.p.＝138-139℃(乙醚，石油醚)。
IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，2100(N3)，1770，1740和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.57(1H，bs，NH)，4.23-4.18(1H，m，H-1′)，3.932(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝5.8Hz，H-4)，3.52-3.36(2H，m，CH2N3)，3.146(1H，dd，J＝1.8Hz，J＝3.7Hz，H-3)，2.85-2.74(1H，m，H-1″)，2.1-1.94(1H，m，HCH)，1.9-1.7(1H，m，HCH)，1.1830(3H，t，J＝6.3Hz，CH3)，0.868(9H，s，叔丁基)，0.072和0.059ppm(6H，2s，二甲基). E.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叠氮基乙基)-3″-重叠基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮
在氮气氛下，将(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-3″-叠氮基丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(3.56g，10mmol)在无水CH3CN中的悬浮液先用羰基二咪唑(1.94g，12mmol)处理并搅拌30分钟。向该透明溶液中加入丙二酸单烯丙酯镁盐(3.73g，12mmol)，并将混合物在60℃下搅拌18小时。然后补加丙二酸酯盐(923mg，3mmol)，并将混合物在60℃下再加热4小时。重复该过程两次，加热时间分别为18小时和4小时。然后蒸发乙腈，残留物溶于EtOAc(200ml)中，将该溶液用冷水(100ml)、1N HCl水溶液(100ml)、10%Na2CO3水溶液(100ml)和盐水(100ml)洗涤，然后干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-4-〔(1″R)-1″-(2-叠氮基乙基)-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮粗品(4.2g，100%)。将一部分该粗品(1.85g，4.22mmol)置于CH3CN(19ml)中，冷却(冰浴)，依次用三乙胺(0.6ml，4.3mmol)和对甲苯磺酰基叠氮(847mg，3.2mmol)处理，然后在大约22℃下搅拌3.5小时。蒸发溶剂，残留物通过硅胶(20g，CH2Cl2，10%EtOAc/CH2Cl2)柱，得到标题化合物(1.21g，62%)，它掺杂有少量的对甲苯磺酰胺。
IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，2150(N2)，2100(N3)，1765，1715和1645cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.1-5.8(1H，m，乙烯 H)，5.87(1H，bs，NH)，5.41-5.29(2H，m，乙烯 H)，4.75-4.7(2H，m，CH2)，4.23-4.1(2H，m，H-1′和H-1″)，3.873(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝5.2Hz，H-4)，3.39-3.24(2H，m，CH2N3)，3.049(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝3.7Hz，H-3)，2.21-2.05(1H，m，HCH)，1.75-1.60(1H，m，HCH)，1.179(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.864(9H，s，叔丁基)，0.064和0.052ppm(6H，2s，二甲基). F.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叠氮基乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮
在冰浴冷却下，向(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叠氮基乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(1.21g，2.61mmol)在EtOH(20ml)中的溶液中缓慢加入2N HCl水溶液(2.61ml，5.22mmol)。撤去冰浴，将混合物搅拌22小时，然后用1M NaHCO3水溶液中和至pH7。将混合物减压下浓缩，残留物溶于EtOAc(50ml)中，用水(20ml)、1M NaHCO3水溶液(20ml)和盐水(20ml)洗涤，然后干燥(MgSO4)。残留物通过硅胶(20g)柱(CH2Cl2→8/2 EtOAc/CH2Cl2)，得到标题化合物(760mg，83%)。
IR(CH2Cl2)νmax3600，3500(OH)，2150(N2)，2100(N3)，1765，1715和1645cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.25(1H，bs，NH)，6.04-5.8(1H，m，乙烯 H)，5.4-5.2(2H，m，乙烯 H)，4.9-4.8(2H，m，CH2)，4.17-4.01(2H，m，H-1′和H-1″)，3.844(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝6.1Hz，H-4)，3.42-3.2(2H，m，CH2N3)，3.017(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝6.7Hz，H-3)，2.5(1H，bs，OH)，2.2-2.0(1H，m，HCH)，1.85-1.7(1H，m，HCH)和1.286ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). G.(2R，4R，5R，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯
将(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叠氮基乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(350mg，1mmol)和Rh(OAc)2(6mg)在EtOAc(15ml)和己烷(5ml)中的溶液在80-85℃(浴温)下加热2小时。减压下除去溶剂，得到油状标题化合物(340mg，100%)。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.05-5.9(1H，m，乙烯 H)，5.5-5.2(2H，m，乙烯 H)，4.77(1H，s，H-2)，4.48-4.6(2H，m，CH2)，4.329(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝8.7Hz，H-5)，4.3-4.1(1H，m，H-1′)，3.568(2H，t，J＝6.5Hz，CH2N3)，3.234(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝8.0Hz，H-6)，2.95-2.75(1H，m，H-4)，2.1-1.9(1H，m，HCH)，1.8-1.6(1H，m，HCH)和1.412ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). H.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-CH3OH浴冷却下，将(2R，4R，5R，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(338mg，1mmol)在CH3CN(8ml)中的溶液用ClPO(OPh)2(0.23ml，1.1mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.19ml，1.1mmol)依次处理，然后搅拌45分钟。将所得烯醇磷酸酯用三甲基硅基氯(0.14ml，1.1mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.19ml，1.1mmol)处理，然后再搅拌45分钟。将所得的保护的烯醇磷酸酯用在CH3CN(1ml)中的2-吡啶甲基硫醇(250mg，2.0mmol)以及N，N-二异丙基乙胺(0.34ml，2.0mmol)处理，然后搅拌2小时。将反应混合物用EtOAc(30ml)稀释，用冷水(10ml)、1M NaHSO3水溶液(10ml)、水(10ml)、1M NaHCO3水溶液(10ml)、水(10ml)和盐水(10ml)洗涤，然后干燥(MgSO4)。蒸发溶剂后，残留物溶于冰浴冷却的THF(10ml)中，用2N CH3CO2H水溶液(3ml，6mmol)处理，然后在冷却下搅拌1小时，再在大约22℃下搅拌1.5小时。将混合物用乙酸乙酯(20ml)稀释，用冷水(10ml)、1M NaHCO3水溶液(10ml)、水(10ml)和盐水洗涤，然后干燥(MgSO4)。残留物通过硅胶(15g)柱洗脱(CH2Cl2→60%EtOAc/CH2Cl2)，得到标题化合物(175mg，38%)。
IR 3600，3500-3400(OH)，2100(N3)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)，δ8.54-8.51(1H，m，芳族 H)，7.7-7.6(1H，m，芳族 H)，7.38，7.34(1H，m，芳族 H)，7.25-7.15(1H，m，芳族 H)，6.1-5.8(1H，m，烯丙基H)，5.5(2H，m，烯丙基H)，4.8-4.55(2H，m，CH2-烯丙基)，4.294，4.225，4.072，4.002(2H，ABq，J＝14.0Hz，CH2-吡啶基)，4.3-4.1(1H，m，H-1′)，4.166(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.8-3.65(1H，m，H-4)，3.6-3.3(2H，m，CH2-N3)，3.162(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.7Hz，H-6)，2.2-2(1H，m，HCH)，1.95(1H，bs，OH)，1.9-1.6(1H，m，HCH)和1.382ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). I.(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷却下，将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(43mg，0.1mmol)在CH2Cl2中的溶液用(PPh3)4Pd(21mg，0.018mmol)处理，然后用N-甲基苯胺(0.03ml，0.26mmol)处理。将混合物在大约22℃下搅拌1小时，用乙醚(10ml)稀释，然后用0.1M pH7.0磷酸盐缓冲水溶液(2×1.5ml，0.15mmol)和水(2×1.5ml)提取。水相用乙醚(5ml)洗涤，用1M pH4.2磷酸盐缓冲水溶液将pH调至pH5.9-6.0。然后用10%Pd/C(75mg)作催化剂将水层在45-50p.s.i.和5℃至15℃(反应终止时的温度)下氢化1小时。滤出催化剂，用pH6磷酸盐缓冲液漂洗，在C18μBondapak(12g)反相柱上层析(2%CH3CN/H2O)纯化，然后以相同的方式再重复一次纯化，得到标题化合物(6mg，16%)。
HPLC纯度98.11%，保留时间＝6.08分钟。(302nm，10%CH3CN，0.01M pH7.4磷酸盐缓冲液); UV(H2O)λmax266(4600)，302(5300); IR(液体石蜡)νmax1755和1590cm-1C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.48-8.45(1H，m，芳族)，7.9-7.8(1H，m，ar芳族 H)，7.51，7.47(1H，bd，芳族 H)，7.4-7.33(1H，m，ar芳族 H)，4.22，4.15，4.09，4.02(2H，ABq，J＝14.5Hz，CH2-吡啶甲基)，4.3-4.14(1H，m，H-1′)，4.097(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝9.6Hz，H-5)，3.374(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝6.6Hz，H-6)，3.3-3.16(1H，m，H-4)，3.03(1H，t，J＝7.8Hz，CH2N)，2.2-2.05(1H，m HCH)，1.82-1.6(1H，m，HCH)和1.299ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例3 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叠氮基乙基)-3″-重氮基-3″-对硝基苄氧羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮
将(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-4-〔(1″R)-1″-羧基-3″-叠氮基丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(100mg，0.27mmol)在CH3CN(4ml)中的悬浮液用羰基二咪唑(52mg，0.32mmol)处理，并在大约22℃下搅拌0.5小时。加入丙二酸单对硝基苄基酯镁盐(200mg，0.400mmol)，并将混合物在60℃(浴温)下加热18小时。将混合物用EtOAc(20ml)稀释，用1N HCl水溶液(10ml)、水(10ml)、10%K2CO3水溶液(10ml)和盐水(10ml)洗涤，然后干燥(MgSO4)，得到(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叠氮基乙基)-3″-对硝基苄氧羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮粗品(1.37g，92%)。将一部分该粗品(109mg，0.198mmol)溶于CH3CN(2ml)中，用三乙胺(0.030ml，0.22mmol)和对甲苯磺酰基叠氮(43mg，0.22mmol)依次处理，并在大约22℃下搅拌1.3小时。蒸发溶剂，残留物在制备型TLC板上层析(乙醚)，提取后，得到(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叠氮基乙基)-3″-重氮基-3″-对硝基苄氧羰基-2″氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(Rf0.71，84mg)，其中污染有对甲苯磺酰基叠氮(65mg，57%校正收率)。将类似混合物(从另一反应得到)(2.7g，4.7mmol)溶于冰浴冷却的乙醇(40ml)中，用2N HCl水溶液(4.7ml，9.4mmol)滴加处理。撤去冰浴，将混合物搅拌23小时，然后，在冰浴冷却下用1M NaHCO3水溶液(大约10ml)中和，再减压浓缩。残留物用EtOAc(100ml)稀释，用冷的1M NaHCO3水溶液(200ml)、水(20ml)及盐水洗涤，干燥(MgSO4)。残留物通过硅胶(30g)垫(CH2Cl2→80%EtOAc/CH2Cl2→EtOAc)，得到黄色固状的标题化合物(1.45g，67%)。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.3-8.23(2H，m，芳族 H)，7.56，7.52(2H，bd，J＝8.7Hz，芳族 H)，6.02(1H，bs，NH)，5.44，5.37，5.35，5.29(2H，Abq，J＝13.1Hz，CH2)，4.16-4.01(2H，m，H-1′和H-1″)，3.849(1H，dd，J＝2.2Hz，J＝6.0Hz，H-4)，3.43-3.25(2H，m，CH2N3)，3.041(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝6.9Hz，H-3)，2.3-2.0(1H，m，HCH)，2.130(1H，d，J＝4.1Hz，OH)，1.9-1.7(1H，m，HCH)和1.30ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸对硝基苄基酯
将(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-〔(2-叠氮基乙基)-3″-重氮基-3″-对硝基苄氧羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(856mg，1.86mmol)在3/1 EtOAc/己烷(40ml)中的溶液和Rh(OAc)2(20mg)在80-85℃(浴温)下加热1.5小时。除去溶剂，得到双环酮粗品(2R，4R，5R，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸对硝基苄基酯(860mg，100%); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.2(2H，d，芳族 H)，7.5(2H，d，芳族 H)，5.4(1H，s，H-2)，5.3(2H，ABq的中心，CH2芳族)，4.3(1H，dd，H-5)，4.3-4.1(1H，m，H-1′)，3.5(2H，t，CH2N3)，3.3(1H，dd，H-6)，3.0-2.8(1H，m，H-4);2.1-1.9(1H，m，HCH)，1.9-1.7(1H，m，HCH)，1.43(3H，d，CH3). 在冰-CH3OH浴冷却下，将酮粗品(860mg，1.86mmol)在CH3CN(20ml)中的溶液用氯磷酸二苯基酯(0.43ml，2.05mmol)处理，接着缓慢加入N，N-二异丙基乙胺(0.35ml，2.05mmol)和少许4-二甲氨基吡啶。将混合物搅拌30分钟，然后依次加入三甲基硅基氯(0.26ml，2.05mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.35ml，2.05mmol)，继续搅拌30多分钟。将所得的O-三甲基硅基烯醇磷酸酯用在CH3CN(1ml)中的2-吡啶甲基硫醇(517mg，4.10mmol)处理，接着滴加N，N-二异丙基乙胺(0.70ml，0.41mmol)，然后搅拌1小时。将混合物用EtOAc(40ml)稀释，用冷水(20ml)、pH7.4磷酸盐缓冲液(20ml)和盐水(20ml)洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂后，将残留物溶于THF(100ml)中，冷却至5℃(冰浴)，用2N CH3CO2H水溶液(5ml)处理，搅拌2小时。将混合物用乙酸乙酯(25ml)稀释，用水、pH7.5磷酸盐缓冲液(20ml)和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。残留物在硅胶(20g)柱上闪式层析(CH2Cl2→EtOAc)纯化，得到标题化合物(500mg，49%)。
IR(CH2Cl2)νmax3600，3509，3400(OH)，2100(N3)，1775，1710(C＝O)和1525cm-1(NO2); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.54，8.52(1H，bd，芳族 H)，8.198(2H，d，J＝8.7Hz，p-NB 酯)，7.7-7.5(3H，m，和d，J＝8.7，芳族 H，p-NB 酯)，7.36-7.32(1H，bd，芳族 H)，7.24-7.17(1H，m，芳族 H)，5.517，5.448，5.230，5.161(2H，ABq，J＝14.8Hz，CH2-pNB)，4.305，4.236，4.087，4.018(2H，ABq，J＝13.9Hz，CH2-吡啶基)，4.3-4.2(1H，m，H-1′)，4.190，4.177(部分 dd，J＝2.6Hz，部分 H-5)，3.85-3.72(1H，m，H-4)，3.7-3.3(2H，m，CH2N3)，3.198(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝7.6Hz，H-6)，2.2-1.95(1H，m，H-CH)，1.9-1.6(1H，m，HCH)，1.64(1H，bs，OH)和1.399ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷却下，在50psi下，将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸对硝基苄基酯(55mg，0.1mmol)在乙醚THF(11，20ml)和水-0.05M pH7.0磷酸盐缓冲液(7ml+3ml)两相体系中的溶液用10%Pd/C(84mg)氢化5小时。滤出催化剂，有机层用水洗涤，合并水层，通过μBondapak C18反相柱;得到标题化合物，其光谱数据与实施例2步骤Ⅰ制得的化合物相同。
实施例4 (4R，5S，6S)-4-〔3-(N-亚胺甲基)氨基乙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷却下，将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠(100mg，0.24mmol)在水(12ml)和0.1M pH6.0磷酸盐缓冲液(7ml)中的溶液用10%Pd/C为催化剂氢化2小时。滤出催化剂，用1N和0.1N NaOH水溶液将水溶液(冰浴冷却)的pH值调至8.5。将混合物用甲亚胺酸苄酯盐酸盐(410mg，2.4mmol)分批处理并用0.1N NaOH将pH值保持在8-8.3。将反应混合物搅拌15分钟，通过μBondapak C18柱(10g，H2O→1，2和3%CH3CN/H2O)，得到标题化合物(30mg)。在同样的物质(C18，6g)上再次纯化产物，得到纯的标题化合物(13mg，13%)。
HPLC纯度92.6%(μBondapak C18，8%CH3CN/KH2PO40.01M pH7.4，保留时间＝7.095分钟); UV(H2O)λmax304(6445)，266(5592); IR(液体石蜡)νmax1755，1595(C＝O)和1715cm-1(C＝N); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.47，8.45(1H，bd，芳族 H)，7.9-7.8(1H，m，芳族 H)，7.805(1H，s，C＝NH)，7.5-7.2(2H，m，芳族 H)，4.3-4.1(1H，m，H-1′)，4.217，4.141，4.078，4.008(2H，ABq，J＝15.2Hz，CH2-吡啶)，4.14-4.07(1H，隐藏 H-5)，3.5-3.1(4H，m，H-6，CH2N，H-4)，2.1-1.1(1H，m，HCH)，1.75-1.5(1H，m，HCH)和1.296ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 实施例5 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-羟基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
A.4-叔丁基二甲基硅氧基-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕丁酸酯
在冰浴冷却下，将4-叔丁基二甲基硅氧基丁酸(2.7g，13mmol)和2-吡啶甲基硫醇(1.67g，13mmol)在CH2Cl2(40ml)中的溶液用1，3-二环己基碳化二亚胺(2.8g，13mmol)和1-羟基苯并三唑水合物(1.81g，13mmol)处理并在大约22℃下搅拌20小时。将混合物用乙酸乙酯稀释，用水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到残留物，通过硅胶垫(EtOAc己烷，13)，得到标题化合物(3.08g，71%)。
IR(净态)νmax1690cm-1C＝O; 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.54，8.52(1H，bd，芳族)，7.68，7.66，1.63，7.62，7.59，7.58(1H，dt，芳族)，7.36，7.32(1H，d，芳族)，7.26，7.19，7.166，7.16，7.15，7.13(1H，m，芳族)，4.25(2H，s，CH2)，3.62(2H，t，J＝6.1Hz，CH2)，2.68(2H，t，J＝7.5Hz，CH2)，1.90(2H，5线的中心;CH2)，0.87(9H，s，叔丁基)和0.019ppm(6H，s，二甲基). B.4-叔丁基二甲基硅氧基-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕丁酸酯的叔丁基二甲基硅氧基烯醇醚
在冰浴冷却下，将S-(2-吡啶甲硫基)-4-叔丁基二甲基硅氧基丁酸酯(1.3g，4.0mmol)在CH2Cl2(15ml)中的溶液用三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯(1.1ml，6.0mmol)和三乙胺(1.14，8.00mmol)滴加处理，并在室温(大约22℃)下搅拌3小时。将混合物用石油醚(60ml)稀释，用冷水(3×50ml)和盐水(50ml)洗涤，干燥(MgSO4)。溶液用活性炭处理，过滤，蒸发溶剂，得到油状的标题化合物(1.8g，100%)。
IR(净态)νmax1630cm-1烯; 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.54，8.53，8.52，8.51(1H，d，芳族 -H)，7.30-7.24(1H，m，芳族 -H)，7.16-7.10(1H，m，芳族 -H)，6.00(0.6H，t，J＝7.5Hz，烯 H)，4.89(0.4H，t，J＝7.1Hz，烯 H)，4.04(1.2H，s，CH2)，3.97(0.8H，s，CH2)，3.47(0.8H，t，J＝7.1Hz，CH2)，3.38(0.8H，t，J＝6.8Hz，CH2)，2.28-2.15(2H，m，CH2)，0.98，0.96(2s，9H，叔丁基)，0.864，0.861(9H，2s，叔丁基)，0.237，0.196(6H，2s，二甲基)，0.014和0.003ppm(6H，2s，二甲基). C.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-3″-叔丁基二甲基硅氧基丙基〕氮杂环丁烷-2-酮
在冰浴冷却下和氩气氛下，向新熔融过的ZnCl2(545mg，4mmol)中加入在CH2Cl2(10ml)中的(3S，4R)-4-乙酰氧基-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮(575mg，2mmol)，接着滴加在CH2Cl2(5ml)中的步骤B制得的甲硅烷基烯醇醚(1.8g，4mmol)。将混合物在5℃下搅拌18小时，用乙酸乙酯(60ml)稀释，用饱和NaHCO3水溶液(50ml)、饱和NH4Cl水溶液(50ml)和盐水(50ml)洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂后，残留物在硅胶柱(80g，15乙酸乙酯/己烷)上纯化，得到固状标题化合物(500mg，45%)，m.p.＝103-105℃(己烷)。
IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，1765和1680cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.54-8.51(1H，m，芳族 H)，7.66-7.57(1H，m，芳族 H)，7.34(1H，d，J＝7.8Hz，芳族 H)，7.20-7.12(1H，m，芳族 H);5.99(1H，bs，NH)，4.24(2H，s，CH2)，4.2-4.09(1H，m，H-1′)，3.83(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝6.9Hz，H-4)，3.73-3.49(2H，m，CH2O)，3.04-2.94(2H，m，H-1″和H-3)，2.01-1.89(1H，m，H-2″)，1.80-1.64(1H，m，H-2″)，1.00 3H，d，J＝6.4Hz，CH3)，0.861，0.850(18H，2s，叔丁基)，0.040和0.004ppm(12H，2s，二甲基); 分析计算值 C27H47N2O4SSi2 C 58.76，H 8.58，N 5.08，S 5.81. 实测值 C 58.57，H 9.00，N 4.97，S 5.89. D.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-3″-叔丁基二甲基硅氧基丙基〕氮杂环丁烷-2-酮
在冰浴冷却下，将(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-3″-叔丁基二甲基硅氧基丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(480mg，0.87mmol)在THF(5ml)中的溶液用30%H2O2(0.15ml，1.7mmol)处理，接着滴加1N NaOH水溶液(1.7ml，1.7mmol)。撤去冰浴，将混合物搅拌90分钟，然后用乙酸乙酯(30ml)稀释，用1N HCl水溶液(25ml)、1N NaHSO3水溶液(25ml)、水和盐水洗涤，干燥。蒸发溶剂后，得到白色固状的标题化合物(0.37g，96%);m.p.＝125-127℃(乙酸乙酯)。
IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，1765(β-内酰胺)和1710cm-1(acid); 1H NMR(CDCl3)δ6.23(1H，bs，NH)，4.204(1H，m，H-1′)，2.94(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝5.9Hz，H-4)，3.72(2H，bt，J＝5.7Hz，CH2)，3.07(1H，dd，J＝1.7Hz，J＝4.1Hz，H-3)，2.84-2.74(1H，m，H-1″)，2.02-1.81(1H，m，HCH)，1.78-1.69(1H，m，HCH)，1.18(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.889，0.866(18H，2s，叔丁基)，和0.065ppm(12H，s，二甲基); 分析计算值 C21H42NO5Si2 C 56.71，H 9.52，N 3.15. 实测值 C 56.55，H 9.67，N 3.13. E.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮
将(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-3″-叔丁基二甲基硅氧基丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(7.5g，17mmol)在CH3CN(75ml)中的悬浮液用羰基二咪唑(2.92g，18.0mmol)处理并在22℃下搅拌1小时。然后将混合物用无水丙二酸单烷基酯镁盐(5.3g，17mmol)处理并在80℃(浴温)加热18小时。蒸发部分溶剂。浓缩液用EtOAc(250ml)稀释，用1N HCl水溶液(100ml)、水(100ml)、饱和NaHCO3水溶液(100ml)、水和盐水(100ml)洗涤，干燥(MgSO4)。残留物(15g)通过闪式硅胶(300g)柱(1∶3EtOAc/己烷)，得到标题化合物(5.15g，57%)，为酮和烯醇形式的混合物。
IR(液体石蜡)νmax3150-3100(OH)，1760，1710，1650和1620cm-1(C＝O和烯醇); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.03-5.80(2H，2 bs和m，NH和烯丙基)，5.38-5.23(2H，m，烯丙基)，5.07(0.5H，s，烯醇的烯H)，4.67-4.60(2H，m，CH2)，4.24-4.12(1H，m，H-1′)，3.90(0.47H，dd，J＝2.2Hz，J＝5.6Hz，H-4)，3.83(0.53H，dd，J＝2.1Hz，J＝7.1Hz，H-4)，3.75-3.48(32H，m，CH2OSi和COCH2CO)，3.10(0.47H，m，H-1″)，2.94(1H，m，H-3)，2.55-2.40(0.45H，m，H-1″)，1.97-1.6(2H，2m，CH2)，1.17(1.3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，1.11(1.4H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.882，0.878，0.865(18H，3s，叔丁基)，0.064，0.056，0.049和0.031 ppm(12H，4s，二甲基); 分析计算值 C26H49NO6Si2 C 59.16，H 9.36，N 2.65. 实测值 C 59.11，H 9.36，N 2.60. F.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮
将(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(0.60g，1.1mmol)在CH3CN(10ml)中的溶液用对甲苯磺酰基叠氮(240mg，1.2mmol)和三乙胺(160μl，1.1mmol)处理并在大约22℃下搅拌2小时。除去溶剂，残留物用石油醚(20ml)研制，促使对甲苯磺酰胺沉淀。将黄色油状物(0.61g)通过硅胶(25g，10%-20%EtOAc/己烷)，得到纯的标题化合物(420mg);m.p.＝53-55℃。
IR(CH2Cl2)νmax3400(NH)，3140(N2)，1765，1715和1050cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.02-5.8(2H，bs和m，NH，烯丙基)，5.4-5.27(2H，m，烯丙基)，4.72-4.68(2H，m，CH2)，4.23-4.13(2H，m，H-1′和H-1″)，3.87(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝5.5Hz，H-4)，3.67-3.52(2H，m，CH2O)，3.04(1H，bt，J＝4.0Hz，H-3)，2.10-2.01(1H，m，HCH)，1.66-1.57(1H，m，HCH)，1.165(3H，d，J＝6.4Hz，CH3)，0.862和0.849(18H，2s，叔丁基)，0.058，0.053，0.0005和0.0061 ppm(12H，4s，二甲基); 分析计算值 C26H47N3O6Si2 C 56.39，H 8.55，N 7.59. 实测值 C 56.44，H 8.80，N 7.50. G.(4R，5R，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯
将(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(1.0g，1.8mmol)和辛酸铑(Ⅱ)(3mg)在75%己烷-EtOAc(10ml)中的溶液加热回流3小时，蒸发后，以定量收率得到了油状标题化合物(1g，100%)。
IR(净态)νmax1765(C＝O)，1745(肩峰 C＝O)和1735cm-1(肩峰，C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ5.99-8.79(1H，m，烯丙基)，5.39(2H，m，烯丙基)，4.7-4.6(2H，m，CH2)，4.63(1H，s，H-2)，4.35-4.2(1H，m，H-1′)，4.25(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝8.4Hz，H-5)，3.8-3.6(2H，m，CH2-O)，3.21(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝5.8Hz，H-6)，2.99-2.87(1H，m，H-4)，2.0-1.58(2H，m，CH2)，1.28(3H，d，J＝6.2Hz，CH3)，0.886，0.879(18H，2s，叔丁基)，0.094，0.087，0.054和0.045 ppm(12H，4s，二甲基). H.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰浴冷却下，将(4R，5R，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(0.92g，1.8mmol)在CH3CN(10ml)中的溶液用氯磷酸二苯基酯(0.4ml，2mmol)、N，N-二异丙基乙胺(0.36ml，2mmol)和二甲氨基吡啶(1mg)处理并在22℃下搅拌1小时。再次将混合物冷却(冰浴)，用2-吡啶甲基硫醇(0.38g，3mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.6μl，3.2mmol)处理，然后在5℃下搅拌20小时。将反应混合物用EtOAc(60ml)稀释，用冷的NaHCO3、水(3×50ml)和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂后，残留物通过硅胶柱(16g，1∶9-1∶3EtOAc/己烷)，得到标题化合物(0.63g，56%)。
IR(CH2Cl2)νmax1775和1710 cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.52-8.49(1H，m，芳族)，7.68-7.59(1H，m，芳族)，7.34-7.30(1H，d，芳族)，7.20-7.13(1H，m，芳族)，6.03-5.84(1H，m，烯丙基 H)，5.47-5.18(1H，m，烯丙基 H)，3.82-4.6(2H，m，CH2)，4.354，4.287(1H，部分 ABq，J＝13.5Hz，CH2-吡啶基)，4.28-4.14(1H，m，H-1′)，4.143，4.075(1H，部分 ABq，J＝13.5Hz，CH2-吡啶基)4.08(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝9.2Hz，H-5)，3.84-3.70(2H，m，CH2O)，3.65-3.51(1H，m，H-4)，3.100(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝6.9Hz，H-6)，2.12-1.69(1H，m，HCH)，1.56-1.56(1H，m，HCH)，1.284(3H，d，J＝6.1，CH3)，0.888，0.850(18H，2s，叔丁基)，0.081(6H，s，二甲基)，0.051和0.045 ppm(6H，2s，二甲基). I.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-羟基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰-CH3OH浴冷却下，将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(230mg，0.36mmol)在THF(新蒸过的)(5ml)中的溶液先用乙酸(250μl，4.2mmol)处理，然后用氯化四丁铵在THF中的1M溶液(2.2ml，2.2mmol)滴加处理。将混合物在22℃下搅拌120小时，用EtOAc(20ml)稀释，用冷的1M NaHCO3水溶液(15ml)、水(15ml)和盐水(15ml)洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂后，残留物在硅胶(10g)柱上纯化(10%CH3CN/CH2Cl2，CH3CN，丙酮)，得到标题化合物(60mg，41%)。
IR(CH2Cl)νmax3690，3610，3530(OH)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.5-8.47(1H，m，芳族 H)，7.75-7.66(1H，m，芳族 H)，7.42，7.38(1H，d，芳族 H)，7.23-7.19(1H，芳族 H)，6.05-5.86(1H，m，烯丙基 H)，5.48-5.21(2H，m，烯丙基 H)，4.87-4.60(2H，m，CH2)，4.343，4.273(1H 部分 ABq，J＝14.1Hz，CH2-吡啶基)，4.204(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.6Hz，H-5)，4.142，4.072(1H，部分 ABq，J＝14.1Hz，CH2-吡啶基)，4.27-4.14(1H，m，H-1′)，3.89-3.70(3H，m，CH2-O和H-4)，3.261(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.8Hz，H-6)，2.17-2.02(1H，m，HCH)，1.89-1.67(1H，m，HCH)，1.66(2H，bs，OH)和1.364 ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). J.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-羟基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
在冰浴冷却下，将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-羟基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(60mg，0.15mmol)在新蒸过的THF(2ml)中的溶液用PPh3(5mg)、(PPh3)4Pd(5mg)和N-甲基苯胺(33μl，0.3mmol)处理。撤去冰浴，将混合物搅拌1小时，然后用EtOAc(8ml)稀释，用0.1M pH7缓冲水溶液(4ml+2ml)提取两次。合并水相，用EtOAc(5ml)洗涤，减压抽吸并通过反相硅胶C18柱(10g，H2O→10%CH3CN/H2O)，冷冻干燥后，得到粉状标题化合物(25mg，43%)。
纯度(HPLC)99.5%(10%CH3CN/KH2PO40.01M，pH7.4，C18μBondapak，保留时间4.49分钟)。
IR(液体石蜡)νmax1750和1600cm-1(C＝O); UV(H2O)λmax266(5100)，306(6800); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.48-8.45(1H，m，芳族 H)，7.89-7.81(1H m，芳族 H)，7.53-7.49(1H，d，J＝7.9Hz，芳族 H)，7.39-7.33(1H，m，芳族 H)，4.25-4.186，4.103，4.033(2H，ABq，J＝13.8，CH2-吡啶基)，4.25-4.18(1H，m，H-1′)，4.0587，4.0457(部分 dd，J＝2.6，H-5)，3.74-3.61(1H，m，H-CH-O)，3.57-3.44(1H，m，HCH-O)，3.383(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝5.9Hz，H-6)，3.31-3.19(1H，m，H-4)，2.1-1.9(1H，m，HCH)，1.69-1.5(1H m，HCH)，和1.285 ppm(3H，d，J-6.4Hz，CH3). 实施例6 (4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-羟基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰浴冷却下，将实施例5步骤H制得的(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(630mg，1.00mmol)在新蒸过的THF(10ml)中的溶液先用AcOH(0.35ml，6mmol)处理，然后用1M的氟化四丁铵THF溶液(3.0ml，3mmol)滴加处理。将混合物在5℃下搅拌20小时，用1M NaHCO3水溶液中和至pH7.0，用EtOAc(2×15ml)提取。有机液用1M NaHCO3水溶液(1×20ml)、水(3×20ml)和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。残留物(0.6g)通过闪式硅胶(20g)柱(11己烷EtOAc)，得到油状标题化合物(0.39g，75%)。
IR(CH2Cl2)νmax3680，3610(OH)，1770和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.479(1H，bd，J＝4.1Hz，芳族 H)，7.710(1H，dt，J＝7.7Hz，J＝1.78Hz，芳族 H)，7.40(1H，d，J＝8.8Hz，芳族 H)，7.26-7.19(1H，m，芳族 H)，6.04-5.85(1H，m，烯丙基-H)，5.48-5.20(2H，m，烯丙基 H)，4.83-4.61(2H，m，CH2)，4.387，4.317，4.178，4.109(2H，ABq，J＝14.0Hz，CH2-吡啶)，4.27-4.12(1H，m，H-1′)，4.122，4.075，4.063(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝9.4Hz，H-5)，3.93-3.82(2H，m，H-4和HCH-O)，3.65-3.55(2H，m，H-CH-O和OH)，3.130(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝7.0Hz，H-6)，2.2-2.0(1H，m，HCH)，1.9-1.6(1H，m，HCH)，1.279(3H，t，J＝7.1Hz，CH3)，0.889(9H，s，叔丁基)和0.076 ppm(6H，s，二甲基). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-羟基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.39g，0.75mmol)在THF(80ml)中的冷(-20℃)溶液用三苯膦(315mg，1.2mmol)、0.43M的叠氮酸在甲苯中的溶液(0.21ml，1.3mmol)和偶氮二羧酸二乙酯(0.21ml，1.3mmol)处理。将混合物在-20℃下搅拌30分钟，用EtOAc(30ml)稀释，用1M NaHCO3水溶液(1×20ml)、水(2×20ml)和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。残留物(大约1g)通过硅胶(50g)柱(1/3AcOEt/己烷)，得到标题化合物(0.30g，74%)。
IR(CH2Cl2)νmax2105(N3)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.53-8.50(1H，m，芳族 H)，7.71-7.62(1H，m，芳族 H)，7.38，7.34(1H，d，芳族 H)，7.22-7.16(1H，m，al芳族 H)，6.03-5.84(1H，m，烯丙基 H)，5.46-5.20(2H，m，烯丙基 H)，4.83-4.59(2H，m，CH2)，4.306，4.237，4.096，4.628(2H，ABq，J＝13.7Hz，CH2吡啶基)，4.23-4.1(1H，m，H-1′)，4.076，4.063，4.016(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.4Hz，H-5)，3.75-3.6(1H，m，H-4)，3.6-3.45(1H，m，HCH-O)，3.45-3.25(1H，m，HCH-O)，3.071(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝7.8Hz，H-6)，2.13-1.95(1H，m，HCH)，1.8-1.5(1H，m，HCH)，1.302(3H，d，J＝6.0Hz，CH3)，0.892(9H，s，叔丁基)，0.086和0.081 ppm(6H，2s，二甲基). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.30g，0.55mmol)在新蒸过的THF(10ml)中的冷(-20℃)溶液用AcOH(0.2ml，3.3mmol)处理，然后用1M的氟化四丁铵THF溶液(1.7ml，1.7mmol)滴加处理。将混合物在5℃下搅拌90小时，用EtOAc(40ml)稀释，用1M NaHCO3水溶液(1×30ml)、水(2×30ml)和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。残留物(0.3g)通过硅胶(10g)柱(11己烷EtOAc)，得到标题化合物(0.21g，89%)。
IR(CH2Cl2)νmax3680-3600(OH)，2100(N3)1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.54-8.51(1H，m，芳族 H)，7.7-7.6(1H，m，芳族 H)，7.38，7.34(1H，m，芳族 H)，7.25-7.15(1H，m，a 芳族 H)，6.1-5.8(1H，m，烯丙基 H)，5.5(2H，m，烯丙基 H)，4.8-4.55(2H，m，CH2-烯丙基)，4.294，4.225，4.072，4.002(2H，ABq，J＝14.0Hz，CH2-吡啶基)，4.3-4.1(1H，m，H-1′)，4.166(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.8-3.65(1H，m，H-4)，3.6-3.3(2H，m，CH2-N3)，3.162(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.7Hz，H-6)，2.2-2(1H，m，HCH)，1.95(1H，bs，OH)，1.9-1.6(1H，m，HCH)1.382(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). D.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(74mg，0.17mmol)在CH2Cl2(3ml)中的冷(冰浴)溶液用Pd(PPh3)4(35mg)处理，接着加入N-甲基苯胺(0.5ml，0.45mmol)。将所得混合物在大约22℃下搅拌1小时，然后用0.1M pH7.1磷酸盐缓冲水溶液(0.35mmol)和乙醚(10ml)稀释。分相，水相用乙醚(2×10ml)洗涤，高真空下抽吸，通过C18μ-Bondapak反相柱(35g，4%-10%CH3CN/H2O)，冷冻干燥后，得到标题化合物(55mg，41%)。
UV(H2O)λmax266(7800)，304(10500); 纯度(HPLC)99.5%(304nm，10% CH3CN/KH2PO40.01M pH 7.4). IR(液体石蜡)νmax2100(N3)，1750和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.5-8.4(1H，m，芳族 H)，7.9-7.8(1H，m，芳族 H)，7.54，7.50(1H，dd，芳族 H)，7.4-7.3(1H，m，芳族 H)，4.27，4.20，4.11，4.04(2H，ABq，J＝14.2Hz，CH2-吡啶)，4.25-4.15(1H，m，H-1′)，4.067，4.054(部分 dd，J＝2.6Hz，部分 H-5)，3.52-3.17(4H，m，CH2N3，H-4和H-6)，3.389(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.3Hz，H-6)，2.1-1.9(1H，m，HCH)，1.75-1.5(1H，m，HCH)和1.297 ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例7 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.5-叠氮基-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-戊酸酯
在冰浴冷却下，将2-吡啶甲基硫醇(20.2g，162mmol)在CH2Cl2(200ml)中的溶液用吡啶(16.3ml，203mmol)处理，接着滴加在CH2Cl2(50ml)中的5-叠氮基戊酰氯(27.0g，167mmol)。将混合物搅拌30分钟，用乙醚(1l)稀释，用冷水(500ml)、1M NaHSO4水溶液(2×500ml)、水(500ml)、1M NaHCO3水溶液(500ml)、水(500ml)和盐水(500ml)洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到标题化合物(40.8g，100%)。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.54，8.52(1H，bd，芳族 H)，7.6-7.5(1H，m，芳族 H)，7.35-7.31(1H，bd，芳族 H)，7.19-7.12(1H，m，芳族 H)，4.25(2H，s，CH2)，3.27(2H，t，J＝6.6Hz，CH2N3)，2.62(2H，t，J＝6.9Hz，CH2CO)，和1.8-1.5 ppm(4H，m，CH2CH2). B.5-叠氮基-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕戊酸酯的叔丁基二甲基硅基烯醇醚
在冰-MeOH浴冷却下，将5-叠氮基-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕戊酸酯(44.0g，162mmol)在CH2Cl2(400ml)中的溶液先用三乙胺(50ml，356mmol)处理，然后用三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯(76.6ml，333mmol)滴加处理。撤去冷却浴，将混合物搅拌2小时。然后将反应混合物用石油醚(1.5l)稀释，用冷水(2×500ml)、1M NaHCO3水溶液(2×500ml)、水(2×500ml)和盐水(500ml)洗涤，干燥(MgSO4)。然后将有机相用中性活性炭处理，过滤并蒸发溶剂后，得到标题化合物(48.9g，83%)。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.56-8.53(1H，m，芳族 H)，7.67-7.57(1H，m，芳族 H)，7.28-7.23(1H，m，芳族 H)，7.18-7.11(1H，m，芳族 H)，4.96(0.5H，t，J＝7.6Hz，乙烯基 H)，4.80(0.5H，t，J＝7.3Hz，乙烯基 H)，4.030和3.955(2H，2s，CH2-吡啶基)，3.097和3.040(2H，2t，J＝7.0Hz，J＝7.3Hz，CH2)，2.06(2H，4线的中心，J＝7.1Hz，CH2乙烯基)，1.57-1.38(2H，m，CH2)，0.989，0.970(9H，2s，叔丁基)和0.243，0.205ppm(6H，2s，二甲基). C.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-4″-叠氮基丁基〕氮杂环丁烷-2-酮
在冰浴冷却下，向新熔融过的ZnCl2(18.0g，133mmol)中先加入在CH2Cl2(200ml)中的(3S，4R)-4-乙酰氧基-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮(19.0g，67.0mmol)，然后滴加步骤B制得的5-叠氮基-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-戊酸酯的叔丁基二甲基硅基烯醇醚(48.5g，133mmol)在CH2Cl2(100ml)中的溶液。将混合物在5℃(冷室)下搅拌1小时后放置过夜(18小时)。将反应混合物用石油醚(1.2l)和冰冷的水(500ml)稀释。有机相用冷水(2×500ml)、1M NH4Cl水溶液(1×500ml)、水(500ml)、1M NaHCO3水溶液(2×500ml)、水(2×500ml)和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。残留物通过硅胶垫(400g，己烷，CH2Cl2，EtOAc)，得到油状的标题化合物(14.2g，44%)。
IR(CH2Cl2)νmax3400(NH)，2100(N3)，1770和1680cm-1(C＝O)， 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.55-8.51(1H，m，芳族 H)，7.68-7.59(1H，m，芳族 H)，7.35-7.30(1H，m，芳族 H)，7.21-7.14(1H，m，芳族 H)，5.89(1H，bs，NH)，4.27(2H，s，CH2-吡啶基)，4.20-4.10(1H，m，H-1′)，3.81(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝7.0Hz，H-4)，3.279(2H，bt，J＝6.3Hz，CH2N3)，3.048(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝3.2Hz，H-3)，2.9-1.7(1H，m，H-1″)，1.9-1.7(1H，m，HCH)，1.7-1.5(3H，m，HCH和CH2)，0.987(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.851(9H，s，叔丁基)和0.042ppm(6H，s，二甲基). D.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-4″-叠氮基丁基〕氮杂环丁烷-2-酮
在冰浴冷却下，将(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-4″-叠氮基丁基〕氮杂环丁烷-2-酮(14.0g，28.4mmol)在THF(140ml)中的溶液先用30%H2O2(9.8ml，714mmol)处理，接着滴加1M NaOH水溶液(85.2ml，85.2mmol)。撤去冰浴，将混合物搅拌0.5小时。然后用1N HCl水溶液(170ml，170mmol)酸化，用EtOAc(3×125ml)提取。合并乙酸乙酯提取液，用水(1×125ml)、1M NaHSO4水溶液(1×125ml)、水(2×125ml)和盐水(1×125ml)洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，研制固体(己烷)，得到白色固状的标题化合物(8.3g，76%);m.p.＝147-148℃(乙醚)。
IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，2100(N3)，1765，1740和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.43(1H，bs，NH)，4.3-4.1(1H，m，H-1′)，3.89(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝6.1Hz，H-4)，3.337(2H，bt，J＝6.1Hz，CH2N3)，3.148(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝3.7Hz，H-3)，2.75-2.6(1H，m，H-1″)，1.9-1.5(4H，m，CH2CH2)，1.176(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.868(9H，s，叔丁基)，0.071和0.060ppm(6H，2s，二甲基). E.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-叠氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮
将(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-4″-叠氮基丁基〕氮杂环丁烷-2-酮(5.0g，13mmol)在CH3CN(50ml)中的悬浮液用羰基二咪唑(2.5g，15.6mmol)处理，然后搅拌30分钟。向所得透明溶液(酰基咪唑)中加入丙二酸单烯丙基酯镁盐(5.0g，16mmol)。将混合物在70℃(浴温)下加热18小时。补加丙二酸酯盐(1.25g，4mmol)，再将混合物搅拌5小时。然后再补加丙二酸单烯丙基酯镁盐(1.25g，4mmol)，继续加热18小时。部分蒸发溶剂。残留物溶于乙酸乙酯(100ml)中，用水(100ml)、1N HCl水溶液(100ml)、水(2×100ml)、10%K2CO3水溶液(100ml)、水(100ml)和盐水(100ml)洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂后，残留物溶于CH3CN(50ml)，在氮气下用冰浴冷却至5℃，先用三乙胺(1.82ml，13.0mmol)处理，接着用在CH3CN(5ml)中的对甲苯磺酰基叠氮(2.56ml，13.0mmol)滴加处理，然后在室温(22℃)下搅拌3小时。蒸发溶剂，所得残留物通过硅胶垫(100g，己烷→40%乙醚/己烷)，得到黄色油状的标题化合物(1.6g，25%)。
IR(CH2Cl2)νmax3400(NH)，2150(N2)，2100(N3)，1765，1715和1650cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.1-5.8(1H，m，乙烯基 H)，5.85(1H，bs，NH)，5.41-5.29(2H，m，乙烯基 H)，4.74-4.70(2H，m，烯丙基 CH2)，4.3-4.0(2H，m，H-1′和H-1″)，3.85(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝5.3Hz，H-4)，3.267(2H，m，CH2N3)，3.044(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝3.6Hz，H-3)，2.0-1.8(1H，m，HCH)，1.7-1.4(3H，m，CH2HCH)，1.172(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.863(9H，s，叔丁基)0.063和0.052(6H，2s，二甲基). F.(4R，5R，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(3″-叠氮基丙基)-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯
将预先用氩气清洗过(10分钟)的(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-4-〔(1″R)-1″-(3-叠氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(1.45g，303mmol)在苯(50ml)中的溶液用Rh(OAc)2(40mg)作为催化剂加热回流40分钟。然后蒸发溶剂，得到油状标题化合物(1.45g，100%)。
IR(CH2Cl2)νmax2100(N3)，1770和1745cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.0-5.8(1H，m，乙烯基 H)，5.4-5.25(2H，m，乙烯基 H)，4.67(1H，s，H-2)，4.64(2H，m，CH2)，4.4-4.2(1H，m，H-1′)，4.255，1H，dd，J＝2.4Hz，J＝8.3Hz，H-5)，3.5-3.2(2H，m，CH2N3)，3.24(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝6.2Hz，H-6)，2.8-2.6(1H，m，H-4)，1.85-1.55(4H，m，CH2CH2CO)，1.304(3H，d，J＝6.2Hz，CH3)，0.886(9H，s，叔丁基)，0.102和0.090ppm(6H，2s，二甲基). G.(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷却下，将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(1.45g，3.03mmol)在CH3CN(25ml)中的溶液先用氯磷酸二苯基酯(0.67ml，3.3mmol)处理，接着用N，N-二异丙基乙胺(0.55ml，3.3mmol)滴加处理，然后搅拌45分钟。将所得的烯醇磷酸酯用2-吡啶甲基硫醇(2.90g，23.2mmol)处理后用N，N-二异丙基乙胺(3.86ml，23.2mmol)滴加处理。用冰浴代替冰-MeOH浴，将混合物搅拌2小时，然后用EtOAc(100ml)稀释，用冷水(50ml)、冷的1M NaHSO3水溶液(3×50ml)、水(2×50ml)、冷的1M NaHCO3水溶液(2×50ml)、水(1×50ml)和盐水(50ml)洗涤，干燥(MgSO4)。残留物通过硅胶柱(30g，己烷→40%EtOAc/己烷)，得到污染有起始硫醇的标题产物。将该物质用乙醚(50ml)稀释，再用冷水(20ml)、1M NaHSO3水溶液(3×20ml)、H2O(2×20ml)、1M NaHCO3水溶液(2×20ml)、水(20ml)和盐水(20ml)洗涤，干燥(MgSO4)，得到纯的标题化合物(1.45g，86%)。
IR(CH2Cl2)νmax2105(N3)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.5-8.4(1H，m，芳族 H)，7.8-7.6(1H，m，芳族 H)，7.4-7.39(1H，bd，芳族 H)，7.3-7.18(1H，m，芳族 H)，6.05-5.80(1H，m，乙烯基 H)，H-1′)，4.01(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.6-3.4(1H，m，5.5-5.2(2H，m，乙烯基 H)，4.9-4.6(2H，m，CH2)，4.287，4.217，4.083，4.013(2H，ABq，J＝14.0Hz，CH2-吡啶基)，4.21-4.08(1H，m，H-4)，3.4-3.2(2H，m，CH2N3)，3.145(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝7.5Hz，H-6)，2.0-1.4(4H，m，CH2CH2)，1.288(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.874(9H，s，叔丁基)，0.073和0.059(6H，2s，二甲基). H.(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷却下，将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.5g，2.6mmol)和THF(30ml)溶液用CH3CO2H(0.9ml，15.6mmol)滴加处理后，用1M的氟化四丁铵的THF溶液(7.8ml，7.8mmol)处理。将混合物在所述温度下搅拌1小时，接着在5℃下放置56小时，然后在室温下搅拌24小时。将混合物冷却至0℃，用1M NaHCO3水溶液(16ml)中和，水相用EtOAc/乙醚(1∶1)(2×100ml)提取。合并有机提取液，用冷的1M NaHCO3水溶液(50ml)、水(2×50ml)和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。残留物通过硅胶柱(30g，己烷/CH2Cl2→CH2Cl2/EtOAc→EtOAc)，得到标题化合物(679mg，64%)和起始原料(160mg，11%)。
IR(CH2Cl2)νmax3600，3500(OH)，2100(N3)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.51-8.49(1H，m，芳族 H)，7.7-7.6(1H，m，芳族 H)，7.41，7.37(1H，bd，芳族 H)，7.23-7.16(1H，m，芳族 H)，6.05-5.8(1H，m，乙烯基 H)，5.5-5.2(2H，m，乙烯基 H)，4.86-4.6(2H，m，乙烯基 CH2)，4.256，4.185，4.056，3.985(2H，ABq，J＝14.2Hz，CH2-吡啶基)，4.25-4.15(1H，m，H-1′)，1.121(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.6-3.45(1H，隐藏，H-4)，3.45-3.24(2H，m，CH2N3)，3.214(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.5Hz，H-6)，1.87(1H，bd，J＝6.5，OH)，2.0-1.5(4H，m，CH2CH2)，和1.37ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). I.(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷却下，将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(133mg，0.3mmol)在CH2Cl2(10ml)中的溶液用(Ph3P)4Pd(63mg)和N-甲基苯胺(0.1ml，0.6mmol)处理。撤去冰浴，将混合物搅拌1小时，然后再用冰浴冷却。将反应混合物用乙醚(40ml)稀释，用0.05M pH7.0磷酸盐缓冲液(2×6ml)提取。合并水提取液，用乙醚(2×20ml)洗涤，用0.05M pH4.2磷酸盐缓冲液酸化至pH5.8-5.9。水层用10%Pd/C(225mg)为催化剂在50 psi和5℃-15℃条件下氢化1小时。氢化结束时，除去催化剂，通过C18μBondapak柱(35g，H2O→4%CH3CN/H2O)，冷冻干燥，得到标题化合物，将该化合物在C18μBondapak柱(15g)上再次纯化，冷冻干燥(17mg，11%)。
纯度(HPLC)97.5%(10%CH3CN/KH2PO40.01M pH 7.4，保留时间5.66分钟，μBondapak C1810μ); UV(H2O)λmax304(9383)，266(6895); IR(液体石蜡)λmax1755和1590cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.48-8.45(1H，bd，芳族 H)，7.9-7.8(1H，m，芳族 H)，7.54，7.49(1H，bd，芳族 H)，7.4-7.3(1H，m，芳族 H)，4.3-4.1(1H，m，H-1′)，4.225，4.157，4.106，4.043(2H，ABq，J＝13.2Hz，CH2-吡啶)，4.056，4.043(部分 dd，J＝2.6Hz，H-5)，3.31(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝6.5Hz，H-6)，3.197(1H，bt，J＝9.4Hz，H-4)，3.0-2.85(2H，m，CH2N3)，1.9-1.55(3H，m，HCH和CH2)，1.55-1.2(1H，m，HCH)和1.295ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例8 (4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-亚胺甲基)氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在5℃(冰浴)下，用1M NaOH水溶液将如实施例7步骤Ⅰ所述的那样由(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(150mg，0.338mmol)脱保护得到的氢解产物(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸粗品的pH值调至8.5。向该含水混合物中分批加入甲亚胺酸苄酯盐酸盐(583mg，3.41mmol)，同时用1M NaOH水溶液将pH值保持在8.3-8.4。加完时，将反应混合物搅拌6分钟，然后加到μBondapak C18反相柱上(40g，H2O→1，2，3，4和6%CH3CN/H2O)，得到标题产物，再次在μBondapak C18反相柱上纯化(H2O→2，3，4和6%CH3CN/H2O)。得到了白色蓬松的固状标题化合物纯品(19mg，11%)。
纯度98.9%(HPLC测得，10%CH3CN/K2PO40.01M，pH7.4，保留时间6.77分钟，μBondapak C1810μ); UV(H2O)λmax304(7791)，266(5941); IR(液体石蜡)νmax1755，1690(C＝O)，和1715cm-1(C＝NH); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.45-8.42(1H，bd，芳族 H)，7.87-7.75(1H，m，芳族 H)，7.77(1H，bs，C＝NH)，7.51，7.47(1H，bd，芳族 H)，7.37，7.3(1H，m，芳族 H)，4.3-4.1(1H，m，H-1′)，4.198，4.134，4.072，4.001(2H，ABq，J＝13.5Hz，CH2吡啶)，4.045-4.07(1H，隐藏 H-5)，3.4-3.05(4H，m，CH2N，H-4，H-6)，1.8-1.4(3H，m，HCH和CH2)，1.4-1.15(1H，m，HCH)和1.259ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 实施例9 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(3″-羟基丙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
A.5-羟基戊酸钠
在冰浴冷却下，将戊内酯(20g，0.20mol)在水(100ml)中的悬浮液用NaOH(8.0g，0.20mol)在水(100ml)中的溶液滴加处理。将混合物搅拌15分钟，然后，撤去冷却浴，继续搅拌15分钟。过滤混合物以除去固体物，将滤液冷冻干燥，得到白色固状的标题化合物(26.2g，94%)。
IR(液体石蜡)νmax3600-3100(OH)，和1560cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ3.61(2H，t，J＝6.1Hz，CH2OH)，2.20(2H，t，J＝7.0Hz，CH2CO2)和1.58，1.57，1.55ppm(4H，m，CH2CH2). B.5-(叔丁基二甲基硅氧基)戊酸叔丁基二甲基硅基酯
在冰浴冷却下，向5-羟基戊酸钠(25.0g，179mmol)在DMF(250ml)中的悬浮液中分批加入叔丁基二甲基硅基氯(80.8g，536mmol)，然后滴加三乙胺(32ml，232mmol)。撤去冰浴，将混合物在大约22℃搅拌2.5天。将反应混合物用冰冷却的水(700ml)稀释，用乙醚(2×800ml)提取。合并有机提取液，用冷水(5×500ml)和盐水(500ml)洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到油状标题化合物(70g，＞100%)。
IR(净态)νmax1720cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ3.61(2H，t，J＝6.0Hz，CH2O)，2.33(2H，t，J＝7.0Hz，CH2CO2)，2.8-2.5(4H，m，(CH2)2)，0.92，0.88(18H，2s，叔丁基)，0.25，0.09，和0.04ppm(12H，3s，CH3). C.5-(叔丁基二甲基硅氧基)戊酸
将5-(叔丁基二甲基硅氧基)戊酸叔丁基二甲基硅基酯(70g，得自178.6mmol羟基戊酸钠)在MeOH(550ml)中的溶液用5N乙酸水溶液(50ml，250mmol)处理，然后搅拌1.5-2.0小时。除去溶剂，残留物溶于CH2Cl2(1l)中，用冰冷的水(4×500ml)和盐水(500ml)洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂后，残留物(58g)溶于乙醚(600ml)中，用1M NaHCO3水溶液(3×200ml)提取。合并水提取液，用乙醚(3×200ml)洗涤，用5M乙酸水溶液酸化至pH5.0，然后用乙醚(4×200ml)提取。合并有机提取液，用冷水(4×200ml)和盐水(200ml)洗涤，干燥(MgSO4)，得到油状标题化合物(25g，60%)。
IR(CH2Cl2)νmax3660-2500(OH)，1750-1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ3.63(2H，t，J＝6.0Hz，CH2O)，2.39(2H，t，J＝7.2Hz，CH2CO2)，1.78-1.49(4H，m，(CH2)2)，0.89(9H，s，叔丁基)和0847ppm(6H，s，CH3). D.5-(叔丁基二甲基硅氧基)-1-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕戊酸酯
在冰浴冷却下，向5-(叔丁基二甲基硅氧基)戊酸(25.0g，108mmol)在CH2Cl2(350ml)中的溶液中加入2-吡啶甲基硫醇(13.5g，108mmol)、1，3-二环己基碳化二亚胺(22.2g，108mmol)和1-羟基苯并三唑水合物(14.6g，108mmol)。撤去冰浴，将混合物搅拌20小时，然后用乙酸乙酯(1l)稀释，用冰冷的水(1l)、冰冷的1M NaHSO3水溶液(1l)、冰冷的水(1l)、1M NaHCO3水溶液(1l)、冰冷的水(2×1l)和盐水(1l)洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂后，残留物在硅胶闪式柱上纯化(250g，己烷，5%，10%，15%EtOAc/己烷)，得到油状标题化合物(30.2g，83%)。
IR(CH2Cl2)νmax1690cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，

OO MHz)δ8.55-8.52(1H，m，吡啶 -H)，7.68-7.59(1H，m，吡啶 -H)，7.37-7.33(1H，bd，J＝7.7Hz，吡啶 -H)，7.20-7.14(1H，m，吡啶 -H)，4.26(2H，s，CH2S)，3.60(2H，t，J＝6.1Hz，CH2O)，2.61(2H，t，J＝7.1Hz，CH2CO2)，1.85-1.6(2H，m，CH2)，1.6-1.4(2H，m，CH2)，0.88(9H，s，叔丁基)和0.03(6H，s，CH3). E.5-(叔丁基二甲基硅氧基)-1-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕戊酸酯的叔丁基二甲基硅基烯醇醚
在冰-MeOH浴冷却下，向5-(叔丁基二甲基硅氧基)-1-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕戊酸酯(30.2g，89.0mmol)在CH2Cl2(300ml)中的溶液中加入三乙胺(27ml，196mmol)，然后滴加三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯(41ml，178mmol)。撤去冷浴，将混合物搅拌2小时。混合物用冷的石油醚(2.7l)稀释，用冰冷的水(2×500ml)、冰冷的1M NaHCO3水溶液(1×500ml)、冰冷的水(2×500ml)和盐水(500ml)洗涤，干燥。用中性活性炭处理有机溶液，过滤，得到红色油状的标题化合物(33g，83%)，为45∶55比率的几何异构体。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.54-8.51(1H，m，吡啶 -H)，7.65-7.56(1H，m，吡啶 -H)，7.31-7.23(1H，m，吡啶 -H)，7.16-7.09(1H，m，吡啶 H)，5.02(0.55H，t，J＝7.6Hz，乙烯基 H)，4.87(0.45H，t，J＝7.2Hz，乙烯基 H)，4.03(1.1H，s，CH2S)，3.96(0.9H，s，CH2S)，3.55，3.52，3.49，3.46(2H，4 线，J＝6.4Hz，CH2O)，2.1-1.96(2H，m，CH2-乙烯)，1.52-1.29(2H，m，CH2)，0.985，0.977(9H，2s，叔丁基)，0.879，0.873(9H，2s，叔丁基)，0.236g，0.194g，0.02g和0.013ppm(12H，4s，CH3). F.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基〕氮杂环丁烷-2-酮
在氮气氛和冰浴冷却下，向新熔融过的ZnCl2(10.0g，73.5mmol)中加入在CH2Cl2(100ml)中的(3S，4R)-4-乙酰氧基-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮(10.5g，36.7mmol)，然后缓慢加入在CH2Cl2(50ml)中的步骤E制得的烯醇甲硅烷基醚(33.2g，73.3mmol)。将混合物在5℃下搅拌18.5小时，然后，用石油醚(1l)稀释，倒到冰水(500ml)上。有机相用冷水(2×500ml)、1M NH4Cl水溶液(500ml)、水(500ml)、1M NaHCO3水溶液(500ml)、水(2×500ml)和盐水(500ml)洗涤，干燥(MgSO4)。残留物通过硅胶垫(100g，CH2Cl2，3%，5%，8%，10%，20%EtOAc/CH2Cl2)，得到固状标题化合物(9.2g，44%);m.p.＝110-111℃(乙醚-石油醚1/4)。
IR(CH2Cl2)νmax3400(NH)，1770和1680cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.54-8.50(1H，m，吡啶 -H)，7.66-7.58(1H，m，吡啶 -H)，7.34，7.30(1H，bd，J＝7.5Hz，吡啶 -H)，7.2-7.13(1H，m，吡啶 -H)，5.85(1H，bs，NH)，4.25(2H，s，CH2S)，4.20-4.09(1H，m，H-1′)，3.82(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝7.1Hz，H-4)，3.61-3.55(2H，m，CH2O)，3.05-3.02(1H，m，H-3)，2.84-2.75(1H，m，H-1″)，1.9-1.4(4H，m，(CH2)2)，0.98(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.87，0.85(18H，2s，叔丁基)，0.04和0.023ppm(12H，2s，CH3). 分析计算值 C28H50N2O4SSi C，59.32;H，8.89;N，4.94. 实测值 C，59.35;H，9.03;N，4.95. G.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基〕氮杂环丁烷-2-酮
在冰浴冷却下，将(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基〕氮杂环丁烷-2-酮(7.30g，12.9mmol)在THF(70ml)中的溶液用30%(V/V)H2O2(4.45ml，51.0mmol)处理，接着滴加1M NaOH水溶液(38.7ml，38.7mmol)。撤去冰浴，将混合物搅拌30分钟，然后再次用冰浴冷却。加入1N HCl水溶液(77ml)，将混合物用EtOAc(3×50ml)提取。有机提取液用冰冷的水(2×50ml)、1M NaHSO3水溶液(2×50ml)、冰冷的水(3×50ml)和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，得到白色固状的标题化合物(5.5g，92%);m.p.＝127-128℃(石油醚/乙醚1/2)。
IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，1755，1740和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.28(1H，bs，NH)，4.23-4.18(1H，m，H-1′)，3.89(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝6.3Hz，H-4)，3.7-3.55(2H，m，CH2O)，3.15-3.05(1H，m，H-3)，2.8-2.6(1H，m，H-1″)，1.8-1.5(4H，m，(CH2)2)，1.17(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.89，0.86(18H，2s，叔丁基)，0.064，0.057和0.051(12H，3s，CH3). 分析计算值 C28H45NO5Si2 C，57.47，H，9.86，N，3.05. 实测值 C，57.41，H，10.04，N，3.07. H.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3″-叔丁基二甲基硅氧基丙基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮
用迪安-斯达克冷凝器将丙二酸二烯丙酯镁盐(5.7g，18.1mmol)在苯(80ml)中的溶液加热回流。除去头20ml苯，并用装有3

分子筛的滴液漏斗代替迪安-斯达克。继续回流3小时，然后使该溶液冷却。
在另一烧瓶中，将(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基〕氮杂环丁烷-2-酮(5.50g，12.1mmol)在甲苯(100ml)中的溶液用羰基二咪唑(2.15g，13.3mmol)处理。将混合物搅拌2小时，蒸发溶剂，得到油状物，在高真空下抽吸2小时。然后将该酰基咪唑用苯(20ml)稀释，加到丙二酸二烯丙酯镁盐的苯溶液。将混合物在67-70℃下加热18小时，冷却，用冷EtOAc稀释，用冰冷的水(2×100ml)、HCl(100ml)、冰冷的水(2×100ml)、10%Na2CO3水溶液(1×100ml)、冰冷的水(1×100ml)和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，用活性炭处理。蒸发溶剂，得到油状标题化合物(6.2g，95%)。
IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，1765和1715cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ12.03，12.02(0.5H，2s，烯醇 -H)，6.0-5.8(1H，m，乙烯基 -H)，5.87(1H，bs，NH)，5.38-5.24(2H，m，乙烯基 -H)，5.07(0.52H，s，烯醇形式的烯H)，4.65-4.61(2H，m，CH2-乙烯)，4.19-4.1(1H，m，H-1′)，3.89(0.5H，dd，J＝2.0Hz，J＝6.2Hz，H-4)，3.82(0.5H，dd，J＝2.0Hz，J＝7.4Hz，H-4)，3.64-3.4(2.5H，m，CH2O和H-1″)，2.97-2.91(1H，m，H-3)，2.3-2.1(0.5H，m，H-1″)，1.8-1.4(4H，m，(CH2)2)，1.17(1.5H，d，J＝6.2Hz，CH3)，1.11(1.5H，d，J＝6.4Hz，CH3)，0.88，0.86(18H，2s，叔丁基)，0.06和0.054ppm(12H，2s，CH3). I.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-叔丁基二甲基硅氧基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮
在冰浴冷却下，将(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-叔丁基二甲基硅氧基丙基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(6.20g，11.5mmol)在无水CH3CN(50ml)中的溶液用三乙胺(1.16ml，11.5mmol)处理，然后滴加在CH3CN(10ml)中的对甲苯磺酰基叠氮(2.27g，11.5mmol)。将混合物在大约22℃下搅拌3小时，减压下除去溶剂。油状残留物用己烷研制，滤除固体。蒸发己烷后，残留物通过硅胶垫(100g，己烷，20%，30%，40%乙醚/己烷)，得到黄色油状的标题化合物(4.88g，75.0%)。
IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，2150(N2)，1765，1715和1650cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.03-5.80(1H，m，乙烯基 -H)，5.84(1H，bs，NH)，5.4-5.28(2H，m，乙烯基 -H)，4.73-4.68(2H，m，乙烯基 -CH2)，4.23-4.12(1H，m，H-1′)，4.07-4.0(1H，m，H-1″)，3.88(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝5.5Hz，H-4)，3.59，3.56，3.54(2H，3 线，CH2O)，3.04(1H，t，J＝2.5Hz，H-3)，1.9-1.7(1H，m，H-C-H)，1.6-1.4(3H，m，HCH和CH2)，1.16(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.87，0.86(18H，2s，叔丁基)，0.056，0.050和0.027ppm(12H，3s，CH3). J.(2R，4R，5R，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(3″-叔丁基二甲基硅氧基丙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯
将(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-叔丁基二甲基硅氧基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(3.8g，6.7mmol)在苯(300ml)中的溶液用氩气清洗10分钟。然后加入Rh(OAc)2(100mg)，将混合物加热回流70分钟。减压下除去溶剂，得到油状标题化合物(3.9g，＞100%)。
IR(CH2Cl2)νmax1765和1745cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ5.99-5.79(1H，m，乙烯基 H)，5.39-5.20(2H，m，乙烯基 H)，4.66-4.60(2H，m，CH2-乙烯)，4.63(1H，s，H-2)，4.36，4.33，4.30，4.27(1H，5线外的4线，H-1′)，4.24(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝8.1Hz，H-5)，2.7-2.5(2H，m，CH2O)，3.31(1H，dd，J＝2.3Hz，J＝5.8Hz，H-6)，2.8-2.6(1H，m，H-4)，1.8-1.5(4H，m，(CH2)2)，1.29(3H，d，J＝6.2Hz，CH3)，0.881，0.878(18H，2s，叔丁基)，0.093，0.085和0.033ppm(12H，3s，CH3). K.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(3″-叔丁基二甲基硅氧基丙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷却下，将(2R，4R，5R，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(3″-叔丁基二甲基硅氧基丙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(得自3.8g，6.7mmol相应的重氮基化合物)在CH3CN(40ml)中的溶液用氯磷酸二苯基酯(1.52ml，7.37mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.03ml，7.37mmol)滴加处理。将混合物在-15℃～-10℃下搅拌1小时。将所得的烯醇磷酸酯在冷却(-15℃)状态下先用在CH3CN(10ml)中的2-吡啶甲基硫醇(1.68g，13.4mmol)处理，然后用N，N-二异丙基乙胺(2.36ml，13.4mmol)滴加处理。将混合物在-10℃～0℃下搅拌1小时，然后在5℃(冰浴)下搅拌1.5小时。将反应混合物用冷EtOAc(300ml)稀释，用冷水(2×100ml)、冰冷的1M NaHSO3水溶液(3×100ml)、冰冷的水(2×100ml)、1M NaHCO3水溶液(2×100ml)、冰冷的水(2×100ml)和盐水(100ml)洗涤，干燥(MgSO4)。残留物通过闪式硅胶柱(60g，己烷，5%，10%，15%，20%EtOAc/己烷)，得到油状标题化合物(3.2g，74%)。
IR(CH2Cl2)νmax1770和1715cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.50-8.48(1H，m，吡啶 -H)，7.7-7.6(1H，吡啶 -H)，7.41-7.36(1H，bd，J＝7.9，吡啶 -H)，7.21-7.15(1H，m，吡啶 -H，6.05-5.8(1H，m，乙烯基 H)，5.47-5.19(2H，m，乙烯基 -H)，4.9-4.6(2H，m，CH2-乙烯)，4.28，4.21，4.09，4.02(2H，ABq，J＝13.8Hz，CH2-吡啶甲基)，4.21-4.08(1H，m，H-1′)，4.01(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝9.3Hz，H-5)，3.7-3.5(2H，m，CH2-O)，3.5-3.4(1H，m，H-4)，3.27(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝7.3Hz，H-6)，1.9-1.4[4H，m，(CH2)2]，1.28(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.877，0.871(18H，2s，叔丁基)，0.066，0.057，0.036和0.029ppm(12H，4s，CH3). L.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(3″-羟基丙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷却下，将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(3″-叔丁基二甲基硅氧基丙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(3.20g，4.95mmol)在无水THF(60ml)中的溶液用CH3CO2H(1.72ml，30mmol)处理，然后滴加1M氟化四丁铵的THF溶液(15ml，15mmol)。将混合物在冷室(5℃)中保持30小时，然后在冰浴冷却下用1M NaHCO3(30ml，30mmol)中和。将混合物用EtOAc(200ml)稀释，水相用EtOAc(2×200ml)提取2次。将有机提取液用冰的1M NaHCO3水溶液(4×100ml)、冰冷的水(2×100ml)和盐水(100ml)洗涤，干燥(MgSO4)。残留物通过闪式硅胶柱(75g，CH2Cl2，5%，10%，20%，30%，40%，60%EtOAc/CH2Cl2)，得到白色固状的(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(3″-羟基丙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.5g，57%)。
IR(CH2Cl2)νmax3600-3300(OH)，1770和1720cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.48-8.45(1H，m，吡啶 -H)，7.77-7.67(1H，m，吡啶 -H)，7.50-7.46(1H，d，J＝7.9Hz，吡啶 -H)，7.26-7.19(1H，m，吡啶 -H)，6.05-5.85(1H，m，乙烯基 -H)，5.47-5.20(2H，m，乙烯基-H)，4.84-4.61(2H，m，乙烯基 -CH2)，4.46，4.39，4.05，3.98(2H，ABq，J＝14.4Hz，CH2- 吡啶)，4.20，4.16，4.13(1H，35线外的3线，H-1′)，3.96(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.8-3.6(2H，m，CH2O)，3.5-3.3(1H，m，H-4)，3.22(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝7.3Hz，H-6)，1.9-1.6(4H，m，(CH2)2)，1.64(1H，bs，OH)，1.27(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.857(9H，s，叔丁基)，0.059和0.039(6H，2s，CH3). 用丙酮洗脱上述柱，得到了标题化合物(411mg，20%)。
IR(CH2Cl2)νmax3700-3200(OH)，1770和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.49-8.46(1H，m，吡啶 -H)，7.75-7.66(1H，m，吡啶 -H)，7.48-7.45(1H，bd，J＝8.9Hz，吡啶 -H)，7.23-7.19(1H，m，吡啶 -H)，6.06-5.86(1H，m，乙烯基 -H)，5.48-5.21(1H，m 乙烯基-H)，4.88-4.60(2H，m，CH2- 乙烯基)，4.41，4.33，4.06，3.98(2H，ABq，J＝14.5Hz，CH2- 吡啶)，4.22-4.13(1H，m，H-1′)，4.11，4.09(部分 dd，J＝2.6Hz，部分 H-5)，3.8-3.6(2H，m，CH2O)，3.6-3.45(1H，m，H-4)，3.30(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝7.6Hz，H-6)，1.9-1.5(5H，m，(CH2)2和OH)，和1.35ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). M.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(3″-羟基丙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
在冰浴冷却下，向(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(3″-羟基丙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(166mg，0.400mmol)在CH2Cl2(10ml)中的溶液中加入Pd(PPh3)4，然后滴加2-乙基己酸钾(0.5M乙酸乙酯溶液1ml，0.5mmol)。将混合物搅拌15分钟，用乙醚(25ml)稀释，用冰冷的0.04M pH7.0缓冲水溶液(3×5ml)提取。水提取物用乙醚(2×25ml)洗涤后，通过C18μBondapak反相柱(40g，H2O，1%，2%，3%，5%CH3CN/H2O)，得到标题化合物(120mg，75%)，为冷冻干燥粉末。
HPLC测得的纯度为99.6%; UV(H2O)λmax306(11900)，266(8000); IR(液体石蜡)νmax1745和1590cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.47，8.45(1H，bd，J＝4.8Hz，吡啶 -H)，7.85(1H，bt，J＝7.8Hz，吡啶 -H)，7.52(1H，bd，J＝7.8Hz，吡啶 -H)，7.39-7.33(1H，m，吡啶 -H)，4.22，4.17，4.11，4.06(2H，ABq，J＝10.5Hz，CH2-吡啶)，4.3-4.0(2H，m，隐藏 H-1′和H-5)，3.57，3.54，3.51(2H，m，隐藏 H-1′和H-5)，3.57，3.54，3.51(2H，m，CH2O)，3.35(1H，dd，J＝2.3Hz，J＝6.0Hz，H-6)，3.21，3.17，3.12(1H，m，H-4)，2.8-2.2(4H，m，(CH2)2)和1.28ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 实施例10 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-甲基吡啶鎓-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸磷酸二氢盐
将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钾(如实施例6所制备)(0.300g，0.70mmol)在无水乙腈(3ml)中的悬浮液冷却至-20℃，用98%甲酸(0.030ml，0.79mmol)处理。15分钟后，用三氟甲磺酸甲酯(0.12ml，1.06mmol)处理该透明溶液，搅拌1.5小时。然后加入20ml 0.1M pH7.4磷酸盐缓冲液使反应混合物骤冷，减压下蒸发乙腈。水相用40ml 0.1M pH6.0磷酸盐缓冲液稀释，在0℃和45psi氢压下用30%Pd/硅藻土(0.40g)氢化1.5小时。通过硅藻土垫过滤催化剂，滤液在反相硅胶(μBondapak C18，3×15cm)上层析。用0-5%乙腈水溶液梯度洗脱，冷冻干燥后，得到白色非晶形固状的标题化合物(0.062g，19%)。1H-NMR测得，产物纯度为80%。
HPLC纯度97%(μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm)，洗脱剂10%CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液，流速1.5ml/分，UV检测器300nm，保留时间10.0分钟。
UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax270nm(6，630)和300nm(sh，3480); IR(KBr)νmax1765β-内酰胺的C＝O1635，1610和1585cm-1; 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.39Hz，CH3CHO)，1.7-2.3(m，2H，CH2-4)，3.1-3.3(m，2H，CH2NH2)，3.37(dτ，JH4，CH2＝10.1Hz，JH4，H5＝3.86Hz，1H，H-4)，3.53(dd，JH6，H5＝3.20Hz，JH6，H1′＝6.42Hz，1H，H-6)，4.2-4.4(m，H-5和H-1′重叠)，4.40(s，3H，吡啶鎓的CH3)，7.79(～d，J＝7.8Hz，1H，吡啶鎓的H-3)，7.92(m，1H，H-5)，8.44(m，1H，吡啶鎓的H-4)和8.78ppm(d，J＝5.5Hz，1H，吡啶鎓的H-6). 实施例11 (4R，5S，6S)-4-(2″-二甲氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(实施例2)(0.187g，0.51mmol)在冷水(3ml)中的溶液用CH3CN(2ml)稀释，然后在0-5℃下用37%甲醛水溶液(0.21ml)处理。溶液的pH值(pH计)为7.2。然后同时一次加入氰基硼氢化钠(0.058g，0.93mmol)(pH8.5-9.0)，接着在2分钟后加入冰乙酸(3滴，pH5.2-5.5)。将所得的均相混合物在0-5℃下搅拌30分钟。然后加入20ml 0.1M pH6.0磷酸盐缓冲液，减压下(＜15℃)除去乙腈。残留的水相在反相硅胶(μ-Bondapak C18，2.5×10cm)上用0-10%乙腈水溶液为洗脱剂进行梯度层析。收集UV活性级分，冷冻干燥，用同样的体系再次层析。得到了白色非晶形固状标题化合物0.117g(5.8%);〔α〕22D-4.0°(c1.0，H2O)。
HPLC纯度88%(μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，流速2ml/分钟，5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液，UV检测器300nm，保留时间9.02分钟。
UV(H2O，pH7.4 磷酸盐 缓冲液)λmax266(7，039)和302nm(7，707); IR(KBr)νmax1762(β-内酰胺的C＝O)和1595cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.30(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.2(m，2H，CH2-4)，2.86(s，6H，N(CH3)2)，3.15(m，3H，H-4和CH2N)，3.32(dd，JH6，H5＝2.91Hz，JH6，H1′＝6.75Hz，1H，H-6)，4.10(ABq，JAB＝14.06Hz，△ν＝25.4Hz，SCH2)，4.1-4.3(m，2H，H-5和CH3CHO重叠)，7.38(m，1H，吡啶的H-3)，7.47(d，J＝7.87Hz，1H，吡啶的H-5)，7.86(m，1H，吡啶的H-4)和8.47ppm(d，J＝5.0Hz，1H，吡啶的H-2). 实施例12 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.6-(叔丁基二甲基硅氧基)己酸叔丁基二甲基硅基酯
如P.A.Aristoff等人在J.Org.Chem.，48，5341(1983)中所述的那样，对ε-己内酯(20.6g，0.18mol)进行皂化，得到30.0g白色固状的钠盐1H-NMR(200MHz，D2O)δ1.2-1.7(m，6H)，2.19(t，J＝7.32Hz，2H，CH2CO2Na和3.61ppm(t，J＝6.51Hz，2H，CH2OH)。
将所得盐粗品悬于N，N-二甲基甲酰胺(250ml)中，冷却至0-5℃，用叔丁基二甲基硅基氯(81.6g，0.54mol)处理，然后滴加三乙胺(32.6ml，0.23mol)。在22℃6小时后，滤出形成的固体，用石油醚(bp20-60℃)洗涤。用另外的石油醚(500ml)稀释后，将滤液用饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂后，减压下蒸馏残留物，得到60.8g(93%)透明油状的标题酯bp＝106-107℃/0.015托。
IR(NaCl，压片)νmax1722cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.04和0.26(2s，2 x 6H，SiCH3)，0.88和0.92(2s，2 x 9H，叔丁基)，1.2-1.7ppm(m，6H，CH2-3，4和5). B.6-(叔丁基二甲基硅氧基)己酸
将步骤A制得的甲硅烷基酯(82.0g，0.227mol)在四氢呋喃(800ml)和水(800ml)的混合物中的溶液在22℃下用草酸(8.2g，0.09mol)处理，搅拌2小时。然后将反应混合物用EtOAc(1l)稀释，用水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到72g油状物，为标题酸与二硅氧烷的混合物。无需纯化将该产物用于下一步反应中。
IR(NaCl，压片)νmax1715cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.41(s，SiCH3)，0.88(s，Si-叔丁基)，1.3-1.8(m，CH2-3，4和5)，2.3-2.4(m，CH2CO2H)和3.6-3.7ppm(m，CH2OSi). C.6-(叔丁基二甲基硅氧基)-(吡啶-2-基)甲硫基-己酸酯
在0-5℃下，将步骤B的6-(叔丁基二甲基硅氧基)己酸粗品(～0.227mol)在无水CH2Cl2(500ml)中的溶液用2-吡啶甲基硫醇(28.4g，0.227mol)、1-羟基苯并三唑水合物(34.8g，0.227mol)和1，3-二环己基碳化二亚胺(46.9g，0.227mol)处理。在22℃16小时后，滤出形成的固体，用EtOAc洗涤。滤液用水和盐水洗涤，然后干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到油状物，将之在硅胶(9×10cm)上层析，用甲苯和EtOAc的95∶5混合物洗脱，得到40.0g(50%)透明油状的标题硫酯。
IR(NaCl，压片)νmax1695cm-1(硫酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.28(s，6H，SiCH3)，0.88(s，9H，t-Bu)，1.3-1.8(m，6H，CH2-3，4和5)，2.58(t，J＝7.5Hz，2H，CH2-2)，3.57(t，J＝6.2Hz，2H，CH2-6)，4.24(s，2H，吡啶甲基的CH2)，7.15(m，1H，吡啶的H-5)，7.33(d，J＝7.8Hz，1H，吡啶的H-3)，7.62(m，1H，吡啶的H-4)和8.52ppm(d，J＝8.5Hz，1H，吡啶的H-6) D.6-(叔丁基二甲基硅氧基)-1-(吡啶-2-基)甲硫基己酸酯的O-叔丁基二甲基硅基烯醇醚
在0-5℃下，将6-(叔丁基二甲基硅氧基)-1-(吡啶-2-基)甲硫基己酸酯(40.0g，0.113mol)在无水CH2Cl2(400ml)中的溶液用三乙胺(32ml，0.23mol)处理，接着滴加三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯(40ml，0.174mol)。然后将反应混合物在22℃搅拌3小时。用石油醚(bp30-60℃，1l)稀释后，有机相用水洗涤，干燥(MgSO4)，减压蒸发。残留的硬油状物(53.0g)立即直接用于下一步的偶联。
