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起点商标网 专利名称：带有噁唑啉侧链的紫杉烷及其制备方法
本申请是申请号为99101066.3，申请日为1993年12月23日，发明名称为“带有侧链的紫杉烷类化合物”的发明专利申请的分案申请。
本申请是申请人的共同未决申请07/995,443(1992年12月23日申请)的部分继续申请，该未决申请被本文全部引入作为参考文献。
本发明涉及制备带有侧链的紫杉烷类化合物及其中间体的方法，以及由这些方法制得的新化合物。
紫杉烷类化合物是在药物领域中已发现用途的二萜化合物。例如，已发现紫杉醇，具有下列结构的紫杉烷是有效的抗癌剂 其中ph是苯基，Ac是乙酰基和Bz是苯甲酰基。天然存在的紫杉烷类化合物如紫杉醇可在植物中发现并且已从中分离出来。然而，这些紫杉烷类化合物以相当低的含量存在于植物中，因此，例如就紫杉醇而言，需要大量生长缓慢的紫杉树作为化合物的来源。所以本领域在继续研究制备紫杉烷类化合物如紫杉醇及其类似物的合成包括半合成途径以及制备用于制备这些化合物的中间体的途径。
本发明提供了制备新的带有侧链的紫杉烷类化合物的新的综合方法，该方法包括下列步骤(a)至(e)(a).制备下式I的噁唑啉化合物或其盐 其中R1是R5，R7-O-，R7-S-或(R5)(R6)N-；R2是R7-O-，R7-S-或(R5)(R6)N-；R3和R4分别是R5，R5-O-C-(O)-，或(R5)(R6)N-C(O)-；R5和R6分别是氢，烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基，芳基或杂环基；R7是烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基，芳基或杂环基；(b).将式I噁唑啉或其盐转化为式II噁唑啉或其盐
其中R1、R3和R4如上定义，(c).使式II噁唑啉或其盐与具有直接键连于其C-13的羟基的紫杉烷或其盐在偶合剂存在下进行偶合生成下式III的带有噁唑啉侧链的紫杉烷或其盐 其中R1、R3和R4如上定义，T是紫杉烷部分，优选式IX化合物与紫杉烷部分的C-13直接键连；(d).使式III带有噁唑啉侧链的紫杉烷或其盐与能够打开式III化合物或其盐的噁唑啉环的含水酸反应生成下式X的带有侧链的紫杉烷或其盐
其中R1、R3、R4和T如上定义，所述式X的胺基的酸盐是通过与所述的开环酸反应生成的；(e).使上述式X的带有侧链的紫杉烷或其盐与碱反应生成下式IV的带有侧链的紫杉烷或其盐 其中R1、R3、R4和T如上定义。
另外，本发明提供了每一步骤(a)至(e)的各个方法，这些方法均是新方法，本发明还提供如下所述的新的式I、II、III、IV、IX和X化合物及其盐和水合物。这些化合物的新的前药也包括在本发明之中。
本发明进一步描述如下本文单独或作为其他基团一部分使用的术语“烷基”或“烷”是指选择性取代的直链和支链饱和烃基，优选在直链中具有1-10个碳原子，最优选低级烷基。典型的未取代的基团包括甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、戊基、己基、异己基、庚基、4，4-二甲基戊基、辛基、2，2，4-三甲基戊基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基等。典型的取代基可包括一个或多个下列基团卤、烷氧基、烷硫基、链烯基、炔基、芳基、(例如形成苄基)、环烷基、环烯基、羟基或被保护的羟基、羧基(-COOH)、烷氧羰基、烷基羰氧基、烷基羰基、氨基甲酰基(NH2-CO-)，取代的氨基甲酰基((R5)(R6)N-CO-，其中R5或R6如上所定义，只是至少R5或R6之一不是氢)、氨基(-NH2)、杂环基、一或二烷基氨基或硫羟基(-SH)。
本文所用术语“低级烷”或“低级烷基”是指如上所述的选择性取代的、在直链中具有1-4个碳原子的烷基。
术语“烷氧基”或“烷硫基”分别是指通过氧键(-O-)或硫键(-S-)键连的如上所述的烷基。本文所用的术语“烷氧羰基”是指通过羰基键连的烷氧基。本文所用的术语“烷基羰基”是指通过羰基键连的烷基。本文所用的术语“烷基羰氧基”是指通过羰基键连，接着通过氧键键连的烷基。术语“一烷基氨基”或“二烷基氨基”是指分别被一个或两个如上所述的烷基取代的氨基。
本文单独或作为其他基团一部分使用的术语“链烯基”是指在其链中含有至少一个碳-碳双键且优选在直链中具有2-10个碳原子的选择性取代的直链和支链的烃基。典型的未取代的此类基团包括乙烯基、丙烯基、异丁烯基、丁烯基、戊烯基、己烯基、庚烯基、辛烯基、壬烯基、癸烯基等。典型的取代基可包括一个或多个下列基团卤、烷氧基、烷硫基、烷基、炔基、芳基、环烷基、环烯基、羟基或被保护的羟基、羧基(-COOH)、烷氧羰基、烷基羰氧基、烷基羰基、氨基甲酰基(NH2-CO-)、取代的氨基甲酰基((R5)(R6)N-CO-，其中R5或R6如上定义，只是至少R5或R6之一不是氢)、氨基(-NH2)、杂环基、一或二烷基氨基或硫羟基(-SH)。
本文单独或作为其他基团一部分使用的术语“炔基”是指在其链中含有至少一个碳-碳三键且优选在直链中具有2-10个碳原子的选择取代的直链和支链的烃基。典型的未取代的基团包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基、庚炔基、辛炔基、壬炔基、癸炔基等。典型的取代基可包括一个或多个下列基团卤、烷氧基、烷硫基、烷基、链烯基、芳基、环烷基、环烯基、羟基或被保护的羟基、羧基(-COOH)、烷氧羰基、烷基羰氧基、烷基羰基、氨基甲酰基(NH2-CO-)，取代的氨基甲酰基((R5)(R6)N-CO-，其中R5或R6如上定义，只是至少R5或R6之一不是氢)、氨基(-NH2)、杂环基、一或二烷基氨基或硫羟基(-SH)。
本文单独或作为其他基团一部分使用的术语“环烷基”是指优选含有1-3个环并每个环具有3-7个碳原子的选择性取代的饱和环烃环体系。典型的末取代的此类基团包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环癸基、环十二烷基、金刚烷基。典型的取代基包括一个或多个如上所述的烷基，或一个或多个如上所述的作为烷基取代基的基团。
本文单独或作为其他基团一部分使用的术语“环烯基”是指选择取代的如上所述的环烷基，且还含有至少一个碳-碳双键形成部分不饱和环的基团。
本文单独或作为其他基团一部分使用的术语“芳”或“芳基”是指优选含有1个或2个环和6-12个环碳原子的选择取代的碳环芳香基。典型的未取代的基团包括苯基、联苯基和萘基。典型的取代基包括一个或多个优选三个或较少的硝基、如上所述的烷基或如上所述的作为烷基取代基的基团。
本文单独或作为其他基团一部分使用的术语“杂环基”或“杂环的”是指在至少一个环中具有至少一个杂原子的选择取代的完全饱和或不饱和的芳香或非芳香的环基，优选在每一环中具有5或6个原子的单环或二环基。例如杂环基在其环中具有1个或2个氧原子，1个或2个硫原子和/或1-4个氮原子。各杂环基可通过其环体系的任一碳原子或杂原子键连。典型的杂环基包括下列基团噻吩基、呋喃基、吡咯基、吡啶基、咪唑基、吡咯烷基、哌啶基、吖庚因基、吲哚基、异吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、苯并噁二唑基和苯并呋咱基。典型的取代基包括一个或多个如上所述的烷基，或者一个或多个如上所述的作为烷基取代基的基团。杂环基还包括较小的杂环基如环氧化物和氮丙啶类。
本文单独或作为其他基团一部分使用的术语“卤素”、“卤代”或“卤”是指氯、溴、氟和碘。
本文所用的术语“紫杉烷部分”是指含有下列核心结构的部分 其核心结构可被取代并且在其环系中可含有乙烯不饱和度。
本文所用的术语“紫杉烷”是指含有上述紫杉烷部分的化合物。
本文所用的术语“羟(或羟基)保护基”是指能够保护游离羟基的任何基团，在其用于反应之后，可在不破坏分子的其余部分的情况下将其除去。这些基团及其合成可在″Protective Groups inOrganic Synthesis″T.W.Greene，John Wiley和Sons，1991或Fieser & Fieser中找到。典型的羟基保护基包括甲氧基甲基、1-乙氧基乙基、1-甲氧基-1-甲基乙基、苄氧基甲基、(β-三甲基甲硅烷基乙氧基)甲基、四氢吡喃基、2，2，2-三氯乙氧基羰基、叔丁基(二苯基)甲硅烷基、三烷基甲硅烷基、三氯甲氧羰基、2，2，2-三氯乙氧基甲基。
术语“盐”包括无机酸和/或有机酸和碱形成的酸盐和/或碱盐。典型的酸盐包括无机酸如HCl、H2SO4或HNO3，或羧酸如三氟乙酸或乙酸形成的盐。典型的碱盐包括与胺如三乙胺、二异丙基乙胺，或吡啶或氨基酸如精氨酸，或胍形成的盐。羟基盐如金属(如碱金属或碱土金属)醇盐也被本文称为“盐”，例如使羟基与金属取代剂反应可生成金属醇盐。
除非另有说明，本发明中所使用的或用本发明的方法制备的有关化合物包括其盐和水合物。
式I的噁唑啉化合物及其盐的制备本发明提供了制备式I的噁唑啉化合物及其盐的新方法，具体是如下所述的脱水、置换和交换方法。
本发明还提供了新的式I的噁唑啉化合物及其盐，包括其所有立体异构体，或者基本上无其他立体异构体、或者与选择的其他立体异构体或所有其他立体异构体的混合物，其条件是当R1是苯基和R3或R4之一是氢时，(i)当R3或R4的另一个是十五烷基，苄基或甲氧羰基时R2不是甲氧基，或者(ii)当R3或R4的另一个是乙氧羰基时R2不是乙氧基；当R1是甲基和R3或R4之一是氢，而R3或R4的另一个是2-甲基丙基时，R2不是8-苯基氧基；当R1是乙酰基甲基和R3和R4是氢时，R2不是乙氧基或NH2。
优选下述的式Ia噁唑啉及其盐，特别是具有下面称为“优选化合物”中选出的那些取代基的化合物。
脱水方法式I噁唑啉化合物或其盐可用脱水方法制备，该方法包括使下式V化合物或其盐 其中R1、R2、R3和R4如上定义，与能够使式V化合物或其盐脱水的酸反应生成式I化合物或其盐的步骤。
起始原料式V化合物及其盐可按例如下列文献中所述的方法制备美国专利申请号07/975,453，Patel等人，1992年11月12日申请；Ojima等人，J.Org.Chem.，56，1681-1683(1991)；Georg等人，Tetrahedron Lett.，32，3151-3154(1991)；Denis等人，J.Org.Chem.，51，46-50(1986)；Corey等人，Tetrahedron Lett.，32，2857-2860(1991)；Denis等人，J.Org.Chem.，57，4320-4323(1992)；Ojima等人，Tetrahedron，48，6985-7012(1992)；Commercon等人，Tett.Lett.，33，5185-5188(1992)；Denis等人，J.Org.Chem.，56(24)，6939-6942(1991)(例如接着酯化并用酸处理)；和Denis等人，J.Org.Chem.，55，1957-1959(1990)，所有上述文献在此引入作为参考文献。
能够脱水的任何酸均可用于本发明的脱水方法，典型的酸包括磺酸如吡啶鎓对甲苯磺酸、对甲苯磺酸、樟脑磺酸和甲磺酸，羧酸如三氟乙酸或乙酸，或无机酸如HCl、H2SO4或HNO3。酸式V化合物的摩尔比优选为大约1∶100至大约1∶1。
反应优选在大约0℃至大约200℃的温度下，在大约1atm至大约5atm下进行，反应也优选在惰性气体如氩气氛中进行。
优选使用的溶剂是惰性有机溶剂如甲苯、四氢呋喃、乙腈、苯或二甲苯。优选使用的溶剂量应使起始原料式V化合物占溶剂和式V化合物总重量的大约2.5％。
式I化合物的噁唑啉环编号如下 就4和5位的碳原子而言，式I化合物的噁唑啉化合物可存在如下四种立体异构体Ia、Ib、Ic和Id
就相应位置的碳原子而言，式V化合物也可存在四种立体异构体。这些立体异构体为下列化合物Va、Vb、Vc和Vd
例如，所需立体异构体的式I化合物可按本发明的脱水方法使用合适立体异构体的起始原料式V化合物来制备，因此，使用化合物Va将得到化合物Ia，使用化合物Vb将得到化合物Ib，使用化合物Vc将得到化合物Ic，使用化合物Vd将得到化合物Id。尽管也可使用立体异构体混合物，但在本发明的脱水方法中优选使用起始原料化合物V的单一立体异构体。特别优选使用化合物Va制备化合物Ia，尤其是制备具有下面称为“优选化合物”中列出的那些取代基的化合物。
置换方法式I噁唑啉化合物或其盐也可用置换方法制备，该方法包括使式V化合物或其盐在碱存在下与能够活化式V化合物或其盐的羟基的活化剂反应从而发生分子内置换，生成式I化合物或其盐的步骤，其条件是当R1是苯基，R3或R4之一是氢时，(i)当R3或R4的另一个是乙氧羰基时R2不是乙氧基，或者(ii)当R3或R4的另一个是苄基时R2不是甲氧基。
能够活化式V化合物的羟基并发生分子内置换的任何化合物均可用作本发明置换方法中的活化剂。典型的活化剂包括磺酰卤如烷基磺酰卤(如甲磺酰氯)，或芳基磺酰卤(如苯磺酰氯或对甲苯磺酰氯)，磷酰氯(POCl3)，五氯化磷(PCl5)，或亚硫酰氯(SOCl2)。活化剂式V化合物的摩尔比优选为大约1∶1至大约2∶1。
活化式V化合物或其盐的羟基可制得新的式VI中间体化合物或其盐 其中R1、R2、R3和R4如上定义。L是离去基团如烷基磺酰氧基(如甲磺酰氧基)，芳基磺酰氧基(如苯磺酰氧基或对甲苯磺酰氧基)，氯或磷酰基(PO2-或PO-)。本发明提供了上述新的式VI化合物及其盐，包括其所有立体异构体，或者基本上无其他立体异构体，或者是与选择的其他立体异构体或所有其他立体异构体的混合物，其条件是当R1是苯基、R2是甲氧基、R3或R4之一是氢而另一个是苄基时，L不是氯。
可使用的碱包括有机碱如胺(例如吡啶、三乙胺、二异丙基乙胺、二甲基吡啶或1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯)或六甲基二硅氮烷化锂，或无机碱如碱金属碳酸盐(如碳酸钾)，碱式V化合物的摩尔比优选大于约2∶1。
反应优选在大约-20℃至大约100℃，特别是0℃的温度下，并在大约1atm压力下进行。反应优选在惰性气体如氩气中进行。
优选使用的溶剂是惰性有机溶剂如氯仿、二氯甲烷、甲苯、四氢呋喃、乙腈，最优选的溶剂是在本发明的方法中既能用作溶剂又能用作碱的碱性有机溶剂如吡啶、三乙胺或二甲基吡啶。优选使用的溶剂的量应使起始原料式V化合物占溶剂和式V化合物总重量的大约10％。
例如，所需的式I化合物的立体异构体可按本发明的置换方法使用起始原料式V化合物的合适的立体异构体来制备。因此，使用化合物Va将得到化合物Ic，使用化合物Vb将得到化合物Ib，使用化合物Vc将得到化合物Ia，使用化合物Vd将得到化合物Id，尽管也可使用立体异构体混合物，但在本发明的置换方法中优选使用起始原料化合物V的单一立体异构体。特别优选使用化合物Vc制备化合物Ia，尤其是制备具有下面称为“优选化合物”中列出的那些取代基的化合物。
交换方法其中R1为如下定义的R1’的式I噁唑啉化合物或其盐也可通过交换法制备，此方法包括将下列式VII化合物或其盐 其中R2、R3和R4如上定义，与下列式VII化合物或其盐反应
其中R1’和E分别为烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基，芳基或杂环基；条件是当E为乙基，R3和R4其中之一为氢，并且(i)当R1’为苯基，当R3或R4中的另一个为甲氧羰基时，R2不为甲氧基，和当R3或R4中的另一个为乙氧羰基时，R2不为乙氧基；和(ii)当R3或R4中的另一个为2-甲丙基时，R1’为甲基，R2不为8-苯基氧基。
当两个原料化合物VII和VIII分别以NH2和HN基团上的酸加成盐的形式同时使用时，为了足以令反应进行可以使用胺碱如氨或有机胺碱分别形成游离的NH2和/或HN基团。在此任何形成游离的NH2和/或HN基团的胺碱均可使用。优选叔胺碱例如三乙胺，二异丙基乙基胺，二甲基吡啶，吡啶或1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯。胺碱∶式VII化合物的摩尔比优选是从约1∶1-约10∶1。
式VII原料化合物和其盐可以通过下列文献中所述的方法制备，例如Patcl等人于1992，11，12申请的美国专利申请号07/975,453；Commercon等人，Tetrahedron Lett.，33(36)，5185-5188(1992)；Corey等人，Tetrahedron Lett.，32，2857-2860(1991)；Ojima等人，Tetrahedron，48，6985-7012(1992)和Ojima等人Tetrahedron Lett.，33，5737-5740(1992)。所有这些文献在此引入做为参考。式VIII原料化合物和其盐可以通过例如Kimball等人，Org.Synth.Coll.Vol.II，P284(1943)中所述方法制备。式VIII化合物的酸性盐例如与羧酸，磺酸或无机酸形成的盐是优选使用的原料，因为此类化合物相对稳定并容易得到。上述盐可以通过与上述所用碱反应中和。式VIII化合物∶式VII化合物的摩尔比优选是从约1∶1-约2∶1。
反应优选在约0℃至约100℃温度下和约1atm压力下进行。反应优选在惰性气体如氩气或氮气下进行。
优选使用的溶剂为惰性有机溶剂例如甲苯，四氢呋喃，二氯甲烷，1，2-二氯乙烷或氯仿。所用溶剂的量优选是应使起始原料式VII化合物占以溶剂和式VII化合物总和重量为基准的约6％重量。
同式V化合物一样，式VII化合物可在相应位置碳原子上具有四个立体异构体。这些异构体为下列化合物VIIa，VIIb，VIIc和VIId
所需式I化合物的立体异构体可以通过例如使用式VII原料化合物的适宜立体异构体利用本发明交换方法制备。这样，当使用化合物VIIa时可得到化合物Ia，使用化合物VIIb时可得到化合物Id，使用化合物VIIc时可得到化合物Ic，和使用化合物VIId时可得到化合物Ib。在本发明交换法中尽管也可以使用立体异构体混合物，但优选的是使用原料化合物VII的单一立体异构体。特别优选的是使用化合物VIIa可制得化合物Ia，特别是可制得具有在下列称为“优选化合物”中所列举取代基的化合物Ia。
式II噁唑啉化合物及其盐的制备式II噁唑啉化合物及其盐可通过将基团-C(O)-R2转化成基团-C(O)-OH从而由式I噁唑啉化合物及其盐制备。
任何能够完成上述转化的试剂均可使用。例如当R2为烷氧基如甲氧基或乙氧基时，可用适宜的亲核试剂如甲硫醇的碱金属或碱土金属盐将式I化合物或其盐脱烷基化形成式II化合物。另外，也可利用氢化作用，例如通过使用氢化剂如氢和氢化催化剂如钯可将苄氧羰基基团转化成羧基。
优选的是，通过水解进行基团-C(O)-R2转变成羧基。任何能够完成水解作用的化合物均可在此用作水解剂。典型的水解剂包括含水碱例如氢氧化物(如金属氢氧化物例如氢氧化钡，或优选的是碱金属氢氧化物例如氢氧化锂，氢氧化钠或氢氧化钾)。碱∶式I化合物的摩尔比优选是由约1∶1-约3∶1。水∶式I化合物的摩尔比优选是由约1∶1-约100∶1。
反应优选在约-20℃至约100℃温度下和约1个大气压下进行。其中R2为-N(R5)(R6)的式I化合物或其盐的氢氧化物皂化反应优选在上述温度范围的较高温度下或在接近所用液体介质回流温度下或在所用液体介质回流温度下进行。反应优选在氮气，氩气或空气下进行。
溶剂可选自无机和有机液体如水，醇，甲苯，四氢呋喃，二噁烷，乙腈或二甲基甲酰胺，或它们的混合物。水和有机液体如四氢呋喃混合液优选用作溶剂。所用溶剂的量优选是应使起始原料I化合物占以溶剂和式I化合物总重量为基准的约7％重量。
本发明还提供了新的式II化合物及其盐，包括其所有立体异构体，可以是基本上不含有其它立体异构体的形式，或者是与其它选择性立体异构体或所有其它立体异构体的混合物形式，条件是，当R1为苯基和R3或R4中的一个为氢时，R3或R4中的另一个不为COOH。同式I噁唑啉一样，式II噁唑啉可在4-和5-位碳原子上具有四个立体异构体。这些立体异构体为下列化合物IIa，IIb，IIc和IId
式IIa噁唑啉及其盐是优选的，特别优选的是具有在下列称为“优选化合物”中所列举取代基的式IIa化合物。
在本方法中式I原料化合物或其盐的立体构象可以被保留和/或被转化。例如，分别在4-和5-位上具有相应顺式位置取代基的式I化合物的水解可以水解生成具有相应顺式构象的式II化合物，当对应于起始化合物的5-位羧基取代基被转化时生成具有相应反式构象的式II化合物或上述顺式和反式化合物的混合物，当用碱进行水解时，键合有基团-C(O)-R2的碳原子被脱质子化，随即由环系反方向上述碳原子被再质子化，结果导致立体构象的转化。典型的碱包括上文所述碱金属或碱金属碳酸盐例如碳酸钾，胺碱，或金属如碱金属或碱土金属醇盐，后者醇盐可以在加入之前生成或者就地生成(例如，通过将金属取代剂(metallating agent)如正丁基锂和链烷醇如乙醇一起加入)。
当在上述本方法中立体构象被转化时，相对于式I原料化合物具有转向立体构象的式I化合物可以制成中间体形式(即差向异构化)。例如，在水解反应中，当式I原料化合物4-和5-位取代基在相对彼此顺式位置时，其中相对于原料化合物5-位取代基-C(O)-R2被转化的相应的式I反式化合物可以作为中间体的形式制得。上述转化方法也包含在本发明范围内。
式III带有噁唑啉侧链的紫杉烷及其盐的偶合法制备式III带有侧链的紫杉烷或其盐可以通过下述方法制备，此方法包括在偶合剂存在下将式II噁唑啉化合物或其盐与C-13上直接键合有羟基的紫杉烷或其盐反应。在此方法中优选使用式IIa噁唑啉或其盐，特别是具有在下列称为“优选化合物”中所列举的取代基的式IIa化合物。
紫杉烷为含有下列母核结构的化合物 如上所述，此母核可以被取代并且在其环系中可以含有不饱和烯键。在此方法中任何含有C-13上直接键合的羟基的紫杉烷或其盐(例如C-13羟基的金属醇盐)均可使用。用于本发明方法中的紫杉烷原料可以是欧洲专利公开号400,971(在此作为参考)中所述化合物，或者可以是Chen等人于1992，7，1，申请的美国专利申请号07/907,261或Ueda等人于1992，11，24申请的美国专利申请号07/981,151(上述两篇文献在此作为参考)中所述含有紫杉烷残基的化合物，以及通过其中所述方法或其中所述方法的相似方法制备的化合物。此紫杉烷的实例包括下列式IX化合物或其盐
其中R8为氢，羟基，R14-O-，R15-C(O)-O-或R15-O-C(O)-O-；R9为氢，羟基，氟，R14-O-，R15-C(O)-O-或R15-O-C(O)-O-；R10和R11各自为氢，烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基，R16-O-，芳基或杂环基；R14为羟基保护基；和R15为氢，烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基，芳基或杂环基；R16为烷基。
未具体指明手性中心的式IX化合物所有立体构象均适用于本发明的偶合方法。尽管可以使用其混合物，但优选使用单一的立体异构体，用作式IX原料的优选的一种化合物是7-三烷基甲硅烷基浆果赤霉素III化合物，更优选的是7-三甲基甲硅烷基浆果赤霉素III或7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III。
作为式IX原料化合物优选的另外一系列化合物为其中R8为OC(O)CH3；R9为羟基或羟基保护基例如O-三甲基甲硅烷基或三乙基甲硅烷基；R10除不是金属外如上所定义以及R11为芳基例如苄基的化合物。此后一类化合物被认为是新的，它们的制备方法如下文所述，特别优选的上述化合物为其中R10为环烷基或OR15的化合物。
上述化合物可通过下列一般反应流程制备 步骤F通过与适宜试剂例如卤代三烷基硅烷如卤代三甲基或卤代三乙基硅烷，2，2，2-三氯乙基氯甲酸酯或苄氧羰基(Carbobenzyloxy)反应将浆果赤霉素IIIC-7和C-13位进行保护。可溶解浆果赤霉素III的任何惰性有机溶剂均可使用，例如THF，DMF，MeCl2和二噁烷。反应在叔胺碱如吡啶或咪唑存在下进行。反应温度可在-30℃至室温范围内变化，对于C-7取代作用优选在-30℃-0℃下进行而对于C-13优选在0℃至室温下进行。保护基反应物浓度优选是对C-7和C-13两取代基过量的摩尔浓度(1-10)。
步骤G此后通过在例如DMF，THF，二噁烷或各种醚中与三甲基硅烷或优选二甲基硅烷例如氯代三甲基硅烷或优选氯代二甲基硅烷反应将中间体XIC-1羟基进行保护。如步骤F中所述，反应优选在叔胺碱如咪唑或吡啶中进行，温度范围可以是-30℃至室温，优选是约0℃。