1H NMR(200MHz，CDCl3)表明为E和Z异构体的1∶1混合物;δ3.95和4.03(2 x s，SCH2)，4.85(t，J＝7.25Hz，C＝CH)和5.0ppm(t，J＝7.54Hz，C＝CH). E.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-5″-叔丁基二甲基硅氧基戊基〕氮杂环丁烷-2-酮
在0-5℃下向新熔融的ZnCl2(15.4g，0.113mol)在无水CH2Cl2(200ml)中的悬浮液中加入(3S，4R)-4-乙酰氧基-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮(16.25g，0.056mol)。然后滴加步骤D中制得的甲硅烷基烯醇醚粗品(0.113mol)在无水CH2Cl2(200ml)中的溶液(～15分钟)，所得混合物在0-5℃下搅拌18小时。将反应混合物用EtOAc稀释，用饱和氯化铵水溶液、饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到暗色残留物，在硅胶(15×11cm)上用甲苯和EtOAc的1∶1混合物洗脱层析后，得到23g(70%)胶状标题化合物，将该产物照原样用于下一步中。1H-NMR表明，β与α异构体的比率为9∶1。将等份试样用己烷结晶后，得到白色片状的标题化合物的β异构体纯品;m.p.＝82-83℃;〔α〕22D-9.0°(c1.0，CHCl3)。
UV(EtOH)λmax238(5，080)和264nm(4，600); IR(KBr)νmax1770(β-内酰胺的C＝O)和1682cm-1(硫酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.02和0.04(2 x s，2 x 6H，SiCH3)，0.84和0.87(2 x s，2 x 9H，Si 叔丁基)，0.97(d，J＝6.31Hz，3H，CH3CHO)，1.2-2.0(m，6H，戊基的CH2-2，3，4)，2.8(m，1H，戊基的H-1)，3.03(m，1H，H-6)，3.56(t，J＝5.9Hz，2H，戊基的CH2-5)，3.80(dd，JH4，H3＝2.05Hz，JH4，H＝7.08Hz，1H，H-4)，4.14(m，1H，CH3CHO)，4.26(ABq，JAB＝14.0Hz，△ν＝7.3Hz，2H，SCH2)，5.88(宽s，1H，NH)，7.18(m，1H，吡啶的H-5)，7.33(d，J＝7.8Hz，1H，吡啶的H-3)，7.64(m，1H，吡啶的H-4)，和8.52ppm(d，J＝4.8Hz，1H，吡啶的H-6). 分析计算值 C29H51N2O4SSi2 C，60.06;H，8.86;N，4.83;S，5.53; 实测值 C，60.30;H，8.82;N，4.72;S，5.67. F.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-5″-叔丁基二甲基硅氧基戊基〕氮杂环丁烷-2-酮
在0-5℃下，将(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-5″-叔丁基二甲基硅氧基戊基〕氮杂环丁烷-2-酮(23.0g，39.7mmol，β与α异构体的大约9∶1混合物)在THF(200ml)中的溶液用30%H2O2(7.0ml，81.2mmol)处理，接着用80ml(80.0mmol)1M氢氧化钠滴加处理。在22℃2小时后，将反应混合物用EtOAc(500ml)稀释，用1N HCl(100ml)酸化。有机相用1N亚硫酸氢钠，(100ml)和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到固体，经EtOAc-己烷类重结晶，得到12.4g(66%)白色固状标题化合物m.p.＝136-138℃;〔α〕22D-3.6°(c1.0，CHCl3)。
IR(KBr)νmax1760(sh)，1715(酸的C＝O)和1690cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.04，0.05和0.06(3 x s，6H，3H和3H，SiCH3)，0.86和0.88(2 x s，2 x 9H，siτ-Bu)，1.16(d，J＝6.28Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.8(m，6H，戊基的CH2-2，3和4)，2.6(m，1H，戊基的H-1)，3.13(m，1H，H-3)，3.60(t，J＝5.82Hz，2H，戊基的CH2-5)，3.86(dd，JH4，H3＝1.92Hz，JH4，H＝6.46Hz，1H，H-4)，4.20(dq，JH1′，CH3＝6.28Hz，JH1，H3＝3.86Hz，1H，CH3CHO)，和6.32ppm(宽 s，1H，NH). 分析计算值 C23H47NO5Si2; C，58.31;H，10.00;N，2.96; 实测值 C，58.18;H，10.18;N，2.91. G.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(4-叔丁基二甲基硅氧基丁基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮
在22℃下，将(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-5″-叔丁基二甲基硅氧基戊基〕氮杂环丁烷-2-酮(4.70g，9.92mmol)在无水甲苯(125ml)中的悬浮液用1，1-羰基二咪唑(1.80g，11.1mmol)处理。5小时后，减压下蒸发溶剂，残留物溶于无水苯(15ml)中。将该溶液加到丙二酸单烯丙基酯镁盐(4.7g，15.3mmol)在无水苯(100ml)中的溶液中，将所得混合物在80℃下搅拌18小时。然后将反应混合物用EtOAc稀释，用冷的1N HCl、饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到残留物，在硅胶(6.5×11cm)上用甲苯和EtOAc的混合物(8∶2)洗脱后，得到3.48g(63%)白色固状的标题化合物。1H-NMR表明，该产物为乙酰乙酸酯的酮和烯醇形式的1∶1混合物。在-20℃下用石油醚(30-60℃)对固体物重结晶后，得到一些白色针状的产物的烯醇形式纯品mp＝72-73℃;〔α〕22D0°(c 1.0，CHCl3). UV(EtOH)λmax248nm(11，090); IR(KBr)νmax1761(β-内酰胺的C＝O)，1718，1650和1625cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.03和0.05(2 x s，2 x 6H，SiCH3)，0.86和0.88(2 x s，2 x 9H，Sit-Bu)，1.10(d，J＝6.29Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.19(m，1H，氧代丙基的H-1)，2.90(m，1H，H-3)，3.59(t，J＝5.96Hz，丁基的CH2-4)，3.81(dd，JH4，H3＝2.03Hz，JH4，H1＝7.41Hz，1H，H-4)，4.18(dq，JH，CH3＝6.29Hz，JH，H3＝3.67Hz，CH3CHO)，4.63(m，2H，烯丙基的CH2)，5.06(s，1H，氧代丙基烯醇形式的H-3)，5.2-5.4(m，2H，烯丙基的CH)和5.8-6.1ppm(m，2H，烯丙基的CH和NH). 分析计算值 C28H53NO6Si2 C，60.50;H，9.61;N，2.52; 实测值 C，60.62;H，9.64;N，2.45. H.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-4-〔(1″R)-1″-(4-叔丁基二甲基硅氧基丁基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮
在22℃下，将(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-4-〔(1″R)-1″-(4-叔丁基二甲基硅氧基丁基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(3.4g，6.12mmol)在乙腈(50ml)中的溶液用对甲苯磺酰基叠氮(6.9mmol，2.3ml 3M CH3CN溶液)和三乙胺(0.85ml，6.1mmol)处理。1.5小时后，将反应混合物用EtOAc(200ml)稀释，用水、饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到残留物，将之用甲苯和EtOAc的混合物(9∶1，～30ml)研制。滤出晶状对甲苯磺酰胺，滤液在硅胶(5×11cm)上层析，用甲苯和EtOAc的9∶1混合物洗脱，得到3.56g(100%)透明油状的标题化合物。
IR(NaCl，压片)νmax2140(N2)，1760(β-内酰胺的C＝O)，1720(酯的C＝O)和1650cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.03和0.05(2 x s，2 x 6H，SiCH3)，0.9(s，18H，Si t-Bu)，1.16(d，J＝6.29Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.04(m，1H，H-3)，3.57(t，J＝6.2Hz，1H，丁基的CH2-4)，3.85(dd，JH4，H3＝2.11Hz，JH4，H＝5.48Hz，1H，H-4)，4.05(m，1H，氧代丙基的H-1)，4.17(dq，JH，CH3＝6.29Hz，JH2，H3＝3.68Hz，1H，CH3CHO)，4.7(m，2H，烯丙基的CH2)，5.3-5.5(m，2H，烯丙基的CH)，和5.8-6.1ppm(m，2H，NH和烯丙基的CH). I.(4R，5R，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯
在氮气氛下，将(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(4-叔丁基二甲基硅氧基丁基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(3.50g，6.0mmol)在无水苯(350ml)中的溶液用辛酸铑(Ⅱ)(0.14g)处理，加热回流45分钟。蒸发溶剂，得到油状双环酮粗品，用于下一步反应。
IR(NaCl，压片)νmax1770(β-内酰胺的C＝O)和1745cm-1(酮酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.03，0.08和0.09(3 x s，6H，3H和3H，SiCH3)，0.86(s，18H，SitBu)，1.1-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，1.28(d，J＝6.16Hz，3H，CH3CHO)，2.64(m，1H，H-4)，3.22 dd，JH6，H5＝2.36Hz，JH6，H1′＝5.54Hz，1H，H-6)，3.6(m，2H，CH2OSi)，4.24(dd，JH5，H6＝2.36Hz，JH5，H4＝8.03Hz，1H，H-5)，4.30(m，1H，CH3CHO)，4.61(s，1H，H-2)，4.64(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.4和5.8-6.0ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). J.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在0-5℃和氮气氛下，用5分钟时间向(4R，5R，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(6.0mmol)在无水CH3CN(35ml)中的溶液中同时加入氯磷酸二苯基酯(1.4ml，6.8mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.2ml，6.9mmol)。然后加入4-N，N-二甲基氨基吡啶(～3mg)，将所得混合物在同样的温度下搅拌1小时。加入2-吡啶甲基硫醇(1.5g，12.0mmol)和N，N-二异丙基乙胺后，将混合物在0-5℃下搅拌16小时。然后将反应混合物用EtOAc稀释，用饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到油状物，在硅胶(5×10cm)上用甲苯和EtOAc的9∶1混合物洗脱层析后，得到2.95g(74%)油状标题化合物。
IR(NaCl压片)νmax1775(β-内酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.04，0.05和0.06(3 x s，6H，3H和3H，SiCH3)，0.87和0.88(2 x s，2 x 9H，Sit-Bu)，1.2-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，1.26(d，J＝6.13Hz，3H，CH3CHO)，3.12(dd，JH6，H5＝2.48Hz，JH6，H1′＝6.68Hz，1H，H-6)，3.40(m，1H，H-4)，3.59(m，2H，丁基的CH2-4)，4.03(dd，JH5，H6＝2.48Hz，JH5，H4＝9.17Hz，1H，H-5)，4.13(ABq，JAB＝14.3Hz，△ν＝30.4Hz，2H，SCH2)，4.20(m，1H，CH3CHO)，4.72(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.8-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，7.20(m，1H，吡啶的H-5)，7.4(d，J＝7.9Hz，1H，吡啶的H-3)，7.67(m，1H，吡啶的H-4)和8.5ppm(m，1H，吡啶的H-6). K.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(4″-羟基丁基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在-10℃和氮气氛下，将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(2.95g，4.46mmol)在无水THF(70ml)中的溶液用冰乙酸(1.6ml，28.0mmol)处理，然后用13.4ml 1.0M的氟化四丁铵四氢呋喃溶液处理。将所得混合物在0℃下搅拌17小时后，用EtOAc稀释，用冷的饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到油状物，在硅胶(6×8cm)上用50→100%EtOAc甲苯溶液梯度洗脱，得到1.64g(67%)的透明油状标题化合物。
IR(NaCl，压片)νmax1775(β-内酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.06和0.07(2s，2 x 3H，SiCH3)，0.87(s，9H，Si t-Bu)，1.28(d，J＝6.08Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.14(dd，JH6，H5＝2.54Hz，JH6，H1′＝7.19Hz，1H，H-6)，3.37(m，1H，H-4)3.65(m，2H，丁基的CH2-4)，4.02(dd，JH5，H6＝2.54Hz，JH5，H4＝9.37Hz，1H，H-5)，4.14(ABq，JAB＝13.8Hz，Δν＝33.2Hz，2H，SCH2)，4.2(m，1H，CH3CHO)，4.72(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(2xm，2H和1H，烯丙基的CH)，7.2(m，1H，吡啶的H-5)，7.4(d，J＝7.9Hz，1H，吡啶的H-3)，7.68(m，1H，吡啶的H-4)和8.50ppm(1H，吡啶的H-6). L.(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在-20℃和氮气氛下，将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基〕-4-(4″-羟基丁基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.64g，3.0mmol)在无水THF(250ml)中的溶液用三苯膦(1.26g，4.8mmol)和8.5ml(5.1mmol)0.6M叠氮酸甲苯溶液处理。然后用5分钟时间滴加偶氮二甲酸二乙酯(0.80ml，5.08mmol)。在-20℃下30分钟后，加入EtOAc和饱和NaHCO3水溶液使反应混合物骤冷。有机相用盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压蒸发溶剂，得到油状物，用甲苯(～25ml)研制。滤出肼二羧酸二乙酯结晶物，按同样的方法用乙醚处理滤液，使三苯膦氧化物结晶。最后将残留物在硅胶(5×9cm)上用甲苯和EtOAc的8∶2混合物为洗脱剂层析，蒸发UV活性级分，得到1.60g(93%)透明油状的标题化合物。
IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)，1775(β-内酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.06和0.07(2 x s，2 x 3H，SiCH3)，0.88(s，9H，Si t-Bu)，1.29(d，J＝6.07Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.10(dd，JH6，H5＝2.55Hz，JH6，H1′＝7.20Hz，1H，H-6)，3.29(t，J＝6.2Hz，2H，CH2N3)，3.42(m，1H，H-4)，4.02(dd，JH5，H6＝2.55Hz，JH5，H4＝9.36Hz，1H，H-5)，4.13(ABq，JAB＝14.0Hz，Δν＝31.9Hz，2H，SCH2)，4.19(m，1H，与SCH2重叠，CH3CHO)，4.72(m，2H，烯丙基的SCH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(2 x m，2H，和1H，烯丙基的CH)，7.21(m，1H，吡啶的H-5)，7.41(d，J＝7.8Hz，1H，吡啶的H-3)，7.69(m，1H，吡啶的H-4)和8.50ppm(m，1H，吡啶的H-6). M.(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在5℃下，将(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.60g，2.80mmol)在无水THF(40ml)中的溶液用乙酸(1.0ml，17.5mmol)处理，然后用8.4ml(8.4mmol)1.0M氟化四丁铵四氢呋喃溶液处理。在5℃112小时后，将反应混合物用EtOAc稀释，用饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到油状物，在硅胶(4×11cm)上用甲苯和EtOAc的1∶1混合物洗脱，得到0.57g(36%)回收原料，然后用EtOAc洗脱层析，得到0.76g(59%，基于回收原料计算为92%)的油状标题化合物。
IR(NaCl，压片)νmax2100(N2)，1772(β-内酰胺的C＝O)和1708cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.38(d，J＝6.28Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，和2和3)，1.84(d，J＝5.2Hz，1H，OH)，3.15(dd，JH6，H5＝2.64Hz JH6，H1′＝7.28Hz，1H，H-6)，3.31(t，J＝6.2Hz，2H，CH2N3)，3.48(m，1H，H-4)，4.13(dd，JH5，H6＝2.64Hz，JH5，H4＝9.43Hz，1H，H-5)，4.11(ABq，JAB＝14.16Hz，Δν＝33.3Hz，2H，SCH2)，4.2(m，1H，CH3CHO)，4.74(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(m，2H，烯丙基的CH)，7.2(m，1H，吡啶的H-5)，7.40(d，J＝7.9Hz，1H，H-吡啶的H-3)，7.67(m，1H，吡啶的H-4)和8.50ppm(m，1H，吡啶的H-6). N.(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃下，将(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.76g，1.66mmol)在无水CH2Cl2中的溶液用四(三苯膦)钯〔O〕(0.14g)和3.6ml(1.8mmol)0.5M2-乙基己酸钾的EtOAc溶液处理。30分钟后，将反应混合物用乙醚(150ml)稀释，用75ml 0.05M pH7.0磷酸盐缓冲液提取三次。合并水提取液，用75ml 1M NaH2PO4稀释(结果pH5.8)，然后在45psi和0-5℃下用30%Pd/硅藻土(0.8g)氢化1.5小时。滤出催化剂，滤液减压(＜15℃)浓缩至大约50ml。残留物在反相硅胶(μ-Bondapak C18，5×9cm)上用0-10%乙腈水溶液梯度洗脱进行层析，冷冻干燥后，先得到0.125g(17%)的白色粉状的(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(4″-羟基丁基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钾。
终级分冷冻干燥后，得到0.273g(42%)的白色粉状的标题化合物。1H-NMR和HPLC表明，该产物含有7%的上述羟基丁基副产物。将一部分产物(0.175g)再次层析纯化，得到0.152g(87%回收率)纯标题化合物〔α〕D0°(c1.0，H2O)。
HPLC纯度94%(μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，洗脱剂5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液，流速1.5ml/分，UV检测器306nm，保留时间8.92分钟。
UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax266(6，490)和306nm(9，377); IR(KBr)νmax1758(β-内酰胺的C＝O)和1590cm-1(羧基酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.29(d，J＝6.36Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.97(t，J＝7.6Hz，2H，CH2NH2)，3.16(m，1H，H-4)，3.29(dd，JH6，H5＝2.52Hz，JH6，H1′-6.35Hz，1H，H-6)，4.0-4.3(m，4H，H-5，CH3CHN和SCH2重叠)，7.37(m，1H，吡啶的H-5)，7.52(d，J＝7.9Hz，1H，吡啶的H-3)，7.86(m，1H，吡啶的H-4)，和8.47ppm(m，1H，吡啶的H-6). 实施例13 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(4″-羟基丁基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钾
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(4″-羟基丁基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在-10℃和氮气氛下，将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(实施例12步骤J制得)(0.67g，1.01mmol)在无水四氢呋喃(15ml)中的溶液用乙酸(0.7ml，12.2mmol)处理，然后用6.0ml(6.0mmol)的1.0M氟化四丁铵在四氢呋喃中的溶液处理。在0-5℃下140小时后，将反应混合物用EtOAc稀释，用饱和NaHCO3和盐水洗涤，然后干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到油状物，在硅胶(3×7cm)上进行层析。先用CH3CN的EtOAc溶液进行梯度洗脱，得到0.17g(30%)的单去保护的(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(4″-羟基丁基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯，为一油状物，与实施例12步骤K的化合物相同。然后用乙腈洗脱得到了0.20g(45%)的油状标题化合物。
IR(NaCl，压片)νmax3400(OH)，1770(β-内酰胺C＝O)和1705cm-1(羧酸酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.37(d，J＝6.26Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.21(dd，JH6，H5＝2.65Hz，JH6，H1′＝8.09Hz，1H，H-6)，3.44(m，1H，H-4)3.68(～t，J＝5.0，2H，CH2OH)，4.1-4.2(m，与SCH2重叠 2H，H-5和CH3CHO)，4.14(ABq，JAB＝14.08Hz，Δν＝35.7Hz，2H，SCH2)，4.74(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，7.21(m，1H，吡啶的H-5)，7.42(d，J＝7.8Hz，1H，吡啶的H-3)，7.69(m，1H，吡啶的H-4)和8.5ppm(m，1H，吡啶的H-6). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(4″-羟基丁基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钾
在22℃和氮气氛下，将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(4″-羟基丁基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.20g，0.46mmol)在无水二氯甲烷(10ml)中的溶液用三苯膦(0.020g)、四(三苯膦)钯〔O〕〔0.020g〕和1.0ml(0.5mmol)的0.5M2-乙基己酸钾乙酸乙酯溶液处理。20分钟后，将反应混合物用水(3×10ml)提取，合并的水提取液保持在减压下以除去痕量的有机溶剂。在反相硅胶柱上层析(μ-Bondapak C-18，3.5×6.5cm，0-5%CH3CN水溶液洗脱)，冷冻干燥后，得到0.151g(75%)非晶形固状的标题化合物，〔α〕22D-4.1°(c1.0，H2O)。
HPLC纯度99%，μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速2ml/分，UV检测器304nm，保留时间10.0分钟。
UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax266(7，243)和306nm(10，819); IR(KBr)νmax1750(β-内酰胺的C＝O)和1590cm-1(羧酸酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.28(d，J＝6.33Hz，3H，CH3CHO)，1.1-1.7(m，6H，CH2CH2CH2CH2OH)3.13(m，1H，H-4)3.32(dd，JH6，H5＝2.50Hz，JH6，H1′＝5.93Hz，1H，H-6)，3.56(t，J＝6.3Hz，CH2OH)，4.14(ABq，JAB＝14.5Hz，Δν＝24.6Hz，2H，SCH2)，4.0-4.3(m与SCH2重叠，2H，H-5和CH3CHO)，7.37(m，1H，吡啶的H-5)，7.52(d，J＝7.9Hz，1H，吡啶的H-3)，7.86(m，1H，吡啶的H-4)和8.47ppm(d，J＝4.9Hz，1H，吡啶的H-6). 实施例14 (4R，5S，6S)-4-〔4″-(N-亚胺甲基)氨基丁基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0℃下，将(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.098g，0.25mmol)在25ml 0.04M pH7.0磷酸盐缓冲液中的溶液用0.1M氢氧化钠调至pH8.5。然后分小批(～10分钟)加入甲亚胺酸苄酯盐酸盐(0.43g，2.5mmol)，同时用0.1M NaOH保持pH在8.3附近。在0-5℃下15分钟后，用0.1M HCl将溶液的pH值调至7.0，用EtOAc洗涤水相。然后将水相保持在减压下以除去痕量的有机溶剂，再在反相硅胶上层析(μ-Bondapak C-18，3.5×6.5cm，用0-5%乙腈水溶液进行梯度洗脱)。冷冻干燥UV活性级分，得到0.076g(72%)白色非晶形粉状标题化合物，〔α〕22D+2.4°(c1.0，H2O)。
HPLC纯度97.9%，μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，洗脱剂10%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液，流速1ml/分，UV检测器306nm，保留时间8.68分钟。
UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax266(6，680)和306nm(8，980); IR(KBr)νmax1758(β-内酰胺的C＝O)，1715和1590(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.28(d，J＝6.31Hz，CH3CHO)，1.2-1.7(m，6H，CH2CH2CH2CH2NH)，3.16(～t，1H，H-4)，3.3(m，3H，H-6和CH2NHCH＝NH 重叠)，4.0-4.3(m，4H，H-5，CH3CHO和SCH2重叠)，7.37(m，1H，吡啶的H-5)，7.53(d，J＝7.9Hz，1H，H-吡啶的H-3)，7.79(s，1H，NH-CH＝NH)，7.86(m，1H，吡啶的H-4)和8.47ppm(d，J＝4.4Hz，1H，吡啶的H-6). 实施例15 (4R，5S，6S)-4-〔2″-(N-胍基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
用30%Pd/硅藻土(60mg)为催化剂，在40-50psi氢压下，将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠(120mg，0.28mmol)〔用在实施例6步骤D中所述的一般方法处理实施例7步骤H的化合物得到〕在0.1M pH5.9的磷酸盐缓冲水溶液(8.4ml，0.84mmol)中的溶液和水(8ml)置于帕尔氢化器中振荡90分钟，氢化温度为5℃至15℃(反应终止时的温度)。滤除催化剂，用0.1N NaOH水溶液将水溶液的pH值调至8.5。在5℃(冰浴)下向该溶液中加入氨基亚氨基甲磺酸(360mg，3.0mmol)并加入0.10N NaOH水溶液将pH值保持在8-8.5。将该混合物搅拌30分钟，然后用0.1N HCl水溶液中和至pH7.0。通过C18μBondapak(6g和3g)柱(H2O→15%CH3CN/H2O)两次，得到标题化合物(15mg，13%)。
HPLC纯度100%(304nm，10%CH3CN/KH2PO40.01M，pH7.4)，保留时间7.3分钟。
UV(H2O)λmax266(5830)，306(8250); IR(液体石蜡)νmax3500-3000(OH和NH2)，1755，1590(C＝O)，和1660，1630cm-1(C＝N); 1H NMR(D2O，200 MHz)δ8.47-8.45(1H，m，芳族 -H)，7.9-7.81(1H，m，芳族 -H)，7.54-7.50(1H，bd，J＝7.9Hz，芳族 -H)，7.40-7.34(1H，m，芳族 -H)，4.25-4.16(1H，m，H-1′)，4.22，4.17，4.10，4.03(2H，ABq，J＝14.4Hz，CH2吡啶)，4.06(0.5H，d，J＝2.3Hz，部分 H-5)，3.24(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.3Hz，H-6)，3.2-3.1(2H，m，CH2-N)，3.27-3.1(1H，m，隐藏 H-4)，1.7-1.1(4H，m，CH2CH2)和1.28(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 实施例16 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-甲基氨甲酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-甲基氨甲酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在氩气氛下，向(4R，5S，6S)-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-4-(2″-羟基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.27g，0.52mmol)〔实施例6步骤A中制得〕在CH2Cl2(5ml)中的冷(0℃)溶液中加入异氰酸甲酯(0.31ml，5.23mmol)。在0-5℃将反应混合物搅拌48小时，此时大约10%的起始原料未发生反应。蒸发溶剂，得到泡沫体，在用CH2Cl2填充的硅胶柱(2.5×9cm)上用CH2Cl2/EtOAc(1∶1，梯度洗脱)洗脱进行层析，得到标题化合物(0.26g，87%)。
1H NMR(200MHz，CDCl37.24)δ0.02(s，3H，SiCH3)，0.04(s，3H，SiCH3)，0.82(s，9H，SiC(CH3)3，1.24(d，CH3，JCH3，1′＝6.14Hz)，1.69-1.85(m，1H，CH2)，2.05-2.18(m，1H，CH2)，2.79(d，NHCH3，J＝4.81Hz)，3.16(dd，H-6，J5，6＝2.33Hz，J6，1′＝6.74Hz)，3.47(t，H-4，J＝9.69Hz)，3.84-4.39(m，6H，CH2O，CHOH，H-5，SCH2)，4.57-4.83(m，OCH2，烯丙基)，5.18-5.46(m，＝CH2，烯丙基)，5.8-6.02(m，CH＝，烯丙基)，7.19(m，H-5，py，J4，5＝7.72Hz，J5，6＝4.77Hz)，7.48(d，H-3，py，J3，4＝7.82Hz)，7.69(dt，H-4，py，J4，6＝1.64Hz)，8.45(dd，H-6，py). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-甲基氨甲酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-4-(2″-甲基氨甲酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.25g，0.43mmol)在无水THF(5ml)中的冷(0℃)溶液用乙酸(0.15ml，2.6mmol)处理，然后用1M氟化四丁铵在THF中的溶液(1.3ml，1.3mmol)处理。将混合物在0℃-5℃搅拌120小时，此时大约一半起始原料未发生反应。将混合物在0℃下用1M NaHCO3溶液(2.6ml，2.6mmol)中和，用EtOAc(3×50ml)提取。合并有机提取液，依次用冷的1M NaHCO3溶液、水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，蒸发溶剂，得到带浆固体，在用CH2Cl2填充的硅胶(2.5×9cm)上层析，先用CH2Cl2和EtOAc的混合物洗脱(梯度洗脱)，然后用EtOAc洗脱，最后用CH3CN和CH2Cl2的混合物洗脱(1∶1，梯度洗脱)，得到白色粉状的标题化合物(0.1g，50%)。
1H NMR(200MHz，CDCl37.24)δ1.37(d，CH3，JCH3，1′＝6.25Hz)，1.66-1.84(m，1H，CH2)，2.11-2.27(m，1H，CH2)，2.78(d，NHCH3，J＝4.95Hz)，3.32(dd，H-6，J5，6＝2.52Hz，J6，1′＝8.47Hz)，3.45(t，H-4，J＝10.26Hz)，3.93-4.31(m，6H，CH2O，CHOH，H-5，SCH2)，4.59-4.87(m，OCH2，烯丙基)，5.19-5.48(m，＝CH2，烯丙基)，5.84-6.04(m，CH＝，烯丙基)，7.19(m，H-5，py，J4，5＝7.71Hz，J5，6＝5.31Hz)，7.41(d，H-3，py，J3，4＝7.85Hz)，7.66(dt，H-4，py，J4，6＝1.77Hz)，8.45(m，H-6，py，J3，6＝0.96Hz). C.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-甲基氨甲酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-甲基氨甲酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.094g，0.204mmol)在CH2Cl2(10ml)中的冷(0℃)溶液用Pd〔Ph3P〕4(0.03g，0.026mmol)处理，接着用0.5M的2-乙基己酸钠乙酸乙酯溶液(0.45ml，0.224mmol)处理。将混合物在0℃搅拌2小时，然后用水(3×15ml)提取。合并的水相通过μ-Bondapak C-18反相硅胶柱(2.5×9cm)，用水和CH3CN的混合物(95∶5，梯度洗脱)洗脱标题化合物，冷冻干燥后，得到白色蓬松的固体(0.062g，69%)。
HPLC纯度99.7%，UV检测设置在304nm处，μ-Bondapak C-18(4mm×30cm)，8%CH3CN在pH7.4磷酸盐缓冲液中的溶液，流速1ml/分，保留时间9.04分钟。
UV(pH7.4)λmax304(8778). IR(液体石蜡)νmax1750cm-1(β-内酰胺的C＝O)，1710cm-1(NHCO). 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.305(d，CH3，JCH3，1′＝6.38Hz)，1.6-1.73(m，1H，CH2)，2.00-2.07(m，1H，CH2)，2.71(s，NCH3)，3.23(t，H-4，J＝9.7Hz)，3.48(dd，H-6，J5，6＝2.61Hz，J6，1′＝5.84Hz)，3.93-4.31(m，6H，CH2O，CHOH，H-5，SCH2)，7.39(dd，H-5，py，J5，6＝4.84Hz，J4，5＝7.74Hz)，7.52(d，H-3，py，J3，4＝7.84Hz)，7.89(dt，H-4，py，J4，6＝1.72Hz)，8.48(d，H-6，py). 实施例17 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在0-5℃和氮气氛下，用5分钟时间，向(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基)-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(6.87mmol，按照实施例12步骤Ⅰ从4.0g，6.87mmol重氮基前体制得)在无水CH3CN(40ml)中的溶液中同时加入氯磷酸二苯基酯(1.56ml，7.52mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.31ml，7.52mmol)。然后加入少许4-N，N-二甲基氨基吡啶晶粒，并将混合物搅拌1小时。然后将该溶液冷却至-20℃，先用在乙腈(5ml)中的β-巯基丙腈〔L.Bauer和T.L.Welsh，J.Org.Chem.，26，1443(1961)〕(1.23g，14.1mmol)处理，再用N，N-二异丙基乙胺(1.31ml，7.52mmol)处理。使溶液的温度升至0-5℃，将混合物搅拌2小时。将反应混合物用EtOAc稀释，用饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到油状物，在硅胶(5×9cm)上层析，用0-5%的乙酸乙酯甲苯溶液梯度洗脱，得到3.42g(80%)的油状标题化合物。
IR(NaCl，压片)νmax2260(CN)，1778(β-内酰胺的C＝O)和1715cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.04和0.08(2 x s，2 x6H，SiCH3)，0.88和0.89(2 x s，2 x 9H，Si tert-Bu)1.27(d，J＝6.14Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.5-3.2(m，6H，SCH2CH2CN，H-4和H-6重叠)，3.61(m，2H，CH2OSi)，4.1-4.3(m，2H，H-5和CH3CHO重叠)，4.7(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(4″-羟基丁基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在0-5℃下，将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(3.42g，5.49mmol)在无水THF(75ml)中的溶液先用乙酸(1.9ml，33.2mmol)处理，接着用16.5ml(16.5mmol)的1.0M氟化四丁铵四氢呋喃溶液处理。在4℃下24小时后，将反应混合物用EtOAc稀释，用饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到油状物，在硅胶(5×11cm)上层析，用甲苯和EtOAc的混合物(1∶1→EtOAc)洗脱，得到1.67g(68%)油状标题产物。
IR(NaCl，压片)νmax3500(OH)，2250(CN)，1775(β-内酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.08(s，6H，SiCH3)，0.88(s，9H，Sit-Bu)，1.29(d，J＝6.12Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.68(m，2H，CH2CN)，2.7-3.2(m，3H，H-4和SCH2)，3.21(dd，JH6，H5＝2.62Hz，JH6，H1＝6.78Hz，1H，H-6)，3.66(m，2H，CH2OH)，4.2(m，2H，H-5和CH3CHO重叠)，4.74(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). C.(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在-20℃下，将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(4″-羟基丁基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.67g，3.28mmol)在无水THF(250ml)中的溶液用三苯膦(1.38g，5.26mmol)和7.6ml(5.7mmol)0.75M的叠氮酸甲苯溶液处理。然后用5分钟时间滴加偶氮二甲酸二乙酯(0.90ml，5.7mmol)，并将所得混合物在同样的温度下搅拌30分钟。加入EtOAc和饱和碳酸氢钠水溶液使反应混合物骤冷。有机相用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，减压浓缩。残留油状物用甲苯(25ml)研制，过滤除去肼二羧酸二乙酯结晶。用乙醚进行类似的处理，除去三苯膦氧化物，滤液在硅胶(4.5×11cm)上层析，用甲苯和EtOAc的混合物(8∶2)洗脱，得到1.40g(80%)的油状标题化合物。
IR(NaCl，压片)νmax2250(CN)，2100(N3)，1765(β-内酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.08(s，6H，SiCH3)，0.89(s，9H，t-Bu)，1.30(d，J＝6.12Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.68(m，2H，CH2CN)，2.9-3.2(m，3H，H-4和SCH2)，3.17(dd，JH6，H5＝2.58Hz，JH6，H1＝6.9Hz，H-6)，3.32(宽 t，J＝6.0Hz，2H，CH2N3)，4.1-4.3(m，2H，H-5和CH3CHO 重叠)，4.74(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). D.(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在0-5℃下，将(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.40g，2.62mmol)在无水THF(40ml)中的溶液用乙酸(1.0ml，17.5mmol)处理，接着用8.4ml(8.4mmol)1.0M的氟化四丁铵四氢呋喃溶液处理。将该溶液在5℃下储存10天。然后将反应混合物用冷的乙酸乙酯稀释，用饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到油状物，在硅胶(4.5×11cm)上用乙酸乙酯的甲苯溶液(1∶1→EtOAc)梯度洗脱层析。
从头馏分中得到0.23g(16%)回收起始原料。从接下来的馏分中得到0.78g(71%)油状标题化合物。
IR(NaCl，压片)νmax3500(OH)，2250(CN)，2100(N3)，1770(β-内酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.40(d，J＝6.26Hz，3H，CH3CHO)，1.4-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，1.83(d，J＝5.1Hz，1H，OH)，2.9-3.3(m，3H，H-4 and SCH2)，3.22(dd，JH6，H5＝2.75Hz，JH6，H1′＝7.37Hz，1H，H-6)，3.34(宽 t，J＝6.0Hz，2H，CH2N3)，4.25(m 与H-5重叠 1H，CH3CHO)，4.28(dd，JH5，H6＝2.75Hz，JH5，H4＝9.58Hz，1H，H-5)，4.77(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). E.(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃和氮气氛下，将(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.78g，1.86mmol)在无水CH2Cl2(50ml)中的溶液用四(三苯膦)钯〔O〕(0.1g)和4.1ml(2.05mmol)的0.5M2-乙基己酸钾乙酸乙酯溶液处理。30分钟后，将反应混合物用乙醚(150ml)稀释，用0.05M pH 7.0磷酸盐缓冲水溶液(3×75ml)提取。合并水相，用1M NaH2PO4将pH调至5.8，减压下除去痕量有机溶剂。在0-5℃和45psi下用30%Pd/硅藻土将水溶液氢化2小时。然后将催化剂过滤到硅藻土垫上，用水洗涤。HPLC(μ-Bondapak C-18，5%CH3CN-H2O pH6.8磷酸盐缓冲液洗脱)表明，得到的是4″-氨基丁基化合物(先洗脱下来)和4-羟基丁基化合物的70∶30混合物。
将该溶液在反相硅胶上快速层析(μ-Bondapak C-18，4×7cm，H2O-CH3CN 5%洗脱)，除去无机盐。将UV活性级分冷冻干燥，在相同的柱上用5%CH3CN-H2O 0.01M pH6.8磷酸盐缓冲液为洗脱剂层析。得到两个主级分，再次在反相硅胶上脱盐。将第一级分冷冻干燥，得到0.33g(50%)白色非晶形粉状的标题4″-氨基丁基化合物。HPLC和1H-NMR表明，该级分纯度为大约90%，含有一些4″-羟基丁基化合物和其它杂质。
第二级分给出0.102g(14%)的白色非晶形粉状的4-羟基丁基化合物，HPLC和1H-NMR表明，纯度为90%，用于实施例18。
将上述4″-氨基丁基化合物在反相柱(μ-Bondapak C-18，条件同上)上精细层析，得到纯的标题化合物〔α〕22D+60.4°(c1.0，H2O)。
HPLC纯度98.5%，μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速1ml/分，UV检测器306nm，保留时间5.25分钟。
UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax300nm(10，267); IR(KBr)νmax2250(CN)，1760(β-内酰胺的C＝O)和1690cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.38Hz，1H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.86(m，2H，CH2CN)，2.9-3.2(m，2H，SCH2)，3.02(t，J＝7.6Hz，2H，CH2NH2)，3.4(m，JH6，H5＝2.66Hz，2H，H-6和H-4重叠)，和4.3ppm(m，2H，H-5和CH3CHO重叠). 实施例18 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(4″-羟基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钾
通过制备性HPLC(Zorbax ODS，Dupont，21.2mm×25cm，5% CH3CN-H2O pH6.8磷酸钾缓冲液洗脱，UV检测器)层析，然后在μ-Bondapak C-18上脱进，对在实施例17步骤E中通过叠氮基前体氢化制得的含4″-羟基丁基化合物的粗级分(0.102g，90%纯度)进行纯化。冷冻干燥，得到0.045g(45%回收率)的白色非晶形粉状标题化合物。
HPLC纯度99%，μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，10% CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速0.6ml/分，UV检测器306nm，保留时间6.93分钟。
UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax302nm(7，364); IR(KBr)νmax2250(CN)，1750(β-内酰胺的C＝O)和1600cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.41Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.86(m，2H，CH2CN)，2.8-3.3(m，2H，SCH2)，3.35(m，1H，H-4)，3.43(dd，JH6，H5＝2.59Hz，JH6，H1＝6.0Hz，1H，H-6)，3.62(t，J＝6.3Hz，2H，CH2OH)，和4.3ppm(m，2H，H-5和CH3CHO重叠). 实施例19 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔4″-(N-亚胺甲基)氨基丁基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.113g，0.32mmol)在30ml 0.04M pH7.0磷酸盐缓冲液中的冷(0-5℃)溶液的pH值用0.1M NaOH调至8.5。然后分小批加入甲亚胺酸苄酯盐酸盐(0.54g，3.17mmol)，同时用0.1M NaOH保持pH值在8.0-8.5之间(大约10分钟)。10分钟后，用0.1N HCl将pH值调至7.0，用EtOAc洗涤反应混合物。将水相保持在减压下以除去痕量有机溶剂，然后在反相硅胶(μ-Bondapak C-18，3.5×7cm)上用0-10%乙腈水溶液梯度洗脱进行层析，冷冻干燥后，得到0.106g(86%)白色非晶形粉状的标题化合物〔α〕22D+53.5°(c1.0，H2O)。
HPLC纯度93%，μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，5% CH3CN-H2O pH 7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速1ml/分，UV检测器300nm，保留时间7.74分钟。
UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax300nm(10，481); IR(KBr)νmax2250(CN)，1760(β-内酰胺的C＝O)和1715cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.34(d，J＝6.34Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H;丁基的CH2-1，2和3)，2.8-2.9(m，2H，CH2CN)，2.9-3.3(m，2H，SCH2)，3.3-3.5(m，4H，H-4，H-6和CH2N)，4.3(m，2H，H-5和CH3CHO 重叠)，和7.81ppm(s，1H，CH＝N). 实施例20 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(4″-N，N-二甲基氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃下，将(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.054g，0.15mmol)在水(1ml)中的溶液用乙腈(1ml)稀释，然后用37%甲醛水溶液(0.075ml，0.81mmol)处理，再用氰基硼氢化钠(0.024g，0.38mmol)和1滴乙酸处理。15分钟后，加入0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液使反应混合物骤冷，并于减压下除去有机溶剂。水相在反相硅胶(μ-Bondapak C-18，3.5×6.5cm)上层析，用0-6%乙腈水溶液梯度洗脱，冷冻干燥后，得到0.016g(27%)白色非晶形粉状的标题化合物。
HPLC纯度96%，μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，5% CH3CN-H2O pH 7.0磷酸盐缓冲液洗脱，流速1ml/分钟，UV检测器300nm，保留时间10.9分钟。
UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax300nm(9，907); IR(KBr)νmax2250(弱 CN)，1759(β-内酰胺的C＝O)和1590cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.37Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.87(s，6H，N(CH3)2)，2.87(m 与NCH3重叠，2H，CH2CN)，2.9-3.2(m，2H，SCH2)，3.15(～t 与SCH2重叠，2HCH2N(CH3)2)，3.38(dd，JH6，H5＝2.6Hz，JH6，H1＝6.25Hz，1H，H-6)，3.38(m与H-6重叠，1H，H-4)和4.27ppm(m，2H，H-5和CH3CHO). 实施例21 (4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
A.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-叠氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮
在冰浴冷却下，向从实施例7步骤E得到的(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-叠氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(2.4g，5.0mmol)在EtOH(50ml)中的溶液中加入2N HCl水溶液(7ml)。撤去冰浴，将混合物搅拌20小时。用1M NaHCO3水溶液(15ml)将溶液的pH值调至7，减压下除去乙醇。所得残留物用EtOAc稀释，用1M NaHCO3水溶液(18ml)、水(10ml)和盐水(10ml)洗涤，干燥(MgSO4)。残留物通过闪式硅胶(40g)柱(5，10，20，40，60，80%EtOAc/CH2Cl2)，得到油状标题化合物(1.7g，93%)，该油状物自动结晶。
IR(CH2Cl2)νmax3600，3500(OH)，3400(NH)，2150(N2)，2100(N3)，1765，1715和1650cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.04-5.84(1H，m，乙烯基 -H)，6.01(1H，bs，NH)，5.42-5.29(2H，m，乙烯基 -H)，4.75-4.63(2H，m，CH2乙烯基，4.19-4.01(1H，m，H-1′)，4.02-3.89(1H，m，H-1″)，3.83(1H，dd，J＝6.5Hz，J＝2.1Hz，H-4)，3.31-3.25(2H，m，CH2N3)，3.01(1H，dd，J＝1.9Hz，J＝6.9Hz，H-3)，2.23(1H，d，J＝3.9Hz，OH)，1.98-1.75(1H，m，HCH)，1.73-1.48(3H，m，CH2-HCH)和1.29ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). B.(2R，4R，5R，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯
将(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-叠氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(1.46g，4.00mmol)和Rh(OAc)2(56mg)在苯(140ml)中的溶液加热回流40分钟。减压下除去苯，得到油状标题化合物(1.5g，100%)。
IR(CH2Cl2)νmax3610(OH)，2100(N3)，1770和1745cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ5.96-5.8(1H，m，乙烯基 H)，5.39-5.25(2H，m，乙烯基 H)，4.75-4.64(2H，m，CH2-乙烯基)，4.66(1H，s，H-2)，4.35-4.26(1H，m，H-1′)，4.29(1H，dd，J＝2.2Hz，J＝8.1Hz，H-5)，3.45-3.25(2H，m，CH2N3)，3.29(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝7.7Hz，H-6)，2.8-2.6(1H，m，H-4)，1.9-1.5(4H，m，OH，CH2-CH2)和1.42ppm(3H，t，J＝6.2Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷却下，将(2R，4R，5R，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(1.5g，4.00mmol)在CH3CN(30ml)中的溶液用氯磷酸二苯基酯(0.88ml，4.4mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.76ml，4.4mmol)滴加处理。将混合物搅拌45分钟，依次加入三甲基硅基氯(0.57ml，4.4mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.76ml，4.4mmol)将所得烯醇磷酸酯甲硅烷基化。将混合物搅拌35分钟，然后用2-巯基乙醇(624mg，8.00mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.39ml，8.00mmol)处理保护的烯醇磷酸酯。搅拌混合物，在5℃下放置24小时，然后用冷EtOAc(100ml)稀释，用冷的1N HCl水溶液(1×50ml)、冰冷的水(2×50ml)、冷的1M NaHCO3溶液(1×50ml)、冰冷的水(2×50ml)和盐水(50ml)洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，所得残留物用THF(30ml，用Na/二苯酮蒸馏过)稀释。然后，在-25℃(CH3CN/干冰浴)下，先用AcOH(1.3ml，24mmol)处理，再用1M氟化四丁铵四氢呋喃溶液(12.0ml，12mmol)滴加处理。将混合物搅拌20分钟，然后用冷EtOAc(150ml)稀释，用冰冷的1M NaHCO3水溶液(3×50ml)、冰冷的水(3×50ml)和盐水(50ml)洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂后，将所得残留物通过闪式硅胶(100g)柱(EtOAc-CH2Cl2，10%→100%)，得到半结晶油状的标题化合物(795mg，50%)。
IR(CH2Cl2)νmax3600(OH)，2100(N3)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.04-5.90(1H，m，乙烯基 H)，5.50-5.23(2H，m，乙烯基 -H)，4.82-4.63(2H，m，CH2-乙烯基)，4.27-4.19(1H，m，H-1′)，4.22(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.9-3.75(2H，m，CH2O)，3.42-3.26(2H，m，CH2-N3和H-4)，3.24(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.3Hz，H-6)，3.08-2.8(2H，m，SCH2)，2.3-1.9(1H，bs，OH)，1.95-1.54(4H，m，CH2-CH2)和1.37ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). D.(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
在冰浴冷却下，将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(63mg，0.16mmol)在CH2Cl2(7ml)中的溶液用Pd(PPh3)4(12mg，0.012mmol)和0.5M2-乙基己酸钠乙酸乙酯溶液(0.32ml，0.16mmol)处理。将混合物在5℃下搅拌40分钟，然后用乙醚(30ml)稀释，用冷的pH7.0缓冲液(3×3.5ml)和水(1×3ml)提取。合并水提取液，用乙醚(2×10ml)洗涤，通过μ-Bondapak C-18(15g)反相柱(H2O，1，2，3，4%CH3CN/H2O)，冷冻干燥后，得到标题化合物(30mg，50%)。
HPLC纯度98.6%(5%CH3CN/缓冲液pH7.40.014M)，保留时间8.87分钟; UV(H2O)λmax304(10，770); IR(液体石蜡)νmax3600-3100(OH)，2100(N3)，1750和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.35-4.20(1H，m，H-1′)，4.22(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝9.3Hz，H-5)，3.8-3.7(2H，m，CH2O)，3.45-3.3(4H，CH2N3，H-6和H-1′)，3.11-2.8(2H，m，SCH2)，1.95-1.45(4H，m，CH2CH2)和1.33ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例22 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-叠氮基乙酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-4-(2″-叠氮基乙酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在0℃和氩气氛下，向(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-4-(2″-羟基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.5g，0.96mmol)〔实施例6步骤A中制得〕在CH2Cl2(10ml)中的溶液中先加入吡啶(0.1ml，1.2mmol)，然后加入叠氮基乙酰氯(0.14g，1.2mmol)在CH2Cl2(2ml)中的溶液。将反应混合物在0℃下搅拌30分钟，然后用EtOAc(40ml)稀释，用冷的pH7磷酸盐缓冲液和盐水依次洗涤。干燥(MgSO4)后，蒸发溶剂，得到糖浆状物，在用CH2Cl2填充的硅胶(2.3×11cm)上层析，用CH2Cl2和EtOAc的混合物(8∶2，梯度洗脱)洗脱，得到糖浆状标题化合物(0.423g，73%)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.04(s，3H，SiCH3)，0.05(s，3H，SiCH3)，0.84(s，9H，SiC(CH3)3)，1.28(d，CH3，JCH3，1′＝6.12Hz)，1.70-1.87(m，1H，CH2)，2.16-2.33(m，1H，CH2)，3.16(dd，H-6，J5，6＝2.64Hz，J6.1′＝7.04Hz)，3.67(m，H-4，J＝2.1，8.03，10.63Hz)，3.98(s，CH2N3)3.83-4.43(重叠，6H，CH2O，CHOH，H-5，SCH2)4.57-4.82(m，OCH2烯丙基)，5.18-5.45(m，＝CH2，烯丙基)，5.82-6.01(m，CH＝，烯丙基)，7.17(m，H-5，py，J4，5＝7.68Hz，J5，6＝4.9Hz)，7.38(d，H-3，py，J3，4＝7.83Hz)，7.66(dt，H-4，py，J4，6＝1.8Hz)，8.45(m，H-6，py，J3，6＝0.8Hz). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-叠氮基乙酰氧基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-4-(2″-叠氮基乙酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.423g，0.7mmol)在无水THF(8ml)中的冷(0℃)溶液依次用乙酸(0.24ml，4.22mmol)和1M氟化四丁铵四氢呋喃溶液(2.11ml，2.11mmol)处理。将混合物在0-5℃搅拌120小时，此时，大约25%原料未发生反应。在0℃下用1M NaHCO3溶液(4.3ml，4.22mmol)中和混合物，用EtOAc(3×50ml)提取。合并的有机相依次用冷的1M NaHCO3溶液、水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，蒸发溶剂，得到粘胶状物，在用CH2Cl2填充的硅胶(2.5×12cm)上层析，用CH2Cl2和EtOAc的混合物(3∶7，梯度洗脱)洗脱，得到标题化合物(0.23g，68%)。
1H NMR(200 MHz，CDCl37.24)δ1.38(d，CH3，JCH3，1′＝6.24Hz)，1.71-1.87(m，1H，CH2)，2.26-2.38(m，1H，CH2)，3.24(dd，H-6，J5，6＝2.82Hz，J6，1′＝8.08Hz)，3.7(m，H-4，J＝2.16，9.79Hz)，3.86-4.53(m，8H，CH2O，CH2N3，CHOH，H-5，SCH2)，4.57-4.85(m，OCH2，烯丙基)，5.19-5.45(m，＝CH2，烯丙基)，5.83-6.02(m，CH＝，烯丙基)，7.14-7.21(m，H-5，py，J3，5＝1.03Hz，J4，5＝7.71Hz，J5，6＝4.82Hz)，7.38(d，H-3，py，J3，6＝0.98Hz，J3，4＝7.86Hz)，7.65(dt，H-4，py，J3，4＝7.86Hz，J4，6＝1.81Hz)，8.46(m，H-6，py). C.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-叠氮基乙酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
在0℃和氩气氛下，向(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-叠氮基乙酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.22g，0.46mmol)在CH2Cl2(10ml)中的溶液中依次加入Pd〔Ph3P〕4(0.08g，0.07mmol)和0.5M2-乙基己酸钠乙酸乙酯溶液(1.01ml，0.5mmol)。将混合物在0℃下搅拌2小时，然后用水(3×15ml)提取。合并的水相通过μ-Bondapak C-18反相硅胶(2.5×10cm)柱，用水和CH3CN的混合物(9∶1，梯度洗脱)洗脱，冷冻干燥后，得到白色蓬松固状的标题化合物(0.1g，48%)。
1H NMR(200 MHz，D2O)δ1.31(d，CH3，JCH3，1′＝6.4Hz)，1.65-1.84(m，1H，CH2)，2.03-2.2(m，1H，CH2)，3.28(dt，H-4，J＝2.72，11.33Hz)，3.48(dd，H-6，J5，6＝2.64Hz，J6，1′＝6.03Hz)，4.13(s，2H，CH2N3)，4.05-4.35(m，6H，CH2O，CHOH，H-5，SCH2)，7.39(m，H-5，py，J4，5＝7.73Hz，J5，6＝4.92Hz)，7.51(d，H-3，py，J3，4＝7.83Hz)，7.87(dt，H-4，py，J4，6＝1.75Hz)，8.48(d，H-6，py). 实施例23 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-氨基乙酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0℃和40psi下，用5%Pd/BaSO4(0.04g)将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-叠氮基乙酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠(0.08g，0.17mmol)在0.5M pH7磷酸钠缓冲液中的溶液氢化30分钟。滤出催化剂，用水洗涤。合并的水溶液通过μ-Bondapak C-18反相硅胶(2.5×10cm)柱，用水和CH3CN的混合物(9∶1，梯度洗脱)洗脱化合物。经证实所得的第一种化合物为酯裂解所产生的(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-羟基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠。接着洗脱，冷冻干燥后，得到白色蓬松固状的标题化合物(0.035g，49%)。
HPLC纯度93.1%(实际上＞98%)，UV检测设置在304nm处，μ-Bondapak C-18(4mm×30cm);10%CH3CN的pH7.4磷酸盐缓冲液溶液;流速1ml/分;保留时间5.37分钟; UV(pH7.4)λmax304(8260). IR(液体石蜡)νmax1750cm-1(β-内酰胺的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.29(d，CH3，JCH3，1′＝6.4Hz)，1.69-1.87(m，1H，CH2)，2.06-2.21(m，1H，CH2)，3.27(dt，H-4，J＝2.79，10.83Hz)，3.46(dd，H-6，J5，6＝2.7Hz，J6，1′＝6.33Hz)，3.89(s，2H，CH2NH2)，4.04-4.38(m，6H，CH2O，CHOH，H-5，SCH2)，7.36(m，H-5，py，J4，5＝7.73Hz，J5，6＝5.08Hz)，7.5(d，H-3，py，J3，4＝7.93Hz)，7.85(dt，H-4，py，J4，6＝1.77Hz，8.45(d，H-6 py). 实施例24 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在-15℃下，用5分钟时间，将氯磷酸二苯基酯(1.4ml，6.75mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.2ml，6.9mmol)一起加到(4R，5R，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(6.46mmol，由3.0g(6.46mmol)的实施例2步骤E的重氮基前体制得)在无水CH3CN(50ml)中的溶液中。然后加入少许4-N，N-二甲基氨基吡啶晶粒，在30分钟内将混合物缓慢温热至0-5℃。然后滴加在CH3CN(5ml)中的N，N-二异丙基乙胺(1.4ml，8.0mmol)和3-巯甲基吡啶(1.54g，12.3mmol)。在0-5℃下1.5小时后，加入EtOAc和冷水使反应混合物骤冷。有机相用1M NaHSO3、饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到油状物，在硅胶(5×11cm)上层析，用0-20%乙酸乙酯甲苯溶液梯度洗脱，得到2.13g(60%)的油状标题化合物。
IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)，1775(β-内酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.07和0.08(2 x s，2 x 3H，SiCH3)，0.88(s，9H，Sit-Bu)，1.29(d，J＝6.12Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.2(m，2H，CH2-4)，3.06(dd，JH6，H5＝2.70Hz，JH6，H1＝7.74Hz，1H，H-6)，3.2-3.7(m，H，CH2N3和H-4)，4.05(dd与SCH2重叠，JH5，H6＝2.70Hz，JH5，H4＝9.54Hz，1H，H-5)，4.07(ABq，JAB＝15.6Hz，Δν＝15.2Hz，1H，SCH2)，4.17(m，1H，CH3CHO)，4.74(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.8-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，7.29(m，1H，吡啶的H-5)，7.79(m，1H，吡啶的H-4)，8.54(dd，J＝15.0Hz和J＝4.8Hz，1H，吡啶的H-6)和8.62ppm(d，J＝2.0Hz，1H，吡啶的H-2). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在0-5℃和氮气氛下，将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(2.13g，3.92mmol)在无水THF(60ml)中的溶液用乙酸(1.35ml，23.6mmol)和12.0ml(12.0mmol)的1M氟化四丁铵四氢呋喃溶液处理。在5℃下5天后，将反应混合物用EtOAc稀释，用冷的饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到油状物，在硅胶(4×12cm)上用50-100%的乙酸乙酯甲苯溶液梯度洗脱进行层析。从先洗脱下来的级分得到0.33g(15%)的回收起始原料。从接着洗脱下来的级分得到0.90g(54%)透明油状标题化合物。
IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)，1775(β-内酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.38(d，J＝6.23Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.2(m，2H，CH2-4)，3.12(dd，JH6，H5＝2.77Hz，JH6，H1＝7.89Hz，1H，H-6)，3.3-3.7(m，3H，CH2N3和H-4)，4.05(ABq，JAB＝13.4Hz，Δν＝23.0Hz，2H，SCH2)，4.1-4.3(m，2H，H-5和CH3CHO重叠)，4.75(m，2H，烯丙基的CH2)，5.3-5.5和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，7.3(m，1H，吡啶的H-5)，7.72(m，1H，吡啶的H-4)，8.53(dd，J＝1.58Hz和J＝4.8Hz，1H，吡啶的H-6)和8.6ppm(d，J＝2.0Hz，1H，吡啶的H-2). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃和氮气氛下，用四(三苯膦)钯〔O〕(0.13g)和4.6ml(2.3mmol)的0.5M2-乙基己酸钾的乙酸乙酯溶液处理(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.90g，2.09mmol)在无水CH2Cl2(50ml)中的溶液。15分钟后，用乙醚(150ml)稀释反应混合物，用0.05M pH7.0磷酸盐缓冲液(3×75ml)提取。合并水相，用1M NaH2PO4将pH值调至5.8，减压下除去痕量有机溶剂。然后在0-5℃和45psi下用0.9g30%Pd/硅藻土将水溶液氢化1.2小时。滤出催化剂，滤液在反相硅胶(μ-Bondapak C-18，3.5×6.5cm)上层析，用0.5%乙腈水溶液梯度洗脱，冷冻干燥后，得到白色非晶形粉状标题物质。在水(30ml)中结晶，得到0.137g很细的固状标题化合物。母液再次层析后，得到0.27g白色非晶形粉状的标题化合物(总收率0.397g，52%)。
HPLC纯度94.5%，μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，8%CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速1ml/分，UV检测器300nm，保留时间5.35分钟; UV(H2O，pH7.4磷酸盐的缓冲液)λmax268(6，010)和302nm(7，740); IR(KBr)νmax1770β-内酰胺的C＝O和1590cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.30(d，J＝6.29Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.2(m，2H，CH2-4)，3.04(宽 t，J＝8.3Hz，2H，CH2NH2)，3.20(m，1H，H-4)，3.38(dd，JH6，H5＝2.72Hz，JH6，H1＝6.45Hz，1H，H-6)，4.06(ABq，JAB＝13.6Hz，Δν＝24.3，2H，SCH2)，4.1-4.3(m，2H，H-5和CH3CHO)，7.44(m，1H，吡啶的H-5)，7.85(d，J＝7.8Hz，1H，吡啶的H-4)，8.44(d，J＝4.9Hz，1H，吡啶的H-6)和8.50ppm(宽 s，1H，吡啶的H-2). 实施例25 (4R，5S，6S)-4-(2″-N，N-二甲基氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃下，用37%甲醛水溶液(0.23g，2.4mmol)、氰基硼氢化钠(0.048g，0.72mmol)和2滴乙酸处理从实施例24得到的(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.150g，0.41mmol)在水(3ml)和乙腈(3ml)的混合物中的悬浮液。20分钟后，用30ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液稀释反应混合物，减压下除去痕量有机溶剂。水相在反相硅胶(μ-Bondapak C-18，4×9cm)上用0-5%乙腈水溶液为梯度洗脱剂层析两次。UV活性级分冷冻干燥后，得到0.080g(～50%)白色非晶形粉末。HPLC表明，该产物为标题二甲氨基化合物和N-甲基-N-氰甲基化合物(实施例26)的3∶1混合物。用制备性HPLC(μ-Bondapak C-18，10mm×30cm，5%CH3CN-H2O洗脱)纯化，得到0.047g(29%)纯的二甲氨基标题化合物。
HPLC纯度97%，μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，8%CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速1ml/分，保留时间5.42分钟。
UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax268nm(6592)和302nm(7，793); IR(KBr)νmax1765(β-内酰胺的C＝O)和1605cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.30(d，J＝6.37Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.2(m，2H，CH2-4)，2.87(s，6H，N(CH3)2)，3.15(m，3H，CH2N和H-4)，3.32(dd，JH6，H52.90Hz，JH6，H1＝6.80Hz，1H，H-6)，4.05(ABq，JAB＝14.1Hz，Δν＝29.7Hz，2H，SCH2)，4.12(dd，与SCH2部分重叠JH5，H6＝2.90Hz，1H，H-5)，4.22(m，1H，CH3CHO)，7.44(dd，J＝5.0Hz和J＝7.9Hz，1H，吡啶的H-5)，7.84(m，1H，吡啶的H-4)，8.44(dd，J＝1.5Hz，和J＝5.0Hz，1H，吡啶的H-6)和8.50ppm(d，J＝1.8Hz，1H，吡啶的H-2). 实施例26 (4R，5S，6S)-4-〔2″-(N-氰甲基-N-甲基氨基)乙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将如实施例25所述的那样由(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸还原性烷基化制得的产物混合物用制备性HPLC(μ-Bondapak C-18)纯化。冷冻干燥后，从具有较长保留时间的、混合物中的较少组分得到0.011g白色非晶形粉状标题化合物。
HPLC纯度92%，μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，8%CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速1ml/分，UV检测器302nm，保留时间23.5分钟; UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax268和304nm; IR(KBr)νmax1752(β-内酰胺的C＝O)和1605cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.31(d，J＝6.36Hz，1H，CH3CHO)，1.4和1.9(2 x m，2 x 1H，CH2-4)，2.35(s，3H，N-CH3)，2.3-2.6(m，2H，CH2CH2N)，3.12(m，1H，H-4)，3.33(dd，JH6，H5＝2.68Hz，JH6，H1＝5.95Hz，1H，H-6)，3.70(s，2H，NCH2CN)，4.09(ABq，JAB＝14.14Hz，Δν＝29.5Hz，2H，SCH2)，4.12(dd与SCH2重叠，JH5，H6＝2.68Hz，1H，H-5)，4.24(m，1H，CH3CHO)，7.49(m，1H，吡啶的H-5)，7.92(d，J＝8.0Hz，1H，吡啶的H-4)，8.46(宽 d，J＝4.3Hz，1H，吡啶的H-6)和8.54ppm(宽 s，1H，吡啶的H-2). 实施例27 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在5℃下，用1.0M pH4.2 NaH2PO4缓冲液将如实施例21所述的那样从相应的烯丙酯(404mg，1.02mmol)得到的(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠的0.04M pH7.0磷酸盐缓冲液溶液(50ml，2.0mmol)的pH值调至5.8-5.9。向该混合物中加入30%Pd/硅藻土(400mg)，于45-50psi氢压下在帕尔氢化器上振荡1.5小时，其初始温度为5℃(冰浴)，最终温度为15℃。滤出催化剂，溶液通过μ-Bondapak C18反相柱(60g，H2O)，得到不纯的标题物质，其中污染有(4R，5S，6S)-4-(3″-羟基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠(实施例28)。将该不纯物溶于0.01M pH6.0磷酸盐缓冲液中，再次倒到μ-Bondapak C18柱(比例500/1)上。先用pH6.0缓冲液洗脱出两倍于柱体积的洗脱液，然后用水洗脱，得到纯的3-氨基丙基标题化合物(95mg，28%)和3-羟基丙基衍生物(得自340mg，0.85mmol烯丙酯，45mg，17%，如实施例28所述)。
HPLC测得的标题化合物纯度88%(KH2PO40.01M，pH7.4)，保留时间5.54分钟; UV(H2O)λmax302(9000); IR(液体石蜡)νmax3600-3100(OH)，1750和1585cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.33-4.2(1H，m，H-1′)，4.23(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.2Hz，H-5)，3.82-3.67(2H，m，CH2O)，3.43-3.34(1H，m，H-4)，3.36(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝6.6Hz，H6)，3.09-3.02(2H，m，CH2N)，3.06-2.79(2H，2 组 m，SCH2)，1.95-1.5(4H，m，CH2CH2)和1.33ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例28 (4R，5S，6S)-4-(3″-羟基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
在5℃下，用1.0M pH4.2 NaH2PO4缓冲液将如实施例21所述那样从相应的烯丙酯(404mg，1.02mmol)得到的(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠的0.04M pH7.0磷酸盐缓冲液溶液(50ml，2.0mmol)的pH值调至5.8-5.9。向该混合物中加入30%Pd/硅藻土(400mg)，然后在帕尔氢化器上于45-50psi氢压下振荡1.5小时，其初始温度为5℃(冰浴)，最终温度为15℃。滤出催化剂，溶液通过μ-Bondapak C18，反相柱(60g，H2O)，得到不纯的标题物质，其中污染有(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸盐(实施例27)。将该不纯物溶于0.01M pH6.0磷酸盐缓冲液中，再次倒到μ-Bondapak C18柱(比例500/1上。先用pH6.0缓冲液洗脱出两倍柱体积的洗脱液，然后用水洗脱，得到实施例27的3-氨基丙基化合物(95mg，28%)和3-羟基丙基标题化合物(得自340mg，0.85mmol的烯丙酯，45mg，17%)。
HPLC测得的标题化合物的纯度95.2%(KH2PO4，0.01M pH7.4)，保留时间7.9分钟; UV(H2O)λmax302(10，300); IR(液体石蜡)νmax3600-3100(OH)，1740和1690cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.35-4.2(1H，m，H-1′)，4.23(1H，dd，J＝9.2Hz，J＝2.5Hz，H-5)，3.77(2H，m，SCH2CH2O)，3.65(2H，m，CH2O)，3.41(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝6.1Hz，H-6)，3.42-3.36(1H，m，H-4)，3.1-2.8(2H，2 se 组 m，SCH2)，2.0-1.4(4H，m，CH2CH2)和1.33ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例29 (4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
A.(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将在实施例7步骤E中制得的(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-叠氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(2.0g，4.2mmol)和Rh(OAc)2在苯(80ml)中的溶液加热回流20分钟。减压下除去苯，用CH3CN(80ml)稀释所得的双环酮。将所得溶液冷却至-10℃(冰-MeOH浴)，用氯磷酸二苯基酯(1.0ml，4.6mmol)、N，N-二异丙基乙胺(0.84ml，4.6mmol)和4-二甲氨基吡啶(2.3mg)滴加处理。将混合物搅拌2小时，然后加入N，N-二异丙基乙胺(1.7ml，9.2mmol)，接着通入CH3SH气流(10分钟)。将混合物在5℃(冷室)下保持18小时，然后用冷的EtOAc(400ml)稀释，用冷的1N HCl水溶液(400ml)、冰冷的水(200ml)、1M NaHCO3水溶液(2×400ml)、冰冷的水(3×400ml)和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，所得残留物(2g)通过闪式硅胶柱(100g，己烷→20%EtOAc/己烷)，得到油状标题化合物(1.0g，50%)。
IR(CH2Cl2)νmax2100(N3)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ5.97-5.89(1H，m，乙烯基 H)，5.48-5.21(2H，m，乙烯基 H)，4.9-4.6(2H，m，CH2-乙烯基)，4.3-4.15(1H，m，H-1′)，4.12(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.4Hz，H-5)，3.5-3.3(2H，m，CH2N3)，3.3-3.1(1H，m，H-4)，3.16(1H，dd，J＝7.4Hz，J-2.7Hz，H-6)，2.38(3H，s，CH3)，1.9-1.5(4H，m，CH2CH2)，1.31(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.88(9H，s，叔丁基)，0.086和0.078ppm(6H，2s，CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.0g，2.1mmol)在THF(60ml)中的冷(-20℃)溶液先用冰AcOH(1.5ml，25.2mmol)处理，然后用1M氟化四丁铵四氢呋喃溶液(12.7ml，12.6mmol)处理。将反应在5℃下保持100小时，然后用1M NaHCO3水溶液中和，用乙酸乙酯(200ml)稀释，用冷的1M NaHCO3水溶液(1×50ml)、水(2×150ml)和盐水(1×150ml)稀释，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，所得残留物(1.2g)通过闪式硅胶柱(1/1己烷/EtOH→EtOH)，得到标题化合物(0.30g)和起始醚(0.42g)，在同样的条件下用氟化四丁铵再次处理所述醚，得到标题化合物(0.13g)，合计0.43g，56%。
IR(CH2Cl2)νmax3600(OH)，2100(N3)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.07-5.87(1H，m，乙烯基 H)，5.5-5.21(2H，m，乙烯基 -H)，4.87-4.62(2H，m，CH2-乙烯基)，4.3-4.18(1H，m，H-1′)，4.22(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.3Hz，H-5)，3.5-3.3(2H，m，CH2N3)，3.3-3.2(1H，m，H-4)，3.23(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝7.6Hz，H-6)，2.37(3H，s，SCH3)，1.9-1.55(4H，m，CH2CH2)，1.77(1H，d，J＝4.8Hz，OH)和1.39ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
在冰浴冷却下，将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(50mg，0.14mmol)在CH2Cl2(2ml)中的溶液用Pd(PPh3)4(5mg)和0.5M2-乙基己酸钠的乙酸乙酯溶液(0.3ml，0.15mmol)处理。用EtOAc(10ml)稀释混合物，用0.05M磷酸盐缓冲液(1×10ml，1×5ml)提取。合并水提取液，用乙醚洗涤，通过μ-Bondapak C18反相柱(20g，H2O→2%CH3CN/H2O)，得到标题化合物(30mg，60%)。
HPLC纯度97.2%(10%CH3CN/KH2PO40.01M，pH7.4)，保留时间7.56分钟; UV(H2O)λmax304(8070); IR(液体石蜡)νmax3600-3100(OH)，2100(N3)，1745和1595cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.34-4.2(1H，m，H-1′)，4.22(1H，dd，J＝2.3Hz，J＝9.0Hz，H-5)，3.47-3.37(4H，m，H-6，H-4和CH2N3)，3.375(d，J＝2.3Hz，H-6的部分dd)，2.37(3H，s，CH3)，1.95-1.4(4H，m，CH2CH2)和1.35ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例30 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷却下，用1.0M pH4.2 NaH2PO4缓冲液将如实施例29所述的那样从相应的烯丙酯(0.12g，0.33mmol)制得的(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠的0.05M pH7.0磷酸盐缓冲液溶液(25ml)的pH值调至5.8。然后将混合物在帕尔氢化器上于45-50psi氢压和～10℃(初始温度5℃)下用30%Pd/硅藻土(120mg)为催化剂振荡90分钟。滤除催化剂，溶液通过μ-Bondapak C18反相柱(50g，H2O→2%CH3CN/H2O)，得到两种化合物的混合物(0.3g)。将冷冻干燥后的粉末再次通过反相柱(45g，150ml的0.05M pH6.0磷酸盐缓冲液，H2O→2%CH3CN/H2O)，得到不纯的3-氨基丙基衍生物(125mg)和实施例31的3-羟基丙基衍生物(20mg，20%)。将3-氨基丙基衍生物在反相柱上再次纯化(45g，H2O→2%CH3CN/H2O)，得到纯的标题3-氨基丙基化合物(25mg，25%)。
HPLC纯度96.5%(KH2PO4缓冲液0.01M，pH7.4)，保留时间7.50分钟; UV(H2O)λmax304(8580); IR(液体石蜡)νmax3600-3100(OH，NH2)，1750和1580cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.3-4.2(1H，m，H-1′)，4.21(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝9.1Hz，H-5)，3.48-3.39(1H，m，H-4)，3.33(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝6.5Hz，H-6)，3.15-3.0(2H，m，CH2N)，2.34(3H，s，SCH3)，1.9-1.5(4H，m，CH2CH2)和1.33ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例31 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(3″-羟基丙基)-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
在冰浴冷却下，用1.0M pH4.2 NaH2PO4缓冲液将如实施例29所述的那样从相应的烯丙酯(0.12g，0.33mmol)制得的(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠的0.05M pH7.0磷酸盐缓冲液溶液(25ml)的pH值调至5.8。然后将混合物在帕尔氢化器上于45-50psi氢压和～10℃(初始温度5℃)下用30%Pd/硅藻土(120mg)为催化剂振荡90分钟。滤除催化剂，溶液通过μ-Bondapak C18反相柱(50g，H2O→2%CH3CN/H2O)，得到两种化合物的混合物(0.3g)。将冷冻干燥后的粉末再次通过反相柱(45g，150ml的0.05M pH6.0磷酸盐缓冲液，H2O→2%CH3CN/H2O)，得到实施例30的不纯的3-氨基丙基衍生物(125mg)和纯的3-羟基丙基标题化合物(20mg，20%)。
HPLC纯度97.5%(2%CH3CN/pH 7.4 0.01M磷酸盐缓冲液)，保留时间7.79分钟。
UV(H2O)λmax306(9700); IR(液体石蜡)νmax3500-3100(OH)，1740和1590cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.34-4.18(1H，m，H-1′)，4.21(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝9.3Hz，H-5)，3.69-3.63(2H，m，CH2O)，3.46-3.36(1H，m，H-4)，3.38(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝6.3Hz，H-6)，2.36(3H，s，SCH3)，1.95-1.4(4H，m，CH2CH2)和1.34ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例32 (4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-亚胺甲基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷却下，向(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(50mg，0.15mmol，实施例7中制得)在0.04M pH7.0磷酸盐缓冲液(10ml，0.4mmol)中的溶液中加入0.1N NaOH水溶液，将其pH值调至8.2-8.4。向该溶液中分批加入甲亚胺酸苄酯盐酸盐(257mg，1.5mmol)，同时用0.1N NaOH水溶液将pH值保持在8.0-8.5。将混合物搅拌10分钟，然后用0.1N HCl水溶液将pH值调至7.0。溶液通过μ-Bondapak C18柱(25g，H2O→2%，4%CH3CN/H2O)，冷冻干燥后，得到纯的粉状标题化合物(33mg，62%)。
HPLC纯度93.8%(2%CH3CN/KH2PO40.01M，pH7.4)，保留时间5.73分钟; UV(H2O)λmax302(7651); IR(液体石蜡)νmax3600-3100(NH，OH)，1755，1585(C＝O)和1710cm-1(C＝NH); 1H NMR(D2O，200MHz)δ7.83，7.80(1H，2s，NCHN)，4.35-4.2(1.5H，m，H-1′)，4.21(0.5H，d，J＝2.2Hz，部分H-5)，3.8-3.7(2H，m，CH2O)，3.55-3.25(4H，m，CH2N，H-6，H-4)，3.1-2.8(2H，2，组 m，SCH2)，1.95-1.4(4H，m，CH2CH2)和1.32ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 实施例33 (4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-亚胺甲基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷却下，将(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(31mg，0.10mmol，实施例30中制得)在0.05M pH7.0磷酸盐缓冲液中的溶液的pH值用0.1N NaOH水溶液调至8.5。向该溶液中分批加入甲亚胺酸苄酯盐酸盐(172mg，1mmol)，同时用0.1N NaOH水溶液将pH值保持在8-8.3。将混合物搅拌15分钟，然后将pH值调至7.0。水溶液通过μ-Bondapak C18柱(25g，H2O)，冷冻干燥后，得到粉状标题化合物(22mg，60%)。
HPLC纯度97.8%(304nm，2%CH3CN/KH2PO40.01M，pH7.4)，保留时间8.33分钟; UV(H2O)λmax306(12，200); IR(液体石蜡)νmax3600-3100(OH，NH2)，1750，1590(C＝O)和1710cm-1(C＝N); 1H NMR(D2O;200MHz)δ7.83，7.80(1H，2s，CH)，4.35-4.18(2H，m，H-1′和H-5)，3.45-3.35(3H，m，CH2N，H-4)，3.30(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝6.2Hz，H-6)，2.34(3H，s，SCH3)，1.9-1.45(4H，m，CH2CH2)和1.32ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例34 (4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-胍基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷却下，将(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(50mg，0.17mmol，实施例30中制得)在0.05M pH7.0磷酸盐缓冲液中的溶液的pH值用0.1N NaOH水溶液调至8。向该混合物中分批加入氨基亚氨基甲磺酸(211mg，1.70mmol)，同时用0.1N NaOH水溶液将pH值保持在7.8-8.0。将混合物搅拌1小时，然后用0.1N HCl水溶液将pH值调至7.0。溶液通过μ-Bondapak C18反相柱(25g，H2O)，冷冻干燥后，得到粉状标题化合物(17mg，40%). HPLC纯度99.4%(304nm，2%CH3CN/KH2PO40.01M，pH7.4)，保留时间9.19分钟; UV(H2O)λmax306(10，700); IR(液体石蜡)νmax3600-3100(NH2，OH)，1750，1680(C＝O)和1660cm-1(C＝N); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.3-4.17(1H，m，H-1′)，4.20(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝9.1Hz，H-5)，3.46-3.30(1H，m，H-4)，3.26(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝6.3Hz，H-6)，3.3-3.2(2H，m，CH2N)，2.34(3H，s，SCH3)，1.9-1.4(4H，m，CH2CH2)和1.32ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 实施例35 (4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-胍基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷却下，向(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(50mg，0.15mmol，实施例27中制得)在0.04M pH7.0磷酸盐缓冲水溶液(10ml，0.4mmol)中的溶液中加入0.1N NaOH水溶液，将其pH值调至7.8-8.0。向该溶液中分批加入如H.S.Mosher等人在Tet.Lett.，29，(26)3183-86(1988)中所述的氨基亚氨基甲磺酸(186mg，1.5mmol)，并将pH值保持在7.6-7.8。在用0.1N NaOH水溶液将pH值保持恒定(7.6-7.8)的同时，将混合物搅拌1小时，然后用0.1N HCl水溶液将pH值调至7.08。溶液通过μ-Bondapak C18反相柱(25g，H2O→2%，4% CH3CN/H2O)，冷冻干燥后，得到粉状标题化合物(35mg，63%)。
HPLC纯度99.1%(2%CH3CN/缓冲液0.01M，pH7.4)，保留时间7.5分钟; UV(H2O)λmax304(7800); IR(液体石蜡)νmax3320，3180(NH，OH)，1750，1580(C＝O)和1665cm-1(C＝N); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.3-4.2(2H，m，H-1′和H-5)，3.77(2H，t，J＝6.2Hz，CH2O)，3.28(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝6.2Hz，H-6)，3.45-3.15(3H，m，H-4和CH2N)，3.15-2.8(2H，2 组 m，SCH2)，2.0-1.45(4H，m，CH2CH2)和1.32(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 实施例36 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5R，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在-15℃和氮气氛下，用5分钟时间，将氯磷酸二苯基酯(1.4ml，6.75mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.2ml，6.9mmol)同时加到(4R，5R，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(6.46mmol，由实施例2步骤E中制得的重氮基前体(3.0g，6.46mmol)环化制得)在无水乙腈(50ml)中的溶液中。然后加入少许4-N，N-二甲基氨基吡啶的晶粒，并在30分钟内将混合物的温度缓慢温热至0-5℃。加入N，N-二异丙基乙胺(1.2ml，6.9mmol)及L.Bauer和T.L.Welsh在J.Org.Chem.，26，1443(1961)中所述的β-巯基丙腈(1.13g，13.0mmol)，并将混合物在0-5℃下搅拌2小时。然后将反应混合物用EtOAc(300ml)稀释，用水、1M NaHSO3、饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到油状物，在硅胶(5×11cm)上层析，用0-10%乙酸乙酯甲苯溶液梯度洗脱，得到棕色油状的标题化合物(3.3g，～100%)，其中含有一些聚合产物。该物质照原样用于下一步反应中。
IR(NaCl，压片)νmax2250(CN)，2100(N3)，1775(β-内酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.19(s，6H，SiCH3)，0.99(s，9H，Sit-Bu)1.41(d，J＝6.11Hz，3H，CH3CHO)，1.7-2.2(m，2H，CH2-4)，2.7-3.4(m，5H，SCH2CH2CN和H-6)，3.4-3.8(m，3H，CH2N3和H-4)，4.3(m，2H，H-5和CH3CHO)，4.85(m，2H，烯丙基的CH2)，5.3-5.6和5.9-6.2 ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-羧酸烯丙酯
在0-5℃和氮气氛下，将得自步骤A的(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯粗品(3.3g，6.4mmol)在无水THF(100ml)中的溶液先用乙酸(2.2ml，38.4mmol)处理，然后用20ml(20.0mmol)的1M氟化四丁铵四氢呋喃溶液处理。将该溶液在5℃下储存8天。然后用EtOAc稀释反应混合物，用饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到油状物，在硅胶(5×11cm)上层析，用甲苯和EtOAc的1∶1混合物洗脱，得到透明油状的标题化合物(0.92g，36%，收率基于重氮基氮杂环丁酮计算)。