步骤H(A)此后通过与适宜的还原剂如Red-Al或氢化铝锂反应将中间体XIIC-4还原为羟基，通常使用过量摩尔比(1-5当量)还原剂。反应溶剂可以是THF，二噁烷或各种适宜的醚而反应温度可以是-30℃-0℃范围，优选是约0℃。
(B)在仲胺碱的碱金属(Li，Na或K)阴离子存在下，通过与适宜的酰氯酸酐或混合酸酐如丙烯酰氯，苯甲酰氯，环烷基甲酰氯，氯甲酸烷基酯反应将(A)中间体XIII其中C-4羟基转变成适宜的C-4取代基。反应溶剂包括THF，二噁烷等。温度范围可以是-30℃至室温，优选是约0℃。
步骤I(A)此后通过与吡啶鎓氟化物(含水氟化氢的吡啶溶液)于乙腈中反应，随后于THF中用四丁基氟化铵或于THF用氟化铯处理将步骤H(B)中间体XIII脱保护。然后混合物用醇稀释，用温和的有机或无机酸洗涤并分离。
(B)随后如步骤F所述按照上述适于C-7取代基的反应参数在XIV中引入C-7羟基保护基。
随后按照本文所述新的方法或经美国专利5,227,400，5,175,315和5,229,526(在此作为参考)中所述Holton工艺可在C-13上引入适宜的侧链。
因此，本发明新的最终产物是下式化合物或其盐或水合物 其中R1为R5，R7-O-，R7-S-或(R5)(R6)N-；R3和R4各自为R5，R5-O-C(O)-或(R5)(R6)N-C(O)-；R5和R6各自为氢，烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基，芳基或杂环基；和R7为烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基，芳基或杂环基；
T为 其中R8为氢，羟基，R14-O-，R15-C-(O)-O-或R15-O-C(O)-O-；R9为氢，羟基，氟，R14-O-，R15-C(O)-O-或R15-O-C(O)-O-；R10和R11各自为氢，烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基，R15-O-芳基或杂环基；R14为羟基保护基；和R15为氢，烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基，芳基或杂环基，R16为烷基，条件是R10不是甲基。
优选化合物新的式IV化合物中特别优选的是其中R10为环烷基或OR6的化合物。新的式IV化合物中最优选的是其中R10为环烷基，R1为芳基，优选苯基，或烷氧基优选叔丁氧基；R3为芳基，优选苯基，杂环基优选2-或3-呋喃基或噻吩基，异丁烯基，2-丙烯基，异丙基或(CH3)2CH-；R4为氢；R8优选为羟基或烷羰氧基例如乙酰氧基；R9为羟基和R11为芳基，优选苯基的化合物。
任何可用式II噁唑啉或其盐的羧基将原料紫杉烷或其盐的C-13羟基酯化的化合物均可用作本方法中的偶合剂。偶合剂的实例包括当与式II噁唑啉反应时可形成活化噁唑啉酯(例如1-羟基苯并三唑或N-羟基琥珀酰亚胺)或酸酐(例如酰氯如新戊酰氯或双(2-氧-3-噁唑烷基)膦酰氯)的化合物，特别是偶合剂包括如碳化二亚胺(如二环己基碳二亚胺(DCC)，1，3-二异丙基碳二亚胺(DIC)或1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸化物)，双(2-氧代-3-噁唑烷基)膦酰氯)，羰基二咪唑(CDI)，新戊酰氯或2，4，6-三氯苯甲酰氯的化合物；其中上述化合物优选与如1-羟基苯并三唑(HOBt)或N-羟基琥珀酰亚胺(HO-Su)的化合物或如下列的胺一起使用，所述胺如三乙胺，吡啶或在4-位上被-N(R16)(R17)取代的吡啶，其中R16和R17各自选自烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基或杂环基(形成例如4-二甲氨基吡啶(DMAP)的化合物)，或者其中R16和R17与它们所连接的氮原子一起形成一个杂环基(形成例如4-吗啉代吡啶或4-吡咯烷基吡啶的化合物)。偶合剂∶原料紫杉烷的摩尔比优选是由约1∶1至约2∶1。
式II噁唑啉∶原料紫杉烷的摩尔比优选是由约1∶1至约2∶1。
反应优选是在约0℃至约140℃温度下并于一个大气压下进行。反应优选在惰性气体如氩气氛下进行。
所用优选溶剂为惰性有机液体如甲苯，乙腈，1，2-二氯乙烷，氯仿，四氢呋喃，吡啶，二氯甲烷或二甲基甲酰胺。所用溶剂的量优选是应使原料紫杉烷占以溶剂和紫杉烷化合物的总合为基准的约20％重量。
在偶合的式III产物中原料噁唑啉4-和5-位取代基的立体构象可以保留和/或转化，例如，当5-位取代基相应于原料被转化时，则产生由顺式转化成反式的差向异构化作用。
本发明还提供了新的式III带有噁唑啉侧链的紫杉烷及其盐，包括其所有立体异构体，基本上不含有其它立体异构体的形式或与其它选择性立体异构体或所有其它立体异构体混合的形式。
开环形成式X紫杉烷及其盐式X带有侧链的紫杉烷或其盐可以通过下述方法由带有噁唑啉侧链的式III紫杉烷或其盐制备，此方法包括将式III紫杉烷或其盐与能够使与所述紫杉烷化合物紫杉烷残基C-13键合的噁唑啉基团开环以形成所述式X化合物或其盐的含水酸反应。
任何能够完成上述开环反应的含水酸均可用于本发明方法中，可开环酸的实例包括羧酸如乙酸或三氟乙酸，或优选无机酸如盐酸，氢氟酸或硫酸水溶液，可开环酸∶式III化合物的摩尔比优选由约1∶1至约10∶1，水∶式III化合物的摩尔比优选由约1∶1至约100∶1。
开环反应优选是在约-20℃至约40℃温度下并在约1个大气压下进行。反应优选在氮气，氩气或空气气氛下进行。
所用优选溶剂为单独使用或与水混合的惰性有机液体如四氢呋喃，醇(优选低级链烷醇如甲醇)，二噁烷，甲苯，乙腈或它们的混合物，所用溶剂的量优选是应使式III原料化合物占以溶剂和式III化合物的总和为基准的大约5％重量。
本发明优选的实施方案进一步包括脱除紫杉烷残基上的一个或多个基团，特别是游离的羟基以制备式X紫杉烷。例如，脱保护反应可通过用脱保护剂于上述开环反应之前或之后，或与开环反应同时进行，任何能够完成脱保护反应的化合物均可用作脱保护剂。例如，酸如氢氟酸或含水质子传递酸，或四烷基氟化铵如四正丁基氟化铵可用于脱除甲硅烷基保护基；苄基保护基可通过氢化脱除，三氯乙氧羰基保护基可通过与锌反应脱除；而醛缩醇或酮缩醇保护基可通过用质子传递酸或路易斯酸脱除。
本发明优选的实例包括同时进行开环反应和紫杉烷环结构上，特别是C-7上一个或多个羟基保护基的脱保护反应。特别优选的实例包括用能够完成这两个反应的酸(如无机酸例如盐酸)同时进行开环反应和脱保护反应。例如，在上述开环反应条件下使用酸可以使开环反应和C-7上可酸裂解羟基保护基如三烷基甲硅烷基(例如三甲基甲硅烷基或三乙基甲硅烷基)的脱除反应同时进行。
本发明还提供了在开环反应中和任意的脱保护反应中形成的新的式X中间体及其盐，包括其所有立体异构体，基本上不含有其它立体异构体的形式或与选择性地与其它立体异构体或所有其它立体异构体的混合形式。
与碱反应生成式IV紫杉烷及其盐将式X化合物或其盐用碱处理得到式IV化合物或其盐。任何可使酰基-C(O)-R1转变成基团-NH2以生成式IV化合物或其盐的碱均可用于本发明方法中。这种碱的实例包括碱金属碳酸氢盐如碳酸氢钠或碳酸氢钾。碱∶式X化合物的摩尔比优选为约1∶1至约5∶1。
反应优选是在约-20℃至约80℃温度下并于1个大气压下进行。反应优选在氩气，氮气或空气气氛下进行。
所用优选溶剂为单独使用或与水混合的惰性有机液体如四氢呋喃，醇(优选低级链烷醇如甲醇)，甲苯，乙腈，二噁烷或它们的混合物。所用溶剂的量优选应使式X化合物占以溶剂和式X化合物的总和重量为基准的大约1～5％重量。
如上所述，尽管可在开环反应之前进行脱保护反应，但也可在开环反应的同时或之后再用碱进行脱保护基反应，优选是与开环反应同时进行。
分离本发明方法制备的产物可经例如萃取，蒸馏，结晶和柱色谱法分离和纯化。
带侧链的紫杉烷产物本发明方法制备的式IV带侧链的化合物及其盐本身具有药理学活性，或者是可被转化成药理学活性产物的化合物，具有药理学活性的紫杉烷如紫杉醇(taxol)在对癌症例如乳房癌，卵巢癌，结肠癌或肺癌患者治疗中用作抗癌剂。此类带有侧链的紫杉烷的应用已在下列参考文献中公开，例如欧洲专利公开号400,971，美国专利4,876,399，美国专利4,857,653，美国专利4,814,470，美国专利4,924，012，美国专利4,924,011，美国专利申请号07/907,261，1992，7，1由Chen等人申请以及美国专利申请号07/981,151，1992，11，24由Ueda等人申请。所有这些文献在此引入作为参考。
具有下述结构的Taxotere，或者特别是具有上述结构的紫杉醇优选最终以式IV带有侧链的紫杉烷的形式制得 在本发明的任一方法中均可使用或以适宜的形式制得反应物或产物的溶剂化物如水合物。
式IV化合物可溶于水的前药形式也认为包括在本发明范围内。此类式IV化合物的前药形式可通过在C-7或C-10和/或在侧链2’-位上引入下列通式的膦酰氧基制备-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2其中m为0或1-6的整数。
下式新的前药及其膦酰氧基碱盐
其中R1是R5，R7-O-，R7-S-或(R5)(R6)N-；R3和R4各自为R5，R5-O-C(O)-或(R5)(R6)N-C(O)-；R5和R6各自为氢，烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基，芳基或杂环基；和R7为烷基，链烯基，链炔基，环烷基，环烯基，芳基或杂环基；和T为 其中R8为氢，羟基，R14-O-，R15-C(O)-O-，R15-O-C(O)-O-，或-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2；R10和R11各自为氢，烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基，R16-O-芳基，或杂环基；R20为氢，-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2，-OC(O)R21或-OC(O)OR21，其中R21为被1-6个卤原子任意取代的C1-C6烷基，C3-C6环烷基，C2-C6链烯基或下式残基
其中D为一个键或C1-C6烷基而Ra，Rb和Rc各自为氢，氨基，C1-C6一或二烷氨基，卤素，C1-C6烷基或C1-C6烷氧基；R14为羟基保护基；R16为烷基；R30为氢，羟基，氟，-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2或-OC(O)OR21，其中R21如上定义；R15为氢，烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基，芳基或杂环基；m为0或1-6的整数，条件是R8，R20和30中至少一个为-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH2)而R10不为甲基。
优选的式IV’化合物包括其中R10为环烷基；R1为芳基，优选苯基或烷氧基优选叔丁氧基；R3为芳基优选苯基或杂环基优选呋喃基或噻吩基；R4为氢；R8为羟基或烷羰氧基，优选乙酰氧基；R11为芳基优选苯基；R20为-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2或-OC(O)OR21，其中R21为乙基或N-丙基；R30为-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2和m为0或1的化合物。
膦酰氧基通常按照参考文献1993年8月17日申请的U.S.S.N08/108,015中所述方法随式1V最终产物的形成而引入。
在制备上述新的前药过程中，按照U.S.S.N.08/108,015中所述一般反应条件可形成各种新的中间体。用其中不需要的羟基已被保护的式IV化合物作原料，首先将式IV中2’或7或10位或多个位置上存在的活泼羟基被适宜保护的式IV化合物连接到相应的甲硫基甲基醚[-OCH2(OCH2)mSCH3]上，此后根据m的数据，按照上述U.S.S.N.中各步所述将此醚连接成被保护的膦酰氧基甲基醚，然后经常规方法可除去膦酰基保护基和羟基保护基。
此后用常规方法包括将游离酸与金属碱或与胺反应可将游离酸转变成所需碱盐。适宜的金属碱包括钠，钾，锂，钙，钡，镁，锌和铝的氢氧化物，碳酸盐和碳酸氢盐；而适宜的胺包括三乙胺，氨，赖氨酸，精氨酸，N-甲基葡糖胺，乙醇胺，普鲁卡因，苄星(benzathine)二苄胺，缓血酸胺(TRIS)，氯普鲁卡困，胆碱，二乙醇胺，三乙醇胺等。碱盐可进一步经色谱法，随后经冷冻干燥或结晶纯化。
按照上述专利申请(08/108,015)的教导，前药既可以口服也可以非肠道用药。式IV和IV’化合物是新的抗癌剂，其表现在在体外对人结肠癌细胞系HCT-116和HCT-116/VM46及M109肺癌有细胞毒性活性。
下列实施例将进一步描述本发明，这些实施例仅用于说明目的，而对权利要求的范围无任何限制作用。
实施例1(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸乙酯的制备 将(2R，3S)-N-苯甲酰基-3-苯基异丝氨酸乙酯(0.104g，0.332mmol)加到烘箱干燥、氩气清洗的10ml烧瓶中，并悬浮于甲苯(5.0ml)中。加入吡啶鎓对甲苯磺酸(PPTS)(42mg，0.167mmol)，于室温搅拌约1小时后，将混合物加热回流，加热得到澄清的均匀溶液。加热约1小时后，反应混合物变得浑浊。加热16.5小时后，TCL显示反应完全(1∶1乙酸乙酯(EtOAc)∶己烷，PMA(磷钼酸)/乙醇，紫外(U.V.))。
反应混合物用10ml氯仿稀释，用5ml饱和NaHCO3水溶液洗涤，Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到97.8mg黄色油状物(产率＝100％)。1H NMR显示得到仅含微量(＜＜5％)杂质的反式-噁唑啉标题产物，其中没有相应的顺式-噁唑啉。
实施例2(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸乙酯的制备 将(2R，3S)-N-苯甲酰基-3-苯基异丝氨酸乙酯(0.100g，0.319mmol)加到火焰干燥、氩气清洗的5ml烧瓶中，溶于吡啶(1.0ml)并冷至0℃。滴加甲磺酰氯(38mg，0.335mmol)，并于0℃将黄色溶液搅拌13/4小时，然后热至室温。于室温11/2小时后薄层色谱法(TCL)显示反应完全(1∶1乙酸乙酯∶己烷，PMA/乙醇，U.V.)将不均匀混合物用5ml乙酸乙酯稀释并用1/3饱和CuSO4水溶液(10ml)洗涤。水相用2×5ml乙酸乙酯萃取，合并的有机相用5ml饱和NaCl水溶液洗涤，Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到0.12g黄色油状物。
标题产物经硅胶色谱法(柱20mmd×50mml)用1∶1乙酸乙酯∶己烷纯化，得到92.6mg黄色油状物(产率＝98.3％)。1H NMR和质谱显示得到反式-噁唑啉标题产物。旋光率(c＝0.1，CHCl3)，[α]D＝+15.6°，[α]578＝+16.3°，[α]546＝+18.7°，[α]436＝+33.1°。
原料化合物(2S，3S)-N-苯甲酰基-3-苯基异丝氨酸乙酯如下列分离实验制备于0℃搅拌下10分钟内向含有(4S-顺式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸乙酯(0.79g，2.67mmol)甲醇(MeOH)(57ml)溶液的500ml烧瓶中加入1NHCl(57ml)。在加入HCl时有沉淀生成，经加入四氢呋喃(THF)令沉淀溶解，然后向澄清溶液中加入THF(57ml)，并于0℃将混合物搅拌2小时15分钟。用饱和的NaCHO3(120ml)将溶液的PH调至9.0，然后令混合物于室温搅拌18小时。(反应经TLC(硅胶)检测，用4∶6 EtOAc∶己烷作洗脱剂，原料的Rf＝0.71，产物的Rf＝0.42，UV显色)。
将反应用EtOAc(200ml)稀释，分出水层并用EtOAc(100ml×1)萃取，然后将合并的EtOAc溶液用盐水(150ml×1)洗涤，Na2SO4干燥，过滤并浓缩得到固体状粗品(2S，3S)-N-苯甲酰基-3-苯基异丝氨酸乙酯(0.810g)。将其溶于热MeOH(15ml)中并于室温静置30分钟，然后于4℃静置1小时。将固体过滤，用冷MeOH(2ml)洗涤并真空干燥，第一批得到0.43g(2S，3S)-N-苯甲酰基-3-苯基异丝氨酸乙酯，如上所述第二批得到0.24g，总共得到0.67g(80％)(2S，3S)-N-苯甲酰基-3-苯基异丝氨酸乙酯。(白色固体mp＝160-161℃，[α]D＝-40.3°(C，l，CHCl3)。
元素分析C18H19NO40.03H2O计算值实测值C68.8668.99H6.12 6.07N4.46 4.60H2O 0.20 0.20实施例3(4S-反式)-和(4S-顺式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸乙酯 和 将(2S，3S)-N-苯甲酰基-3-苯基异丝氨酸乙酯(66.8g，0.213mmol)加到烘箱干燥、氩气清洗的10ml烧瓶中，并悬浮于甲苯(4.0ml)中。加入吡啶鎓对甲苯磺酸(49mg，0.195mmol)，烧瓶装上迪安-斯达克榻分水器(装有4埃分子筛)，将反应加热回流(加热下大部分固体溶解)。5小时后，TCL显示反应接近完全(1∶1EtOAc∶己烷，PMA/EtOH，U.V.)。
令回流继续过夜，加热22小时后，将反应冷至室温。溶液中生成一些油滴状油状物，将此油状物进一步冷至室温。加入～5ml EtOAc，固体溶解不明显，加入～3ml CHCl3，固体全部溶解。TLC显示没有原料存在。
溶液用5ml饱和NaHCO3水溶液洗涤，Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到64.3mg部分结晶的黄色油状物。1H和13C NMR显示顺式-噁唑啉标题产物反式-噁唑啉标题产物杂质为-5痕量1。反式-噁唑啉标题产物是由存在于原料中的痕量(2R，3S)-N-苯甲酰基-3-苯基异丝氨酸乙酯产生的。产物于硅胶上用1∶1 EtOAc/己烷2∶1 EtOAc/己烷进行色谱分离(Rf＝0.57(1∶1EtOAc/己烷)，得到49.3mg油状黄色固体，产率＝78.4％；1H NMR显示顺式和反式噁唑啉标题产物的比率约为10∶1(顺式∶反式)。
实施例4(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸甲酯的制备(a)苯甲亚氨酸乙酯盐酸化物
将苄腈(30.3g，294mmol)和乙醇(14.2g，308mmol)加到火焰干燥、氩气清洗的100ml烧瓶中并冷至0℃。向搅拌的溶液中吹入HCl20分钟，此时配衡瓶显示已经加入了17.5g HCl。停止加入HCl并于0℃搅拌澄清溶液，约1小时后开始有沉淀生成。
于0℃搅拌约21/2小时后，将均匀混合物转入4℃冷室中。于4℃31/2天后，将固体物捣碎并用150ml冷至4℃乙醚研制。令混合物于4℃静置6小时，将混合物真空过滤并迅速用2×100ml冷乙醚洗涤，高真空(0.5mmHg，17小时)干燥，得到51.6g(94.5％)白色自由流动的粉状标题产物。
(b)(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸甲酯 将(2R，3S)-3-苯基异丝氨酸甲酯盐酸盐(5.76g，24.9mmol)溶于1，2-二氯乙烷(75ml)，加入三乙胺(2.77g，27.3mmol)并在将所得混合物搅拌15分钟后，一次加入上述步骤(a)所制备的苯甲亚氨酸酯(benzimidate)(4.62g，24.9mmol)。将混合物搅拌10分钟，然后加热回流。回流41/2小时后，TCL显示反应完全(1∶1乙酸乙酯/己烷，PMA/乙醇，U.V.)。
反应混合物用150ml二氯甲烷和150ml 10％K2CO3稀释并振摇，分层，水相用3×50ml CH2Cl2萃取，合并的有机相用50ml饱和NaCl水溶液洗涤，Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到黄色油状物，将其于硅胶柱(干柱～750ml；装柱100mmd×110mml)用1∶2乙酸乙酯/己烷纯化，得到6.05g略带颜色的油状标题产物，将其于室温静置固化，产率＝86.4％。
实施例5(4S-顺式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸乙酯的制备 于0℃2分钟内向含有(2R，3S)-N-苯甲酰基-3-苯基异丝氨酸乙酯(2.00g，6.38mmol)的吡啶(20ml)溶液的100ml烧瓶中滴加甲磺酰氯(0.52ml，6.70mmol)。将溶液于0-4℃搅拌90分钟，然后于65-70℃搅拌18小时。(反应经TCL检测，用1∶2EtOAc∶甲苯作展开剂，原料的Rf＝0.42，甲磺酸酯的Rf＝0.48，顺式-噁唑啉标题产物的Rf＝0.78，UV显色)。
将反应冷至室温并用EtOAc(80ml)和1/3饱和CuSO4溶液(80ml)(1/3饱和CuSO4溶液通过将饱和CuSO4溶液稀释至其原始浓度的1/3制备)稀释。分出水层并用EtOAc(40ml×1)萃取，合并的EtOAc溶液用盐水(80ml×1)洗涤，Na2SO4干燥，过滤，浓缩并与庚烷(20ml×2)共沸，得到固体状粗品顺式噁唑啉标题产物(1.88g)。将其溶于热EtOAc(8ml)并加入己烷(4ml)，将结晶混合物于室温静置20分钟，然后于4℃静置30分钟，将固体过滤，用冷10％EtOAc的己烷液洗涤并空气干燥，得到1.34g(71.3％)顺式-噁唑啉标题产物，熔点135℃。[α]D＝-9.25(C＝1.0，CHCl3)。
实施例6(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸的制备 将(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸乙酯(92mg，0.311mmol)导入1英钱管形瓶中并溶于四氢呋喃(THF)(0.8ml)，滴加LiOH(1N水溶液，0.343mmol)并将所得双相混合物于室温剧烈搅拌，5分钟内得到均匀溶液。45分钟后，TLC显示无原料存在(1∶1乙酸乙酯(EtOAc)/己烷，PMA/乙醇(EtOH)，U.V)。
将溶液冷至0℃并进一步用2.0ml THF稀释，反应用0.34ml1N HCl(1.1当量)骤冷。热至室温后，溶液用5ml EtOAC和5mlH2O稀释并振摇。分层，水相用3×5ml EtOAc萃取。(萃取后，水相PH-6)。合并的有机相用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到72.1mg白色固体，产率＝87％。1H和13C NMR以及质谱显示为标题产物，其熔点为201-203℃，[α]D＝+25.6°，[α]578＝+26.9°，[α]546＝+30.7，[α]436＝+53.8，(C＝1.0 CHCl3∶CH3OH(1∶1)。
实施例7(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸的制备 将(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸甲酯(0.509g，1，81mmol)加到10ml烧瓶中并溶于四氢呋喃(THF)(4.7ml)。滴加氢氧化锂(1N水溶液，2.0ml，1.99mmol)，将双相混合物剧烈搅拌，于2分钟内加完氢氧化锂后，得到一澄清溶液。15分钟后，TLC显示反应完全(1∶1乙酸乙酯∶己烷，DMA/乙醇)。
将反应混合物进一步用10ml THF稀释并将所得浑浊溶液冷至0℃。通过滴加2.0ml 1N HCl水溶液使反应骤冷，溶液再用20ml乙酸乙酯和15ml水稀释并振摇。分层，水相用3×10ml乙酸乙酯萃取(萃取后，水层的PH约为6)。合并的有机相用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将所得浓缩物溶于苯和甲醇混合液中，但在甲醇，CHCl3，乙酸乙酯或这些溶剂的混合液中不易溶解。将浓缩物于高真空下干燥过夜，得到白色固体状标题产物0.448g(产率＝93％).M.P.＝201-203°.[α]D＝+25.6，[α]578＝+26.9°，[α]546＝+30.7，[α]436＝+53.8°，(c＝1.0，CHCl3∶CH3OH(1∶1)).