IR(NaCl，压片)νmax3500(OH)，2250(CN)，2105(N3)，1775β-内酰胺的C＝O和1710cm-1(羧酸酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.40(d，J＝6.23Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.1(m，2H，CH2-4)，2.7(m，2H，CH2CN)，2.9-3.3(m，3H，H-6和SCH2)，3.4-3.7(m，3H，H-4和CH2N3)，4.25(m与H-5重叠，1H，CH3CHO)，4.29(dd，JH5，H6＝2.80Hz，JH5，H4＝9.69Hz，1H，H-5)，4.77(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃和氮气氛下，将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.92g，2.35mmol)在无水CH2Cl2(50ml)中的溶液用四(三苯膦)钯〔O〕(0.13g)和5.2ml(2.6mmol)的0.5M2-乙基己酸钾乙酸乙酯溶液处理。然后加入200ml 0.1M pH6.0磷酸盐缓冲液，减压蒸发有机溶液。将残留的水相在0-5℃和45psi的氢压下用2.0g 5% Pd/BaSO4氢化30分钟。滤出催化剂，减压下将滤液浓缩至一半体积。在反相硅胶(μ-Bondapak C-18，7.5×10.5cm)上用水为洗脱剂层析两次后，将UV活性级分冷冻干燥，得到0.15g(20%)的白色非晶形粉状的标题化合物; HPLC纯度99%，μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，H2O pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速1ml/分，UV检测器304nm，保留时间4.67分钟; UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax298nm(7，709); IR(KBr)νmax2250(CN)，1760(β-内酰胺的C＝O)和1590cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.8-2.4(m，2H，CH2-4)，2.85(m，2H，CH2CN)，2.9-3.3(m，4H，SCH2和CH2NH2)，3.45(m，与H-6重叠，1H，H-4)，3.47(dd，JH6，H5＝2.90Hz，JH6，H1＝6.47Hz，1H，H-6)，和4.2-4.4ppm(m，2H，H-5和CH3CHO). 实施例37 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-(2，5-二氧代-1-吡咯烷氧基)乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔2″-(2，5-二氧代-1-吡咯烷氧基)乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0℃和氩气氛下，向实施例6步骤A中制得的(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-4-(2″-羟基乙基)-3-〔(吡啶-2基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.29g，0.56mmol)、N-羟基琥珀酰亚胺(0.07g，0.62mmol)和三苯膦(0.176g，0.67mmol)在无水THF(8ml)中的混合物中加入偶氮二甲酸二乙酯(0.117g，0.67mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌1小时，然后在室温下再搅拌1小时。减压下除去溶剂，残留物在用CH2Cl2填充的硅胶(3×9cm)上层析，用CH2Cl2和EtOAc的混合物(4∶6，梯度洗脱)洗脱，得到混有大约1当量Ph3P＝O的标题化合物(0.465g)。
1H NMR(200MHz，CDCl37.24)δ0.04(s，6H，Si(CH3)2)，0.84(s，9H，SiC(CH3)3)，1.23(d，CH3，JCH3，1′＝6.07Hz)，1.73-1.95(m，1H，CH2)，2.19-2.33(m，1H，CH2)，2.67(s，4H，O＝C(CH2)2C＝O)，3.14(dd，H-6，J5，6＝2.56Hz，J6.1′＝6.4Hz)，3.81(m，H-4)，3.96-4.33(重叠，6H，CH2O，CHOH，H-5，SCH2)，4.59-4.81(m，OCH2，烯丙基)，5.17-5.44(m，＝CH2，烯丙基)，5.82-5.98(m，CH＝，烯丙基)，7.16(m，H-5，py，J4，5＝7.47Hz，J5，6＝4.91Hz)，8.49(d，H-6，py). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(2，5-二氧代-1-吡咯烷氧基)乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯。

在氩气氛下，将得自步骤A的(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-4-〔2″-(2，5-二氧代-1-吡咯烷氧基)乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.46g，0.75mmol)在无水THF(8ml)中的冷(0℃)溶液先用乙酸(0.26ml，4.48mmol)处理，然后用1M的氟化四丁铵四氢呋喃溶液(2.24ml，2.24mmol)处理。将混合物在0～5℃之间搅拌120小时，然后在0℃下用1M NaHCO3溶液(4.52ml，4.48mmol)中和。混合物用EtOAc(3×50ml)提取，合并有机相，依次用冷的1M NaHCO3溶液、水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，蒸发溶剂，得到粘胶状物，在用CH2Cl2填充的硅胶(3.5×9cm)上层析，先用CH2Cl2和EtOAc的混合物(50-100%EtOAc)洗脱，然后用CH3CN和EtOAc的混合物(1∶1梯度洗脱)洗脱，得到泡沫状标题化合物(0.18g，64.3%)。
1H NMR(200MHz，CDCl37.24)δ1.37(d，CH3，JCH3，1′＝6.25Hz)，1.71-1.9(m，1H，CH2)，2.31-2.44(m，1H，CH2)，2.7(s，4H，O＝C(CH2)2C＝O)，3.25(dd，H-6，J5，6＝2.73Hz，J6，1′＝8.77Hz)，3.91(m，H-4)，3.85-4.30(重叠，6H，CH2O，CHOH，H-5，SCH2)，4.58-4.86(m，OCH2，烯丙基)，5.19-5.46(m，＝CH2，烯丙基)，5.84-6.03(m，CH＝，烯丙基)，7.16(m，H-5，py，J3，5＝0.93Hz，J4，5＝7.67Hz，J5，6＝4.04Hz)，7.34(m，H-3，py，J3，4＝7.8Hz)，7.64(m，H-4，py，J4，6＝1.82Hz)，8.48(m，H-6，py). C.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(2，5-二氧代-1-吡咯烷氧基)乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在氩气氛下，向(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(2，5-二氧代-1-吡咯烷氧基)乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.16g，0.32mmol)在CH2Cl2(10ml)中的冷(0℃)溶液中加入Pd〔Ph3P〕4(0.055g，0.048mmol)，然后加入0.5M2-乙基己酸钠的乙酸乙酯溶液(0.64ml，0.32mmol)。将混合物在0℃下搅拌2小时，然后用水(3×15ml)提取。合并的水相通过μ-Bondapak C-18反相硅胶(3×11cm)柱。用水和CH3CN的混合物(9∶1，梯度洗脱)洗脱标题化合物，冷冻干燥后，得到白色蓬松的固状物(0.1g，64.9%); HPLC纯度97.6%;UV检测设置在304nm，μ-Bondapak C-18(4mm×30cm)，8%CH3CN的pH7.4磷酸盐缓冲液，流速1ml/分，保留时间9.7分钟; IR(液体石蜡)νmax1750cm-1(β-内酰胺的C＝O)1720cm-1(酰胺C＝O). UV(pH7.4)λmax304(7756). 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.25(d，CH3，JCH3，1′＝6.39Hz)，1.75-1.91(m，1H，CH2)，2.11-2.25(m，1H，CH2)，2.82(s，4H，O＝C(CH2)2C＝O)，3.41-3.52(重叠，2H，H-4，H-6)，3.98-4.30(重叠，6H，CH2O，CHOH，H-5，SCH2)，7.41(dd，H-5，py，J3，4＝7.9Hz)，7.91(dt，H-4，py，J4，6＝1.68Hz)，8.48(d，H-6，py). 实施例38 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叠氮基乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(3.7g，8.0mmol，如在实施例2步骤E中所制得)和Rh(OAc)2(150mg)在热苯(300ml)中的溶液加热回流1小时。过滤后，蒸发苯，得到(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯粗品，将该粗品溶于CH3CN(75ml)中，冷却至-15℃(冰-MeOH浴)，用氯磷酸二苯酯(1.76ml，8.80mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.54ml，8.8mmol)滴加处理。将混合物搅拌1小时，所得的烯醇磷酸酯用在CH3CN(1.5ml)中的1，2，3-噻二唑-4-甲硫醇(1.16g，8.8mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.54ml，8.8mmol)滴加处理。将反应混合物搅拌1小时，加入另外的硫醇(160mg，1.2mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.20ml，1.2mmol)。将混合物搅拌1小时，用冷的EtOAc(200ml)稀释，用冷水(25ml)、1M NaHSO3水溶液(3×25ml)、H2O(25ml)、1N HCl水溶液(25ml)、1M NaHCO3水溶液(25ml)和盐水(25ml)洗涤，干燥(MgSO4)。残留物通过闪式硅胶垫(125g，己烷→5%→25%乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(2.38g，61.5%)和一些烯醇磷酸酯(640mg，0.96mmol)。
IR(CH2Cl2)νmax2100(N3)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.44(1H，s，芳族 -H)，6.00-5.83(1H，m，乙烯基 -H)，5.46-5.20(2H，m，乙烯基 -H)，4.82-4.60(2H，烯丙基 CH2)，4.774，4.701，3.397，4.324(2H，ABq，J＝14.6Hz，CH2)，4.25-4.13(1H，m，H-1′)，4.113(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.6Hz，H-5)，3.69-3.55(2H，m，CH2-N3)，3.46-3.32(1H，m，H-4)，3.094(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.4Hz，H-6)，2.16-1.98，1.78-1.65(2H，2 组 m，CH2-4)，1.291(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.882(9H，s，叔丁基)和0.080ppm(6H，s，二甲基). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷却下，将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(2.38g，4.30mmol)在无水THF(40ml)中的溶液用乙酸(1.49ml，25.8mmol)处理，然后用1M氟化四丁铵四氢呋喃溶液(12.9ml，12.9mmol)滴加处理。将混合物在5℃下搅拌48小时。将之用EtOAc(150ml)稀释，用水(2×25ml)、1M NaHCO3水溶液(2×25ml)、水(1×25ml)和盐水(25ml)洗涤，干燥(MgSO4)。残留物通过闪式硅胶柱(50g，CH2Cl2/己烷1/1→EtOAc/CH2Cl25→60%)，得到油状标题化合物(814mg，43%); IR(CH2Cl2)νmax3600(OH)，2100(N3)，1780和，1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.46(1H，s，芳族 -H)，6.04-5.84(1H，m，乙烯基 -H)，5.47-5.21(2H，m，乙烯基-H)，4.87-4.59(2H，m，烯丙基 H)，4.799，4.725，4.353，4.278(2H，ABq，J＝15.0Hz，CH2-芳族)，4.216(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝6.7Hz，H-5)，4.72-4.18(1H，m，H-1′)，3.79-3.67(1H，m，H-4)，3.66-2.56，3.52-3.38(2H，2 组 m，CH2-N3)，3.176(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝7.9Hz，H6)，2.20-2.03，1.88-1.67(2H，2 组 m，CH2-4)，1.874(1H，d，J＝4.3Hz，OH)和1.495ppm(3H，d，J＝6.5Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷却下，将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(465mg，1.07mmol)在CH2Cl2(50ml)中的溶液用Pd(PPh3)4(22mg)和0.5M的2-乙基己酸钠乙酸乙酯溶液(2.14ml，1.07mmol)处理。将混合物搅拌1小时，用乙醚(20ml)稀释，用0.04M pH7.0磷酸盐缓冲水溶液(4×5ml)提取。水提取液用乙醚(2×20ml)洗涤后，将pH值调至5.9。然后将水溶液在帕尔氢化器上于45-50psi氢压下和5℃至15℃(反应结束时温度)温度下用30%Pd/硅藻土为催化剂氢化1小时。滤除催化剂，用水(2×5ml)洗涤。水层通过μ-Bondapak C18反相柱(100g，H2O→1%→3%CH3CN/H2O)，冷冻干燥后，得到粉状标题化合物(163mg，41%)。
纯度97.9%，HPLC(300nm); UV(H2O)λmax300(ε 9240); IR(Nujol)δ1770和1580cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.87(1H，s，芳族 H)，4.73，4.67，4.43，4.35(2H，ABq，J＝14.0Hz，CH2-芳族 C)，4.31-4.18(1H，m，H-1′)，4.157(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝9.7Hz，H-5)，3.417(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝6.5Hz，H-6)，3.38-3.26(1H，m，H-4)，3.17-3.02(2H，m，CH2-N)，2.25-2.07，1.86-1.65(2H，2 组 m，CH2-4)，和1.306ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例39 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷却下，将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯〔如实施例38步骤A那样得自(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叠氮基乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(2.55g，7.00mmol)〕在CH3CN(100ml)中的溶液用氯磷酸二苯基酯(1.63ml，7.70mmol)、N，N-二异丙基乙胺(1.40ml，7.7mmol)和4-二甲氨基吡啶(26mg)处理。将混合物搅拌1小时，所得的烯醇磷酸酯用三甲基硅基氯(1.0ml，7.7mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.4ml，7.7mmol)处理。将混合物搅拌15分钟，加入N，N-二异丙基乙胺(2.8ml，15mmol)，接着通入CH3SH气流10分钟。使混合物在5℃下反应44小时，然后用EtOAc(300ml)稀释，用冰冷的1M NaHCO3水溶液(3×50ml)、冰冷的水(3×50ml)和盐水(50ml)洗涤，干燥(MgSO4)。用THF(100ml)稀释残留物(3g)，用2N AcOH水溶液(17.5ml，35mmol)处理，然后在22℃下搅拌1小时。用EtOAc(300ml)稀释混合物，用1M NaHCO3水溶液(2×100ml)、水(3×100ml)和盐水(100ml)洗涤，干燥(MgSO4)。残留物(1.5g)通过硅胶垫(75g，己烷/EtOAc1/1→EtOAc)，得到油状标题化合物(530mg，21%)。
IR(净态)νmax3600-3200(OH)，2100(N3)，1770和1705cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.07-5.87(1H，m，乙烯基 H)，5.49-5.22(2H，m，乙烯基 -H)，4.88-4.63(2H，m，烯丙基 CH2)，4.30-4.19(1H，m，H-1′)，4.227(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.4Hz，H-5)，3.66-3.54(1H，m，H-4)，3.49-3.34(2H，m，CH2N)，3.142(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝7.9Hz，H-6)，2.394(3H，s，SCH3)，2.17-1.68(3H，m，和bs，OH和CH2-4)和1.391ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
在冰浴冷却下，将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.53g，1.5mmol)在CH2Cl2(5ml)中的溶液用Pd(PPh3)4(50mg)和0.5M的2-乙基己酸钠乙酸乙酯溶液(3.2ml，1.6mmol)处理。撤去冰浴，将混合物搅拌30分钟。用乙酸乙酯(20ml)稀释后，用水(2×10ml)提取。合并水相，用乙醚(20ml)洗涤，然后通过反相μ-Bondapak C18柱(50g，H2O→5%CH3CN/H2O)，冷冻干燥后，得到粉状的标题化合物(0.32g，64%)。
1H NMR(D2O，200MHz)δ4.33-4.19(1H，m，H-1′)，4.221(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.6Hz，H-5)，3.63-3.33(3H，m，H-4，CH2-N)，3.401(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.4Hz，H-6)，2.365(3H，s，SCH3)，2.13-1.95，1.89-1.70(2H，2 组 m，CH2-4)和1.334ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷却下和45-50psi氢压下，用30%Pd/硅藻土(320mg)为催化剂，将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠(320mg，0.960mmol)在水(20ml)中的溶液在帕尔氢化器上振荡90分钟。滤除催化剂，水相通过μ-Bondapak C18柱三次，(50g，800g和80g，H2O)，冷冻干燥后，得到粉状标题化合物(82mg，30%)。
纯度91.8%(HPLC，304nm); UV(H2O)λmax304(ε 8110); IR(液体石蜡)δ3600-3200(OH)，1750和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.34-4.21(1H，m，H-1′)，4.231(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝6.6Hz，H-5)，3.53-3.40(1H，m，H-4)，3.385(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝6.6Hz，H-6)，3.14-3.05(2H，m，CH2N)，2.34(3H，s，SCH3)，2.23-2.80(2H，2 组 m，CH2-4)和1.335ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 实施例40 (4R，5S，6S)-4-(2″-胍基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷却下，将得自实施例38的(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(160mg，0.432mmol)在0.04M pH7.4磷酸盐缓冲水溶液中的溶液用0.1N NaOH水溶液处理(调节并保持pH在7.6-7.8)，并分批加入氨基亚氨甲磺酸(533mg，4.30mmol)处理之。将混合物搅拌45分钟，用0.1N HCl水溶液将pH值调至6.9。将水性混合物通过μ-Bondapak C18反相柱(50g，H2O→1%-5%CH3CN/H2O)，冷冻干燥后，得到粉状标题化合物(93mg，52%)。
纯度99.7%(HPLC，300nm); UV(H2O)λmax302(ε 8300); IR(Nujol)νmax3400-3100(OH)，1755(C＝O)，1665(C＝N)和1585cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.886(1H，s，芳族 -H)，4.651，4.577，4.421，4.347(2H，ABq，J＝14.9Hz，CH2-芳族)，4.3-4.17(1H，m，H-1′)，4.143(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.7Hz，H-5)，3.405(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.8Hz，H-6)，3.38-3.1(3H，m，H-4和CH2-N)，2.15-1.95，1.8-1.55(2H，2 组 m，CH2-4)和1.315(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例41 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷却下，将在实施例21步骤B中制得的(2R，4R，5R，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(从(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-叠氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(2.16g，5.90mmol)制得)在CH3CN(40ml)中的溶液用氯磷酸二苯基酯(1.3ml，6.5mmol)、N，N-二异丙基乙胺(1.12ml，6.5mmol)和少量的4-二甲氨基吡啶滴加处理。将混合物搅拌45分钟，通过顺序加入三甲基硅基氯(0.84ml，6.5mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.12ml，6.50mmol)将所得的烯醇磷酸酯甲硅烷基化。将混合物搅拌30分钟，用氰基乙硫醇(640mg，7.37mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.27ml，7.37mmol)处理产生的烯醇磷酸酯甲硅烷基醚。将混合物搅拌30分钟，然后用冰浴代替冰-MeOH浴，继续搅拌30分钟。加入氰基乙硫醇(160mg，1.84mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.317ml，1.84mmol)，接着搅拌1小时。加入另外的氰基乙硫醇(160mg，1.84mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.317ml，1.84mmol)，搅拌30分钟后，用EtOAc(100ml)稀释混合物，用冰冷的水(3×40ml)、1M NaHSO4水溶液(3×40ml)、水(40ml)、1M NaHCO3水溶液(40ml)、水(40ml)和盐水(40ml)洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂后，将所得残留物溶于THF(40ml)中，用冰-MeOH浴冷却至-15℃，先用乙酸(2ml，35.4mmol)处理，然后用1M氟化四丁铵的四氢呋喃溶液(17.7ml，17.7mmol)滴加处理。将混合物搅拌40分钟，用EtOAc(100ml)稀释，用冷的1N HCl水溶液(20ml)、水(2×20ml)、1M NaHCO3水溶液(20ml)、水(2×20ml)和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。残留物通过闪式硅胶柱(50g，CH2Cl2→10，20，40，60%EtOAc/CH2Cl2)，得到油状标题化合物(1.41g，59.0%); IR(CH2Cl2)νmax3600，3500(OH)，2100(N3)，1780和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.07-5.87(1H，m，乙烯基 H)，5.50-5.24(2H，m，乙烯基 H)，4.89-4.63(2H，m，烯丙基-CH2)，4.279(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝9.7Hz，H-5)，4.3-4.17(1H，m，H-1′)，3.52-3.36(2H，m，CH2N3)，3.30-3.2(1H，m，H-4)，3.277(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝7.6Hz，H-6)，3.22-2.93(2H，m，SCH2)，2.82-2.56(2H，m，CH2CN)，2.0-1.7(5H，m，OH，CH2CH2)和1.395ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷却下，将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(661mg，1.63mmol)在CH2Cl2(66ml)中的溶液用Pd(PPh3)4(132mg，0.110mmol)处理，然后用0.5M2-乙基己酸钠溶液(3.3ml，1.7mmol)滴加处理。将混合物搅拌50分钟，用乙醚(250ml)稀释，用0.04M pH7磷酸盐溶液(3×10ml)提取。合并水相，用乙醚(2×50ml)洗涤，用1M NaH2PO4缓冲水溶液将pH值降至5.9。向该混合物((4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-(2-氰基乙硫基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸的钠盐粗品)中加入30%Pd/硅藻土(660mg)，然后在5℃(冰浴，初始温度，最终温度为15℃)下和45-50psi氢压下在帕尔氢化器上振荡1小时。滤除催化剂，用水(2×10ml)洗涤。水溶液通过μ-Bondapak C18反相柱(165g，H2O→1%CH3CN)，得到3-氨基丙基标题化合物和实施例42中所述的3-羟基丙基衍生物的74∶26混合物(363mg)。将该混合物再次通过反相柱(180g，pH6.0，0.01M磷酸盐缓冲液)，得到两种含磷酸盐的衍生物。
通过反相层析除去3-氨基丙基化合物的盐，得到了纯的标题化合物(182mg，33%)。
纯度98.3%(HPLC 300nm); UV(H2O)λmax300(7900); IR(液体石蜡)νmax1755和1585cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.34-4.21(1H，m，H-1′)，4.268(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝6.8Hz，H-5)，3.408(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝6.5Hz，H-6)，3.47-3.38(1H，m，H-4)，3.23-2.91(4H，m，CH2NH2，CH2S)，2.89-2.80(2H，m，CH2CN)，1.92-1.50(4H，m，CH2CH2)和1.334ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 实施例42 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(3″-羟基丙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
在冰浴冷却下，将得自实施例41步骤A的(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(3″-羟基丙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(661mg，1.63mmol)在CH2Cl2(66ml)中的溶液用Pd(PPh3)4(132mg，0.110mmol)处理，然后用0.5M2-乙基己酸钠溶液(3.3ml，1.7mmol)滴加处理。将混合物搅拌50分钟，用乙醚(250ml)稀释，用0.04M pH7磷酸盐溶液(3×10ml)提取。合并水提取液，用乙醚(2×50ml)洗涤，用1M NaH2PO4缓冲水溶液将pH值降至5.9。向该混合物((4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-(2-氰基乙硫基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸的钠盐粗品)中加入30%Pd/硅藻土(660mg)，然后在5℃(冰浴，初始温度;最终温度为15℃)下和45-50psi氢压下在帕尔氢化器上振荡1小时。滤除催化剂，用水(2×10ml)洗涤。水溶液通过μ-Bondapak C18反相柱(165g，H2O→1%CH3CN)，得到实施例41的3-氨基丙基化合物和3-羟基丙基标题化合物的74∶26混合物(363mg)。将该混合物再次通过反相柱(180g，pH6.0，0.01M磷酸盐缓冲液)，得到两种含磷酸盐的衍生物。
通过反相层析(H2O)除去3-羟基丙基化合物的盐，冷冻干燥后，得到了粉状标题化合物(85mg，14%)。
纯度92.5%(HPLC 300nm); IR(液体石蜡)νmax1745和1695cm-1(C＝O); UV(H2O)λmax302(9600); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.34-4.21(1H，m，H-1′);4.270(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝12.0Hz，H-5)，3.65，2H，bt，J＝6.0Hz，CH2O)，3.450(1H，dd，J＝2.5Az，J＝6.0Hz，H-6);3.45-3.35(1H，m，H-4)，3.25-3.06，3.03-2.9(2H，2 组 m，SCH2)，2.88-2.80(2H，m，CH2CN)，1.94-1.41(4H，m，CH2CH2)和1.331ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例43 (4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-亚胺甲基)氨基丙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷却下，向从实施例41中得到的(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(135mg，0.400mmol)在0.04M pH 7.0磷酸盐缓冲水溶液(25ml)中的溶液中加入0.1N NaOH水溶液将pH调至8.2-8.4，分批加入甲亚胺酸苄酯盐酸盐(685mg，4.00mmol)，同时将水性混合物的pH值保持在8.0-8.4。将混合物搅拌10分钟，然后用0.1N HCl水溶液将pH值降至7.0。将该溶液通过μ-Bondapak C18反相柱(30g，H2O→1%，2%CH3CN/H2O)两次，冷冻干燥后，得到粉状标题化合物(99mg，69%)。
纯度97.8%(HPLC 300nm); UV(H2O)λmax300(9350); IR(液体石蜡)νmax1760(C＝O)，1710(C＝N)和1590cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ7.83，7.81(1H，2s，CH)，4.725(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝6.1Hz，H-5)，4.31-4.20(1H，m，H-1′)，3.50-3.35(4H，m，H-4，H-6和CH2N)，3.22-3.08和3.02-2.91(2H，2 组 m，SCH2)，2.89-2.80(2H，m，CH2CN)，1.92-1.50(4H，m，CH2CH2)和1.323ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例44 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷却下，将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(3″-叠氮基丙基)-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯〔由实施例21步骤A中制得的(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-叠氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(4.0g，11mmol)与Rh(OAc)2(100mg)在苯(300ml)中加热回流45分钟制得〕在CH3CN(100ml)中的溶液用氯磷酸二苯基酯(2.6ml，12mmol)、N，N-二异丙基乙胺(2.2ml，12mmol)和4-N，N-二甲基氨基吡啶(20mg)滴加处理。将混合物搅拌1小时，然后用4-吡啶甲硫酯(2.07g，16.5mmol)和N，N-二异丙基乙胺(3.1ml，17mmol)处理，并在5℃下保持18小时。用乙酸乙酯(300ml)稀释混合物，用冷的1M NaHCO3水溶液(1×100ml)、H2O(2×100ml)、1M NaHSO3水溶液(1×100ml)、水(2×100ml)和盐水(100ml)洗涤，干燥(MgSO4)。残留物(5g)通过闪式硅胶垫(150g，己烷/EtOAc→CH3CN)，得到油状标题化合物(3.0g，62%)。
IR(CH2Cl2)νmax3680-3600(OH)，2100(N3)，1780和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.58-8.55(2H，m，芳族 -H)，7.29-7.20(2H，m 芳族 H)，6.06-5.86(1H，m，乙烯基 -H)，5.49-5.22(2H，m，乙烯基 -H)，4.89-4.63(2H，m，烯丙基 -CH2)，4.27-4.14(1H，m，H-1′)，4.109(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.6Hz，H-5)，4.10，4.03，3.98，3.91(2H，ABq，J＝14.2Hz，CH2- 芳族)，3.43-3.22(2H，m，CH2-N)，3.200(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.6Hz，H-6)，3.10-2.98(1H，m，H-4)，2.19(1H，bs，OH)，1.91-1.43(4H，m，CH2CH2-4)和1.360(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
在冰浴冷却下，将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(3.0g，6.8mmol)在CH2Cl2(50ml)中的溶液用Pd(PPh3)4(150mg)和0.5M2-乙基己酸钠的乙酸乙酯溶液(14ml，7mmol)处理。将混合物搅拌60分钟，然后用己烷/乙醚(1/1)稀释，用0.05M磷酸盐缓冲水溶液(1×100ml和2×25ml)提取。合并水层，用乙醚(100ml)洗涤，然后通过μ-Bondapak C18柱(300g，H2O→5%CH3CN/H2O)，得到标题化合物(0.8g，30%); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.50-8.46(2H，m，芳族 -H)，7.50-7.20(2H，m，芳族 -H)，4.28-4.15(1H，m，H-1′)，4.19，4.11，4.03，3.95(2H，ABq，J＝14.6Hz，CH2-芳族)，4.073(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.37-3.29(3H，m，H-6和CH2N)，3.16-3.06(1H，m，H-4)，1.8-1.38(4H，2 组 m，CH2CH2-4)和1.288ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在5℃(冰浴)和45-50psi氢压下，用5%Pd/氧化铝(540mg)为催化剂，将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠(270mg，0.60mmol)在水(55ml)中的冷溶液在帕尔氢化器上振荡2.5小时。滤除催化剂，水溶液通过μ-Bondapak C18反相柱(50g，H2O→7%CH3CN/H2O)，冷冻干燥后，得到粉状标题化合物(127mg，53%); 纯度97.2%(HPLC，300nm); UV(H2O)λmax262(ε 5210)，304(ε 7950); IR(液体石蜡)νmax3600-3100(OH)，1760和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.49-8.46(2H，m，芳族 -H)，7.52-7.24(2H，m，芳族 -H)，4.28-4.16(1H，m H-1′)，4.16，4.08，4.02，3.94(2H，ABq，J＝14.6Hz，CH2-芳族)，4.076(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.5Hz，H-6)，3.20-3.10(1H，m，H-4)，3.00-2.93(2H，m，CH2N)，1.80-1.38(4H，m，CH2CH2-4)和1.292ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例45 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.6-叠氮基己酰氯 在22℃下，用30分钟时间，将草酰氯(88.0ml，1.0mmol)滴加到6-叠氮基己酸(151g，0.96mmol)〔M.Rothe和K.Gehrke，Makromol.Chem.，83，1(965);C.A.644934d〕在无水CH2Cl2(500ml)中的溶液中。2小时后，加入两滴N，N-二甲基甲酰胺，将该溶液在22℃和氮气氛下搅拌18小时。然后减压下蒸发溶剂，得到透明油状的酰氯粗品，将其照原样用于下一步反应。
IR(NaCL，压片)νmax2100(N3)和1800cm-1(C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.3-1.9(m，6H，CH2-3，4和5)，2.9(t，J＝7Hz，2H，CH2-2)和3.3ppm(t，J＝6.5Hz，2H，CH2-6). B.6-(叠氮基)硫羟己酸2-吡啶甲基酯
将2-吡啶甲硫醇(130.6g，1.04mol)在无水CH2Cl2(1.3l)中的溶液冷却至0-5℃，在1小时时间内将吡啶(85ml，1.05mol)和6-叠氮基己酰氯(179g，1.02mol)在CH2Cl2(200ml)中的溶液滴加到上述溶液中。在0-5℃下保持另外1小时后，有机相用水、饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到244g(90%)透明油状的硫酯，将其照原样用于下一步反应中。
IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)和1680cm-1(硫酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.3-1.8(m，6H，CH2-3，4，和5)，2.6(t，J＝7.34Hz，2H，CH2-2)，3.25(t，J＝6.7Hz，2H，CH2-6)，4.25(s，2H，SCH2)，7.16(m，1H，吡啶的H-5)，7.33(d，J＝7.8Hz，1H，吡啶的H-3)，7.62(m，1H，吡啶的H-4)和8.53ppm(m，1H，吡啶的H-6). C.6-(叠氮基)硫羟己酸2-吡啶甲基酯的O-叔丁基二甲基硅基醚
将6-(叠氮基)硫羟己酸2-吡啶甲基酯(244g，0.92mol)在1l无水CH2Cl2中的溶液冷却至-10℃，先用三乙胺(260ml，1.86mol)处理，接着在40分钟内向其中滴加三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯(318ml，1.38mol)。将混合物的温度升至22℃，搅拌3小时。然后用己烷类(1.5l)稀释混合物，用冷水(2×1l)、饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。将溶液用活性炭(中性)处理，过滤，减压浓缩。用己烷类(1.5l)提取残留的黑色焦油状物，蒸发提取液，得到315g(90%)黑色油状的甲硅烷基烯醇醚粗品，将其照原样用于偶联步骤中，1H-NMR表明，该物质为E和Z异构体的1∶1混合物。
IR(NaCl，压片)νmax2090(N3)，1625和1590cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.2和0.24(2 x s，6H，SiCH3)，0.97和0.98(2 x s，9H，Si t-Bu)，1.2-1.8(m，4H，CH2-4和5)，2.0(m，2H，CH2-CH＝C)，3.17(m，2H，CH2N3)，3.95和4.03(2 x s，2H，SCH2)，4.82和4.97(2 x t，1H，J＝7.26Hz，和J＝7.58Hz，2 x 1H，CH2-CH＝C)，7.14(m，1H，吡啶的H-5)，7.26(m，1H，吡啶的H-3)，7.6(m，1H，吡啶的H-4)和8.55ppm(m，1H，吡啶的H-6). D.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-5″-叠氮基戊基〕氮杂环丁烷-2-酮
向新熔融的氯化锌(151g，1.1mol)在无水二氯甲烷(2.6l)中的冷(0-5℃)悬浮液中先加入238g(0.83mol)(3S，4R)-4-乙酰氧基-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮，然后加入6-(叠氮基)硫羟己酸2-吡啶甲基酯的O-叔丁基二甲基硅基醚粗品(315g，0.83mol)在无水二氯甲烷中的溶液。将溶液的温度缓慢升至22℃(～3小时)，再将所得的均相混合物搅拌18小时。然后将反应混合物用水、饱和NH4Cl、饱和NaHCO3、水和盐水依次洗涤。干燥(MgSO4)后，蒸发溶剂，得到494g暗色油状物，将其照原样用于下一步反应中。1H-NMR分析表明，该粗产物为1′R和1′S-戊基化合物的8∶2混合物。在硅胶上用甲苯-EtOAc(1∶1)洗脱对一小部分产物进行纯化，得到纯的白色晶状的标题化合物m.p.＝81-83℃(己烷类) UV(EtOH)λmax236(5576)和264nm(4，989); IR(KBr)νmax2100(N3)，1758(β-内酰胺的C＝O)，1718(酯的C＝O)和1680cm-1(硫酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)，δ0.04(s，6H，SiCH3)，0.85(s，9H，Sit-Bu)，0.99(d，J＝6.32Hz，3H，CH3CHO)，1.2-2.0(m，6H，戊基的CH2-2，3和4)2.79(m，1H，戊基的H-1)，3.04(宽 s，1H，氮杂环丁酮的H-3)，3.23(t，J＝6.56Hz，2H，CH2N3)，3.80(dd，JH3，H4＝2.08Hz，JH3，H1＝6.97Hz，1H，氮杂环丁酮的H-3)，4.14(m，1H，CH3CHO)4.26(s，2H，SCH2)，5.85(宽 s，1H，NH)，7.18(m，1H，吡啶的H-5)，7.32(d，J＝7.8Hz，1H，吡啶的H-3)，7.62(m，1H，吡啶的H-4)和8.5ppm(m，1H，吡啶的H-6). 分析计算值 C23H37N5O3SSi C，56.18;H，7.58;N，14.24. 实测值 C，56.25;H，7.59;N，14.10. E.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-5″-叠氮基戊基〕氮杂环丁烷-2-酮
将(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-5″-叠氮基戊基〕氮杂环丁烷-2-酮(～400g，0.83mol)在3l四氢呋喃中的溶液冷却至0℃，小心地分批加入30%过氧化氢(1l，11.6mol)进行处理，然后用2小时时间滴加2.8l 1M NaOH。将溶液在0-5℃下再搅拌2小时，然后用3N HCl(～1l)酸化至pH2.0。将反应混合物用EtOAc(2l和3×1l)提取，合并提取液用水、1M NaHSO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到暗色油状物，将油状物溶于己烷类(1l)中，用饱和NaHCO3(4×1l)提取。合并水相，冷却至0-5℃，用3N HCl酸化至pH2。收集形成的白色沉淀，用水洗涤。将湿滤饼溶于CH2Cl2中，干燥(MgSO4)，蒸发后得到114g粗产物。用乙酸乙酯和己烷类的混合物结晶，得到67.4g(21%)的纯的白色片状的标题酸;m.p.＝132-133℃。
IR(KBr)νmax3280(NH)，2500(COOH)，2110(N3)，1760(sh)，1715和1690cm-1(酸和β-内酰胺的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.06和0.07(2 x s，2 x 3H，SiCH3)，0.87(s，9H，Si t-Bu)，1.17(d，J＝6.29Hz，3H，CH3CHO)，1.4-1.8(m，6H，戊基的CH2-2，3和4)，2.64(m，1H，戊基的H-1)，3.14(m，1H，H-3)，3.29(t，J＝6.5Hz，2H，CH2N3)，3.87(dd，JH4，H3＝1.90Hz，JH4，H1＝6.22Hz，1H，H-4)，4.20(dq，JH，CH3＝6.29Hz，JH，H3＝4.04Hz，1H，CH3CHO)，和6.46ppm(s，1H，NH). 分析计算值 C17H32N4O4S C，53.10;H，8.39;N，14.57. 实测值 C，53.08;H，8.12;N，14.56. F.(3S，4R)-4-〔(1″R)-1″-(4-叠氮基丁基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮
在22℃和氮气氛下，用1，1-羰基二咪唑(31.1g，0.192mol)处理(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-5″-叠氮基戊基〕氮杂环丁烷-2-酮(67.0g，0.174mol)在无水CH3CN(1.5l)中的悬浮液，并将所得混合物搅拌2小时。然后减压浓缩所述溶液，得到油状的咪唑烷粗品IR(NaCl，压片)2100(N3)，1755(β-内酰胺的C＝O)和1730(咪唑烷的C＝O)。
将咪唑烷粗品在无水CH3CN(200ml)中的溶液加到无水的丙二酸单烯丙酯镁(87.0g，0.28mol)在苯(1.4l)中的溶液中，并将所得混合物在60-65℃下搅拌16小时。冷却反应混合物，用乙酸乙酯(1l)稀释，依次用冷水、0.1N HCl、饱和NaHCO3、水和盐水洗涤。干燥(MgSO4)后蒸发溶剂，得到80.3g油状酮酯粗品，将该粗品直接用于下一步反应。在硅胶上对一小部分粗品进行纯化，得到透明油状的纯标题化合物。1H-NMR表明，该产物为酮和烯醇形式的1∶1混合物。
IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)，1760(β-内酰胺的C＝O)和1715cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.05和0.06(2 x s，6H，SiCH3)，0.86(s，9H，Si t-Bu)，1.10和1.17(2d，J＝6.33Hz，和J＝6.28Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.1-2.3(m，1H，丁基的H-1)，1.2-2.3(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.9和2.97(2 x m，1H，氮杂环丁酮的H-3)，3.27(宽 t，2H，CH2N3)，3.54(s，氧代丙基的酮形式的CH2-3)，3.83(两个重叠 dd，1H，氮杂环丁酮的H-4)，4.17(m，1H，CH3CHO)，4.64(m，2H，烯丙基的CH2)，5.07(s，氧代丙基烯醇形式的CH-3)，5.2-5.4和5.8-6.0(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)和6.0ppm(宽 s，1H，NH). G.(3S，4R)-4-〔(1″R)-1″-(4-叠氮基丁基)-3″-烯丙氧羰基-3″-重氮基-2″-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮
将(3S，4R)-4-〔(1″R)-1″-(4-叠氮基丁基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮粗品(79g，0.169mol)在乙腈(400ml)中的溶液冷却至0-5℃，用对甲苯磺酰基叠氮(40g，0.20mol)在乙腈(500ml)中的溶液处理。然后滴加三乙胺(28.3ml，0.20mmol)(5分钟)，并将所得混合物搅拌2小时。减压下浓缩溶剂，残留物用乙醚和己烷类的1∶1混合物研制。滤集对甲苯磺酰胺结晶，蒸发滤液，得到油状的标题重氮基化合物(86g)。将该物质直接用于甲硅烷基醚的断裂反应中。
在硅胶上对部分粗产物(30g)进行纯化(9×13cm，己烷类-EtOAc，9∶1→7∶3洗脱)，得到17.5g透明油状的标题重氮基氮杂环丁酮(相应于从酸计算得到的59%收率(两步))。
IR(NaCl，压片)νmax2140(N2)，2100(N3)，1760(β-内酰胺的C＝O)，1720(酯的C＝O)和1650cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.05和0.06(2 x s，2 x 3H，Si CH3)，0.86(s，9H，t-Bu)，1.17(d，J＝6.31Hz，3H，CH3CHO)，3.04(m，1H，氮杂环丁酮的H-3)，3.25(m，2H，CH2N3)，3.84(dd，JH4，H3＝2.09Hz，JH4，H1＝5.33Hz，1H，氮杂环丁酮的H-4)，4.07(m，1H，氧代丙基的H-1)，4.17(dq，JH，CH3＝6.31Hz，JH，H3＝3.94Hz，1H，CH3CHO)，4.72(m，2H，烯丙基的CH2)，5.3-5.4和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，和5.84ppm(s，1H，NH). H.(3S，4R)-4-〔(1″R)-1″-(4-叠氮基丁基)-3″-烯丙氧基羰基-3″-重氮基-2″-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮
在24℃下，用1N HCl(100ml)处理(3S，4R)-4-〔(1″R)-1″-(4-叠氮基丁基)-3″-烯丙氧基羰基-3″-重氮基-2″-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮(17.5g，35.5mmol)在乙醇(300ml)中的溶液并在暗处搅拌16小时。用Na2CO3中和反应混合物，减压浓缩。用乙酸乙酯(500ml和250ml)提取残留的水溶液，合并有机相，用水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到固体，从乙醚-己烷类中结晶并将母液在硅胶上用乙酸乙酯纯化后，得到11.8g(88%)白色针状的标题化合物m.p.＝73-74℃。
UV(EtOH)λmax260nm(8，365); IR(KBr)νmax3350(OH)，2160(N2)，2080(N3)，1738(β-内酰胺的C＝O)，1716(酯的C＝O)和1650cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.30(d，J＝6.33Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.28(d，J＝3.8Hz，1H，OH)，3.0(dd，JH3，H4＝2.0Hz，JH3，H1＝6.97Hz，1H，氮杂环丁酮的H-3)，3.27(t，J＝6.58 Hz，2H，CH2N3)，3.8(dd，JH4，H3＝2.0Hz，JH4，H1＝6.55Hz，1H，H-4)，3.95(m，1H，氧代丙基的H-1)，4.15(m，1H，CH3CHO)，4.73(m，2H，烯丙基的CH2)，5.3-5.4和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)和6.0ppm(宽 s，1H，NH). 分析计算值 C16H22N6O5 C，50.79;H，5.86;N，22.21. 实测值 C，50.87;H，5.87;N，22.31. I.(2R，4R，5R，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯
在氮气氛下，将(3S，4R)-4-〔(1″R)-1″-(4-叠氮基丁基)-3″-烯丙氧基羰基-3″-重氮基-2″-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮(1.88g，4.97mmol)在无水苯(60ml)中的溶液用辛酸铑(Ⅱ)二聚体(0.050g)处理，并加热回流(浴温90℃)20分钟。然后减压下蒸发溶剂，得到油状的标题双环酮。
IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)，1762(β-内酰胺的C＝O)和1745cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.41(d，J＝6.26Hz，3H，CH2CHO)，1.4-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.7(m，1H，H-4)，3.2-3.4(m，3H，H-6和CH2N3重叠)，4.28(dd，JH5，H6＝2.37Hz，JH5，H4＝8.15Hz，1H，H-5)，4.3(m，与H-5重叠，1H，CH3CHO)，4.65(s，1H，H-2)，4.65(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.4和5.8-6.0ppm(2 x m，2和1H，烯丙基的CH). J.(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(2R，4R，5R，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(4.97mmol)在无水CH3CN(30ml)中的溶液冷却至0-5℃，用10分钟时间同时滴加氯磷酸二苯基酯(1.40g，5.21mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.91ml，5.21mmol)。然后加入少许4-N，N-二甲基氨基吡啶晶粒，并将混合物搅拌1小时。加入另外的N，N-二异丙基乙胺(1.3ml，7.4mmol)，接着加入3-吡啶甲硫醇(0.93g，7.4mmol)。然后将反应混合物在0-5℃下搅拌4小时，最后加入乙酸乙酯(300ml)和冷水骤冷反应混合物。用pH7.0磷酸盐缓冲液和盐水洗涤有机相，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到油状物。将油状物在硅胶(3.5×10cm)上用乙酸乙酯洗脱层析，得到1.41g(62%)油状标题化合物。
IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)，1770(β-内酰胺的C＝O)和1705m-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.38(d，J＝6.26Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.1(m，1H，H-4)，3.16(dd，JH6，H5＝2.72Hz，JH6，H1＝7.33Hz，1H，H-6)，3.32(t，J＝6.0Hz，2H，CH2N3)，4.02(ABq，2H，SCH2)，4.14(dd，JH5，H6＝2.72Hz，JH5，H4＝9.56Hz，1H，H-5)，4.22(m，1H，CH3CHO)，4.75(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，7.3(m，1H，吡啶的H-5)，7.7(m，1H，吡啶的H-4)和8.5ppm(m，2H，吡啶的H-2和H-6). K.(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在22℃和氮气氛下，用四(三苯膦)钯〔O〕(0.050g)和5.4ml(2.7mmol)0.5M2-乙基己酸钾的乙酸乙酯溶液处理(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.12g，2.45mmol)在乙酸乙酯(40ml)中的溶液。20分钟后，用冷水(3×20ml)提取反应混合物，合并水相，将水相保持在减压下以除去痕量有机溶剂。然后在0-5℃和45psi氢压下用5%Pd/氧化铝(1.2g)将水相氢化1.5小时(初始pH6.8，最终pH9.6)。加入20ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液后，滤出催化剂，滤液在反相硅胶(μ-Bondapak C18，3×14cm)上层析，用0-10%乙腈水溶液梯度洗脱，冷冻干燥后，得到0.489g(51%)的白色非晶形粉状的标题化合物〔α〕22D-3.5°(c1.0，H2O); HPLC纯度98.7%，μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速1ml/分，UV检测器300nm，保留时间9.6分钟; UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax268(5740)和306nm(8810); IR(KBr)νmax1755(β-内酰胺的C＝O)和1585cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.29(d，J＝6.33Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.96(t，J＝7.6Hz，2H，CH2N3)，3.15(m，1H，H-4)，3.29(dd，JH6，H5＝2.54Hz，JH6，H1＝6.36Hz，1H，H-6)，4.07(ABq，JAB＝14.2Hz，Δν＝24.3Hz，2H，SCH2)，4.07(与SCH2重叠，1H，H-5)，4.22(m，1H，CH3CHO)，7.44(dd，JH5，H6＝4.95Hz，JH5，H4＝7.9Hz，1H，吡啶的H-5)，7.88(m，1H，吡啶的H-4)，8.43(dd，JH6，H5＝4.95Hz，JH6，H4＝1.52Hz，1H，吡啶的H-6)和8.52ppm(d，JH2，H4＝1.75ppm，1H，吡啶的H-2). 实施例46 (4R，5S，6S)-4-(4″-N-亚胺甲基氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
用1M NaOH将得自实施例45的(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.175g，0.45mmol)在冷(0-5℃)水(15ml)中的溶液的pH值调至8.5。然后用10分钟时间分小批加入甲亚胺酸苄酯盐酸盐(0.38g，2.2mmol)，同时用1M NaOH将pH值保持在8-8.5。在0-5℃下保持另外20分钟后，加入20ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液，并用EtOAc(20ml)洗涤混合物。然后将水相保持在减压状态下以除去痕量有机溶剂。在反相硅胶(μ-Bondapak C18，2×14cm)上用0-5%的乙腈水溶液为梯度洗脱剂对水相层析两次。对UV活性级分进行冷冻干燥，得到0.120g(64%)白色非晶形固状的标题化合物〔α〕24D-3.2°(c0.5，H2O); HPLC纯度99%，μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，10% CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速2ml/分，UV检测器300nm，保留时间6.44分钟。
UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax266(6，300)和304nm(9，600); IR(KBr)νmax1755β-内酰胺的C＝O，1715和1590cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.28(d，J＝6.34Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.2(m，3H，H-6和CH2NH2)，4.07(与SCH2重叠，1H，H-5)，4.07(ABq，JAB＝14.3Hz，Δν＝23.5Hz，2H，SCH2)，4.22(m，1H，CH3CHO)，7.44(m，1H，吡啶的H-5)，7.79(s，1H，CH＝NH)，7.89(m，1H，吡啶的H-4)，8.43(m，1H，吡啶的H-6)和8.52ppm(m，1H，吡啶的H-2). 实施例47 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-(3-氰基丙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在-15℃和氩气氛下，用5分钟时间将氯磷酸二苯酯(1.4ml，6.75mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.2ml，6.9mmol)同时滴加到(4R，5R，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(6.46mmol，由实施例2步骤E中制得的3.0g，6.46mmol重氮基前体环化制得)在无水乙腈(50ml)中的溶液中。然后加入少许4-N，N-二甲基氨基吡啶晶粒，并用30分钟将混合物的温度缓慢升至0-5℃。加入N，N-二异丙基乙胺(1.2ml，6.9mmol)和4-巯基丁腈(1.31g，13.0mmol)〔由4-乙酰硫基丁腈的四氢呋喃水溶液经碱性水解得到(U.S.3，223，585)〕，并将混合物在0-5℃下搅拌4小时，然后在-15℃下搅拌过夜。用乙酸乙酯(300ml)稀释反应混合物，用水、1M NaHSO3、饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到油状物。将油状物在硅胶(5×15cm)上层析，用EtOAc/甲苯(1∶9)洗脱，得到2.62g(78%)的棕色油状的标题化合物。
IR(NaCl，压片)νmax2250(CN)，2100(N3)，1775(β-内酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O). 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.10(s，6H，SiCH3)，0.90(s，9H，Si-t-Bu)1.31(d，3H，J＝6.11Hz，CH3CHO)，1.7-2.12(m，4H，CH2-4和CH2CH2-CN)，2.4-3.12(m，SH，CH2-S，CH2CN和H-6)，3.32-3.7(m，3H，CH2N3和H-4)，4.16(dd，J4-5＝9.6Hz，J5-6＝2.70Hz，1H，H-4)，4.21(dd，J6-8＝7.47Hz，J8-9＝6.2Hz，CH3CHO)，4.75(m，2H，烯丙基的CH2)，5.20-6.50和5.96(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在0-5℃和氩气氛下，将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(2.48g，4.77mmol)在无水THF(75ml)中的溶液先用乙酸(1.64ml，28.6mmol)处理，然后用14.9ml(14.8mmol)的1M氟化四丁铵四氢呋喃溶液处理。将该溶液在5℃下储存4.5天。然后用EtOAc稀释反应混合物，用饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到油状物。将油状物在硅胶(5×15cm)上用甲苯/EtOAc(9∶11)洗脱层析，得到0.91g(37%，基于重氮基氮杂环丁酮计算的收率)黄色油状的标题化合物。
IR(NaCl，压片)νmax3500(OH)，2250(CN)，2100(N3)，1775β-内酰胺的C＝O和1705cm-1(羧酸酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.40(d，3H，J＝6.21Hz，CH3CHO)，1.6-2.15(m，4H，CH2CH2CN和CH2-4)，2.55(m，2H，CH2CN)，2.85-3.09(m，2H，SCH2)，3.18(dd，1H，J6-8＝7.84Hz，J5-6＝2.66Hz，H-6)，3.37-3.67(m，3H，H-4和CH2N3)，4.26(m，与H-5重叠，1H，CH3CHO)，4.26(dd，J4，5＝9.70Hz，J5-6＝2.61Hz，1H，H-5)，4.78(m，2H，烯丙基的CH2)，5.24-5.30和5.96(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
在0-5℃和氩气氛下，用四(三苯膦)钯〔O〕(123mg)和4.9ml(2.44mmol)0.5M2-乙基己酸钠的乙酸乙酯溶液处理(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(900mg，2.22mmol)在无水CH2Cl2(47ml)中的溶液。然后加入190ml 0.1M磷酸盐缓冲液，分离有机层。有机相再用50ml水提取两次，合并水层，减压除去有机溶剂。在反相硅胶(Bondapak C-18，7×10.5cm)上用0-7%乙腈水溶液梯度洗脱层析后，将UV活性级分冷冻干燥，得到580mg(66%)标题化合物，其中混有少量的2-乙基己酸钠。将该物质直接用于下一步反应。
IR(NaCl，压片)νmax2250(CN)，2105(N3)，1750(β-内酰胺的C＝O)和1600(羧酸盐的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.31(d，J＝6.40Hz，3H，CH3CHO)，1.71-2.01(m，4H，CH2CH2CN和CH2-4)，2.73和2.74(2t，J＝6.94和J＝7.04，2H，CH2CN)，2.80-3.19(m，2H，SCH2)，3.35-3.67(m，4H，CH2N3，H-4和H-6)，4.29-4.42(m，2H，H-5和CH3CHO). D.(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃和45psi氢压下，用250mg 5% Pd/氧化铝将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠(250mg，0.64mmol)在水中的溶液氢化1小时。滤出催化剂，滤液在反相硅胶(Bondapak C-18，7×10.5cm)上用水为洗脱剂层析，将UV活性级分冷冻干燥，得到18mg(8%)的浅黄色非晶形固状的标题化合物(其中混有少量的2-乙基己酸钠)和129mg(59%)的灰白色非晶形粉状的纯标题化合物。
HPLC纯度97%，μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，2% CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速1ml/分，UV检测器302nm，保留时间5.24分钟。
UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax302nm(5982); IR(KBr)νmax2250(CN)，1760β-内酰胺的C＝O和1590cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.75-2.30(m，4H，CH2CH2CN和CH2-4)，2.63(t，J＝7.07 Hz，2H，CH2CN)，2.69-3.19(m，4H，SCH2和CH2NH2)，3.41(m，与H-6重叠，1H，H-4)，3.44(dd，J1′-6＝6.6Hz，J5-6＝2.85Hz，H-6)，4.21-4.33(m，2H，H-5和CH3CHO). 实施例48 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叠氮基乙基)-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将如实施例2制得的(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-4-(2″-叠氮基乙基)-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(4.7g，10.76mmol)在CH3CN(50ml)中的冷(0℃)溶液先用氯磷酸二苯基酯(2.45ml，11.84mmol)处理，然后用N，N-二异丙基乙胺(2.06ml，11.84mmol)和4-N，N-二甲基氨基吡啶(10mg)处理。将混合物在0℃和氩气氛下搅拌2小时，然后向溶液中鼓入氩气泡10分钟。将烯醇磷酸酯用在CH3CN(10ml)中的4-吡啶甲硫醇(2.02g，16.15mmol)处理，然后用N，N-二异丙基乙胺(2.81ml，16.15mmol)处理，再在0℃下搅拌3小时。用EtOAc(350ml)稀释反应混合物，依次用冷的1M NaHSO3、1M NaHCO3和盐水洗涤。干燥(MgSO4)有机相，蒸发溶剂，得到糖浆状物，在用CH2Cl2填充的硅胶柱(7.5×11cm)上用CH2Cl2和EtOAc的混合物(8∶2梯度)洗脱层析，得到糖浆状标题化合物(2.28g，39%)。
1H NMR(200MHz，CDCl37.24)δ0.04(s，3H，SiCH3)，0.06(s，3H，SiCH3)，0.86(s，9H，SiC(CH3)3)，1.27(d，CH3，JCH3，1′＝6.12Hz)，1.63-1.76(m，1H，CH2)，1.93-2.05(m，1H，CH2)，3.02(dd，H-6，J5，6＝2.68Hz，J6，1′＝7.91Hz)，3.18-3.67(重叠，3H，H-4，CH2N3)，3.9-4.17(重叠，4H，CHOH，H-5，SCH2)，4.6-4.85(m，OCH2，烯丙基)，5.2-5.47(m，＝CH2，烯丙基)，5.84-6.03(m，CH＝，烯丙基)，7.29(A of A2B2，H-3，5 py，J2，3＝5.98Hz)，8.56(B of A2B2，H-2，6 py). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-叠氮基乙基)-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在氩气氛下，将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叠氮基乙基)-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(2.26g，4.16mmol)在无水THF(35ml)中的冷(0℃)溶液先用乙酸(1.43ml，24.94mmol)处理，然后用1M氟化四丁铵四氢呋喃溶液(12.47ml，12.47mmol)处理。将混合物在0-5℃下搅拌120小时，然后在0℃下用1M NaHCO3溶液(25ml，25mmol)中和。将混合物用EtOAc(3×75ml)提取，合并有机相，依次用冷的1M NaHCO3溶液、H2O和盐水洗涤，干燥(MgSO4)并蒸发溶剂后，得到粘性泡沫体。将该泡沫体在用CH2Cl2填充的硅胶(4.5×1l)上层析，先用CH2Cl2和EtOAc的混合物(50→100%EtOAc)洗脱，然后用CH3CN和EtOAc的混合物(1∶1梯度)洗脱，得到泡沫状标题化合物(1.23g，69%)。
1H NMR(200MHz，CDCl37.24)δ1.36(d，CH3，JCH3，1′＝6.23Hz)，1.64-1.79(m，1H，CH2)，1.94-2.09(m，1H，CH2)，3.09(dd，H-6，J5，6＝2.78Hz，J6，1′＝8.08Hz)，3.19-3.65(重叠，3H，H-4，CH2N3)，3.88-4.23(重叠，4H，CHOH，H-5，SCH2)，4.61-4.88(m，OCH2，烯丙基)，5.21-5.47(m，＝CH2，烯丙基)，5.85-6.04(m，CHO，烯丙基)，7.28(A of A2B2，2H，H-3，5，py，J2，3＝6.01Hz)，8.56(B of A2B2，2H，H-2，6;py). C.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-叠氮基乙基)-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
在氩气氛下，向(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-叠氮基乙基)-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.23g，2.86mmol)在CH2Cl2(25ml)中的冷(0℃)溶液中先加入Pd〔Ph3P〕4(0.3g，0.26mmol)，接着加入0.5M2-乙基己酸钠的乙酸乙酯溶液(5.73ml，2.86mmol)。将混合物在0℃下搅拌1小时，然后用水(3×25ml)提取。合并水相，使之通过μ-Bondapak C-18反相硅胶柱(4.5×11cm)，用水和CH3CN的混合物(9∶1，梯度)洗脱标题化合物，冷冻干燥后，得到蓬松固状的标题化合物(0.69g，58.5%)。
1H NMR(200MHz，D2O)δ1.29(d，CH3，JCH3，1′＝6.37Hz)，1.6-1.78(m，1H，CH2)，1.93-2.09(m，1H，CH2)，3.14-3.58(重叠，3H，H-4，CH2N3)，3.4(dd，H-6，J5，6＝2.64Hz，J6，1′＝6.22Hz)，3.96-4.28(重叠，4H，CHOH，H-5，SCH2)，7.5(A of A2B2，H-3，5，py，J2，3＝5.35Hz)，8.49(br s，B of A2B2，H-2，6，py). D.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0℃和45psi氢压下，用5%Pd/氧化铝(0.32g)将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-叠氮基乙基)-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠(0.16g，0.39mmol)在40ml 0.05M pH7磷酸盐缓冲液中的溶液氢化1小时。除去催化剂后，使滤液通过μ-Bondapak C-18反相硅胶(4.5×11cm)。用水和CH3CN的混合物(95∶5，梯度)洗脱标题化合物，冷冻干燥后，得到一蓬松固体(0.044g，31.4%)。
HPLC纯度95.9%;UV检测设置在302nm，μ-Bondapak C-18(4mm×30cm)，10% CH3CN的pH7.4磷酸盐缓冲液溶液，流速1ml/分，保留时间7.24分钟。
IR(液体石蜡)νmax1750cm-1(β-内酰胺). 1H NMR(D2O，200MHz)δ1.31(d，CH3，JCH3，1′＝6.35Hz)，1.65-1.85(m，1H，CH2)，2.04-2.22(m，1H，CH2)，3.04(t，2H，CH2NH2)，3.19(dt，H-4，J4，5＝10.05，J＝3.44Hz)，3.4(dd，H-6，J5，6＝2.8Hz，J6，1′＝6.52Hz)，3.99，4.13(AB，SCH2，Jgem＝14.39Hz)，4.11(dd，H-5)，4.24(m，H-1′)，7.46(A of A2B2，H-3，5，py，J2，3＝6.1Hz)，8.49(B of A2B2，H-2-6，py). 实施例49 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(N-吗啉基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷却下，将(2R，4R，5R，6S)-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(得自相应的(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(15.0g，27.0mmol))在CH3CN(160ml)中的溶液先用氯磷酸二苯基酯(6.2ml，30mmol)处理，然后用N，N-二异丙基乙胺(5.2ml，30mmol)和4-二甲氨基吡啶(20mg)滴加处理。将混合物搅拌1小时，用2-氰基乙硫醇(2.9g，33.8mmol)和N，N-二异丙基乙胺(5.8ml，33.8mmol)处理所得的烯醇磷酸酯。将混合物搅拌30分钟，然后以30分钟间隔用2-氰基乙硫醇(600mg，6.7mmol×2)和N，N-二异丙基乙胺(1.16ml，6.76mmol×2)处理两次。将混合物用EtOAc(400ml)稀释，用冰冷的水(3×100ml)、冰冷的1M NaHSO3水溶液(100ml)、冰冷的1N HCl水溶液(100ml)、水(100ml)、冷的1M NaHCO3水溶液(100ml)、冰冷的水(100ml×2)和盐水(100ml)洗涤，干燥(MgSO4)。将混合物通过闪式硅胶垫(250g，己烷→15%EtOAc/己烷)，得到固状的标题化合物(11.5g，71.6%); IR(净态)νmax2250(C＝N)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.05-5.85(1H，m，乙烯基 H)，5.49-5.21(2H，m，乙烯基 H)，4.9-4.55(2H，m，烯丙基 CH2)，4.27-4.18(2H，m，H-1′和H-5)，4.195(部分 H-5，d，J＝2.6Hz)，3.89-3.75(1H，m，HCH-OSi)，3.60-3.45(2H，m，H-4和HCH-OSi)，3.35-3.22，3.12-2.93(2H，2 组 m，SCH2)，3.102(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝6.3Hz，H-6)，2.70-2.60(2H，m，CH2-CN)，2.04-1.90，1.80-1.60(2H，2 组 m，CH2-4)，1.267(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.907和0.887(18H，2s，叔丁基)，0.084和0.074ppm(12H，2s，二甲基). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-羟基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷却下，将(4R，5S，6S)-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(2.0g，3.36mmol)在无水THF(20ml)中的溶液先用冰乙酸(2.2ml，40mmol)处理，接着用1M氟化四丁铵四氢呋喃溶液(20ml，20mmol)滴加处理。将混合物搅拌1小时，然后使之在5℃(冷室)下反应18小时。将混合物倒入冰冷的饱和NaHCO3(50ml)中，用乙酸乙酯(4×25ml)提取。合并有机层，用冰冷的水(25ml)、冰冷的1M NaHCO3水溶液(2×25ml)、水(2×25ml)和盐水(25ml)洗涤，干燥(MgSO4)。使混合物通过闪式硅胶垫(50g，CH2Cl2→10，20，30，40%EtOAc/CH2Cl2)，得到半固状的标题化合物(1.0g，62%)。
IR(净态)νmax3600-3200(OH)，2250(C＝N)，1770和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.03-5.86(1H，m，乙烯基 -H)，5.50-5.22(2H，m，乙烯基H)，4.80-4.66(2H，m，烯丙基CH2)，4.222(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.8Hz，H-5)，4.25-4.19(1H，m，H-1′)，3.95-3.82，3.75-3.65(2H，2 组 m，CH2O)，3.59-3.48(1H，m，H-4)，3.31-3.16，3.09-2.94(2H，2 组 m，S-CH2)，3.184(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝6.9Hz，H-6)，2.74-2.66(2H，m，CH2-CN)，2.15-1.95，1.90-1.70(2H，2 组 m，CH2-4)，1.56(1H，s，OH)，1.290(3H，d，J＝6.2Hz，CH3)，0.891(9H，s，叔丁基)和0.090ppm(6H，s，二甲基). C.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-(N-吗啉基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在干冰-丙酮浴冷却下，将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-羟基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(312mg，0.650mmol)在CH2Cl2(8ml)中的溶液用N，N-二异丙基乙胺(200μl，1.72mmol)处理，并用三氟甲磺酸酐(130μl，0.773mmol)滴加处理。将混合物搅拌30分钟，然后加入吗啉(350μl，4.01mmol)。撤去干冰浴，代之以冰浴。将混合物搅拌3小时，然后直接加到硅胶柱上层析(15g，己烷→己烷/EtOAc→CH3CN)，得到油状标题化合物(420mg，100%)。
IR(净态)νmax1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.04-5.84(1H，m，乙烯基 -H)，4.85-4.62(2H，m，烯丙基-CH2)，4.192(1H，dd，J＝2.2Hz，J＝11.8Hz，H-5)，4.29，4.26，4.20(1H，m，部分H-1′)，3.70(4H，bs，CH2OCH2)，3.35-3.16(3H，m，H-4，H-6，HCHS)，3.03-2.89(1H，m，HCHS)，2.72-2.55(2H，m，CH2CN)，2.52-2.22(6H，m，(CH2)3N)，1.98-1.86(1H，m，CH-4)，1.69-1.48(1H，m，CH-4)，1.279(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.877(9H，s，叔丁基)和0.076(6H，s，二甲基). D.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(N-吗啉基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH冷却下，将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-(N-吗啉基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(420mg，764mmol)在THF(8ml)中的溶液先用乙酸(560μl，9.78mmol)处理，然后用1M氟化四丁铵四氢呋喃溶液(4.55ml，4.55mmol)滴加处理。将混合物搅拌30分钟，然后将冰-MeOH浴换成冰浴。将混合物于冷室(5℃)中放置120小时。加入固状NaHCO3(600mg)，将混合物搅拌30分钟，然后用4块制备性TLC板(2mm，CH3CN)层析，得到纯的标题化合物(325mg，97%，Rf＝0.2)，其中只混有一些四丁基铵盐。
IR(液体石蜡)νmax3600-3200(OH)，1770和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.04-5.87(1H，m，乙烯基 H)，5.49-5.24(2H，m，乙烯基 H)，4.88-4.64(2H，m，烯丙基CH2)，4.276(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝9.8Hz，H-5)，4.3-4.1(1H，m，H-1′)，3.76-3.7(4H，bm，CH2OCH2)，3.45-3.31(1H，m，H-4)，3.269(1H，dd，J＝2.9Hz，J＝8.0Hz，H-6)，3.25-3.16，3.03-2.90(2H，2 组 m，SCH2)，2.72-2.35(8H，CH2CN，(CH2)3N)，2.1-1.9和1.8-1.6(2H，2 组 m，CH2)和1.388ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). E.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-(N-吗啉基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷却下，向(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(N-吗啉基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(321mg，0.737mmol)在CH2Cl2(6ml)中的溶液中加入Pd(PPh3)4(14mg)和0.5M2-乙基己酸钾溶液(1.5ml，0.75mmol)。撤去冰浴，将混合物搅拌1小时。加入另外的Pd(PPh3)4，继续搅拌1小时。用乙醚稀释后，用0.05M的pH7.0和pH7.4的缓冲水溶液提取。合并水提取液，用乙醚洗涤，通过反相μ-Bondapak C-18柱(H2O，2%→4%CH3CN/H2O)，冷冻干燥后，得到粉状标题化合物(179mg，61.4%)。
HPLC纯度99.7%(300nm); UV(H2O)λmax300(7900); IR(液体石蜡)νmax1750和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4271(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.8Hz，H-5)，4.4-4.22(1H，m，H-1′)，3.84-3.80(4H，m，CH2OCH2)，3.424(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.3Hz，H-6)，3.43-3.33(1H，m，H-4)，3.21-3.08，3.01-2.90(2H，2 组 m，SCH2)，2.90-2.6(8H，m，CH2CN，(CH2)3N)，2.2-2.0，1.90-1.70(2H，2 组 m，CH2)和1.336(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 实施例50 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷却下，将(2R，4R，5R，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(如实施例21中所述，从(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(1′R)-1′-(3-叠氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(2.00g，5.49mmol)制得)在CH3CN(40ml)中的溶液用氯磷酸二苯基酯(1.2ml，6.0mmol)、N，N-二异丙基乙胺(1.03ml，6.00mmol)和少量4-N，N-二甲基氨基吡啶滴加处理。将混合物搅拌30分钟，所得烯醇磷酸酯用氰基丙硫醇(693mg，6.86mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.19ml，6.90mmol)滴加处理。将混合物搅拌1小时，然后将冰-MeOH浴换成冰浴，再搅拌2小时。然后再加入氰基丙硫醇(280mg，2.74mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.480ml，2.74mmol)，接着在5℃(冷室)下搅拌18小时。加入另外的硫醇(280mg，2.74mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.480ml，2.74mmol)，继续搅拌3小时。然后，将混合物用EtOAc(100ml)稀释，用冷的1M NaHSO3水溶液(2×40ml)、水(40ml)、1N HCl水溶液(40ml)、水(40ml)、1M NaHCO3水溶液(40ml)、水(40ml)和盐水(40ml)洗涤，干燥(MgSO4)。残留物通过闪式硅胶柱(75g，EtOAc/己烷1/3→EtOAc)，得到油状标题化合物(1.33g，59%)。
IR(CH2Cl2)νmax3600-3500(OH)，2250(CN)，2100(N3)，1780和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.04-5.87(1H，m，乙烯基 -H)，5.50-5.23(2H，m，乙烯基-H)，4.89-4.63(2H，m，烯丙基CH2)，4.29-4.20(1H，m，H-1′)，4.248(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.50-3.35(2H，m，CH2-N3)，3.267(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.6Hz，H-6)，3.30-3.20(1H，m，H-4)，3.05-2.85(2H，m，SCH2)，2.59-2.51(2H，m，CH2CN)，2.06-1.93(2H，CH2CH2CH2CN)，1.93-1.57(4H，CH2-CH2-CH2N3)，1.76(1H，d，J＝3.7Hz，OH)和1.393ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷却下，将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(100mg，0.240mmol)在CH2Cl2(10ml)中的溶液先用Pd(PPh3)4(220mg，0.018mmol)处理，接着用0.5M2-乙基己酸钠的乙酸乙酯溶液(0.48ml，0.24mmol)滴加处理。将混合物搅拌1.5小时，然后用乙醚(20ml)稀释，用水(3×3ml)和0.05M pH8.0磷酸盐缓冲液(3×3ml)提取。合并水提取液，用乙醚(2×5ml)洗涤，然后在5℃(冰浴)和45-50psi氢压下用5%Pd/氧化铝(100mg)为催化剂处理1.25小时。滤除催化剂，用水(2×2ml)洗涤，水溶液通过μ-Bondapak C18柱(25g，H2O→1%，2%CH3CN/H2O)，冷冻干燥后，得到白色粉状的标题化合物(65mg，77%)。
HPLC纯度99.9%(300nm); UV(H2O)λmax302(ε 8000); IR(液体石蜡)νmax2250(CN)，1760和1595cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.34-4.32(2H，m，H-1′和H-5)，4.239，4.226(d，J＝2.6Hz，部分 H-5)，3.42-3.33(1H，m，H-4)，3.383(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.2Hz，H-6)，3.09-2.94(3H，m，CH2N和S-HCH)，2.85-2.74(1H，m，SHCH)，2.70-2.61(2H，m，CH2CN)，2.10-1.49(6H，m，CH2CH2CH2CN，CH2CH2)和1.334ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例51 (4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-亚胺甲基)氨基丙基〕-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷却下，将(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(150mg，0.420mmol)在0.04M pH7.0磷酸盐缓冲液(25ml)中的溶液先用0.1M氢氧化钠水溶液处理(提高并维持pH值在8-8.4)，然后用甲亚胺酸苄酯盐酸盐(720mg，4.2mmol)分批处理。将混合物搅拌10分钟，用0.1N HCl水溶液将溶液的pH值降至7.0。然后将混合物通过μ-Bondapak C18柱(两次，30g和60g，H2O→1%，2%，3%，4%CH3CN/H2O)，冷冻干燥后，得到粉状标题化合物(117mg，73%); 纯度(HPLC)94.4%(300nm); UV(H2O)λmax302(ε 9100); IR(液体石蜡)νmax2250(CN)，1755(C＝O)，1715(C＝N)和1590cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ7.83，7.81(1H，2s，CH)，4.34-4.22(2H，m，H-1′和H-4)，4.231(d，J＝2.9Hz，部分H-4)，3.49-3.32(4H，m，H-4，H-6和CH2N)，3.06-2.92，2.84-2.74(2H，2 组 m，SCH2)，2.70-2.61(2H，m，CH2CN)，2.10-1.47(6H，CH2CH2CH2CN，CH2-CH2)和1.323ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例52 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯
将(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙基酯(6.71mmol，按实施例45所述方法使1.54g，6.71mmol重氮基前体环化而制得)溶解在无水乙腈(40ml)中，于0-5℃，在氮气氛中，用5分钟时间同时加入氯代磷酸二苯酯(1.53ml，7.4mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.3ml，7.5mmol)处理上述溶液。然后加入少量的4-N，N-二甲基氨基吡啶晶体，并将该混合物搅拌1小时。然后先加入N，N-二异丙基乙胺(1.75ml，10.0mmol)，再加入4-巯基丁腈(1.01g，10.0mmol)〔由4-乙酰硫基丁腈经碱性水解制得(U.S.3，223，585)〕，并将该混合物在0-5℃下搅拌18小时。然后用乙酸乙酯(300ml)稀释该反应混合物，依次用水、饱和NaHCO3、pH7.0磷酸盐缓冲液及盐水洗涤，干燥(MgSO4)，蒸除溶剂得到油状物，后者经硅胶(4.5×11cm)层析纯化，用EtOAc甲苯(8∶2至1∶1)进行梯度洗脱，得到2.14g(73%)标题化合物，为油状物 IR(NaCl，压片)νmax2250(CN)，2100(N3)，1772(β-内酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.39(d，J＝6.25Hz，3H，CH3CHO)，1.4-2.1(m，8H，丁基的CH2-1，2和3以及氰丙硫基的CH2-2)，2.55(m，2H，CH2CN)，2.8-3.1(m，2H，SCH2)，3.2(dd，JH6，H5＝2.70Hz，JH6，H1＝7.22Hz，1H，H-6)，3.2(m，与H-6重叠，1H，H-4)，3.33(t，J＝6.1Hz，2H，CH2N3)，4.25(dd，JH5，H6＝2.70Hz，JH5，H4＝9.49Hz，1H，H-5)，4.75(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). B.(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮丁基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯(1.86g，4.3mmol)溶解在无水EtOAc(80ml)中，于24℃和氮气氛下，用四(三苯膦)钯〔O〕(0.10g)和9.5ml(4.75mmol)0.5M2-乙基己酸钾的EtOAc溶液处理上述溶液。30分钟后，用水(2×75ml)提取该反应混合物，合并水相，并将其在0-5℃，于45psi氢气压下用5%钯/氧化铝(2.4g)为催化剂氢化1小时。然后迅速加入40ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液(最初pH10.5，最后pH6.9)。滤出催化剂，滤液经反相硅胶(μ-Bondapak C-18，3.5×11cm)层析两次，用乙腈/水(5∶95)混合物作为洗脱剂。将有紫外吸收的级分冷冻干燥，得到0.839g(53%)标题化合物，为白色非晶形固体。
纯度(HPLC)99%(μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm)，5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液，流速为1ml/分，UV检测器300nm，保留时间7.89分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax302nm(9，528); IR(KBr)νmax2250(CN)，1755(β-内酰胺的C＝O)和1590cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.37Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.1(m，8H，丁基的CH2-1，2和3以及氰丙硫基的CH2-2)，2.64(t，J＝7.0，Hz，2H，CH2CN)，2.6-3.1(m，2H，SCH2)，3.0(t，J-7.6Hz，2H，CH2NH2)，3.3(m，与H-6重叠，1H，H-4)，3.35(dd，JH6，H5＝2.46Hz，JH6，H1＝6.39Hz，1H，H-6)，4.22(dd，JH5，H6＝2.46Hz，JH5，H4＝6.83Hz，1H，H-5)和4.26ppm(m，1H，CH3CHO). 实施例53 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯
将(4R，5R，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕-庚烷-2-羧酸烯丙基酯(5.28mmol，按实施例45所述使2.0g重氮基前体环化制得)溶解在无水乙腈(35ml)中，在0-5℃和氮气氛下，用5分钟时间同时加入氯代磷酸二苯酯(1.49g，5.5mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.97ml，5.5mmol)处理前述溶液。然后加入少量4-N，N-二甲基氨基吡啶晶体，将该溶液搅拌1小时。然后补加N，N-二异丙基乙胺(1.4ml，7.9mmol)，再加入4-吡啶甲基硫醇(1.0ml，7.9mmol)，将该混合物在0-5℃搅拌3小时，加入EtOAc(300ml)和0.2M pH7.0磷酸盐缓冲液使该反应混合物骤冷。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO4)，浓缩。残留物经硅胶(3.5×13cm)层析纯化，用EtOAc洗脱，得到1.89g(78%)标题化合物，为透明油状物 IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)，1770(β-内酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.37(d，J＝6.27Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.02(m，1H，H-4)，3.14(dd，JH6，H5＝2.65Hz，JH6，H1＝7.41Hz，1H，H-6)，3.31(t，J＝6.1Hz，CH2N3)，3.98(ABq，JAB＝14.22Hz，Δν＝15.7Hz，2H，SCH2)，4.21(m，1H，CH3CHO，4.76(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，7.27(～d，2H，吡啶的H-3)和8.57ppm(～d，2H，吡啶的H-2). B.(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕-庚-2-烯-2-羧酸
于22℃，在氮气氛下，用四(三苯膦)钯〔O〕(0.1g)和8ml(4.0mmol)0.5M的2-乙基己酸钾的EtOAc溶液处理(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕-庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯(1.80g，3.9mmol)在EtOAc(50ml)中的溶液。30分钟后，用水(3×50ml)提取反应混合物，合并水提取液，并用2.3g5%钯/氧化铝，于0-5℃，在45psi氢气压下将上述水提取液氢化1小时。然后加入50ml冷的0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液(最初pH为10.5，最终pH为6.7)，滤除催化剂。然后将滤液在反相硅胶(μ-Bondapak C-18，3×14cm)上进行层析，用梯度为0-5%乙腈的水溶液进行洗脱。
经冷冻干燥后，第一级份给出0.050g(4%)(4R，5S，6S)-4-(4″-羟基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕-庚-2-烯-2-羧酸盐(钠盐和钾盐的混合物)，为白色固体。
后续级份给出0.830g(54%)标题化合物，为白色非晶形固体〔α〕22D-9.5°(c1.0，H2O); HPLC测定的纯度97.8%(μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液，流速2ml/分，紫外检测器300nm，保留时间7.42分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax262(5，195)和304nm(8，370); IR(KBr)νmax1755(β-内酰胺的C＝O)和1600cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.29(d，J＝6.37Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.94(t，J＝7.5Hz，CH2NH2)，3.10(m，1H，H-4)，3.28(dd，JH6，5＝2.53Hz，JH6，H1＝6.30Hz，1H，H-6)，4.05(m，3H，H-5和SCH2重叠)，4.21(m，1H，CH3CHO)，7.48(～d，2H，吡啶的H-3)，和8.49ppm(～d，2H，吡啶的H-2). 实施例54 (4R，5S，6S)-4-(4″-N-亚胺甲基氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕-庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕-庚-2-烯-2-羧酸(0.318g，0.81mmol)在冷(0-5℃)水(25ml)中的溶液用1N NaOH调至pH8.5。然后，用10分钟时间分小批加入甲亚胺酸苄酯盐酸盐(0.70g，4.06mmol)，与此同时用1N NaOH将pH保持在8.5。在0-5℃下再反应20分钟后，加入20ml 0.2M pH为6.0的磷酸盐溶液使反应混合物骤冷。用EtOAc(20ml)洗涤该水溶液，然后使之在反相硅胶(μ-Bondapak C-18，3×15cm)上进行层析，采用0.01M pH7.0磷酸盐缓冲液和乙腈(0-10%)为洗脱剂。在相同的柱上用水和乙腈(10%)洗涤使有紫外吸收的级分脱盐，冷冻干燥，得到0.153g(53%)标题化合物，为白色非晶形固体;〔α〕24D-3.6°(c0.55，H2O); HPLC测定的纯度97.5%(μ-Bondapak C-18，3.9mm/30cm，15%CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液，流速1ml/分，紫外检测器300nm，保留时间5.8分钟; UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax262(5，476)和304nm(8，790); IR(KBr)νmax1750(β-内酰胺的C＝O)，1715和1600(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.27(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.1-1.7(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.11(m，1H，H-4)，3.2-3.4(m，3H，H-6和CH2NH)，4.08(m与SCH2重叠，1H，H-5)，4.08(ABq，JAB＝14.75 Hz，△ν＝23.2 Hz，SCH2)，4.21(m，1H，CH3CHOH)，7.47(m，2H，吡啶的H-3)，7.78(s，1H，CH＝NH)和8.47ppm(m，2H，吡啶的H-2). 实施例55 (4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-亚胺甲基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷却下，用0.1N NaOH水溶液处理实施例44中所述的(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.16g，0.42mmol)在0.05M pH7.0磷酸盐缓冲水溶液(30ml)中的溶液(提高并保持pH值在8.0左右)，分次加入甲亚胺酸苄酸盐酸盐(720mg，4.2mmol)。将该混合物搅拌30分钟，用1M NaH2PO4水溶液中和至pH7.0，并使之通过μ-Bondapak C-18柱(H2O→5%CH3CN/H2O)两次，得到标题化合物(76mg，47%)，为冻干粉末; 纯度96.7%(HPLC 304nm); UV(H2O)λmax262(ε 7120)，304(ε 10700); IR(液体石蜡)νmax3600-3100(OH，NH2)，1755(C＝O)，1710(C＝N)和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.48-8.44(2H，m，芳族 -H)，7.78-7.44(2H，m，芳族 H)，4.27-4.15(1H，m，H-1′)，4.14，4.07，4.00，3.93(2H，ABq，J＝Hz，CH2-芳族)，4.075(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.3Hz，H-5)，3.34-3.23(3H，m，H-5和CH2-N)，3.303，3.291(部分 H-6，d，J＝2.5Hz)，3.17-3.07(1H，m，H-4)，1.70-1.36(4H，m，CH2CH2-4)，和1.268ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 实施例56 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-4-(2″-羟基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-对硝基苄氧羰基氨基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕-庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯
将(4R，5R，6S)-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙基酯(5.41mmol，按实施例5方法使重氮基前体(3.0g，5.41mmol)环化而制得)溶解在无水乙腈(25ml)中，在0-5℃和氮气氛下，用5分钟时间同时加入氯代磷酸二苯酯(1.18ml，5.65mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.0ml，5.65mmol)处理该溶液。然后加入少量的4-N，N-二甲基氨基吡啶晶体，将该溶液搅拌90分钟。补加N，N-二异丙基乙胺(1.42ml，8.1mmol)，然后加入2-巯基乙基氨甲酸对硝基苄基酯(2.10g，8.19mmol)〔I.Shinkai等人，Synthesis，924(1980)〕，将该混合物搅拌16小时，用EtOAc(400ml)稀释，用水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压下蒸除溶剂后，将残留物在硅胶(3.5×10cm)上进行层析，用梯度为5-10%乙酸乙酯的甲苯溶液进行洗脱，得到1.75g(42%)标题化合物，为油状物 IR(NaCl，压片)νmax1772(β-内酰胺的C＝O)和1720cm-1(羧酸酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.04，0.05和0.08(3 x s，3H，3H和6H，SiCH3)，0.88(s，18H，Si t-Bu)，1.27(d，J＝6.14Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.1(m，2H，CH2CH2OTBDMS)，2.8-3.2(m，2H，SCH2)，3.10(dd，JH6，H5＝2.49Hz，JH6，H1＝6.34Hz，1H，H-6)，3.2-3.9(m，5H，H-4，CH2OTBDMS和CH2NH)，4.16(dd，JH5，H6＝2.49Hz，JH5，H4＝9.37Hz，1H，H-5)，4.23(m，1H，CH3CHO)，4.74(m，2H，烯丙基的CH2)，5.18(s，2H，对硝基苄基的CH2，5.2-5.5和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，7.5(d，J＝8.7Hz，2H，对硝基苄基的邻位H)和8.22ppm(d，J＝8.7Hz，2H，对硝基苄基的间位H). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-羟基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-对硝基苄氧基羰基氨基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯
将(4R，5S，6S)-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧乙基〕-3-〔(2-对硝基苄氧羰基氨基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯(1.75g，2.29mmol)在无水四氢呋喃(20ml)中的溶液冷却至0-5℃，在氮气氛下，先加入乙酸(1.6ml，27.5mmol)，再加入13ml(13.0mmol 1.0M 氟化四丁铵四氢呋喃溶液处理上述溶液。在5℃反应120小时后，用乙酸乙酯(200ml)稀释该反应混合物，依次用水、饱和NaHCO3、0.2M pH7.0磷酸盐缓冲液和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸除溶剂后所得残留物在硅胶(3×11cm)上进行层析，先用乙酸乙酯，再用乙酸乙酯/丙酮/乙腈(18∶1∶1)的混合物洗脱。
第一级分给出0.78g(50%)单去保护产物，(5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧乙基〕-4-(2″-羟基乙基)-3-〔(2-对硝基苄氧羰基氨基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯，为油状物。
后续级分给出0.23g(19%)标题化合物，为泡沫状物。
IR(NaCl，压片)νmax1770(β-内酰胺的C＝O)，1725和1705cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.37(d，J＝6.23Hz，3H，CH3CHO)，1.7-2.1(m，2H，CH2CH2OH)，2.8-3.2(m，2H，SCH2)，3.26(dd，JH6，H5＝2.55Hz，JH6，H1＝7.77Hz，1H，H-6)，3.3-3.9(m，5H，H-4，CH2OH和CH2NH)，4.1-4.4(m，2H，H-5和CH3CHO重叠)，4.75(m，2H，烯丙基的CH2)，5.19(s，2H，对硝基苄基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，7.5(d，J＝8.7Hz，2H，对硝基苄基的邻位H)和8.22ppm(d，J＝8.7Hz，对硝基苄基的间位H). C.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-4-(2″-羟基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕-庚-2-烯-2-羧酸
在22℃和氮气氛下，用(Ph3P)4Pd(0.050g)和4ml(2.0mmol)0.5M2-乙基己酸钾的乙酸乙酯溶液处理(4R，5S，6S)-4-(2″-羟基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-对硝基苄氧羰基氨基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯(0.99g，1.85mmol)在无水乙酸乙酯(40ml)中的溶液。30分钟后，形成沉淀，将该反应混合物冷却至0-5℃，放置2小时。然后滤出固体，真空干燥，得到1.0g浅棕色固状中间体钾盐。将该固体加到由冷却的0.2M pH7.0磷酸盐缓冲液(40ml)，四氢呋喃(20ml)和乙醚(20ml)组成的混合物中，于0-5℃和45psi氢气压下，用10%钯/活性炭将上述混合物氢化1小时。滤除催化剂，将滤液在反相硅胶(μBondapak C18，3×14cm)上层析两次，采用梯度为0-10%的乙腈水溶液进行洗脱。将第一级分冷冻干燥得到0.150g(26%)标题化合物，为白色非晶形固体。后续级分给出了0.450g部分还原的物质。第一级分在水(1ml)中重结晶，得到0.096g标题化合物，为小立方体 HPLC测得的纯度99.8%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用2%CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，UV检测器300nm，保留时间6.24分钟); UV(水，pH7.4，磷酸盐缓冲液)λmax298nm(8，510); IR(KBr)νmax1758(β-内酰胺的C＝O)，1638，1618和1580cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.42Hz，3H，CH3CHO)，1.4-2.2(m，2H，羟乙基的CH2-1)，2.9-3.8(m，7H，H-4，SCH2CH2NH2和CH2OH)，3.49(dd，JH6，H5＝2.72Hz，JH6，H1＝5.37Hz，1H，H-6)，和4.2-4.4ppm(m，2H，H-5和CH3CHO重叠). 实施例57 (4R，5S，6S)-4-〔(2″R或S)-氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸;异构体A
A.4-叠氮基硫羟戊酸(吡啶-2-基)甲基酯
冷却(5℃)下，将SOCl2(15ml)滴加到4-叠氮基戊酸(59.0g，412.2mmol)和N-甲基咪唑(33.84g，412.2mmol)在CH2Cl2(1200ml)中的溶液中。将该反应混合物在5℃搅拌1小时，并在20℃搅拌2.5小时。在冰浴中再次冷却该反应混合物，此次滴加2-巯甲基吡啶(51.6g，412.2mmol)和N-甲基咪唑(37.2g，453.4mmol)在CH2Cl2(50ml)中的溶液，滴加时间为15分钟。在5℃下搅拌15分钟后，蒸除溶剂，并以乙酸乙酯(500ml)代替之。用水(250ml)洗涤该溶液。合并有机层，用NaHCO3洗涤。最后经盐水洗涤后，将该有机溶液干燥(MgSO4)，蒸发，得到97.23g(94.2%)标题化合物。
IR(CH2Cl2)νmax2110cm-2(-N3)，1690cm-1(硫酯); 1H NMR(CDCl3)δ8.55-8.52(1H，m，吡啶 -H)，7.67-7.58(1H，m，吡啶 -H)，7.35-7.31(1H，m，吡啶 -H)，7.20-7.13(1H，m，吡啶 -H)，4.36(2H，s，CH2-S)，3.55-3.45(1H，m，CH-N3)，2.74-2.65(2H，m，CH2COS)，1.89-1.62(2H，m，CH2C-N3)，1.28(3H，d，J6.53Hz，CH3-). B.4-叠氮基-(吡啶-2-基)甲基戊酸酯的烯醇甲硅烷基醚 冷却(5℃)下，用25分钟时间，用三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯(205.3g，776.8mmol)对4-叠氮基硫羟戊酸(吡啶-2-基)甲基酯(97.2g，388.4mmol)和三乙胺(86.5g，854.5mmol)在CH2Cl2(1000ml)中的溶液进行滴加处理。将冰浴耗尽，并将该溶液在20℃下搅拌15小时。然后蒸除溶剂，代之以石油醚(1000ml)。加入冷水(500ml)振荡该溶液，并使该两相通过Celite垫。弃去水层，依次用冷水、NaHCO3水溶液、冷水和盐水洗涤该有机相。将有机溶液干燥(MgSO4)，用活性炭处理。经Celite垫过滤后，将深色的滤液再用活性炭处理两次，最后得到红色溶液。蒸掉溶剂后，得到99.4g(70.2%)红色油状标题化合物。
IR(CH2Cl2)νmax2110cm-1(-N3); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.57-8.53(1H，m，吡啶 -H)，7.67-7.58(1H，m，吡啶 -H)，7.30-7.25(1H，m，吡啶 -H)，7.18-7.11(1H，m，吡啶 -H)，5.00(0.32H，t，J7.65Hz，vinylic H)，4.85(0.68 H，t，J7.29Hz，乙烯基 -H)，4.05(0.64H，s，-SCH2)，3.98(1.36H，s，-SCH2-)，3.34(0.68H，m，CH-N3)，3.22(0.32H，m，CH-N3)，2.25-2.15(2H，m，-CH2-)，1.10(2.04H，d，J6.54Hz，H3C-)，1.08(0.96H，d，J6.53H，H3C-)，0.99(9H，2s，叔丁基)，0.25和0.22ppm(6H，2s，二甲基). C.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-3″-叠氮基丁基〕氮杂环丁烷-2-酮
在冷却(5℃)下，向熔融过的ZnCl2(33.4g，245mmol)在CH2Cl2(500ml)中的悬浮液中依次加入(3S，4R)-4-乙酰氧基-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮(70.42g，245mmol)和4-叠氮基硫羟戊酸(吡啶-2-基)甲基酯的叔丁基二甲基硅基烯醇醚(99.4g，272.6mmol)。使冰浴耗尽，同时将该混合物机械搅拌过夜(18小时)。然后蒸除溶剂，并使粘稠残留物在乙醚(500ml)和水(100ml)之间分配。弃去水相，依次用水、NaHCO3、水和盐水洗涤该有机溶液。干燥有机相(MgSO4)，用活性炭处理，过滤，蒸发。将由此得到的红色粘油(142.5g)经层析纯化(SiO2，CH2Cl2，含5%CH3CN的CH2Cl2和乙酸乙酯)，得到38.0g(32.5%)标题化合物，为C-3异构体的1∶1混合物。
IR(CH2Cl2)νmax3405(NH)，2115(-N3)，1765(β-内酰胺)，1680cm-1(CO-S); 极性较小的异构体A 1H NMR(CDCl3)δ8.56-8.52(1H，m，吡啶 -H)，7.68-7.60(1H，m，吡啶 -H)，7.33-7.26(1H，m，吡啶 -H)，7.21-7.15(1H，m，吡啶 -H)，5.83(1H，s，NH)，4.29(2H，s SCH2-)，4.15(1H，m，CH′)，3.80(1H，dd，J6.20，2.14Hz，H-4)，3.48(1H，m，CH-N3)，3.16-3.05(2H，m，H-3，H-1″)，1.96和1.44(2H，2m，-CH2″)，1.29(3H，d，J6.41，H3C-C-N3)，1.03(3H，d，J6.29，-CH3)，0.854(9H，s，叔丁基)，0.05(6H，s，Si(CH3)2). 极性较大的异构体B 1H NMR(CDCl3)δ8.54-8.52(1H，m，吡啶 -H)，7.68-7.59(1H，m，吡啶 -H)，7.36-7.26(1H，m，吡啶 -H)，7.21-7.15(1H，m，吡啶 -H)，5.85(1H，s，NH)，4.28(2H，d，J5.25Hz，S-CH2)，4.17(1H，m，CH′)，3.89(1H，dd，J2.05，6.87Hz，H-4)，3.49(1H，m，CH-N3)，3.05(1H，m，H-3)，2.85(1H，m，H-1″)，2.05和1.57(2H，2m，CH2″)，1.28(3H，d，J6.47，H3CC-N3)，1.01(3H，d，J6.32，H3C)，0.85(9H，s，叔丁基)，0.05(6H，s，Si(CH3)2. D.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-3″-叠氮基丁基〕氮杂环丁烷-2-酮
将过氧化氢(30%，27ml，314mmol)加到冷却至5℃的(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-3″-叠氮基丁基〕氮杂环丁烷-2-酮(37.5g，78.5mmol)溶液中，然后滴加1N NaOH(235.5ml，235.5mmol)。在40分钟内于10℃以下完成加料。将该混合物再搅拌30分钟，然后用浓盐酸(30ml)酸化至pH～1.0。用乙酸乙酯提取该溶液。用盐水将提取液洗涤两次，干燥(MgSO4)，蒸发。在石油醚中研制由此制得的固体，过滤收集之，得到24.0g(82.6%)标题化合物;m.p.＝123-125℃(分解)。
IR(CH2Cl2)νmax2110(-N3)，1765(β-内酰胺)，1740和1710cm-1(-CO2H). 极性较小的异构体A 1H NMR(CDCl3)δ6.35(1H，s，NH)，4.20(1H，m，CH′)，3.89(1H，dd，J2.05，5.50Hz，H-4)，3.58(1H，m，CH-N3)，3.13(1H，m，H-3)，2.95(1H，m，H-1″)，1.88和1.48(2H，2m，-CH2)，1.34(3H，d，J6.45Hz，CH3-C-N3)，1.19(3H，d，J6.26 -CH3)，0.87(9H，s，叔丁基)，0.07(6H，2s，Si(CH3)2. 极性较大的异构体B 1H NMR(CDCl3)δ6.42(1H，s，NH)，4.20(1H，m，CH′)，3.88(1H，dd，J1.94，6.42Hz，H-4)，3.55(1H，m，CH-N3)，3.15(1H，m，H-3)，2.74(1H，m，H-1″)，1.98和1.59(2H，2m，-CH2)，1.33(3H，d，J6.50Hz，H3CC-N3)，1.18(3H，d，J6.28，-CH3)，0.87(9H，s，叔丁基)，0.068(6H，2s，Si(CH3)2). E.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叠氮基丙基)-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮
将(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-3″-叠氮基丁基〕氮杂环丁烷-2-酮(3.48g，9.39mmol)和羰基二咪唑(1.70g，10.33mmol)在CH3CN中的混合物，于20℃下搅拌30分钟，然后蒸发至干，剩下泡沫状物质。
在另一只烧瓶中，回流丙二酸单烯丙酯镁盐(4.37g，14mmol)在苯(75ml)中的悬浮液，并同时用迪安-斯达克井收集残留的水。回流1.5小时后，将该溶液冷却至20℃，然后将其加到上述酰基咪唑中。将该混合物置于预热至70℃的油浴中，加热18小时。然后用等体积的乙酸乙酯稀释该混合物，依次用水、稀盐酸、水、稀NaHCO3、水和盐水洗涤。干燥有机相(MgSO4)，蒸发。粗产品经层析纯化(SiO2，先用CH2Cl2，然后用梯度为5-10%CH3CN的CH2Cl2溶液洗脱)，得到3.37g(79.3%)油状标题化合物，后者经放置固化。
IR(CH2Cl2)νmax2115(-N3)，1765，1715cm-1(C＝O) 极性较小的异构体A 1H NMR(CDCl3)δ4.6-6.0(5H，烯丙基类型)4.18(1H，m，H-1′)，3.80-3.85(1H，m，H-4)，3.62(1H，d，-CHC＝O)，3.46(1H，m，CH-N3)，3.27(0.6H，m，H-1″)，2.99和2.93(1H，m，H-3)，2.55(0.4H，m，H-1″)，1.93和1.41(2H，2m，-CH2C-N3)1.32和1.31(3H，2d，J6.45，6.40Hz，CH3CN3)，1.19和1.12(3H，2d，J6.27，6.29Hz，-CH3)，0.87(9H，s，叔丁基)，0.07和0.06(6H，2s，Si(CH3)2). 极性较大的异构体B 1H NMR(CDCl3)δ4.6-6.0(5H，烯丙基类型)4.17(1H，m，H-1′)，3.84(1H，dd，J2.1，5.35Hz，H-4)，3.63(1H，d，CH2CO)3.48(1H，m，CHN3)，3.07(0.6H，m，H-1″)，2.93(1H，m，H-3)，2.0和1.6(2H，2m，CH2CN3)，1.27和1.32(3H，2d，J6.5Hz，CH3CN3)1.09和1.18(3H，2d，J6.25Hz，CH3)，0.87(9H，s，叔丁基)，0.06(6H，2s，Si(CH3)2). F.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叠氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮
将对甲苯磺酰氯(442mg，2.32mmol)、叠氮化钠(154mg，2.37mmol)和氯化四丁铵(12mg)在CH3CN(15ml)中的混合物在20℃搅拌4小时。然后将该混合物冷却至5℃，加入在极少量CH3CN中的(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叠氮基丙基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(953mg，2.11mmol)，然后滴加三乙胺(235mg，2.32mmol)。将该反应混合物在5℃搅拌1.5小时，然后蒸发。将残留物溶于乙醚中，用水和盐水洗涤。干燥有机相(MgSO4)，蒸发后剩下软固体。该物质在石油醚中研制，滤出不溶解的对甲苯磺酰胺(74.3%)。蒸发滤液，得到一黄色粘稠油状物，后者经层析(SiO2，先用CH2Cl2，再用含5%CH3CN的CH2Cl2洗脱)纯化，得到825mg(81.7%)粘油状标题化合物。
IR(CH2Cl2)νmax2125(＝N2)，2118(-N3)，1765(β-内酰胺)，1713cm-1(-CO2-); 极性较小的异构体A 1H NMR(CDCl3)δ4.7-6.0(5H，烯丙基类型)4.31(1H，m，H-1″)，4.16(1H，m，H-1′)，3.81(1H，dd，J2.08，4.90Hz，H-4)，3.38(1H，m，CH-N3)，3.05(1H，m，H-3)，2.69和1.39(2H，2m，CH2-CN3)，1.28(3H，d，J6.42Hz，H3CCN3)，1.18(3H，d，J6.29Hz，-CH3)，0.86(9H，s，叔丁基)，0.064和0.052(6H，2s，Si(CH3)2). 极性较大的异构体B 1H NMR(CDCl3)δ4.7-6.0(5H，烯丙基类型)4.15(2H，m，H-1′，H-1″)，3.84(1H，m，H-4)，3.45(1H，m，CH-N3)，3.05(1H，m，H-3)，2.10和1.5(2H，2m，CH2C-N3)，1.27(3H，d，J6.43Hz，CH3-CN3)，1.17(3H，d，J6.27Hz，-CH3)，0.87(9H，s，叔丁基)，0.064和0.053(6H，2S，Si(CH3)2). G.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叠氮丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮
冷却(5℃)下，用4N HCl(0.52ml，1.72mmol)处理(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叠氮丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(825mg，1.72mmol)在CH3CN(10ml)中的溶液。将该反应混合物在5℃搅拌3.5小时，然后在20℃搅拌1小时。继之加入饱和NaHCO3(3ml)使反应骤冷。先用乙酸乙酯稀释，然后用水和盐水(2次)洗涤该混合物。干燥有机层(MgSO4)，蒸发。粗产物经硅胶层析纯化，先用CH2Cl2，再用乙酸乙酯洗脱，得到554mg(88.4%)黄色油状标题化合物。未分离两种异构体化合物; IR(CH2Cl2)νmax3600(-OH)，3400(NH)，2145(＝N2)，2115(-N3)，1763(β-内酰胺)，1713(C＝O). 1H NMR(CDCl3)δ4.7-6.0(5H，烯丙基类型)，4.12(2H，m，H-1′和H-1″)，3.81(1H，m，H-4)，3.45(1H，m CH-N3)，3.05(1H，m，H-3)，2.05和1.55(2H，2m，CH2CN3)，1.30(6H，几个峰，2-CH3). H.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯
将辛酸铑二聚体(55mg)在C6H6(110ml)中的悬液放在预热130℃的油浴中，回流30分钟。然后加入(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叠氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(2.0g，5.49mmol)。在剧烈回流下25分钟后完成环化反应。蒸除溶剂，代之以CH3CN(55ml)。用氯代磷酸二苯酯(1.6g，6mmol)，N，N-二异丙基乙胺(0.78g，6mmol)和催化量的4-N，N-二甲氨基吡啶处理上述溶液。在5℃反应15分钟后，反应完成。用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水和盐水洗涤。干燥(MgSO4)后，蒸发有机相，粗品经层析(SiO2/Et2O)纯化，得到1.63g(52.0%)磷酸烯醇酯。
将纯化过的烯醇溶解在冷的(5℃)DMF(16ml)中，用2-吡啶甲基硫醇(465mg，3.72mmol)和N，N-二异丙基乙胺(481mg，3.72mmol)处理上述溶液。将该反应混合物在5℃搅拌17小时，再在20℃搅拌24小时。然后用乙酸乙酯(100ml)稀释该溶液，依次用冷盐水(3×50ml)，10%NaHSO3(2×25ml)，水和盐水洗涤。干燥(MgSO4)有机相，蒸发后留下棕色粘油。经层析(SiO2/冷Et2O)纯化、分离，得到标题化合物的2个异构体，470mg(37%)极性较小的异构体A和325mg(25.6%)极性较大的异构体B 极性较小的异构体A IR(CH2Cl2)νmax3600(-OH)，2115(-N3)，1775(β-内酰胺)，1710cm-1(-CO2-); 1H NMR(CDCl3)δ8.55(1H，m，Ar-H)，7.66(1H，m，Ar-H)，7.34(1H，m，Ar-H)，7.19(1H，m，Ar-H)，4.6-6.0(5H，烯丙基类型)，4.19(2H，ABq，J13.8Hz，S-CH2)，4.16-4.24(2H，m，H-1′，H-5)，3.87(1H，m，CH-N3)，3.65(1H，m，H-4)，3.05(1H，dd，J2.70，7.92Hz，H-6)，1.6-2.0(2H，2m，CH2CN3)，1.39(6H，d，J6.15Hz，2-CH3). 极性较大的异构体B IR(CH2Cl2)νmax3600(-OH)，2115(-N3)，1772(β-内酰胺)，1710cm-1(-CO2-); 1H NMR(CDCl3)δ8.51(1H，m，Ar-H)，7.64(1H，m，Ar-H)，7.37(1H，m，Ar-H)，7.21(1H，m，Ar-H)，4.6-6.10(5H，烯丙基类型)，4.22(1H，m，H-1′)，4.14(1H，dd，J2.66，9.60Hz，H-5)，4.11(2H，ABq，J14.18Hz，-SCH2)，3.75(1H，m，CH-N3)，3.62(1H，m，H-4)，3.32(1H，dd，J2.70，7.32，H-6)，1.6-2.0(2H，2m，-CH2C-N3)，1.39(3H，d，J6.42Hz，-CH3)，1.38(3H，d，J6.25Hz，-CH3). I.(4R，5S，6S)-4-〔(2″R或S)-叠氮基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠;异构体A
在5℃下，用0.5M乙基己酸钠(2.5ml，1.24mmol)和(PPh3)4Pd(131mg，0.113mmol)处理(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯(500mg，1.13mmol，步骤H中极性较小的异构体A)在CH2Cl2(50ml)中的溶液。搅拌30分钟后，用乙醚(100ml)稀释该溶液，用0.04M缓冲液(pH7.0，3×15ml)提取。用乙醚洗涤水提取液，在反相SiO2(微粒形硅胶)上进行层析，先用水，再用含5-15%CH3CN的水洗脱。合并适当的级分，冷冻干燥，得到180mg(38.9%)标题化合物; 1H NMR(D2O)δ8.50(1H，m，Ar-H)，7.89(1H，m，Ar-H)，7.4-7.6(2H，2m，2 Ar-H)，4.26-4.06(2H，m，H-1′，H-5)，4.18(2H，ABq，J14.09，S-CH2)，3.6(1H，m，CH-N3)，3.35(2H，m，H-6，H-4)，1.8和1.56(2H，2m，CH2C-N3)，1.35(3H，d，J6.71Hz，-CH3)，1.32(3H，d，J6.65Hz，-CH3). J.(4R，5S，6S)-4-〔(2″R或S)-氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸;异构体A
将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠(175mg，0.425mmol，步骤Ⅰ中极性较小的异构体A)在0.05M磷酸盐缓冲液(pH6.0，60ml)中的溶液，在30%Pd/硅藻土(350mg)存在下，于45psi氢气压下，在5℃进行氢化。75分钟后，补加催化剂(100mg)，然后再继续还原30分钟。滤出催化剂，将滤液在反相SiO2(微粒形硅胶)上层析，先用水，再用含5%CH3CN的水洗脱。将适宜的级分冷冻干燥，得到50mg(31.2%)标题化合物;异构体A; UV(H2O)λmax266(4093)，300(3945); IR(液体石蜡)νmax1755(β-内酰胺)，1595cm-1(-CO2-); 1H NMR(D2O)δ8.46(1H，m，Ar-H)，7.84(1H，m，Ar-H)，7.46-7.29(2H，m，2 Ar-H)，4.24-4.01(4H，m，H-1′，H-5，-SCH2)，3.17-3.46(3H，m，H-4，H-6，CH-N-)，1.4-2.0(2H，2m，CH2C-N)，1.31(3H，d，J6.53Hz，-CH3)，1.29(3H，d，J6.31Hz，-CH3). 实施例58 (4R，5S，6S)-4-〔(2″S或R)-氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸;异构体B
A.(4R，5S，6S)-4-〔(2″S或R)-叠氮基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠;异构体B
在冷却(5℃)下，用0.5M乙基己酸钠(1.7ml，0.85mmol)和(PPh3)4Pd(88mg，0.08mmol)处理(4R，5S，6S)-4-〔(2″S或R)-叠氮基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶基-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(340mg，0.767mmol，由实施例57步骤H所得极性较大的异构体B)在CH2Cl2(35ml)中的溶液。搅拌30分钟后，用乙醚(70ml)稀释该溶液，并用0.04M缓冲液(pH7.0，3×10ml)提取。用乙醚洗涤水提取液，并在反相SiO2(微粒形硅胶)上进行层析，先用水，再用含5-15%CH3CN的水洗脱。合并适当的级分，冷冻干燥，得到140mg(44.4%)标题化合物; 1H NMR(D2O)δ8.48(1H，m，Ar-H)，7.88(1H，m，Ar-H)，7.49(1H，m，Ar-H)，7.40(1H，m，Ar-H)，4.02-4.27(4H，m，H-1′，H-5，SCH2)，3.67(1H，m，CH-N3)，3.43(1H，dd，J2.5，5.84，H-6)，3.15(1H，m，H-4)，1.50-1.90(2H，2m，CH2C-N3)，1.28(6H，d，J6.35Hz，2-CH3). B.(4R，5S，6S)-4-〔(2″R或S)-氨基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶基-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸;异构体B
在5℃，于40psi氢气压下，用30%Pd/硅藻土(270mg)将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶基-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠(135mg，0.328mmol，步骤A中极性较大的异构体B)在0.05M磷酸盐缓冲液(pH6.0，45ml)中的溶液氢化。65分钟后，滤出催化剂，滤液在反相SiO2(微粒形硅胶)上进行层析，先用水，再用含5%CH3CN的水洗脱。合并适当的级分，冷冻干燥，得到60mg(48.5%)标题化合物; UV(H2O)λmax268(8362)，302(9583); IR(液体石蜡)νmax1760(β-内酰胺)，1595cm-1(-CO2-); 1H NMR(D2O)δ8.46(1H，m，Ar-H)，7.83(1H，m，Ar-H)，7.47(1H，m，Ar-H)，7.36(1H，m，Ar-H)，4.01-4.25(4H，m，H-1′，H-5，SCh2)，3.40(2H，m，-CH-N，dd，J2.95，6.66，H-6)，3.14(1H，m，H-4)，1.98和1.75(2H，2m，CH2-CN)，1.35(3H，d，J6.44Hz，-CH3)，1.29(3H，d，J6.37，-CH3). 实施例59 (4R，5S，6S)-3-〔(氰基丙基)硫基〕-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将实施例50所述的(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(150mg，0.420mmol)溶解在0.04M pH7.0磷酸盐缓冲水溶液(25ml)中，在冰浴冷却下，先用0.1M NaOH水溶液处理之(使pH上升并维持在7.6-7.8)，然后再用氨基亚氨基甲磺酸(520mg，4.20mmol)处理。将该混合物搅拌2小时，用0.1N盐酸水溶液将pH调至7.1。使该混合物通过μ-Bondapak C18反相硅胶柱(45g，H2O→1%→8%CH3CN/H2O)。冷冻干燥后，得到粉末状的标题化合物(125mg，75%); 纯度98.4%(HPLC 300 nm); UV(H2O)λmax302(ε＝8230); IR(液体石蜡)νmax2250(C＝N)，1750(C＝O)，1700(C＝N)和1585cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.33-4.21(1H，m，H-1′)，4.243(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.4Hz，H-4)，3.41-3.23(3H，m，H-4和CH2-N)，3.330(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝6.3Hz，H-6)，3.06-292，2.85-2.73(2H，2 组 m，SCH2)，2.71-2.60(2H，m，CH2CN)，2.06-1.49(6H，m，CH2CH2CH2CN和CH2CH2)和1.321ppm(3H，d，6.4Hz，CH3). 实施例60 (4R，5S，6S)-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.16g，0.42mmol)〔实施例44〕溶解在0.05M pH7.0磷酸盐缓冲水溶液(30ml)中，在冰浴冷却下，先用0.1N NaOH水溶液处理之(使pH升高，并维持在7.7-8.1)。然后用氨基亚氨基甲磺酸(525mg，4.2mmol)处理之。将该混合物搅拌90分钟，用1.0M NaH2PO4水溶液中和至pH7.0，然后使之通过μ-Bondapak C18反相柱(30g，H2O→8% CH3CN/H2O)，冷冻干燥后，得到粉末状的标题化合物(85mg，57%); 纯度95.2%(HPLC，304nm); UV(H2O)λmax304(ε 8，000)，262(ε 5200); IR(液体石蜡)νmax3500-3100(OH，NH)，1755(C＝O)，1660(C＝N)和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.49-8.46(2H，m，芳族 H)，7.49-7.46(2H，m，芳族 -H)，4.25-4.16(1H，m，H-1′)，4.16，4.09，4.01，3.94(2H，ABq，J＝14.4Hz，CH2-芳族)，4.058(部分 H-5，d，J＝2.4Hz)，3.261(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝6.02Hz，H-6)，3.20-3.07(3H，m，CH2N，H-4)，1.8-1.5，1.5-1.26(4H，2 组 m，CH2CH2-4)，和1.280ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例61 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(125mg，0.37mmol)〔按实施例41制备〕溶解在0.04M pH7.0磷酸盐缓冲水溶液(25ml)中，在冰浴冷却下，加入0.1N NaOH水溶液，然后分次加入氨基亚氨基甲磺酸(458mg，3.70mmol)，与此同时，将pH维持在7.6-7.8。将该混合物在5℃搅拌2.5小时，用0.1N HCl水溶液将pH调至7.05。使该溶液通过μ-Bondapak C18柱(38g，H2O，1，2，3，4，5%CH3CN/H2O)，冷冻干燥后，得到粉末状的标题化合物(98mg，70%); 纯度98.8%(HPLC，300nm); UV(H2O)λmax300(ε 8990); IR(液体石蜡)νmax1755(C＝O)，1665(C＝N)和1585cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.34-4.21(1H，m，H-1′)，4.259(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.2Hz，H-5)，3.45-3.33(1H，m，H-4)，3.351(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝6.5Hz，H-6)，3.29-3.22(2H，m，CH2-N)，3.18-3.08，3.02-2.92(2H，2 组 m，SCH2)，2.91-2.80(2H，m，CH2CN)，1.92-1.44(4H，m，CH2CH2)和1.321ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 实施例62 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(5.28mmol，由2.0g，5.28mmol重氮基前体环化制得)溶解在无水乙腈(40ml)中，在0-5℃和氮气氛下，用5分钟时间同时加入氯磷酸二苯酯(1.2ml，5.8mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.0ml，5.8mmol)。然后加入少量的4-N，N-二甲基氨基吡啶晶体，并将该透明的混合物在同一温度下搅拌1小时。补加N，N-二异丙基乙胺(1.8ml，10.6mmol)，继之加入1-甲基-4-巯甲基-1，2，3-三唑(1.36g，10.5mmol)，将该混合物搅拌3小时。然后加入EtOAc(200ml)和冷水使反应混合物骤冷。依次用1M NaHSO3，饱和NaHCO3和盐水洗涤有机相，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂后，得到一油状物，后者经硅胶(5×10cm)层析纯化，采用在甲苯中的EtOAc(1∶1至EtOAc)进行梯度洗脱。蒸发UV活性级分，得到1.51g(62%)泡沫状标题化合物 IR(NaCl，压片)νmax3400(宽，OH)2100(N3)，1770(β-内酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.37(d，J＝6.26Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，1.92(d，J＝1.9Hz，1H，OH)，3.17(dd，JH6，H5＝2.66Hz，JH6，H1＝7.09Hz，1H，H-6)，3.33(宽 t，J＝6.2Hz，2H，CH2N3)，3.52(宽 t，J＝9.0Hz，1H，H-4)，4.07(ABq，JAB＝14.75Hz，Δν＝54.4Hz，2H，SCH2)，4.08(s，3H，三唑的CH3-1)，4.2(m，2H，H-5和CH3CHO重叠)，4.74(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(2 x m，2H和1H烯丙基的CH)和7.48ppm(s，1H，三唑的H-5). B.(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.51g，3.27mmol)溶解在无水EtOAc(75ml)中，在22℃和氮气氛下，用Pd(PPh3)4(0.075g)和7.2ml(3.6mmol)0.5M的2-乙基己酸钾在EtOAc中的溶液处理之。45分钟后，用水(2×75ml)提取该反应混合物。合并水相，并将其置于真空条件下以除去痕量的有机溶剂，然后在0-5℃，45psi氢气压下，用1.7g5%Pd/氧化铝氢化1小时(最终pH10.5)。然后加入25ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液，在硅藻土垫上滤出催化剂。减压下将滤液浓缩至一半体积，然后在反相硅胶(μ-Bondapak C18，3.5×12cm)上进行层析，用梯度为0-5%乙腈的水溶液进行洗脱，经冷冻干燥后，得到1.0g(76%)白色非晶形粉末状标题化合物 纯度(HPLC)97%(μ-Bondapak C-18，3.9×30cm，用5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，UV检测器300nm，保留时间为6.07分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax302nm(9，098); IR(KBr)νmax1755(β-内酰胺的C＝O)和1690cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.30(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.0(t，J＝7.6Hz，2H，CH2NH2)，3.23(宽 t，1H，H-4)，3.33(dd，JH6，H5＝2.52Hz，JH6，H1＝6.33Hz，1H，H-6)，4.08(s，3H，三唑的CH3-1)，4.09(ABq，JAB＝14.93Hz，Δν＝33.7Hz，2H，SCH2)，4.1(与SCH2重叠，1H，H-5)，4.24(m，1H，CH3CHO)和7.87ppm(s，1H，三唑的H-5). 实施例63 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(1-吡咯烷基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-(1-吡咯烷基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-羟基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(418mg，0.870mmol)溶解在CH2Cl2(10ml)中，在干冰-丙酮浴冷却下，先用N，N-二异丙基乙胺(410μl，3.59mmol)处理，然后滴加三氟甲磺酸酐(209μl，1.24mmol)。将该混合物搅拌30分钟，滴加吡咯烷(530μl，6.35mmol)。用冰-MeOH浴代替干冰-丙酮浴，并将该混合物搅拌2小时。将该反应混合物放在四块制备薄层层析板上进行层析(2mm，EtOAc，Rf＝0.2)，得到油状标题化合物(355mg，75.5%)。
IR(净态)νmax1780和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.05-5.85(1H，m，乙烯基 -H)，5.49-5.72(2H，m，乙烯基H)，4.85-4.63(2H，m，烯丙基-CH2)，4.3-4.13(1H，m，H-1′)，4.193(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.4Hz，H-5)，3.224(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.5Hz，H-6)，3.37-3.19(2H，m，H-4和HCHS)，3.07-2.93(1H，m，HCHS)，2.72-2.5(8H，m，CH2CN和(CH2)3N)，2.1-1.8(6H，m，CH2-4和CH2-CH2)，1.587(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.892(9H，s，叔丁基)和0.088ppm(6H，s，二甲基). B.(4R，5S，6S)-3-〔(氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(1-吡咯烷基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-(1-吡咯烷基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(355mg，0.665mmol)溶解在THF(8ml)中，在冰-MeOH浴冷却下，先用乙酸(500μl，8.73mmol)处理之，然后滴加1M氟化四丁铵在THF中的溶液(4.5ml，4.5mmol)。将该混合物搅拌30分钟，然后在冷室(5℃)放置114小时。然后加入固体NaHCO3(1g)，并将该混合物搅拌30分钟。将该混合物放在3块制备TLC板上层析(2mm，用丙酮展开两次)，得到污染有一些四丁铵盐的标题化合物(220mg，78.8%，Rf0.2); IR(净态)νmax3600-3200(OH)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.07-5.87(1H，m，乙烯基 H)，5.49-5.24(2H，m，乙烯基 H)，4.88-4.6(2H，m，烯丙基-CH2)，4.293(1H，dd，J＝3.2Hz，J＝10.4Hz，H-5)，4.17-4.02(1H，m，H-1′)，3.366(1H，dd，J＝3.2Hz，J＝9.2Hz，H-6)，3.2-2.8(9H，CH2S，(CH2)3N，H-4)，2.7-2.62(2H，m，CH2CN)，2.4-2.2(1H，m，HCH-4)，2.1-1.8(5H，m，CH2CH2，HCH-4)和1.404ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(1-吡咯烷基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷却下，将Pd(PPh3)4(20mg)和0.5M2-乙基己酸钾在EtOAc中的溶液(1.1ml，0.55mmol)加到(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(1-吡咯烷基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(220mg，0.524mmol)在CH2Cl2(8ml)中的溶液中。将该混合物搅拌30分钟后，用乙醚和0.05M pH7.0缓冲水溶液稀释。再次用0.05M pH7.4缓冲液(3×3ml)提取有机层。合并水层，用乙醚(25ml)洗涤，并使之通过μ-Bondapak C18反相柱(25g，H2O，2-4% CH3CN-H2O)，冷冻干燥后，得到粉末状的标题化合物(145mg，73%); 纯度(HPLC)97.2%(300nm); UV(H2O)λmax300(ε＝7500); IR(液体石蜡)νmax1760和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.33-4.24(1H，m，H-1′)，4.298(1H，dd，J＝2.9Hz，J＝9.3Hz，H-5)，3.43(1H，dd，J＝2.9Hz，J＝6.8Hz，H-6)，3.50-2.4(7H，m，(CH2)3N，H-4)，3.21-3.07，3.01-2.90(2H，2 组 m，CH2-S)，2.88-2.78(2H，m，CH2CN)，2.24-1.93(5H，m，CH2CH2和CH2-4)和1.336ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 实施例64 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氨甲酰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-3-〔(2-氨甲酰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在0-5℃和氮气氛下，用10分钟时间同时加入氯磷酸二苯酯(1.20ml，5.8mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.0ml，5.74mmol)处理(4R，5R，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(5.28mmol，由实施例45所述的2.0g，5.28mmol重氮基前体环化制备)在无水CH3CN(40ml)中的溶液。然后加入少量的4-N，N-二甲氨基吡啶晶粒，并将该混合物搅拌1小时。补加N，N-二异丙基乙胺(0.92ml，5.3mmol)，再加入氯代三甲基硅烷(0.67ml，5.3mmol)，并将该混合物搅拌10分钟。然后加入N，N-二异丙基乙胺(1.21ml，6.9mmol)，继之加入3-巯基丙酰胺(0.73g，6.9mmol)〔按T.Endo等在“Chemistry Letters.443(1974)”和C.M.Buess等在“J.Am.Chem.Soc.，77，6613(1955)”中所述方法制备〕在N，N-二甲基甲酰胺(2ml)中的溶液，将该溶液在0-5℃搅拌18小时。加入EtOAc(300ml)和冷水使该反应混合物骤冷。依次用饱和NaHCO3，0.2M pH7.0磷酸盐缓冲液和盐水洗涤有机相，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到一油状物，将后者用四氢呋喃(20ml)和水(5ml)稀释，并用乙酸(2ml)处理之。在22℃反应1小时，并在5℃反应18小时后，用EtOAc(300ml)稀释该溶液，并按前述方法洗涤。经干燥(MgSO4)并蒸除溶剂后，将残留物在硅胶(5×10cm)上进行层析，用梯度为0-10%乙醇的乙酸乙酯溶液进行洗脱，蒸发UV活性级分，得到1.06g(46%)油状标题酯; IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)，1770(β-内酰胺的C＝O)1710(肩峰，酯的C＝O)和1680cm-1(酰胺的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.38(d，J＝6.27Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，叠氮基丁基的CH2-1，2，3)，2.05(d，J＝2.0Hz，1H，OH)，2.53(t，J＝7 Hz，2H，SCH2CH2CONH2)，3.0-3.3(m，4H，SCH2，H-6和H-4重叠，)，3.33(t，J＝6.1Hz，2H，CH2N3)，4.26(dd，JH5，H6＝2.61Hz，JH5，H4＝9.37Hz，1H，H-5)，4.26(与H-5重叠，1H，CH3CHO)，4.75(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，5.5和5.6ppm(2 宽 s，2 x 1H，CONH2). B.(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氨甲酰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在22℃，于氮气氛下，用Pd(PPh3)4(0.074g)和0.5M的2-乙基己酸钾在EtOAc中的溶液(5.3ml，2.65mmol)处理(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-3-〔(2-氨甲酰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.06g，2.42mmol)在EtOAc(50ml)中的溶液。30分钟后，用水(2×50ml)提取该反应混合物，合并水相，并将其置于真空条件下以除去痕量的有机溶剂。然后在0-5℃，在45psi氢气压下，用1.25g5%Pd/氧化铝将上述水相氢化1小时。加入20ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液，滤出催化剂，并将滤液在反相硅胶(μ-Bondapak C-18，3.5×15cm)上层析两次，用梯度为0-5%CH3CN的水溶液进行洗脱，经冷冻干燥后，得到0.36g(40%)白色非晶形粉末状标题化合物(HPLC纯度为93%)。在相同的柱上再层析一次，用0.01M pH7.0磷酸盐缓冲液代替水洗脱，然后使产物脱盐，纯度可达99% 纯度(HPLC)99.5%(μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为0.7ml/分，UV检测器304nm，保留时间为6.96分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax302nm(8，865); IR(KBr)νmax1750(β-内酰胺的C＝O)，1670(内酰胺的C＝O)和1590cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.37Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.60(t，J＝6.4Hz，2H，CH2CONH2)，2.9-3.2(m，4H，SCH2和CH2NH2重叠)，3.4(m，2H，H-4和H-6)，4.23(dd，JH5，H6＝2.6Hz，JH5，H4＝9.15Hz，1H，H-5)和4.27ppm(m，1H，CH3CHO). 实施例65 (4R，5S，6S)-3-〔(2″-氰基乙基)硫基〕-4-(2-N-亚胺甲基氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.290g，0.89mmol)在冷(0-5℃)水(35ml)中的溶液用1M NaOH调到pH8.5，然后用10分钟时间分小批量加入甲亚胺酸苄酯盐酸盐(0.76g，4.4mmol)处理之，其间将pH维持在8-8.5(1N NaOH)。20分钟后，加入25ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液使反应混合物骤冷，并用EtOAc洗涤。将水相置于真空条件下以除去痕量的有机溶剂，然后在反相硅胶(μ-Bondapak C-18，3.5×12cm)上进行层析，先用0.01M pH7.0磷酸盐缓冲液洗脱该柱。合并UV活性级分，冷冻干燥，在相同的柱上进行脱盐，用水洗脱。冷冻干燥后，得到白色非晶形粉末状标题化合物(0.120g，38%); 纯度(HPLC)99%(μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，用1.5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，UV检测器300nm，保留时间为4.91分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax300nm(7，429); IR(KBr)νmax2250(弱CN)，1755(β-内酰胺的C＝O)1610(亚胺甲基的C＝N)和1580cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.34(d，J＝6.37Hz，3H，CH3CHO)，1.8-2.3(m，2H，氨基乙基的CH2-1)，2.8-3.2(m，4H，SCH2CH2CN)，3.45(与H-6重叠，1H，H-4)，3.47(dd，JH6，H5＝2.92Hz，JH6，H1＝6.87Hz，1H，H-6)，4.28(m，1H，CH3CHO)，4.32(dd，JH5，H6＝2.92Hz，JH5，H4＝6.68Hz，1H，H-5)，和7.85ppm(s，1H，CH＝NH). 实施例66 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷却下，将(4R，5R，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(由(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-叠氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮制得，2.0g，5.49mmol)在CH3CN(40ml)中的溶液用氯磷酸二苯酯(1.3ml，6.0mmol)，N，N-二异丙基乙胺(0.98ml，6.0mmol)和少量的4-二甲氨基吡啶处理。将该混合物搅拌40分钟，然后用2-氨甲酰氧基乙硫醇(1.33g，11.0mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.7ml，11.0mmol)处理所得到的磷酸烯醇酯。将该混合物在5℃搅拌24小时，然后再次用2-氨甲酰氧基乙硫醇(0.65ml，5.5mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.88ml，5.5mmol)处理之。再搅拌35小时后，用乙酸乙酯(200ml)稀释该混合物，依次用冷水(2×50ml)，冷1M NaHSO3水溶液(2×50ml)，水(50ml)，1N HCl水溶液(50ml)，水(50ml)，1M NaHCO3水溶液(50ml)，水(50ml)和盐水(50ml)洗涤，干燥(MgSO4)。使残留物通过硅胶垫(25g，己烷→乙酸乙酯)，得到标题化合物(1.29g，53%)，为黄色半结晶状化合物; IR(CH2Cl2)νmax3680，3600，3540，3420(OH，NH2)，2100(N3)，1775，1740和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.04-5.87(1H，m，乙烯基-H)，5.50-5.22(2H，m，乙烯基 -H)，4.88-4.63(4H，m，NH2和烯丙基-CH2)，4.37-4.10(4H，m，H-1′，CH2O和H-4)，4.276(部分 H-4，d，J＝2.7Hz)，3.49-3.35(3H，m，CH2N3和H-4)，3.247(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.5Hz，H-6)，3.8-3.09，2.97-2.63(2H，2 组 m，SCH2)，1.96-1.55(3H，m，OH和CH2CH2)和1.388ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷却下，将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(520mg，1.18mmol)在CH2Cl2(50ml)中的溶液用Pd(PPh3)4(110mg，0.09mmol)处理，然后滴加0.5M2-乙基己酸钠的乙酸乙酯溶液(2.36ml，1.18mmol)。将该混合物搅拌20分钟，用乙醚(150ml)稀释，用水(2×20ml)提取。合并水提取液，用乙醚(2×30ml)洗涤，并在帕尔氢化器中，在45-50psi氢气压下，于0℃，以5%Pd/氧化铝(500mg)为催化剂，将上述反应液振荡1小时。用1M KH2PO4水溶液将上述溶液调至pH6.9。滤除催化剂，使该水溶液通过μBondapak C18反相柱(120g，H2O→1%→3%CH3CN/H2O)两次，冷冻干燥后，得到粉末状标题化合物(155mg，35%); 纯度99.0%(HPLC，300nm); UV(H2O)λmax302(ε 10600); IR(液体石蜡)νmax1755，1710和1585cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.34-4.21(4H，m，H-1′，H-5和CH2O)，3.47-3.35(1H，m，H-4)，3.356(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.5Hz，H-6)，3.21-2.88(4H，m，CH2N，SCH2)，2.0-1.4(4H，m，CH2CH2)和1.334ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 实施例67 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(4.69mmol，按实施例2所述方法将2.18g，4.69mmol重氮基前体环化制得)溶解在无水乙腈(36ml)中，于-15℃，在氩气氛下，用氯磷酸二苯酯(1.02ml，4.9mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.87ml，5.0mmol)处理该溶液。加入少许4-N，N-二甲氨基吡啶晶体，并将该混合物在-15℃搅拌30分钟，加入N，N-二异丙基乙胺(0.87ml，5.0mmol)和1-甲基-4-巯甲基-1，2，3-三唑(1.22g，9.4mmol)，并将该混合物在-15℃搅拌过夜。用EtOAc(250ml)稀释该反应混合物，并将它与来自0.54mmol重氮基前体起始的类似试验的混合物混合。依次用水，1M NaHSO3，饱和NaHCO3和盐水洗涤所得溶液，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到一油状物，将后者在硅胶(5×15cm)上层析，用EtOAc和甲苯的混合物(7∶13)洗脱，得到1.99g(69%)棕色油状标题化合物 IR(液体石蜡)νmax2105(N3)，1775(β-内酰胺的C＝O)和1710(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.09(s，6H，SiCH3)，0.89(s，9H，Si-t-bu)，1.29(d，J＝6.14Hz，3H，CH3CHO)，1.72和2.04(2 x m，2 x 1H，CH2-4)，3.10(dd，J1′6＝7.19Hz，J5-6＝2.73Hz，1H，H-6)，3.30-3.64(m，2H，CH2N3)，3.65(ddd，J4-5＝J＝10.06Hz，J＝2.73Hz，1H，H-4)，4.01(d，Jgem＝14.62Hz，1H，CH2-S)，4.02-4.35(m，2H，H-5和CH3CHO)，4.08(s，3H，CH3-N)，4.26(d，Jgem＝14.58Hz，1H，CH2-S)，4.72(m，2H，烯丙基的CH2)，5.21-5.47和5.95(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，7.48(s，1H，三唑的CH). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.99g，3.63mmol)溶解在无水四氢呋喃(57ml)中，在0-5℃，于氩气氛下，先用乙酸(1.25ml，21.8mmol)处理，然后加入11.3ml(11.3mmol)1M氟化四丁铵四氢呋喃溶液。将该溶液在5℃下放置10天。然后用EtOAc稀释该反应混合物，用饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到一油状物，后者经硅胶(5×15cm)层析纯化，用乙腈和EtOAc的混合物(3∶97)洗脱，得到1.09g(48%，按重氮基氮杂环丁酮计收率)淡黄色泡沫固体状标题化合物 IR(NaCl，压片)νmax3490(OH)，2105(N3)，1780(β-内酰胺的C＝O)，和1710(酯的C＝O). 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.38(d，J＝6.26Hz，3H，CH3CHO)，1.78和2.02-2.18(2 x m，2 x 1H，CH2-4)，2.07(d，J＝4.42Hz，1H，OH)，3.17(dd，J1′-6＝7.71Hz，J5-6＝2.76Hz，H-6)，3.39-3.65(m 2H，CH2N3)，3.74(ddd，J4-510，40Hz，J＝10.40 Hz，J＝2.42 Hz，H-4)，3.95(d，Jgem＝14.89Hz，1H，CH2-S)，4.08(s，3H，CH3-N)，4.14-4.27(m，1H，CH3CHO)，4.21(dd，J4-5＝9.54Hz，J5-6＝2.69Hz，H-5)，4.28(d，Jgem＝15.05Hz，1H，CH2-S)，4.73(m，2H，烯丙基的CH2)，5.22-5.48和5.94(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，7.48(s，1H，三唑的CH). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(495mg，1.14mmol)溶解在无水CH2Cl2(25ml)中，在0-5℃，在氩气氛下，用Pd(PPh3)4(83mg)和2.5ml(1.25mmol)0.5M2-乙基己酸钠的EtOAc溶液处理上述溶液。然后加入50ml水，分离有机层。用水(3×15ml)再提有机相，合并水层，并在减压下除去有机溶剂。用419mg 5% Pd/氧化铝，在45psi氢气压下，将残留的水相氢化1小时。滤除催化剂，用1M NaH2PO4溶液(几滴)中和滤液。将该混合物在反相硅胶(μ-Bondapak C-18，7×11cm)上层析，用梯度0-1%的乙腈水溶液进行洗脱，然后将UV活性级分冷冻干燥，得到290mg(69%)标题化合物，为浅黄色非晶形粉末; 纯度(HPLC)97.3%(μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，用1.5% CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，UV检测器302nm，保留时间为5.82分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax302nm(6091); IR(KBr)νmax1760(β-内酰胺的C＝O)和1600(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200 Hz，D2O)δ1.31(d，J＝6.34Hz，3H，CH3CHO)，1.80和2.17(2 x m，2 x 1H，CH2-4)，3.09(t，J＝8.33Hz，CH2N3)，3.32(ddd，J4-5＝J＝10.06Hz，J＝3.06Hz，1H，H-4)，3.41(dd，J7′-6＝6.56 Hz，J5-6＝2.79Hz，H-6)，3.95-4.28(m，4H，CH2-S，CH3CHO，H-5)，4.08(s，3H，CH3-N)，7.85(s，1H，三唑的C＝O). 实施例68 (4R，5S，6S)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-4-(4″-N-亚胺甲基氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
用1M NaOH将(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.411g，1.12mmol)在水(50ml)中的溶液调至pH8.5。然后用5分钟时间分小批量加入甲亚胺酸苄酯盐酸盐(0.94g，5.4mmol)，其间，用1M NaOH将pH维持在8-8.5。20分钟后，加入40ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液，用乙酸乙酯洗涤该溶液，并将水相置于减压下除去痕量的有机溶剂。在0-5℃，将水相在反相硅胶(3.5×15cm，μ-Bondapak)上进行层析，用梯度为0-10%的乙腈，在0.01M pH7.0磷酸盐缓冲液中的溶液进行洗脱。合并UV活性级分，减压浓缩(t＜10℃)，在同样的柱上，用水和乙腈(0-10%)洗脱去盐。冷冻干燥后，得到白色非晶形粉末状标题化合物(0.224g，50%) 纯度(HPLC)99%(μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，用8%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，UV检测器304nm，保留时间为6.85分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax304nm(9，324); IR(KBr)νmax2250(CN)，1755(β-内酰胺的C＝O)，1715(亚胺甲基的C＝N)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.31Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.1(m，8H，丁基的CH2-1，2和3及氰丙基的CH2-2)，2.64(t，J＝6.9Hz，2H，CH2CN)，2.7-3.1(m，2H，SCH2)，3.35(m，4H，CH2NH，H-4和H-6重叠)，4.2-4.4(m，2H，H-5和CH3CHO重叠)和7.79ppm(s，1H，CH＝NH). 实施例69 (4R，5S，6S)-4-(4″-N，N-二甲氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
用37%W/W甲醛(0.23ml，2.8mmol)和乙酸(0.2ml，3.5mmol)处理(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.221g，0.56mmol)在冷(0-5℃)水(5ml)中的溶液。结果pH为4.0。然后立即一次加入0.071g(1.1mmol)硼氢化钠，继之用2小时时间分小批量补加0.130g(2.1mmol)。然后加入20ml 0.2M pH7.0磷酸盐缓冲液使反应混合物骤冷，在反相硅胶(μ-Bondapak C18，2×15cm)上进行层析。用梯度为0-5%的CH3CN-H2O进行洗脱，经冷冻干燥后，得到0.161g(68%)白色非晶形固体状标题化合物 纯度(HPLC)94%(μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，用10%CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1.5ml/分，UV检测器300nm，保留时间为8.19分钟); UV(水，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax266(4980)和304nm(7.540); IR(KBr)νmax1758(β-内酰胺的C＝O)和1582cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.29(d，J＝6.34Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.86(s，6H，NCH3)，3.1(m，3H，CH2N和H-4)，3.29(dd，JH6，H5＝2.54Hz，JH6，H1＝6.35Hz，1H，H-6)，4.08(ABq，JAB＝14.9Hz，Δν＝24.2Hz，2H，SCH2)，4.08(与SCH2重叠，1H，H-5)，4.22(m，1H，CH3CHO)，7.45(dd，J＝4.9Hz，和J＝7.9Hz，1H，吡啶的H-5)，7.9(m，1H，吡啶的H-4)，8.44(dd，J＝1.5Hz，和J＝4.9Hz，1H，吡啶的H-6)和8.53ppm(d，J＝1.8Hz，1H，吡啶的H-2). 实施例70 (4R，5S，6S)-4-(4″-N-亚胺甲基氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃下，向(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.296g，0.75mmol)〔按实施例62制备〕在水(30ml)中的溶液中分次加入甲亚胺酸苄酯盐酸盐(0.65g，3.8mmol)，加料时间为10分钟，与此同时用1M NaOH将pH维持在8-8.5。30分钟后，加入0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液(25ml)，用乙酸乙酯洗涤所得混合物。将水相保持在真空条件下以除去痕量的有机溶剂，然后在反相硅胶(μ-Bondapak C-18，3.5×14cm)上进行层析。先用梯度为0-8%在0.01M pH7磷酸盐缓冲液中的CH3CN洗脱该柱。减压下浓缩UV活性级分(T＜15℃)，然后再在同样的柱上进行层析，但是用水代替缓冲液。将UV活性级分冷冻干燥，得到0.21g(66%)白色非晶形粉末状标题化合物 纯度(HPLC)98%(μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，用8%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，紫外检测器304nm，保留时间为6.34分钟; UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax302nm(8，586); IR(KBr)νmax1755(β-内酰胺的C＝O)1715(亚胺甲基的C＝N)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.30(d，J＝6.36 Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.1-3.5(m，4H，H-4，H-6和丁基的CH2-4重叠)，4.08(s，3H，三唑的CH3-1)，4.09(ABq，JAB＝14.85Hz，△ν＝31.9Hz，2H，SCH2)，4.15(SCH2与CH3重叠，1H，H-5)，4.27(m，1H，CH3CHO)，7.8(宽 S，1H，CH＝NH)和7.87ppm(s，1H，三唑的H-5). 实施例71 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯
将(4R，5R，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙基酯(11.8mmol，将4.47g(11.8mmol)按实施例45所述制得的重氮基前体环化制得)在无水乙腈(50ml)中的溶液冷却至0-5℃，并用5分钟时间同时加入氯磷酸二苯酯(2.57ml，12.4mmol)和N，N-二异丙基乙胺(2.16ml，12.4mmol)处理之。1小时后，用5分钟时间，依次滴加N，N-二异丙基乙胺(2.16ml，12.4mmol)和氯代三甲基甲硅烷(1.57ml，12.4mmol)。然后再加入N，N-二异丙基乙胺(2.16ml，12.4mmol)和2-巯基乙醇(1.84g，23.5mmol)，将该混合物在0-5℃搅拌16小时。然后用乙酸乙酯(500ml)稀释该反应混合物，用冷水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂后得到一油状物，用四氢呋喃(100ml)和水(20ml)稀释，在20℃下用乙酸(2ml)处理2小时。再次用乙酸乙酯稀释该溶液，用饱和NaHCO3，0.2M pH7.0磷酸盐缓冲液和盐水洗涤。用无水MgSO4干燥后蒸掉溶剂，得到一油状物，后者经硅胶(4.5×10cm)层析，用甲苯/乙酸乙酯混合物(1∶1)洗脱，得到2.56g(52%)油状标题化合物 IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)，1765(β-内酰胺的C＝O)和1705cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.38(d，J＝6.29Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.8-3.2(m，2H，SCH2CH2OH)，3.18(dd，JH6，H5＝2.60Hz，JH6，H1＝7.18Hz，1H，H-6)，3.3(m，3H，CH2N3和H′-4重叠)，3.82(t，J＝6.0Hz，2H，SCH2CH2OH)，4.1-4.3(m，2H，H-5和CH3CHO重叠)，4.75(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). B.(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在22℃，于氮气氛下，用Pd(Ph3P)4(0.15g)和1.25g(6.9mmol)2-乙基己酸钾处理(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯(2.56g，6.2mmol)在无水乙酸乙酯(60ml)中的溶液。2小时后，用冷水(3×50ml)提取该反应混合物，合并水相，在反相硅胶(μ-Bondapak C18，3×13cm，用5%CH3CN-H2O洗脱)上进行层析。然后，在0-5℃，于45psi氢气压下，在水(200ml)中，用2.0g 5%钯/氧化铝，将中间体钾盐(1.4g)氢化45分钟。加入60ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液，然后滤出催化剂，将滤液在反相硅胶(μBondapak C18，3×13cm)上层析，用梯度为0-5%乙腈-水溶液洗脱，经冷冻干燥后，得到0.689g(32%)白色非晶形固体状标题化合物〔α〕24D+74.0°(c1.0，H2O); 纯度(HPLC)99%(μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，用pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，保留时间为9.68分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax304nm(7，616); IR(KBr)νmax1750(β-内酰胺的C＝O)和1585cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)1.33(d，J＝6.38Hz，3H，CH3CHO)1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.8-3.1(m，2H，SCH2CH2OH)，3.02(t，J＝7.6Hz，2H，CH2NH2)，3.36(m，2H，H-4和H-6 重叠)，3.77(t，J＝6.2 Hz，2H，SCH2CH2OH)，4.22(dd，JH5，H6＝2.43Hz，1H，H-5)和4.26ppm(m，与H-5重叠，1H，CH3CHO). 实施例72 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(4″-胍基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.300g，0.85mmol)〔按实施例17制备〕在冷(0-5℃)水(20ml)中的溶液用1M NaOH调至pH8，然后用5分钟分小批量加入氨基亚氨基甲磺酸(0.35g，2.8mmol)〔K.Kim等人，Tetrahedron Lett.，29，3183(1988)〕处理上述溶液。在加料期间用1M NaOH将pH维持在8-8.5，并将该pH维持2小时。然后加入10ml pH6.0 0.2M磷酸盐缓冲液，将该溶液在反相硅胶(μ-Bondapak C18，2.5×14cm)上进行层析。用梯度为0-5%的乙腈水溶液洗脱，冷冻干燥后，得到0.257g(77%)非晶形粉末状标题化合物〔α〕22D+45.5°(c1.0，H2O)。
纯度(HPLC)99%(μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，紫外检测器300nm，保留时间为11.1分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax302nm(8，676); IR(KBr)νmax2250(弱 CN)，1755(β-内酰胺的C＝O)1665(胍基的C＝N)和1685cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.39Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.8-3.3(m，4H，SCH2CH2CN)，3.22(t，J＝6.5Hz，CH2NH)，3.36(dd，JH6，H5＝2.34Hz，JH6，H1＝6.22Hz，1H，H-6)，3.4(与H-6重叠，1H，H-4)和4.2-4.4ppm(m，2H，H-5和CH3CHO重叠). 实施例73 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-胍基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
向(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.185g，0.57mmol)〔按实施例36制备〕在冷(0-5℃)水(20ml)中的溶液中用5分钟时间分小批量加入氨基亚氨基甲磺酸(0.35g，2.8mmol)〔K.Kim等人，Tetrahedron Lett.，29，3183(1988)〕，与此同时，用1M NaOH将pH维持在8-8.5。将pH维持在8-8.5之时反应1小时，然后加入5ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液使反应混合物骤冷。将该溶液在反相硅胶(μ-Bondapak C-18，2.5×14cm)上进行层析，用梯度为0-2%乙腈/水进行洗脱，将UV活性级分冷冻干燥，得到0.035g(17%)标题化合物，为白色非晶形粉末 纯度(HPLC)99%(μ-Bondapak C-18，3.9mm/30cm，用2%CH3CN/H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，UV检测器300nm，保留时间为5.98分钟)。
UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax300nm(7，483); IR(KBr)νmax2255(弱 CN)，1755(β-内酰胺的C＝O)1660(胍基的C＝N)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.34(d，J＝6.34Hz，3H，CH3CHO)，1.7-2.3(m，2H，CH2胍基乙基的CH2-1)，2.7-3.4(m，7H，SCH2CH2CN，胍基乙基的CH2-2及H-4)，3.45(dd，JH6H5＝2.69Hz，JH6，H1＝6.8Hz，1H，H-6)和4.3ppm(m，2H，H-5和CH3CHO重叠). 实施例74 (4R，5S，6S)-4-(N-亚胺甲基-4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃下，用1M NaOH将(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.205g，0.59mmol)在水(20ml)中的溶液调至pH8.5。然后分小批量加入甲亚胺酸苄酯盐酸盐(0.39g，2.27mmol)(10分钟)，与此同时用1M NaOH将pH维持在8-8.5。15分钟后，加入10ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液使反应混合物骤冷，用乙酸乙酯(20ml)洗涤。然后在反相硅胶(μBondapak C-18，2×14cm)上将水相层析，用梯度为0-2%乙腈在0.02M pH7.0磷酸盐缓冲液中的溶液作为洗脱剂。合并UV活性级分，浓缩至50ml，在同样的柱上用水代替缓冲液进行脱盐。UV活性级分经冷冻干燥后得到0.154g(69%)白色非晶形固体状标题化合物〔α〕24D+67.0°(c1.0，H2O); 纯度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用2%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，UV检测器300nm，保留时间为10.2分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax304nm(10，105); IR(KBr)νmax1750(β-内酰胺的C＝O)，1715(亚胺甲基的C＝N)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.37Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.8-3.1(m，2H，SCH2CH2OH)，3.3-3.5(m，4H，H-4，H-6和CH2NH重叠)，3.77(t，J＝6.21Hz，2H，SCH2CH2OH)，4.21(dd，JH5，H6＝2.25Hz，1H，H-5)，4.26(m与H-5重叠，1H，CH3CHO)，和7.78ppm(宽 s，1H，CH＝NH). 实施例75 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-N-甲基咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-N-甲基咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5R，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(5.28mmol，将2.0g，5.28mmol按实施例45制得的重氮基前体环化制得)溶解在无水CH3CN(40ml)中，在0-5℃，氮气氛下，用5分钟时间同时加入氯磷酸二苯酯(1.2ml，5.8mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.0ml，5.8mmol)处理之。然后加入少许4-N，N-二甲氨基吡啶晶体，并将该混合物搅拌40分钟。补加N，N-二异丙基乙胺(1.84ml，10.6mmol)，继之加入在无水CH3CN(3ml)中的5-巯基甲基-1-N-甲基咪唑(1.35g，10.5mmol)。3小时后，用乙酸乙酯稀释该反应混合物，依次用水，饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸除溶剂后，残留物在硅胶(4.5×10cm)上进行层析，用乙酸乙酯，CH3CN和丙酮的混合物(8∶1∶1至4∶3∶3)洗脱。蒸发UV活性级分，得到1.86g(76%)油状标题化合物 IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)，1770(β-内酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.38(d，J＝6.25Hz，3H，CH3CHO)，1.4-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.17(dd，JH5，H6＝2.72Hz，JH3，H4＝7.36Hz，1H，H-6)，3.2(m，1H，H-4)，3.32(t，J＝6.0 Hz，2H，CH2N3)，3.68(s，3H，咪唑的CH3-1)，4.02(ABq，JAB＝14.3Hz，Δν＝33.0Hz，2H，SCH2)，4.1-4.3(m，2H，H-5和CH3CHO)，4.74(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，6.93(s，1H，咪唑的H-4)，和7.42ppm(s，1H，咪唑的H-2). B.(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-N-甲基咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-N-甲基咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.86g，4.04mmol)溶解在乙酸乙酯(75ml)中，于22℃，在氮气氛下，用Pd(PPh3)4(0.075g)和8.9ml(4.45mmol)0.5M2-乙基己酸钾在乙酸乙酯中的溶液处理之。45分钟后，用水(2×75ml)提取该反应混合物，合并水相，并将其置于真空条件下以除去痕量的有机溶剂。在0-5℃，45psi氢气压下，用5%钯/氧化铝(2.1g)将上述水溶液氢化1小时。然后加入30ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液，滤除催化剂。将滤液在反相硅胶(μ-Bondapak C18，3.5×11cm)上进行层析，用梯度为0-8%乙腈水溶液作为洗脱剂。将UV活性级分冷冻干燥，得到0.528g(33%)标题化合物，为白色非晶形粉末〔α〕22D-22.4°(c1.0，H2O); 纯度(HPLC)97.3%(μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，用8%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，UV检测器302nm，保留时间为5.88分钟); UV(水，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax302nm(7，569); IR(KBr)νmax1755(β-内酰胺的C＝O)和1585cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.31(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.99(t，J＝7.6Hz，2H，CH2NH2)，3.22(宽 t，1H，H-4)，3.33(dd，JH6，H5＝2.56Hz，JH6，H1＝6.34Hz，1H，H-6)，3.71(s，3H，咪唑的CH3-1)，4.07(ABq，JAB＝14.8 Hz，Δν＝38.45Hz，2H，SCH2)，4.13(dd与SCH2重叠，JH5，H6＝2.56Hz，1H，H-5)，4.24(m，1H，CH3CHO)，6.94(s，1H，咪唑的H-4)和7.66ppm(s，1H，咪唑的H-2). 实施例76 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氨甲酰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(2-氨甲酰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯
将由(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-叠氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(2.00g，5.49mmol)新鲜制备的(2R，4R，5R，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙基酯在CH3CN(50ml)中的溶液用冰-MeOH浴冷却，用氯磷酸二苯酯(1.3ml，6.0mmol)，N，N-二异丙基乙胺(1.1ml，6.0mmol)和痕量4-二甲氨基吡啶(10mg)滴加处理之。将该混合物搅拌1小时，用在DMF(5ml)中的2-氨甲酰基乙硫醇(1.16g，11.0mmol)和N，N-二异丙基乙胺(2.0ml，11mmol)处理之。将该混合物在冷室中搅拌20小时。然后再次用硫醇(580mg，5.5mmol)和N，N-二异丙基乙胺处理该混合物，并搅拌反应72小时。用乙酸乙酯(200ml)稀释，依次用水(2×100ml)，1M NaHCO3水溶液(1×100ml)，水(3×100ml)和盐水(100ml)洗涤，干燥(MgSO4)。使残留物(2.6g)通过闪式硅胶柱(75g，乙酸乙酯→丙酮)，得到油状标题化合物(0.84g，36%); IR(CH2Cl2)νmax3680，3600，3520，3410(OH和NH2)，2100N3，1775，1710，1690和1675cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.03-5.89(1H，m乙烯基)，5.7，5.6(2H，bd，NH2)，5.22(2H，m，乙烯基-H)，4.9-4.6(2H，m，烯丙基-CH2)，4.266(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝7.5Hz，H-5)，3.6-3.27(3H，m，CH2N3和H-4)，3.251(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.2Hz，H-6)，3.23-2.95(2H，m，SCH2)，2.6-2.45(2H，m，CH2CON)，2.25(1H，bs，OH)，1.95-1.5(4H，m，CH2-CH2-4)和1.373ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氨甲酰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷却下，用Pd(PPh3)4处理(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(2-氨甲酰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯(0.84g，2.0mmol)在CH2Cl2(20ml)中的溶液，然后滴加0.5M2-乙基己酸钠的乙酸乙酯溶液(4.2ml，2.1mmol)。将该混合物搅拌45分钟，然后用乙酸乙酯(75ml)稀释，用冰冷的水(1×50ml和2×25ml)提取。合并水提取液，用乙醚洗涤，并在帕尔氢化器中，在5℃(冰浴)和45-50psi氢气压下，用5%Pd/氧化铝(800mg)作为催化剂将上述溶液氢化90分钟。用1M KH2PO4水溶液将上述溶液调至pH6.9。滤除催化剂，使水层通过μBondapak C18反相柱(160g，H2O→4%CH3CN/H2O)，经冷冻干燥后，得到粉末状标题化合物(340mg，48%) 纯度94.7%(304nm，HPLC); UV(H2O)λmax302(ε9260); IR(液体石蜡)νmax3600-3100(OH，NH2);1750-1665和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.35-4.21(1H，m，H-1′)，4.239(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝5.3Hz，H-5)，3.45-3.36(1H，m，H-4)，3.385(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝6.6Hz，H-6)，3.2-2.8(4H，m，CH2N和SCH2)，2.63-5.55(2H，m，CH2CO)，2.0-1.45(4H，m，(CH2)2-4)和1.331ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例77 (4R，5S，6S)-4-(4″-N-亚胺甲基氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-N-甲基咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃下，将(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-N-甲基咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.269g，0.68mmol)在水(30ml)中的溶液用1M NaOH调至pH8.5。然后分小批量加入甲亚胺酸苄酯盐酸盐(0.6g，3.49mmol)，其间用1M NaOH将pH维持在8-8.5。30分钟后，加入25ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液使反应混合物骤冷，用乙酸乙酯洗涤。然后将水相在反相硅胶(3.5×12cm)上层析，用梯度为0-8%在0.01M pH7.0磷酸盐缓冲液中的乙腈溶液为洗脱剂。合并UV活性级分，浓缩，在相同的柱上通过用水和乙腈洗脱脱盐。将UV活性级分冷冻干燥，得到白色非晶形粉末状标题化合物，0.180g(63%)〔α〕22D-23.1°(c1.0，水) 纯度(HPLC)97.6%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用8%CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，UV检测器302nm，保留时间为9.45分钟); IR(KBr)νmax1750(β-内酰胺的C＝O)，1715(亚胺甲基的C＝N)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.30(d，J＝6.34Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.2-3.5(m，4H，H-4，H-6和CH2N)，3.71(s，3H，咪唑的CH3-1)，4.08(ABq，JAB＝14.68Hz，Δν＝37.4Hz，2H，SCH2)，4.14(dd与SCH2重叠，JH5，6＝2.43Hz，JH5，H4＝9.38Hz，1H，H-5)，4.24(m，1H，CH3CHO)，6.93(s，1H，咪唑的H-4)，7.62(s，1H，咪唑的H-2)和7.79ppm(s，1H，CH＝NH). 实施例78 (4R，5S，6S)-4-(4″-胍基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.134g，0.34mmol)在15ml冷水(pH6.4)中的溶液用1M NaOH调至pH8.0。然后用5分钟时间，分小批量加入0.170g(1.36mmol)氨基亚氨基甲磺酸〔K.Kim等人，Tet Lett.，29，3183(1988)〕，其间用1M NaOH将pH维持在8。然后以30分钟的间隔，分三次补加氨基亚氨基甲磺酸(3×0.050g)，将所得混合物(含有一些不溶物)在0-5℃下搅拌3小时。在整个反应过程中用1M NaOH将pH维持在8。然后加入15ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液，并将所得均相溶液在反相硅胶(μBondapak C18，2.5×14cm)上进行层析，用含0-10%乙腈的水溶液进行梯度洗脱，经冷冻干燥后，得到0.103g(69%)白色非晶形粉末状标题化合物。该冷冻干燥物仅微溶于水 纯度(HPLC)99%(μBondapak C-18，3.9mm×30cm，用10%CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1.5ml/分，UV检测器300nm，保留时间为7.47分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax262(5，360)和304nm(8，765); IR(KBr)νmax1752(β-内酰胺的C＝O)，1665(胍基的C＝N)，1600cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.27(d，J＝6.33Hz，3H，CH3CHO)，1.1-1.7(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.1(m，1H，H-4)，3.15(t，J＝6.4Hz，2H，CH2N)，3.26(dd，JH6，H5＝2.45Hz，JH6，H1＝6.06Hz，1H，H-6)，4.05(ABq，JAB＝14.76Hz，Δν＝22.9Hz，2H，SCH2)，4.05(与SCH2重叠，1H，H-5)，4.21(m，1H，CH3CHO)，7.47(d，J＝6.2Hz，2H，吡啶的H-3)和8.47ppm(d，J＝6.2Hz，2H，吡啶的H-2). 实施例79 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-N-甲基咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-N-甲基咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯
在0-5℃，在氮气氛下，用氯磷酸二苯酯(1.14ml，5.5mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.96ml，5.5mmol)处理(4R，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(5mmol，通过将重氮基前体环化制得)在无水CH3CN(75ml)中的溶液。然后加入少许4-N，N-二甲氨基吡啶晶体，将该混合物搅拌1小时。加入5-巯甲基-1-N-甲基咪唑(1g，7.5mmol)在无水CH3CN(1ml)中的溶液，然后加入N，N-二异丙基乙胺(1.3ml，7.5mmol)。3小时后，用EtOAc(150ml)稀释反应混合物，依次用水，饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸掉溶剂后，将残留物在硅胶(3.5×6.5cm)上层析，先用CH3CN-EtOAc梯度(25∶75→100∶0)，然后用丙酮作为洗脱剂进行洗脱。合并含有所期化合物的级分，减压浓缩，得到1.29g(58%)油状标题化合物; IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)，1775β-内酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.38(d，J＝6.24Hz，3H，CH3CHO)，1.4-2.0(m，4H，丙基的CH2-1和2)，3.23(dd，JH5，H6＝2.69Hz，JH3，H4＝7.73Hz，1H，H-6)，3.3-3.4(m，3H，H-4和CH2-N3重叠)，3.70(s，3H，咪唑的CH3-1)，4.05(ABq，2H，SCH2)，4.1-4.3(m，2H，H-5 and CH3CHO)，4.75(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，6.94(s，1H，咪唑的H-4)，和7.45ppm(s，1H，咪唑的H-2). B.(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-N-甲基咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃，在氮气氛下，用Pd(PPh3)4(0.275g)和2-乙基己酸钠(0.450g)处理(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-N-甲基咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.25g，2.8mmol)在乙酸乙酯(35ml)中的溶液。撤去冷却浴，将该反应混合物在22℃搅拌1小时。然后用水(3×60ml)提取反应混合物，合并水相，并将其置于减压下以除去痕量的有机溶剂。然后在0-5℃，50psi氢气压下，用5%Pd/氧化铝(1.25g)将水相氢化3小时。滤除催化剂，用2N HCl将pH调至6.2。将所得滤液浓缩至约50ml，在反相硅胶(μ-Bondapak C18，3.5×14cm)上层析两次，用梯度为0-5%的乙腈的水溶液进行洗脱。将纯的级分(用反相-TLC检测)冷冻干燥，得到0.39g(38%)灰白色非晶形粉末状标题化合物。
纯度(HPLC)97.8%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用8%CH3CN-H2O pH 7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，UV检测器300nm，保留时间为5.00分钟); UV(H2O)λmax300nm(7396); IR(KBr)νmax1755(β-内酰胺的C＝O)和1590cm-1羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.31(d，J＝6.36Hz，3H，CH2CHO)，1.3-1.9(m，3H，丙基的CH2-1，2)，2.99(t，J＝7.15，2H，CH2NH2)，3.25(宽 t，1H，H-4)，3.37(dd，JH6，H5＝2.66，JH6，H1＝6.46Hz，1H，H-6)，3.72(s，3H，咪唑的CH3-1)，4.08(ABq，2H，SCH2)，4.15-4.3(m与SCH2重叠，2H，H-5和CH3CHO)，6.96(s，1H，咪唑的H-4和7.67ppm(s，1H，咪唑的H-2). 实施例80 (4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-亚胺甲基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-N-甲基咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-N-甲基咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(300mg，0.789mmol)在水(40ml)中的溶液在冰浴中冷却，用1N NaOH水溶液将该溶液调至pH 8。将甲亚胺酸苄酯盐酸盐(5当量，3.94mmol，0.68g)分次加到该混合物中，用1N NaOH水溶液将pH保持在8-8.5。待加料结束后，将该反应混合物搅拌15分钟，然后用1N HCl水溶液将pH调至6.5，用乙酸乙酯(2×30ml)洗涤。不加热在减压下浓缩水相，在反相硅胶(μBondapak C18，3.5×13cm)上用0.01M pH6.0磷酸盐缓冲液和梯度为0-3%CH3CN洗脱。将纯的级分冷冻干燥，在反相柱上再次纯化，以除去盐(水→5%CH3CN-H2O)，冷冻干燥后，得到0.115g(36%)白色非晶形固体状标题化合物。
纯度(HPLC)99.2%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，流速为1ml/分，用8%CH3CN-KH2PO40.01M pH7.4洗脱，UV检测器300nm，保留时间为6.30分钟); UV(H2O)λmax800nm(ε＝7853); IR(KBr)νmax1755(β-内酰胺的C＝O)，1715(C＝N和1590cm-1(羧酸根的C＝O; 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.30(d，J＝6.37Hz，CH3)，1.3-1.72(4H，m，CH2CH2)，3.19-3.40(3H，m，CH2N和H-6重叠)，3.71(3H，s，N-CH3)，4.08(ABq，J＝14.87Hz，Δν＝45.5Hz，2H，SCH2)，4.2(m，1H，CH3CHO)，6.95(s，1H，咪唑的H-4)，7.65(s，1H，咪唑的H-2和7.81(s，1H，CH＝NH). 实施例81 (4R，5S，6S)-4-(4″-N，N-二甲基氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃，用37%甲醛(0.2ml，约2.5mmol)，乙酸(0.052ml，0.9mmol)和氰基硼氢化钠(0.056g，0.9mmol)处理(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.176g，0.45mmol)在水(8ml)中的溶液。最终混合物为pH4.2。HPLC监测反应完成。用5小时时间加入氰基硼氢化钠(6×0.050g)和甲醛(2×0.1ml)，其间用乙酸将pH保持在4.5-5。然后加入15ml 0.2M pH7.0磷酸盐缓冲液使该反应混合物骤冷，用1M NaOH将溶液的pH调至6.5。经HPLC测定，该产物是二甲基和N-甲基-N-氰甲基衍生物的混合物(74∶20)。将该溶液在反相硅胶(μBondapak C18，2.5×18cm)上层析两次，用梯度为0-10%的乙腈的水溶液进行洗脱。
将第一级分冷冻干燥，得到0.021gN-甲基-N-氰甲基化合物。
后续级分得到0.104g(55%)白色非晶形粉末状标题化合物〔α〕22D+4.0°(c0.5，水); 纯度(HPLC)95%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用10% CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，保留时间为12.0分钟); UV(水，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax262(6032)和304nm(9，937); IR(KBr)νmax1758(β-内酰胺的C＝O)和1600cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.1-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，1.28(d，J＝6.37Hz，3H，CH3CHO)，2.85(s，6H，NCH3)，2.9-3.2(m，3H，H-4和CH2N)，3.27(dd，JH6，H5＝2.54Hz，JH6，H1＝6.34Hz，1H，H-6)，4.06(ABq，JAB＝14.9Hz，Δν＝23.4Hz，2H，SCH2)，4.08(与SCH2重叠，1H，H-5)，4.21(m，1H，CH3CHO)，7.49(～d，2H，吡啶的H-3)和8.49ppm(～d，2H，吡啶的H-2). 实施例82 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(2R，4R，5R，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(由(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-叠氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(1.7g，4.7mmol)新鲜制备)溶解在CH3CN(50ml)中，在冰-甲醇浴冷却下，用氯磷酸二苯酯(1.1ml，5mmol)，N，N-二异丙基乙胺(0.92ml，5.0mmol)和少量4-二甲氨基吡啶(5mg)处理上述溶液。将该混合物搅拌1小时，滴加4-巯甲基-1-甲基-1，2，3-三唑(1.21g，9.40mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.84ml，10.0mmol)处理上述磷酸烯醇酯。在5℃(冷室)搅拌20小时后，用乙酸乙酯(200ml)稀释该反应混合物，依次用冷的1M NaHCO3水溶液(2×100ml)，水(2×100ml)，1M NaHSO3水溶液(1×100ml)，水(2×100ml)和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。使残留物(3g)通过闪式硅胶垫(150g，1/1己烷/乙酸乙酯→乙酸乙酯)，得到油状标题化合物(1.0g，47%); IR(CH2Cl2)νmax3680，3600，3400(OH)，2100(N3)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ7.489(1H，s，芳族 -H)，6.02-5.87(1H，m，乙烯基-H)，5.47-5.20(2H，m，乙烯基-H)，4.85-4.59(2H，m，烯丙基 CH2)，4.274，4.199，3.961，3.886(2H，ABq，J＝15.1Hz，CH2-芳族)，4.25-4.12(1H，m，H-1′)，4.159(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.6Hz，H-5)，4.071(3H，s，N-Me)，3.64-3.53(1H，m，H-4)，3.49-3.36(2H，m，CH2-N3)，3.228(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.3Hz，H-6)，2.3(1H，bs，OH)，2.03-1.5(4H，m，(CH2)2-4)和1.357ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