实施例8(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸的制备将乙醇(0.1ml)与四氢呋喃(1.0ml)混合并将混合物冷至-78℃，滴加正丁基锂(n-BuLi)(2.12M，0.050ml)，并将混合物温热至0℃。加入具有下列结构式的固体(4S-顺式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸乙酯
(20mg，0.0678mmol)并将反应搅拌1小时(有少量水存在)。经TCL检测到顺式噁唑啉乙酯原料和相应的反式噁唑啉乙酯(5-位转向)混合物(在此步骤可观察到很少量的水解反应)。将反应混合物再搅拌1小时，然后令其于冰浴中(0℃至室温)过夜，18小时后，TCL显示绝大部分为反式酸标题化合物并有痕量顺式酯原料(溶剂体系己烷∶EtOAc2∶1(痕量顺式酯)和EtOAc∶丙酮∶H2O∶MeOH7∶1∶1∶1(标题产物))。
反应用磷酸盐(PH＝4.3)缓冲液骤冷并用乙酸乙酯(5×10ml)萃取。将有机相干燥并除去溶剂，得到～17mg(93％)标题产物。(NMR显示为反式酸标题产物)。M.P.＝135℃[α]D＝-92.5°，(C＝1.0，CHCl3)。
实施例9(4S-反式)-和(4S-顺式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸的制备 和 将(4S-顺式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸乙酯(202mg，0.6890mmol)溶于四氢呋喃(1.5ml)并滴加氢氧化锂(1N水溶液，0.718ml)，得到一不均匀溶液，将反应混合物于室温搅拌过夜，此时溶液变得澄清。(TLC(乙酸乙酯∶己烷，1∶1)显示有少量原料存在。TLC(乙酸乙酯∶甲醇∶水∶丙酮7∶1∶1∶1)显示得到顺式和反式噁唑啉标题产物)。
加入1N HCl(0.718ml)，随后加入饱和NaCl(约10ml)和乙酸乙酯(约10ml)，水层用乙酸乙酯洗涤5次(约10ml)并将H2O层由PH～5.5进一步酸化至3.4PH，用约10ml EtOAc萃取。合并的有机层用MgSO4干燥，并过滤。减压蒸发乙酸乙酯，得到183mg(100％)顺式和反式标题产物的混合物(经1H NMR测得3∶1顺式∶反式)。
实施例107-三乙基甲硅烷基13-[[(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑基]羰基]浆果赤霉素III(a)7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉III(i)[2aR-(2aα，4β，4αβ，6β，9α，11β，12α，12aα，12bα)]苯甲酸12b-乙酰氧基-2a，3，4，4a，5，6，9，10，11，12，12a，12b-十二氢-6，9，11-三羟基-4a，8，13，13-四甲基-5-氧代-4-[(三乙基甲硅烷基)氧基]-7，11-亚甲基-1H-环癸[3，4]苯并[1，2-b]氧杂环丁烷-12基酯
将10-去乙酰基浆果赤霉素III(27.4g，50.3mmol，含有H2O1.57％，CH3OH1.6％，乙酸乙酯0.09％和己烷0.03％)和4-二甲氨基吡啶(2.62g，21.4mmol，H2O重量百分比(Karl Fisher法(″K.F.″)＝0.09)加到火焰干燥、氩气清洗的113口烧瓶(装有机械搅拌器和数字温度计)并溶于无水二甲基甲酰胺(122ml，H2O重量百分比(K.F.)＝＜0.01)。加入二氯甲烷(256ml，H2O重量百分比(K.F.)＝＜0.01)(在加入二氯甲烷期间反应溶液的温度由23℃升至25℃)并将所得均匀溶液冷至-50℃。
于3分钟内滴加三乙胺(16ml，120mmol，H2O重量百分比(K.F.)＝0.08)并于-50℃将所得溶液搅拌5分钟后，滴加纯净的三乙基甲硅烷基氯(18.6ml，111mmol)，于10分钟内加入三乙基甲硅烷基氯，此时反应温度不超过-50℃。在加入三乙基甲硅烷基氯期间反应变得十分浑浊。
将所得混合物于约-50℃搅拌1小时，然后令其于-48℃冷冻箱中静置(不搅拌)22小时。(分离实验表明于-48℃将反应搅拌8小时得到～60％转化)，将混合物于冷冻箱中取出并热至约-10℃。混合物TLC分析(溶剂乙酸乙酯，染色剂磷钼酸/乙醇)发现没有原料存在并且显示一个产物色点(Rf＝0.60)。将冷却的混合物与EtOAc(11)合并并用H2O(890ml)洗涤。
分出形成的水层并用EtOAc(250ml)萃取。合并的有机层用5.7％NaH2PO4水溶液(2×250ml，测得5.7％NaH2PO4水溶液PH＝4.30±0.05，测得合并的NaH2PO4洗液PH＝5.75±0.05)，半饱和NaCl水溶液(250ml)、饱和NaCl水溶液(250ml)洗涤，Na2SO4干燥，过滤并于旋转蒸发仪上浓缩(此实施例于旋转蒸发仪上全部浓缩过程于35℃水浴温度下进行)。
将所得半固体状物暴露于高真空下(～1mmHg 20分钟)进一步干燥，得到41.5g白色固体，然后将粗产物溶于CH2Cl2(400ml)(于35℃水浴中加热以使固体溶解)，于旋转蒸发仪上使所得溶液的体积减至～150ml，立即开始析晶并令混合物于室温静置1小时。加入己烷(100ml)并使混合物轻轻回荡，令混合物于4℃冷室中静置16.5小时。将固体过滤，用1∶9 CH2Cl2/己烷(3×250ml)于吸滤器上洗涤，并于高真空下(～0.2mmHg 42小时)干燥，得到26.1g(79％)白色粉末状标题产物。将母液于旋转蒸发仪上浓缩，残余物于CH2Cl2中结晶，得到4.5g(14％)白色结晶状标题产物。用相同方法将第一批产物进行重结晶不需加热将固体溶于CH2Cl2(100ml)，并于旋转蒸发仪上将所得溶液的体积减至～7ml，于5分钟内开始析晶，令混合物于室温静置1小时，4℃冷室中静置42小时。将结晶过滤并于吸滤器上用1∶9 CH2Cl2/己烷(3×50ml)洗涤，于高真空下(～0.2mmHg，18小时)干燥。此批产物的1H NMR与第一批产物的1H NMR相同。两批合并的产率为93％(未校正)。
元素分析(％)C35H50O10Si计算值 实测值C 63.8063.43H 7.65 7.66KF(H2O)0.00 0.00
m.p.239-242℃(分解)[α]22D-53.6°(c1.0，CHCl3)TLCRf＝0.60(硅胶，EtOAc)磷钼酸/乙醇显色。
(ii)[2aR-(2aα，4β，4αβ，6β，9α，11β，12α，12aα，12bα)]-6，12b-双(乙酰氧基)-12-(苯甲酰氧基)-2a，3，4，4a，5，6，9，10，11，12，12a，12b-十二氢-9，11-二羟基-4a，8，13，13-四甲基-4-[(三乙基甲硅烷基)氧基]-7，11-亚甲基-1H-环癸[3，4]苯并[1，2-b]氧杂环丁烷-5-酮(7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III) 将上述步骤(i)所得标题产物(21.4g，32.4mmol)加到火焰干燥、氩气清洗的113口烧瓶(装有机械搅拌器和数字温度计)并溶于THF(350ml，由钠/二苯酮中新蒸的)。将所得溶液冷至-70℃，于23分钟内滴加正丁基锂(n-BuLi)溶液(14.6ml，2.56M己烷溶液，37.3mmol，于0℃THF中用二苯基乙酸滴定，作三次平行分析)，在滴加过程中反应温度不超过-68℃。在加入n-BuLi时有固体生成并且于-70℃溶解不明显。将所得混合物于-70℃搅拌20分钟，然后热至-48℃，当热至-48℃时得到-澄清均匀溶液。
于-48℃搅拌1/2小时后，于7分钟内滴加乙酸酐(4.6ml，49mmol，使用前于氩气氛下(137-138℃1atm)新蒸的)，在滴加过程中反应温度不超过-45℃。将所得溶液于-48℃搅拌20分钟，然后于0℃搅拌1小时，溶液用乙酸乙酯(350ml)稀释，饱和NH4Cl水溶液(250ml)洗涤，分层，水层用乙酸乙酯(200ml)萃取。合并的有机层用饱和NaCl水溶液洗涤，Na2SO4干燥，过滤并于旋转蒸发仪上浓缩(此实施例中于旋转蒸发仪上的所有浓缩过程在35℃水浴温度下进行)。将半固体状物暴露于高真空下(～1.5mmHg，1/2小时)，得到24.7g白色固体。
将粗产物溶于CH2Cl2(300ml)并于旋转蒸发仪上将所得溶液的体积减至～70ml，一分钟内开始结晶。令混合物于室温静置45分钟，然后于4℃冷室中静置18小时。将结晶过滤，于吸滤器上用1∶9 CH2Cl2/己烷(3×100ml)洗涤并于真空下(～0.2mmHg，19小时)干燥，得到20.9g(92.0％)精细白色针状结晶的标题产物。于旋转蒸发仪上将母液浓缩，残余物于CH2Cl2/己烷中结晶，得到0.82g(3.6％)细小白色针状结晶为标题产物。
母液的结晶过程如下所述进行将残余物溶于CH2Cl2(10ml)中并于旋转蒸发仪上将所得溶液的体积减至～5ml。于室温静至1/2小时后，无结晶生成。以每份1ml加入己烷(5ml)并将溶液轻轻摇荡，此时有极少结晶出现。令混合物于室温静置1/2小时(有较多的结晶生成)，然后于4℃冷室中静置18小时，将结晶过滤，于吸滤器上用1∶9CH2Cl2/己烷洗涤，并于高真空下(～0.15mmHg，21小时)干燥。两批产物合并的产率为95.6％。m.p.＝218-219℃(分解)；[α]22D＝-78.4°(C1.0，CHCl3)；TLCRf＝0.37(硅胶，1∶9丙酮∶CH2Cl2，磷钼酸/乙醇显色)。(b)7-三乙基甲硅烷基13-[[(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑基]羰基]浆果赤霉素III 将上述步骤(a)所制7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III(0.209g，0.298mmol)，如实施例6制备的噁唑啉标题产物(80.2mg，0.300mmol)，二环己基碳二亚胺(DCC)(84mg，0.407mmol)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)(25mg，0.205mmol)加到1英钱管形瓶(烘干)，用氩气清洗并悬浮于甲苯(1.0ml)中。于室温搅拌1小时后，部分固体溶解，混合物呈黄色。将不均匀混合物热至85℃，21/2小时后TLC显示有原料存在(1∶1乙酸乙酯∶己烷，PMA/乙醇，U.V.)。于85℃继续加热，5小时后TLC显示基本相同。令反应于室温搅拌过夜，于室温14小时后，TLC仍然相同。将不均匀混合物用1.0ml乙酸乙酯稀释(观察到部分沉淀)并将混合物经一层硅藻土过滤，硅藻土用3×1ml乙酸乙酯洗涤，将滤液浓缩，得到0.349g黄色固体。1H NMR显示存在的标题产物和7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III的比率约为8∶1，另外也可观察到一些1，3-二环己基脲(DCU)和痕量原料噁唑啉或杂质。
将混合物于硅胶上(柱20mm直径×90mm长)用1∶2乙酸乙酯/己烷-1∶1乙酸乙酯/己烷进行部分分离。色谱法分离过程中，TLC分析发现在比偶合标题产物Rf稍低处有一小色点，将此杂质和偶合产物的混合馏分合并。第一个色点偶合标题产物(0.267g灰白色固体，产率94％)(1H NMR显示所需偶合产物和上述杂质的比率约为18∶1)；第一色点和上述混合馏分11.5mg油状物(1HNMR显示所需偶合产物和不同杂质的比率约为2∶1)。M.P.＝139-142℃[a]D＝-49.5°，[α]578＝-52.6°，[α]546＝-63.5°，[α]436＝-157.0°，(c＝1.0，CHCl3)。
实施例117-三乙基甲硅烷基13-[[(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑基]羰基]浆果赤霉素III的制备
将4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸(96.0mg，0.359mmol)，7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III(0.252g，0.359mmol)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)(30mg，0.246mmol)加到火焰干燥的1英钱管形瓶中，用氩气清洗并悬浮于甲苯(1.2ml)中，立即加入二异丙基碳二亚胺(DIC)(63mg，0.503mmol)，于室温搅拌此浅黄色不均匀混合物。随着时间的延长，得到十分浑浊的黄色溶液。此时，将管形瓶密封并浸入80℃油浴中，于～80℃3小时后，得到暗橙色溶液。将反应混合物直接浓缩。1H NMR显示所需偶合产物和7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III的比率约为6∶1。产物经硅胶色谱法用1∶3 EtOAc/己烷进行部分分离，得到0.300g灰白色固体。TLC显示有分离的产物和二异丙基脲副产物。
1H NMR显示仅含有～25∶1的所需偶合产物和杂质及二异丙基脲副产物。所需偶合产物与二异丙基脲副产物的比率约为12∶1。
由上述结果得出所需偶合产物的产率约为85％。
M.P.＝139-142℃.[α]D＝-49.5°，[α]578＝-52.6°，[α]546＝-63.5°，[α]436＝-157.0°，(c＝1.0，CHCl3).
实施例127-三乙基甲硅烷基13-[[(4S-反式)-4，5-二氢-2，5-二苯基-5-噁唑基]羰基]浆果赤霉素III在下列表1所列条件下将7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III(此实施例中缩写为“A”)和(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸(此实施例中缩写为“B”)反应制备标题化合物。烷点＝139-142℃。[α]D＝-49.5°，[α]578＝-52.6°，[α]546＝-63.5°，[α]436＝-157.0°，(C＝1.0，CHCl3)。
表1实施B 试剂 浓度 时间 温度例号 (eq.).(eq.).溶剂 B(M) (hrs) (℃)12a 1.2 DCC(1.4) PhCH30.29 1 23DMAP(0.7) 2.58512b 1.0 DCC(1.4) PhCH30.30 5.585DMAP(0.7)12c 1.0 R2POCl(1.04)1.2-DCE 0.28 6 23DMAP(1.01)15 55NEt3(1.04)12d 10 R2POCl(1.01)1.2-DCE 0.23 5 23NEt3(2.0)16 6544 7512e 1.0 CDl(1.2) THF 0.39 21 70DMAP(1.0)12f 1.0 ArCOCl(1.5) CH2Cl20.23 23 23DMAP(2.0)NEt3(1.5)12g 1.0 ArCOCl(1.5) PhCH30.29 5.523DMAP(2.0)NEt3(1.5)12h 1.0 ArCOCl(1.05) CH2Cl20.30 3.5 -78DMAP(2.0) 19-60NEt3(1.0)1 02023
表1(续)12i1.0 t-BuCOCl(1.1)1，2-DCE0.284.5 23DMAP(2.0)NEt3(1.2) 156012j2.1 t-BuCOCl(2.1)1，2-DCE0.232123DMAP(4.2)NEt3(2.3)12k1.0 t-BuCOCl(1.0)CH2Cl20.241923DMAP(0.07)NEt3(2.0)12l1.0 t-BuCOCl(1.0)Pyridine0.234.5 23DMAP(0.05) 16552323*eq.＝当量，以7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III为基准(根据上述实施例12a＝0.061g；12b＝0.533g；12c＝0.200g；12d＝0.161g；12e＝0.057g；12f＝0.200g；12g＝0.203g；12h＝0.208g；12i＝0.196g；12j＝0.165g；12k＝0.165g；12l＝0.164g所用7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III的量)
表1关键词R2POCl＝ ＝双(2-氧-3-噁唑烷基)膦酰氯DCC＝二环己基碳二亚胺DMAP＝二甲氨基吡啶DlC＝二异丙基碳二亚胺ArCOCl＝2，4，6-三氯苯甲酰氯＝ CDl＝羰基二咪唑t-BuCOCl＝新戊酰氯1，2-DCE＝1，2-二氯乙烷NEt3＝三乙胺THF＝四氢呋喃PhCH3＝甲苯实施例12a在加入溶剂之前将所有试剂混合在一起。经色谱法分离得到108％(90mg)标题产物(含有约10％杂质)。NMR未发现原料化合物A。(此实施例中B的浓度为0.29M。在分离实验中当使用DCC(2.0当量)，DMAP(3.0当量)，DMAP·HCl(2.0当量)的CHCl3溶液和1.0当量B时，27小时后NMR显示B的摩尔浓度为0.07M时不能令反应迅速进行且不足以观察到标题产物的生成。
实施例12b在加入溶剂之前将所有试剂混合在一起。所得标题产物与原料化合物A的比率约为9∶1(经NMR显示)。经色谱法分离得到87％(0.63g)标题产物。
实施例12c在加入溶剂之前将所有试剂混合在一起。所得标题产物与原料化合物A的比率约为1∶1(经NMR显示)。1小时后不再进一步反应。
实施例12d在加入原料化合物A之前令活化的噁唑啉B形成1小时(通过向原料化合物B中加入R2POCl)。所得标题产物与原料化合物A的比率约为1∶6(经NMR显示)。5小时后观察到有极微弱的反应进行。
实施例12e在加入原料化合物A之前使CDI与原料化合物B反应1小时，当t＝4小时时加入DMAP。得到标题化合物与原料化合物A和杂质的比率约为1∶1∶1(经NMR显示)。在加入DMAP之前未发现有反应发生并且过度加热引起一些分解反应。
实施例12f最后加入ArCOCl。得到标题产物与原料化合物A的比率约为1∶1(经NMR显示)。1.5小时后未观察到有进一步反应进行。
实施例12g最后加入ArCOCl。得到标题产物与原料化合物A的比率约为1∶1(经NMR显示)。1小时后未观察到有进一步反应进行。
实施例12h最后加入ArCOCl。得到标题产物与原料化合物A的比率约为1∶1(经NMR显示)。3.5小时后未观察到有进一步反应进行。
实施例12i在加入原料化合物A之前预先制备混合酸酐1小时(通过向原料化合物B中加入t-BuCOCl)。得到标题产物与原料化合物A的比率约为1∶2(经NMR显示)。2小时后未观察到有进一步反应进行。
实施例12j
在加入原料化合物A之前预先制备混合酸酐1小时(通过向原料化合物B中加入t-BuCOCl)。得到标题产物与原料化合物A的比率约为3∶1(经NMR显示)。1小时后未观察到有进一步反应进行。
实施例12k在加入原料化合物A之前预先制备混合酸酐1小时(通过向原料化合物B中加入t-BuCOCl)。加入原料化合物A后1小时加入DMAP。得到标题产物与原料化合物A的比率约为1∶4(经NMR显示)。在未加入DMAP情况下未观察到有反应发生；在加入DMAP后2小时未观察到有进一步反应进行。
实施例12l在加入原料化合物A之前预先制备混合酸酐1小时(通过向原料化合物B中加入t-BuCOCl)。于16小时后55℃加入DMAP。得到标题产物与原料化合物A的比率约为1∶6(经NMR显示)。在加入DMAP之前未观察到有反应发生或者观察到有很微弱的反应。
实施例137-三乙基甲硅烷基13-[[(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑基]羰基]浆果赤霉素III的制备将(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸(65.0mg，0.243mmol)，7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III(0.142g，0.203mmol)，DCC(75mg，256mmol)和吡咯烷并吡啶(38mg，256mmol)加到火焰干燥的1英钱管形瓶中，用氩气清洗并部分溶于甲苯(1.0ml)。将所得黄色不均匀混合物于室温搅拌。3小时后TLC显示有标题产物生成(1∶1 EtOAc∶己烷，PMA/EtOH，U.V.)(于室温下搅拌之后，7小时和23小时TLC显示没有进一步的变化。)将反应混合物用乙酸乙酯(1ml)稀释，经一层硅藻土过滤并浓缩，得到0.275g油状黄色固体。1H NMR显示所需偶合标题产物和7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III的比率约为8∶1，偶合剂的副产物N-酰基脲存在的量约与7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III的量相同。
将固体于硅胶上用1∶2 EtOAc/己烷进行色谱分离，得到0.176g灰白色固体，产率约为91％。1H NMR显示所需偶合产物和N-酰基脲的比率约为11∶1。
实施例147-三乙基甲硅烷基13-[[(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑基]羰基]浆果赤霉素III的制备将(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑基羧酸(66.7mg，0.250mmol)，7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III(0.146g，0.208mmol)，DCC(79mg，0.383mmol)和4-吗啉代吡啶(41mg，0.250mmol)加到火焰干燥的1英钱管形瓶中，用氩气清洗并部分溶于甲苯(1ml)。将所得黄色不均匀混合物于室温搅拌。3小时后TLC显示有标题产物生成(1∶1 EtOAc∶己烷，PMA/EtOH，U.V.)(于室温下搅拌之后，7小时和23小时TLC显示没有进一步的变化。)将反应混合物用乙酸乙酯(1ml)稀释，经一层硅藻土过滤并浓缩，得到0.280g黄色固体。1H NMR显示为所需偶合标题产物且不含有7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III(尽管经TLC可观测到痕量)。偶合剂的副产物N-酰基脲与标题产物的比率约为1∶9。
将固体于硅胶上用1∶2 EtOAc/己烷进行色谱分离，得到0.196g白色固体，1H NMR显示偶合产物和N-酰基脲的比率约为15∶1。产率大于90％。M.P.＝139-142℃.[α]D＝-49.5°，[α]578＝-52.6°，[α]546＝-63.5°，[α]＝436＝-157.0°(c＝1.0，CHCl3)。
实施例15制备7-三乙基甲硅烷基13-[[(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑基]羰基]浆果赤霉素III，和7-三乙基甲硅烷基13-[[(4S-顺式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑基]羰基]浆果赤霉素III 制备实施例9顺反之比为3∶1的顺式和反式噁唑啉标题化合物(100mg)、7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III(219mg，0.3121mmol)、DCC(97mg)和DMAP(23mg)于甲苯(0.9ml)中的混合物。在80℃加热1小时后，有相当数量的7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III没有反应。再加入DMAP(97mg)和DCC(23mg)，混合物在80℃加热过夜。由TLC(己烷∶EtOAc 2∶1)可测出少量起始物。
反应混合物用二氯甲烷(20ml)稀释，向其中加入饱和碳酸氢钠溶液(10ml，水溶液)，水层用二氯甲烷萃取(2×10ml)，合并的有机相用无水MgSO4干燥和真空浓缩后，产品用HPLC(己烷∶乙酸乙酯4∶1)纯化，得到含二环己基脲(DCU)的标题化合物。产物重260mg，在将产品悬浮于乙酸乙酯后，过滤除去DCU。再一次HPLC纯化后给出117mg纯的反式标题化合物(40％)和45mg混合物(～2∶1的反式标题产物∶顺式标题产物(15％))。混合物用制备TLC纯化(己烷∶乙酸乙酯1∶1)得到11mg顺式标题产物。
实施例16制备紫杉醇(Taxol)将上述实施例10得到的偶联标题产物(0.102g，0.107mmol)称重后加入10ml烧瓶中，并溶于四氢呋喃(1.2ml)。然后加入甲醇(1.2ml)，使均相溶液冷至0℃。滴加HCl(水溶液，1N，0.59ml，0.59mmol)，在0℃搅拌澄清的均相溶液。0℃下搅拌3小时后，TLC(1∶1乙酸乙酯∶己烷，PMA/乙醇，U.V)表明仍有起始物。将澄清的均相溶液转移至4℃冷却室内，4℃下18小时后，TLC分析说明反应基本完全(1∶1乙酸乙酯∶己烷，PMA/乙醇，U.V)。得到下述化合物
将澄清溶液加热至室温，加入3.5ml饱和NaHCO3水溶液(可看到产生气泡)生成非均相混合物。加入5ml四氢呋喃和2ml水不能显著增加其溶解性。将非均相混合物于室温剧烈搅拌，1小时后，依然有非均相混合物存在。用7ml水和4ml四氢呋喃进一步稀释非均相混合物，得到的澄清均相混合物于室温下搅拌。
加入NaHCO32.5小时以后TLC表明仅有紫杉醇(2∶1乙酸乙酯/己烷，PMA/乙醇，U.V.)。将反应混合物用25ml乙酸乙酯和25ml水稀释并振荡，分层，水层用3×25ml乙酸乙酯萃取。合并的有机相用Na2SO4干燥、过滤和浓缩得到104mg浅米色透明状固体。1H NMR证实是紫杉醇。得到的固体在硅胶上色谱纯化(柱直径20mm×70mm长)，用2∶1乙酸乙酯/己烷至4∶1乙酸乙酯/己烷洗脱给出79.0mg标题化合物白色固体，产率86.4％。
实施例17制备7，13-双TES浆果赤霉素 把浆果霉素III(3.102g，5.290mmol)溶于无水DMF(21ml)，0℃下向其中加入咪唑(1.80g，26.5mmol)，接着再加入TESCL(4.45ml，26.5mmol)。室温下搅拌过夜，用EtOAC(350ml)稀释，用水(4×20ml)和盐水洗涤。干燥和真空浓缩有机相，残余物经色谱纯化(含20％乙酸乙酸的己烷)给出4.00g(89.1％)目的产物。
实施例18制备1-DMS-7，13-TES浆果赤霉素 把7，13-TES浆果赤霉素(2.877g，3.534mmol)溶于无水四氢呋喃(17.7ml)。0℃下在此溶液中加入咪唑(720.9mg，10.60mmol)，接着加入二甲基氯硅烷(91.18ml，10.60mmol)。在此温度下搅拌反应45分钟，然后用EtOAc(300ml)稀释，用水(4×20ml)洗涤。将有机相干燥和真空浓缩，残余物色谱分离(含10％乙酸乙酯的己烷)，给出2.632g(85.4％)目的产物。
实施例19制备4-羟基-7，13-双TES-1-DMS浆果赤霉素 把实施例18的甲硅烷基化的浆果赤霉素衍生物(815mg，0.935mmol)溶于THF(15.6ml)。0℃下在此溶液中加入红铝(Red-Al)(0.910ml，60％重量比，4.675mmol)。40分钟后，反应用饱和酒石酸钠溶液(7ml)骤停。5分钟后用EtOAc(250ml)稀释反应混合物。有机相用水和盐水洗涤并干燥，然后真空浓缩有机层，残余物经色谱纯化(含10-20％乙酸乙酯的己烷)，给出590mg(76.0％)C4-羟基浆果赤霉素目的类似物。
实施例20制备C4-环丙基酯-7，13-双TES-1-DMS浆果赤霉素
把实施例19的C4-羟基浆果赤霉素衍生物(196mg，0.236mmol)溶于无水THF(4.7ml)。在0℃下用LHMDS(0.283ml，1M，0.283mmol)处理此溶液，在此温度下30分钟以后加入环丙烷羰基氯(0.032ml，0.354mmol)。0℃下搅拌反应1小时，然后用饱和NH4Cl(3ml)骤停。反应混合物用EtOAc(100ml)萃取，用水和盐水洗涤。有机层经干燥和真空浓缩。得到残余物经色谱纯化(含10％乙酸乙酯的己烷)给出137mg(65％)目的产物。
实施例21制备C4-环丙烷基酯浆果赤霉素 把实施例20的7，13-TES-1-DMS-C4-环丙烷浆果赤霉素(673mg，0.749mmol)溶于无水乙腈(6ml)和THF(2ml)。于0℃下在此溶液中加入吡啶(2.25ml)，接着加入48％HF溶液(6.74ml)。0℃，30分钟后，加入TBAF(2.25ml，1M，2.25mmol)。加入附加量的TBAF，直至TLC确定起始物已耗尽。把反应混合物浓缩成浆液，再用EtOAc(350ml)稀释，用1N HCl、NaHCO3饱和溶液和盐水洗涤，真空浓缩。残留物经色谱纯化(含60％乙酸乙酯的己烷)给出366mg(80％)目的产物。
实施例22制备7-TES-4-环丙烷浆果赤霉素 把实施例21的4-环丙烷浆果赤霉素(46.6mg，0.076mmol)溶于无水DMF(1ml)，0℃下在此溶液中加入咪唑(20.7mg，0.305mmol)，再加入TESCl(0.0512ml，0.305mmol)，0℃下搅拌反应30分钟，再用EtOAc(50ml)稀释。反应混合物用水和盐水洗涤、干燥、真空浓缩，残余物经色谱纯化(含30-50％乙酸乙酯的己烷)给出36mg(65.1％)目的产物。
实施例23制备2’，7-双TES-4-环丙烷Paclitaxel
将实施例22化合物(30.0mg，0.413mmol)的THF(1ml)溶液冷却至-40℃，用LHMDS(0.062ml，0.062mmol)处理。5分钟后，加入β-内酰胺*(23.6mg，0.062mmol)的THF溶液(0.5ml)。反应在0℃下搅拌1小时，然后用饱和NH4Cl溶液1ml使反应骤停。反应混合物用EtOAc(40ml)萃取，用水和盐水洗涤。有机层经干燥和真空浓缩，残余物经色谱纯化(含20-30-60％乙酸乙酯的己烷)给出24.5mg(53.6％)目的产物，与5.1mg(17％)的起始物混在一起。
*制备此β-内酰胺的方法见USP5,175,315。
实施例24制备Paclitaxel的4-环丙烷酯
0℃下，将实施例23的产物(22.0mg，0.020mmol)的乙腈溶液(0.5ml)先用吡啶(0.060ml)，再用48％HF溶液(0.180ml)处理。反应混合物于5℃放置过夜，然后用EtOAc(30ml)稀释，用水和盐水洗涤。有机层经干燥和真空浓缩，残余物色谱纯化(含60％乙酸乙酯的己烷)给出10.0mg(57.2％)目的产物。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.10-8.06(m，2H)，7,76-7.26(m，13H)，7.04(d，J＝9.1Hz，1H)，6.27(s，1H)，6.14(m，1H)，5.82(d，J＝9.1Hz，1H)，5.65(d，J＝6.9Hz，1H)，4.85(m，2H)，4.39(m，1H)，4.19(ABq，J＝8.4Hz2H)，3.80(d，J＝6.9Hz，1H)，3.59(d，J＝4.8Hz，1H)，2.60-1.13(m，24H，包括单峰2.23，1.77，1.66，1.23，1.14，各3H).