用Pd(PPh3)4(100mg)处理冰浴冷却下的(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.0g，2.2mmol)在CH2Cl2(50ml)中的溶液，然后滴加0.5M2-乙基己酸钠在乙酸乙酯中的溶液(4.6ml，2.3mmol)。将该混合物搅拌1.5小时，用乙酸乙酯(150ml)稀释，用水(1×75ml，2×30ml)提取。合并水提取液，用乙醚洗涤，并在帕尔氢化器中，在5℃(冰浴)和45-50psi氢气压下，用5%Pd/氧化铝作催化剂，将上述溶液振荡氢化1小时。补加催化剂(1g)，再振荡氢化1.5小时，然后滤除催化剂。使该水溶液通过μBondapak C18反相柱(200g，水→5% CH3CN/H2O)，冷冻干燥后，得到粉末状标题化合物(500mg，59%) 纯度97.2%(304nm，HPLC); UV(H2O)λmax302(ε8250); IR(液体石蜡)νmax3600-3100(OH)，1755和1585cm-1(C＝O); 1H nmr(D2O，200MHz)δ7.866(1H，s，芳族 H)，4.30-4.18(1H，m，H-1′)，4.216，4.143，4.034，3.959(2H，ABq，J＝14.7Hz，CH2- 芳族)，4.085(3H，s，N-CH3)，4.10-4.08(1H，m，隐藏 H-5)，3.356(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝6.5Hz，H-6)，3.33-3.20(1H，m，H-4)，3.07-3.00(2H，m，CH2N3)，1.95-1.40(4H，m，(CH2)2-4)和1.312ppm(3H，d J＝6.3Hz，CH3). 实施例83 (4R，5S，6S)-3-〔(2-乙酰氨基乙基)硫基〕-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
由污染有N-乙酰基半胱胺的残留2-氨甲酰基乙硫醇按实施例77进行反应，制得了标题化合物，并按常规方法分离之。冷冻干燥后，得到粉末状标题化合物; 纯度95%(304nm，HPLC); UV(H2O)λmax302(ε＝7810); IR(液体石蜡)νmax3600-3100 OH，NH)，1755，1650和1600cm-1(C＝O); 1H nmr(D2O，200MHz)δ4.30-4.20(1H，m，H-1′)，4.230(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.3Hz，H-5)，3.5-3.3(4H，m，H-6，H-4和CH2-NAc)，3.1-2.95(3H，SHCH和CH2N)，1.9-1.7(1H，m，SHCH)，1.999(3H，s，NAc)，1.9-1.5(4H，m，(CH2)2-4)和1.332ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例84 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氨甲酰基乙基)硫基〕-4-〔3″-(N-亚胺甲基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氨甲酰乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(180mg，0.500mmol)溶解在0.05M pH7.0磷酸盐缓冲液(50ml)中，在冰浴冷却下，先用0.1N NaOH水溶液处理之(上升pH，并维持在pH8.2左右)，然后分次加入甲亚胺酸苄酯盐酸盐(0.87g，5.0mmol)。将该混合物搅拌20分钟，加入1M NaH2PO4水溶液将pH降至7.0。使该混合物通过μBondapak C18柱(3.6g，H2O→4%CH3CN/H2O)，冷冻干燥后，得到粉末状标题化合物(110mg，57%); 纯度93.1%(HPLC，302mm); UV(H2O)λmax302(ε7550); IR(液体石蜡)νmax3600-3100(NH2，OH)，1750，1665和1590cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.34-4.22(2H，m，H-1′和H-5)，4.225(部分H-5，d，J＝2.6Hz)，3.49-3.34(4H，m，CH2N3，H-5和H-4)，3.351(部分 H6，d，J＝2.4Hz)，3.15-2.85(1H，2 组 m，SCH2)，2.71-2.51(2H，m，CH2CON)，2.0-1.46(4H，m，(CH22-4)和1.322ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例85 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(5.28mmol，将2.0g，5.28mmol重氮基前体环化制得)溶解在无水乙腈(40ml)中，在0-5℃，氮气氛下，用5分钟时间同时加入氯磷酸二苯酯(1.2ml，5.8mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.0ml，5.7mmol)处理之。然后加入少许4-N，N-二甲氨基吡啶晶体，并将该混合物搅拌1小时。冷却至-20℃，先加入N，N-二异丙基乙胺(1.84ml，10.56mmol)，再加入在5ml乙腈中的4-巯甲基-1，2，3-噻二唑(1.45g，10.96mmol)处理之。1小时后，温度缓慢地升至0℃，使该混合物在水和乙酸乙酯(400ml)之间分配。依次用1M NaHSO3，饱和NaHCO3和盐水洗涤有机相，干燥(MgSO4)。蒸除溶剂得到一油状物，后者在硅胶(5×11cm)上层析，用乙酸乙酯/甲苯(8∶2至1∶1)进行梯度洗脱，得到1.95g(79%)油状标题化合物 IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)，1770(β-内酰胺的C＝O)和1708cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.38(d，J＝6.28Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.18(dd，JH6，H5＝2.70Hz，JH6，H1＝7.21Hz，1H，H-6)，3.34(t，J＝6.1Hz，2H，CH2N3)，3.46(宽 t，1H，H-4)，4.17(dd，JH5，H6＝2.70Hz，JH5，H4＝9.7Hz，1H，H-5)，4.22(m，1H，CH3CHO)，4.50(ABq，JAB＝14.95Hz，Δν＝73.5Hz，2H，SCH2)，4.74(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，和8.47ppm(s，1H，噻二唑的H-5). B.(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.95g，4.2mmol)溶解在乙酸乙酯(75ml)中，于22℃，氮气氛下，用Pd(PPh3)4(0.075g)和9.2ml(4.6mmol)0.5M2-乙基己酸钾在乙酸乙酯中的溶液处理该溶液。45分钟后，用水(2×75ml)提取反应混合物，合并水提取液，并将其置于减压条件下以除去痕量有机溶剂。然后在0-5℃，45psi氢气压下，用2.1g5%Pd/氧化铝，将上述水相氢化2小时。然后加入30ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液，滤除催化剂。将滤液在反相硅胶(μBondapak C18，3.5×15cm)上层析，用梯度为0-8%的乙腈水溶液为洗脱剂。
收集第一级分，冷冻干燥后得到0.17g白色固体状(4R，5S，6S)-4-(4″-羟基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸盐(Na，K盐)。后续级分得到0.576g(34%)白色非晶形固体状标题化合物 纯度(HPLC)97.7%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用8%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为0.8ml/分，保留时间为6.75分钟); UV(水，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax260(5470)和302nm(9，209); IR(KBr)νmax1755(β-内酰胺的C＝O)和1585cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.29(d，J＝6.36Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.0(t，J＝7.6Hz，2H，CH2NH2)，3.21(宽 t，1H，H-4)，3.32(dd，JH6，5＝2.45Hz，JH6，H1＝6.25Hz，1H，H-6)，4.10(dd，JH5，H6＝2.45Hz，JH5，H4＝9.42Hz，1H，H-5)，4.23(m，1H，CH3CHO)，4.51(ABq，JAB＝14.94Hz，Δν＝40.2Hz，2H，SCH2)，和8.89ppm(s，1H，噻二唑的H-5). 实施例86 (4R，5S，6S)-4-(4″-N-亚胺甲基氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.250g，0.63mmol)溶解在水(30ml)中，在0-5℃下，用10分钟时间分小批量加入甲亚胺酸苄酯盐酸盐(0.60g，3.5mmol)，其间用1M NaOH将pH维持在8-8.5之间。20分钟后，加入25ml 0.2M pH6缓冲液，并用乙酸乙酯(20ml)洗涤该混合物。将水相置于真空条件下以除去痕量的有机溶剂，将该水溶液在反相硅胶(μBondapak C18，3.5×15cm)上层析。先用梯度为0-8%的乙腈在0.01M pH7.0磷酸盐缓冲液中的溶液洗脱。合并UV活性级分，冷冻干燥，再次在相同的柱上层析，用水代替缓冲液洗脱。将UV活性级分冷冻干燥，得到0.21g(78%)白色非晶形固体状标题化合物;〔α〕22D-28.4°(c1.0，水); 纯度(HPLC)98%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用8%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱;流速为1ml/分，UV检测器302nm，保留时间为7.8分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax258(5，318)和302nm(8，795); IR(KBr)νmax1755(β-内酰胺的C＝O)，1710(亚胺甲基的C＝N)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.29(d，J＝6.39Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)3.2-3.5(m，4H，H-6和丁基的CH2-4重叠)，4.10(dd，JH5，H6＝2.47Hz，JH5，H4＝9.43Hz，1H，H-5)，4.23(m，1H，CH3CHO)，4.51(ABq，JAB＝15.0Hz，Δν＝39.4Hz，2H，SCH2)，7.8(宽 s，1H，CH＝NH)，和8.9ppm(s，1H，噻二唑的H-5). 实施例87 (4R，5S，6S)-4-(4″-胍基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃，用1M NaOH将(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.150g，0.44mmol)在水(10ml)中的溶液调至pH8，然后用5分钟时间分小批量加入氨基亚氨基甲磺酸(0.216g，1.74mmol)处理之。在整个加料过程中用1M NaOH将pH维持在8-8.5，然后再维持该pH值3小时。加入10ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液使该冷的反应混合物骤冷，继之在反相硅胶(μBondapak C18，2.5×16cm)上层析。用梯度为0-5%乙腈水溶液洗脱，将UV活性的级分冷冻干燥后得到0.115g(68%)标题化合物 纯度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9×30cm，用5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，UV检测器300nm，保留时间为7.19分钟); UV(水，pH7.4 pl磷酸盐缓冲液)λmax304nm(9，530); IR(KBr)νmax1750(β-内酰胺的C＝O)，1665(胍基的C＝N)和1580cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.8-3.1(m，2H，SCH2)，3.22(t，J＝6.5Hz，2H，CH2NH2)，3.32(dd，JH6，H5＝2.45Hz，JH6，H1＝6.19Hz，1H，H-6)，3.35(与H-6重叠，1H，H-4)，3.77(t，J＝6.3Hz，2H，CH2OH)，4.21(dd，JH5，H6＝2.45Hz，JH5，H4＝9.34Hz，1H，H-5)，和4.27ppm(m，1H，CH3CHO). 实施例88 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-4-〔3″-(N-亚胺甲基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(150mg，0.4mmol)溶解在0.04M pH7.0磷酸盐缓冲液中，在冰浴冷却下，用0.1N NaOH水溶液处理(调整pH并维持在8.0-8.3)，然后分次加入甲亚胺酸苄酯盐酸盐(342mg，2.0mmol)。将该混合物搅拌15分钟，然后用0.1N HCl水溶液将pH调至7.05。使该混合物通过μBondapak C18反相柱(37.5g，0.02M pH7.0磷酸盐缓冲液→1%→2%→3%→4%CH3CN/磷酸盐缓冲液)。将冷冻干燥的粉末再次通过相同的反相硅胶柱(H2O→1%→4%CH3CN/H2O)，得到纯的标题化合物(95mg，59%)，为冷冻干燥的粉末; 纯度98.7%(300nm，HPLC); UV(H2O)λmax302(7520); IR(液体石蜡)νmax3600-3100(OH，NH2)，1750，1710和1585cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ7.830，7.807(1H，2s，CH＝N)，4.83-4.20(4H，m，H-1′，H4和CH2O);3.45-3.33(4H，m，CH2N，H-6，H-4)，3.19-3.05，2.98-2.85(2H，2 组 m，S-CH2)，1.95-1.51(4H，4-CH2CH2)和1.320ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例89 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯;异构体B
用3-巯基丙腈(300mg，3.44mmol)和N，N-二异丙基乙胺(445mg，3.44mmol)处理冷却(5℃)下的(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基丙基)-3-(二苯基磷酰基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.48g，2.6mmol)〔按实施例57，步骤H制备〕在DMF(15ml)中的溶液。待冰浴耗尽，在22℃搅拌该反应混合物，总的搅拌时间为18小时。用乙酸乙酯(100ml)稀释该溶液，用冷盐水洗涤3次。干燥(MgSO4)有机层，蒸发，得到一混合物，后者在SiO2上层析，用乙醚洗脱。在所得产物异构体A和B中，将极性较大的异构体B纯化，得到212mg(20.1%)标题化合物; IR(CH2Cl2)νmax3600(-OH)，2115(-N3)，1778(β-内酰胺)，1710(-CO2-) 1H NMR(CDCl3)δ4.6-6.10(5H，烯丙基类型)，4.21-4.32(2H，m，H-1′，4.28，dd，J;2.79，9.60Hz，H-5)，3.51-3.69(2H，m，CH-N3，H-4)，3.23和3.0(2H，2m，S-CH2)，3.06(1H，dd，J2.72，8.14Hz，H-6)，2.72(2H，m，CH2CN)，1.6-1.9(2H，m，CH2C-N3)，1.39(3H，d，J6.2Hz，-CH3)，1.38(3H，d，J6.38Hz，-CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠;异构体B
将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(210mg，0.52mmol，步骤A中极性较大的异构体B)溶解在CH2Cl2(20ml)中，冷却至5℃，用0.5M乙基己酸钠(1.14ml，0.57mmol)和(PPh3)4Pd(60mg，0.052mmol)处理上述溶液。在5℃搅拌30分钟后，用乙醚(40ml)稀释该溶液，并用0.04M缓冲液(pH7.0，3×8ml)提取之。合并水提取液，在反相SiO2(微粒形硅胶)上层析，先用水，再用含5%CH3CN的水洗脱。合并适宜的级分，冷冻干燥，得到63mg(31.3%)标题化合物; 1H NMR(D2O)δ4.25-4.35(2H，m，H-1′，H-5)，3.54-3.69(2H，m，CH-N3，H-4)，3.42(1H，dd，J2.72，6.38Hz，H-6)，3.19和2.99(2H，2m，SCH2)，2.84-2.94(2H，m，CH2CN)，1.82(2H，m，CH2-CN3)，1.38(3H，d，J6.52Hz，-CH3)，1.34(3H，d，J6.47Hz，-CH3). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸;异构体B
将由步骤B制得的(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠(63mg，0.163mmol)在0.05M磷酸盐缓冲液(pH7.0，20ml)中的溶液在5℃，在30%Pd/硅藻土(270mg)存在下，于45psi氢气压下进行氢化。60分钟后;滤除催化剂，将滤液在反相SiO2(微粒形硅胶)上层析，先用水，再用含5%CH3CN的水洗脱。合并适宜的级分，冷冻干燥，得到12mg(21.7%)标题化合物; UV(H2O)λmax296(6200); IR(液体石蜡)νmax1755(β-内酰胺)，1585cm-1(-CO2-); 1H NMR(D2O)δ4.26-4.40(2H，m，H-5，H-1′)，3.43-3.69(3H，m，H-4，CH-N3，H-6)，2.8-3.16(4H，，m，SCH2CH2CN)，1.8-2.2(2H，m，CH2CN3)，1.43(3H，d，J6.62Hz，-CH3)，1.35(3H，d，J6.37Hz，-CH3). 实施例90 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(咪唑-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-(咪唑-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-羟基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(370mg，0.770mmol)溶解在CH2Cl2(10ml)中，在干冰-丙酮浴冷却下，用N，N-二异丙基乙胺(462μl，2.65mmol)处理该溶液，然后滴加三氟甲磺酸酐(231μl，1.37mmol)。将该混合物搅拌30分钟，加入咪唑(200mg，2.94mmol)。用冰-MeOH浴代替干冰-丙酮浴，并将该混合物搅拌3.5小时。然后用冷的乙酸乙酯稀释该混合物，依次用水(3×20ml)，NaHCO3(20ml)，水(2×20ml)和盐水洗涤，干燥，得到固体状标题化合物(350mg，85%); IR(净态)νmax1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ7.53(1H，s，芳族 -H)，7.14(1H，s，芳族 H)，6.99(1H，s，芳族 H)，5.97-5.88(1H，m，乙烯基-H)，5.48-5.23(2H，m乙烯基 -H)，4.80-4.69(2H，m，烯丙基-CH2)，4.255(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.6Hz，H-5)，4.35-4.2(2H，m，H-1′和HCH- 咪唑)，4.0-3.9(1H，m HCH-咪唑)，3.173(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.0Hz，H-6)，3.2-3.1(1H，m，H-4)，3.7-3.5(4H，SCH2CH2CN)，2.3-2.15，2.1-1.9(2H，2 组 m，CH2-4)，1.369(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.912(9H，s，叔丁基)，0.133和0.127ppm(6H，2s，CH3). B.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(咪唑-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-(咪唑-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(425mg，0.802mmol)溶解在四氢呋喃(20ml)中，在冰-MeOH浴冷却下，先用乙酸(600μl，10.5mmol)处理，然后再滴加1M氟化四丁铵四氢呋喃溶液(4.5ml，4.5mmol)。将该混合物搅拌30分钟，然后使之在5℃(冷室)下反应114小时。加入固体NaHCO3(1g)，并将该混合物搅拌30分钟(冰浴)。然后将其加到3块制备性TLC(2mm，丙酮，Rf＝0.2)上，得到标题化合物(120mg，36%)，该化合物污染有一些氟化四丁铵盐; IR(净态)νmax3600-3100(OH)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ7.70(1H，s，芳族 -H)，7.17(1H，s，芳族 -H)，7.05(1H，s，芳族 H)，6.05-5.99(1H，m，乙烯基 H)，5.49-5.24(2H，m，乙烯基-H)，4.9-4.6(2H，m，烯丙基-CH2)，4.4-4.2(4H，m，H-5，H-1′和CH2-咪唑)，3.217(1H，dd，J＝2.9Hz，J＝9.3Hz，H-6)，3.05-2.90(1H，m，H-4)，2.75-2.55(4H，m，SCH2CH2CN)，2.50-2.25，2.05-1.85(2H，2 组 m，CH2-4)，1.6(1H，bs，OH)和1.447ppm(3H，d，J＝6.1Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(咪唑-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将Pd(PPh3)4(20mg)和0.5M 2-乙基己酸钠在乙酸乙酯中的溶液(1.0ml，0.50mmol)加到冰浴冷却下的(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(咪唑-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(120mg，0.288mmol)在CH2Cl2(5ml)中的溶液中。将该混合物搅拌30分钟，撤去冰浴。30分钟后，再次将该混合物冷却，再继续搅拌30分钟。用乙醚(30ml)和水(5ml)稀释该混合物。分相，再次用水(2×5ml)和0.05M pH7.4磷酸盐缓冲水溶液(3×5ml)提取有机层。合并水提取液，用乙醚洗涤，并使之通过反相μBondapak C18柱(20g，H2O→2%CH3CN/H2O)，得到污染有2-乙基己酸钠盐的物质。使该粉末状物质通过相同的柱，但是用0.025M pH6.0磷酸盐缓冲液洗脱，得到纯的标题化合物和磷酸盐。通过相同的反相柱(H2O)除去盐，得到纯的标题化合物(43mg，39.6%); 纯度99.8%(HPLC 300nm); UV(H2O)λmax300(7800); IR νmax1750和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.00(1H，s，芳族 H)，7.36(1H，s，芳族 -H)，7.19(1H，s，芳族 H)，3.41-3.26(3H，m，H-5，H-1′ and HCH-咪唑)，4.25-4.05(1H，m，HCH-咪唑)，3.528(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.8Hz，H6)，3.25-3.10(1H，m，H-4)，2.74-2.66(4H，m，SCH2CH2CN)，2.4-2.25，2.25-2.0(2H，2 组 m，CH2-4)，和1.383ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例91 (4R，5S，6S)-4-(4″-N，N-二甲氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
用0.2ml 37%甲醛水溶液和乙酸(52μl，0.9mmol)处理冷却至0-5℃的(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.175g，0.51mmol)在水(8ml)中的溶液。然后用1小时时间分小批量加入氰基硼氢化钠(5×0.050g，总量为4.0mmol)(pH～5)。加入10ml 0.2M pH7.0磷酸盐缓冲液使该反应混合物骤冷。经HPLC证实，该反应混合物粗品是标题化合物和4-(4″-N-甲基-N-氰甲基氨基丁基)化合物的混合物(7∶3)。然后将该溶液在反相硅胶(μBondapak C18，2.5×15cm)上层析，用梯度为0-5%乙腈在0.01M pH7.0磷酸盐缓冲液中的溶液进行洗脱。合并UV活性级分，浓缩，在相同的柱上，用水代替缓冲液进行洗脱脱盐。将适宜的级分冷冻干燥，得到0.077g(40%)白色非晶形粉末状标题化合物〔α〕24D+78.5°(c1.0，H2O); 纯度(HPLC)98%(μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，UV检测器300nm，保留时间为6.68分钟); UV(水，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax304nm(8，500); IR(KBr)νmax1750(β-内酰胺的C＝O)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.37Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.84(s，6H，NCH3)，2.8-3.2(m 2H，SCH2)，3.11(t，J＝8.0Hz，2H，CH2N)，3.34(dd，JH6，H5＝2.40Hz，JH6，H1＝6.41Hz，1H，H-6)，3.35(与H-6重叠，1H，H-4)，3.77(t，J＝6.16Hz，CH2OH)，4.22(dd，JH5，H6＝2.40Hz，JH5，H4＝10.1Hz，1H，H-5)和4.26ppm(m，1H，CH3CHO). 实施例92 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5R，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(5.28mmol，由2.0g，5.28mmol重氮基前体制备)溶解在无水乙腈(40ml)中，在0-5℃，在氮气氛下，用5分钟时间同时加入氯磷酸二苯酯(1.2ml，5.79mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.0ml，5.74mmol)处理之。加入少许4-N，N-二甲氨基吡啶晶体，将该混合物搅拌40分钟，再加入N，N-二异丙基乙胺(0.92ml，5.28mmol)，然后加入氯代三甲基甲硅烷(0.67ml，5.28mmol)，将该混合物搅拌5分钟。然后用N，N-二异丙基乙胺(1.84ml，10.56mmol)处理该溶液，在该溶液中凝结出过量的甲硫醇(0.7g，15mmol)。将该反应混合物在0-5℃搅拌48小时。加入乙酸乙酯(400ml)，然后依次用水，1M NaHSO3，1M NaHCO3和盐水洗涤有机相，干燥(MgSO4)。减压下浓缩该溶液，用四氢呋喃(20ml)和水(5ml)稀释残留物，在0-5℃下用乙酸(2ml)处理。将所得混合物在0-5℃储存16小时。然后用乙酸乙酯稀释，并如前述(饱和NaHCO3，盐水，MgSO4)进行后处理，将所得产物在硅胶(5×10cm)上层析。用乙酸乙酯/甲苯(2∶8至3∶7)进行梯度洗脱，得到1.38g(69%)透明油状标题化合物 IR(NaCl3，压片)νmax2100(N3)，1770(β-内酰胺的C＝O)和1705cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.39(d，J＝6.26Hz，3H，CH3CHO)，1.4-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，1.90(d，J＝5.14Hz，1H，OH)，2.36(s，3H，SCH3)，3.16(dd，JH6，H5＝2.58Hz，JH6，H1＝7.38Hz，1H，H-6)，3.20(与H-6重叠，1H，H-4)，3.33(t，J＝6.2Hz，2H，CH2N3)，4.21(dd，JH5，H6＝2.58Hz，JH5，H4＝9.29Hz，1H，H-5)，4.25(与H-5重叠，1H，CH3CHO)，4.75(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). B.(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.38g，3.63mmol)溶解在无水乙酸乙酯(75ml)中，在22℃，在氮气氛下，用Pd(PPh3)4(0.12g)和8ml(4.0mmol)0.5M2-乙基己酸钾在乙酸乙酯中的溶液处理之。1.5小时后，用冷却水(2×75ml)提取该反应混合物，合并水提取液，并将其置于减压条件下以除去痕量的有机溶剂。在0-5℃，45psi氢气压下，用2g 5%Pd/氧化铝将上述水相氢化1.2小时。然后加入25ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液，滤出催化剂。将滤液在反相硅胶(μBondapak C18，3.5×15cm)上层析，用梯度为0-4%乙腈的水溶液进行洗脱。将UV活性级分冷冻干燥，得到0.57g(50%)白色非晶形粉末状标题化合物〔α〕22D+97.2°(c1.0，水); 纯度(HPLC)98.9%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为0.8ml/分，UV检测器300nm，保留时间为6.05分钟); UV(水，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax306nm(9，475); IR(KBr)νmax1750(β-内酰胺的C＝O)和1580cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.34Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.34(s，3H，SCH3)，3.01(t，J＝7.6Hz，2H，CH2NH2)，3.31(dd，JH6，H5＝2.36Hz，JH6，H1＝6.47Hz，1H，H-6)，3.39(宽 t，J＝9Hz，1H，H-4)，4.19(dd，JH5，H6＝2.36Hz，JH5，H4＝9.06Hz，1H，H-5)和4.26ppm(m，1H，CH3CHO). 实施例93 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(2R，4R，5R，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(由(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(1″R)-1′-(3-叠氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(1.7g，4.7mmol)新鲜制备)溶解在CH3CN(50ml)中，在冰-MeOH浴冷却下，滴加氯磷酸二苯酯(1.1ml，5.0mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.92ml，5.0mmol)及少量4-N，N-二甲氨基吡啶(5mg)处理之。将该混合物搅拌1小时，然后用4-巯甲基-1，2，3-噻二唑(925mg，7.0mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.84ml，10.0mmol)处理该磷酸烯醇酯。将该混合物在5℃(冰浴)搅拌2小时，补加硫醇(0.46g，3.5mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.92ml，5mmol)。将该反应混合物在5℃(冷室)下放置18小时，用乙酸乙酯(200ml)稀释，依次用1M NaHCO3水溶液(100ml)，水(100ml)，1M NaHSO3水溶液(100ml)，水(100ml)和盐水(100ml)洗涤，干燥(MgSO4)。使残留物(4.0g)通过闪式硅胶柱(200g，己烷/EtOAc 1/1)，得到油状标题化合物(0.90g，43%); IR(CH2Cl2)νmax3680，3600(OH)，2100(N3)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.477(1H，s，芳族 -H)，6.02-5.85(1H，m，乙烯基 -H)，5.48-5.22(2H，m，乙烯基 H)，4.87-4.61(2H，m，烯丙基 -CH2)，4.771，4.696，4.337，4.260(2H，ABq，J＝15.2Hz，CH2- 芳族)，4.28-4.14(1H，m，H-1′)，4.162(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.6Hz，H-5)，3.60-3.27(3H，m，CH2N3和H-4)，3.245(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.5Hz，H-6)，2.04-1.50(4H，m，(CH2)2-4)，1.597(1H，bs，OH)和1.377ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚--2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.9g，2mmol)溶解在CH2Cl2(20ml)中，在冰浴冷却下，先用Pd(PPh3)4(90mg)处理上述溶液，然后滴加0.5M2-乙基己酸钠的乙酸乙酯溶液(4.1ml，2.05mmol)。将该混合物搅拌30分钟，然后用乙酸乙酯/乙醚混合物(1∶1)稀释，用0.05M pH7.0磷酸盐缓冲水溶液(1×50ml和2×25ml)提取。合并水提取液，用乙醚洗涤，并使之通过μBondapak C18反相柱(180g，H2O→5%CH3CN/H2O)，经冷冻干燥后，得到粉末状羧酸钠盐(0.50g，61%); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.897(1H，s，芳族 -H)，4.679，4.605，4.447，4.372(2H，ABq，J＝15Hz，CH2-芳族ic)，4.299-4.173(1H，5 线，H-1′)，4.124(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.412，3.401(部分 H-6，d，J＝2.5Hz)，3.41-3.34(3H，m，H-6和CH2-N3)，3.31-3.20(1H m，H-4)，1.9-1.32(4H，m，(CH2)2-4)和1.300ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 在帕尔氢化器中，在0℃(冰浴)，45-50psi氢气压下，采用5%Pd/氧化铝作为催化剂(500mg)将上述羧酸钠(500mg，1.22mmol)在水(75ml)中的溶液振荡1小时。补加催化剂(500mg)，在0℃下再氢化1小时。滤除催化剂，用1M NaH2PO4水溶液将pH(10-11)调至7.0。使该混合物通过μBondapak C18反相柱(100g，H2O→5%CH3CN/H2O)，冷冻干燥后，得到粉末状标题化合物(250mg，53%); 纯度99.93%(304nm，HPLC); UV(H2O)λmax302(ε8050); IR(液体石蜡)νmax3600-3100(OH，NH2)，1755和1685cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.894(1H，s，芳族 H)，4.660，4.586，4.440，4.365(2H，ABq，J＝14.9Hz，CH2- 芳族)，4.302-4.174(1H，5 线，H-1′)，4.125(1H，dd，J＝2.6 Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.359(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.5Hz，H-6)，3.32-3.22(1H，m，H-4)，3.06-2.97(2H，m，CH2-N)，1.83-1.32(4H，m，(CH2)2-4和1.304ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例94 (4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-亚胺甲基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(175mg，0.460mmol)溶解在0.02M pH7.0磷酸盐缓冲液(50ml)中，在冰浴冷却下，用0.1N NaOH水溶液处理上述溶液(提高pH值并维持在约8.0±0.2)，然后加入甲亚胺酸苄酯盐酸盐(200mg，1.15mmol)。将该混合物搅拌30分钟，然后用1M NaH2PO4水溶液将上述溶液的pH降至7.0。使该混合物通过μBondapak C18反相柱(20g，H2O→5%CH3CN/H2O)，冷冻干燥后，得到粉末状标题化合物(110mg，59%); 纯度97.2%(302nm，HPLC); UV(H2O)λmax302(ε9260); IR(液体石蜡)νmax3600-3700(OH)，1750(C＝O)，1710(C＝N)和1585cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ7.867(1H，s，芳族 -H)，7.834，7.812(1H，2s，CH)，4.30-4.18(1H，m，H-1′)，4.212，4.137，4.031，3.957(2H，ABq，J＝14.9Hz，CH2-芳族)，4.159，4.112，4.099(1H，1s和1d，J＝2.6Hz，部分 H-5)，4.083(3H，s，N-CH3)，3.330(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝6.1Hz，H-6)，3.45-3.20(3H，m，H-4和CH2N)，1.9-1.32(4H，m，(CH2)2-4)和1.300ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例95 (4R，5S，6S)-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(170mg，0.460mmol)溶解在0.02M pH7.0磷酸盐缓冲水溶液(50ml)中，在冰浴冷却下，先用0.1N NaOH水溶液处理上述溶液(提高pH值，并维持在8.0±0.2)，然后加入氨基亚氨基甲磺酸(570mg，4.60mmol)。将该混合物搅拌90分钟，然后用1M NaH2PO4水溶液将pH降至7.0。使该混合物通过μBondapak C18反相柱(20g，H2O→5%CH3CN/H2O)，冷冻干燥后，得到粉末状标题化合物(130mg，74%); 纯度99.85%(302nm，HPLC); UV(H2O)λmax302(ε9150); IR(液体石蜡)νmax3600-3100(NH，OH)，1755(C＝O)，1670-1630(C＝N)和1590 cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ7.871(1H，s，芳族 H)，4.31-4.16(1H，5 线，H-1′)，4.211，4.135，4.037，3.962(2H，ABq，J＝15Hz，CH2-芳族)，4.063(3H，s，CH3-三唑)，4.155-4.06(1H，m，隐藏H-5)，3.318，3.306，3.267(部分 H-6，d+s)，3.32-3.22(3H，m，CH2-N和H-4)，1.9-1.30(4H，m，(CH2)2-4)和1.29ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例96 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氨甲酰氧基)乙硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-3-〔(2-氨甲酰氧基)乙硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(7.6mmol，由2.88g，7.6mmol重氮基前体制得)溶解在无水乙腈(35ml)中，在0-5℃，氮气氛下，用5分钟时间同时加入氯磷酸二苯酯(1.65ml，8.0mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.38ml，8.0mmol)处理上述溶液。加入少许4-N，N-二甲氨基吡啶晶体，并将该混合物搅拌30分钟。然后补加N，N-二异丙基乙胺(1.38ml，8.0mmol)，继之加入氯代三甲基甲硅烷(1.0ml，8.0mmol)，并将该混合物搅拌10分钟。再补加N，N-二异丙基乙胺(1.38ml，8.0mmol)，然后加入在乙腈中的2-氨甲酰氧基乙硫醇(1.8g，15.2mmol)，将所得混合物在0-5℃搅拌18小时。然后加入冷的0.2M pH7.0磷酸盐缓冲液(100ml)和乙酸乙酯(500ml)使该反应混合物骤冷。用水和盐水洗涤有机相，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到一油状物，将后者溶解在四氢呋喃(50ml)和水(50ml)中，并在0-5℃下用乙酸(1.5ml)处理。然后用1小时时间使温度升至22℃。用乙酸乙酯(400ml)稀释该反应混合物，按前述方法进行后处理。蒸发溶剂后，将所得残留物在硅胶(4×12cm)上层析两次，第一次用甲苯/乙酸乙酯的混合物(1∶1)洗脱，然后用二氯甲烷/乙腈混合物(7∶3)洗脱。蒸发UV活性级分，得到1.71g(49%)油状标题化合物 IR(NaCl，压片)νmax2，100(N3)，1770(β-内酰胺的C＝O)和1720(宽峰，酯和氨甲酰基的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.39(d，J＝6.25Hz，3H，CH3CHO)，1.4-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.8-3.2(m，5H，SCH2，CH2N3和H-4)，3.18(dd，JH6，H5＝2.62Hz，JH6，H5＝7.17Hz，1H，H-6)，4.1-4.4(m，4H，H-5，CH3CHO和CH2OCONH2o 重叠)，4.6-4.9(m，4H，烯丙基的CH2和OCONH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2m，2H和1H，烯丙基的CH). B.(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氨甲酰氧基)乙硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-3-〔(2-氨甲酰氧基)乙硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.71g，3.77mmol)溶解在无水乙酸乙酯(50ml)中，在22℃，氮气氛下，先用Pd(PPh3)4(0.100g)处理，然后再加入8ml(4.0mmol)0.5M 2-乙基己酸钾在乙酸乙酯中的溶液。然后用水(3×50ml)提取反应混合物，合并水提取液，在反相硅胶(μBondapak C18，3×13cm)上层析。用梯度为0-5%乙腈的水溶液进行洗脱，经冷冻干燥后得到1.0g(59%)中间体钾盐，为白色固体。
然后将该钾盐溶解在冷水(150ml)中，在0-5℃，于45psi氢气压下，用1.5g 5%Pd/氧化铝将上述溶液氢化1小时。然后加入20ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液，滤出催化剂，将滤液在反相硅胶(μBondapak C18，3×15cm)上层析，用梯度为0-5%乙腈水溶液进行洗脱，经冷冻干燥后，得到0.722g(83%，49%合并收率)白色非晶形粉末状标题化合物〔α〕22D+74.6°(c1.0，H2O); 纯度(HPLC)96.4%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为0.8ml/分，UV检测器300nm，保留时间为5.56分钟); UV(水，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax302nm(9，219); IR(KBr)νmax1750(β-内酰胺的C＝O)，1720(氨甲酸根的C＝O)和1585cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.34Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.9-3.2(m，4H，SCH2和CH2NH2)，3.36(dd，JH6，H5＝2.51Hz，JH6，H1＝6.27Hz，1H，H-6)，3.4(m，与H-6重叠，1H，H-4)和4.2-4.4ppm(m，4H，H-5，CH3CHO和CH2OCONH2). 实施例97 (4R，5S，6S)-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(120mg，0.31mmol)溶解在0.025 M pH7.0磷酸盐缓冲水溶液(30ml)中，在冰浴冷却下，先用0.1M NaOH水溶液处理之(提高pH，并将pH维持在8.1±0.2)，然后分次加入氨基亚氨基甲磺酸(390mg，3.10mmol)。将该混合物搅拌1.5小时，用1M NaH2PO4水溶液将pH降至7.0。使该混合物通过μBondapak C18反相柱(20g，水→3%CH3CN/H2O，冷冻干燥后，得到粉末状标题化合物(90mg，68%); 纯度98.5%(302nm，HPLC); UV(H2O)λmax302(ε8400); IR(液体石蜡)νmax3600-3100(OH，NH3)，1750(C＝O)，1770-1730(C＝N)和1680cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.896(1H，s，芳族 H)，4.654，4.580，4.446，4.371(2H，ABq，J＝15Hz，CH2- 芳族)，4.29-4.17(1H，5 线，H-1′)，4.124(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.298(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝6.5Hz，H-6)，3.30-3.10(3H，m，CH2-N和H-4)，1.90-1.30(4H，m，(CH2)2-4)和1.291ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例98 (4R，5S，6S)-4-(4″-N-亚胺甲基氨基丁基)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.196g，0.506mmol)在冷水(15ml)中的溶液用1M NaOH调至pH8.0，然后在0-5℃下，用10分钟时间分小批量加入甲亚胺酸苄酯盐酸盐(0.26g，1.5mmol)处理上述溶液。在整个加料过程中，用1M NaOH将pH维持在8-8.5。20分钟后，加入10ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液，用乙酸乙酯洗涤该反应混合物。然后将水相先在反相硅胶(μBondapak C18，2.5×15cm)上层析，用梯度为0-5%的乙腈在0.02M pH7.0磷酸盐缓冲液中的溶液作为洗脱剂。合并UV活性级分，浓缩(T＜5℃)，在相同的柱上用水代替缓冲液作为洗脱剂去盐。将适宜的级分冷冻干燥，得到0.136g(65%)白色非晶形粉末状标题化合物〔α〕22D+72.0°(c1.0，水); 纯度(HPLC)98.8%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，UV检测器300nm，保留时间为6.12分钟); UV(水，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax302nm(9，228); IR(KBr)νmax1750(β-内酰胺的C＝O)，1715cm-1(氨甲酸根的C＝O和亚胺甲基)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.31(d，J＝6.32Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.8-3.2(m，2H，SCH2)，3.3-3.5(m，4H，H-4，H-6和CH2NH)，4.2-4.4(m，3H，CH2OCONH2，H-5和CH3CHO)和7.79ppm(宽 s，1H，CHNH). 实施例99 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，3-咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，3-咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(5.10mmol，将2.37g，5.10mmol重氮基前体环化制得)溶解在无水乙腈(39ml)中，在-15℃，氩气氛下，用氯磷酸二苯酯(1.10ml，5.3mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.95ml，5.3mmol)处理之。加入少许4-N，N-二甲氨基吡啶晶体，并将该混合物在-15℃搅拌30分钟。加入N，N-二异丙基乙胺(0.95ml，5.4mmol)和1-甲基-5-巯甲基-1，3-咪唑(1.31g，10.2mmol)，并将该混合物在0℃搅拌3小时。用乙酸乙酯(272ml)稀释该反应混合物，依次用水、1M NaHSO3、饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到油状物，在硅胶上层析纯化，用EtOAc∶CH3CN∶丙酮(12∶87∶1)洗脱，得到1.5g(54%)黄色油状标题化合物 IR(CH2Cl2)λmax2100(N3)，1775β-内酰胺的C＝O和1710(酯的C＝O). 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.09(s，6H，SiCH3)，0.90(s，9H，Si-t-bu)，1.31(d，J＝6.1Hz，3H，CH3CHO)，1.7和2.0(2 x m，2 x 1H，CH2-4)，3.08(dd，J1′6＝7.17Hz，J5-6＝2.76Hz，1H，H-6)，3.3-3.6(m，2H，CH2N3)，3.69(s，3H，CH3-N)，3.9-4.2(m，4H)，4.7(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和6.0(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，6.99和7.46(2xS，2H，咪唑基). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，3-咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，3-咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.50g，2.74mmol)溶解在无水四氢呋喃(43ml)中，在0-5℃，于氩气氛下，用乙酸(0.94ml，16.4mmol)处理该溶液，然后加入8.5ml(8.5mmol)1M氟化四丁铵四氢呋喃溶液。将该溶液在5℃放置8.5天。然后用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到一油状物，后者在硅胶(4.5×15cm)上层析，用丙酮洗脱，得到1.87g(73%)标题化合物，为浅黄色泡沫状固体; IR(NaCl，压片)νmax3200(宽，OH)，2105(N3)，1780(β-内酰胺的C＝O)，和1710(酯的C＝O). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，3-咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，3-咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(558mg，1.29mmol)溶解在无水CH2Cl2(29ml)中，在0-5℃，在氩气氛下，用Pd(PPh3)4(112mg)和2.84ml(1.42mmol)0.5M2-乙基己酸钠在EtOAc中的溶液处理上述溶液。加入39ml水，分离有机层，用2×22ml水再提有机相，合并水层，蒸发以除去有机溶剂。用396mg 5% Pd/氧化铝，在45psi氢气压下，将上述残留的水相氢化1小时。滤出催化剂，用1M NaH2PO4溶液(几滴)中和滤液。将该混合物在反相硅胶(Bondapak C18，7×11cm)上层析，用梯度为0-1%的乙腈水溶液洗脱，然后将UV活性级分冷冻干燥，得到130mg标题化合物，为浅黄色非晶形粉末; UV(水，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax302nm(6000); IR(KBr)νmax1765(β-内酰胺的C＝O)和1625(羧酸根的C＝O); 1HNMR(200Hz，D2O)δ1.32(d，J＝6.3Hz，3H，CH3CHO)，1.7和2.1(2 x m，2 x 1H，CH2-4)，3.05(t，J＝9.0Hz，CH2NH2)，3.23(m，1H，H-4)，3.41(dd，J7′-6＝6.5Hz，J5-6＝2.7Hz，H-6)，3.7(s，3H，CH3-N)，3.9-4.3(m，4H，CH2-S，CH3CHO，H-5)，6.93和7.63(2 x s，2H，咪唑基). 实施例100 (4R，5S，6S)-4-(4″-胍基丁基)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
用1M NaOH将(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.172g，0.44mmol)在冷水(0-5℃，13ml)中的溶液调至pH8.5。用10分钟时间，分小批量加入氨基亚氨基甲磺酸(0.275g，2.21mmol)，与此同时，将pH维持在8-8.5之间。在0-5℃反应45分钟后，加入15ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液使该反应混合物骤冷，在反相硅胶(μBondapak C18，2.5×15cm)上层析。用梯度为0-5%的乙腈水溶液洗脱，经冷冻干燥后，得到0.149g(78%)白色非晶形固体状标题化合物 纯度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用10%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为0.8ml/分，UV检测器300nm，保留时间为6.0分钟); UV(水，pH7.4 磷酸盐缓冲液)λmax302nm(9，371); IR(KBr)νmax1750(sh，(β-内酰胺的C＝O)，1730(宽峰，氨甲酸根的C＝O)，1670(胍的C＝N)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.32Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.8-3.2(m，2H，SCH2)，3.22(t，J＝6.5Hz，CH2N)，3.34(dd，JH6，H5＝2.55Hz，JH6，H1＝6.10Hz，1H，H-6)，3.36(m，与H-6重叠，1H，H-4)和4.2-4.4ppm(m，4H，CH2O，H-5和CH3CHO). 实施例101 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-二甲氨基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-二甲氨基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-羟基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(384mg，0.801mmol)溶解在CH2Cl2(20ml)中，在干冰-丙酮浴冷却下，用N，N-二异丙基乙胺(480μl，4.20mmol)处理该溶液，然后滴加三氟甲磺酸酐(208μl，1.24mmol)。将该混合物搅拌30分钟，并在该混合物中通入HN(CH3)2气流，通气时间为20秒。用冰-MeOH浴代替干冰-丙酮浴。将该混合物搅拌3小时(用TLC跟踪反应)，然后用冰冷却的乙酸乙酯(100ml)稀释，用冰冷却的水(4×50ml)和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，得到油状标题化合物(390mg，96%); IR(净态)νmax2250(C≡N)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.03-4.85(1H，m，乙烯基 -H)，5.49-5.22(2H，m，乙烯基 H)，4.9-4.6(2H，m，烯丙基-CH2)，4.30-4.17(1H，m，H-1′)，4.205(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.7Hz，H-5)，3.40-3.20(2H，m H-4和HCH-N)，3.254(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝7.0Hz，H-6)，3.15-2.95(2H，m，SCH2)，2.72-2.63(2H，m，CH2CN)，2.5-2.30(1H，m，HCH-N)，2.254(6H，s，N(CH3)2)，2.05-1.80(1H，m，HCH-4)，1.7-1.4(1H，m，HCH-4)，1.290(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.890(9H，s，叔丁基)和0.086ppm(6H，s，d二甲基). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-二甲氨基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
用乙酸(600μl，10.5mmol)处理在冰-MeOH浴冷却下的(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-二甲氨基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(390mg，0.768mmol)在四氢呋喃(10ml)中的溶液，然后滴加1M氟化四丁铵在四氢呋喃中的溶液(6.0ml，6.0mmol)。将该混合物搅拌1小时，然后在冷室中放置144小时。用乙酸乙酯(100ml)稀释该混合物，依次用冰冷却的1M NaHCO3水溶液(2×100ml)和冷盐水(2×100ml)洗涤，干燥(MgSO4)，得到油状标题化合物粗品(270mg，89%); IR(净态)νmax3600-3200(OH)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.05-1.90(1H，m，乙烯基 H)，5.50-5.24(2H，m，乙烯基 -H)，4.9-4.6(2H，m，烯丙基-H)，4.294，4.279(部分 H-5，d，J＝2.9Hz)，4.29-4.15(1H，m，H-1′)，3.45-3.9(3H，m，H-4和SCH2)，3.302(1H，dd，J＝2.9Hz，J＝7.9Hz，H-6)，2.8-2.6(4H，m，CH2-N和CH2CN)，2.264(6H，s，N(CH3)2)，2.0-1.6(3H，m，CH2-4和OH)和1.377ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-二甲氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
用Pd(PPh3)4(30mg)和0.5M2-乙基己酸钠在乙酸乙酯中的溶液(1.44ml，0.720mmol)处理在冰浴冷却下的(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-二甲氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯粗品(270mg，0.69mmol)在CH2Cl2(5ml)中的溶液。将该混合物搅拌45分钟，然后用1/1乙酸乙酯/乙醚混合物(20ml)稀释，用0.02M pH7.0磷酸盐缓冲液(1×20ml，2×10ml)提取。合并水提取液，用乙醚洗涤，并使之通过μBondapak C18反相柱(40g，0.02M pH7.0磷酸盐缓冲液→3%CH3CN/H2O)层析两次，冷冻干燥后，得到粉末状标题化合物(70mg，30%); 纯度99.5%(298nm，HPLC); UV(H2O)λmax298(ε6960); IR(液体石蜡)νmax3600-31200(OH)，2250(C≡N)，1750和1590cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.33-4.21(1H，m，H-1′)，4.289(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝9.3Hz，H-5)，3.429(1H，dd，J＝2.9Hz，J＝6.6Hz，H-6)，3.48-3.35(H，m，H-4)，3.21-2.76(6H，SCH2，CH2-N，CH2CN)2.758(6H，s，N(CH3)2)，2.27-2.14和1.98-1.80(2H，2 组 m，CH2-4)和1.339ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例102 (4R，5S，6S)-4-(4″-胍基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.226g，0.72mmol)在冷水(0-5℃，20ml)中的溶液用1M NaOH调至pH8.5，然后用5分钟时间分小批量加入氨基亚氨基甲磺酸(0.40g，3.22mmol)。在整个加料过程中用1M NaOH将pH维持在8-8.5，并将该pH再维持2小时。然后加入20ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液使该反应混合物骤冷，在反相硅胶(μBondapak C18，3.5×15cm)上层析，用梯度为0-5%的乙腈水溶液洗脱，经冷冻干燥后，得到0.169g(66%)白色非晶形粉末状标题化合物; 纯度(HPLC)99.8%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，5% CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液，流速为1.5ml/分，UV检测器300nm，保留时间为5.77分钟); UV(水，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax306nm(9，411); IR(KBr)νmax1750(β-内酰胺的C＝O)，1665(胍的C＝N)和1580cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.34(s，3H，SCH3)，3.22(t，J＝6.5Hz，2H，CH2N)，3.28(dd，JH6，H5＝2.39Hz，JH6，H1＝6.26Hz，1H，H-6)，3.38(宽 t，1H，H-4)，4.19(dd，JH5，H6＝2.39Hz，JH5，H4＝9.04Hz，1H，H5)和4.27ppm(m，1H，CH3CHO). 实施例103 (4R，5S，6S)-4-(4″-N-亚胺甲基氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.210g，0.67mmol)在水(30ml)中的溶液，在0-5℃下，用1N NaOH调至pH8.5。然后用10分钟时间，分小批量加入甲亚胺酸苄酯盐酸盐(0.60g，3.5mmol)，其间，用1N NaOH将pH维持在8-8.5之间。在0-5℃反应另外20分钟后，加入25ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液使该反应混合物骤冷，用乙酸乙酯(20ml)洗涤。然后将水相置于真空条件下以除去痕量的有机溶剂，在反相硅胶(μBondapak C18，3.5×14cm)上层析，用梯度为0-5%乙腈在0.01M pH7.0磷酸盐缓冲液中的溶液作为洗脱剂。合并UV活性级分，减压浓缩(T＜5℃)，再次进行层析，用水代替缓冲液作为洗脱剂。将适宜的级分冷冻干燥，得到0.123g(54%)白色非晶形粉末状标题化合物;〔α〕22D+110.3°(c1.0，水); 纯度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用3%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1.5ml/分，UV检测器300nm，保留时间为6.48分钟); UV(水，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax306nm(10，187); IR(KBr)νmax1750(β-内酰胺的C＝O)，1715(亚胺甲基的C＝N)和1580cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.27Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.34(s，3H，SCH3)，3.3-3.5(m，4H，H-6，H-4和CH2NH)，4.18(dd，JH5，H6＝1.92Hz，JH5，H4＝9.0Hz，1H，H-5)，4.26(m，1H，CH3CHO)和7.8ppm(宽 s，1H，CH＝NH). 实施例104 (4R，5S，6S)-4-(4″-N，N-二甲氨基丁基)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃下，用0.25ml(3.0mmol)37%甲醛水溶液和2ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液处理(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.230g，0.59mmol)在水(10ml)中的溶液。然后立即一次加入0.074g(1.18mmol)氰基硼氢化钠，并将所得混合物在0-5℃搅拌1小时。经HPLC(μBondapak C18)证实，该产物是标题二甲基衍生物和N-甲基-N-氰甲基衍生物的51∶45混合物。将该反应混合物粗品先在反相硅胶(μBondapak C18，2×15cm)上层析，用梯度为0-5%乙腈在0.02M pH7.0磷酸盐缓冲液中的溶液作为洗脱剂。合并第一级分，在相同的柱上层析脱盐，用水代替缓冲液作为洗脱剂，经冷冻干燥后，得到0.081g(33%)白色非晶形固体状标题化合物; 纯度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，UV检测器300nm，保留时间为6.11分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax302(9，036); IR(KBr)νmax1750(β-内酰胺的C＝O)，1725(氨甲酸根的C＝O)和1595cm-1(c 羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.34Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.84(s，6H，NCH3)，2.8-3.2(m，2H，SCH2)，3.10(t与SCH2重叠，J＝7.9Hz，2H，CH2N)，3.36(dd，JH6，H5＝2.30Hz，1H，H-6)，3.37(m，与H-6重叠，1H，H-4)，和4.2-4.4ppm(m，4H，H-5，CH3CHO和CH2OCONH2重叠). 实施例105 (4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛缩二甲腙)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在干冰-丙酮浴冷却下，用DMSO(250μl，3.19mmol)在CH2Cl2(1ml)中的溶液滴加处理草酰氯(150μl，1.65mmol)在CH2Cl2(5ml)中的溶液。将该混合物搅拌5分钟，然后滴加(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-羟基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(420mg，0.875mmol)在CH2Cl2(4ml)中的溶液。将该混合物搅拌15-20分钟，加入三乙胺(1.5ml，10.8mmol)。将该溶液再搅拌10分钟，然后使之温热至室温(约10分钟)。用水(25ml)和CH2Cl2(40ml)稀释，用CH2Cl2(4×20ml)提取水层。合并有机层，依次用冰冷却的5%HCl水溶液(2×20ml)、冰冷却的水(2×20ml)、冰冷却的5%NaHCO3(2×20ml)、冰冷却的水(2×20ml)和盐水(20ml)洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到油状标题化合物(402mg，96%); IR(净态)νmax2250(C≡N)，1775，1720和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ9.849(1H，s，CHO)，6.01-5.87(1H，m，乙烯基-H)，5.49-5.22(2H，m，乙烯基 -H)，4.80-4.60(2H，m，烯丙基-CH2)，4.371(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.8Hz，H-5)，4.28-4.18(1H，6 线，H-1′)，3.763(1H，dt，J＝3.5Hz，J＝10.2Hz，H-4)，3.2-2.77(5H，m，H-6，SCH2和CH2CHO)，2.70-2.63(2H，m，CH2CN)，1.161(3H，d，J＝6.2Hz，CH3)，0.883(9H，s，叔丁基)和0.068ppm(6H，s，二甲基). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛缩二甲基腙)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
用二甲基肼(150μl，1.97mmol)处理在冰浴冷却下的(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(402mg，0.840mmol)在无水乙醇(8ml)中的溶液。使该混合物在5℃(冷室)反应24小时，然后蒸除溶剂，留下油状标题化合物(463mg，100%); IR(净态)νmax2250(C≡N)，1775，1710(C＝O)和1550cm-1(C≡N); 1H NMR(CDCl3，200MHz)，δ6.474(1H，bt，J＝4.2Hz，CH＝N)，6.04-5.85(1H，m，乙烯基 H)，5.48-5.21(2H，m，乙烯基 H)，4.85-4.70(2H，m，烯丙基 -H)，4.298(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.4Hz，H-5)，4.28-4.22(1H，m，H-1′)，3.64-3.55(1H，m，H-4)，3.319(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝3.9Hz，H-6)，3.25-2.92(2H，m，SCH2)，2.754(6H，s，N(CH3)2)，2.73-2.60(3H，m，CH2CN和HCH-4)，2.55-2.3(1H，m，HCH-4)1.148(3H，d，J＝6.2Hz，CH3)，0.0878(9H，s，叔丁基)和0.066，0.060ppm(6H，2s，二甲基). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛缩二甲基腙)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛缩二甲基腙)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(460mg，0.883mmol)溶解在四氢呋喃(15ml)中，在冰-甲醇浴冷却下，用乙酸(700μl，12.2mmol)处理之，然后滴加1M氟化四丁铵在四氢呋喃中的溶液(6.0ml，6.0mmol)。将该混合物搅拌30分钟，然后使之在5℃(冷室)反应430小时。用冰冷却的乙酸乙酯(100ml)稀释，依次用冷的5%NaHCO3水溶液(4×20ml)、水(2×20ml)和盐水(20ml)洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到油状标题化合物(335mg，93%); IR(净态)νmax3600-3200(OH)，2250(C≡N)，1775，1710(C＝O)和1550cm-1(C＝N); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.602(1H，bt，J＝4.8Hz，CH-N)，6.05-5.90(1H，m，乙烯基 H)，5.51-5.24(1H，m，乙烯基 H)，4.90-4.64(2H，m，烯丙基 CH2)，4.311(1H，dd，J＝2.9Hz，J＝9.8Hz，H-5)，4.20-4.00(1H，m，H-1′)，3.73-3.60(1H，m，H-4)，3.307(1H，dd，J＝2.9Hz，J＝8.0Hz，H-6)，3.18-2.90(2H，m，SCH2)，2.773(6H，s，N(CH3)2)，2.87-2.63(3H，m，CH2CN和HCH-4)，2.56-2.40(1H，m，HCH-4)，1.59(1H，bs，OH)和1.310ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). D.(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛缩二甲基腙)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
用Pd(PPh3)4(35mg)处理冰浴冷却下的(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛缩二甲基腙)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(335mg，0.820mmol)在CH2Cl2(5ml)中的溶液，然后滴加0.5 M2-乙基己酸钠在乙酸乙酯中的溶液(1.72ml，0.860mmol)。将该混合物搅拌30分钟，然后用1/1乙酸乙酯/乙醚溶液稀释，用0.02M pH7.0磷酸盐缓冲液(1×30ml，2×10ml)提取。合并水提取液，用乙醚洗涤，并使之通过μBondapak C18反相柱(40g，0.02M磷酸盐缓冲液→5%CH3CN/缓冲液和40g，H2O→5%CH3CN/H2O)层析两次，冷冻干燥后，得到粉末状标题化合物(100mg，33%); 纯度97.9%(302nm，HPLC); UV(H2O)νmax240(ε7440)，302(ε8150); IR(液体石蜡)νmax3600-3100(OH)，2250(C≡N)，1750和1590(C＝O)和1560cm-1(C＝N); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.425(1H，dt，J＝5.4Hz，CH＝N)，4.288(1H，dd，J＝2.62Hz，J＝9.5Hz，H-5)，4.30-4.17(1H，m，H-1′)，3.79-3.67(1H，，H-4)，3.518(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝5.8Hz，H-6)，3.30-3.13，3.05-2.90(2H，2 组 m，SCH2)，2.90-2.80(2H，m，CH2CN)，2.90-2.50(2H，m，CH2-4)，2.691[6H，s，N(CH3)2]和1.274ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例106 (4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
用冰乙酸(350ml，6.1mmol)处理冰-MeOH浴冷却下的(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(200mg，0.418mmol)在四氢呋喃(8ml)中的溶液，然后滴加1M氟化四丁铵在四氢呋喃中的溶液(3.0ml，3.0mmol)。将该混合物搅拌30分钟，然后使之在5℃(冷室)反应500小时。用冰冷却的乙酸乙酯(50ml)稀释，依次用冰冷却的饱和NaHCO3(4×20ml)和盐水(20ml)洗涤，干燥(MgSO4)，蒸发溶剂得到一油状物，然后在制备性硅胶板上层析(EtOAc，Rf＝0.5)，得到油状标题化合物(40mg，26%); IR(净态)νmax3600-330(OH)，2250(CN)，1775和1720cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ9.869(1H，s，CHO)，6.04-5.87和5.49-5.25(3H，m，乙烯 H)，4.89-4.65(2H，m，CH2-乙烯)，3.416(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝9.9Hz，H-5)，4.24-4.13(1H，5 线，H-1′)，3.84-3.71(1H，6 线，H-4)，3.19-2.81(3H，m，H-6，CH2S和CH2O)，2.75-2.63(2H，m，CH2-CN)，1.57(1H，bs，OH)和1.298ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
用Pd(PPh3)4(10mg)处理在冰浴冷却下的(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(40mg，0.11mmol)在二氯甲烷(2ml)中的溶液，然后加入N-甲基苯胺(20μl，过量)。将该混合物搅拌30分钟，然后用乙醚(20ml)稀释，用0.05M pH7.4磷酸盐缓冲液(4×5ml)提取。合并水提液，用乙醚洗涤，并使之通过反相μBondapak C18柱(9g，H2O)层析，冷冻干燥后，得到粉末状标题化合物(10mg，26%); IR(液体石蜡)νmax3600-3100(OH)，2250(CN)，1755，1720和1600(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ9.789(0.5H，s，CHO)，5.244，5.226，5.208，5.189(0.5H，4 线，CH(OH)2)，4.409(0.5H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.7Hz，H-5)，4.36-4.20(1H，m，H-1′)，3.92-3.84(0.5H，6 线，J＝3.7Hz，10.2Hz，H-4)，3.556(0.5H，dd，J＝2.6Hz，J＝5.8Hz，H-6)，3.56-3.46(0.5H，m，H-4)，3.27-2.80(5.5H，m，0.5 H-6，SCH2，CH2CN和1H CH2CHO)，2.15-1.90(1H，m，CH2CH(OH)2)，1.336(1.5H，d，J＝6.4Hz，CH3)和1.248ppm(1.5H，d，J＝6.5Hz，CH3). 实施例107 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基)-4-(钠氧羰基甲基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
A.(4R，5S，6S)-4-(烯丙氧羰基甲基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
用重铬酸吡啶鎓(2.0g，5.7mmol)处理在冰浴冷却下的(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(300mg，0.627mmol)在二甲基甲酰胺(10ml)中的溶液，并将该反应物在5℃(冷室)搅拌24小时。用水(100ml)稀释该混合物，用乙酸乙酯(5×20ml)提取水相。合并乙酸乙酯提取液，依次用水(2×50ml)、冰冷却的1%HCl(50ml)、水(3×50ml)和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂得到一残留物，将后者溶解在二氯甲烷/DMF(1∶1)混合物(10ml)中。依次用烯丙醇(1ml)、1-羟基苯并三唑(135mg，1.00mmol)和1，3-二环己基碳化二亚胺(206mg，1.00mmol)处理上述溶液，并将该反应物在约22℃搅拌72小时。合并乙酸乙酯提取液，依次用水(3×20ml)、冰冷却的1N HCl水溶液(20ml)、水(2×20ml)、1M NaHCO3水溶液(20ml)、水(3×20ml)和盐水(20ml)洗涤，干燥(MgSO4)。将蒸除溶剂后所得残留物用两块制备性硅胶板层析(2mm，EtOAc，Rf＝0.9)，得到油状标题化合物(100mg，29.8%); IR(净态)νmax2250(C≡N)，1780，1735和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MH)δ6.03-5.81，5.48-5.22(6H，m，乙烯基 H)，4.82-4.58(4H，2 组 m，CH2-乙烯)，3.370(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.6Hz，H-5)，4.30-4.19(1H，6 线，H-1′)，3.7(1H，ABX的X部分，J＝3.4Hz，H-4)，3.24-3.11，3.04-2.90(2H，2 组 m，SCH2)，3.128(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝4.2Hz，H-6)，2.877，2.860，2.792，2.774(1H，ABX的AB部分，J＝3.4Hz，J＝17.1Hz)，2.601，2.545，2.516，2.460(1H，ABX的AB部分，J＝17.1Hz，J＝11.3Hz，CH2-4)，2.72-2.63(2H，m，CH2CN)，1.147(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.879(9H，s，叔丁基)，0.068和0.063ppm(6H，2 s，二甲基). B.(4R，5S，6S)-4-(烯丙氧羰基甲基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
用冰乙酸(120μl，2.09mmol)处理在冰-甲醇浴冷却下的(4R，5S，6S)-4-(烯丙氧羰基甲基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(100mg，0.187mmol)在THF(3ml)中的溶液，然后滴加1M氟化四丁铵在THF中的溶液(1.3ml，1.3mmol)。将该混合物搅拌30分钟，然后使之在5℃(冷室)反应430小时。用冰冷却的乙酸乙酯(40ml)稀释该混合物，依次用冰冷却的饱和NaHCO3水溶液(4×20ml)、水(2×20ml)和盐水(20ml)洗涤，干燥(MgSO4)。蒸掉溶剂得到一残留物，将后者在制备性硅胶板层析(2mm，EtOAc，Rf＝0.75)，得到油状标题化合物(23mg，29%)，放置固化; IR(净态)νmax3600-3300(OH)，2250(C≡N)，1775，1730和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.04-5.83，5.50-5.24(6H，2 组 m，乙烯基-H)，4.89-4.61(4H，2 组 m，CH2-乙烯)，4.395(1H，dd，J＝3.0Hz，J＝9.8Hz，H-5)，4.30-4.10(1H，m，H-1′)，3.803-3.678(1H，ABX的X部分，J＝3.4Hz，H-4)，3.173(1H，dd，J＝3.1Hz，J＝6.9Hz，H-6)，3.20-3.133，3.09-2.9(2.5H，2 组 m，SCH2和隐藏 d of ABq)，2.884，2.867(AB的一部分，J＝3.4Hz，CH2-4)，2.688(2H，t，J＝7.2Hz，CH2CN)，2.649，2.589，2.562，2.503(1H，ABX的AB部分，J＝11.9Hz，J＝17.5Hz，CH2-4)，1.974(1H，d，J＝4.6Hz，OH)和1.300ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(钠氧羰基甲基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
依次用Pd(PPh3)4(11mg)和N-甲基苯胺(30μl，0.22mmol)处理冰浴冷却下的(4R，5S，6S)-4-(烯丙氧羰基甲基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(23mg，0.055mmol)在CH2Cl2(3ml)中的溶液。将该混合物搅拌20分钟，然后用乙醚(10ml)稀释，用0.1M pH7.0磷酸盐缓冲液(5×2ml)提取。合并水提取液，用乙醚洗涤，然后通过反相μBondapak C18柱(5g，H2O→1%CH3CN)层析，冷冻干燥后，得到粉末状标题化合物(10mg，50%); IR(液体石蜡)νmax3600-3200(OH)，2250(C≡N)，1755和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.328(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝9.5Hz，H-5)，4.297-4.22(1H，m，H-1′)，3.778-3.653(1H，ABX的X部分，J＝3.7Hz，H-4)，3.419)1H，dd，J＝2.8Hz，J＝4.2Hz，H-6).3.30-3.15，3.01-2.90(2H，2 组 m，SCH2)，2.90-2.81(≈2.5H，m，SCH2CN和ABX的B部分的1d)，2.760-2.742(0.77H，d，J＝3.7Hz，ABX的B部分，CH2CO2)，2.346，2.286，2.262和2.203(1H，ABX的A部分，J＝11.8Hz，J＝16.7Hz，CH2CO2)和1.241ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例108 (4R，5S，6S)-3-｛(4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-羟基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5R，6S)-3-二苯基磷酰氧基-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
用辛酸铑(Ⅱ)二聚物(0.2g)处理(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1R)-1-(2-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3-烯丙氧羰基-3-重氮基-2-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(6.93g，12.5mmol)在无水苯(150ml)中的溶液，加热回流(浴温为90-95℃)1小时。减压下蒸除溶剂，将残留物溶解在乙腈(80ml)中，冷却至0-5℃。然后用5分钟时间同时加入N，N-二异丙基乙胺(2.40ml，13.78mmol)和氯磷酸二苯酯(2.85ml，13.75mmol)。加入少许4-N，N-二甲氨基吡啶晶体，并将该混合物搅拌1小时。然后用乙酸乙酯(500ml)稀释该反应混合物，依次用冷水、0.2M pH7.0磷酸盐缓冲液和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压下蒸除溶剂，得到一油状物，后者在硅胶(5×12cm)上进行层析。用甲苯和乙酸乙酯的混合物(95∶5)洗脱，得到5.77g(61%)透明油状标题化合物; IR(NaCl，压片)νmax1788β-内酰胺的C＝O和1730cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ-0.01，0.06和0.07(3 x s，6H，3H和3H，SiCH3)，0.83和0.87(2 x s，2 x 9H，Si叔-Bu)，1.27(d，J＝6.14Hz，3H，CH3CHO)，1.5-1.8和1.9-2.1(m，2H，CH2-4)，3.25(dd，JH6，H5＝2.77Hz，JH6，H1＝6.92Hz，1H，H-6)，3.3-3.7(m，3H，H-4和CH2CH2OSi)，4.12(dd，JH5，H6＝2.77Hz，JH5，H4＝10.35Hz，1H，H-5)，4.20(m，1H，CH3CHO)，4.64(宽 d，J＝5.1Hz，2H，烯丙基的CH2)，5.1-5.4和5.7-6.0(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)和7.1-7.4ppm(m，10H，芳族). B.(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基-(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-3-二苯基磷酰氧基-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.24g，1.63mmol)的无水乙腈(20ml)溶液冷却至0-5℃，依次用N，N-二异丙基乙胺(0.57ml，3.27mmol)和在乙腈(3ml)中的(2S，4S)-1-N-烯丙氧羰基-2-二甲氨基羰基-4-巯基吡咯烷(0.84g，3.27mmol)〔按欧洲专利申请Ep-126，587中所述常规方法制得〕处理上述溶液。然后将该反应混合物在0-5℃搅拌16小时。用乙酸乙酯(200ml)稀释该溶液，依次用水、0.2M磷酸盐缓冲液pH7.0和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压下蒸除溶剂，得到一油状物，后者在硅胶(2.5×20cm)上层析，用甲苯和乙酸乙酯的混合物(1∶1)洗脱，得到0.80g(64%)油状标题化合物; IR(NaCl，压片)νmax1775(β-内酰胺的C＝O)1710(酯的C＝O)和1660cm-1(酰胺的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.03，0.05和0.09(3 x s，3H，3H和6H，SiCH3)，0.87和0.89(2 x s，2 x 9H，Sit-But)，1.26(d，J＝6.25Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.1(m，3H，CH2-4和吡咯烷的H-3)，2.6(m，1H，吡咯烷的H-3)，2.95，1.97，3.03和3.08(4s，共 6H，CON(CH3)2，3.05(与NCH3重叠，1H，H-6)，3.4-3.6和3.7-3.9(2 x m，3H和2H，H-4，CH2OSi和吡咯烷的H-5)，4.0-4.2(m，1H，吡咯烷的H-4)，4.2-4.4(m，2H，H-5和CH3CHO)，4.5-4.9(m，5H，烯丙基的CH2和吡咯烷的H-2)，5.1-5.5和5.8-6.1ppm(2 x m，4H和2H，烯丙基的CH). C.(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基-(2S)-2-二甲基氨基羰基〕吡咯烷硫基-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-羟基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基-(2S)-2-二甲基氨基羰基〕吡咯烷硫基-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.70g，0.91mmol)在无水四氢呋喃(10ml)中的溶液，在0-5℃下滴加乙酸(0.62ml，11.0mmol)处理，然后滴加5.5ml(5.5mmol)1M的氟化四丁铵的四氢呋喃溶液。将该混合物在10℃下放置144小时。然后用乙酸乙酯(200ml)稀释该溶液，依次用冷的饱和碳酸氢钠和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压下蒸除溶剂，得到一油状物，后者在硅胶(2.5×12cm)上层析。先用乙酸乙酯洗脱，得到0.30g(50%)单去保护的(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基-(2S)-2-二甲基氨基羰基〕吡咯烷硫基-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-羟基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯〔见实施例109，方法B，步骤A〕。
然后用乙酸乙酯、丙酮和乙腈的混合物(6∶2∶2)洗脱，得到0.179g(36%)油状标题卡巴潘尼姆，该产物污染有一些四丁铵盐，可直接用于下一步反应 IR(NaCl，压片)νmax3400(OH)，1775(β-内酰胺的C＝O)，1710(酯的C＝O)和1650cm-1(酰胺的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.33(d，J＝6.33;Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.0(m，3H，CH2-4和吡咯烷的H-3)，2.9(m，1H，吡咯烷的H-3)，2.95，2.97，3.03和3.09(4 x s，共6H，NCH3)，3.4～5.0(宽，16H)，5.2-5.5和6.8-6.1ppm(4H和2H，烯丙基的CH). D.(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔-2(S)-2-二甲基氨基羰基〕吡咯烷硫基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-羟基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基-2(S)-2-二甲基氨基羰基〕吡咯烷硫基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-羟基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.33g，0.613mmol)溶解在二氯甲烷(10ml)中，在22℃，于氮气氛下，用Pd(PPh3)4(0.030g)和N-甲基苯胺(0.26ml，2.45mmol)处理上述溶液。1小时后，过滤收集形成的固体，减压下干燥，得到0.164g(65%)粉末状标题化合物粗品。该固体在反相硅胶(μ-Bondapak C-18，2.5×14cm)上层析，用梯度为(0-5%)的乙腈水溶液洗脱。将UV活性级分冷冻干燥，得到0.122g(44%)白色非晶形粉末状标题化合物〔α〕22D＝-58.5°(c1.0，H2O); 纯度(HPLC)94.7%(μBondapak C-18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，UV检测器300nm，保留时间为5.9分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax302nm(8，680); IR(KBr)νmax1750(β-内酰胺的C＝O)，1650，1660(酰胺的C＝O)和1600cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.37Hz，3H，CH3CHO)，1.7-2.2(m，3H，羟基乙基的CH2-1和吡咯烷的H-3)，3.0(m与NCH3重叠，1H，吡咯烷的H-3)，3.0和3.07(2 x s，2 x 3H，NCH3)，3.3-3.9(m，5H，H-4，CH2CH2OH和吡咯烷的H-5)，3.48(dd，JH6，H5＝2.73Hz，JH6，H1＝5.91Hz，1H，H-6)，3.95(m，1H，吡咯烷的H-4)，4.2-4.4(m，2H，H-5和CH3CHO重叠)，和4.83ppm(t，J＝5.8Hz，1H，吡咯烷的H-2). 实施例109 (4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-3-((4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
方法A A.(4R，5R，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-3-二苯基磷酰氧基-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(3S，4S)-4-〔(1R)-1-(2-叠氮基乙基)-3-烯丙氧羰基-3-重氮基-2-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮(4.0g，8.6mmol)溶解在无水苯(125ml)中，在氮气氛下，用辛酸铑(Ⅱ)二聚体(0.075g)处理上述溶液，然后加热回流(浴温为90℃)30分钟。减压下除去溶剂，并将中间体二环酮溶解在无水乙腈(60ml)中，冷却至0-5℃。然后，用5分钟时间同时加入氯磷酸二苯酯(2.0ml，9.65mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.68ml，9.64mmol)处理上述溶液。继之加入少许4-N，N-二甲氨基吡啶晶体，并将该混合物在0-5℃搅拌45分钟。然后用乙酸乙酯(500ml)稀释该反应混合物，依次用冷水、0.2M pH7.0磷酸盐缓冲液和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压下蒸发溶剂后，将残留物在硅胶(5×10cm)上层析，用梯度为0-5%乙酸乙酯在甲苯中的溶液洗脱，得到3.84g(66%)油状标题化合物; IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)，1788(β-内酰胺的C＝O)和1730cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.07和0.08(2s，6H，SiCH3)，0.87(s，9H，Si-tBu)，1.28(d，J＝6.18Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.2(m，2H，CH2-4)，3.18(dd，JH6，H5＝2.95Hz，JH6，H1＝7.38Hz，1H，H-6)，3.1-3.5(m，3H，CH2OH和H-4)，4.12(dd，JH5，H6＝2.95Hz，JH5，H4＝10.54Hz，1H，H-5)，4.19(m，1H，CH3CHO)，4.65(m，2H，烯丙基的CH2)，5.1-5.5和5.8-6.0(2m，2H和1H，烯丙基的CH)，和7.2-7.5(m，10H，芳族). B.(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基-(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基｝-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-3-二苯基磷酰氧基-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(3.84g，5.74mmol)在无水乙腈(40ml)中的溶液冷却至0-5℃，在氮气氛下，用N，N-二异丙基乙胺(2.0ml，11.6mmol)处理之，然后加入(2S，4S)-1-N-烯丙氧羰基-2-二甲氨基羰基-4-巯基吡咯烷〔按Ep-126，587所述通法制得〕(3.0g，11.6mmol)在乙腈(7ml)中的溶液。在0-5℃反应17小时后，用乙酸乙酯(500ml)稀释该反应混合物，依次用冷水、饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。将在减压下蒸除溶剂后所得残留物在硅胶(5×10cm)上层析，用甲苯和乙酸乙酯的混合物(1∶1)作为洗脱剂，得到2.47g(64%)白色泡沫状标题化合物 IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)，1780(β-内酰胺的C＝O)，1710(酯的C＝O)和1660cm-1酰胺的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.1(s，6H，SiCH3)，0.9(s，9H，Si-tBu)，1.31(d，J＝6.03Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.1(m，3H，吡咯烷的H-3和CH2-4)，2.6-2.8(m，1H，吡咯烷的H-3)，2.96，2.98，3.05和3.11(4s，共 6H，NCH3)，3.1(与NCH3重叠，1H，H-6)，3.3-3.8(m，5H，吡咯烷的CH2-5，CH2N3和H-4)，4.1(m，1H，吡咯烷的H-4)，4.1-4.3(m，2H，H-5和CH3CHO)，4.5-4.9(m，5H，烯丙基的CH2和吡咯烷的H-2)，5.1-5.5和5.8-6.1ppm(2 x m，4H和2H，烯丙基的CH). 方法B A.(4R，5S，6S)-4-(2″-羟基乙基)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基-(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基-(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(2.64g，3.44mmol)〔按实施例108，步骤B制备〕溶解在无水四氢呋喃(50ml)中，在0-5℃，氮气氛下，先用乙酸(1.2ml，21.0mmol)处理上述溶液，然后加入10.3ml(10.3mmol)1M氟化四丁铵在四氢呋喃中的溶液。在10℃反应16小时后，用乙酸乙酯(400ml)稀释该反应混合物，用冷的饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压下蒸发溶剂，得到一油状物，将后者在硅胶(4×8cm)上层析，用乙酸乙酯洗脱，得到1.82g(81%)油状标题卡巴潘尼姆 IR(NaCl，压片)νmax3450(OH)，1755(β-内酰胺的C＝O)，1705(酯的C＝O)和1650cm-1(酰胺的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.09(s，6H，SiCH3)，0.89(s，9H，Si-tBu)，1.29(d，J＝6.1Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.1(m，3H，CH2CH2OH和吡咯烷的H-3)，2.6-2.8(m，1H，吡咯烷的H-3)，2.96，2.98，3.05和3.09(4s，共 6H，CON(CH3)2)，3.17(宽 dd，JH6，H5＝2.5Hz，JH6，H1＝6.1Hz，1H，H-6)，3.46(t，2H，吡咯烷的H-5和H-4重叠)，3.6-3.9(m，3H，CH2CH2OH和吡咯烷的H-5)，4.1(m，1H，吡咯烷的H-4)，4.15-4.3(m，2H，H-5和CH3CHO)，4.5-4.9(m，5H，烯丙基的CH2和吡咯烷的H-2)，5.1-5.5和5.9-6.1ppm(2 x m，4H和2H，烯丙基的CH). B.(4R，5S，6S)-3-((4S)-〔1-N-烯丙氧羰基-(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-3-((4S)-〔1-N-烯丙氧羰基-(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-4-(2″-羟基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.82g，2.79mmol)溶解在无水四氢呋喃(200ml)中，在-20℃，氮气氛下，用三苯膦(1.17g，4.46mmol)和6.5ml(4.81mmol)0.74M叠氮酸在甲苯中的溶液处理上述溶液。然后滴加偶氮二甲酸二乙酯(0.75ml，4.76mmol)，并将所得混合物搅拌30分钟。然后用乙酸乙酯(500ml)稀释该反应混合物，用冷的饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。然后在减压下浓缩除去溶剂，得到一糊状物，在0-5℃下将后者与甲苯(25ml)一起研制，过滤除去肼二甲酸二乙酯晶体。浓缩滤液，以相同的方式用乙醚(25ml)处理，除去三苯膦氧化物。然后将滤液在硅胶(4×11cm)上层析，用甲苯和乙酸乙酯的混合物(1∶1)作为洗脱剂，得到2.3g油状标题化合物，该化合物污染有三苯膦氧化物。该产物的红外和1H NMR谱与方法A所得产物的光谱相同。
C.(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基-(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基-(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(2.47g，3.65mmol)在无水四氢呋喃(50ml)中的溶液冷却至0-5℃，在氮气氛下先用乙酸(1.25ml，21.8mmol)处理，然后加入11.0ml(11.0mmol)1M氟化四丁铵在四氢呋喃中的溶液。将该溶液在10℃放置7天。用乙酸乙酯(500ml)稀释该反应混合物，用冷的饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压下蒸发溶剂，得到一油状物，后者在硅胶(4×11cm)上层析，用梯度为50→100%乙酸乙酯在甲苯中的溶液洗脱，得到1.43g(70%)白色泡沫状标题化合物 IR(NaCl，压片)νmax2105(N3)，1780(β-内酰胺的C＝O)1710(酯的C＝O)和1650cm-1(酰胺的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.39(d，J＝6.17Hz，3H，CH3CHO)，1.7-2.2(m，3H，吡咯烷的H-3和CH2-4)，2.6-2.8(m，1H，吡咯烷的H-3)，2.96，2.98，3.06和3.10(4 x s，总数 6H，NCH3)，3.15与NCH3重叠，1H，H-6)，3.3-3.7(m，5H，吡咯烷的CH2-5，H-4和CH2N3)，4-4.2(m，1H，吡咯烷的CH-4)，4.2-4.4(m，2H，H-5 and CH3CHO)，4.5-4.9(m，5H，烯丙基的CH2和吡咯烷的H-2)，5.1-5.5和5.7-6.1ppm(2 x m，4H，和2H，烯丙基的CH). D.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-3-((4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基-(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.18g，2.1mmol)溶解在无水二氯甲烷(40ml)中，在22℃，在氮气氛下，先用Pd(PPh3)4(0.1g)处理该溶液，然后加入0.91ml(8.4mmol)N-甲基苯胺。1小时后，用冷水(3×40ml)提取有机相，合并水提取液，并将其置于减压条件下以除去痕量的有机溶剂。然后将水相在反相硅胶(μ-Bondapak C18，3.5×15cm)上层析，用梯度为0-15%乙腈在水中的溶液为洗脱剂。将UV活性级分冷冻干燥后，得到0.50g(54%)白色非晶形粉末状标题卡巴潘尼姆〔α〕22D-56.2°(c1.0，H2O); 纯度(HPLC)96%(μBondapak C-18，3.9mm×30cm，15%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液，流速为1ml/分，UV检测器302nm，保留时间为7.6分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax302nm(8，420); IR(KBr)νmax2100(N3)，1760(β-内酰胺的C＝O)，1655(酰胺的C＝O)和1600cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.36Hz，3H，CH3CHO)，1.7-2.3(m，3H，吡咯烷的H-3和CH2-4)，3.0和3.07(2 x s，2 x 3H，NCH3)，3.1(m，1H，吡咯烷的H-3)，3.3-3.7(m，5H，吡咯烷的H-5，H-4，H-6和CH2N3)，3.77(dd，Jgem＝12.15Hz，JH5，H4＝6.32Hz，吡咯烷的H-5)，4.0(m，1H，吡咯烷的H-4)，4.27(m，1H，CH3CHO)4.30(dd与CH3CHO重叠，JH5，H6＝2.7Hz，H-5)和4.9ppm(与HOD重叠，吡咯烷的H-2). 实施例110 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-｛(4S)-4-〔(2S)-2-二甲基氨基羰基〕吡咯烷硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐
将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-3-｛(4S)-4-〔(2S)-2-二甲基氨基羰基〕吡咯烷硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.70g，1.60mmol)溶解在冷水(140ml)中，在0-5℃，45psi氢气压下，用1.9g 5%Pd/氧化铝将上述溶液氢化1小时。然后加入0.18ml(3.2mmol)乙酸(pH由8.1降至4.2)，在硅藻土垫上滤出催化剂。在反相硅胶柱(μBondapak C18，2.5×13cm)上层析滤液，用水作为洗脱剂。合并UV活性级分，冷冻干燥，再用相同的柱进行第二次层析，将合适的级分冷冻干燥，得到0.35g(47%)白色非晶形粉末状标题卡巴潘尼姆〔α〕22D＝-47.8°(c1.0，H2O); 纯度(HPLC)98.8%(μBondapak C18，3.4mm×30cm，5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液，流速为1ml/分，UV检测器300nm，保留时间为11.3分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax300nm(8，130); IR(KBr)νmax1760(β-内酰胺的C＝O)，1660(酰胺的C＝O)和1600cm-1(宽，羧酸根的C＝O). 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.35(d，J＝6.35 Hz，3H，CH3CHO)，1.8-2.4(m，3H，吡咯烷的H-3和CH2-4)，1.94(s，CH3CO2H)，3.02和3.09(2s，2 x 3H，CON(CH3)2)，2.9-3.2(m与NCH3重叠，3H，吡咯烷的H-3和CH2NH2)，3.25-3.5(m，2H，吡咯烷的H-5和H-4)，3.51(dd，JH6，H5＝2.89Hz，JH6，H1＝6.44Hz，1H，H-6)，3.6-3.75(m，1H，吡咯烷的H-5)，3.98(m，1H，吡咯烷的H-4)，4.3(m，1H，CH3CHO)，4.34(dd与CH3CHO重叠，JH5，H6＝2.89Hz，JH5，H4＝9.70Hz，1H，H-5)和4.74ppm(t，J＝8.6Hz，1H，吡咯烷的H-2). 实施例111 (4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-｛(4S)-4-〔(2S)-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基)-(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(2R，4R，5R，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(8.23mmol，将3.0g，8.23mmol重氮基前体环化制得)溶解在无水乙腈(60ml)中，在0-5℃，于氮气氛下，用5分钟时间同时加入氯磷酸二苯酯(1.9ml，9.18mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.6ml，9.18mmol)处理上述溶液。然后加入少许4-N，N-二甲氨基吡啶晶体，并将该溶液搅拌1小时。补加N，N-二异丙基乙胺(2.0ml，11.5mmol)，继之加入(2S，4S1-N-烯丙氧羰基-2-二甲氨基羰基-4-巯基吡咯烷(3.0g，11.65mmol))在乙腈(7ml)中的溶液，将所得混合物在0-5℃下搅拌18小时。加入乙酸乙酯(500ml)使该反应混合物骤冷，依次用冷水、饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压下蒸发溶剂，得到一油状物，后者在硅胶(6.5×12cm)上层析，用乙酸乙酯/甲苯(1∶1至EtOAc)进行梯度洗脱，得到白色泡沫状标题化合物(1.59g，33%); IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)，1775(β-内酰胺的C＝O)，1705(酯的C＝O)和1650cm-1(酰胺的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.37和1.39(2d，J＝6.1Hz，和J＝6.18Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.0(m，5H，吡咯烷的H-3)，CH2-1和丙基的2)，2.6-2.8(m，1H，吡咯烷的H-3)，2.96，2.97，3.05和3.1(4s，共 6H，CON(CH3)2)，3.1-3.7(m，6H，吡咯烷的CH2-5，CH2N3，H-4和H-6)，4.0(m，1H，吡咯烷的H-4)，4.1-4.3(m，2H，H-5和CH3CHO)，4.5-4.9(m，5H，吡咯烷的H-2和烯丙基的CH2)，5.1-5.5和5.8-6.1ppm(2m，4H和2H，烯丙基的CH). B.(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-((4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基)-(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.59g，2.76mmol)溶解在无水二氯甲烷(50ml)中，在22℃，氮气氛下，先用Pd(PPh3)4(0.12g)处理上述溶液，然后加入1.2ml(11.1mmol)N-甲基苯胺。3小时后，用水(3×50ml)提取反应混合物，合并水相，并将其置于减压条件下以除去痕量的有机溶剂。将水相在反相硅胶(μBondapak C18，3.5×15cm)上层析，用梯度为0-15%的乙腈在水中的溶液洗脱，经冷冻干燥后，得到0.60g(48%)白色非晶形粉末状标题卡巴潘尼姆〔α〕22D＝-47.7°(c1.0，H2O); 纯度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用15%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1.5ml/分，UV检测器302nm，保留时间为9分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax302nm(9，737); IR(KBr)νmax2100(N3)，1755(β-内酰胺的C＝O)，1655(酰胺的C＝O)和1600cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.39Hz，3H，CH3CHO)，1.4-2.0(m，5H，丙基的CH2-1和2及吡咯烷的H-3)，2.99和3.07(2s，2 x 3H，CON(CH3)2)，2.9-3.1(与CON(CH3)2重叠CH3)2，1H，H-3吡咯烷的H-3)，3.2-3.5(m，5H，吡咯烷的H-5，H-4，H-6和CH2N3)，3.63(dd，Jgem12.25Hz，JH5，H4＝6.16Hz，1H，吡咯烷的H-5)，3.93(m，1H，吡咯烷的H-4)，4.2-4.4(m，2H，H-5和CH3CHO重叠)和4.65ppm(t，J＝8.5Hz，1H，吡咯烷的H-2). 实施例112 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-((4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸半磷酸氢盐
将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-((4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.51g，1.13mmol)在冷水(100ml)中的溶液，在45psi氢气压下，在0-5℃，用0.5g5%钯/氧化铝氢化1小时。然后加入50ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液，在硅藻土(Celite)垫上滤除催化剂。将滤液在反相硅胶(μ-Bondapak C18，3.5×14cm)上层析，用梯度为0-10%乙腈在0.02M pH7.0磷酸盐缓冲液中的溶液作为洗脱剂。将UV活性级分合并在相似的柱(2.5×14cm)上用水代替缓冲液作为洗脱盐。将UV活性级分冷冻干燥，得到0.25g(46%)白色非晶形粉末状标题卡巴潘尼姆;〔α〕22D-67.6°(c1.0，H2O); 纯度(HPLC)99%(μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，用8%CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为0.8ml/分，UV检测器302nm，保留时间为5.68分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax302nm(10，400); IR(KBr)νmax1760(β-内酰胺的C＝O)，1645(酰胺的C＝O)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.33Hz，3H，CH3CHO)，1.4-2.0(m，5H，吡咯烷的H-3及丙基的CH2-1和2)，2.73(m，1H，吡咯烷的H-3)，2.97和3.07(2s，2 x 3H，CON(CH3)2)，3-3.2(与NCH3重叠，4H，吡咯烷的CH2-5和CH2NH2)，3.34(宽 t，1H，H-4)，3.38(dd，JH6，H5＝2.59Hz，JH6，H1＝6.27Hz，1H，H-6)，3.73(m，1H，吡咯烷的H-4)，4.10(dd 收缩成 t，J＝8.0Hz，1H，吡咯烷的H-2)和4.2-4.4ppm(m，2H，CH3CHO和H-5重叠). 实施例113 (4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸半磷酸氢盐
将(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-｛(4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸半磷酸氢盐(0.14g，0.33mmol)在水(15ml)中的溶液在0-5℃下用1N NaOH调至pH8-8.5，然后用5分钟时间分小批量加入氨基亚氨基甲磺酸(0.22g，1.77mmol)处理之。在加料期间及加料完成后2小时内，将该反应混合物的pH维持在8-8.5。然后加入15ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液，并将所得溶液在反相硅胶(μBondapak C18，2.5×14cm)上层析。用梯度为0-15%乙腈在水中的溶液洗脱，经冷冻干燥后，得到0.068g(45%)白色非晶形粉末状标题化合物 纯度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用8%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，UV检测器302nm，保留时间为7.2分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax302nm(10，800); IR(KBr)νmax1755(β-内酰胺的C＝O)，1640(酰胺的C＝O)和1590cm-1(sh，羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.38Hz，3H，CH3CHO)，1.4-2.0(m，5H，吡咯烷的H-3及丙基的CH2-1和2)，2.75(m，1H，吡咯烷的H-3)，2.97和3.08(2s，2 x 3H，NCH3)，3.1-3.4(m，5H，吡咯烷的CH2-5，丙基的CH2N-3和H-4)，3.33(dd，JH6，H5＝2.55Hz，JH6，H1＝6.21Hz，1H，H-6)，3.75(m，1H，吡咯烷的H-4)，4.16(AMX系统的X部分，JAX＝8.8Hz，JMX＝7.4Hz，1H，吡咯烷的H-2)，4.25(dd与CH3CHO重叠JH5，H6＝2.55Hz，1H，H-5)和4.27ppm(m，1H，CH3CHO). 实施例114 (4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-3-〔(2-烯丙氧羰基氨基乙基)硫基〕-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(2R，4R，5R，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(10.0mmol，将4.64g，10.0mmol重氮基前体环化制得)溶解在无水乙腈(75ml)中，在0-5℃，氮气氛下，用5分钟时间同时加入氯磷酸二苯酯(2.3ml，11.1mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.9ml，10.9mmol)处理上述溶液。然后加入少许4-N，N-二甲氨基吡啶晶体，将所得混合物在0-5℃搅拌30分钟。然后先向该溶液中补加N，N-二异丙基乙胺(6.0ml，34.5mmol)，再加入2-巯基乙基氨甲酸烯丙酯(见实施例116，步骤A)(5.1g，33.4mmol)在乙腈(5ml)中的溶液，将所得混合物在0-5℃搅拌20小时。然后用乙酸乙酯(500ml)稀释该溶液，依次用水、饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。将减压蒸除溶剂后得到的残留物在硅胶(5×10cm)上层析，用梯度为0-10%乙酸乙酯在甲苯中的溶液为洗脱剂。蒸发合适的级分，得到浅黄色油状标题化合物(4.37g，75%)。经TLC和1H NMR测定，该物质污染有一部分杂质(二硫化物)，将其直接用于下一步反应。
IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)，1775(β-内酰胺的C＝O)和1720cm-1(宽，酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.09(s，6H，SiCH3)，0.89(s，9H，Si-tBu)，1.30(d，J＝6.05Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.0(m，2H，CH2-4)，2.8-3.6(m，8H，SCH2CH2N，CH2N3，H-4和H-6)，4.1-4.3(m，2H，H-5和CH3CHO)，4.5-4.9(m，4H，烯丙基的CH2)，5.1-5.5和5.8-6.1ppm(2m，6H，和2H，烯丙基的CH和NH)。
B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-烯丙氧羰基氨基乙基)硫基〕-4-(2″-叠氮基乙基)-7-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-烯丙氧羰基氨基乙基)硫基〕-4-(2″-叠氮基乙基)-7-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(4.37g，7.54mmol)溶解在无水四氢呋喃(120ml)中，在0-5℃，氮气氛下，先用乙酸(2.7ml，47.5mmol)处理该溶液，然后用5分钟时间滴加24ml(24.0mmol)氟化四丁铵在四氢呋喃中的溶液。将该溶液在10℃放置7天。用乙酸乙酯(500ml)稀释该反应混合物，用饱和碳酸氢钠(2×)和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压下蒸发溶剂，得到一油状物，后者在硅胶(6.5×11cm)上层析，用乙酸乙酯/甲苯(7∶3至1∶1)进行梯度洗脱。蒸发UV活性级分，得到1.17g(33%)透明油状标题化合物 IR(NaCl)νmax3480(OH)，2100(N3)，1770(β-内酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.39(d，J＝6.24Hz，3H，CH3CHO)，1.7-2.1(m，2H，CH2-4)，2.7-3.15(m，2H，SCH2)，3.18(dd，JH6，H5＝2.66Hz，JH6，H1＝7.97Hz，1H，H-6)，3.2-3.7(m，5H，CH2NH，CH2N3和H-4)，4.23(m，与H-5重叠，1H，CH3CHO)，4.25(dd，JH5，H6＝2.66Hz，JH5，H4＝9.57Hz，1H，H-5)，4.57和4.75(2m，2 x 2H，烯丙基的CH2)，5.1-5.5和5.8-6.1ppm(2m，6H和2H，烯丙基的CH和NH). C.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-3-〔(2-烯丙氧羰基氨基乙基)硫基〕-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.17g，2.5mmol)溶解在无水二氯甲烷(30ml)中，在22℃，氮气氛下，先用Pd(PPh3)4(0.072g)处理上述溶液，然后加入N-甲基苯胺(1.6ml，14.8mmol)。将该溶液搅拌3小时，同时出现沉淀。用冷水(3×35ml)提取该反应混合物，合并水相，并将其置于减压条件下以除去痕量的有机溶剂。将该溶液在反相硅胶(μBondapak C18，2.5×14cm)上层析，用乙腈水溶液进行梯度洗脱。将UV活性级分冷冻干燥，得到白色非晶形固体状标题卡巴潘尼姆〔α〕22D+21.5°(c1.0，H2O); 纯度(HPLC)99.2%(μBondapak C18(3.9mm×30cm)，用10%CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，UV检测器302nm，保留时间为7.68分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax298nm(7401nm); IR(KBr)νmax2100(N3)，1760(β-内酰胺的C＝O)和1590cm-1(宽，羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.38Hz，3H，CH3CHO)，1.7-2.2(m，2H，CH2-4)，2.9-3.7(宽 m，7H，SCH2CH2NH2，CH2N3和H-4)，3.50(dd，JH6，H5＝2.67Hz，JH6，H1＝6.24Hz，1H，H-6)和4.2-4.4ppm(m，2H，H-5和CH3CHO重叠). 实施例115 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐
将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.30g，0.88mmol)溶解在冷水(90ml)中，在0-5℃，45psi氢气压下，用1.2g5%Pd/氧化铝将上述溶液氢化50分钟。然后加入0.1ml(1.6mmol)乙酸(pH由9.3变为4.3)，在硅藻土(Celite)垫上滤除催化剂。将滤液在反相硅胶(2.5×14cm)上层析，用0.005M乙酸水溶液作为洗脱剂。产物随溶剂前沿从柱中很快洗出。合并UV活性级分，冷冻干燥，在相同柱上进行第二次层析。冷冻干燥，得到0.22g(66%)白色非晶形粉末状标题卡巴潘尼姆。经UV和1H NMR测定，该产物的纯度为60%，它含有一些乙酸的无机盐(基于叠氮基前体的UV吸收强度7400); 纯度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为0.9ml/分，UV检测器300nm，保留时间为5.7分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax296nm(4，446); IR(KBr)νmax1760(β-内酰胺的C＝O)和1570cm-1(宽，羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J-6.36Hz，3H，CH3CHO)，1.9(s，CH3CO2H)，1.8-2.4(m，2H，CH2-4)，2.8-3.45(m，7H，SCH2CH2NH2，H-4和CH2NH2)，3.49(dd，JH6，H5＝2.84Hz，JH6，H4＝6.42Hz，1H，H-6)，4.2-4.4ppm(m，2H，H-5和CH3CHO). 实施例116 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕--7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.2-巯基乙基氨甲酸烯丙酯 将2-氨基乙硫醇盐酸盐(4.4g，38.7mmol)在无水乙腈(30ml)中的悬浮液冷却至0-5℃，在氮气氛下用N，N-二异丙基乙胺(16.0ml，91.8mmol)处理。5分钟后，立即一次加入氯代三甲基硅烷(6.56ml，51.7mmol)，并将该混合物搅拌15分钟。然后先滴加氯甲酸烯丙酯(4.24ml，40.0mmol)，再滴加N，N-二异丙基乙胺(6.9ml，29.6mmol)(10分钟)，将所得混合物在0-5℃搅拌30分钟，然后在22℃搅拌2小时。加入水(100ml)，用二氯甲烷(2×100ml)提取反应混合物。合并有机相，依次用1N盐酸(20ml)、0.2M pH7.0磷酸盐缓冲液和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)。减压下蒸发溶剂，得到6.5g硫醇粗品，为透明油状物，后者直接用于下一步偶合步骤。标题化合物的制备基于I.Shinkai等人在Synthesis，924(1980)中所述的方法。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.36(t，J＝8.53Hz，1H，SH)，2.66(m，2H，SCH2)，3.37(m，2H，CH2N)，4.57(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2(宽，1H，NH)，5.2-5.4和5.8-6.1ppm(2m，2H和1H，烯丙基的CH). B.(4R，5S，6S)-3-〔(2-烯丙氧羰基氨基乙基)硫基〕-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5R，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(11.0mmol，将4.0g，11.0mmol重氮基前体环化制得)在无水乙腈(50ml)中的溶液冷却至0-5℃，用5分钟时间同时滴入氯磷酸二苯酯(2.3ml，11.5mmol)和N，N-二异丙基乙胺(2.3ml，11.5mmol)处理上述溶液。然后加入少许4-N，N-二甲氨基吡啶晶体，并将该溶液搅拌1小时。然后先滴加N，N-二异丙基乙胺(2.3ml，11.5mmol)，再滴加氯代三甲硅烷(1.46ml，11.5mmol)，并将所得混合物搅拌15分钟，由此将羟基甲硅烷基化。补加N，N-二异丙基乙胺(3.8ml，21.9mmol)，并加入2-巯基乙基氨甲酸烯丙酯(3.53g，21.9mmol)，将该混合物在0-5℃搅拌16小时。加入乙酸乙酯(400ml)和水使该反应混合物骤冷。依次用2%冷的柠檬酸水溶液、0.2M pH7.0磷酸盐缓冲液和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压下蒸除溶剂，将残留物溶解在四氢呋喃(100ml)和水(50ml)的混合物中，并且在0-5℃下用乙酸(5ml)处理。在0-5℃反应1小时，在22℃反应2小时后，用乙酸乙酯(400ml)稀释该反应混合物，依次用冷的饱和NaHCO3、0.2M pH7.0磷酸盐缓冲液和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压下蒸除溶剂，将所得油状物在硅胶(4×12cm)上层析，用乙酸乙酯/甲苯(8∶7至1∶1)进行梯度洗脱，得到3.19g(61%)油状标题化合物 IR(NaCl，压片)νmax3400(OH)，2100(N3)，1755(β-内酰胺的C＝O)和1705cm-1(宽，酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.39(d，J＝6.25Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.0(m，4H，丙基的CH2-1和2)，2.7-3.2(m，2H，SCH2)，3.24(dd，JH6，H5＝2.63Hz，JH6，H1＝7.46Hz，1H，H-6)，3.2-3.6(m，5H，CH2N3，CH2N和H-4)，4.24(dd，JH5，H6＝2.63Hz，JH5，H4＝9.43Hz，1H，H-5)，4.24(与H-5重叠，1H，CH3CHO)，4.56和4.75ppm(2m，2 x 2H，烯丙基的CH2)，5.1-5.5(m，5H，烯丙基的CH和NH)和5.8-6.1ppm(m，2H，烯丙基的CH). C.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-3-〔(2-烯丙氧羰基氨基乙基)硫基〕-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(3.19g，6.65mmol)溶解在无水二氯甲烷(80ml)中，在22℃，氮气氛下，用Pd(PPh3)4(0.19g)和N-甲基苯胺(4.3ml，40.0mmol)处理上述溶液。3小时后，用冷水(200ml)稀释含有胶样沉淀的反应混合物，用2N盐酸将pH调至3.8，以使氨基酸溶解。收集冷却的水相，用二氯甲烷洗涤，用1N NaOH将pH调至6.5，然后将其置于减压条件下以除去痕量的有机溶剂。将该溶液在反相硅胶(μBondapak C18，3×15cm)上层析，用梯度为0-10%的乙腈水溶液为洗脱剂。将UV活性级分冷冻干燥，得到1.28g(54%)白色非晶形粉末状标题化合物〔α〕22D+32.6°(c1.0，H2O); 纯度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用10%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，UV检测器300nm，保留时间为13.3分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax298nm(8，425); IR(KBr)νmax2100(N3)，1760(β-内酰胺的C＝O)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.37Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.0(m，4H，丙基的CH2-1和2)，2.8-3.5(m，5H，SCH2CH2NH2和H-4)，3.42(t，J＝6.2Hz，3H，CH2N3)，3.47(dd，JH6，H5＝2.70Hz，JH6，H1＝5.98Hz，1H，H-6)，4.26(dd，JH5，H6＝2.70Hz，JH5，H4＝9.35Hz，1H，H-5)和4.28ppm(m与H-5重叠，1H，CH3CHO). 实施例117 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐
将(4R，5S，6S)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-4-(3″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.292g，0.82mmol)溶解在水(90ml)中，在0-5℃，45psi氢气压下，用1.2g5%Pd/氧化铝将上述溶液氢化1小时。然后加入0.1ml(1.64mmol)乙酸，经硅藻土垫滤除催化剂。然后在反相硅胶(μBondapak C18，3×12cm)上层析滤液，用0.005M乙酸水溶液作为洗脱剂。合并UV活性级分，冷冻干燥，得到0.264g(82%)白色非晶形固体状标题化合物〔α〕22D+37.0°(c1.0，H2O); 纯度(HPLC)98%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为0.8ml/分，UV检测器300nm，保留时间为4.9分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax298nm(7，517); IR(KBr)νmax1755(β-内酰胺的C＝O)和1570cm-1(宽，羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.34Hz，3H，CH3CHO)，1.4-2.0(m，4H，丙基的CH2-1和2)，1.92(s，CH3CO2H)，2.8-3.4(m，7H，SCH2CH2NH2，丙基的CH2NH2-3和H-4)，3.43(dd，JH6，H5＝2.73Hz，JH6，H1＝6.37Hz，1H，H-6)，4.2-4.3ppm(m，2H，H-5和CH3CHO重叠). 实施例118 (4R，5S，6S)-3-〔(2-N-亚胺甲基氨基乙基)硫基〕-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
用1M NaOH将(4R，5S，6S)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.460g，1.29mmol)在冷水(25ml)中的悬浮液调至pH8.5，然后在0-5℃，用10分钟时间分小批量加入甲亚胺酸苄酯盐酸盐(0.78g，4.52mmol)处理上述悬浮液。在整个加料期和其后的25分钟内，用1M NaOH将pH维持在8-8.5。然后加入20ml 0.2M pH6磷酸盐缓冲液，用乙酸乙酯(20ml)洗涤该反应混合物。将水相置于减压条件下以除去痕量的有机溶剂，然后在反相硅胶(μBondapak C18，2.5×11cm)上层析。用梯度为0-15%乙腈在0.01M磷酸盐缓冲液中的溶液洗脱。合并UV活性级分，减压(T＜20℃)浓缩，在相同的柱上用水代替缓冲液作为洗脱剂脱盐。将合适的级分冷冻干燥，得到0.240g(48%)白色非晶形粉末状标题化合物〔α〕22D+16.0°(c1.0，H2O); 纯度(HPLC)99.4%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用20%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为0.8ml/分，UV检测器300nm，保留时间为6.06分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax302nm(9，768); IR(KBr)νmax2100(N3)，1955(β-内酰胺的C＝O)，1715(亚胺甲基的CN)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.4-2.0(m，4H，丁基的CH2-1和2)，2.8-3.3(m，2H，SCH2)，3.3-3.8(m，6H，H-6，H-4，CH2N3和CH2NH)，4.2-4.4(m，2H，H-5和CH3CHO重叠)，7.76和7.83ppm(2S，1H，NHCH＝NH). 实施例119 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-N-亚胺甲基氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐
将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(2-N-亚胺甲基氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.180g，0.47mmol)在冷水(70ml)中的溶液，在0-5℃，45psi氢气压下，用1.2g5%Pd/氧化铝氢化1小时。然后加入乙酸(0.045ml，0.79mmol)，在硅藻土垫上滤除催化剂。然后在反相硅胶(μBondapak C18，3×10cm)上层析滤液，用0.005M乙酸作为洗脱剂。将UV活性级分冷冻干燥，得到0.136g(69%)白色非晶形固体状标题化合物〔α〕22D+17.5°(c1.0，H2O); 纯度(HPLC)94%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，UV检测器300nm，保留时间为7.57分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax300nm(6，900); IR(KBr)νmax1755(β-内酰胺的C＝O)，1720(亚胺甲基的CN)和1570cm-1(宽，羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.36Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.0(m，4H，丙基的CH2-1和2)，1.92(s，3H，CH3CO2H)，3.04(t，J＝7.0Hz，2H，CH2NH2)，3.42(dd，JH6，H5＝2.64Hz，JH6，H1＝6.31Hz，1H，H-6)，2.8-3.7(m，5H，SCH2，CH2NHCH＝NH和H-4)，4.26(dd，与CH3CHO重叠，JH5，H6＝2.64Hz，1H，H-5)，4.28(m，1H，CH3CHO)，7.74和7.83ppm(2S，1H，NHCH＝NH). 实施例120 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐
A.(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-三乙基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-甲醇浴冷却下，用氯磷酸二苯酯(0.6ml，3.0mmol)缓慢处理(2R，4R，5R，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯〔由(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-叠氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(1.0g，2.75mmol)制备〕溶液，然后滴加二异丙基乙胺(0.52ml，3.0mmol)。将该混合物搅拌1小时，随后加入氯化三乙基甲硅烷(0.5ml，3mmol)和二异丙基乙胺(0.52ml，3.0mmol)。将该混合物在-15℃搅拌30分钟，然后用在CH3CN(0.5ml)中的2-巯基乙醇(430mg，5.5mmol)和二异丙基乙胺(0.95ml，5.5mmol)处理所得甲硅烷基化的烯醇磷酸酯。将该混合物在5-8℃(冷室)下搅拌19小时，用乙酸乙酯(50ml)稀释，用冰冷的水(2×20ml)，1M NaHSO3水溶液(3×20ml)，水(20ml)，1N HCl水溶液(20ml)，水(2×20ml)，1M NaHCO3水溶液(20ml)，水(20ml)和盐水(20ml)洗涤，干燥(MgSO4)。使残留物通过闪式硅胶柱(50g，0-50%乙酸乙酯/己烷)，得到油状标题化合物(883mg，63%)。
IR(CH2Cl2)νmax3600(OH)，2100(N3)，1775(C＝Oβ-内酰胺)和1710cm-1(C＝O酯); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.05-5.8(1H，m，乙烯基H)，5.49-5.2(2H，m，乙烯基 H)，4.9-4.6(2H，m，烯丙基CH2)，4.30-4.16(1H，m，H-1′)，4.145(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.6Hz，H-5)，3.803(2H，t，J＝5.9Hz，CH2O，3.40-3.28(2H，m，CH2N3)，3.24-3.28(1H，m，H-1′)，3.192(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝7.5Hz，H-6)，3.15-2.87(2H，m，SCH2)，1.89-1.75(1H，m，部分 CH2-4)，1.7-1.45(3H，m，CH2-CH2at4)，1.552(1H，bs，OH)，1.316(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.998，0.957和0.920(9H，3 线，CH3)，0.662，0.659，0.623，0.584，0.546和0.539ppm(6H，6 线，CH2). B.(4R，5S，6S)-3-〔2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-三乙基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-三乙基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(883mg，1.73mmol)溶解在二氯甲烷(20ml)中，在干冰-丙酮浴冷却下，先用二异丙基乙胺(0.80ml，4.5mmol)处理上述溶液，然后滴加三氟甲磺酸酐(0.35ml，2.1mmol)。将该混合物搅拌20分钟，并向其中加入在二氯甲烷(1ml)中的吡咯烷(0.90ml，10.4mmol)。在-78℃(干冰-丙酮)下继续搅拌30分钟，然后在-15℃(冰-甲醇浴)搅拌30分钟。用乙酸乙酯(100ml)和石油醚(20ml)稀释该反应混合物，依次用冰冷的水(10×25ml)和盐水(25ml)洗涤，干燥(MgSO4)，并将蒸除溶剂后的残留物通过闪式硅胶垫(45g，33→100%乙酸乙酯/己烷，10→40%丙酮/乙酸乙酯)得到油状标题化合物(510mg，52%)。
IR(CH2Cl2)νmax2100(N3)，1775(C＝O β-内酰胺)和1710cm-1(C＝O 酯); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.03-5.9(1H，m，乙烯基 H)，5.49-5.21(2H，m，乙烯基 H)，4.9-4.6(2H，m，烯丙基CH2)，4.30-4.14(1H，m，H-1′)，4.121(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.6Hz，H-5)，3.4-3.30(2H，m，CH2N3)，3.23-3.14(1H，m，H-4)，3.169(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝7.6Hz，H-6)，2.98-2.88，2.75-2.63(2H，2组m，SCH2)，2.63-2.45(6H，m，CH2N)，1.9-1.5(8H，m，CH2CH2-4和CH2CH2吡咯烷)，1.317(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.0993，0.952，0.916(9H，3 线，CH3)，0.697，0.658，0.655，0.619，0.579，0.542和0.535ppm(6H，7 线，SiCH2). C.(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-6-〔(1′R)-1′-三乙基硅乙基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(500mg，0.77mmol)溶解在无水四氢呋喃(5ml)中，在冰-甲醇冷却下，先用冰乙酸(0.290ml，5.28mmol)处理该溶液，然后滴加1M氟化四丁铵在四氢呋喃中的溶液(2.64ml，2.64mmol)。将该混合物在-20℃放置20小时，然后用乙酸乙酯(25ml)稀释，用冰冷的1M NaHCO3水溶液(3×10ml)和盐水(10ml)洗涤，干燥(MgSO4)。将蒸除溶剂后所得的残留物(370mg，94%)直接用于下一步反应。
IR(CH2Cl2)νmax3600(OH)，2100(N3)，1775(C＝Oβ-内酰胺)和1710cm-1(C＝O 酯); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.04-5.90(1H，m，乙烯基 H)，5.49-5.22(2H，m，乙烯基 H)，4.82-4.62(2H，m，烯丙基 H)，4.27-4.18(1H，m，H-1′)，4.217(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.7Hz，H-5)，3.45-3.25(3H，m，CH2N3和H-4)，3.233(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.6Hz，H-6)，2.99-2.82，2.76-2.65(2H，2组m，SCH2)，2.65-2.4(6H，m，CH2N)，1.95-1.50(9H，m，CH2CH2-4，OH和CH2CH2吡咯烷)和1.388ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). D.(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
先用Pd(PPh3)4处理(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(360mg，0.80mmol)在二氯甲烷(20ml)中的冷却(冰浴)溶液，然后滴加N-甲基苯胺(0.17ml，1.6mmol)。将该混合物搅拌15分钟，然后加入0.1M pH7.0磷酸盐缓冲水溶液(50ml，5mmol)和乙醚(50ml)。再次用0.1M pH7.0缓冲液(2×15ml)和水(15ml)提取有机相。合并水提取液，用乙醚(2×25ml)洗涤，使之通过μBondapak C18反相柱(50g，0→30%CH3CN/H2O)，经冷冻干燥后，得到粉末状标题化合物(200mg，58%)。
纯度(HPLC)99.9%(保留时间为7.751分钟，μBondapak C18，10μ，15%CH3CN/KH2PO4，0.01M，pH7.4); UV(水)λmax296(7170); IR(液体石蜡)νmax3500-3100(OH)，2100(N3)，1755(C＝Oβ-内酰胺)和1600cm-1(C＝O 羧酸根); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.35-4.20(1H，m，H-1′)，4.263(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.4Hz，H-5)，3.475(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.1Hz，H-6)，3.46-3.39(2H，m，CH2N)，3.10-2.9(1H，m，1H of SCH2)，2.10-1.85(5H，m，CH2CH2吡咯烷和1H of CH2-4)，1.80-1.45(3H，m，CH2CH2-4)和1.331ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). E.(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐
将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(150mg，0.34mmol)溶解在水(30ml)中，在冰浴冷却下，在45-50psi氢气压下，在帕尔氢化器中，用5%Pd/氧化铝(750mg)为催化剂，将上述溶液振荡1小时。除去催化剂，用水(2×25ml)洗涤，用1M乙酸水溶液将该溶液(pH9.5)调至pH4.6。使该水溶液通过μBondapak C18反相柱两次(45g和35g，0.005M乙酸水溶液，1%→2%CH3CN/0.005乙酸水溶液)，冷冻干燥后，得到淡黄色粉末状标题化合物(138mg，67%)。
纯度(HPLC)99.5%(保留时间为7.338分钟，μBondapak C18，10μ，10%CH3CN/KH2PO4，0.01M，pH7.4); UV(H2O)λmax296(8426); IR(液体石蜡)νmax3500-3100(OH，NH2)，1755(C＝Oβ-内酰胺)和1590cm-1(C＝O 羧酸根); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.33-4.20(2H，m，H-1′和H-5)，3.412(1H，dd，J＝2.6 Hz，J＝6.4Hz，H-6)，3.5-3.1(1H，m，CH2N，H-4，SCH2的1H)，3.09，3.051，3.016(2H，3 线，CH2N)，3.10-2.95(1H，m，SCH2的1H)，2.09(4H，bs，CH2CH2吡咯烷)，1.92(2H，s，CH3CO2)，2.0-1.45(4H，m，CH2CH2-4)和1.331ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例121 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基戊基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.7-叠氮基庚酸 将7-溴庚酸(50.0g，0.24mmol)加到氢氧化钠(9.6g，0.24mmol)在75ml水中的溶液中。然后加入叠氮化钠(20.9g，0.32mmol)，将所得混合物加热回流17小时。然后将该溶液冷却至0-5℃，用2N硫酸酸化至pH2.0，用乙醚(3×200ml)提取。合并有机提取液，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，减压蒸发，得到40.9g(100%)油状标题酸。1H NMR表明该粗产物含有6%(摩尔)起始物溴代酸，该粗产物直接用于制备酰氯。
IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)和1710cm-1(酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.3-1.8(m，8H，CH2-3，4，5和6)，2.36(t，J＝7.35Hz，2H，CH2-2)和3.26ppm(t，J＝6.77Hz，2H，CH2-7). B.7-叠氮基庚酰氯 在22℃下，用10分钟时间滴加草酰氯(22.0ml，0.25mol)处理得自步骤A的7-叠氮基庚酸(40.9g，0.24mol)在无水二氯甲烷(200ml)中的溶液。1小时后，加入两滴N，N-二甲基甲酰胺，将该混合物再搅拌1小时，减压下蒸发溶剂，得到油状酰氯粗品，后者直接用于下一步反应 IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)和1800cm-1(酰氯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.3-1.9(m，8H，CH2-3，4，5和6)，2.9(t，J＝7.18Hz，2H，CH2-2)和3.27ppm(t，J＝6.7Hz，2H，CH2-7). C.7-叠氮基硫羟己酸2-吡啶甲基酯
将2-吡啶甲硫醇(30.0g，0.24mol)溶解在无水二氯甲烷(400ml)中，在0-5℃，氩气氛下，用吡啶(21.0ml，0.26mol)处理上述溶液，然后用10分钟时间滴加7-叠氮基庚酰氯(45.5g，0.24mol)在二氯甲烷(100ml)中的溶液。30分钟后，用冷的饱和NaHCO3和盐水洗涤反应混合物，干燥(MgSO4)。减压下蒸发溶剂，得到透明油状的硫酯粗品。在硅胶垫(9×11cm)上过滤，用甲苯/乙酸乙酯混合物(8∶2)洗脱，得到透明油状标题硫酯(60.3g，90%) IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)和1690cm-1(硫酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.2-1.8(m，8H，CH2-3，4，5和6)，2.59(t，J＝7.4Hz，2H，CH2-2)，3.24(t，J＝6.79Hz，2H，CH2-7)，4.25(s，2H，SCH2)，7.15(m，1H，吡啶的H-5)，7.33(d，J＝7.8Hz，1H，吡啶的H-3)，7.62(m，1H，吡啶的H-4)和8.53ppm(m，1H，吡啶的H-6). D.7-叠氮基硫羟庚酸2-吡啶甲基酯的O-叔丁基二甲基硅基烯醇醚
将7-叠氮基硫羟庚酸2-吡啶甲基酯(60.0g，0.215mol)在无水二氯甲烷(250ml)中的溶液冷却至-10℃，并用三乙胺(60.0ml，0.43mmol)处理之。然后用40分钟时间滴加74ml(0.32mol)三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯。使混合物的温度升至20℃，并将该溶液搅拌3小时。然后用己烷类(600ml)稀释反应混合物，依次用冷水(3×)，饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到暗色油状甲硅烷基烯醇醚粗品，后者直接用于下一步反应。1H NMR表明它是E和Z异构体的1∶1混合物 IR(NaCl，压片)νmax2100cm-1(N3); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.2和0.23(2 x s，6H，SiCH3)，0.96和0.98(2 x s，9H，Sit-Bu)，1.2-2.1(m，CH2-4，5和6)，3.2(m，4H，CH2-3和7)，3.95和4.03(2 x s，2H，SCH2)，4.84和4.99(2 x t，J＝7.22Hz和J＝7.6Hz，1H，CH-2)，7.14(m，1H，吡啶的H-5)，7.28(m，1H，吡啶的H-3)，7.61(m，1H，吡啶的H-4)和8.53ppm(m，1H，吡啶的H-6). E.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-6″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-6″-叠氮基己基〕氮杂环丁烷-2-酮
将新熔融过的氯化锌(38g，0.28mol)在无水二氯甲烷(600ml)中的悬浮液冷却至0-5℃，加入60.0g(0.208mmol)(3S，4R)-4-乙酰氧基-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮，然后加入7-叠氮基硫羟庚酸2-吡啶甲基酯的O-叔丁基二甲基硅基烯醇醚粗品(0.215mol)在二氯甲烷(125ml)中的溶液。然后将该混合物在22℃搅拌18小时。依次用水，饱和氯化铵，饱和NaHCO3和盐水洗涤该混合物，干燥(MgSO4)。减压下蒸发溶剂，得到131g暗色油状硫酯粗品，后者直接用于下一步反应。1H NMR和HPLC分析该混合物表明它是己基1-位差向异构体(85∶15)的混合物(异构体比例为β∶α85∶15)。取一部分(4g)在硅胶(4×20cm，甲苯-乙酸乙酯1∶1洗脱)层析，得到油状标题化合物纯品，跟随其后的是β和α差向异构体的混合级分(0.25g)。纯的β差向异构体具有下述特征常数 IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)，1761(β-内酰胺的C＝O)和1685cm-1(硫酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.04(s，6H，SiCH3)，0.85(s，9H，Si t-Bu)，0.99(d，J＝6.32Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.9(m，8H，己基的CH2-2，3，4和5)，2.9(m，1H，己基的H-1)，3.03(m，1H，H-3)，3.22(t，J＝6.73Hz，2H，CH2N3)，3.79(dd，JH4，H3＝2.07Hz，JH4，H1＝7.01Hz，1H，H-4)，4.14(qd，JH，CH3＝6.32Hz，JH，H3＝3.60Hz，1H，CH3CHO)，5.86(宽 s，1H，NH)，7.18(m，1H，吡啶的H-5)，7.32(d，J＝7.8Hz，1H，吡啶的H-3)，7.63(m，1H，吡啶的H-4)和8.54ppm(m，1H，H 吡啶的H-6). F.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-6″-叠氮基己基〕氮杂环丁烷-2-酮
将得自步骤E的硫酯粗品(～0.2mmol)在四氢呋喃(700ml)中的溶液冷却至0-5℃，用150ml(1.74mol)30%过氧化氢滴加处理(滴加时间为15分钟)。然后用1小时时间滴加700ml 1N NaOH(2.7mol)。使该混合物在18℃进行反应，并将该溶液再搅拌1小时。然后用己烷类(700ml)稀释该混合物，收集水相，冷却至0-5℃，用浓盐酸酸化至pH2.0。然后用乙酸乙酯(500ml，200ml)提取该水溶液。合并有机相，依次用水，1M亚硫酸氢钠和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸除溶剂使之形成糊状物，然后用己烷类(200ml)研制。滤出固体，得到16.1g(按乙酰氧基氮杂环丁酮计算收率为19%)白色固体状标题酸。1H NMR表明无任何α异构体存在。用乙酸乙酯和己烷类混合物重结晶，得到白色片状物，m.p.＝145-147℃(分解);〔α〕24D-7.1°(c1.0，CHCl3). IR(KBr)νmax2100(N3)和1715和1690(宽C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.06 and 0.07(2 x s，2 x 3H，SiCH3)，0.87(s，9H，Si t-Bu)，1.17(d，J＝6.31Hz，3H，CH3CHO)1.2-1.8(m，8H，己基的CH2-2，3，4和5)，2.65(m，1H，己基的H-1)，3.13(宽 dd，1H，H-3)，3.26(t，J＝6.7Hz，2H，CH2N3)，3.86(dd，JH4，H3＝1.98Hz，JH4，H1＝6.92Hz，1H，H-4)，4.20(dq，JH，CH3＝6.31Hz，JH，H3＝4.0Hz，1H，CH3CHO)，和6.34ppm(s，1H，NH). 分析计算值C18H34N4O4Si C 54.24，H 8.60，N 14.06; 实测值C 54.18，H 8.54，N 13.91. G.(3S，4R)-4-〔(1″R)-1″-(5-叠氮基戊基)-3″-烯丙氧羰基)-2″-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮
在22℃，氮气氛下，用1，1-羰基二咪唑(6.7g，41.3mmol)处理(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-6″-叠氮基己基〕氮杂环丁烷-2-酮(15.0g，37.6mmol)在无水乙腈(350ml)中的悬浮液。将所得混合物搅拌2小时，减压下蒸发溶剂，得到油状酰基咪唑粗品 IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)，1760(β-内酰胺的C＝O)和1735cm-1(酰基咪唑的C＝O). 然后将酰基在无水乙腈(50ml)中的咪唑粗品加到丙二酸单烯丙基酯镁盐(19.0g，61.2mmol)在苯(300ml)中的溶液中，并将所得混合物在65℃下加热28小时。用乙酸乙酯(500ml)稀释冷却的反应物，依次用水，冷的1N盐酸，饱和NaHCO3和盐水洗涤。用MgSO4干燥后，蒸发溶剂，得到油状标题化合物粗品(～20g)，后者直接用于下一步反应。取一小部分在硅胶上层析(甲苯/乙酸乙酯8∶2洗脱)，得到油状标题化合物 IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)，1760(β-内酰胺的C＝O)和1715，1650和1630cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)酮式和烯醇式的混合物，比例为1∶1;δ0.05和0.07(2s，6H，SiCH3)，0.87(s，9H，Si t-Bu)，1.1和1.17(2d，J＝6.31Hz，和J＝6.33Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.8(m，8H，戊基的CH2-1，2，3和4)，2.2(m，氧代丙基的H-1，烯醇式)，2.9-3.0(m，氧代丙基的H-3和H-1，酮式)，3.26(t，J＝6.7Hz，CH2N3)，3.54(s，氧代丙基的CH2-3，酮式)，3.8(m，1H，H-4)，4.2(m，1H，CH3CHO)，4.8(m，2H，烯丙基的CH2)，5.07(s，1H，氧代丙基的H-3，烯醇式)，5.2-5.4和5.9-6.1(2m，2H和1H，烯丙基的CH)和5.9ppm(宽 s，1H，NH). H.(3S，4R)-4-〔(1″R)-1″-(5-叠氮基戊基)-3″-烯丙氧羰基-3″-重氮基-2″-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮
将(3S，4R)-4-〔(1″R)-1″-(5-叠氮基戊基)-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮粗品(37.6mmol)溶解在乙腈(100ml)中，在0-5℃，先用对甲苯磺酰基叠氮(9.1g，46.1mmol)在乙腈(115ml)中的溶液处理，再用三乙胺(6.5ml，46.0mmol)处理上述溶液。然后将该反应混合物在22℃搅拌30分钟。减压下蒸发溶剂，用乙醚和己烷类(1∶1)混合物研制残留物。滤集对甲苯磺酰胺粗品。将滤液减压浓缩，得到油状标题化合物。该产物直接用于下一步反应。取一部分产物在硅胶上层析，用甲苯和乙酸乙酯的混合物(9∶1)洗脱，得到纯的油状标题化合物 IR(NaCl，压片)νmax2140(N2)，2100(N3)，1760(β-内酰胺的C＝O)，1720和1650cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.05和0.06(2 x s，6H，SiCH3)，0.86(s，9H，Si t-Bu)，1.17(d，J＝6.3Hz，3H，CH3CHO)，1.2-2.0(m，8H，戊基的CH2-1，2，3和4)，3.03(宽 dd，1H，H-3)，3.24(t，J＝6.7Hz，2H，CH2N3)，3.84(dd，JH4，H3＝2.07Hz，JH4，H-1＝5.37Hz，1H，H-4)，4.1(m，1H，氧代丙基的H-1)，4.17(dq，JH，CH3＝6.3Hz，JH，H3＝3.86Hz，1H，CH3CHO)，4.72(m，2H，烯丙基的CH2)，5.3-5.4和5.9-6.1(2m，2H和1H，烯丙基的CH)和5.84ppm(宽 s，1H，NH). I.(3S，4R)-4-〔(1″R)-1″-(5-叠氮基戊基)-3″-烯丙氧羰基-3″-重氮基-2″-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮
在5℃下，用100ml 1N盐酸水溶液处理(3S，4R)-4-〔(1″R)-1″-(5-叠氮基戊基)-3″-烯丙氧羰基-3″-重氮基-2″-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮粗品(37.6mmol)在乙醇(250ml)中的溶液。65小时后，用NaHCO3将该反应混合物调至pH6，减压下除去乙醇。用乙酸乙酯(500ml)稀释残留物，依次用水，0.2M pH7磷酸盐缓冲液和盐水洗涤有机相。干燥(MgSO4)后，减压下蒸发溶剂，将残留物在硅胶(9×12cm)上层析，用乙酸乙酯/甲苯(1∶1)至纯乙酸乙酯进行梯度洗脱。将合适的级分蒸发，得到8.95g(从羧酸起三步收率为61%)固体状标题氮杂环丁酮。用乙醚和己烷类混合物重结晶，得到白色棱晶体m.p.＝65-66℃;〔α〕22D-31.2°(c1.0，CHCl3)。
UV(EtOH)λmax260nm(8，440); IR(KBr)νmax2158(N2)，2100(N3)，1730和1712(β-内酰胺和酯的C＝O)和1650cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.29(d，J＝6.3Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.9(m，8H，戊基的CH2-1，2，3和4)，2.31(d，J＝3.75Hz，1H，OH)，2.99(dd，JH3，H4＝2.0Hz，JH3，H1＝6.93Hz，1H，H-3)，3.25(t，J＝6.7Hz，2H，CH2N3)，3.82(dd，JH4，H3＝2.0Hz，JH4，H1＝6.63Hz，1H，H-4)，3.95(m，1H，叠氮基戊基的H-1)，4.11(m，1H，CH3CHO)，4.73(m，2H，烯丙基的CH2)，5.3-5.4和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)和6.0ppm(b 宽 s，1H，NH). 分析计算值C17H24N6O5 C 52.09，H 6.16，N 21.42; 实测值C 51.85，H 6.04，N 21.33. J.(2R，4R，5R，6S)-4-(4″-叠氮基戊基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯
在氩气氛下，用辛酸铑(Ⅱ)二聚体(0.050g)处理(3S，4R)-4-〔(1″R)-1″-(5-叠氮基戊基)-3″-烯丙氧羰基-3″-重氮基-2″-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮(2.50g，6.37mmol)在无水苯(80ml)中的溶液，加热回流(浴温为95℃)20分钟。然后减压下蒸除溶剂，得到油状标题双环化合物粗品，后者直接用于下一步反应 IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)，1760(β-内酰胺的C＝O)和1745cm-1(sh，酮酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.4(d，J＝6.30Hz，3H，CH3CHO)，1.4-2.0(m，8H，戊基的CH2-1，2，3和4)，2.7(m，1H，H-4)，3.2-3.4(m，3H，H-6和CH2N3)，4.26(dd，JH5，H6＝2.32Hz，JH5，H4＝8.06Hz，1H，H-5)，4.28(m，1H，CH3CHO)，4.64(s，1H，H-2)，4.66(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.4和5.8-6.0ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). K.(4R，5S，6S)-4-(4″-叠氮基乙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(2R，4R，5R，6S)-4-(4″-叠氮基戊基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(6.37mmol)溶解在无水乙腈(40ml)中，在0-5℃，氩气氛下，用10分钟时间同时用氯磷酸二苯酯(1.45ml，7.0mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.22ml，7.0mmol)处理上述溶液。然后加入少许4-N，N-二甲氨基吡啶晶体，并将该混合物搅拌45分钟。补加N，N-二异丙基乙胺(2.22ml，12.7mmol)，随后加入在乙腈(3ml)中的β-巯基丙腈(1.11g，12.7mmol)，并将该混合物搅拌1小时。用乙酸乙酯稀释该反应混合物，依次用水，饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到一油状物，后者在硅胶(5×10cm)上层析，用乙酸乙酯/甲苯(8∶2至7∶3)进行梯度洗脱，得到2.52g(91%)透明油状标题化合物。
IR(NaCl，压片)νmax2258(CN)，2100(N3)，1770(β-内酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.38(d，J＝6.28Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，8H，戊基的CH2-1，2，3和4)，1.89(d，J＝4.6Hz，1H，OH)，2.7(～dt，，2H，CH2CN)，2.9-3.2(m，2H，SCH2)，3.19(dd，JH6，H5＝2.65Hz，JH6，H1＝7.34Hz，1H，H-6)，3.2(与H-6重叠，1H，H-4)，3.30(t，J＝6.5Hz，1H，CH2N3)，4.24(与H-5重叠，1H，CH3CHO)，4.26(dd，JH5，H6＝2.65Hz，JH5，H4＝9.52Hz，1H，H-5)，4.76(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). L.(4R，5S，6S)-4-(5″-氨基戊基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在22℃，于氩气氛下，先用Pd(PPh3)4(0.13g)处理(4R，5S，6S)-4-(5″-叠氮基戊基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(2.52g，5.8mmol)在无水乙腈(125ml)中的溶液，然后加入12.8ml(6.4mmol)0.5M 2-乙基己酸钾在乙酸乙酯中的溶液。45分钟后，用水(125ml)提取该反应混合物，将水相置于真空条件下以除去痕量的有机溶剂。然后在0-5℃，在45psi氢气压下，用4.0g5%Pd/氧化铝将上述水溶液氢化1小时(开始pH为7，最后pH为11)。然后加入50ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液，滤出催化剂。减压下将滤液浓缩至一半体积(T＜10℃)，然后在反相硅胶(μBondapak C18，3.5×14cm)上层析，用梯度为0-5%的乙腈水溶液为洗脱剂。将UV活性级分冷冻干燥，得到1.06g(49%)白色非晶形固体状标题卡巴潘尼姆(经冷冻干燥后);〔α〕22D＝+52.1°(c1.0，H2O)。
纯度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，UV检测器306nm，保留时间。
UV(水，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax302nm(9，055); IR(KBr)νmax2255(CN)，1755(β-内酰胺的C＝O)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，8H，戊基的CH2-1，2，3和4)，2.8-3.2(m，4H，SCH2CH2CN)，3.0(t，J＝7.4Hz，2H，CH2NH2)，3.36(与H-6重叠，1H，H-4)，3.38(dd，JH6，H5＝2.53Hz，JH6，H1＝6.30Hz，1H，H-6)，4.25(dd与CH3CHO重叠，JH5，H6＝2.53Hz，1H，H-5)和4.27ppm(m，1H，CH3CHO). 实施例122 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-4-(2″-氨基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-4-(2″-叠氮基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-4-(2″-叠氮基乙基)-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(0.47g，1.08mmol)溶解在CH3CN(10ml)中，冷却(0℃)下，先用氯磷酸二苯酯(0.25ml，1.18mmol)处理上述溶液，然后再用N，N-二异丙基乙胺(0.21ml，1.18mmol)和4-N，N-二甲基氨基吡啶(2mg)处理之。将该混合物在氩气氛下，在0℃搅拌2小时，然后再向该溶液通入氩气15分钟。先用在CH3CN(2ml)中的2-巯基乙醇(0.15ml，2.15mmol)处理烯醇磷酸酯，然后再用N，N-二异丙基乙胺(0.38ml，2.15mmol)处理，在0℃搅拌1小时，然后在冷却(5℃)下放置16小时。用EtOAc(50ml)稀释该反应混合物，依次用冷水，1M NaHSO3，水，1N HCl，水，1M NaHCO2和盐水洗涤。干燥(MgSO4)有机相，蒸除溶剂后，将所得糖浆状物在用CH2Cl2填充的SiO2(3.5×11cm)上层析，用CH2Cl2和EtOAc的混合物(8∶2)进行梯度洗脱，得到浆状标题化合物(0.35g，65.5%); 1H NMR(200MHz，CDCl37.24)δ0.06(s，6H，Si(CH3)2)，0.87(S，9H，SiC(CH3)3，1.35(d，3H，CH3，J＝6.3Hz，)，2.85-3.9(重叠，8H，CH2OH，CH2N3，H-4，H-6，SCH2)，4.22(中心 m，2H，H-5，H-1′)，4.6-4.9(m，2H，OCH2，烯丙基)，5.2-5.5(m，2H，＝CH2，烯丙基)，5.86-6.05(m 1H，CH＝烯丙基). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-4-(2″-叠氮基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-4-(2″-叠氮基乙基)〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯(0.33g，0.66mmol)溶解在无水四氢呋喃(5ml)中，冷却至0℃，在氩气氛下，先用乙酸(0.23ml，4mmol)处理，然后加入1M氟化四丁铵在四氢呋喃中的溶液(1.99ml，1.99mmol)。将该混合物在0至5℃之间搅拌168小时，然后在0℃用1M NaHCO3溶液(4ml，4mmol)中和之。用EtOAc(3×50ml)提取该混合物，合并有机相，依次用冷的NaHCO3，水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，蒸除溶剂，得到一胶粘的泡沫状物，后者在用CH2Cl2填充的SiO2(3.5×8cm)上层析，用CH2Cl2和EtOAc的混合物(0∶100)进行梯度洗脱，得到泡沫状标题化合物(0.09g，35.4%); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.37(d，3H，CH3，J＝6.26Hz)，2.82-3.17(m，2H，SCH2)，3.15(m，1H，H-6)，3.34-3.64(重叠，3H，CH2N3，H-4)，3.82(t，2H，CH2OH，J＝5.43Hz)，4.22(m，1H，H-1′)，4.22(dd，1H，H-5，J4，5＝9.64Hz，J5，6＝2.78Hz)，4.62-4.87(m，2H，OCH2，烯丙基)，5.21-5.49(m，2H，＝CH2烯丙基)，5.86-6.05(m，1H，CH＝，烯丙基). C.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-4-(2″-氨基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在氩气氛下，将Pd(PPh3)4(0.04g，0.035mmol)加到冷却至0℃的(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-4-(2″-叠氮基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.09g，0.24mmol)在CH2Cl2(10ml)中的溶液中，然后加入0.5M2-乙基己酸钠在EtOAc中的溶液(0.52ml，0.26mmol)。将该混合物在0℃搅拌1小时，加入乙醚(50ml)，用水(3×25ml)提取。合并水提取液，加入0.05M pH7.0磷酸盐缓冲液(10ml)。在0℃，40psi氢气压下，用0.3g5%钯/氧化铝将上述溶液氢化2小时。滤出催化剂，用水洗涤，合并滤液，并使之通过μBondapak C18反相SiO2柱(3.5×9cm)。将相应于产物的级分冷冻干燥，得到一固体，后者再次在μBondapak C18反相SiO2柱(3.5×9cm)上层析。用水洗脱化合物，冷冻干燥后，得到一淡黄色蓬松固体(0.021g，28.2%)。
纯度(HPLC)93.9%(在μBondapak C18柱上(4mm×30cm)在302nm处UV检测;pH6.8磷酸盐缓冲液;流速为1ml/分，保留时间为3.89分钟); UV λmax302nm. IR(液体石蜡)νmax1750cm-1(β-内酰胺的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，3H，CH3，J＝6.37Hz)，1.82-1.98;2.1-2.27(m，2H，CH2)，2.79-3.23(重叠，4H，CH2NH2，SCH2)，3.44(中心 m，2H，H-4，H-6)，3.76(m，2H，CH2OH，J＝6.24Hz)，4.26(dd，1H，H-5，J4，5＝9.14Hz，J5，6＝2.56Hz)，4.28(m，1H，H-1′). 实施例123 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(1-N-甲基吡啶鎓)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸盐
将(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(1-吡咯烷基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.150g，0.39mmol)〔按实施例63制备〕溶解在水(8ml)，乙腈(4ml)和二噁烷(5ml)的混合物中，在0-5℃，用1N NaOH将其调至pH9.5。然后立即一次加入硫酸二甲酯(0.22ml)，将pH在9-9.5维持35分钟。然后加入20ml 0.2M pH6.0磷酸盐缓冲液，并将该溶液置于减压条件下以除去有机溶剂。水相在反相硅胶(μBondapak C18，2.5×13cm)上层析两次，用梯度为0-5%乙腈水溶液为洗脱剂。将UV活性级分冷冻干燥，得到0.056g(36%)白色非晶形固体状标题吡咯鎓盐化合物〔α〕22D＝+57.0°(c1.0，H2O); 纯度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，UV检测器300nm，保留时间为6.24分钟); UV(水，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax298nm(6，660); IR(KBr)νmax2250(CN)，1760(β-内酰胺的C＝O)和1600cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.34(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，2.0-2.4(m，6H，乙基的CH2-1和吡咯烷的CH2-3，3′)，2.8-3.2(m，4H，SCH2CH2CN)，3.11(s，3H，NCH3)，3.4-3.7(m，8H，H-4，H-6，乙基的CH2-2和吡咯烷的CH2-2，2′)，4.28(m，1H，CH3CHO)和4.31ppm(dd，JH5，H6＝3.01Hz，JH5，H4＝9.0Hz，1H，H-5). 实施例124 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-〔N，N-(2-氰基乙基)甲氨基〕乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-〔N，N-(2-氰基乙基)甲氨基〕乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-羟基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(400mg，0.830mmol)溶解在二氯甲烷(10ml)中，在干冰-丙酮冷却下，先用N，N-二异丙基乙胺(0.380ml，2.16mmol)处理上述溶液，然后滴加三氟甲磺酸酐(0.17ml，1.0mmol)。将该混合物搅拌25分钟，用在二氯甲烷(0.5ml)中的N-甲基-β-氨基丙腈(0.23ml，2.5mmol)处理，然后在-15℃(用冰-甲醇浴代替干冰浴)搅拌3小时。将该混合物在冷室(5℃)放置18小时，然后用乙酸乙酯(20ml)稀释，依次用冰冷的1M NaHCO3水溶液(5ml)，冰冷的水(5ml)和盐水(5ml)洗涤，干燥(MgSO4)。使残留物通过闪式硅胶垫(15g，30→80%乙酸乙酯/己烷)，得到淡黄色油状标题化合物(315mg，69%)。
IR(CH2CL2)νmax2250(CN)，1775(β-内酰胺的C＝O)和1715cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.03-5.86(1H，m，乙烯基 H)，5.486-5.224(2H，m，乙烯基 H)，4.851-4.666(2H，m，烯丙基 CH2)，4.29-4.18(1H，m，H-1′)，4.197，4.184(d，J＝2.6Hz，部分 H-5)，3.541-3.450(1H，m，H-4)，3.380-3.242，3.069-2.929(2H，2组m，SCH2)，3.110(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝7.0Hz，H-6)，2.807-2.315(8H，m，CH2N和CH2CN)，2.315(3H，s，NCH3)，2.04-1.87，1.70-1.55(2H，2组m，CH2-4)，1.30(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.895(9H，s，叔丁基)和0.096ppm(6H，s，二甲基). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-〔N，N-(2-氰基乙基)甲氨基〕乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-〔N，N-(2-氰基乙基)甲氨基〕乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(305mg，0.560mmol)溶解在四氢呋喃(5ml)中，在冰-甲醇浴冷却下，用冰乙酸(0.18ml，3.4mmol)处理，然后滴加1M氟化四丁铵在四氢呋喃中的溶液(1.68ml，1.68mmol)。将该混合物在冷室中放置8天，然后用乙酸乙酯(25ml)稀释，依次用冰冷的1M NaHCO3水溶液(3×5ml)，水(2×5ml)和盐水(5ml)洗涤，干燥(MgSO4)。使残留物通过闪式硅胶垫(6g，40%→100%乙酸乙酯/己烷，1/1乙酸乙酯/丙酮)，得到油状标题化合物(195mg，80%); IR(CH2Cl2)νmax3600，3500(OH)，2250(CN)，1775(β-内酰胺的C＝O)和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.04-5.85(1H，m，乙烯基 H)，5.494-5.238(2H，m，乙烯基 H)，4.9-4.70(2H，m，烯丙基 H)，4.282(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.6Hz，H-5)，4.29-4.13(1H，m，H-1′)，3.80-3.70(1H，m，H-4)，3.35-3.20，3.05-2.90(2H，2组m，SCH2)，3.152(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝8.8Hz，H-6)，2.8-2.6(4H，m，CH2CN)，2.6-2.45(2H，m，CH2N)，2.1-1.9，1.7-1.5(2H，2组m，CH2-4)，1.60(1H，bs，OH)和1.404ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-〔N，N-(2-氰基乙基)甲氨基〕乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷却下，先用Pd(PPh3)4(42mg，0.034mmol)处理(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-〔N，N-(2-氰基乙基)甲氨基〕乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(195mg，0.45mmol)在二氯甲烷(12ml)中的溶液，然后滴加0.5M2-乙基己酸钾在乙酸乙酯中的溶液(0.90ml，0.45mmol)。将该混合物搅拌30分钟，用乙醚稀释，用0.04M磷酸盐缓冲液(3×15ml)和水(2×15ml)提取。合并水提取液，用乙醚(2×10ml)洗涤，使之通过μBondapak C18反相柱(150g，0→3%CH3CN/H2O)，冷冻干燥后，得到粉末状标题化合物(127mg，72%); 纯度经HPLC测定为99.2%(保留时间7.89分钟，μBondapak C18，10μ，5%CH3CN/KH2PO40.01M，pH7.4); UV(H2O)λmax300(7887); IR(液体石蜡)νmax3600-3100(OH)，2250(CN)，1745(β-内酰胺的C＝O)和1595cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.35-3.25(2H，m，H-1′ and H-5)，3.404(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝6.3Hz，H-6)，3.42-3.30(1H，m，H-4)，3.25-3.1，3.03-2.9(2H，2组m，SCH2)，2.87-2.81(4H，m，CH2N)，2.75-2.65，2.62-2.54(4H，2组3线，CH2CN)，2.328(3H，s，N-CH3)，2.15-1.95，1.8-1.6(2H，2组m，CH2-4)和1.341ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 实施例125 (4R，5S，6S)-4-〔2″-(1-N-氮杂环烷基)乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(2R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯〔27.2mmol，将15.08g，27.2mmol重氮基前体环化制得〕溶解在无水乙腈(200ml)中，在0-5℃，氮气氛下，用5分钟时间同时加入氯磷酸二苯酯(6.3ml，30.4mmol)和N，N-二异丙基乙胺(5.0ml，28.7mmol)处理上述溶液。然后加入少许4-N，N-二甲氨基吡啶晶体，并将该混合物搅拌1小时。再滴加N，N-二异丙基乙胺(9.5ml，54.5mmol)，然后滴加在乙腈(10ml)中的β-巯基丙腈(4.6g，53.8mmol)，将所得混合物搅拌30分钟。
然后用乙酸乙酯(1升)稀释反应混合物，依次用冷水，饱和NaHCO3，0.2M pH7.0磷酸盐缓冲液和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压下蒸除溶剂，将残留物在硅胶(7.5×11cm)上层析，用梯度为0-5%乙酸乙酯甲苯溶液洗脱。蒸发UV活性级分，得到11.19g(69%)油状标题物质，后者经放置固化。用己烷类重结晶，得到长的针状结晶的标题化合物m.p.＝95℃;〔α〕22D＝+48.9°(c1.0，CHCl3); UV(EtOH)λmax318nm(11，930); IR(KBr)νmax1770(β-内酰胺的C＝O)和1700cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.08和0.09(2s，3H和9H，SiCH3)，0.89和0.91(2s，2 x 9H，Si-tBu)，1.27(d，J＝6.15Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.1(m，2H，CH2-4)，2.67(～t，2H，Ch2CN)，2.9-3.1和3.2-3.4(2m，2H，SCH2)，3.10(dd，JH6，H5＝2.52Hz，JH6，H1＝6.26Hz，1H，H-6)，3.45-3.65和3.75-3.9(2m，2H和1H，H-4和CH2OSi)，4.21(dd与CH3CHO重叠，JH5，H6＝2.52Hz，1H，H-5)，4.24(m，1H，CH3CHO)，4.74(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2m，2H和1H烯丙基的CH). 分析计算值C29H50N2O5SSi2 C 58.55，H 8.47，N 4.71，S 5.39; 实测值C 58.45，H 8.37，N 4.73，S 5.24. B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-羟基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(11.19g，18.8mmol)溶解在四氢呋喃(250ml)中，在0-5℃，在氮气氛下，先用乙酸(6.5ml，0.113mol)，再用56ml(56.0mmol)1.0M氟化四丁铵在四氢呋喃中的溶液处理上述溶液。然后将该溶液在10℃放置18小时。用乙酸乙酯(1升)稀释该反应混合物，用冷的饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压下蒸除溶剂，得到一油状物，后者在硅胶(7.5×12cm)上层析，用乙酸乙酯/甲苯(3∶7至1∶1)进行梯度洗脱，得到6.80g(75%)粘稠玻璃状标题化合物 IR(NaCl，压片)νmax3500(OH)，2260(CN)，1775(β-内酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.09(s，6H，SiCH3)，0.89(s，9H，Si-tBu)，1.29(d，J＝6.13Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.1(m，2H，CH2-4)，2.70(～t，2H，CH2CN)，2.95-3.1和3.2-3.4(2m，2H，SCH2)，3.18(dd，JH6，H5＝2.63Hz，JH6，H1＝7.02Hz，1H，H-6)，3.54(宽 t，1H，H-4)，3.6-4.0(m，2H，CH2OH)，4.15-4.3(m，2H，H-5和CH3CHO重叠)，4.75(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2m，2H和1H，烯丙基的CH). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-(1-N-氮杂环丁烷基)乙基〕-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-羟基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.07g，2.22mmol)在无水二氯甲烷(18ml)中的溶液冷却至-78℃，在氮气氛下，先用N，N-二异丙基乙胺(0.57ml，3.27mmol)处理，再用5分钟时间用三氟甲磺酸酐(0.39ml，2.31mmol)滴加处理。在-78℃反应30分钟后，补加N，N-二异丙基乙胺(0.57ml，3.27mmol)，然后用5分钟时间滴加氮杂环丁烷(0.18ml，2.67mmol)。将该反应混合物在-78℃搅拌30分钟，然后用30分钟时间慢慢地温热至-20℃，并在该温度搅拌1小时。继之，加入冷的乙酸乙酯(200ml)和水(20ml)的混合物使该反应混合物骤冷。用盐水(2×20ml)洗涤有机相，干燥(MgSO4)，减压下蒸发。将残留物在硅胶(3.5×12cm)上层析，用丙酮作为洗脱剂。蒸发UV活性级分，得到0.639g(55%)油状标题化合物。经TLC和1H NMR测定，该物质含有25%氮杂环丁烷使β-内酰胺开环而产生的产物。
IR(NaCl，压片)νmax2255(CN)，1775(β-内酰胺的C＝O)，1712(酯的C＝O)，和1645(开环产物的酰胺); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.08(s，6H，SiCH3)，0.88(s，9H，Si-tBu)，1.29(d，J＝6.13Hz，3H，CH3CHO)，1.4-1.8(m，2H，CH2-4)，2.07(m，2H氮杂环丁烷的CH2-3)，2.69(～t，2H，CH2CN)，2.9-3.5(宽 m，10H，氮杂环丁烷的CH2-2和4，乙基的CH2-2，H-4和H-6和SCH2)，4.15(dd，JH5，H6＝2.55Hz，JH5，H4＝9.45Hz，1H，H-5)，4.17(m，1H，CH3CHO)，4.73(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2m，2H和1H，烯丙基的CH). D.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(1-N-氮杂环丁烷基)乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔2″-(1-N-氮杂环丁烷基)乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.639g，1.23mmol)在无水四氢呋喃(8ml)中的溶液冷却到-15℃，在氮气氛下，先用乙酸(0.42ml，3.7mmol)，再用3.7ml(3.7mmol)1M氟化四丁铵在四氢呋喃中的溶液处理上述溶液。然后将该溶液在0℃搅拌140小时。继之加入1.2g NaHCO3固体粉末，将该混合物搅拌10分钟。然后将有机相在硅胶(3.5×3.5cm)上层析，用丙酮和二甲基甲酰胺的混合物(9∶1)作为洗脱剂。将合适的级分蒸发，得到0.39g(78%)油状标题物质。经1H NMR测定，该物质的纯度约为50%，含有一些N，N-二甲基甲酰胺和一部分四丁铵盐。该产物直接用于下一步反应。
IR(NaCl，压片)νmax2250(CN)，1775(β-内酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.39(d，J＝6.31Hz，3H，CH3CHO)，1.7(m，2H，CH2-4)，2.27(m，2H，氮杂环丁烷的CH2-3)，2.67(～t，2H，CH2CN)，2.9-3.2(m，2H，SCH2)，3.2-3.4(m，4H，H-4，H-6和乙基的CH2-2)，3.58(t，J＝7.6Hz，氮杂环丁烷的CH2-2和4)，4.10(dq，JH，CH3＝6.31Hz，JH，H6＝8.86Hz，1H，CH3CHO)，4.28(dd，JH5，H6＝3.12Hz，JH5，H4＝10.26Hz，1H，H-5)，4.75(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2m，2H和1H，烯丙基的CH). E.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(1-N-氮杂环丁烷基)乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(1-N-氮杂环丁烷基)乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯粗品(0.39g，0.96mmol)溶解在乙酸乙酯(15ml)中，在22℃，于氮气氛下，用Pd(PPh3)4(0.050g)和3ml(1.5mmol)0.5M2-乙基己酸钾在乙酸乙酯中的溶液处理上述溶液。30分钟后，用水(30ml和20ml)提取该反应混合物，合并提取液，并将其置于减压条件下以除去痕量的有机溶剂。然后加入8ml 0.2M pH6的磷酸盐缓冲液，并将该溶液在反相硅胶(μBondapak C18，3×13cm)上层析，用梯度为0-5%的乙腈水溶液作为洗脱剂。合并UV活性的级分，冷冻干燥，再次在相同的柱上层析。最后冷冻干燥后，得到0.065g(19%)白色非晶形粉末状标题卡巴潘尼姆 纯度(HPLC)99.4%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，UV检测器300nm，保留时间为6.41分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax298nm(8，422); IR(KBr)νmax2250(CN)，1760(β-内酰胺的C＝O)和1600cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.38Hz，3H，CH3CHO)，1.7-2.2(m，2H，CH2-4)，2.52(m，2H，氮杂环丁烷的CH2-3)，2.85(m，2H，CH2CN)，2.85-3.2(m，2H，SCH2)，3.2-3.5(m，3H，乙基的CH2-2和H-4)，3.41(dd与乙基的CH2-2重叠，JH6，H5＝2.70Hz，JH6，H1＝6.86Hz，1H，H-6)，4.17(m，4H，氮杂环丁烷的CH2-2和4)，和4.2-4.35ppm(m，2H，H-5和CH3CHO). 实施例126 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基〕-4-〔2″-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基〕-4-〔2″-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.0g，2.08mmol)在无水二氯甲烷(20ml)中的溶液冷却至-78℃，在氮气氛下，先用N，N-二异丙基乙胺(0.54ml，3.1mmol)处理，再用5分钟时间用三氟甲磺酸酐(0.4ml，2.38mmol)滴加处理。在-78℃反应20分钟后，滴加1-甲基哌嗪(1.0ml，9.01mmol)，使所得溶液缓慢地温热至-20℃，并在该温度下搅拌1.5小时。然后加入冷的乙酸乙酯(200ml)和水使反应骤冷。用水和盐水洗涤有机相，干燥(MgSO4)。减压下蒸除溶剂，得到1.4g透明油状物，该油状物直接用于下一步反应。经1H NMR测定，该产物污染有一部分1-甲基哌嗪; IR(NaCl，压片)νmax2260(CN)，1775(β-内酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.08(s，6H，SiCH3)，0.88(2，9H，Si-tBut)，1.28(d，J＝6.05Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.0(m，2H，CH2-4)，2.3(s，3H，NCH3)，2.3-2.6(m，10H，乙基的CH2-2和哌嗪的CH2)，2.6-2.8(m，2H，CH2CN)，2.9-3.1和3.2-3.4(m，2H，SCH2)，3.19(dd，JH6，H5＝2.37Hz，JH6，H1＝6.6Hz，1H，H-6)，3.3(m，1H，H-4)，4.19(dd与CH3CHO重叠，JH5，H6＝2.37Hz，1H，H-5)，4.22(m，1H，CH3CHO)，4.73(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基〕-4-〔2″-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基〕-4-〔2″-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.17g，2.08mmol)在无水四氢呋喃(50ml)中的溶液冷却至-20℃，在氮气氛下，先滴加乙酸(1.55ml，27.1mmol)，再滴加14.6ml(14.6mmol)1M氟化四丁铵在四氢呋喃中的溶液。然后将该溶液在10℃放置7天。继之用乙酸乙酯(300ml)稀释该反应混合物，用冷的饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压下蒸发溶剂，得到1.45g卡巴潘尼姆粗品。在硅胶(3.5×6cm)上层析，用丙酮和N，N-二甲基甲酰胺的混合物(9∶1)洗脱，得到0.57g(61%，两步收率)油状标题卡巴潘尼姆。经1H NMR测定，该物质含有1当量的N，N-二甲基甲酰胺。
IR(NaCl，压片)νmax2250(CN)，1770(β-内酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.38(d，J＝6.24Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.0(m，2H，CH2-4)，2.29(s，3H，NCH3)，2.3-2.8(m，12H，哌嗪的CH2，乙基的CH2-2和CH2CN)，2.9-3.1和3.2-3.4(m，2H，SCH2)，3.24(dd与SCH2重叠，JH6，H5＝2.7Hz，JH6，H1＝6.9Hz，1H，H-6)，3.42(m，1H，H-4)，4.23(m，1H，CH3CHO)，4.28(dd，JH5，H6＝2.7Hz，JH5，H4＝9.5Hz，1H，H-5)，4.76(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). C.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.57g，1.27mmol)溶解在无水乙酸乙酯(25ml)中，在22℃，在氮气氛下，先用Pd(PPh3)4(0.075g)，再用2.8ml(1.4mmol)0.5M2-乙基己酸钾在乙酸乙酯中的溶液处理上述溶液。45分钟后，依次用50ml 0.1M pH6.0磷酸盐缓冲液和25ml水提取该反应混合物。合并水相，并将其置于减压条件下以除去痕量的有机溶剂，然后在反相硅胶(μBondapak C18，2.5×14cm)上层析两次。用梯度为0-5%乙腈水溶液洗脱，经冷冻干燥后，得到0.28g(54%)白色非晶形粉末状标题卡巴潘尼姆〔α〕22D＝+35.3°(c1.0，H2O)。
纯度(HPLC)97%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用10%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，UV检测器302nm，保留时间为6.6分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax300nm(8，390); IR(KBr)νmax2250(CN)，1755(β-内酰胺的C＝O)和1595cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.39Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.2(m，2H，CH2-4)，2.75(s，3H，NCH3)，2.6-3.3(m，12H，哌嗪的CH2，SCH2和4-乙基的CH2-2)，3.3-3.5(m，2H，H-4和H-6重叠)和4.2-4.4ppm(m，2H，H-5和CH3CHO). 实施例127 (4R，5S，6S)-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-(〔2-(1-吡咯烷基)乙基〕硫基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐
用0.1N NaOH水溶液处理在冰浴冷却下的(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-(〔2-(1-吡咯烷基)乙基〕硫基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(将相应的叠氮衍生物(115mg，0.270mmol)水解而制得)在0.05M磷酸盐缓冲液(15ml)中的溶液，使pH升高，并在分次加入氨基亚氨基甲磺酸(170mg，1.30mmol)期间将pH维持在8.0-8.2。将该混合物搅拌3小时(将pH维持在8-8.2)，然后用0.1M NaH2PO4水溶液中和。使之通过μBondapak C18反相柱(20g，0.005M乙酸水溶液，1→2%CH3CN/0.005乙酸水溶液)，经冷冻干燥后，得到白色粉末状标题化合物(75mg，57%)。
纯度98.7%(HPLC测定，保留时间＝8.86分钟，μBondapak C18，10μ，20%CH3CN/KH2PO40.01M，pH7.4); UV(水)λmax296(6723); IR(液体石蜡)νmax3400-3100(OH，NH2)，1760(β-内酰胺的C＝O)，1670，1635(C＝N)，和1485cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)，δ4.35-4.23(1H，m，H-1′)，4.264(1H，dd，J＝3.1Hz，J＝9.8Hz，H-5)，3.399，3.384(d，J＝3.1Hz，部分 H-6)，3.40-3.138(11H，m，H-4(CH2-NH，S-CH2CH2N，CH2-N-CH2和部分 H-6)，2.12-2.05(4H，(CH2)2吡咯烷)，1.919(1.5H，s，CH3CO2)，1.95-1.4(2组m，CH2CH2，4位)和1.320ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例128 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-N，N-二甲氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐
A.(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(2-N，N-二甲氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(2-N，N-二甲氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-三乙基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(3.29g，6.45mmol)溶解在CH2Cl2(60ml)中，在干冰-丙酮浴冷却下，先向其中加入N，N-二异丙基乙胺(2.90ml，16.8mmol)，然后滴加三氟甲磺酸酐(1.29ml，7.7mmol)。搅拌20分钟后，向反应混合物通入二甲胺气流，通气持续1.5分钟。将该混合物在-78℃搅拌15分钟，在-15℃(冰-甲醇)搅拌30分钟，然后用冰冷的乙酸乙酯(250ml)和乙醚(50ml)稀释，用冰冷的水(10×50ml)和盐水(50ml)洗涤，干燥(MgSO4)。将蒸除溶剂后的残留物溶解在无水四氢呋喃(30ml)中，冷却至-15℃(冰-甲醇)，然后用冰乙酸(2.1ml，38.7mmol)和1M氟化四丁铵的四氢呋喃溶液(19.4ml，19.4mmol)处理之，在-20℃下放置18小时。用冰冷的乙酸乙酯(150ml)稀释该混合物，用冷的1M NaHCO3水溶液(3×75ml)和盐水(75ml)洗涤，干燥(MgSO4)。使残留物通过闪式硅胶柱(75g，50-100%乙酸乙酯/己烷，10%→100%丙酮/乙酸乙酯，15%甲醇/丙酮)，得到黄色油状标题化合物(605mg，22%)。
IR(CH2Cl2)νmax3600，330(OH)，2100(N3)，1775和1610cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.1-5.9(1H，m，乙烯基 H)，5.5-5.2(2H，m，乙烯基 H)，4.88-4.62(2H，m，烯丙基 CH2)，4.247(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.5Hz)，4.3-4.2(1H，m，H-1′)，3.43-3.2(3H，m，H-1′，CH2N3)，3.244(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.4Hz，H-6)，3.1-2.8(2H，m，SCH3)，2.65-2.56(2H，m，CH2N)，2.335(6H，s，N(CH3)2)，2.0-1.56(5H，m，CH2-CH2-4，OH)和1.391ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(2-N，N-二甲氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(2-N，N-二甲氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(588mg，1.39mmol)溶解在CH2Cl2(35ml)中，在冰浴冷却下，先用Pd(PPh3)4(123mg，0.1mmol)处理该溶液，然后滴加N-甲基苯胺(0.3ml，2.78mmol)。将该混合物搅拌25分钟。然后加入0.1M pH7.0磷酸盐缓冲液(80ml)和乙醚(150ml)。分相，用0.01M pH7.0磷酸盐缓冲液(2×30ml)提取有机相。合并水相，用乙醚(2×50ml)洗涤，并使之通过μBondapak C18反相柱(75g，水，2%→30%CH3CN/H2O)，经冷冻干燥后得到浅黄色粉末状标题化合物(399mg，75%)。
IR(液体石蜡)νmax3500-3100(OH)，2100(N3)，1750和1590cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.264(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.3Hz，H-5)，4.34-4.2(1H，m，H-1′)，3.475(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.0Hz，H-6)，3.5-3.2(3H，m，CH2N3和H-1′)，3.2-2.95(4H，m，SCH2和CH2N)，2.0-1.8，1.8-1.47(4H，2 组 m，H-CH-4和HCHCH2-4)和1.33ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-N，N-二甲氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐
将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(2-N，N-二甲氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(250mg，0.65mmol)在水(50ml)中的溶液在帕尔氢化器中，在45-50psi氢气压下，用5%Pd/氧化铝作催化剂，振荡氢化1小时。补加催化剂(600mg)，再继续氢化1小时。滤除催化剂，用水(3×5ml)洗涤。用1M乙酸水溶液将该含水混合物的pH调至4.5，然后使之通过μBondapak C18反相柱(75g，0.005M冰冷的乙酸水溶液，1%CH3CN/0.005M乙酸水溶液)，经冷冻干燥后，得到浅黄色固体状标题化合物(215mg，79%)。
纯度96.1%(HPLC测定，保留时间＝5.83分钟，μBondapak C18，10μ，10%CH3CN/KH2PO40.01M，pH7.4); UV(水)λmax296(8142); IR(液体石蜡)νmax3400-3100(OH，NH2)，1755和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.273(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.9Hz，H-5)，4.4-4.2(1H，m，H-1′)，3.458(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝6.2Hz，H-6)，3.4-3.2(3H，m，CH2N和H-4)，3.2-3.0(4H，m，SCH2和CH2N)，2.91(6H，s，(N(CH3)2)，1.92(2.5H，s，CH3CO2H)，2.0-1.4(4H，m，CH2CH2-4)和1.330(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例129 (4R，5S，6S)-4-(2″-胍基乙基)-3-｛(4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷基硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐
将(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-｛(4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷基硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐(0.24g，0.51mmol)在25ml冷(0-5℃)水中的溶液用1M NaOH调至pH8-8.5。分小批量加入氨基亚氨基甲磺酸(0.38g，3.06mmol)(5分钟)，在加料期间用1M NaOH将pH维持在8-8.5，并在加料完成后再将该pH维持2小时。然后用乙酸将pH调至5，并将所得溶液在反相硅胶(μBondapak C18，2.5×15cm)上层析。用梯度为0-20%乙腈在0.005M乙酸水溶液中的溶液洗脱，经冷冻干燥后，得到0.063g(24%)白色非晶形固体状标题卡巴潘尼姆 纯度(HPLC)94%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为1ml/分，UV检测器302nm，保留时间为15.6分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax300nm(8，011); IR(KBr)νmax1760(β-内酰胺的C＝O)，1660(酰胺的C＝O)和1600(羧酸根的C＝O); 1HNMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.32Hz，3H，CH3CHO)1.7-2.2(m，3H，吡咯烷的H-3和CH2-4)，1.92(s，CH3CO2H)，3.0 and 3.07(2S，2 x 3H，CON(CH3)2)，3-3.1(m与NCH3重叠，1H，吡咯烷的H-3)，3.2-3.6(m，5H，吡咯烷的H-5，H-4，H-6和乙基的CH2NH)，3.65(dd，Jgem＝12.2Hz，JH5，H4＝5.85Hz，1H，吡咯烷的H-5)，3.9(m，1H，吡咯烷的H-4)，4.28(m与H-5重叠，1H，CH3CHO)，4.31(dd，JH5，H6＝2.75Hz，JH5，H4＝9.8Hz，1H，H-5)和4.70ppm(t，J＝8.5Hz，1H，吡咯烷的H-2). 实施例130 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(N，N-二甲基脒基甲基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐
将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(N，N-二甲基脒基甲基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.270g，0.68mmol)在冷水(80ml)中的溶液在0-5℃，45psi氢气压下，用1.2g 5%Pd/氧化铝氢化1小时。然后加入乙酸(0.08ml，1.4mmol)(pH由9降至4)，滤除催化剂。将该滤液在反相硅胶(μBondapak C18，3×12cm)上层析，用梯度为0-20%乙腈在0.01M乙酸水溶液中的溶液洗脱。将UV活性级分冷冻干燥，得到0.200g白色非晶形粉末，经1H NMR测定为标题化合物和乙脒乙酸盐的等摩尔混合物。将该混合物溶解在乙醇(1ml)中，加入乙醚(3ml)使之沉淀。将所得固体(0.088g)在与上述相同的柱上层析，得到0.080g(27%)纯的标题化合物，为白色非晶形粉末 纯度(HPLC)96%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用3%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为2ml/分，UV检测器300nm，保留时间为9.3分钟); UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax292nm(5，872); IR(KBr)νmax1760(β-内酰胺的C＝O)，1645(sh)和1575cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.38Hz，3H，CH3CHO)，1.4-2.0(m，4H，丙基的CH2-1和2)，1.91(s，3H，CH3CO2H)，3-3.4(m，3H，H-4和CH2NH2)，3.12和3.29(2s，2 x 3H，N(CH3)2)，3.50(dd，JH6，H5＝2.92Hz，JH6，H1＝6.32Hz，1H，H-6)，3.84(s，部分交换SCH2)，和4.2-4.4ppm(m，2H，H-5和CH3CHO重叠). 实施例131 (4R，5S，6S)-4-〔2″-(2-氨基乙基硫基)乙基〕-3-〔(2-氰基乙硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-〔2″-(2-烯丙氧羰基氨基乙基硫基)乙基〕-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-羟基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(350mg，0.73mmol)溶解在二氯甲烷(7ml)中，在干冰-丙酮浴冷却下，先用二异丙基乙胺(0.34ml，1.9mmol)处理上述溶液，然后滴加三氟甲磺酸酐(0.14ml，0.88mmol)。将该混合物搅拌25分钟，用在二氯甲烷(1ml)中的N-烯丙氧羰基半胱胺(354mg，2.2mmol)滴加处理，然后在-15℃(用冰-甲醇浴代替干冰浴)搅拌0.5小时。再次用在二氯甲烷(0.5ml)中的硫醇(177mg，1.1mmol)和二异丙基乙胺(0.13ml，0.73mmol)处理上述混合物，然后再搅拌30分钟。用乙酸乙酯(30ml)稀释，依次用冰冷的1M NaHSO3水溶液(2×10ml)，水(10ml)，1M NaHCO3水溶液(2×10ml)，水(10ml)和盐水(10ml)洗涤，干燥(MgSO4)。使残留物通过闪式硅胶柱(35g，10%→50%乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(321mg，70%)。
IR(CH2Cl2)νmax3450(NH)，2250(CN)，1775(β-内酰胺的C＝O)和1720cm-1(酯和氨甲酰基的C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.03-5.82(2H，m，乙烯基 H)，5.48-5.19(4H，m，乙烯基 H)，5.1(1H，bs，NH)，4.9-4.63(2H，m，烯丙基 CH2)，4.583-4.55(2H，m，烯丙基 CH2)，4.3-4.13(1H，m，H-1′)，4.158(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.55-3.33(3H，m，CH2N和H-4)，3.33-3.19，3.05-2.9(2H，2 组 m，SCH23位)，3.11(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.9Hz，H-6)，2.9-2.63(6H，2 组 m，CH2CN和CH2S)，2.1-1.96，1.96-1.75(2H，2 组 m，CH2-4)，1.300(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.884(9H，s，叔丁基)和0.090ppm(6H，s，二甲基). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(2-烯丙氧羰基氨基乙基硫基)乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔2″-(2-烯丙氧羰基氨基乙基硫基)乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(310mg，0.500mmol)溶解在四氢呋喃(7ml)中，在冰-甲醇浴冷却下，先用冰乙酸(0.16ml，3.0mmol)处理上述溶液，然后滴加1M氟化四丁铵在四氢呋喃中的溶液(1.5ml，1.5mmol)。将该混合物在冷室(5℃)放置15天，然后用乙酸乙酯(30ml)稀释，依次用冰冷的1M NaHCO3水溶液(3×15ml)，水(2×15ml)和盐水(15ml)洗涤，干燥(MgSO4)。使残留物通过闪式硅胶柱(15g，40→100%乙酸乙酯/己烷)，得到黄色油状标题化合物(155mg，60%)。
IR(CH2Cl2)νmax3600(OH)，3450(NH)，2250(CN)，1775(β-内酰胺的C＝O)和1715cm-1(酯和氨甲酰基的C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.05-5.8(2H，m，乙烯基 H)，5.50-5.20(4H，m，乙烯基 H)，5.05(1H，bt，NH)，4.82-4.65(2H，m，烯丙基 CH2)，4.586，4.559(2H，d，J＝5.5Hz，烯丙基CH2)，4.206(d，J＝2.7Hz，部分 H-5)，4.22-4.05(1H，m，H-1′)，3.7-3.5(1H，m H-4)，3.5-3.3，3.3-3.1，3.1-2.8，2.8-2.6(11H，H-6，CH2N，SCH2，CH2CN)，2.1-1.6(3H，m，CH2-4和OH)和1.427ppm(3H，d，J＝6.1Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-4-〔2″-(2-氨基乙基硫基)乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-〔2″-(2-烯丙氧羰基氨基乙基硫基)乙基-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(150mg，0.29mmol)溶解在二氯甲烷(8ml)中，在冰浴冷却下，先用Pd(PPh3)4(53mg，0.040mmol)处理上述溶液，然后滴加N-甲基苯胺(0.15ml，1.2mmol)。将该混合物搅拌20分钟，然后用乙醚(30ml)和0.1M pH7.0磷酸盐缓冲水溶液(15ml)稀释。用0.1M缓冲液(2×7ml)和水(7ml)再次提取有机层。
用乙酸乙酯(2×20ml)洗涤水提取液，使之通过μBondapak C18反相柱(45g，水，1→6%CH3CN/水)，冷冻干燥后，得到粉末状标题化合物(31mg，28%)。
纯度经HPLC测定为98.0%(保留时间为6.26分钟;μBondapak C18，10μ，5%CH3CN/KH2PO4，0.01M，pH7.4); UV(水)λmax300(10，964); IR(液体石蜡)νmax3500-3100(OH，NH2)，2250(CN)，1755(β-内酰胺的C＝O)和1590cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.32-4.20(1H，m，H-1′)，4.244(d，J＝2.7Hz，部分 H-5)，3.608-3.494(1H，m，H-4)，3.407(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.6Hz，H-6)，3.278-3.04(3H，m，CH2N和部分 SCH23位)，3.03-2.71(6H，m，SCH2at 3，SCH2和CH2CN)，3.70-2.49(1H，m，部分 SCH2)，2.10-1.95，1.95-1.75(2H，2 组 m，CH2-4)和1.322ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例132 (4R，5S，6S)-4-(2″-胍基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.0g，2.0mmol)溶解在无水CH2Cl2(20ml)中，在干冰-丙酮冷却下，先用二异丙基乙胺(0.92ml，5.2mmol)处理该溶液，然后滴加三氟甲磺酸酐(0.40ml，2.4mmol)。将该混合物搅拌30分钟，向其中滴加吡咯烷(1.0ml，12mmol)，然后将其在-15℃冰-MeOH)搅拌15分钟。用1∶1 EtOAc/石油醚混合物(100ml)稀释上述混合物，用冰冷的水(10×25ml)洗涤。将有机部分干燥(MgSO4)，使之通过闪式硅胶垫(60g，20%→100%EtOAc/己烷，20%丙酮/EtOAc)，得到油状标题化合物(640mg，58%)。
IR(CH2Cl2)νmax2100(N3)，1775和1720cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.1-5.8(1H，m，乙烯基 H)，5.5-5.2(2H，m，乙烯基 H)，4.9-4.55(2H，m，烯丙基CH2)，4.3-4.1(1H，m，H-1′)，4.12(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.7-3.5(1H，m，H-4)，3.4-3.2(2H，m，CH2N3)，3.07(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝7.9Hz，H-6)，3.04-2.76(2H，2 组 m，SCH2)，2.76-2.5(6H，m，CH2N)，2.15-1.95(1H，m HCH)，1.9-1.6(5H，m，(CH2)2和H-CH)，1.313(3H，d，J＝6.2Hz，CH3)，0.895(9H，s，叔丁基)和0.094ppm(6H，s，二甲基). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(620mg，1.1mmol)溶解在无水四氢呋喃(8ml)中，在冰-甲醇浴冷却下，先用乙酸(0.36ml，6.6mmol)处理上述溶液，然后滴加1M氟化四丁铵的四氢呋喃溶液(3.3ml，3.3mmol)。将该混合物搅拌15分钟，然后在5℃(冰浴)下搅拌1小时，并将其在冷室(5-8℃)放置12天。
用乙酸乙酯(30ml)稀释该混合物，用1M NaHCO3饱和水溶液(4×5ml)和盐水(5ml)洗涤，干燥(MgSO4)。使残留物通过闪式硅胶垫(5g，乙酸乙酯/己烷50→100%;丙酮/乙酸乙酯20%→100%)，得到油状标题化合物(200mg，42%)。
IR(CH2Cl2)νmax3600(OH)，2100(N3)，1775和1620cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.05-5.95(1H，m，乙烯基 H)，5.5-5.2(2H，m，乙烯基 H)，4.9-4.6(2H，m，烯丙基 CH2)，4.3-4.2(1.5H，m，H-1′和隐藏部分 H-5)，4.208(d，J＝2.7Hz，部分 H-5)，3.63-3.53(1H，m，H-4)，3.49-3.35(2H，m，CH2N3)，3.155(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.9Hz，H-6)，3.09-2.6(4H，SCH2CH2-吡咯烷)，2.56(4H，bs，CH2NCH2)，2.2-1.7(6H，m，CH2-4和CH2CH2吡咯烷)和1.395ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-胍基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐
将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(160mg，0.370mmol)溶解在CH2Cl2(12ml)中，在冰浴冷却下，先用Pd(PPh3)4(30mg，0.02mmol)处理上述溶液，然后滴加0.5M2-乙基己酸钾的乙酸乙酯溶液(0.74ml，0.37mmol)。将该混合物搅拌15分钟，然后用乙醚(70ml)稀释，用0.04M pH7.0磷酸盐缓冲水溶液(3×15ml)和水(1×15ml)提取。合并水提取液，用乙醚(2×30ml)洗涤，用1M NaH2PO4缓冲水溶液将pH调至5.9(冰浴)。在帕尔氢化器上，在45-50psi氢气压下，在5℃(冰浴)，用30%Pd/硅藻土(160mg)为催化剂将该水性混合物振荡1小时。补加催化剂(100mg)，再氢化30分钟。滤除催化剂，用水(2×5ml)洗涤。用0.5M NaOH水溶液将上述水溶液(冰浴)的pH调至8.0，分批加入氨基亚氨基甲磺酸(360mg，2.96mmol，8当量)，其间，用NaOH溶液将pH维持在7.8-8.0。将该反应混合物搅拌3小时(冰浴)，然后用1M乙酸水溶液将pH调至7.0。使该水性混合物通过μBondapak C18反相柱(60g)，用0.005M乙酸水溶液(1%→2%CH3CN)稳定并洗脱该柱，经冷冻干燥后，得到粉末状标题化合物(45mg，26%)。
纯度97.5%(由HPLC测定，保留时间为7.17分钟，μBondapak C18，10μ，10% CH3CN/KH2PO40.01M，pH7.4); UV(水)λmax294(5427); IR(液体石蜡)νmax3400-3100(NH)，1765，1000(C＝O)和1675-1630cm-1(C＝N); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.35-4.2(1H，m，H-1′)，4.292(1H，dd，J＝2.9Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.502(1H，dd，J＝2.9Hz，J＝6.6Hz，H-6)，3.8-3.0(9H，m，H-4，SCH2CH2N，CH2NCH2吡咯烷)，2.2-1.95(5H，CH2CH2吡咯烷，H-CH 4位)，1.95-1.7(1H，m，HC-H 4位)，1.91(1.5Hz，s，CH3CO)和1.328ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 实施例133 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(3S)-3-吡咯烷基硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(3S)-N-烯丙氧羰基-3-巯基吡咯烷
先用吡啶(0.532g，6.72mmol)，再用三氟甲磺酸酐(1.90g，6.72mmol)处理(3R)-N-烯丙氧羰基-3-羟基吡咯烷(1.0g，5.84mmol)在CH2Cl2中的冷(5℃)溶液。搅拌15分钟后，蒸除溶剂，在乙醚中研制残留物，过滤。将三氟甲磺酸酯粗品重新溶解在冷(5℃)的CH3CN中，然后在该溶液中通入H2S气泡的同时，滴加三乙胺(0.71g，7mmol)。在15分钟内形成硫醇。蒸除溶剂，粗产物经层析(SiO2/5%CH3CN的CH2Cl2溶液)纯化，得到0.787g(71.9%)标题化合物。
IR(CH2Cl2)νmax1700(-CO2-)，1650cm-1(＞＝＜). 1H NMR(CDCl3)δ4.50-6.10(5H，烯丙基类型)，3.70-3.90(1H，m，CH-S-)3.20-3.70[4H，m，-(CH2-)2N]，2.20-2.40和1.70-2.00(2H，2m，2 H-4)，1.70(1H，d，J＝6.57，-SH). B.(4R，5S，6S)-3-〔(3S)-N-(烯丙氧羰基)-3-吡咯烷硫基〕-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
先用(3S)-N-烯丙氧羰基-3-巯基吡咯烷(0.79g，4.2mmol)，再用二异丙基乙胺(0.54g，4.2mmol)处理(4R，5S，6S)-3-(二苯基膦酰基)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(由1.09g，3mmol重氮基酮制备)在CH3CN中的冷(5℃)溶液。将该反应混合物在5℃搅拌18小时，然后用EtOAc稀释，依次用盐水，稀盐酸，稀碳酸氢钠，最后再用盐水洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，蒸发。粗产品经层析(SiO2/15% CH3CN的CH2Cl2溶液)纯化，得到441mg(29.1%)标题化合物。
IR(CH2Cl2)νmax3610(-OH)，2105(-N3)，1775(β-内酰胺)，1700(-CO2-)，1650cm-1(＞＝＜). 1H NMR(CDCl3)δ4.50-6.10(10H，2 烯丙基类型)，4.15-4.25(2H，m，H-5，H-1′)，3.70-3.90(2H，m，H-4，-CHS-)，3.0-3.90(7H，m CH2-N3，H-6，＞CH2)2)N-)，1.50-2.40(6H，m，2H-1″，2H-2″，吡咯烷的2H-4)，1.40(3H，d，J＝6.23，-CH2′). C.(4R，5S，6S)-3-〔(3S)-3-吡咯烷基硫基〕-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-3-〔(3S)-N-(烯丙氧羰基)-3-吡咯烷基硫基〕-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.15g，0.3mmol)，三苯膦(0.03g)和N-甲基苯胺(0.127g，1.19mmol)在EtOAc(10ml)中的溶液在冰浴中冷却，并用Pd(PPh3)4(0.03g)处理该溶液。撤去冰浴，将该反应混合物在20℃搅拌30分钟。补加Pd(PPh3)4(0.035g)，该反应在45分钟内完成。然后用冷水提取该反应混合物，将水提取液在反相硅胶(微粒形硅胶)上层析。用0-20%CH3CN的水溶液洗脱。将合适的级分冷冻干燥，得到0.028g(24.5%)白色泡沫状标题化合物。
IR(液体石蜡)νmax2100(-N3)，1765(β-内酰胺)，1595cm-1(-CO2-). 1H NMR(D2O)δ4.15-4.35(2H，m，H-5，H-1′)，3.97(1H，m，-CH-S-)，3.20-3.70(8H，m，H-4，H-6，CH2-N3，-CH2)2N)，2.40-2.60和1.25-2.20(6H，m，2 H-1″，2H-2″，吡咯烷的2H-4)，1.31(3H，d，J＝6.35，-CH3′). D.(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(3S)-3-吡咯烷硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(3S)-3-吡咯烷硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.042g，0.11mmol)溶解在水(15ml)中，在冷却(5℃)下和43psi下，在5%Pd/Al2O3(0.04g)存在下，将上述溶液氢化1小时。然后滤除催化剂，加入1M NaH2PO4将滤液调至pH6.3。将该水溶液在反相硅胶(微粒形硅胶)上层析，用冷水洗脱。将合适的级分冷冻干燥，得到不纯净的白色固体。进行第二次层析，用0.6ml乙酸/1升水洗脱，得到0.025g(54.7%)纯的标题化合物，为乙酸盐。
IR(液体石蜡)νmax1755cm-1(β-内酰胺); 1H NMR(D2O)δ4.20-4.40(2H，m，H-5，H-1′)，3.99(1H，m，-CH-S)，3.15-3.70(6H，m，H-6，H-4，-CH2)2N)，3.05(2H，m，CH2-N)，2.30-2.60和1.50-2.15(6H，m，2H-1″，2H-2″，吡咯烷的2H-4)，1.33(3H，d，J6.33-CH3′)，1.92(3H，s，乙酸). 实施例134 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-胍基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐
在0-5℃，45psi氢气压下，用5%Pd/Al2O3将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基乙基)-3-〔(2-胍基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.300g，0.76mmol)在冷水(150ml)中的悬浮液氢化1小时。加入0.1ml(1.6mmol)乙酸，然后滤除催化剂，将滤液在反相硅胶(μBondapak C18，2.5×15cm)上层析两次，用0.005M乙酸作为洗脱剂。将UV活性级分冷冻干燥，得到0.23g(70%)标题卡巴潘尼姆，为白色非晶形固体〔α〕22D+32.2°(c1.0，水)。
纯度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用水pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为0.8ml/分，UV检测器302nm，保留时间为8.27分钟); UV(水，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax302nm(6，390); IR(KBr)νmax1750(β-内酰胺的C＝O)，1680，1630和1580cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.34Hz，3H，CH3CHO)，1.4-2.0(m，4H，丙基的CH2-1和2)，1.92(s，CH3CO2H)，2.8-3.4(m，4H，SCH2和CH2NH2)，3.37(m，与H-6重叠，1H，H-4)，3.40(dd，JH6，H5＝2.6Hz，JH6，H1＝6.4Hz，1H，H-6)，3.48(t，J＝5.8Hz，2H，CH2NH-C(NH)NH2)，4.25(dd，与CH3CHO重叠，JH5，H6＝2.6Hz，1H，H-5)和4.28ppm(m，1H，CH3CHO). 实施例135 (4R，5S，6S)-4-(2″-胍基乙基)-3-〔(2-胍基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐
用1M NaOH水溶液将(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐(0.270g，0.73mmol)〔按实施例115制备〕在冷水(50ml)中的溶液调至pH8.5，然后在0-5℃，用5分钟时间分小批量加入氨基亚氨基甲磺酸(0.80g，6.44mmol)处理上述溶液，其间用碱将pH维持在8-8.5。2.5小时后，用乙酸将pH调至4.5，并将该溶液在反相硅胶(μBondapak C18，2.5×15cm)上层析两次，用水作为洗脱剂。将UV活性级分冷冻干燥，得到0.080g(23%)白色非晶形固体状标题卡巴潘尼姆。
纯度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用0.01M磷酸盐缓冲液洗脱，流速2ml/分，UV检测器300nm，保留时间为6.75分钟); UV(水，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax302nm(7，250); IR(KBr)νmax1755(β-内酰胺的C＝O)，1670，1640和1570cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.34Hz，3H，CH3CHO)，1.7-2.2(m，2H，乙基的CH2-1)，1.92(s，CH3CO2H)，2.7-3.2(m，2H，SCH2)，3.2-3.7(m，6H，H-4，H-6，乙基的CH2-2和SCH2CH2N)，和4.2-4.4ppm(m，2H，H-5和CH3CHO). 实施例136 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(1-吡啶鎓)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸盐
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-羟基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.481g，1mmol)〔由实施例125制备〕在无水二氯甲烷(10ml)中的溶液冷却至-78℃，在氩气氛下，先用N，N-二异丙基乙胺(0.262ml，1.5mmol)处理，然后滴加三氟甲磺酸酐(0.194ml，11.5mmol)(3分钟)。在-78℃反应20分钟后，加入吡啶(0.324ml，4mmol)。将该反应混合物在-20℃放置18小时，然后在不加热的情况下减压浓缩。将残留物溶解在无水四氢呋喃(20ml)中，冷却至-15℃，在氩气氛下先用乙酸(0.76ml)，再用6ml(6mmol)1M氟化四丁铵的四氢呋喃溶液处理。将该溶液在0℃放置96小时，然后先加入Pd(PPh3)4(0.090g)，再加入N，N-二异丙基乙胺(0.350ml，2mmol)。将所得反应混合物在0℃，氩气氛下搅拌3小时，然后用冷水(30ml)提取反应混合物。用1N NaOH将水相调至pH6.5，然后用乙醚洗涤提取液，并将其置于减压下以除去痕量的有机溶剂。将该溶液过滤，然后在反相硅胶(μBondapak C18，3.5×14cm)上层析，用水为洗脱剂。合并UV活性级分，冷冻干燥，在相同的柱上进行第二次层析，用梯度为0-1%乙腈水溶液洗脱。最后冷冻干燥后，得到0.310g白色非晶形粉末，后者在冷甲醇(20ml)中结晶，得到纯的晶状标题卡巴潘尼姆(0.262g，68%)。
纯度(HPLC)99.96%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用2%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速为0.8ml/分，UV检测器300nm，保留时间为9.97分钟); UV(水，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax298nm(8101)，260nm(7531); IR(KBr)νmax2250(CN，1755(β-内酰胺的C＝O)和1600cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.37(d，J＝6.35，3H，CH3CHO)，2.2-2.6(m，2H，CH2-4)，2.8(m，2H，CH2CN)，2.9-3.1(m，2H，SCH2)，3.45(m，1H，H-4)，3.56(dd，JH6，H5＝2.97Hz，JH6，H1＝7.04Hz，1H，H-6)，4.20-4.40(m，2H，H-5和CH3CHO)，4.81m，与HOD信号重叠，2H，N+-CH2)，8.11(m，2H，吡啶鎓上的H-3和H-5)，8.59(m，1H，吡啶鎓上的H-4)，8.91(m，吡啶鎓上的H-2和H-6). 实施例137 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-(β-氯-L-丙氨酰-β-氯-L-丙氨酰)氨基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-氨基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.475g，1.46mmol)在0.2M pH7.0磷酸盐缓冲液(15ml)中的溶液冷却至0℃，同时向该溶液中通入氩气气泡。用1N NaOH将pH调至10.2，然后在剧烈搅拌下一次加入在二噁烷(1.5ml)中的β-氯-L-丙氨酸的N-羧酸酐(0.22g，1.46mmol)。在pH降至7.2时，再将其调至10.2，放置1小时。用1N HCl将pH调至6.0，使反应停止。在0℃，向该溶液通入氩气气泡30分钟，同时无论何时pH超过6.0，便将其调回pH6。使该反应混合物粗品通过μBondapak C18反相硅胶柱(4.5×10.5cm)。将属于产物的合适级分合并，冷冻干燥，得到一固体，后者在μBondapak C18反相硅胶(4.5×10.5cm)上再次层析。用水和CH2CN的混合物(94∶6，梯度洗脱)洗脱出与单肽衍生物间隔很近的极性稍小的标题化合物，冷冻干燥后得到微黄色蓬松固体状标题化合物(0.049g，6.8%)。
经HPLC测定，纯度为92.2%，UV检测，设定在300nm处，μBondapak C18(4mm×30cm)，10%CH3CN pH6.8磷酸盐缓冲溶液，流速为1ml/分，保留时间为8.31分钟; UVλmax300nm; IR(液体石蜡)νmax1750cm-1(C＝O，β-内酰胺). 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.37(d，3H，CH3，J＝6.4Hz)，1.66-1.77;2.06-2.16(m，2H，CH2)，2.83-2.89(m，2H，CH2CN)，2.91-3.04;3.08-3.21(m，2H，SCH2)，3.32-3.41(m，3H，CH2NH，H-4)，3.58(dd，1H，H-6，J6，1′＝5.88Hz)，3.78-4.08(m，4H，CβH2)，4.17(t，1H，CαH，Jα，β＝4.61Hz)，4.27(dd，1H，H-5，J4，5＝7.92Hz，J5，6＝2.48Hz)，4.31(m，1H，H-1′)，4.76(t，1H，CαH，Jα，β＝5.37Hz). 实施例138 (4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-3-〔(2-氟乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氟乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰浴冷却和充分搅拌下，用10分钟时间，向三氟硫化二乙基铵(DAST，1.05ml，8.06mmol)在CH2Cl2(20ml)中的溶液中滴加(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯在CH2Cl2(80ml)中的溶液。将混合物搅拌15分钟，然后用冰冷的水(100ml)骤冷，最后用乙酸乙酯/乙醚的1/1混合物和水(400ml)稀释。水相用乙酸乙酯/乙醚(1/1，300ml)提取，合并有机提取液，用冰冷的水(2×250ml)、冰冷的1N HCl水溶液、水、1M NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。残留物通过闪式硅胶垫(180g，己烷，5-25%乙酸乙酯/己烷)，得到黄色油状的标题化合物(1.54g，38%) IR(CH2Cl2)νmax2100(N3)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.05-5.85(1H，m，乙烯基 H)，5.49-5.22(2H，m，乙烯基 H)，4.9-4.4(4H，m，烯丙基 CH2和CH2F)，4.3-4.13(1H，m，H-1′)，4.145(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.7-3.55(1H，m，H-4)，3.46-3.3(2H，m，CH2N3)，3.4-3.15，3.05-2.8(2H，2 组 m，SCH2)，3.088(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.7Hz，H-6)，2.13-1.95，1.85-1.65(2H，2 组 m，CH2-4)，1.309(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.897(9H，S，叔丁基)和0.095ppm(6H，s，二甲基). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-3-〔(2-氟乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷却下，将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氟乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(457mg，0.92mmol)在四氢呋喃(8ml)中的溶液先用冰乙酸(0.3ml，5.5mmol)处理，然后用1M氟化四丁铵四氢呋喃溶液(2.75ml，2.75mmol)滴加处理。将混合物搅拌10分钟，然后在冷室(5-8℃)中放置9天。再用乙酸乙酯(50ml)稀释，用冰冷的1M NaHCO3水溶液(4×25ml)、水(2×25ml)和盐水(25ml)洗涤，干燥(MgSO4)。通过闪式硅胶柱(15g，己烷，乙酸乙酯/己烷10%-15%)，得到油状标题化合物(240mg，68%)。
IR(CH2Cl2)νmax3400(OH)，3100(N3)，1778和1612cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.03-5.9(1H，m，乙烯基 H)，5.5-5.2(2H，m，乙烯基 H)，4.9-4.35(4H，m，烯丙基CH2和CH2-F)，4.3-4.15(1H，m，H-1′)，4.248(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.7-3.5(1H，m，H-4)，3.5-3.3(2H，m，CH2N3)，3.3-2.8(2H，2 组 m，SCH2)，3.160(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝8.0Hz，H-6)，2.15-1.95，1.84-1.65(2H，2 组 m，CH2-4)，1.834(1H，d，J＝5.1Hz，OH)和1.395ppm(3H，d，J＝Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-3-〔(2-氟乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
在冰浴冷却下，向(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-3-〔(2-氟乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(585mg，1.52mmol)在CH2Cl2(20ml)中的溶液中加入Pd(PPh3)4(142mg，0.114mmol)，并滴加0.5M的2-乙基己酸钠乙酸乙酯溶液(3.0ml，1.50mmol)。将混合物搅拌20分钟，用乙醚(80ml)稀释，用水(4×15ml)提取。合并水提取液，用水(2×20ml)洗涤后，通过μ-Bondapak C18反相柱(200g，1%-10%CH3CN/水)，冷冻干燥后，得到灰白色固状的标题化合物(40.2mg，72%)。
纯度97.8%，用HPLC法测得(保留时间＝14.85分钟，μBondapak C18，10μ，5% CH3CN/KH2PO40.01M，pH7.4); UV(H2O)λmax302(9184); IR(液体石蜡)νmax3350(OH)，2100(N3)，1750和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.83-4.75，4.6-4.5(2H，2 组 m，CH2F)，4.35-4.2(1H，m，H-1′)，4.210(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝9.0Hz，H-5)，3.65-2.9(6H，m，H-4，SCH2，CH2N3，H-6)，2.17-2.0，1.9-1.7(2H，2 组 m，CH2-4)和1.331ppm(3H，d，J＝Hz，CH3). 实施例139 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(4-哌啶基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在5℃和45psi下，在5%Pd/Al2O3(0.08g)存在下，将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(4-哌啶基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.08g，0.20mmol)在水(40ml)中的溶液氢化1小时。然后滤出催化剂，加入乙酸将滤液的pH值降至5.0。将该酸化后的溶液在反相硅胶(微粒形硅胶)上层析，用15%CH3CN水溶液洗脱。将适当的级分冷冻干燥，得到0.066g(76.8%)标题化合物的乙酸盐。
IR(液体石蜡)νmax1760(β-内酰胺)，1580cm-1(-CO2-). 1H NMR(D2O)δ4.20-4.40(2H，m，H-5，H-1′)，3.25-3.60[5H，m，H-6，(2H-2，哌啶的2H-6)]，2.95-3.15(4H，m，CH2-N，H-4，哌啶的H-4)，1.50-2.40[8H，m，2H-1″，2H-2″，(2H-3，哌啶的2H-5)]，1.93(3H，s，乙酸)，1.34(3H，d，J＝6.30，-CH3′). 实施例140 (4R，5S，6S)-3-〔(N，N-二甲基脒基甲基)硫基〕-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐
将(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(N，N-二甲基脒基甲基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.203g，0.47mmol)在冷水(0-5℃，30ml)中的溶液用1M氢氧化钠水溶液调至pH8.5，然后在保持pH8-8.5的同时，用5分钟时间分小批加入氨基亚氨基甲磺酸(0.230g，1.85mmol)进行处理。2小时后，用冰乙酸将pH值调至4.8，将溶液在反相硅胶(μ-Bondapak C18，2.5×13.5cm)上用0.01M乙酸水溶液洗脱层析。将UV活性级分冷冻干燥，得到非晶形固状的标题卡巴潘尼姆(0.090g，40%)。
HPLC纯度98%，μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，5% CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速1ml/分钟，UV检测器292nm，保留时间7.52分钟; UV(水，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax292nm(6，340); IR(KBr)νmax1760(β-内酰胺的C＝O)，1680，1650和1580cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.36Hz，3H，CH3CHO)，1.4-1.9(m，4H，丙基的CH2-1和2)，1.92(s，CH3CO2H)，3.12 and 3.29(2s，2 x 3H，NCH3)，3.1-3.4(m，3H，H-4和丙基的CH2-3)，3.44(dd，JH6，H5＝2.83Hz，JH6，H1＝5.97Hz，1H，H-6)，3.86(s，2H，SCH2)和4.2-4.4ppm(m，2H，H-5和CH3CHO重叠). 实施例141 (4R，5S，6S)-3-〔(2-N，N-二甲基氨基乙基)硫基〕-4-(2″-胍基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-N，N-二甲基氨基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷却下，将从(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叠氮基乙基-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(4.64g，10mmol)制得的烯醇磷酸酯在乙腈(45ml)中的溶液用在CH3CN(2ml)中的N，N-二甲基氨基乙硫醇(1.05g，10.0mmol)缓慢处理，并用二异丙基乙胺(1.92ml，11.0mmol)滴加处理。在-10℃→0℃下将混合物搅拌1.5小时，然后再次用冰-MeOH浴冷却，再次用在CH3CN(1ml)中的硫醇(520mg，5mmol)及二异丙基乙胺(0.96ml，5.5mmol)处理。将混合物在-15℃下搅拌0.5小时，并在冰箱(-20℃)中放置18小时。用乙酸乙酯/乙醚(1∶1混合物，500ml)稀释，用冰冷的水(5×100ml)和盐水(100ml)洗涤，干燥(MgSO4)。残留物通过闪式硅胶柱(100g，50→100%乙酸乙酯/己烷，10%丙酮/乙酸乙酯)，得到标题化合物(4.0g，76%)，其中掺杂有开环的β-内酰胺副产物。
IR(CH2Cl2)νmax2100N3，1775和1715cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.1-5.8(1H，m，乙烯基 H)，5.5-5.1(2H，m，乙烯基 3H)，4.9-4.6(2H，m，烯丙基 -CH2)，4.3-4.1(1H，m，H-1′)，4.2-4.15(1H，dd，H-5)，3.7-3.5(1H，m，H-4)，3.5-3.3(2H，m，CH2-N3)，3.071(1H，dd，J＝3.0Hz，J＝7.1Hz，H-6)，3.1-2.85(2H，m，SCH2)，2.7-2.4(2H，m CH2-N)，2.28(6H，s，N(CH3)2)，2.1-1.6(2H，m，CH2-4)，1.314(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.897(9H，s，叔丁基)和0.069ppm(6H，s，二甲基). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-3-〔(2-N，N-二甲基氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷却下，将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-N，N-二甲基氨基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(4.0g，7.6mmol，37%纯度)在四氢呋喃中的溶液先用冰乙酸(2.5ml，45.6mmol)处理，并用1M的氟化四丁铵四氢呋喃溶液(22.8ml，22.8mmol)滴加处理。将混合物在5℃下放置11天，然后用乙酸乙酯(400ml)稀释，用冰冷的1M NaHCO3水溶液(2×25ml)、冰冷的水(3×25ml)和盐水(25ml)洗涤，干燥。残留物通过闪式硅胶柱(60g，10→100%丙酮/乙酸乙酯)，得到黄色油状的标题化合物(473mg，41%)。
IR(CH2Cl2)νmax3610，3450(OH)，2110(N3)，1780和1610cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.1-5.9(1H，m，乙烯基 H)，5.49-5.22(2H，m，乙烯基 H)，4.9-4.6(2H，m，烯丙基 CH2)，4.235(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.3Hz，H-5)，4.33-4.2(1H，m H-1′)，3.7-3.5(1H，m，H-4)，3.47-3.3(2H，m，CH2N3)，3.150(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.9Hz，H-6)，3.1-2.9(2H，m，SCH2)，2.7-2.4(2H，m，CH2N)，2.284(6H，s，N(CH3)2)，1.95-1.7(3H，m，OH，CH2-4)和1.400ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-3-〔(2-N，N-二甲基氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷却下，向(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-3-〔(2-N，N-二甲基氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(470mg，1.14mmol)在CH2Cl2(17ml)中的溶液中加入Pd(PPh3)4(105mg，0.086mmol)和0.5M的2-乙基己酸钾乙酸乙酯溶液(2.28ml，1.14mmol)。将混合物搅拌15分钟，用乙醚(100ml)稀释，用冰冷的水(4×20ml)提取。合并水提取液，用乙醚(2×40ml)洗涤，然后通过μ-Bondapak C18反相柱(67.5g，水，1%→10%CH3CN/H2O)，冷冻干燥后，得到黄色粉状的标题化合物(200mg，46%). IR(液体石蜡)νmax3400-3100(OH)，2100(N3)，1755和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.280(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝6.8Hz，H-5)，4.32-4.2(1H，m，H-1′)，3.67-3.54(1H，m，H-4)，3.481(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.1Hz，H-6)，3.5-3.34(2H，m，CH2N3)，3.2-2.92(4H，m，SCH2和CH2N)，2.60(6H，s，N(CH3)2)，2.18-2.02，1.91-1.75(2H，2 组 m，CH2-4)和1.329ppm(3H，d，J＝6.1Hz，CH3). D.(4R，5S，6S)-3-〔(2-N，N-二甲基氨基乙基)硫基〕-4-(2″-胍基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐
在冰浴冷却下，用1M NaH2PO4水溶液将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-3-〔(2-N，N-二甲基氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(190mg，0.514mmol)的0.04M pH7.0磷酸盐缓冲水溶液(67ml)的pH值调至5.9。在冰浴冷却下和45-50psi氢压下，用30%Pd/硅藻土(270mg)为催化剂，将混合物在帕尔氢化器上振荡1小时。补加Pd/硅藻土(270mg)，继续氢化1小时。滤除催化剂，用水(2×10ml)洗涤。在冰浴冷却下，用1N NaOH水溶液将水溶液的pH值调至7.8-8.0。分批加入氨基亚氨基甲磺酸(354mg，2.87mmol)，并用1N NaOH水溶液将pH值保持在7.8-8.0。将反应混合物搅拌1.5小时，然后补加氨基亚氨基甲磺酸(124mg，1mmol)。将pH值保持在7.8-8.0，再搅拌1小时。反应结束时，用1.0M乙酸水溶液将pH值调至7.0，使混合物通过μ-Bondapak C18反相柱(130g，冰冷的0.005M乙酸水溶液，1%CH3CN/0.005M AcOH)，冷冻干燥后，得到灰白色粉状的标题化合物(60mg，26%)。
纯度96.9%，由HPLC法测得(保留时间＝6.02分钟，μBondapak C18，10μ，3% CH3CN/KH2PO40.01M，pH7.4); UV(H2O)λmax296(6089); IR(液体石蜡)νmax3400-3100(NH，OH)，1760，1600-1540(C＝O)，1680-1620cm-1(C＝N); 1H NMR(D2O，200NH2)δ4.33，4.32(d，J＝2.9Hz，部分 H-5)，4.33-4.2(m，H-1′和部分 H-5)，3.51(1H，dd，J＝2.9Hz，J＝6.6Hz，H-6)，3.41-3.21(5H，m，CH2-胍，CH2N，H-4)，3.20-2.96(2H，m，SCH2)，2.91(6H，s，NCH3)，2.24-2.03，1.9-1.55(2H，2 组 m，CH2-4)，1.925(2，2H，s，CH3CO2)和1.33ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例142 (4R，5S，6S)-3-〔(N，N-二甲基脒基甲基)硫基〕-4-(3″-N-亚氨甲基氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐
用1M氢氧化钠水溶液将(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(N，N-二甲基脒基甲基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐(0.204g，0.474mmol)在冷水(30ml，0-5℃)中的溶液的pH值调至8.5，然后在用1M氢氧化钠溶液保持pH值在8-8.5的同时，用5分钟时间分小批加入甲亚胺酸苄酯盐酸盐(0.40g，2.3mmol)进行处理。15分钟后，用浓乙酸将pH值调至5，用乙酸乙酯(25ml)洗涤反应混合物。将水相保持在减压下以除去痕量的有机溶液，然后于4℃下在反相硅胶(μ-Bondapak C18，2.5×14cm)上层析两次。用0.01M乙酸水溶液洗脱，冷冻干燥后，得到白色非晶形粉状的标题化合物(0.088g，41%)。
HPLC纯度97%，μ-Bondapak C18，3.9mm/30cm，洗脱剂3%CH3CN-水，pH7.4磷酸盐缓冲液，流速0.8ml/分钟，UV检测器292nm，保留时间5.8分钟; UV(水，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax292nm(7，200); IR(KBr)νmax1750(β-内酰胺的C＝O)，1715，1645和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.32Hz，3H，CH3CHO)，1.4-1.9(m，4H，丙基的CH2-1和2)，1.92(s，CH3CO2H)，3.12 and 3.28(2 x s，2 x 3H，NCH3)，3.0-3.6(m，4H，H-4，H-6和丙基的CH2-3)，3.84(s，2H，SCH2)，4.2-4.4(m，2H，H-5和CH3CHO重叠)和7.81ppm(s，1H，CH＝NH). 实施例143 (4R，5S，6S)-4-(3″-N-亚氨甲基氨基丙基)-3-〔(2-胍基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐
用1M氢氧化钠水溶液将(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-胍基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐(0.300g，0.695mmol)在冷水(30ml，0-5℃)中的溶液的pH值调至8.5，然后用5分钟时间分小批加入甲亚胺酸苄酯盐酸盐(0.60g，3.5mmol)进行处理。在加入过程中用1M氢氧化钠将pH值保持在8-8.5，加完后再保持15分钟。然后用浓乙酸将pH值调至5，用乙酸乙酯(2ml)洗涤反应混合物。将水相保持在减压下除去微量有机溶剂，然后于4℃下在反相硅胶(μ-Bondapak C18，2.5×15cm)上层析。用0.01M乙酸水溶液洗脱，冷冻干燥后，得到0.190g(59%)的白色非晶形固状的标题卡巴潘尼姆〔α〕22D+26.6°(c1.0，水)。
HPLC纯度97%，μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，洗脱剂2%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液，流速1ml/分钟，UV检测器300nm，保留时间6.1分钟。
UV(水，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax302nm(8，677); IR(KBr)νmax1755(β-内酰胺的C＝O)，1710，1670，1620和1580cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.33Hz，3H，CH3CHO)，1.4-2.0(m，4H，丙基的CH2-1和2)，1.93(s，CH3CO2H)，2.8-3.2(m，2H，SCH2)，3.3-3.5(m，6H，H-4，H-6，丙基的CH2-3和SCH2CH2N)，4.2-4.4(m，2H，H-5和CH3CHO)和7.8ppm(s，1H，CH＝NH). 实施例144 (4R，5S，6S)-3-〔(2-胍基乙基)硫基〕-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐
用1N氢氧化钠水溶液将(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-胍基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐(0.300g，0.695mmol)在冷水(30ml，0-5℃)中的溶液的pH值调至8.5，用5分钟时间分小批加入氨基亚氨基甲磺酸(0.43g，3.46mmol)进行处理。在整个加入过程中用1M氢氧化钠将pH值保持在8.0-8.5，然后再保持2小时。用冰乙酸将pH值调至5，然后将溶液在反相硅胶(μ-Bondapak C18，2.5×15cm)上层析。用0.01M乙酸水溶液洗脱，冷冻干燥后，得到0.213g(64%)白色非晶形固状的标题卡巴潘尼姆〔α〕22D+11.3°(c1.0，水)。
HPLC纯度99%，μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，洗脱剂2%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液，流速1ml/分钟，UV检测器300nm，保留时间10.4分钟。
UV(水，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax302nm(10，260); IR(KBr)νmax1755(β-内酰胺的C＝O)，1670，1630和1580cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.38Hz，3H，CH3CH3CHO)，1.4-2.0(m，4H，丙基的CH2-1和2)，1.92(s，CH3CO2H)，2.8-3.2(m，2H，SCH2)，3.2-3.6(m，6H，H-4，H-6，丙基的CH2-3和SCH2CH2N)，4.23(dd，JH5，H6＝2.49Hz，JH5，H4＝9.2Hz，1H，H-5)和4.27ppm(m与H-5重叠，1H，CH3CHO). 实施例145 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-(L-丙氨酰基)氨基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-氨基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.512g，1.57mmol)在0.2M pH7.0磷酸盐缓冲液(15ml)中的溶液冷却至0℃，同时向溶液中鼓入氩气泡。用1N NaOH将pH值调至10.2，在剧烈搅拌条件下，将在二噁烷(1.5ml)中的L-丙氨酸的N-羧酸酐(0.181g，1.57mmol)一次性地加入其中。当pH值降至7.2时，将pH值重新调至10.2，放置1小时。用1N HCl将pH值调至6.0停止反应。在0℃下向溶液中鼓入氩气泡30分钟，同时重新将pH值调至6.0(如果pH值升至高于6.0时)。使反应混合物粗品通过μ-Bondapak C18反相硅胶柱(4.5×11.5cm)。合并适当的含产物级分，冷冻干燥后得到固体物，将其在μ-Bondapak C18反相硅胶(4.5×11cm)上重新层析。用水和CH3CN的混合物(97∶3，梯度洗脱)洗脱极性稍大的标题化合物，将其与非常接近的二肽衍生物分离，冷冻干燥后，得到黄色蓬松固状的产物(0.099g，15.9%)。
HPLC纯度96.5%，UV检测设置在300nm，μ-Bondapak C18(4mm×30cm)，5%CH3CN的pH6.8磷酸盐缓冲液溶液，流速0.6ml/分钟，保留时间7.25分钟。
UVλmax300; IR(液体石蜡)νmax1750cm-1(C＝O，β-内酰胺). 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.38(d，3H，CH3，J＝6.4Hz，)，1.47(d，3H，CH3，J＝7.0Hz)，1.52-1.77;1.97-2.11(m，2H，CH2)，2.82-2.89(重叠，2H，CH2CN)，2.91-3.17(重叠，2H，SCH2)，3.27-3.43(重叠，3H，CH2N，H-4)，3.59(dd，1H，H-6，J5，6＝2.66Hz，J6，1′＝6.06Hz)，3.91(q，1H，CαH，Jα，CH3＝7.02Hz)，4.74-4.96(重叠，2H，H-5，H-1′). 实施例146 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-(L-丙氨酰-L-丙氨酰基)氨基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在向溶液中鼓入氩气泡的同时，将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-氨基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.512g，1.57mmol)在0.2M pH7.0磷酸盐缓冲液(15ml)中的溶液冷却至0℃。用1N NaOH将pH值调至10.2，在剧烈搅拌下，将在二噁烷(1.5ml)中的L-丙氨酸的N-羧酸酐(0.181g，1.57mmol)一次性地加入其中。当pH值降至7.2时，将pH值重新调至10.2，放置1小时。用1N HCl将pH值调至6.0停止反应。在0℃下向溶液中鼓入氩气泡，其间，只要pH值升至6.0以上就将其重新调至6.0。使反应混合物粗品通过μ-Bondapak C18反相硅胶柱(4.5×11.5cm)。合并适当的含产物级分，冷冻干燥后，得到固体物，在μ-Bondapak C18反相硅胶(4.5×11cm)上重新层析。用水和CH3CN混合物(96∶4，梯度)洗脱极性较小的标题化合物，将其与非常接近的单肽衍生物分离，冷冻干燥后，得到黄色蓬松固体(0.069g，9.4%)。
HPLC纯度96.6%，UV检测设置在300nm，μ-Bondapak C18(4mm×30cm)，5%CH3CN的pH6.8磷酸盐缓冲液溶液，流速0.6ml/分钟，保留时间9.1分钟。
UVλmax300nm. IR(液体石蜡)νmax1750cm-1(C＝O，β-内酰胺); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.37(d，3H，CH3，J＝6.45Hz)，1.42(d，3H，CH3，J＝7.39Hz)，1.46(d，3H，CH3，J＝8.85Hz)，1.59-1.75;1.99-2.14(m，2H，CH2)，2.84-2.89(重叠，2H，CH2CN)，2.92-3.22(重叠，2H，SCH2)，3.3-3.42(重叠，3H，CH2N，H-4)，3.59(dd，1H，H-6，J5，6＝2.56Hz，J6，1′＝5.88Hz)，3.9(br，1H，CαH)，4.25-4.34(重叠，3H，H-5，H-1′，CαH). 实施例147 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(3-氮杂环丁烷基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在45psi压力下，用5%Pd/Al2O3(0.235g)为催化剂将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(3-氮杂环丁烷基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.235g，0.64mmol)在水(75ml)中的冷(5℃)溶液氢化。1小时后，用一些新催化剂(0.235g)代替用过的催化剂，再氢化1小时。此时，过滤反应混合物，用AcOH酸化至pH5.7，最后在反相硅胶(微粒形硅胶)上用水洗脱进行层析。冷冻干燥后，将所得物质再层析两次，得到了纯度很高的标题化合物(0.045g，17.5%)。
IR(液体石蜡)νmax1750cm-1(β-内酰胺); 1H NMR(D2O)δ4.00-4.15和4.50-4.70(4H，2m，氮杂环丁烷的2H-2和2H-4)，4.15-4.20(3H，m，H-5，H-1′，CH-S)，3.47(1H，dd，J＝2.72，J＝6.33，H-6)，3.00-3.25(3H，m，CH2-N，H-4)，1.50-1.95(4H，m，2H-1″，2H-2″)，1.38(3H，d，J＝6.34，-CH3′). 实施例148 (4R，5S，6S)-4-(2″-羟基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(咪唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钾
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3-〔(咪唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(9.03mmol，由5.00g，9.03mmol的重氮基前体环化得到)在无水乙腈(60ml)中的溶液冷却至0-5℃，在氮气氛下，用5分钟时间同时加入氯磷酸二苯基酯(2.1ml，10.1mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.7ml，9.8mmol)进行处理。然后加入少量4-N，N-二甲基氨基吡啶，将混合物搅拌1小时。然后将溶液冷却至-20℃，再用另外的N，N-二异丙基乙胺(2.3ml，13.2mmol)，和在乙腈(10ml)中的1.22g(10.7mmol)4(5)-(巯甲基)咪唑依次处理。在-20℃下3小时和0℃下1小时后，用乙酸乙酯(500ml)稀释反应混合物，用饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，然后减压下蒸发。残留物在硅胶(5×10cm)上层析。用甲苯和乙酸乙酯的混合物(8∶2)洗脱，先得到5.0g(73%)回收的烯醇磷酸酯。然后用乙酸乙酯洗脱，得到1.35g(24%)的油状标题化合物。1H-NMR表明，该产物含有25%的开环产物，该开环产物是由硫醇引起的β-内酰胺的裂解产生的。
IR(NaCl，压片)νmax1772(β-内酰胺的C＝O)和1708cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.5(SiCH3)，0.9(Si-t-Bu)，1.27(d，J＝6.13H，CH3CHO)，1.6-2.2(m，CH2CH2OSi)，3.09(dd，JH8，H6＝2.45Hz，JH6，H1＝6.63Hz，H-6)，3.5-4.3(m，H-4，H-5，SCH2，CH3CHO，CH2CH2OSi)，4.7(m，烯丙基的CH2)，5.1-5.5和5.8-6.1(2m，烯丙基的CH)，6.9(s，咪唑的H-5)和7.6ppm(s，咪唑的H-2). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-羟基乙基)-3-〔(咪唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3-〔(咪唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(2.65g，4.26mmol)在四氢呋喃(60ml)中的溶液冷却至0-5℃，用冰乙酸(3.0ml，52.4mmol)和26ml(26.0mmol)的1.0M氟化四丁铵四氢呋喃溶液依次处理。然后将溶液在5℃下保存12天。用乙酸乙酯(300ml)稀释反应混合物，用饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥。减压下蒸发溶剂，得到油状物。将油状物在硅胶垫(5×5cm)上层析，用0-20%甲醇乙酸乙酯溶液梯度洗脱。所得产物(0.37g，20%)含有一些四丁铵盐，将该产物直接用于脱保护反应中。
IR(NaCl，压片)νmax1765(β-内酰胺的C＝O)和1700cm-1(酯的C＝O). C.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-羟基乙基)-3-〔(咪唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钾
在22℃和氮气氛下，将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-羟基乙基)-3-〔(咪唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.37g，0.94mmol)在无水二氯甲烷(20ml)中的溶液用四(三苯膦)钯〔O〕和2.1ml(1.25mmol)的0.5M2-乙基己酸钾乙酸乙酯溶液处理。1.2小时后，用水(2×50ml)提取反应混合物，合并水提取液，在反相硅胶(μ-Bondapak C18，3×15cm)上用水为洗脱剂层析两次。将UV活性级分冷冻干燥后，得到0.081g(22%)白色非晶形固状的标题卡巴潘尼姆。
HPLC纯度100%，μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，pH7.0磷酸盐缓冲液洗脱，流速1.5ml/分钟，UV检测器300nm，保留时间9.04分钟; UV(水，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax304nm(10，153); IR(KBr)νmax1750(β-内酰胺的C＝O)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.30(d，J＝6.37Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.1(2M，2H，CH2CH2OH)3.3-3.5(m，2H，H-6和H-4重叠)，3.5-3.8(m，2H，CH2CH2OH)，4.03(ABq，JAB＝14.6Hz，Δν＝37.0Hz，2H，SCH2)，4.13(dd与SCH2重叠，JH5，H6＝2.53Hz，JH5，H4＝9.60Hz，1H，H-5)，4.24(m，1H，CH3CHO)，7.10(s，1H，咪唑的H-5)和7.79ppm(s，1H，咪唑的H-2). 实施例149 (4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(3R)-3-吡咯烷硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(3R)-N-烯丙氧基羰基-3-羟基吡咯烷
将3(R)-羟基吡咯烷盐酸盐(8.0g，64.7mmol)溶于冷(5℃)1N NaOH(130ml，130mmol)中，用氯甲酸烯丙酯(9.4g，77.7mmol)在丙酮(80ml)中的溶液滴加处理。加完后将混合物搅拌15分钟，然后蒸发掉大部分丙酮。然后用乙酸乙酯提取水溶液。将有机提取液用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，蒸发。通过层析(SiO2/Et2O，然后EtOAc和CH3CN)纯化氨甲酸酯粗品，得到6.28g(56.7%)可流动的油状标题化合物。
IR(CH2Cl2)νmax3603，3440(-OH)，1697(-CO2)，1650(＞＝＜). 1H NMR(CDCl3)δ4.8-6.1(5H，烯丙基类型)，4.48(1H，宽 s，H-3)，3.40-3.60(4H，m，2H-2，2H-5)，1.80-2.10(3H，m，2H-4，-OH). B.(3S)-N-烯丙氧基羰基-3-羟基吡咯烷
用吡啶(1.15g，14.5mmol)和三氟甲磺酸酐(4.09g，14.5mmol)处理(3R)-N-烯丙氧基羰基-3-羟基吡咯烷(2.16g，12.62mmol)在CH2Cl2中的冷(5℃)溶液。搅拌15分钟后，蒸发溶剂，残留物在乙醚中研制后过滤。然后蒸发滤液，将三氟甲磺酸酯粗品溶于冷(5℃)CH2Cl2中，用预先形成的甲酸(0.87g，18.93mmol)和三乙胺(1.9g，18.93mmol)的CH2Cl2溶液处理。撤去冰浴，将溶液在室温下搅拌45分钟。然后用冷水和盐水洗涤反应混合物。干燥(MgSO4)后，蒸发溶剂，甲酸酯粗品通过层析(SiO2;10%CH3CN的CH2Cl2溶液)纯化，得到2.13g(84.7%)产物。将该纯化物质溶于冷(5℃)四氢呋喃中，滴加1N NaOH(11ml，11mmol)。搅拌10分钟后，用HCl中和反应混合物，用EtOAc稀释，用冷水和盐水洗涤。蒸发溶剂后，产物用层析法(SiO2/EtOAc)纯化，得到1.51g(82.5%)标题化合物。
IR(CH2Cl2)νmax3605，3440(-OH)，1695(-CO-2)，1650cm-1(＞＝＜). 1H NMR(CDCl3)δ4.40-6.10(5H，烯丙基类型)，4.50(1H，m，H-3)，3.40-3.70(4H，m，2H-2，2H-5)，1.90-2.10(2H，m，2H-4).[α]20D+26.9(130mg/100mL，MeOH). C.(3R)-N-烯丙氧基羰基-3-巯基吡咯烷
将(3S)-N-烯丙氧基羰基-3-羟基吡咯烷(1.51g，8.82mmol)在CH2Cl2中的冷(5℃)溶液用吡啶(0.80g，10.14mmol)处理，接着用三氟甲磺酸酐(2.86g，10.14mmol)处理。搅拌15分钟后，蒸发溶剂，残留物在乙醚中研制，过滤后，蒸发滤液。将三氟甲磺酸酯粗品重新溶于冷(5℃)CH3CN中，并在鼓入H2S气泡的同时，向溶液中滴加三乙胺(1.07g，10.58mmol)。30分钟后起始原料消失。然后蒸发溶剂，硫醇粗品经层析(SiO2/CH2Cl2)纯化，得到1.25g(75.7%)标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ4.60-6.10(5H，烯丙基类型)，3.20-3.90(5H，m，H-3，2H-2，2H-5)，2.20-2.40(1H，m，H-5)，1.80-2.00(1H，m，H-5)，1.71(1H，d，J＝6.65，SH). D.(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(3R)-N-(烯丙氧基羰基)-3-吡咯烷硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-(二苯基膦酰基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.85g，3.25mmol)在DMF(35ml)中的冷(5℃)溶液用(3R)-N-烯丙氧基羰基-3-巯基吡咯烷(1.25g，6.68mmol)处理，然后用二异丙基乙胺(0.863g，6.68mmol)处理。撤去冰浴，在室温下搅拌15小时后，将溶液用乙醚(90ml)稀释，用冷盐水洗涤三次。干燥(MgSO4)后，蒸发有机液，卡巴潘尼姆粗品经层析(SiO2;30%CH3CN的CH2Cl2溶液)纯化，得到1.27g(77.1%)标题化合物。
IR(CH2Cl2)νmax3610(-OH)，2105(-N3)，1778(β-内酰胺)，1700(-CO-2)，1650cm-1(＞＝＜). 1H NMR(CDCl3)δ4.5-6.10(10H，2 烯丙基类型)，4.15-4.30(2H，m，H-5，H-1′)，3.70-3.90(2H，m，H-4，CH-S-)，3.10-3.70(7H，m，H-6，-CH2N3，-(CH2)2N-)，1.40-2.40(6H，m，2H-1″，2H-2″，吡咯烷的2H-4)，1.40(3H，d，J＝6.23，-CH3′). E.(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(3R)-3-吡咯烷硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(3R)-N-(烯丙氧基羰基)-3-吡咯烷硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.932g，1.84mmol)在EtOAc(50ml)中的冷(5℃)溶液用0.5M乙基己酸钠(11.04ml，5.52mmol)和(PPh3)4Pd(0.90g)处理。将溶液在5℃下搅拌20小时，然后用EtOAc稀释，用冷水提取。用AcOH将水提取液酸化至pH～7.0，在反相硅胶(微粒形硅胶)上层析。用0-25%CH3CN水溶液洗脱，得到15mg(2.1%)标题化合物。〔分离出的主产物是相应的单去保护的酯，(31%)〕。
1H NMR(D2O)δ4.20-4.40(2H，m，H-5，H-1′)，3.95(1H，m，-CH-S)，2.96-3.42(1H，m，H-4)，3.1-3.42(7H，m，H-6，-CH2N3，-(CH2)2N-)，1.50-2.50(6H，m，2H-1″，2H-2″，吡咯烷的2H-4)，1.33(3H，d，J-6.37，-CH3′). 实施例150 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(3R)-3-吡咯烷硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在5℃和60psi氢压下，在5%Pd/Al2O3(60mg)存在下，将(4R，5S，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-3-〔(3R)-3-吡咯烷硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.54g，0.142mmol)在冷水(15ml)中的溶液氢化1小时。然后滤出催化剂，用乙酸将滤液酸化至pH5.5。将该酸化后的溶液在反相硅胶(微粒形硅胶)上层析，得到30mg(50.9%)乙酸盐形式的标题化合物。
IR(液体石蜡)νmax1750cm-1(β-内酰胺)，1590(-CO-12). 1H NMR(D2O)δ4.20-4.40(2H，m，H-5，H-1′)，3.90-4.10(1H，m，-CH-S)，3.60-3.70(1H，m，H-4)，3.20-3.50(5H，m，H-6，(-CH2)2N-)，3.05(2H，m，CH2-N-)，1.50-2.60(6H，m，2H-1″，2H-2″，吡咯烷的2H-4)，1.33(3H，s，J＝6.40，-CH13)，1.92(3H，s，乙酸). 实施例151 (4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(咪唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钾
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(咪唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5R，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(10.7mmol，由5.0g，10.7mmol重氮基前体环化制得)在无水乙腈(75ml)中的溶液冷却至0-5℃，在5分钟内同时滴加氯磷酸二苯基酯(2.45ml，11.8mmol)和N，N-二异丙基乙胺(2.06ml，11.8mmol)进行处理。然后加入少量的4-N，N-二甲基氨基吡啶，将混合物搅拌1小时。然后将混合物冷却至-20℃，用另外的N，N-二异丙基乙胺(2.06ml，11.8mmol)和4(5)-(巯甲基)咪唑(1.50g，13.1mmol)在乙腈(10ml)中的溶液依次处理。将该溶液缓慢温热至0-5℃，搅拌3小时。然后用乙酸乙酯(300ml)稀释反应混合物，用饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压蒸发溶剂，残留物在硅胶(5×10cm)上层析。先用甲苯和乙酸乙酯的混合物(8∶2)洗脱，得到3.38g(47%)烯醇磷酸酯中间体。用乙酸乙酯进一步洗脱，得到1.45g(25%)油状标题化合物。
IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)和1765cm-1(β-内酰胺的C＝O). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(咪唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(咪唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.45g，2.72mmol)在四氢呋喃(40ml)中的溶液冷却至0-5℃，用乙酸(1.0ml，17.5mmol)处理后，用8.2ml(8.2mmol)的1.0M氟化四丁铵四氢呋喃溶液处理。在0-5℃下14天后，将反应混合物用乙酸乙酯(400ml)稀释，用饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压下蒸发溶剂，残留物在硅胶(4×6cm)上层析。用0-20%甲醇乙酸乙酯溶液梯度洗脱，得到0.34g(30%)油状标题化合物。
IR(NaCl，压片)νmax2100(N3)，1765(β-内酰胺的C＝O)和1700cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.38(d，J＝6.25Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.1(m，CH2CH2N3)，3.15(dd，JH6，H5＝2.63Hz，JH6，H1＝7.72Hz，1H，H-6)，3.3-3.7(m，3H，H-4和CH2CH2N3重叠)，4.06(ABq，JAB＝14.6Hz，Δν＝45.2Hz，2H，SCH2)，4.1-4.4(m，2H，H-5和CH3CHO 重叠)，4.6-4.9(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(2m，2H，和1H，烯丙基的CH)，6.98(s，1H，咪唑的H-5)和7.59ppm(s，1H，咪唑的H-2). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(咪唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钾
在25℃和氮气氛下，将(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(咪唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.304g，0.81mmol)在二氯甲烷(20ml)中的溶液用四(三苯膦)钯〔O〕(0.040g)和1.8ml(0.9mmol)的0.5M2-乙基己酸钾乙酸乙酯溶液处理。1.2小时后，用水(2×50ml)提取反应混合物，合并提取液，在反相硅胶(μ-Bondapak C18，2.5×15cm)上层析，用0-5%乙腈在0.01M pH7.0磷酸盐缓冲液中的溶液梯度洗脱。收集UV活性级分，浓缩，在同样的柱上用水代替缓冲液为洗脱剂进行脱盐。冷冻干燥适当的级分，得到0.047g(14%)的白色非晶形固状的标题卡巴潘尼姆。
HPLC纯度99%，μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，10%CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速1ml/分钟，UV检测器302nm，保留时间6.83分钟。
UV(水，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax304nm(8，380); IR(KBr)νmax2100(N3)，1745(β-内酰胺的C＝O)和1600cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.31(d，J＝6.40Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.1(m，2H，CH2CH2N3)，3.2-3.6(m，4H，H-6，H-4和CH2CH2N3重叠)，4.03(ABq，JAB＝14.52Hz，Δν＝33.6Hz，2H，SCH2)，4.14(dd，JH5，H6＝2.42 Hz，JH5，H4＝9.48Hz，1H，H-5)，4.24(m，1H，CH3CHO)，7.09(s，1H，咪唑的H-5)和7.72ppm(s，1H，咪唑的H-2). 实施例152 (4R，5S，6S)-4-〔3″-氨基-(2″R或S)-2″-羟基丙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔1′R-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(吡啶-2-基)甲硫基-5-叠氮基-4-(叔丁基二甲基硅氧基)戊酸酯
在冰浴冷却下，向由P.A.Bartlett等人在J.Am，Chem.Soc.，100，3950(1978)中所述的那样碘内酯化得到的5-叠氮基-4-(叔丁基二甲基硅氧基)戊酸(38g，0.14mmol)在二甲基甲酰胺(250ml)中的溶液中加入2-吡啶甲硫醇(17.5g，0.140mol)、1，3-二环己基碳化二亚胺(30g，0.15mol)和1-羟基苯并三唑(10g，0.074mol)。将混合物在冷室(5-8℃)中搅拌60小时，用水(1l)稀释，用乙醚(5×250ml)提取。合并乙醚提取液，用水(5×250ml)和盐水(200ml)洗涤，干燥，通过闪式硅胶垫(500g，己烷，5→30%乙酸乙酯/己烷)，得到油状标题化合物(30g)。
IR(压片)νmax2100(N3)和1690cm-1(C＝O). 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.558-8.525(1H，m，吡啶 H-6)，7.672＝7.586(1H，m，吡啶 H-4)，7.336(1H，d，J＝7.9Hz，吡啶 H-3)，7.199-7.131(1H，m，吡啶 H-5)，4.257(2H，s，CH2S，3.834(1H，5线的中心，J＝5.41-2，CHO)，3.197(2H，ABX的中心，J＝4.5Hz，J＝5.4Hz，J＝12.5Hz，CH2N3)，2.659(2H，t，J＝7.6Hz，CH2CO)，2.01-1.786(2H，m，CH2)，0.893(9H，s，叔丁基)，0.094和0.061ppm(6H，2s，二甲基). B.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-4″-叠氮基-(3″R和S)-3″-叔丁基二甲基硅氧基)丁基〕氮杂环丁烷-2-酮
在冰-MeOH浴冷却下，将(吡啶-2-基)甲硫基-5-叠氮基-4-(叔丁基二甲基硅氧基)戊酸酯(30g，78.9mmol)在二氯甲烷(500ml)中的溶液用三乙胺(35ml，0.25mol)处理，并用三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯(46ml，0.20mmol)滴加处理。加完后，将混合物在5-8℃下放置18小时，然后用己烷(1l)稀释，用水(5×500ml)和盐水(500ml)洗涤，干燥(MgSO4)，用活性炭处理。将红色油状的残留物(20g，51%，0.040mmol)加到在冰浴冷却下的新熔融过的氯化锌(13g，0.096mol)和(3S，4R)-4-乙酰氧基-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮(20g，0.069mol)在二氯甲烷(250ml)中的混合物中。将所得混合物在冷室中放置18小时，用乙醚(1l)稀释，用饱和NH4Cl水溶液(3×250ml)、水(3×250ml)、冰冷的饱和NaHCO3水溶液、水(250ml)和盐水(250ml)洗涤，干燥(MgSO4)。残留物通过闪式硅胶柱(500g，己烷→50%乙酸乙酯/己烷)，得到分离的非对映异构体形式的标题化合物(30g各异构体，合并收率24%)。
异构体1 Rf＝0.33(己烷/乙酸乙酯1/1); IR(压片)νmax3300-3200(NH)，2700(N3)，1765和1680cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.54-8.51(1H，m，吡啶 H6)，7.64-7.58(1H，m，吡啶 H-4)，7.314(1H，d，J＝7.8Hz，吡啶 H-3)，7.21-7.14(1H，m，吡啶 H-5)，5.845(1H，bs，NH)，4.280，4.269(2H，2 线，部分 ABq，CH2S)，4.2-4.05(1H，m，CHO)，3.832(1H，dd，J＝2.05Hz，J＝6.0Hz，H-4)，3.83-3.70(1H，m，CHO)，3.227(2H，ABX，J＝4.6Hz，J＝5.1Hz，J＝12.5Hz，CH2N3)，3.08-2.95(2H，m，H-3和H-1″)，2.15-1.98，1.67-1.55(2H，m，CH2-1″)，1.025(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.883，0.868(18H，2s，叔丁基)，0.070和0.047ppm(3H和5H，2s，二甲基). 异构体2 Rf＝0.42(己烷/乙酸乙酯1/1); IR(压片)νmax3250(NH)，2100(N3)，1765和1685cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.55-8.52(1H，m，吡啶 H-6)，7.67-7.58(1H，m，吡啶 H-4)，7.32(1H，d，J＝7.8Hz，吡啶 H-3)，7.21-7.14(1H，m，吡啶 H-5)，5.90(1H，bs，NH)，4.336，4.267，4.245，4.174(2H，ABq，J＝14.0Hz，CH2S)，4.20-4.13(1H，m，CHO)，3.794(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝6.9Hz，H-4)，3.82-3.75(1H，m，CHO)，3.207(2H，ABX，J＝3.8Hz，J＝5.2Hz，J＝12.8Hz，CH2S)，3.048(1H，bt，J＝2.5Hz，H-3)，2.86-2.75(1H，m，H-1″)，2.10-1.96，1.85-1.70(2H，2 组 m，CH2-4)，1.050(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.883，0.857(18H，2s，叔丁基)和0.047ppm(12H，s，二甲基). C.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-4″-重氮基-(3″R或S)-3″-叔丁基二甲基硅氧基丁基〕氮杂环丁烷-2-酮
在冰浴冷却下，将(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-4″-叠氮基-(3″R或S)-3″-叔丁基二甲基硅氧基)丁基〕氮杂环丁烷-2-酮(2.38g，3.9mmol)在四氢呋喃(25ml)中的溶液用30%H2O2水溶液(1.3ml，15.6mmol)处理，接着缓慢加入1M NaOH水溶液(11.7ml，11.7mmol)。将混合物搅拌30分钟，然后用1N HCl水溶液(14ml)酸化，用乙酸乙酯(3×30ml)提取。合并有机提取液，用水(2×20ml)、1M NaHSO3水溶液(2×20ml)、水(30ml)和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，得到油状标题化合物(1.8g，92%)。
IR(CH2Cl)νmax3400(NH)，2100(N3)，1765，1740和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.329(1H，bs，NH)，4.23-4.14(1H，m，CHO)，3.867(1H，dd，J-2.2Hz，J＝6.4Hz，H-4)，3.26(2H，ABX的中心，J＝4.2Hz，J＝4.7Hz，J＝12.7Hz，CH2N3)，3.13(1H，m的中心，H-3)，2.70-2.60(1H，m，H-1″)，2.04-1.7(2H，m，CH2-1″)，1.171(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.898，0.869(18H，2s，叔丁基)，0.109，0.099，0.070和0.062ppm(12H，4s，CH3). D.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(4-叠氮基-(3R或S)-3-叔丁基二甲基硅氧基丙基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮
将(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-4″-叠氮基-(3″R或S)-3″-叔丁基二甲基硅氧基丁基〕氮杂环丁烷-2-酮(1.8g，3.6mmol)在甲苯(25ml)中的溶液用羰基二咪唑(642mg，3.96mmol)处理，然后搅拌1.5小时。除去溶剂，残留物再次溶于甲苯中。再次除去溶剂，残留物在高真空下干燥。向所得酰基咪唑中加入丙二酸单烯丙酯镁盐(4.5g，14.4mmol)在苯(40ml)中的预先干燥过的溶液(在3

和4

分子筛上加热2.5小时)中。将混合物加热1.6小时(浴温75℃)，用乙醚和乙酸乙酯的1∶1混合物稀释，用冰冷的水(2×40ml)、冰冷的1N HCl水溶液(40ml)、水(2×40ml)和盐水(40ml)洗涤，干燥(MgSO4)，得到标题化合物粗品(2.29g，＞100%)，将该粗品直接用于下一步反应中。
IR(CH2Cl2)νmax3420(NH)，2120(N3)，1770(β-内酰胺的C＝O)，1720，1660和1630cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ12.113(0.5H，bs，OH enol)，6.03-5.80(1H，m，乙烯基 H)5.927(1H，bs，NH)，5.387-5.253(2H，m，乙烯基 H)，5.058(2.6H，s，烯醇的烯H enol)，4.665-4.616(2H，m，烯丙基 H)，4.24-4.12，3.883-3.764(2H，m，H-4和H-1′)，3.775，3.764(d，J＝2.1Hz，部分 H-4)，3.680，3.600，3.592，3.513(2H，ABq，J＝15.9Hz，乙酰乙酸酯的CH2)，3.357-3.269(1H，m，部分 CH2N3)，3.187-3.01(2H，m，H-1″和部分CH2N3)，2.955(0.5H，dd，J＝2.1Hz，J＝4.1Hz，H-3)，2.905(0.5H，dt，J＝2.6Hz，部分 H-3)，2.256-2.146，2.065-1.91，1.836-1.6(2H，3 组 m，CH2-4)，1.180(1.4H，d，J＝6.2Hz，CH3)，1.086(1.6H，d，J＝6.3Hz，CH3))，0.896和0.866(18H，2s，叔丁基)，0.108，0.091，0.087，0.069和0.056ppm(12H，5s，二甲基). E.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(4-叠氮基-(3R或S)-3-叔丁基二甲基硅氧基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮
在冰浴冷却下，将(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(4-叠氮基-(3R或S)-3-叔丁基二甲基硅氧基丙基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(2.2g，3.6mmol)在CH3CN(22ml)中的溶液先用三乙胺(0.51ml，3.6mmol)处理，然后用甲苯磺酰基叠氮(709mg，3.6mmol)在CH3CN(3ml)中的溶液滴加处理。将混合物搅拌1.5小时，然后减压下蒸发溶剂。残留物用己烷研制，滤除甲苯磺酰胺固体，用己烷洗涤。蒸发己烷后，残留物通过闪式硅胶柱(60g，己烷，10%→40%乙醚/己烷)，得到油状标题化合物。
IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，2150(N2)，2100(N3)，1765(β-内酰胺的C＝O)1715和1650cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.03-5.832(1H，m，乙烯基 H)，5.862(1H，bs，NH)，5.40-5.29(2H，m，乙烯基 H)，4.72-4.689(2H，m，CH2烯丙基)，4.215-4.07(2H，m，CHO和H-1′)，3.805-3.71(1H，m，H-1″)，3.189(2H，ABX，J＝3.9Hz，J＝5.5Hz，J＝12.7Hz，CH2N3)，3.023(1H，bt，J＝2.5Hz，H-3)，2.175-2.03，1.73-1.57(2H，2 组 m，CH2-1″)，1.162(3H，d，J＝6.4Hz，CH3)，0.891，0.865(18H，2s，叔丁基)，0.094，0.062和0.053ppm(12H，3s，二甲基). F.(4R，5R，6S)-4-〔3″-叠氮基-(2″R或S)-2″-叔丁基二甲基硅氧基丙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯
在Rh(OAc)2(17mg)存在下，将(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-〔4-叠氮基-(3R或S)-3-叔丁基二甲基硅氧基丙基〕-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮(690mg，1.1mmol)在苯(20ml)中的溶液加热回流45分钟。加入另外的催化剂(17mg)，再加热30分钟。滤除催化剂，减压下除去苯，得到油状标题化合物(700mg，100%)。
IR(CH2Cl2)νmax2110(N3)，1770和1745cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.0-5.79(1H，m，乙烯基 H)，5.38-5.24(2H，m，乙烯基 H)，4.72-4.88(2H，m，烯丙基 CH2)，4.633(1H，s，CH-2)，4.58-4.28(1H，m，H-1′)，4.325(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝8.4Hz，H-5)，3.91-3.82(1H，m，CHO)，3.40-3.2(2H，m，CH2N3)，3.246(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝4.3Hz，H-6)，2.839(1H，bq，J＝7.9Hz，H-4)，1.84-1.72(2H，m，CH2-4)，1.270(3H，d，J＝6.2Hz，CH3)，0.897(18H，s，叔丁基)，0.112，0.099，0.092和0.083ppm(12H，4s，二甲基). G.(4R，5S，6S)-4-〔3″-叠氮基-(2″R或S)-2″-叔丁基二甲基硅氧基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷却下，将(4R，5S，6S)-4-〔3″-叠氮基-(2″R或S)-2″-叔丁基二甲基硅氧基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(得自690mg，1.1mmol重氮基前体)在CH3CN(8ml)中的溶液用氯磷酸二苯基酯(0.26ml，1.32mmol)、二异丙基乙胺(0.23ml，1.32mmol)和少量4-N，N-二甲基氨基吡啶(20mg)滴加处理。将混合物搅拌1小时，然后在1小时内依次加入两份氰乙硫醇(130mg，1.5mmol和52mg，0.60mmol)和二异丙基乙胺(0.26ml，1.50mmol)和0.10ml，0.60mmol)。将混合物搅拌1.5小时，用乙酸乙酯(25ml)稀释，用冰冷的水(3×10ml)、1M NaHSO3水溶液(3×10ml)、水(2×10ml)、1N HCl水溶液(10ml)、水(2×10ml)、1M NaHCO3水溶液(10ml)、水(10ml)和盐水(10ml)洗涤，干燥(MgSO4)。残留物通过闪式硅胶柱(25g，石油醚，10→40%乙醚/石油醚)，得到油状标题化合物(442mg，62%)。
IR(CH2Cl2)νmax2250(CN)，2110(N3)，1775(β-内酰胺的C＝O)，1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.03-5.84(1H，m，乙烯基 H)，5.48-5.20(2H，m 乙烯基 H)，4.85-4.6(2H，m，烯丙基 CH2)，4.38-4.3(1H，m H-1′)，4.284(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.65-3.50(1H，m，CHO)，3.47-2.93(5H，m，H-4，CH2N3，SCH2)，3.205(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝6.4Hz，H-6)，2.699，2.664，2.632(2H，m，CH2CN)，1.90-1.75(2H，m，CH2-4)，1.245(3H，d，J＝6.2Hz，CH3)，0.935和0.898(18H，2s，叔丁基)，0.143和0.091(12H，2s，二甲基). H.(4R，5S，6S)-4-〔3″-叠氮基-(2″R或S)-2″-羟基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷却下，将(4R，5S，6S)-4-〔3″-叠氮基-(2″R或S)-2″-叔丁基二甲基硅氧基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(440mg，0.68mmol)在四氢呋喃(6ml)中的溶液用冰乙酸(0.94ml，17mmol)处理，并用1M氟化四丁铵四氢呋喃溶液(6.8ml，6.8mmol)滴加处理。将混合物在8℃下搅拌15天，然后用乙酸乙酯(40ml)稀释，用冰冷的水(4×10ml)、1M NaHCO3水溶液(2×10ml)、水(10ml)和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。残留物在制备性硅胶板上层析(乙酸乙酯/己烷4/1)，得到油状标题化合物(185mg，65%)。
IR(CH2Cl2)νmax3600，3450(OH)，2250(CN)，2110(N3)，1775(β-内酰胺的C＝O)和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.04-5.87(1H，m，乙烯基 H)，5.493-4.24(2H，m，乙烯基 H)，4.88-4.64(2H，m，烯丙基 H)，4.294(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.7Hz，H-5)，4.3-4.17(1H，m，H-1′)，3.9-3.67(2H，m，CHO和H-4)，3.382，3.353(2H，2 线，CH2N3)，3.35-3.23(1H，m，SCH2质子之一)，3.159(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝8.0Hz，H-6)，3.05-2.91(1H，m，SCH2质子之一)，3.91(1H，bs，OH)，2.81-2.63(2H，m，CH2CN)，2.377(1H，bs，OH)，1.94-1.64(2H，m，CH2-4)和1.388ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). I.(4R，5S，6S)-4-〔3″-叠氮基-(2″R或S)-2″-羟基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠
在冰浴冷却下，将(4R，5S，6S)-4-〔3″-叠氮基-(2″R或S)-2″-羟基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(180mg，0.43mmol)在CH2Cl2(7ml)中的溶液用Pd(PPh3)4处理，并用N-甲基苯胺(0.11ml，0.86mmol)滴加处理。将混合物搅拌30分钟，然后用0.1M pH7.0磷酸盐缓冲液水溶液(10ml)和乙醚(20ml)稀释。用另外的pH7.0缓冲液(2×5ml)和水(5ml)提取有机液。合并水相，用乙醚洗涤，通过μ-Bondapak C18反相柱(50g，水→2%CH3CN/水)，冷冻干燥后，得到粉状标题化合物(105mg，61%)。
IR(液体石蜡)νmax3500-3100(OH)，2100(N3)，1745(β-内酰胺的C＝O)和1595cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.343，4.33(d，J＝2.5Hz，部分 H-5)，4.35-4.21(2H，m，H-1′和H-5)，3.9-3.8(1H，m，CHO)，3.679-3.583(1H，m，H-4)，3.435，3.422(部分 H-6，d，J＝2.5Hz)，3.48-3.31(3H，m，H-6和CH2N3)，3.257-3.134，3.087-2.91(2H，2 组 m，SCH2)，2.91-2.83(2H，m，CH2CN)，1.99-1.876，1.783-1.655(2H，2 组 m，CH2-4)和1.321ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). J.(4R，5S，6S)-4-〔3″-氨基-(2″R或S)-2″-羟基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷却下和45-50psi氢压下，用5%Pd/氧化铝为催化剂，将(4R，5S，6S)-4-〔3″-叠氮基-(2″R或S)-2″-羟基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸钠(105mg，0.26mmol)在水(20ml)中的溶液在帕尔氢化器上振荡1小时。滤除催化剂，用水(2×2ml)洗涤。用0.1M NaH2PO4水溶液将反应混合物水溶液的pH值调至7.05。中和后的溶液通过μ-Bondapak C18反相柱(50g，水)，冷冻干燥后，得到白色粉状的标题化合物(65mg，43%)。
纯度98.2%，用HPLC测得(保留时间5.92分钟，μBondapak C18，10μ，KH2PO40.01M，pH7.4); UV(水)λmax300(8008); IR(液体石蜡)νmax3600-3100(OH，NH2)，2250(CN)，1750(β-内酰胺的C＝O)和1590cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.312(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝9.7Hz，H-5)，4.32-4.207(1H，m，H-1′)，3.948-3.849(1H，m CHO)，3.68-3.575(1H，m，H-4)，3.380(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝6.6Hz，H-6)，3.235，3.219，3.169，3.154(1H，部分 ABX，J＝3.1Hz，J＝13.2Hz，CH2N3)，3.23-3.11(1H，m，SCH2质子之一)，3.008-2.95(2H，m，部分 CH2CN和部分 SCH2)，2.88-2.82(2H，m，CH2CN)，2.002-1.699(2H，m，CH2-4)和1.328ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 实施例153 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-苄硫基-4-〔2″-(N-苄基-N-甲基)氨基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-3-苄硫基-4-〔2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-4-〔2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(4.75g，9.03mmol)在CH3CN(50ml)中的冷(0℃)溶液用ClPO(OPh)2(2.06ml，9.93mmol)处理，接着用N，N-二异丙基乙胺(1.73ml，9.93mmol)和4-N，N-二甲基氨基吡啶(10mg)处理。将混合物在0℃和氩气下搅拌2.5小时，然后向溶液中鼓入氩气泡10分钟。再依次用苯甲硫醇(2.54ml，21.58mmol)和N，N-二异丙基乙胺(3.8ml，21.68mmol)处理烯醇磷酸酯，并在0℃下搅拌20小时。将反应混合物用EtOAc(300ml)稀释，用冷的1M NaHSO3、水和盐水依次洗涤，干燥(MgSO4)，蒸发溶剂，得到糖浆状物，在用己烷填充的硅胶(9×10cm)上层析，用己烷和EtOAc的混合物(85∶15，梯度)洗脱，得到泡沫状标题化合物(4.35g，76.2%)。
1H NMR(200MHz，CDCl37.24)δ0.05(s，12H，Si(CH3)2)，0.857，0.86(2s，18H，SiC(CH3)2)，1.26(d，3H，CH3)，1.62-1.78;1.98.2.12(m，2H，CH2)，3.05(dd，1H，H-6，J6，1′＝6.93Hz)，3.45-3.6(m，1H，H-4)，3.53-3.8(中心 m，2H，CH2O)，4.03(dd，1H，H-5，J5，6＝2.38Hz，J4，5＝9.21Hz)，4.1(紧凑的AB，2H，SCH2)，4.18(m，1H，H-1′)，4.59-4.82(m，2H，OCH2，烯丙基)，5.17-5.46(m，2H，＝CH2，烯丙基)，5.83-6.02(m，1H，CH＝，烯丙基)，7.16-7.34(m，5H，苯基). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-3-苄硫基-4-(2″-羟基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在氩气氛下，将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-3-苄硫基-4-〔2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(4.35g，6.88mmol)在无水四氢呋喃(65ml)中的冷(0℃)溶液依次用乙酸(2.36ml，41.26mmol)和1M氟化四丁铵四氢呋喃溶液(20.63ml，20.63mmol)处理。将混合物在0℃下搅拌5小时，在-20℃下放置18小时，然后在0℃下用1M NaHCO3溶液(42ml，42mmol)中和。将混合物用EtOAc(3×75ml)提取，合并有机相，依次用冷的1M NaHCO3、水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，蒸发溶剂，得到泡沫体，在用CH2Cl2填充的硅胶(7.5×8cm)上层析，用CH2Cl2和CH3CN的混合物(8∶2，梯度)洗脱，得到泡沫状标题化合物(2.49g，69.9%)。