HRMS C49H54NO14(MH+)计算值880.3544，测定值880.3523实施例25制备7，13-TES-1-DMS-4-环丁烷酯浆果赤霉素 用LHMDS(0.178ml，1M，0.178mmol)于0℃下处理实施例19产物(113.6mg，0.137mmol)的THF溶液(2.6ml)。0℃下30分钟后，加入环丁基羰基氯(24.4mg，0.206mmol)。反应在0℃下搅拌1小时，用NH4Cl饱和溶液(2ml)使反应停止。反应混合物用EtOAc(75ml)萃取，用水和盐水洗涤。有机层经干燥和真空浓缩，残余物经色谱纯化(含10％乙酸乙酯的己烷)给出80mg(64.1％)目的产物。
实施例26制备4-环丁基浆果赤霉素 0℃下，在实施例25化合物的乙腈溶液(3ml)中先加入无水吡啶(0.61ml)，再加入48％HF(1.83ml)。0℃下1小时以后，加入TBAF(0.61ml，1M，0.61mmol)。再加入附加量的TBAF直到所有的起始物全部耗尽。然后部分除去溶剂，残余物用EtOAc(150ml)稀释，用1N HCl和NaHCO3饱和溶液洗涤。有机层经干燥和直空浓缩，残余物色谱纯化(含60％乙酸乙酯的己烷)给出95.6mg(75％)目的产物。
实施例27制备7-TES-4-环丁基酯浆果赤霉素
把实施例26的4-环丁基浆果赤霉素(85mg，0.136mmol)溶于无水DMF(1.4ml)，于0℃下向此溶液中加入咪唑(36.9mg，0.543mmol)和TESCl(91.2μl，0.543mmol)。反应混合物用EtOAc(75ml)稀释，用水和盐水洗涤。有机层经干燥和真空浓缩残余物色谱纯化(含40％乙酸乙酯的己烷)给出74mg(73.6％)目的产物。
实施例28制备2’，7-TES-4-环丁基Paclitaxel 把实施例27的7-TES-4-环丁基酯浆果赤霉素(41mg，0.055mmol)溶于THF(1ml)，将此溶液冷却至-40℃，并先用LHMDS(0.083ml，1M，0.083mmol)，再用实施例23的β-内酰胺(31.7mg，0.083mmol)的THF溶液(0.5ml)处理。反应于0℃放置1小时后用NH4Cl(2ml)骤停。反应混合物用EtOAc(50ml)萃取，用水和盐水洗涤，然后干燥和真空浓缩有机层，残余物色谱纯化(含20-30％乙酸乙酯的己烷)给出56mg(90.2％)目的产物。
实施例29制备4-环丁基Paclitaxel 把实施例28的2’，7-TES-4-环丁基紫杉醇(47mg，0.042mmol)溶于乙腈(1ml)，0℃下在此溶液中先加入吡啶(0.125ml)，再加入48％HF(0.375ml)。反应于5℃放置过夜。然后该反应用EtOAc(50ml)稀释，用1N HCl，NaHCO3饱和溶液和盐水洗涤。有机相经干燥和真空浓缩，残余物经色谱纯化(含60％乙酸乙酯的己烷)给出31.8mg(84.9％)的目的产物。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.15-8.12(m，2H)，7.73-7.26(m，13H)，6.96(d，J＝9.0Hz，1H)，6.26(s，1H)，6.17(m，1H)，5.80(d，J＝9.0Hz，1H)，5.66(d，J＝7.1Hz，1H)，4.83(m，2H)，4.41(m，1H)，4.26(ABq，J＝8.4Hz.2H)，3.78(d，J＝7.0Hz，1H)，3.57(d，J＝5.2Hz，1H)，3.42(m，1H)，2.61-1.14(m，25H，包括单峰2.23，1.76，1.68，1.23，1.14，各3H).
HRMS C50H56NO14(MH+)计算值894.3701，测定值894.3669实施例30制备浆果赤霉素的7，13-TES-1-DMS-4-环戊基酯 0℃下，用LHMDS(0.230ml，1M，0.230mmol)处理实施例19化合物(147mg，0.177mmol)的THF溶液(3.5ml)。30分钟后加入环戊基羰基氯(32.3μl，0.266mmol)。在该温度下搅拌反应1小时后，用NH4Cl饱和溶液使反应停止。反应混合物经萃取、洗涤、干燥和真空浓缩，残留物色谱纯化(含10％乙酸乙酯的己烷)给出90mg(55％)目的产物。
实施例31制备4-环戊基浆果赤霉素
将实施例30的产物(75mg，0.081mmol)的乙腈溶液(1.6ml)于0℃下先用吡啶(0.24ml)，再用48％HF(0.72ml)处理。反应在0℃搅拌1小时，然后加入TBAF(0.405ml，1M，0.405mmol)，1小时后加入5当量上述试剂。反应混合物用EtOAc(100ml)稀释，用1N HCl、NaHCO3饱和溶液和盐水洗涤，有机相经干燥和真空浓缩。残余物色谱纯化(含50％乙酸乙酯的己烷)给出44mg(85％)目的产物。
实施例32制备7-TES-4-环戊基酯浆果赤霉素
把4-环戊基浆果赤霉素(35mg，0.055mmol)溶于无水DMF(1ml)，0℃下在此溶液中加入咪唑(14.9mg，0.219mmol)，接着再加入TESCl(36.8μl，0.219mmol)。反应混合物在0℃搅拌30分钟，用EtOAc(50ml)稀释。有机相经洗涤、干燥和真空浓缩，残余物色谱纯化(含40％乙酸乙酯的己烷)给出31mg(75％)目的产物。
实施例33制备2’，7-TES-4-环戊基酯浆果赤霉素 把实施例32产品(24.5mg，0.0324mmol)的THF溶液(0.6ml)于-40℃先用LHMDS(0.049ml，1M，0.049mmol)，再用实施例23的β-内酰胺(18.6mg，0.049mmol)的THF溶液(0.3ml)处理。反应可0℃下搅拌1小时，然后用NH4Cl饱和溶液骤停。反应混合物用EtOAc(35ml)萃取、洗涤、干燥和真空浓缩。残余物色谱纯化(含20-30-50％乙酸乙酯的己烷)给出15.5mg(42％)目的产物，与7.8mg(31.8％)未反应起始物在一起。
实施例34制备4-环戊基酯Paclitaxel 于0℃下，先用吡啶(0.035ml)，再用48％HF溶液(0.103ml)处理实施例33产品(13mg，0.0115mmol)的乙腈溶液(0.3ml)，反应于5℃放置过夜。然后反应混合物用EtOAc(30ml)稀释，用1NHCl、NaHCO3和盐水洗涤，有机层经干燥和真空浓缩，残余物色谱纯化(含50％乙酸乙酯的己烷)给出7.3mg(70.3％)目的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ 8.17-8.14(m，2H)，7.74-7.26(m，13H)，6.90(d，J＝8.9Hz，1H)，6.27(s，1H)，6.20(m，1H)，5.75(d，J＝8.9Hz，1H)，5.69(d，J＝7.0Hz，1H)，4.79(m，2H)，4.44(m，1H)，4.24(AB q，J＝8.4Hz，2H)，3.81(d，J＝7.0Hz，1H)，3.46(d，J＝4.7Hz，1H)，3.06(m，1H)，2.56-1.15(m，27H，包括单峰2.24，1.82，1.68，1.33，1.15，各3H).HRMS，C51H57NO14Na(MNa+)计算值930.3677，测定值930.3714实施例35制备带有呋喃侧链的2’，7-甲硅烷基化的-4-环戊烷紫杉烷(taxane)
将实施例22产品(75.8mg，0.104mmol)的THF溶液(2ml)于-40℃用LHMDS(0.136ml，1M，0.136mmol)和β-内酰胺*(57.3mg，0.156mmol)处理。反应于0℃下搅拌1小时，然后用NH4Cl饱和溶液(1ml)使反应骤停。反应混合物用EtOAc萃取、洗涤和干燥，以及真空浓缩，残余物色谱纯化(含20％乙酸乙酯的己烷)给出113mg(100％)目的产物。
*制备β-内酰胺的方法见USP5,227,400。
实施例36制备带有呋喃侧链的4-环丙基酯紫杉烷 实施例35产品的乙腈溶液(2ml)在0℃先用吡啶(0.27ml)，再用48％HF(0.81ml)处理，反应于5℃放置3小时，用EtOAc(75ml)稀释，用1N HCl、NaHCO3饱和溶液和盐水洗涤，干燥和真空浓缩，残余物色谱纯化(含50-60％乙酸乙酯的己烷)给出68mg(88.2％)目的产物。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.09-8.06(m，2H)，7.62-7.37(m，3H)，7.26(s，1H)，6.37-6.30(m，3H)，6.19(m，1H)，5.65(d，J＝7.0Hz，1H)，5.37(d，J＝9.9Hz，1H)，5.23(d，J＝9.9Hz，1H)，4.82(d，J＝8.3Hz，1H)，4.76(d，J＝4.1Hz，1H)，4.42(m，1H)，4.18(ABq，J＝8.4Hz，2H)，3.85(d，J＝6.9Hz，1H)，3.37(d，J＝5.4Hz，1H)，2.55-1.01(m，33H，包括单峰2.23，1.90，1.66，1.26，1.14各3H；1.33，9H).HRMS，C45H56NO16(MN+)计算值866.3599，测定值866.3569实施例37制备带有呋喃侧链的2’，7-甲硅烷基化的-4-环丁基酯紫杉烷
实施例22产物的THF溶液(0.8mg)于-40℃用LHMDS(0.050ml，1M，0.050mmol)处理，2分钟后，加入实施例35的β-内酰胺(18.2mg，0.050mmol)。反应混合物于0℃搅拌1小时，用NH4Cl饱和溶液停止反应。反应混合物经萃取、洗涤、干燥和真空浓缩，残余物色谱纯化(含20％乙酸乙酯的己烷)给出33.0mg(89.4％)目的产物。
实施例38制备带有呋喃基侧链的4-环丁基酯紫杉烷 将实施例37产品(30.0mg，0.027mmol)的乙腈溶液(1ml)于0℃下先用吡啶(0.081ml)，接着再用48％HF(0.243ml)处理。反应于5℃放置过夜，用EtOAc(50ml)稀释，用1N HCl、NaHCO3饱和溶液和盐水洗涤。然后干燥和真空浓缩有机层，残余物色谱纯化(含60％乙酸乙酯的己烷)得到22mg(92.4％)目的产物。
1H NMR(300HMz，CDCl3)δ8.13-8.10(m，2H)，7.62-7.45(m，3H)，6.42-6.38(m，2H)，6.30(s，1H)，6.19(m，1H)，5.65(d，J＝7.1Hz，1H)，5.34(d，J＝9.6Hz，1H)，5.18(d，J＝9.8Hz，1H)，4.90(d，J＝7.7Hz，1H)，4.73(dd，J＝2.0Hz，J′＝5.7Hz，1H)，4.45(m，1H)，4.25(ABq，J＝8.4Hz，2H)，3.80(d，J＝7.0Hz，1H)，3.50(m，1H)，3.27(d，J＝5.8Hz，1H)，2.61-1.15(m，34H，包括单峰2.24，1.86，1.68，1.26，1.15，各3H；1.33，9H).