1H NMR(200MHz，CDCl3，7.24)δ0.04，0.05(2 s，6H，Si(CH3)2)，0.86(s，9H，SiC(CH3)2)，1.26(d，3H，CH3)，1.63-1.8;1.98-2.14(m，2H，CH2)，3.12(dd，1H，H-6，J6，1′＝7.46Hz)，3.45(m，1H，H-4，J＝2.19，9.45，11.5Hz)，3.63，3.82(m的中心，2H，CH2O)，4.01(dd，1H，H-5，J5，6＝2.59Hz，J4，5＝9.45Hz)，4.03-4.13(AB，2H，SCH2，J＝13.26Hz)，4.155(m，1H，H-1′)，4.59-4.84(m，2H，OCH2，烯丙基)，5.18-5.46(m，2H，＝CH2烯丙基)，5.83-6.03(m，1H，CH＝，烯丙基)，7.19-7.38(m，5H，苯基). C.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-3-苄硫基-4-〔2″-(N-苄基-N-甲基)氨基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在氩气氛下，将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-3-苄硫基-4-〔2″-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.5g，0.97mmol)在无水CH2Cl2(15ml)中的溶液冷却至-78℃，依次用二异丙基乙胺(0.185ml，1.06mmol)和(CF3SO2)2O(0.18ml，1.06mmol)处理。在-78℃下1小时后，加入N-苄基-N-甲基胺(0.75ml，5.8mmol)，并将混合物在-78℃下搅拌1小时，在0℃下搅拌5小时，然后在5℃下放置16小时。将反应混合物用EtOAc(200ml)稀释，用冷水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，蒸发溶剂，得到糖浆状物，在用CH2Cl2填充的硅胶(4.5×13cm)上层析。用CH2Cl2和EtOAc的混合物(7∶3，梯度)洗脱标题化合物，得到糖浆状物(0.4g，66.7%)。
1H NMR(200MHz，CDCl37.24)δ0.036，0.045(2 s，6H，Si(CH3)2)，0.86(s，9H，SiC(CH3)3)，1.07(d，3H，CH3，J＝6.16Hz)，2.26(s，3H，NCH3)，3.18(m，1H，H-4，J＝1.94，9.27，11.37Hz)，3.44-3.56(AB，2H，NCH2，JAB＝13.15Hz)，3.94(dd，1H，H-5，J5，6＝2.47Hz，J4，5＝9.32Hz)，4.0-4.1(AB，2H，SCH2，JAB＝13.21Hz)，4.14(m，1H，H-1′)，4.7-4.8(m，2H，OCH2，烯丙基)，5.19-5.48(m 2H，＝CH2，烯丙基)，5.85-6.04(m，1H，CH＝，烯丙基)，7.19-7.78(m，10H，苯基). D.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-苄硫基-4-〔2″-(N-苄基-N-甲基)氨基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在氩气氛下，将(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-苄硫基-4-〔2″-(N-苄基-N-甲基)氨基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.4g，0.65mmol)在无水四氢呋喃(8ml)中的冷(0℃)溶液依次用HOAc(0.22ml，3.89mmol)和1M氟化四丁铵四氢呋喃溶液(1.95ml，1.95mmol)处理。将混合物在0-5℃下搅拌168小时，然后在0℃下用1M NaHCO3溶液(3.9ml，3.9mmol)中和。将混合物用EtOAc(3×80ml)提取，合并有机提取液，依次用冷的1M NaHCO3、水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，蒸发溶剂，得到胶状物，在用CH2Cl2填充的硅胶(3.2×12cm)上层析。先用CH2Cl2和EtOAc的混合物(100∶0→0∶100，梯度)洗脱，最后用EtOAc和丙酮的混合物(8∶2，梯度)洗脱标题化合物，得到泡沫体(0.093g，28.3%)。
1H NMR(200MHz，CDCl37.24)δ1.13(d，3H，CH3，J＝6.28Hz)，1.94-2.39(m，2H，CH2N)，2.34(s，3H，NCH3)，2.9(dd，1H，H-6，J6，1′＝7.77Hz)，3.23(m，1H，H-4)，3.44，3.52(AB，2H，NCH2，JAB＝13.1Hz)，3.77(dd，1H，H-5，J4，5＝9.56Hz，J5，6＝2.57Hz)，3.88(m，1H，H-1′)，3.98-4.09(AB，2H，SCH2，JAB＝13.59Hz)，4.59-4.86(m，2H，OCH2，烯丙基)，5.19-5.45(m，2H，＝CH2，烯丙基)，5.84-6.03(m，1H，CH＝，烯丙基)，7.24-7.32(m，10H，苯基). E.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-苄硫基-4-〔2″-(N-苄基-N-甲基)氨基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在氩气氛下，向(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-苄硫基-4-〔2″-(N-苄基-N-甲基)氨基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.093g，0.18mmol)在CH2Cl2(5ml)中的冷(0℃)溶液中加入Pd〔Ph3P〕4(0.026g，0.023mmol)，然后加入0.5M2-乙基己酸盐的乙酸乙酯溶液(0.37ml，0.18mmol)。将混合物在0℃下搅拌50分钟，用乙醚(50ml)稀释，用0.1M pH7.0磷酸盐缓冲液(3×10ml)提取。合并水提取液，通过μ-Bondapak C18反相硅胶(3.2×7cm)。用水和CH3CN的混合物(7∶3，梯度)洗脱标题化合物，得到蓬松固体(0.067g，78.2%)。
纯度99.9%，HPLC，UV检测设置在λmax304nm，μ-Bondapak C18(4mm×30cm)，pH6.8磷酸盐缓冲液，流速1ml/分钟，保留时间7.22分钟。
UVλmax304nm. IR(液体石蜡)νmax1750cm-1β-内酰胺的C＝O 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.12(d，3H，CH3，J＝6.35Hz)，1.38，1.94(中心 m，2H，CH2)，2.38(s，3H，NCH3)，2.47(中心 m，2H，CH2CN)，3.04(m，重叠，1H，H-6)，3.05(m，重叠，1H，H-4)，3.72(紧凑的AB，2H，NCH2)，4.05(dd，1H，H-5)，3.96，4.09(AB，2H，SCH2，JAB＝13.8Hz)，4.11(m，1H，H-1′)，7.35-7.54(m，10H，苯基). 实施例154 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(3-N-甲基氨基丙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.5-N-烯丙氧羰基-N-甲基氨基戊酸
将1-甲基-2-哌啶酮(13.0g，0.115mmol)和100ml 6N盐酸的混合物加热回流8小时。蒸发溶剂至干，并将残留的如M.Maeda等人在Chem.Pharm.Bull.，32，4157(1984)中所述的氨基酸用冷水(0-5℃，100ml)稀释。用固体碳酸钠将pH值调至8.5，在保持pH值在8-8.5的同时，滴加氯甲酸烯丙酯(12.2ml，0.115mmol)。在0℃下30分钟和22℃下30分钟后，用乙醚洗涤反应混合物，用浓盐酸将水相的pH值调至3。水溶液用乙醚(3×200ml)提取，合并有机液，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到22.9g(93%)油状标题化合物。
IR(NaCl，压片)νmax1740，1710和1680cm-1(sh); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.5-1.7(m，4H，CH2-3和4)，2.35-2.45(m，2H，CH2-2)，2.90(s，3H，NCH3)，3.25-3.35(m，2H，CH2N)，4.55-4.6(m，2H，烯丙基的CH2)，5.15-5.35和5.85-6.05ppm(2m，2H和1H，烯丙基的CH). B.5-N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基戊酰氯
在22℃下，将5-N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基戊酸(35.26g，0.164mol)在无水二氯甲烷(175ml)中的溶液用草酰氯(15.7ml，0.180mol)滴加处理。10分钟后，加入4滴N，N-二甲基甲酰胺，并将反应混合物搅拌2小时，同时气体的放出缓慢停止。减压下蒸发溶剂和过量的试剂，残留的酰氯直接用于下一步反应。
IR(NaCl，压片)νmax1800(酰氯的C＝O)，1740(sh)，1705和1670cm-1(sh); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.5-1.8(m，4H，CH2-3和4)，2.90(s，3H，NCH3)，2.9-3.0(m，2H，CH2-2)，3.29(t，2H，CH2N)，4.55-4.6(m，2H，烯丙基的CH2)，5.15-5.35和5.8-6.0ppm(2m，2H和1H，烯丙基的CH). C.2-吡啶甲基-5-(N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)硫醇-戊酸酯
在0℃和氮气氛下，将2-吡啶甲硫醇(20.5g，0.164mol)在无水二氯甲烷(350ml)中的溶液先用吡啶(16.0ml，0.197mol)处理，接着用10分钟时间用5-N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基戊酰氯(46.0g，0.164mol)在二氯甲烷(75ml)中的溶液滴加处理。在0-5℃下1.5小时后，将反应混合物用饱和碳酸氢钠和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压下蒸发溶剂，得到油状物，用甲苯和乙酸乙酯的混合物(1∶1)为洗脱剂通过硅胶垫(7.5×12cm)过滤。蒸发UV活性级分，得到48.4g(92%)的透明油状标题化合物。
IR(NaCl，压片)νmax1700和1690(sh)cm-1; 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.5-1.7(m，4H，CH2-3和4)，2.61(t，J＝7.0Hz，2H，CH2-2)，2.87(s，3H，NCH3)，3.26(t，J＝6.6Hz，2H，CH2-5)，4.24(s，2H，CH2Pyr)，4.55-4.6(m，2H，烯丙基的CH2)，5.15-5.3和5.9-6.05(2 m，2H和1H，烯丙基的H)，7.1-7.2(m，1H，吡啶的H-5)，7.33(d，J＝7.8Hz，1H，吡啶的H-3)，7.62(m，1H，吡啶的H-4)和8.5-8.55ppm(m，1H，吡啶的H-6). D.2-吡啶甲基-5-(N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)硫醇戊酸酯的叔丁基二甲基硅基烯醇醚
将2-吡啶甲基-5-(N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)硫醇戊酸酯(51.3g，0.159mol)在无水二氯甲烷(225ml)中的溶液冷却至-10℃，先用三乙胺(44ml，0.315mol)处理，接着在40分钟内用三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯(56ml，0.243mol)滴加处理。温热至22℃后，将溶液搅拌3小时。然后用己烷(1l)稀释反应混合物，用冷水(3×300ml)洗涤。合并水洗液，用己烷(300ml)提取，合并有机提取液，用盐水洗涤后干燥(MgSO4)。用活性炭处理，然后减压下蒸发溶剂，得到暗色油状的甲硅烷基烯醇醚粗品，将其直接用于下一步反应中。1H-NMR表明，该产物为E和Z异构体的1∶1混合物。
IR(NaCl，压片)νmax1705cm-1氨甲酸酯的C＝O 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ2.83和2.85(2s，NCH3)，3.96和4.03(2s，CH2Pyr)，4.85(t，J＝5Hz，CH＝CSO)和5.0ppm(宽 t，CH＝CSO). E.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1R)-1-(2-吡啶基)甲硫基羰基-4-(N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)丁基〕氮杂环丁烷-2-酮
在22℃下，向新熔融的氯化锌(35.0g，0.256mol)在无水二氯甲烷(400ml)中的悬浮液中加入固状4R-乙酰氧基-3S-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮(36.5g，0.127mol)，然后加入甲硅烷基烯醇醚粗品(0.159mol)在无水二氯甲烷(50ml)中的溶液。将混合物在22℃下搅拌18小时。然后用水、饱和氯化铵、饱和碳酸氢钠和盐水洗涤混合物，干燥(MgSO4)。减压下蒸发溶剂，得到油状物，在硅胶(15×12cm)上层析。用50-100%乙酸乙酯甲苯溶液梯度洗脱，得到34.16g(49%)油状标题化合物。1H-NMR表明，该产物为β和α-异构体的84∶16混合物。
IR(NaCl，压片)νmax1765(β-内酰胺的C＝O)，1705(sh)和1685cm-1(氨甲酸酯和硫酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3，主要异构体，β)δ0.04(s，6H，SiCH3)，0.85(s，9H，Si-t-Bu)，0.97(d，J＝6.33Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.8(m，4H，丁基的CH2-2和3)，2.83(s，3H，NCH3)，2.83(m与NCH3重叠，1H，丁基的H-1)，3.03(宽 t，1H，H-3)，3.1-3.4(m，2H，CH2N)，3.79(dd，JH4，H3＝1.96Hz，JH4，H1＝7.16Hz，1H，H-4)，4.1-4.25(m，1H，CH3CHO)，4.26(s，2H，CH2Pyr)，4.55-4.6(m，2H，烯丙基的CH2)，5.15-5.35(m，2H，烯丙基的CH)，5.85-6.1(m，2H，NH和烯丙基的CH)，7.15-7.20(m，1H，吡啶的H-5)，7.32(d，J＝7.78Hz，1H，吡啶的H-3)，7.55-7.65(m，1H，吡啶的H-4)和8.5-8.55ppm(m，1H，吡啶的H-6). F.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1R)-1-羧基-4-(N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)丁基〕氮杂环丁烷-2-酮的咪唑酰胺
在22℃和氮气氛下，将(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1R)-1-羧基-4-(N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)丁基〕氮杂环丁烷-2-酮(13.56g，31.6mmol)在无水乙腈(300ml)中的溶液用1，1-羰基二咪唑(5.64g，34.8mmol)处理。3小时后，减压下蒸发溶剂，咪唑酰胺粗品直接用于下一步反应中。
IR(NaCl，压片)νmax1760，1740和1700cm-1. G.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1R)-1-羧基-4-(N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)丁基〕氮杂环丁烷-2-酮
在0-5℃下，将(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1R)-1-(2-吡啶基)甲硫基羰基-4-(N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)丁基〕氮杂环丁烷-2-酮(32.16g，58.5mmol)在无水四氢呋喃(250ml)中的溶液先用30%过氧化氢(20ml，0.23mol)滴加处理(加入时间5分钟)，然后用64ml(64.0mmol)的1N NaOH水溶液滴加处理(加入时间20分钟)。将反应混合物在22℃下搅拌1小时。然后加入己烷(500ml)，并再将混合物搅拌10分钟。收集形成的水相，有机相用100ml 0.1N氢氧化钠溶液提取。合并水提取液，冷却至0-5℃，用浓盐酸酸化至pH2，用乙酸乙酯(2×350ml)提取。合并有机提取液，用1M亚硫酸氢钠和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压下蒸发溶剂，得到13.56g(52%)泡沫状标题酸粗品。1H-NMR表明，该产物为β和α-异构体的8∶2混合物。
IR(NaCl，压片)νmax1740(β-内酰胺的C＝O)和1700(宽，氨甲酸酯和酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.05和0.06(2s，6H，SiCH3)，0.86(s，9H，Si-t-Bu)，1.15(d，J＝6.30Hz，3H，CH3CHO)，1.4-1.8(m，4H，丙基的CH2-2和3)，2.6-2.7(m，1H，丁基的H-1)，2.89(s，3H，NCH3)，3.12(宽 t，1H，H-3)，3.2-3.5(m，2H，CH2N)，3.86(dd，JH4，H3＝1.84Hz，JH4，H1＝6.38Hz，1H，H-4)，4.19(dq，JH，CH3＝6.30，JH，H3＝3.8Hz，1H，CH3CHO)，4.55-4.6(m，2H，烯丙基的CH2)，5.15-5.35和5.8-6.05(2m，2H和1H，烯丙基的CH)和6.53ppm(宽 s，1H，NH). H.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-｛(1R)-1-〔(3-N-烯丙氧羰基-N-甲基氨基)丙基〕-3-烯丙氧羰基-2-氧代丙基｝氮杂环丁烷-2-酮
将咪唑粗品(31.6mmol)在无水乙腈(50ml)中的溶液加到丙二酸单烯丙酯镁盐(16.0g，51.5mmol)在无水苯(300ml)中的混合物中，并将所得混合物在65℃下保持16小时。反应混合物冷却后，用乙酸乙酯(500ml)稀释，用冷的1N盐酸水溶液、饱和碳酸氢钠和盐水洗涤。干燥(MgSO4)后，减压下蒸发有机相，残留油状物直接用于下一步反应。将一小部分在硅胶上层析(洗脱剂为甲苯-乙酸乙酯9∶1→1∶1)，得到油状标题化合物。1H-NMR表明，该油状物为酮和烯醇形式的1∶1混合物。
IR(NaCl，压片)νmax1760(β-内酰胺的C＝O)和1705cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.05和0.06(2s，SiCH3)，0.86(s，Si-t-Bu)，1.09和1.16(2d，J＝6.31Hz，J＝6.29Hz，CH3CHO)，1.3-1.8(m，丁基的CH2-1和2)，2.1(m，H-氧代丙基酮形式的H-1)，2.88(s，NCH3)，2.8-3.1(m，H-3)，3.2-3.3(m，CH2N)，3.55(s，氧代丙基酮形式的CH2-3)，3.82(2 dd 重叠，H-4)，4.1(m，1H，CH3CHO)，4.57和4.63(2m，烯丙基的CH2)，5.08(s，氧代丙基烯醇式的CH-3)，5.15-5.4(m，烯丙基的CH)和5.8-6.1ppm(m，烯丙基的CH和NH). I.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-｛(1R)-1-〔(3-N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)丙基〕-3-烯丙氧基羰基-3-重氮基-2-氧代丙基｝氮杂环丁烷-2-酮
将(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-｛(1R)-1-〔(3-N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)丙基〕-3-烯丙氧基羰基-2-氧代丙基｝氮杂环丁烷-2-酮(得自上步的粗品，31.6mmol)在乙腈(100ml)中的溶液冷却至0-5℃，用对甲苯磺酰基叠氮(6.45g，32.7mmol)在乙腈(35ml)中的溶液处理。然后用5分钟时间滴加N，N-二异丙基乙胺(4.6ml，33.0mmol)，并将所得混合物在22℃搅拌45分钟。减压下蒸发溶剂，残留物用乙醚和己烷的混合物(1∶1，100ml)研制。滤集结晶状对甲苯磺酰胺，用乙醚和己烷的1∶1混合物洗涤。减压下蒸发滤液和洗液，得到重氮基氮杂环丁烷粗品，将其直接用于下一步反应。将一小部分在硅胶上纯化(洗脱剂、甲苯-乙酸乙酯1∶1)，得到油状标题化合物。
IR(NaCl，压片)νmax2140(N2)，1760(β-内酰胺的C＝O)，1710和1650cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.05和0.06(2s，6H，SiCH3)，0.86(s，9H，Si-t-Bu)，1.15(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，4H，丙基的CH2-1和2)，2.87(s，3H，NCH3)，3.03(m，1H，H-3)，3.23(宽 t，J＝6.7Hz，CH2N)，3.84(dd，JH4，H3＝2.09Hz，JH4，H1＝5.51Hz，1H，H-4)，4.0-4.15(m，1H，氧代丙基的H-1)，4.15-4.25(m，1H，CH3CHO)，4.5-4.6和4.7-4.8(2m，2 x 2H，烯丙基的CH2)，5.1-5.3(m，4H，烯丙基的CH)和5.8-6.1ppm(m，3H，烯丙基的CH和NH). J.(3S，4R)-4-｛(1R)-1-〔(3-N-烯丙氧羰基-N-甲基氨基)丙基〕-3-烯丙氧基羰基-3-重氮基-2-氧代丙基｝-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮
将(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-｛(1R)-1-〔(3-N-烯丙氧羰基-N-甲基氨基)丙基〕-3-烯丙氧基羰基-3-重氮基-2-氧代丙基｝-氮杂环丁烷-2-酮(31.6mmol，得自上步的粗品)在乙醇(175ml)中的溶液冷却至0-5℃，用1N HCl水溶液(100ml)处理。在5℃下18小时后，用固体碳酸氢钠将pH值调至6，减压下蒸掉乙醇。残留物用乙酸乙酯(300ml)稀释，有机相用0.2M pH7.0磷酸盐缓冲液和盐水洗涤。干燥(MgSO4)后，减压下蒸发溶剂，残留物在硅胶(9×11cm)上层析。用甲苯和乙酸乙酯的混合物(1∶1)洗脱，得到5.92g(从酸开始5步的收率为43%)的油状标题化合物。
IR(NaCl，压片)νmax3450 and 3280(宽 OH和NH)，2140(N2)，1755(β-内酰胺的C＝O)，1700(宽)和1645cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.29(d，J＝6.33Hz，1H，CH3HO)，1.4-1.8(m，4H，丙基的CH2-1和2)，2.88(s，3H，NCH3)，2.9(宽，1H，H-3)，3.1-3.4(m，2H，CH2N)，3.80(dd，JH4，H3＝1.98Hz，JH4，H1＝6.95Hz，1H，H-4)，3.9-4.0(m，1H，氧代丙基的H-1)，4.1(m，1H，CH3CHO)，4.55-4.6和4.7-4.75(2m，2 x 2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.45和5.9-6.1(2m，4H和2H，烯丙基的CH)和6.6ppm(宽 s，NH). K.(2R，4R，5R，6S)-4-〔(3″-N-烯丙氧羰基-N-甲基氨基)丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯
将(3S，4R)-4-｛(1R)-1-〔(3-N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)丙基〕-3-烯丙氧基羰基-3-重氮基-2-氧代丙基｝-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮(2.00g，4.58mmol)在无水苯(80ml)中的溶液在辛酸铑二聚体(0.050g)存在下加热回流30分钟，减压下蒸发溶剂，将标题双环状产物直接用于下一步反应中。
IR(NaCl，压片)νmax3450(OH)，1762(β-内酰胺的C＝O)，1645(sh)和1690cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.43(宽 d，J＝6.1Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.0(m，4H，丙基的CH2-1和2)，2.9(m，1H，丙基的H-4)，2.92(s，3H，NCH3)，3.1-3.4(m，3H，H-6和CH2N)，4.1-4.3(m，1H，CH3CHO)，4.3 宽 dd，1H，H-5)，4.56和4.66(2m，2 x 2H，烯丙基的CH2)，5.15-5.4和5.8-6.15ppm(2m，4H和2H，烯丙基的CH). L.(4R，5S，6S)-4-〔(3″-N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)丙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在0-5℃和氮气氛下，用2分钟时间，向步骤K中制得的双环酮粗品(4.58mmol)在无水乙腈(40ml)中的溶液中同时加入氯磷酸二苯基酯(1.04ml，5.02mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.88ml，5.06mmol)。加入少量4-N，N-二甲基氨基吡啶，将混合物搅拌45分钟。然后再依次加入另外的N，N-二异丙基乙胺(0.80ml，4.60mmol)和β-巯基丙腈(0.40g，4.60mmol)在乙腈(2ml)中的溶液，将所得混合物搅拌1小时。用乙酸乙酯(300ml)稀释反应混合物，用冷水、饱和碳酸氢钠和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压下蒸发溶剂，得到油状物，在硅胶(5×10cm)上层析。用乙酸乙酯/甲苯(1∶1→EtOAc)梯度洗脱，得到1.45g(67%)油状标题化合物。
IR(NaCl，压片)νmax3450(OH)，2250(CN)，1775(β-内酰胺的C＝O)和1700cm-1(酯和氨甲酸酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.44(宽 d，J＝6.0 Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.0(m，4H，丙基的CH2-1和2)，2.67(宽 t，2H，SCH2CH2CN)，2.94(s，3H，NCH3)，2.9-3.5(m，4H，H-6，H-4和CH2N)，4.06(m，1H，CH3CHO)，4.28(dd，JH5，H6＝2.78Hz，JH5，H4＝9.79Hz，1H，H-5)，4.57和4.76(2m，2 x 2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.8-6.1ppm(2m，4H和2H，烯丙基的CH). M.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(3″-N-甲基氨基丙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在22℃和氮气氛下，将(4R，5S，6S)-4-〔(3″-N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)丙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.760g，1.59mmol)在无水二氯甲烷(25ml)中的溶液用N-甲基苯胺(1.0ml，9.23mmol)处理，然后用四(三苯膦)钯〔O〕(0.060g)处理。3小时后，用水(2×25ml)和0.05M pH6.0磷酸盐缓冲液(35ml)提取反应混合物。合并水提取液，用0-10%乙腈水溶液为梯度洗脱剂在反相硅胶(3×13cm)上层析。冷冻干燥第一个级分，得到白色非晶形固状的标题化合物(0.156g，27%)，〔α〕22D+57.9°(c1.0，H2O)。
HPLC纯度99.7%，μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，洗脱剂5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸盐缓冲液，流速0.7ml/分钟，UV检测器302nm，保留时间6.37分钟。
UV(水pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax300nm(9，050); IR(KBr)νmax2250(CN)，1755(β-内酰胺的C＝O)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.0(m，4H，丙基的CH2-1和2)，2.72(s，3H，CH3N)，2.75-2.9(m，2H，SCH2CH2CN)，2.9-3.25(m，2H，CH2N)，3.40(dd，JH6，H5＝2.61Hz，JH6，H1＝6.53Hz，1H，H-6)，3.42(m与H-6重叠，1H，H-4)和4.2-4.35ppm(m，2H，H-5和CH3CHO重叠). 实施例155 用适当的中间体和巯基化合物重复前文和实施例的一般步骤，由此制得下式化合物或其盐






实施例156 用适当的中间体和巯基化合物，重复前文和实施例的一般步骤，由此制得下式化合物或其盐






实施例157 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(2″S)-(2″-吡咯烷基)甲基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐
A.(S)-1-烯丙氧羰基-2-(羟甲基)吡咯烷
在0-5℃下，用45分钟时间，用氯甲酸烯丙酯(1.2当量，0.06mol，6.6ml)在丙酮(60ml)中的溶液滴加处理(S)-2-(羟甲基)吡咯烷(5.05g，0.05mol)在冷的1.0N氢氧化钠溶液(1当量，50ml)中的溶液。15分钟后，蒸发丙酮，残留物用乙酸乙酯(2×75ml)提取。合并有机相，用水、饱和碳酸氢钠和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压下蒸发溶剂，用Kugelrohr装置蒸馏(0.1mmHg，80-100℃)，得到8.5g(92%)粉红色油状的标题氨甲酸酯 IR(NaCl)νmax3425(OH)，1690cm-1(氨甲酸酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.5-2.1(m，4H，CH2-3和CH2-4)，3.3-3.6(2 x m，2H，CH2-OH)，3.6-3.7(m，2H，N-CH2)，3.9-4.1(m，1H，CH-2)，4.5-4.6(m，2H，烯丙基的CH2)，5.15-5.35和5.8-6.0ppm(2m，2H和1H，烯丙基的CH). B.(S)-1-烯丙氧基羰基-2-甲酰基-吡咯烷
在氩气氛下，将草酰氯(4ml，44mmol)在无水二氯甲烷(96ml)中的溶液冷却至-60℃，用二甲基亚砜(6.8ml，88mmol)在二氯甲烷(16ml)中的无水溶液滴加处理(大约5分钟)。将反应混合物搅拌2分钟，用6分钟时间滴加(S)-1-烯丙氧基羰基-2-(羟甲基)-吡咯烷(7.4g，40mmol)在无水二氯甲烷(40ml)中的溶液，然后再搅拌15分钟。加入三乙胺(28ml，200mmol)，将反应混合物搅拌5分钟，然后温热至室温(大约60分钟)。加入冷水(200ml)，用乙醚(2×200ml)提取反应混合物。合并有机层，用稀的1N HCl(200ml)、水、饱和碳酸氢钠和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压下蒸发溶剂，得到6.2g(85%)油状标题醛 IR(NaCl，压片)νmax1735(甲酰基的C＝O)和1700cm-1(氨甲酸酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.8-2.3(m，4H，CH2-3和CH2-4)，3.4-3.7(m，2H，CH2-N)，4.1-4.4(m，1H，H-2)，4.5-4.7(m，2H，烯丙基的CH2)，5.1-5.4和5.8-6.1(2m，2H和1H，烯丙基的CH)，9.51和9.57ppm(2d，1H，CHO，J＝2.4Hz和J＝1.65Hz). C.3-〔(2′S)-2′-(1′-烯丙氧基羰基吡咯烷基)〕丙烯酸乙酯
在氩气氛下，将(S)-1-烯丙氧基羰基-2-甲酰基吡咯烷(6.2g，33.84mmol)在无水甲醇(30ml)中的溶液冷却至0-5℃，然后用(乙酯基亚甲基)三苯基正膦(1.2当量，14.2g，40.6mmol)分批处理。将反应混合物在0℃搅拌2小时，在25℃下搅拌2小时，然后蒸发甲醇。残留物用无水乙醚(100ml)稀释，滤出固体，用乙醚洗涤，将滤液蒸发至干。通过闪式层析(硅胶230-400目，6.5×11cm，甲苯-EtOAc100∶0→80∶20梯度洗脱)纯化残留物，得到7.83g(91.4%)油状标题烯丙酯 [α]24D＝-38.6°(C1.1，CHCl3); IR(NaCl，压片)νmax1700-1720(宽，氨甲酸酯和酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.27(t，J＝7.17Hz，3H，酯的CH3)，1.6-2.4(m，4H，CH2-3和CH2-4)，3.4-3.7(m，2H，CH2N)，4.17(q，J＝7.06Hz，2H，酯的CH2)，4.5-4.6(m，3H，烯丙基的CH2和CH-2)，5.1-7.2ppm(一组 m，5H，烯丙基的CH和丙烯酸酯的CH). D.3-〔(2″S)-2′-(1′-烯丙氧基羰基吡咯烷基)〕丙酸甲酯
在氩气氛下，将3-〔(2′S)-2′-(1′-烯丙氧基羰基吡咯烷基)〕烯丙酸乙酯(7.7g，30.4mmol)和镁屑(7.4g，304mmol)在无水甲醇(250ml)中的混合物搅拌4小时。放热反应发生并且内温升高，直至甲醇回流。将反应混合物冷却至室温，小心地加入1N HCl，直到固体物完全溶解，残留物用乙醚提取，然后用水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压下蒸发溶剂，得到6.8g(92.7%)透明油状的标题酯，其纯度适用于下一步反应。将其中一部分用Kugelrohr装置蒸馏(50μm，100℃) [α]24D＝-47.1°(C＝0.94，CHCl3); IR(NaCl，压片)νmax1735(酯的C＝O)和1700cm-1(氨甲酸酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.5-2.4(m，8H，吡咯烷的CH2-3′和CH2-4′和-CH2CH2CO2CH3)，3.3-3.6(m，2H，CH2-N)，3.66(s，3H，酯的CH3)，3.9-4.0(m，1H，吡咯烷的CH-2)，4.5-4.6(m，2H，烯丙基的CH2)，5.15-5.35和5.8-6.0ppm(2m，2H和1H，烯丙基的CH). E.3-〔(2′S)-2′-(1′-烯丙氧基羰基吡咯烷基)〕丙酸
在室温下，将3-〔(2′S)-2′-(1′-烯丙氧基羰基吡咯烷基)〕丙酸甲酯(6.5g，26.9mmol)在甲醇(27ml)中的溶液用3N氢氧化钠溶液(1.3当量，11.7ml)滴加处理。45分钟后，减压下蒸发掉大部分甲醇，残留物用乙醚(25ml)洗涤。用1N HCl溶液将水相酸化至pH1.8，然后用乙醚(2×25ml)提取。合并有机相，用盐水洗涤后干燥(MgSO4)。减压下蒸发溶剂，得到5.55g(90.8%)透明油状的标题酸 [α]24D＝-36.5°(Cl，CHCl3); IR(NaCl，压片)νmax1650-1740cm-1(宽，酸和氨甲酸酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.6-2.1和2.35-2.45(2m，8H，吡咯烷的CH2-3′和CH2-4′和-CH2-CH2CO2H)，3.35-3.5(m，2H，CH2-N)，3.9-4.0(m，1H，吡咯烷的CH-2′)，4.55-4.6(m，2H，烯丙基的CH2)，5.17-5.35和5.84-6.04(2m，2H和1H，烯丙基的CH). F.3-〔(2′S)-2′-(1′-烯丙氧基羰基吡咯烷基)〕丙酰氯
将3-〔(2′S)-2′-(1′-烯丙氧基羰基吡咯烷基)〕丙酸(5.5g，24.42mmol)在无水二氯甲烷(13ml)中的溶液用草酰氯(2.4ml，2.7mmol)滴加处理。加入一滴N，N-二甲基甲酰胺，将所得混合物在22℃下搅拌18小时。减压下蒸发溶剂，得到橙色油状的酰氯粗品，将其直接用于下一步反应中 IR(NaCl，压片)νmax1800(酰氯的C＝O)和1695cm-1(氨甲酸酯的C＝O). G.3-〔(2″S)-2″-(1″-烯丙氧基羰基吡咯烷基)〕硫羟丙酸2′-吡咯甲基酯
将2-吡啶甲硫醇(2.9g，23.2mmol)在无水二氯甲烷(25ml)中的溶液冷却至0-5℃，在氩气氛下用吡啶(2.4ml，29.3mmol)处理，接着滴加3-〔(2″S)-2′-(1′-烯丙氧基羰基吡咯烷基)〕丙酰氯粗品(大约24.42mmol)在无水二氯甲烷(5ml)中的溶液。2小时后，用乙醚(100ml)稀释反应混合物，用冷水(2×50ml)、饱和碳酸氢钠(50ml)和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压下蒸发溶剂，得到油状物，在硅胶(230-400目，4×11cm)上层析。用甲苯/乙酸乙酯(100∶0→70∶30)梯度洗脱，得到7.36g(94%)黄色油状的标题硫酯 IR(NaCl，压片)νmax1695cm-1(宽，C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.6-2.1(m，6H，吡咯烷的CH2-3″和CH2-4″和CH2-3)，2.5-2.7(m，2H，CH2-2)，3.3-3.5(m，2H，CH2-N)，3.8-4.0(m，1H，吡咯烷的CH-2″)，4.24(s，2H，S-CH2)，4.5-4.6(m，2H，烯丙基的CH2)，5.15-5.35和5.8-6.1(2m，2H和1H，烯丙基的CH)，7.12-7.19(m，1H，吡啶的H-5)，7.33(d，J＝7.81Hz，1H，吡啶的H-3)，7.6-7.7(m，1H，吡啶的H-4)和8.52ppm(宽 d，J＝4.4Hz，吡啶的H-6). H.3-〔(2″S)-2″-(1″-烯丙氧基羰基吡咯烷基)〕硫羟丙酸2′-吡啶甲基酯叔丁基二甲基硅基烯醇醚
将3-〔(2″S)-2″-(1″-烯丙氧基羰基吡咯烷基)〕硫羟丙酸2′-吡啶甲基酯(5.06g，22.27mmol)在无水二氯甲烷(30ml)中的溶液冷却至-10℃，在氩气氛下用三乙胺(7.8ml，55.7mmol)处理，接着在30分钟内用三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯(10.2ml，44.54mmol)滴加处理。然后将暗色溶液在22℃下搅拌3小时。然后用己烷(100ml)稀释反应混合物，用冷水(3×100ml)和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压下蒸发溶剂，得到暗色油状的标题物质粗品，将其直接用于下一步中 IR(NaCl，压片)νmax1680-1700(宽，氨甲酸酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ3.95(宽 s，SCH2)和4.8和4.95ppm(2m，CH＝CSO). I.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1R)-1-(2-吡啶基)甲硫基羰基-2-(N-烯丙氧基羰基-(2″S)-2″-吡咯烷基)乙基〕氮杂环丁烷-2-酮
在5℃和氩气氛下，向新熔融过的氯化锌(2.44g，17.9mmol)在无水二氯甲烷(45ml)中的悬浮液中加入4R-乙酰氧基-3S-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮固体(14.9mmol，4.3g)，接着加入在步骤H中制得的甲硅烷基烯醇醚粗品(22mmol)在无水二氯甲烷(10ml)中的溶液。将所得混合物缓慢温热至22℃，搅拌18小时。然后用冷的饱和氯化铵、冷水、饱和碳酸氢钠和盐水洗涤反应混合物。干燥(MgSO4)并减压蒸发溶剂后，得到了红色油状残留物，在硅胶(5.2×11cm)上用乙酸乙酯/甲苯(0∶100→100∶0)梯度洗脱层析。得到透明的红色油状的标题化合物(2g，24%)。1H-NMR表明，该产物为纯的β-异构体 IR(NaCl，压片)1765(内酰胺的C＝O)和1680-1700cm-1(宽，氨甲酸酯的C＝O和硫酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.04(s，6H，SiCH3)，0.85(s，9H，Si-t-Bu)，0.94(d，J＝5.8Hz，CH3CHO)，1.6-2.2和2.6-2.8(宽 m，6H，B-CH2和吡咯烷基的CH2-3′和CH2-4′)，2.95(m，1H，H-3)，3.2-3.5(m，2H，吡咯烷基的N-CH2-5′)，3.8(m，2H，H-4和吡咯烷基的CH-2″)，4-4.2(m，1H，CH3CHO)，4.6(m，2H，5-CH2)，5.1-5.4(m，2H，烯丙基的CH2)，5.8-6.0(m，1H，烯丙基的CH)，7.1-7.4(m，3H，吡啶的H-3和H-5以及烯丙基的CH)，7.6(m，1H，吡啶的H-4)和8.54(m，1H，吡啶的H-6). J.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1R)-1-羧基-2-(N-烯丙氧基羰基-(2″S)-2″-吡咯烷基)乙基〕氮杂环丁烷-2-酮
将(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1R)-1-(2-吡啶基)甲硫基羰基-2-(N-烯丙氧基羰基-(2″S)-2″-吡咯烷基)乙基〕氮杂环丁烷-2-酮(2g，3.56mmol)在四氢呋喃(12ml)中的溶液冷却至5℃，用30%H2O2(1.2ml)缓慢处理。然后滴加1.0M氢氧化钠水溶液，再将反应混合物搅拌30分钟。用己烷类稀释反应混合物，收集水相。用冷水再次提取有机相，合并水提取液，用己烷类洗涤，冷却至0-5℃，用1.0N盐酸酸化至pH2。用乙酸乙酯(2×)提取该溶液，合并有机提取液，用1M亚硫酸氢钠水溶液和盐水洗涤。干燥(MgSO4)后，减压下蒸发溶剂，得到1.388g酸粗品，为半固体状残留物。用乙酸乙酯和己烷类的混合物结晶，得到白色固状的标题酸m.p.＝153-154℃; [α]24D＝-2°(C＝0.2，CHCl3); IR(KBr)νmax1740(β-内酰胺的C＝O)，1705(氨甲酸酯的C＝O)和1665cm-1羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.05和0.06(2s，3H，SiCH3)，0.86(s，9H，Si-t-Bu)，1.23(d，J＝6.26Hz，3H，CH3CHO)1.6-2.2(m，5H，吡咯烷基的CH2-3′和CH2-4′以及β-CH2的一个H)，2.65(m，1H，β-CH2的一个H)，2.80(m，1H，H-3)，3.5(m，2H，吡咯烷基的N-CH2)，3.9(m，1H，H-4)，4.15(m，2H，吡咯烷基的CH和CH3CHO)，4.6(m，2H，烯丙基的CH2)，5.3(m，2H，烯丙基的CH)，5.9-6.0(m，1H，烯丙基的CH)，6.1(宽 s，1H，NH)，分析计算值C22H38N2O6SiC 58.12;H 8.42;N 6.16实测值C 57.52;H 8.33;N 6.04. K.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-｛(1R)-1-〔(N-烯丙氧基羰基-(2″R)-2″-吡咯烷基)甲基〕-3-烯丙氧基羰基-2-氧代丙基｝氮杂环丁烷-2-酮
在22℃和氩气氛下，将(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1R)-1-羧基-2-(N-烯丙氧基羰基-(2″S)-2″-吡咯烷基)乙基〕氮杂环丁烷-2-酮(1.1g，2.42mmol)在无水乙腈(21ml)中的溶液用1，1-羰基二咪唑(0.450g，2.75mmol)处理，并将所得混合物搅拌2小时。减压下蒸发溶剂，得到N-酰基咪唑粗品，然后将该粗品溶于无水乙腈(3ml)中，并将之加到丙二酸单烯丙基酯镁盐(1.3g，4mmol)在无水苯(20ml)中的混合物中，并将所得混合物在65℃下加热18小时。用乙酸乙酯稀释混合物，用0.1N HCl、冷水、饱和碳酸氢钠和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到油状标题物质粗品，放置固化，将其直接用于下一步中。1H NMR表明，该产物为酮和烯醇形式的1∶1混合物 IR(NaCl 压片)νmax1760(β-内酰胺的C＝O)和1700cm-1(宽，氨甲酸烯丙酯和烯丙酯) 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.09和1.17ppm，2d，J＝6.22Hz和6.30Hz，CH3CHO). L.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-｛(1R)-1-〔(N-烯丙氧基羰基-(2″R)-2″-吡咯烷基)甲基〕-3-烯丙氧基羰基-3-重氮基-2-氧代丙基｝氮杂环丁烷-2-酮
在0-5℃下，将(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-｛(1R)-1-〔(N-烯丙氧基羰基-(2″R)-2″-吡咯烷基)甲基〕-3-烯丙氧基羰基-2-氧代丙基｝氮杂环丁烷-2-酮(2.3mmol)在无水乙腈(5ml)中的溶液用对甲苯磺酰基叠氮(0.54g，2.76mmol)在乙腈(7ml)中的溶液处理。加入三乙胺(0.38ml，2.76mmol)，并将溶液在22℃搅拌2小时。然后减压下蒸发溶剂，残留物用乙醚和己烷的1∶1冷(0℃)混合物(30ml)研制。收集晶状对甲苯磺酰胺，用乙醚和己烷类的混合物洗涤。合并滤液和洗液，减压下蒸发，得到1.57g油状标题物质粗品，将其直接用于下一步中。TLC(甲苯∶乙酸乙酯，1∶1)(硅胶)RF＝0.49。
M.(3S，4R)-4-｛(1R)-1-〔(N-烯丙氧基羰基-(2″S)-2″-吡咯烷基)甲基〕-3-烯丙氧基羰基-3-重氮基-2-氧代丙基｝-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮
将(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-｛(1R)-1-〔(N-烯丙氧基羰基-(2″S)-2″-吡咯烷基)甲基〕-3-烯丙氧基羰基-3-重氮基-2-氧代丙基｝氮杂环丁烷-2-酮粗品(大约2.3mmol)在乙醇(22ml)中的溶液冷却至0-5℃，用1N HCl水溶液(12ml)处理。在5℃下18小时后，用碳酸氢钠固体将pH值调至8，残留物用乙酸乙酯稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，残留物在硅胶(2.2×11cm)上层析，先用乙酸乙酯∶甲苯(10∶90)→乙酸乙酯梯度洗脱，然后用CH3CN洗脱，得到0.75g(74%，从酸开始的三步收率)米色泡沫状的标题物质 IR(NaCl，压片)νmax2140(＝N2)，1755(β-内酰胺的C＝O)，1710和1690cm-1烯丙酯的C＝O; 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.32(d，J＝6.27Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.1(m，6H，吡咯烷基的CH2CH2CH2N和吡咯烷基的CH2)，2.77(宽 s，1H，OH)，3.01(d，1H，J＝7.44Hz，H-3)，3.3-3.4(m，2H，吡咯烷基的CH2-N)，3.8-4.2(m，4H，吡咯烷基的N-CH，CH3CHO，H-4，氧代丙基的H-1)，4.4-4.8(2m，4H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.8-6.0(2m，4H和2H，烯丙基的CH)和6.5ppm(m，1H，NH). N.(2R，4R，5R，6S)-4-〔(N-烯丙氧基羰基-(2″S)-2″-吡咯烷基)甲基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯
在氩气氛下，将(3S，4R)-4-｛(1R)-1-｛(N-烯丙氧基羰基-(2″S)-2″-吡咯烷基)甲基〕-3-烯丙氧基羰基-3-重氮基-2-氧代丙基｝-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕氮杂环丁烷-2-酮(0.421g，1.0mmol)在无水苯(18ml)中的溶液用辛酸铑二聚体(15mg)处理，并加热回流20分钟。减压下蒸发溶剂，得到油状的双环酮，将其直接用于下一步中 IR(NaCl，压片)νmax1765(β-内酰胺的C＝O)，1740(Sh)和1670cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.47(d，3H，J＝6.05Hz，CH3CHO)，1.5-2.1(m，6H，吡咯烷基的CH2CH2CH2N和吡咯烷基的CH2)，2.5-2.7(m，1H，H4)，3.2-3.7(m，吡咯烷基的CH2-N和H-6)，3.9-4.3(m，2H，吡咯烷基的N-CH，CH3CHO)，4.41(dd，JH5，H6＝2.84，JH5，H4＝9.0Hz，1H，H-5)，4.5-4.7(m，4H，烯丙基的CH2)，5.2-5.4和5.9-6.0(2m，4H和2H，烯丙基的CH). O.(4R，5S，6S)-4-〔(N-烯丙氧基羰基-(2″S)-2″-吡咯烷基)甲基〕-3-〔N-烯丙氧基羰基-(2-氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在0-5℃和氩气氛下，用1分钟时间，向(2R，4R，5R，6S)-4-〔(N-烯丙氧基羰基-(2″S)-2″-吡咯烷基)甲基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(0.785mmol，由0.330g，0.785mmol重氮基前体环化制得)在无水乙腈(10ml)中的溶液中同时滴加氯磷酸二苯基酯(0.18ml，0.863mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.15ml，0.863mmol)。加入少量4-N，N-二甲基氨基吡啶，将混合物搅拌1.5小时。然后加入三甲基硅基氯(0.110ml，0.863mmol)，再加入N，N-二异丙基乙胺(0.150ml，0.863mmol)，并在5℃下将反应混合物搅拌2小时。然后加入另外的N，N-二异丙基乙胺(0.275ml，1.57mmol)，接着加入2-巯基乙基氨甲酸烯丙酯(0.25g，1.5mmol)在乙腈(1ml)中的溶液，并将所得混合物在0-5℃下搅拌24小时。用乙酸乙酯(50ml)稀释反应混合物，用冷的0.01N HCl水溶液(50ml)、稀的亚硫酸氢钠溶液、水、饱和碳酸氢钠和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。减压下蒸发溶剂，得到油状物，在硅胶(2.5×10cm)上层析。用乙酸乙酯/甲苯(0∶100→乙酸乙酯)梯度洗脱，得到0.10g(22%)油状标题卡巴潘尼姆 IR(NaCl，压片)νmax1775(β-内酰胺的C＝O)和1700cm-1(宽，烯丙酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.44(d，3H，CH3CHO)，1.5-2.1(m，6H，吡咯烷基的CH2CH2CH2N和吡咯烷基的4-CH2)，2.7-3.0(2m，2H，S-CH2)，3.1-3.6(m，5H CH2NH2，CH2N(吡咯烷基)和H-4)，3.9-4.3(2m，2H，CH3CHO和吡咯烷基的CHN)，4.35(dd，JH5，H6＝3.10Hz，JH5，H6＝10.37Hz，1H，H-5)，4.5-4.9(2m，6H，烯丙基的CH2)，5-5.5和5.8-6.1ppm(2m，9H，烯丙基的CH). P.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(2″S)-(2″-吡咯烷基)甲基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸盐
在22℃和氩气氛下，将(4R，5S，6S)-4-〔(N-烯丙氧基羰基-(2″S)-2″-吡咯烷基)甲基〕-3-〔N-烯丙氧基羰基-(2-氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.1g，0.177mmol)在无水二氯甲烷(10ml)中的溶液用氢化三正丁基锡(0.206g，0.708mmol)在二氯甲烷(1ml)中的溶液、乙酸(0.40ml，0.708mmol)和四(三苯膦)钯〔O〕(20mg)处理。20分钟后，用水(2×10ml)提取反应混合物，合并水提取液，用二氯甲烷(20ml)洗涤。减压下浓缩后，水提取物在反相硅胶(μ-Bondapak C18，2×10cm)上用0.01N乙酸为洗脱剂进行层析。冷冻干燥纯级分，得到55mg(79%)灰白色非晶形固状的标题化合物 HPLC纯度95.0%，μ-Bondapak C18，3.9mm×30mm，5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速1ml/分钟，UV检测器300nm，保留时间8.48分钟; UV(H2O，pH7.4磷酸盐缓冲液)λmax294nm(6953); IR(KBr)νmax1760(β-内酰胺的C＝O)和1600cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(400MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.73-1.82和2.36-2.43(2x m，2H，β-CH2)，2.00-2.20(m，4H，吡咯烷基的CH2-3′和CH2-4′)，2.90-2.97和3.08-3.15(2m，3H，S-CH2和H-6)，3.26-3.39(m，4H，吡咯烷基的CH2-NH2和CH2-N)，3.50-3.53(m，1H，H-5)，3.58-3.65(m，1H，吡咯烷基的N-CH)和4.24-4.32ppm(m，2H，CH3CHO和H-5). 实施例158-318 按照上文和实施例的一般方法，用本发明所例举的适当选择的起始原料和试剂，制备下面给定通式的4-取代烷基卡巴潘尼姆化合物，其1H-NMR数据如各表中所示。
























































实施例319 用适当的中间体和巯基化合物，重复上文和实施例中的一般方法步骤，由此制得了具有下式结构的化合物或其盐






实施例320 用适当的中间体和巯基化合物，重复上文和实施例中的一般方法步骤，由此制得了具有下式的化合物或其盐








权利要求
1、下式所示的化合物或其无毒的可药用的盐
其中
R1是氢，C1-2烷基，-CH2OH，-CH2NH2，
A为未取代的或羟基取代的直链或支链C1-10亚烷基或间插有选自氧、硫和氮的杂原子的直链或支链C1-10亚烷基；
R2是羟基，卤素，C1-4烷氧基，氰基，叠氮基，季铵基，-NR5R6，
氮杂环丁烷基或选自通过其碳原子来连接的杂芳基和杂脂环基的5或6员杂环基；
B是一个直链或支链的C1-6亚烷基，或者当R3通过它的碳原子连接到硫原子上时它就代表一个直接的化学键；
R3是一个有机基团的残基；
R4是氢，一个可除去的羧基保护基或是一个生理上可水解的酯基；
R5和R6各自独立地是氢，C1-6烷基，C1-4烷氧基，羟乙基，叠氮基乙基，氨基乙基，并且当R5是氢或C1-4烷基时，R6是羟基，C1-4烷氧基，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，取代的C1-4烷基(其中所说的烷基取代基选自羟基，叠氮基，氨基，胍基，氰基，羧基，亚胺甲基和苯基)或一种氨基酸或肽的酰基残基；或者R5，R6和它们所连接的氮原子一起是一个未取代的或取代的杂环基，它具有1至2个环，每个环上可以有多至4个杂原子，这些杂原子可独立地选自氧、氮和硫，其中所说的取代基选自C1-4烷基，C1-4烷氧基，三氟甲基，羟基，卤素，氨基，氰基，羧基，亚胺甲基，脲基，氨基甲酰基，C1-4烷氨基和氨基(C1-4)烷基；
W是一个直接的键，氧，硫或NR10；
Y是氧或NR10；
Z是氢，羟基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，-NR7R8，氨基(C1-4)烷基，叠氮基(C1-4)烷基或羟基(C1-4)烷基；
R7和R8各自独立地是氢，C1-4烷基，羟基，苄氧基或链烷酰基；
R10是氢，C1-4烷基，C1-4烷基氨基或二(C1-4)烷基氨基。
2、权利要求1的下式化合物或其无毒的可药用的盐
其中
R1是氢，C1-2烷基，-CH2OH，-CH2NH2，
A是未取代的或羟基取代的直链或支链的C1-10亚烷基或者间插有选自氧、硫和氮的杂原子的直链或支链C1-10亚烷基;
R2是羟基，卤素，C1-4烷氧基，氰基，叠氮基，季铵基，-NR5R6，
氮杂环丁烷基或选自通过其碳原子来连接的杂芳基和杂脂环基的5或6员杂环基;
B是一个直链或支链的C1-6亚烷基，或者当R3通过它的碳原子连接到硫原子上时它就代表一个直接的化学键;
R3为氢，C3-6环烷基或取代的C3-6环烷基，C5-6环烯基或取代的C5-6环烯基，苯基或取代的苯基，羟基，C1-4烷氧基，C1-4烷硫基，苯硫基或取代的苯硫基，卤素，氰基，硝基，-NR7R8，
，或是一个选自杂芳环或杂环脂环的，未取代或取代的杂环基团
它有1至2个环，在每个环中有4至7个环成员，并在每个环中可含有多至4个杂原子，这些杂原子独立地选自氧，氮和硫;其中所说的杂环基团可通过一个连接在所说杂环基团的碳原子上的硫原子而被连接;其中所说的C3-6环烷基，C5-6环烯基，苯基和杂环取代基可以选自由下列基团构成的一组基团一个或两个C1-4烷基，C1-4烷氧基，三氟甲基，羟基，卤素，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，氰基，羧基，亚胺甲基，脲基，氨基甲酰基，氨基(C1-4)烷基，C1-4烷基氨基(C1-4)烷基，二(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基，C1-4烷氧羰基，C1-4烷氧羰基(C1-4)烷基，氨基(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基和C1-4烷基羰氧基，并且所说的杂环基还可以被
基所取代;
R4是氢，一个可除去的羧基保护基或是一个生理上可水解的酯基;
R5和R6各自独立地是氢，C1-6烷基，C1-4烷氧基，羟乙基，叠氮基乙基，氨基乙基，并且当R5是氢或C1-4烷基时，R6是羟基，C1-4烷氧基，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，取代的C1-4烷基(其中所说的烷基取代基选自羟基，叠氮基，氨基，胍基，氰基，羧基，亚胺甲基和苯基)或一种氨基酸或肽的酰基残基，或者R5，R6和它们所连接的氮原子一起是未取代的或取代的氮杂环丁烷基，或是一个未取代的或取代的5或6员杂环基，每个环上可以有多至4个杂原子，这些杂原子可独立地选自氧、氮和硫，其中所说的取代基选自C1-4烷基，C1-4烷氧基，三氟甲基，羟基，卤素，氨基，氰基，羧基，亚胺甲基，脲基，氨基甲酰基，C1-4烷氨基和氨基(C1-4)烷基;
n为一个0-2的整数(包括0和2);
W是一个直接的键，氧，硫或NR10;
Y是氧或NR10;
Z是氢，羟基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，-NR7R8，氨基(C1-4)烷基，叠氮基(C1-4)烷基或羟基(C1-4)烷基;
R7和R8各自独立地是氢，C1-4烷基，羟基，苄氧基或链烷酰基;
R9是C1-4烷基或C2-4链烯基;
R10是氢，C1-4烷基，C1-4烷基氨基或二(C1-4)烷基氨基。
3、权利要求1的下式化合物或其无毒的可药用的盐
其中
R1是
A是未取代的或羟基取代的直链或支链的C1-10亚烷基或者间插有选自氧、硫和氮的杂原子的直链或支链C1-10亚烷基;
R2是羟基，氟，C1-4烷氧基，氰基，叠氮基，季铵基，-NR5R6，
，氮杂环丁烷基或选自通过其碳原子来连接的杂芳基和杂脂环基的5或6员杂环基;
B是一个直链或支链的C1-6亚烷基，或者当R3通过它的碳原子连接到硫原子上时它就代表一个直接的化学键;
R3为氢，C3-6环烷基或取代的C3-6环烷基，C5-6环烯基或取代的C5-6环烯基，苯基或取代的苯基，羟基，C1-4烷氧基，C1-4烷硫基，苯硫基或取代的苯硫基，卤素，氰基，-NR7R8，
，或是一个选自杂芳环或杂环脂环的，未取代或取代的杂环基团
它有1至2个环，在每个环中有5至6个环成员，并在每个环中可含有多至4个杂原子，这些杂原子独立地选自氧，氮和硫;其中所说的杂环基团可通过一个连接在所说杂环基团的碳原子上的硫原子而被连接;其中所说的C3-6环烷基，C5-6环烯基，苯基和杂环取代基选自由下列基团构成的一组基团一个或两个C1-4烷基，C1-4烷氧基，三氟甲基，羟基，卤素，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，氰基，羧基，亚胺甲基，脲基，氨基甲酰基，氨基(C1-4)烷基，C1-4烷基氨基(C1-4)烷基，二(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基，C1-4烷氧羰基，C1-4烷氧羰基(C1-4)烷基，氨基(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基和C1-4烷基羰氧基，并且所说的杂环基还可以被
基所取代;
R4是氢，一个可除去的羧基保护基或是一个生理上可水解的酯基;
R5和R6各自独立地是氢和C1-6烷基，并且当R5是氢或C1-4烷基时，R6是羟基，C1-4烷氧基，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，取代的C1-4烷基(其中所说的烷基取代基选自羟基，叠氮基，氨基，胍基，氰基，羧基，亚胺甲基和苯基)或一种氨基酸或肽的酰基残基;或者R5，R6和它们所连接的氮原子一起是一个未取代的或取代的氮杂环丁烷基，或是一个未取代的或取代的5或6员杂环基，每个环上可以有多至2个杂原子，这些杂原子可独立地选自氧、氮和硫，其中所说的取代基选自C1-4烷基，羟基，氨基，氰基，亚胺甲基，C1-4烷氨基和氨基(C1-4)烷基;
n为0-2的整数(包括0和2);
W是一个直接的键，氧，硫或NR10;
Y是氧或NR10;
Z是氢，羟基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，-NR7R8，氨基(C1-4)烷基，叠氮基(C1-4)烷基或羟基(C1-4)烷基;
R7和R8各自独立地是氢，C1-4烷基，羟基，苄氧基或链烷酰基;
R9是C1-4烷基或C2-4链烯基;
R10是氢，C1-4烷基，C1-4烷基氨基或二(C1-4)烷基氨基。
4、权利要求1的下式化合物或其无毒的可药用的盐
其中
R1为
A是直链或支链的C1-10亚烷基;
R2是羟基，氰基，叠氮基，-NR5R6或
B是一个直链或支链的C1-6亚烷基，或者当R3通过它的碳原子连接到硫原子上时它就代表一个直接的化学键;
R3为氢，C3-6环烷基或取代的C3-6环烷基，苯基或取代的苯基，羟基，C1-4烷氧基，C1-4烷硫基，苯硫基或取代的苯硫基，卤素，氰基，-NR7R8，
，或是一个选自杂芳环或杂环脂环的，未取代或取代的杂环基团，它有1至2个环，在每个环中有5至6个环成员，并在每个环中可含有多至4个杂原子，这些杂原子独立地选自氧，氮和硫;其中所说的杂环基团可通过一个连接在所说杂环基团的碳原子上的硫原子而被连接;其中所说的C3-6环烷基，苯基和杂环取代基可以选自由下列基团构成的一组基团一个或两个C1-4烷基，C1-4烷氧基，三氟甲基，羟基，卤素，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，氰基，羧基，亚胺甲基，脲基，氨基甲酰基，氨基(C1-4)烷基，C1-4烷基氨基(C1-4)烷基，二(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基，C1-4烷氧羰基，C1-4烷氧羰基(C1-4)烷基，氨基(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基和C1-4烷基羰氧基，并且所说的杂环基还可以被
基所取代;
R4是氢，一个可除去的羧基保护基或是一个生理上可水解的酯基;
R5和R6各自独立地是氢和C1-6烷基，并且当R5是氢或C1-4烷基时，R6是取代的C1-4烷基(其中所说的烷基取代基选自羟基，叠氮基，氨基，胍基，氰基，羧基，亚胺甲基和苯基)或一种氨基酸或肽的酰基残基;或者R5，R6和它们所连接的氮原子一起是一个未取代的或取代的氮杂环丁烷基，或是一个未取代的或取代的5或6员杂环基，每个环上可以有多至4个杂原子，这些杂原子可独立地选自氧、氮和硫，其中所说的杂环可以通过与所说杂环的碳原子连接的硫原子连接，其中所说的取代基选自C1-4烷基，氨基，亚胺甲基，C1-4烷氨基和氨基(C1-4)烷基;
n为0-2的整数(包括0和2);
W是一个直接的键，氧，硫或NR10;
Y是氧或NR10;
Z是氢，羟基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，-NR7R8，氨基(C1-4)烷基，叠氮基(C1-4)烷基或羟基(C1-4)烷基;
R7和R8各自独立地是氢，C1-4烷基，羟基，苄氧基或链烷酰基;
R9为C1-4烷基或C2-4链烯基;及
R10是氢，C1-4烷基，C1-4烷基氨基或二(C1-4)烷基氨基。
5、权利要求1的下式化合物或其无毒的可药用的盐
其中
A是直链或支链的C1-10亚烷基;
R2是羟基，氰基，叠氮基，-NR5R6或
B是一个直链或支链的C1-6亚烷基，或者当R3通过它的碳原子连接到硫原子上时它就代表一个直接的化学键;
R3为氢，取代的C3-6环烷基，取代的苯基，羟基，C1-4烷氧基，C1-4烷硫基，取代的苯硫基，卤素，氰基，-NR7R8，
，或是一个选自杂芳环或杂环脂环的，未取代或取代的杂环基团，在每个环中有5或6个环成员，并在每个环中可含有多至4个杂原子，这些杂原子独立地选自氧，氮和硫;其中所说的杂环基团可通过一个连接在所说杂环基团的碳原子上的硫原子而被连接;其中所说的C3-6环烷基，苯基和杂环取代基可以选自由下列基团构成的一组基团一个或两个C1-4烷基，C1-4烷氧基，三氟甲基，羟基，卤素，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，氰基，羧基，亚胺甲基，C1-4烷氧羰基，C1-4烷氧羰基(C1-4)烷基，氨基(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基和C1-4烷基羰氧基，并且所说的杂环基还可以被
基所取代;
R4是氢，一个可除去的羧基保护基或是一个生理上可水解的酯基;
R5和R6各自独立地是氢和C1-6烷基，并且当R5是氢或C1-4烷基时，R6是取代的C1-4烷基(其中所说的烷基取代基选自羟基，叠氮基，氨基，胍基，氰基，羧基，亚胺甲基和苯基)或一种氨基酸或肽的酰基残基;或者R5，R6和它们所连接的氮原子一起是氮杂环丁烷基，吡咯烷基，吡咯啉基，哌啶基，吗啉基，硫代吗啉基，哌嗪基，N-甲基哌嗪基，咪唑基，(这些杂环均以氮接出);
n是0-2的整数(包括0和2);
W是一个直接的键，氧，硫或NR10;
Y是氧或NR10;
Z是氢，羟基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，-NR7R8，氨基(C1-4)烷基，叠氮基(C1-4)烷基或羟基(C1-4)烷基;
R7和R8各自独立地是氢，C1-4烷基，羟基，苄氧基或链烷酰基;
R9是C1-4烷基或C2-4链烯基;及
R10是氢，C1-4烷基，C1-4烷基氨基或二(C1-4)烷基氨基。
6、权利要求1的下式化合物或其无毒的可药用的盐
其中
A是直链或支链的C1-8亚烷基;
R2是-NR5R6或
B是一个直链或支链的C1-4亚烷基，或者当R3通过它的碳原子连接到硫原子上时它就代表一个直接的化学键;
R3是氢，取代的C3-6环烷基，取代的苯基，羟基，C1-4烷氧基，C1-4烷硫基，取代的苯硫基，氟，氰基，-NR7R8，
，或是一个选自杂芳环或杂环脂环的，未取代或取代的杂环基团，在每个环中有5或6个环成员，并在每个环中可含有多至4个杂原子，这些杂原子独立地选自氧，氮和硫;其中所说的C3-6环烷基，苯基和杂环取代基选自甲基，甲氧基，三氟甲基，羟基，卤素，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，氰基，羧基，C1-4烷氧羰基，C1-4烷氧羰基(C1-4)烷基，氨基(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基和C1-4烷基羰氧基，并且所说的杂环基还可以被
基所取代;
R4是氢，一个可除去的羧基保护基或是一个生理上可水解的酯基;
R5和R6各自独立地是氢和C1-6烷基，并且当R5是氢或C1-4烷基时，R6是取代的C1-4烷基(其中所说的烷基取代基选自羟基，叠氮基，氨基，胍基，氰基，羧基，亚胺甲基和苯基)或一种氨基酸或肽的酰基残基;或者R5，R6和它们所连接的氮原子一起是氮杂环丁烷基，吡咯烷基，吡咯啉基，哌啶基，吗啉基，硫代吗啉基，哌嗪基，N-甲基哌嗪基，咪唑基，这些杂环均以其氮原子接出;
n是0-2的整数(包括0和2);
W是一个直接的键，氧，硫或NR10;
Y是氧或NR10;
Z是氢，羟基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，-NR7R8，氨基(C1-4)烷基，叠氮基(C1-4)烷基或羟基(C1-4)烷基;
R7和R8各自独立地是氢，C1-4烷基，羟基，苄氧基或链烷酰基;
R9是C1-4烷基或C2-4链烯基;及
R10是氢，C1-4烷基，C1-4烷基氨基或二(C1-4)烷基氨基。
7、权利要求1的化合物，其中R2为氨基。
8、权利要求1的化合物，其中R2为二甲氨基。
9、权利要求1的化合物，其中R2为N-亚胺甲基氨基。
10、权利要求1的化合物，其中R2为胍基。
11、权利要求1的化合物，其中R2为1-吡咯烷基。
12、权利要求1的化合物，其中R2为甲氨基。
13、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
14、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
15、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-甲基吡啶鎓-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
16、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
17、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔4″-(N-亚胺甲基)氨基丁基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
18、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(4″-N，N-二甲基氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
19、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
20、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(2″-N，N-二甲基氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
21、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-〔2″-(N-氰甲基-N-甲基氨基)乙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
22、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
23、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
24、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-亚胺甲基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
25、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-亚胺甲基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
26、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-胍基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
27、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-胍基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
28、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
29、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
30、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
31、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(2″-胍基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
32、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
33、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(3″-羟基丙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
34、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-亚胺甲基)氨基丙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
35、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
36、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
37、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
38、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(1-吡咯烷基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
39、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
40、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
41、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(4″-胍基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
42、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-胍基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
43、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
44、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-4-〔3″-(N-亚胺甲基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
45、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氨甲酰氧基)乙硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
46、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
47、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-4-(4″-N，N-二甲基氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
48、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
49、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(羟基羰基甲基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
50、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-3-｛(4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-羟基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
51、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-｛(4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
52、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-｛(4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
53、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
54、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
55、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
56、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-N-亚胺甲基氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
57、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-羟基乙基)硫基〕-4-(2″-氨基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
58、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(1-N-甲基吡咯烷鎓)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
59、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔2″-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
60、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-(〔2-(1-吡咯烷基)乙基〕硫基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
61、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-N，N-二甲基氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
62、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-3-｛(4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基｝-4-(2″-胍基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
63、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(N，N-二甲基脒基甲基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
64、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(2″-胍基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
65、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(3S)-3-吡咯烷硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
66、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-胍基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
67、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(2″-胍基乙基)-3-〔(2-胍基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
68、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-(β-氯-L-丙氨酰-β-氯-L-丙氨酰基)氨基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
69、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-3-〔(2-氟乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
70、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(4-哌啶基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
71、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(N，N-二甲基脒基甲基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
72、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-3-〔(N，N-二甲基脒基甲基)硫基〕-4-(2″-胍基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
73、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-3-〔(3R)-(吡咯烷-3-基)硫基〕-4-〔2″-N-甲基氨基乙基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
74、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(2″-N-亚胺甲基-N-甲基氨基乙基)-3-｛〔(3R)-(N-亚胺甲基吡咯烷-3-基)〕硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
75、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3-｛〔2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基〕硫基｝-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
76、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-3-｛(4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基吡咯烷基〕硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-N-甲基氨基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
77、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-3-〔(2-氟乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-(2″-N-甲基氨基乙基)-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
78、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(2″S)-(2″-吡咯烷基)甲基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
79、权利要求1的化合物，该化合物为(4R，5S，6S)-4-〔3″-氨基-(2″R或S)-2″-羟基丙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-7-氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其无毒的可药用盐。
80、下式所示的化合物
式中
R11为氢，C1-2烷基，-CH2OH，-CH2O-P2，-CH2NH2，-CH2N-P4，
A为未取代的或羟基取代的直链或支链C1-10亚烷基或间插有选自氧、硫和氮的杂原子的直链或支链C1-10亚烷基;
R12为羟基，卤素，C1-4烷氧基，叠氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或任意保护的氮杂环丁烷基或选自杂芳基和杂脂环基的5或6员杂环基，它们通过它们的碳原子连接;
P1是常规的容易除去的羧基保护基;
P2和P3各自独立地是常规的羟基保护基;
P4是常规的氨基保护基。
81、权利要求80的化合物，其结构如下
式中
R12为
A为直链或支链的C1-10亚烷基;
R12为羟基，氟，C1-4烷氧基，叠氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或任意保护的氮杂环丁烷基或选自杂芳基和杂脂环基的5或6员杂环基，它们通过它们的碳原子连接;
P1是常规的容易除去的羧基保护基;
P2和P3各自独立地是常规的羟基保护基;
P4是常规的氨基保护基。
82、权利要求80的化合物，其结构如下
式中
R11为
A为直链或支链的C1-10亚烷基;
R12为羟基，氟，C1-4烷氧基，叠氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或任意保护的氮杂环丁烷基或选自杂芳基和杂脂环基的5或6员杂环基，它们通过它们的碳原子连接;
P1是常规的容易除去的羧基保护基;
P2和P3各自独立地是常规的羟基保护基;
P4是常规的氨基保护基。
83、权利要求80的化合物，其结构如下
式中A为直链或支链的C1-8亚烷基;
R12为羟基，叠氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或N-P4取代的吡咯烷基;
P1是常规的容易除去的羧基保护基;
P3是常规的羟基保护基;
P4是常规的氨基保护基。
84、权利要求80的化合物，其结构如下
式中A是直链或支链的C1-8亚烷基;
R12是羟基，叠氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或N-P4取代的吡咯烷基;
P1是常规的容易除去的羧基保护基;
P2和P3各自独立地是常规的羟基保护基;
P4是常规的氨基保护基。
85、权利要求80的化合物，其中R12为羟基。
86、权利要求80的化合物，其中R12为叠氮基。
87、权利要求80的化合物，其中R12为叔丁基二甲基硅氧基。
88、权利要求80的化合物，它是(4R，5R，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯。
89、权利要求80的化合物，它是(4R，5R，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(3″-叔丁基二甲基硅氧基丙基)-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯。
90、权利要求80的化合物，它是(4R，5R，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基)-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯。
91、权利要求80的化合物，它是(4R，5R，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯。
92、权利要求80的化合物，它是(4R，5R，6S)-4-(3″-叠氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯。
93、权利要求80的化合物，它是(4R，5R，6S)-4-(4″-叠氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯。
94、权利要求80的化合物，它是(4R，5R，6S)-4-(2″-叠氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯。
95、权利要求80的化合物，它是(4R，5R，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(3″-叠氮基丙基)-3，7-二氧代-1-氮杂双环〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯。
96、下式所示的化合物
式中
R11为氢，C1-2烷基，-CH2OH，-CH2O-P2，-CH2NH2，-CH2N-P4，
A为未取代的或羟基取代的直链或支链C1-10亚烷基或间插有选自氧、硫和氮的杂原子的直链或支链C1-10亚烷基;
R12为羟基，卤素，C1-4烷氧基，叠氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或任意保护的氮杂环丁烷基或选自杂芳基和杂脂环基的5或6员杂环基，它们通过它们的碳原子连接;
R18是氢或P4;
P1是常规的容易除去的羧基保护基;
P2和P3各自独立地是常规的羟基保护基;
P4是常规的氨基保护基。
97、权利要求96的化合物，其结构如下
式中
R11为
A为直链或支链的C1-10亚烷基;
R12为羟基，氟，C1-4烷氧基，叠氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或任意保护的氮杂环丁烷基或选自杂芳基和杂脂环基的5或6员杂环基，它们通过它们的碳原子连接;
R18是氢或P4;
P1是常规的容易除去的羧基保护基;
P2和P3各自独立地是常规的羟基保护基;
P4是常规的氨基保护基。
98、权利要求96的化合物，其结构如下
式中
R11为
A为直链或支链的C1-10亚烷基;
R12为羟基，氟，C1-4烷氧基，叠氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或任意保护的氮杂环丁烷基或选自杂芳基和杂脂环基的5或6员杂环基，它们通过它们的碳原子连接;
R18是氢或P4;
P1是常规的容易除去的羧基保护基;
P2和P3各自独立地是常规的羟基保护基;
P4是常规的氨基保护基。
99、权利要求96的化合物，其结构如下
式中A为直链或支链的C1-8亚烷基;
R12为羟基，叠氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或N-P4取代的吡咯烷基;
R18是氢或P4;
P1是常规的容易除去的羧基保护基;
P3是常规的羟基保护基;
P4是常规的氨基保护基。
100、权利要求96的化合物，其结构如下
式中A是直链或支链的C1-8亚烷基;
R12是羟基，叠氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或N-P4取代的吡咯烷基;
R18是氢或P4;
P1是常规的容易除去的羧基保护基;
P2和P3各自独立地是常规的羟基保护基;
P4是常规的氨基保护基。
101、权利要求96的化合物，其中R12为羟基。
102、权利要求96的化合物，其中R12为叠氮基。
103、权利要求96的化合物，其中R12为叔丁基二甲基硅氧基。
104、权利要求96的化合物，它是(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮。
105、权利要求96的化合物，它是(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-叔丁基二甲基硅氧基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮。
106、权利要求96的化合物，它是(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(4-叔丁基二甲基硅氧基丁基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮。
107、权利要求96的化合物，它是(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叠氮基乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮。
108、权利要求96的化合物，它是(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-叠氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮。
109、权利要求96的化合物，它是(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(4-叠氮基丁基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮。
110、权利要求96的化合物，它是(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叠氮基乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮。
111、权利要求96的化合物，它是(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-叠氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮杂环丁烷-2-酮。
112、下式所示的化合物
式中
R11为氢，C1-2烷基，-CH2OH，-CH2O-P2，-CH2NH2，-CH2N-P4，
A为未取代的或羟基取代的直链或支链C1-10亚烷基或间插有选自氧、硫和氮的杂原子的直链或支链C1-10亚烷基;
R12为羟基，卤素，C1-4烷氧基，叠氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或任意保护的氮杂环丁烷基或选自杂芳基和杂脂环基的5或6员杂环基，它们通过它们的碳原子连接;
R18是氢或P4;
P2和P3各自独立地是常规的羟基保护基;
P4是常规的氨基保护基。
113、权利要求112的化合物，其结构如下
式中
R11为
A为直链或支链的C1-10亚烷基;
R12为羟基，氟，C1-4烷氧基，叠氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或任意保护的氮杂环丁烷基或选自杂芳基和杂脂环基的5或6员杂环基，它们通过它们的碳原子连接;
R18是氢或P4;
P2和P3各自独立地是常规的羟基保护基;
P4是常规的氨基保护基。
114、权利要求112的化合物，其结构如下
式中
R11为
A为直链或支链的C1-10亚烷基;
R12为羟基，氟，C1-4烷氧基，叠氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或任意保护的氮杂环丁烷基或选自杂芳基和杂脂环基的5或6员杂环基，它们通过它们的碳原子连接;
R18是氢或P4;
P2和P3各自独立地是常规的羟基保护基;
P4是常规的氨基保护基。
115、权利要求112的化合物，其结构如下
式中A为直链或支链的C1-8亚烷基;
R12为羟基，叠氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或N-P4取代的吡咯烷基;
R18是氢或P4;
P3是常规的羟基保护基;
P4是常规的氨基保护基。
116、权利要求112的化合物，其结构如下
式中A是直链或支链的C1-8亚烷基;
R12是羟基，叠氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或N-P4取代的吡咯烷基;
R12是氢或P4;
P2和P3各自独立地是常规的羟基保护基;
P4是常规的氨基保护基。
117、权利要求112的化合物，其中R12为羟基。
118、权利要求112的化合物，其中R12为叠氮基。
119、权利要求112的化合物，其中R12为叔丁基二甲基硅氧基。
120、权利要求112的化合物，它是(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-3″-叔丁基二甲基硅氧基丙基〕氮杂环丁烷-2-酮。
121、权利要求112的化合物，它是(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基〕氮杂环丁烷-2-酮。
122、权利要求112的化合物，它是(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-5″-叔丁基二甲基硅氧基戊基〕氮杂环丁烷-2-酮。
123、权利要求112的化合物，它是(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-3″-叠氮基丙基〕氮杂环丁烷-2-酮。
124、权利要求112的化合物，它是(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-4″-叠氮基丁基〕氮杂环丁烷-2-酮。
125、权利要求112的化合物，它是(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-羟基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-5″-叠氮基戊基〕氮杂环丁烷-2-酮。
126、权利要求112的化合物，它是(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-3″-叠氮基丙基〕氮杂环丁烷-2-酮。
127、权利要求112的化合物，它是(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-4″-叠氮基丁基〕氮杂环丁烷-2-酮。
128、下式所示的化合物或其无毒的可药用的盐
式中
R11为氢，C1-2烷基，-CH2OH，-CH2O-P2，-CH2NH2，-CH2N-P4，
A为未取代的或羟基取代的直链或支链C1-10亚烷基或间插有选自氧、硫和氮的杂原子的直链或支链C1-10亚烷基;
B是直链或支链的C1-6亚烷基，或者当R3通过其碳原子连接到硫原子上时它就代表一个直接的化学链;
R3是有机基团的残基;
L2是常规的离去基团;
P1是常规的容易除去的羧基保护基;
P2独立地是常规的羟基保护基;
P4是常规的氨基保护基。
129、权利要求128的下式化合物或其无毒的可药用的盐
式中
R11为氢，C1-2烷基，-CH2OH，-CH2O-P2，-CH2NH2，-CH2N-P4，
A为未取代的或羟基取代的直链或支链C1-10亚烷基或间插有选自氧、硫和氮的杂原子的直链或支链C1-10亚烷基;
B是直链或支链的C1-6亚烷基，或者当R3通过其碳原子连接到硫原子上时它就代表一个直接的化学链;
R3为氢，C3-6环烷基或取代的C3-6环烷基，C5-6环烯基或取代的C5-6环烯基，苯基或取代的苯基，羟基，C1-4烷氧基，C1-4烷硫基，苯硫基或取代的苯硫基，卤素，氰基，硝基，-NR7R8，
，或是一个选自杂芳环或杂环脂环的，未取代或取代的杂环基团
它有1至2个环，在每个环中有4至7个环成员，并在每个环中可含有多至4个杂原子，这些杂原子独立地选自氧，氮和硫;其中所说的杂环基团可通过一个连接在所说杂环基团的碳原子上的硫原子而被连接;其中所说的C3-6环烷基，C5-6环烯基，苯基和杂环取代基可以选自由下列基团构成的一组基团一个或两个C1-4烷基，C1-4烷氧基，三氟甲基，羟基，卤素，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，氰基，羧基，亚胺甲基，脲基，氨基甲酰基，氨基(C1-4)烷基，C1-4烷基氨基(C1-4)烷基，二(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基，C1-4烷氧羰基，C1-4烷氧羰基(C1-4)烷基，氨基(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基和C1-4烷基羰氧基，并且所说的杂环基还可以被
基所取代;
n是0-2的整数，包括0和2;
W是一个直接的键，氧，硫或NR10;
Y是氧或NR10;
Z是氢，羟基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，-NR7R8，氨基(C1-4)烷基，叠氮基(C1-4)烷基或羟基(C1-4)烷基;
R7和R8各自独立地是氢，C1-4烷基，羟基，苄氧基或链烷酰基;
R9是C1-4烷基或C2-4链烯基;
R10是氢，C1-4烷基，C1-4烷基氨基或二(C1-4)烷基氨基;
L2是常规的离去基团;
P1是常规的容易除去的羧基保护基;
P2独立地是常规的羟基保护基;
P4是常规的氨基保护基。
130、权利要求129的化合物或盐，其中A是直链或支链的C1-10亚烷基。
131、权利要求130的化合物或盐，其中R11是
式中P2是常规的羟基保护基;P4是常规的氨基保护基。
132、权利要求130的化合物或盐，其中R11是
式中P2是常规的羟基保护基。
133、权利要求130的化合物或盐，其中R11是叔丁基二甲基硅氧基乙基。
134、权利要求130的化合物或盐，其中P1是烯丙基。
135、权利要求130的化合物或盐，其中L2是-OSO2R14，R14是低级烷基，三氟甲基，苯基或取代的苯基，其中的所述取代基是甲基，异丙基，氯，溴或硝基。
136、权利要求130的化合物或盐，其中L2是三氟甲磺酰基。
137、权利要求130的化合物或盐，其中L2是对硝基苯磺酰基。
138、制备式Ⅰ化合物或其无毒的可药用的盐的方法，
其中
R1是氢，C1-2烷基，-CH2OH，-CH2NH2，
A为未取代的或羟基取代的直链或支链C1-10亚烷基或间插有选自氧、硫和氮的杂原子的直链或支链C1-10亚烷基;
R2是羟基，卤素，C1-4烷氧基，氰基，叠氮基，季铵基，-NR5R6，
氮杂环丁烷基或选自通过其碳原子来连接的杂芳基和杂脂环基的5或6员杂环基;
B是一个直链或支链的C1-6亚烷基，或者当R3通过它的碳原子连接到硫原子上时它就代表一个直接的化学键;
R3是一个有机基团的残基;
R4是氢，一个可除去的羧基保护基或是一个生理上可水解的酯基;
R5和R6各自独立地是氢，C1-6烷基，C1-4烷氧基，羟乙基，叠氮基乙基，氨基乙基，并且当R5是氢或C1-4烷基时，R6是羟基，C1-4烷氧基，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，取代的C1-4烷基(其中所说的烷基取代基选自羟基，叠氮基，氨基，胍基，氰基，羧基，亚胺甲基和苯基)或一种氨基酸或肽的酰基残基;或者R5，R6和它们所连接的氮原子一起是一个未取代的或取代的杂环基，它具有1至2个环，每个环上可以有多至4个杂原子，这些杂原子可独立地选自氧、氮和硫，其中所说的取代基选自C1-4烷基，C1-4烷氧基，三氟甲基，羟基，卤素，氨基，氰基，羧基，亚胺甲基，脲基，氨基甲酰基，C1-4烷氨基和氨基(C1-4)烷基;
W是一个直接的键，氧，硫或NR10;
Y是氧或NR10;
Z是氢，羟基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，-NR7R8，氨基(C1-4)烷基，叠氮基(C1-4)烷基或羟基(C1-4)烷基;
R7和R8各自独立地是氢，C1-4烷基，羟基，苄氧基或链烷酰基;及
R10是氢，C1-4烷基，C1-4烷基氨基或二(C1-4)烷基氨基;
所述方法包括
a)使式Ⅺa化合物与式HS-B-R3化合物(其中B和R3如上所定义)反应，得到式ⅩⅢa化合物
式中R11是氢，C1-2烷基，-CH2OH，-CH2O-P2，-CH2NH2，-CH2N-P4，
A是未取代的或被羟基取代的直链或支链的C1-10亚烷基或间插有选自氧、硫和氮的杂原子的直链或支链的C1-10亚烷基;P1是一个常规的容易除去的羧基保护基;R12是羟基，卤素，C1-4烷氧基，叠氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4，任意保护的氮杂环丁烷基或选自杂环芳基和杂脂环基的5或6员杂环基，它们通过它们的碳原子连接;P2和P3各自独立地是一个常规的羟基保护基;P4是一个常规的氨基保护基;L1是常规的离去基团;
式中R11，R12，R3，A，B和P1各如上所定义;或者
b)使式ⅩⅥ化合物与合适的亲核试剂反应，得到式ⅩⅦa化合物
式中R3，R11，A，B和P1各如上所定义;L2是常规的离去基团;
式中R3，R11，A，B和P1各如上所定义;R13是叠氮基，-NR5R6
氰基，取代的烷氧基或取代的烷硫基，其中R5，R6，Y和Z各如上所定义;或者
c)使任意地含有常规的羟基保护基、氨基保护基或羧基保护基的式ⅩⅧa化合物或其盐与合适的亚胺酰化试剂、酰化试剂或烷基化试剂反应，得到式ⅩⅧb化合物
式中R3，R11和P1各如上所定义;R16是氢或C1-4烷基，
式中R3，R11，P1和R16各如上所定义;R17是C1-4烷基或
，其中Y和Z各如上所定义;以及
d)如果需要，使步骤a)，b)或c)的产物脱保护，成盐，季铵化或酯化，得到式Ⅰ化合物。
139、权利要求138的方法，其中R2是氰基，叠氮基，季铵基，-NR5R6或
140、权利要求138的方法，其中R11是
141、权利要求138，139或140的方法，其中
R3为氢，C3-6环烷基或取代的C3-6环烷基，C5-6环烯基或取代的C5-6环烯基，苯基或取代的苯基，羟基，C1-4烷氧基，C1-4烷硫基，苯硫基或取代的苯硫基，卤素，氰基，硝基，-NR7R8，
或是一个选自杂芳环或杂环脂环的，未取代或取代的杂环基团
它有1至2个环，在每个环中有4至7个环成员，并在每个环中可含有多至4个杂原子，这些杂原子独立地选自氧，氮和硫;其中所说的杂环基团可通过一个连接在所说杂环基团的碳原子上的硫原子而被连接;其中所说的C3-6环烷基，C5-6环烯基，苯基和杂环取代基可以选自由下列基团构成的一组基团一个或两个C1-4烷基，C1-4烷氧基，三氟甲基，羟基，卤素，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，氰基，羧基，亚胺甲基，脲基，氨基甲酰基，氨基(C1-4)烷基，C1-4烷基氨基(C1-4)烷基，二(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基，C1-4烷氧羰基，C1-4烷氧羰基(C1-4)烷基，氨基(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基和C1-4烷基羰氧基，并且所说的杂环基还可以被
基所取代。
142、制备式Ⅱ化合物的方法，
式中
R11是氢，C1-2烷基，-CH2OH，-CH2O-P2，-CH2NH2，-CH2N-P4，
A为未取代的或羟基取代的直链或支链C1-10亚烷基或间插有选自氧、硫和氮的杂原子的直链或支链C1-10亚烷基;
R12为羟基，卤素，C1-4烷氧基，叠氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或任意保护的氮杂环丁烷基或选自杂芳基和杂脂环基的5或6员杂环基，它们通过它们的碳原子连接;
P1是常规的容易除去的羧基保护基;
P2和P3各自独立地是常规的羟基保护基;
P4是常规的氨基保护基;
该方法包括将式Ⅲ化合物环化，
式中R11，R12，A和P1各如上所定义;R18是氢或P4，其中P4是常规的氨基保护基;以及
如果需要，脱去保护基，得到式Ⅱ化合物。
全文摘要
式I所示的化合物或其无毒的可药用的盐是新的抗菌剂，可用于治疗人类和其它动物的感染性疾病。也公开了新的中间体和它们的制备方法。式I中R1，A，R2，B，R3和R4各如说明书中所定义。
文档编号C07F7/18GK1067429SQ92104130
公开日1992年12月30日 申请日期1992年5月30日 优先权日1991年5月31日
发明者A·马泰尔, C·巴尚, M·博纳尔 申请人:布里斯托尔-迈尔斯斯奎布公司

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