实施例39制备7，13-TES-1-DMS-4-丁酸酯浆果赤霉素 把实施例19的C4-羟基浆果赤霉素衍生物(181mg，0.218mmol)溶于无水THF(4.4ml)，将此溶液于0℃下用LHMDS(0.262ml，1M，0.262mmol)处理，在此温度下30分钟以后，加入丁酰氯(0.034ml，0.33mmol)。反应于0℃搅拌1小时，用饱和NH4Cl(3ml)骤停。反应混合物用EtOAc(100ml)萃取，用水和盐水洗涤。有机相经干燥和真空蒸发。得到的残余物色谱纯化(含10％乙酸乙酯的己烷)，给出138mg(70.3％)目的产物。
实施例40制备C4-丁酸酯浆果赤霉素 把实施例39的7，13-TES-1-DMS-4-丁酸酯浆果赤霉素(527mg，0.586mmol)溶于无水乙腈(19.5ml)，0℃在此溶液中先加入吡啶(1.95ml)，再加入48％HF溶液(5.86ml)。0℃，30分钟以后，反应混合物于5℃放置过夜。然后用EtOAc(400ml)稀释，用1N HCl，NaHCO3饱和溶液和盐水洗涤并真空浓缩。残余物色谱纯化(含60％乙酸乙酯的己烷)给出286mg(80％)目的产物。
实施例41制备7-TES-4-丁酸酯浆果赤霉素
把实施例40的4-丁酸酯浆果赤霉素(286mg，0.466mmol)溶于无水DMF(2.3ml)，0℃下，在此溶液中加入咪唑(127mg，1.86mmol)，接着再加入TESCl(0.313ml，1.86mmol)。反应于0℃搅拌30分钟，然后用EtOAc(100ml)稀释。反应混合物用水和盐水洗涤，然后真空浓缩。残余物色谱纯化(含30-50％乙酸乙酯的己烷)得到283.3mg(83.5％)目的产物。
实施例42制备2’，7-双TES-C4-丁酸酯Paclitaxel 把实施例41产物(300.6mg，0.413mmol)的THF(8.3ml)溶液冷却至-40℃，用LHMDS(0.619ml，0.619mmol)处理，5分钟后，加入实施例23的β-内酰胺(236mg，0.619mmol)的THF溶液(4.1ml)。反应于0℃搅拌1小时，然后用饱和NH4Cl溶液(3ml)骤停。反应混合物用EtOAc(150ml)萃取，用水和盐水洗涤，有机相经干燥和真空浓缩，残余物色谱提纯(含20-30-60％乙酸乙酯的己烷)给出377mg(82.3％)目的产物。
实施例43制备C4-丁酸酯Paclitaxel 实施例42产物(366mg，0.334mmol)的乙腈溶液(15.3ml)于0℃下先用吡啶(0.926ml)，再用48％HF溶液(2.78ml)处理。反应混合物于5℃放置过夜，然后用EtOAc(200ml)稀释，用水和盐水洗涤。有机相经干燥和真空浓缩，残余物色谱纯化(含60％乙酸乙酯的己烷)给出274mg(94.5％)目的产物。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ 8.12-8.09(m，2H)，7.71-7.32(m，13H)，7.00(d，J＝8.9Hz，1H)，6.25(s，1H)，6.16(m，1H)，5.73(d，J＝8.8Hz，1H)，5.64(d，J＝7.0Hz，1H)，4.85(d，KJ＝9.4Hz，1H)，4.76(m，1H)，4.38(m，1H)，4.20(ABq，J＝8.4Hz，2H)，3.77(d，J＝6.9Hz，1H)，3.70(d，J＝4.3Hz，1H)，2.66-0.85(m，26H，包括单峰2.20，1.76，1.65，1.21，1.11，各3H，triplet at 0.88，3H).
实施例44制备7，13-TES-1-DMS-4-碳酸乙酯浆果赤霉素
把实施例19产物(205mg，0.247mmol)的THF溶液(5ml)于0℃用LHMDS(0.296ml，1M，0.296mmol)处理。0℃，30分钟以后，加入氯甲酸乙酯(0.0354ml，0.370mmol)。反应于0℃搅拌1小时，用NH4Cl饱和溶液(3ml)停止反应。反应混合物用EtOAc(100ml)萃取，用水和盐水洗涤、干燥并真空浓缩有机相。残余物色谱纯化(含10％乙酸乙酯的己烷)，给出155mg(69.6％)目的产物。
实施例45制备C4-碳酸乙酯浆果赤霉素
在0℃下，于实施例44产物(152mg，0.169mmol)的乙腈溶液中(5.6ml)先加入无水吡啶(0.56ml)，再加入48％HF(1.69ml)。0℃，30分钟后，反应混合物于5℃放置过夜。然后残余物用EtOAc(150ml)稀释，用1NHCl和NaNCO3饱和溶液洗涤。有机层经干燥和真空浓缩，残余物色谱纯化(含60％乙酸乙酯的己烷)给出99mg(95.4％)目的产物。
实施例46制备7-TES-C4-碳酸乙酯浆果赤霉素 把实施例45的4-碳酸乙酯浆果赤霉素(95mg，0.154mmol)溶于无水DMF(0.771ml)。0℃下，在此溶液中加入咪唑(42mg，0.617mmol)和TESCl(104μl，0.617mmol)，反应混合物用EtOAc(100ml)稀释，用水和盐水洗涤。干燥和真空浓缩有机层。残余物色谱纯化(含40％乙酸乙酯的己烷)给出95mg(84.4％)目的产物。
实施例47制备2’，7-TES-C4-碳酸乙酯Paclitaxel
把实施例46的7-TES-4-碳酸乙酯浆果赤霉素(93.4mg，0.128mmol)溶于THF(2.6ml)。此溶液冷却至-40℃，并先后用LHMDS(0.192ml，1M，0.192mmol)，和实施例23的β-内酰胺(73.1mg，0.192mmol)的THF溶液(1.3ml)处理。反应于0℃放置1小时，用NH4Cl(3ml)使反应停止。反应混合物用EtOAc(100ml)萃取，用水和盐水洗涤，然后干燥和真空浓缩有机层，残余物色谱纯化(含20-30％乙酸乙酯的己烷)给出118mg(83.0％)目的产物。
实施例48制备C4-碳酸乙酯Paclitaxel
把实施例47的2’，7-TES-4-碳酸乙酯浆果赤霉素(114mg，0.103mmol)溶于乙腈(5.1ml)，0℃下，在此溶液中加入吡啶(0.285ml)，再加入48％HF(0.855ml)。反应于5℃放置过夜，然后用EtOAc(100ml)稀释，用1N HCl、NaHCO3饱和溶液和盐水洗涤。有机相经干燥和真空浓缩，残余物色谱纯化(含60％乙酸乙酯的己烷)给出75mg(82.8％)目的产物。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.09-8.06(m，2H)，7.75-7.24(m，13H)，7.14(d，J＝9.0Hz，1H)，6.24(s，1H)，6.10(m，1H)，5.79(d，J＝7.1Hz，1H)，5.66(d，J＝6.9Hz，1H)，4.95(d，J＝8.2Hz，1H)，4.75(m，1H)，4.41-4.16(m，5H)，3.89(d，J＝4.3Hz，1H)，3.81(d，J＝6.9Hz，1H)，2.56-1.11(m，23H，包括单峰2.21，1.75，1.65，1.18，1.11，各3H，triplet at 1.22，3H).
实施例49制备带有呋喃基侧链的2’，7-甲硅烷基化的-C-4-丁酸酯紫杉烷
-40℃，用LHMDS(0.548ml，1M，0.548mmol)处理实施例41的7-甲硅烷基-4-丁酸酯浆果赤霉素(266mg，0.365mmol)的THF溶液(7.3ml)。2分钟后，加入实施例35的β-内酰胺(201mg，0.548mmol)的THF溶液(3.6ml)。反应混合物于0℃搅拌1小时，用NH4Cl饱和溶液骤停。反应混合物经萃取、洗涤、干燥和真空浓缩，残余物色谱纯化(含20％乙酸乙酯的己烷)给出399.0mg(99％)目的产物。
实施例50制备带有呋喃基侧链的C-4-丁酸酯紫杉烷 实施例49产物(399.0mg，0.364mmol)的乙腈溶液(18.2ml)于0℃先后用吡啶(1.01ml)和48％HF(3.03ml)处理。反应于5℃放置过夜，用EtOAc(200ml)稀释，用1N HCl，NaHCO3饱和溶液和盐水洗涤。干燥和真空浓缩有机相，残余物色谱纯化(含60％乙酸乙酯的己烷)给出305mg(96.5％)目的产物。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.05-8.02(m，2H)，7.56-7.35(m，4H)，6.33-6.26(m，3H)，6.15(m，1H)，5.59(d，J＝7.0Hz，1H)，5.40(d，J＝9.7Hz，1H)，5.26(d，J＝9.7Hz，1H)，4.85(d，J＝9.5Hz，1H)，4.66(m，1H)，4.39(m，1H)，4.17(ABq，J＝8.4Hz，2H)，3.76(d，J＝6.9Hz，1H)，3.64(J＝6.0Hz，1H)，2.65-0.91(m，35H，包括单峰2.18，1.82，1.62，1.21，1.09，各3H1.28，9H，triplet at 0.94，3H).
实施例51制备7，13-双TES-1-DMS-C-4-碳酸甲酯浆果赤霉素 把实施例19化合物(118mg，0.150mmol)溶于THF(3ml)，0℃下在此溶液中加入LHMDS(0.180ml，1M，0.180mmol)。30分钟后，加入氯甲酸甲酯(0.174ml，0.225mmol)。再过30分钟，用NH4Cl使反应停止。反应混合物用EtOAc(100ml)萃取，有机层用水(10ml×2)和盐水(10ml)洗涤。有机层经干燥和真空浓缩。残余物色谱纯化(5-10％EtOAc-己烷)给出104mg(82.1％)目的产物。
实施例52制备C-4-碳酸甲酯浆果赤霉素 把实施例51化合物(89.0mg，0.105mmol)溶于CH3CN(3.5ml)，0℃下在此溶液中加入吡啶(0.30ml)，接着再加入48％HF(1.05ml)。反应于0℃搅拌6小时，然后用EtOAc(100ml)稀释，反应混合物用1N HCl(10ml)，NaHCO3饱和溶液(10ml×3)洗涤，有机相经干燥和真空浓缩。残余物色谱纯化(含50％乙酸乙酯己烷)给出70mg(100％)目的产物。
实施例53制备7-TES-C-4-碳酸甲酯浆果赤霉素
把实施例52化合物(115.5mg，0.192mmol)溶于DMF(0.960ml)，0℃下，在此溶液中加入咪唑(52.2mg，0.767mmol)，接着再加入TESCl(0.128ml，0.767mmol)。30分钟后，反应混合物用EtOAc(100ml)稀释，有机相用水(10ml×2)和盐水(10ml)洗涤，然后干燥并真空浓缩有机相，残余物色谱分离(含40％乙酸乙酯的己烷)给出133mg(96.8％)目的产物。
实施例54制备带有呋喃基侧链的2’，7-甲硅烷基化的-C4-碳酸甲酯紫杉烷 在-40℃，用LHMDS(0.350ml，1M，0.350mmol)处理实施例53的7-甲硅烷基-4-碳酸甲酯浆果赤霉素(227.8mg，0.318mmol)的THF溶液(6.4ml)。2分钟后，加入实施例35的β-内酰胺(140mg，0.382mmol)THF溶液(3.6ml)。反应混合物于0℃搅拌1小时，用NH4Cl饱和溶液停止反应。反应混合物经萃取、洗涤、干燥和真空浓缩，残余物色谱纯化(含20％乙酸乙酯的己烷)给出332.0mg(96.3％)目的产物。
实施例55制备带有呋喃基侧链的C-4-碳酸甲酯紫杉烷 实施例54(332.0mg，0.307mmol)的乙腈溶液(15.3ml)于0℃下先后用吡啶(1.7ml)和48％HF(5.1ml)处理。反应于5℃放置过夜，用EtOAc(200ml)稀释，用1N HCl，NaHCO3饱和溶液和盐水洗涤，然后干燥和真空浓缩有机相。残余物色谱分离(含60％乙酸乙酯的己烷)给出260mg(99％)目的产物。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.05-8.02(m，2H)，7.53-7.37(m，4H)，6.29-6.15(m，4H)，5.62(d，J＝6.9Hz，1H)，5.40(d，J＝9.6Hz，1H)，5.30(d，J＝9.6Hz，1H)，4.91(d，J＝9.3Hz，1H)，4.68(m，1H)，4.34(m，1H)，4.16(ABq，J＝8.5Hz，2H)，3.88(s，3H)，3.80(d，J＝8.9Hz，1H)，3.69(d，J＝5.5Hz，1H)，2.63-1.08(m，28H，包括单峰2.18，1.85，1.60，1.20，1.08，各3H，1.26，9H).
实施例56制备2’，7-甲硅烷基化的-C4-碳酸甲酯Paclitaxel
把实施例53化合物(113.3mg，0.158mmol)溶于THE(3.16ml)，-40℃下在此溶液中加入LHMDS(0.237ml，1M，0.237mmol)，接着加入实施例23的β-内酰胺(90.43mg，0.237mmol)。按照上述同样的方法，得到159mg(91.6％)目的产物。
实施例57制备C4-碳酸甲酯Paclitaxel 把实施例56化合物(149mg，0.136mmol)溶于CH3CN(6.8ml)，0℃下，在此溶液中加入吡啶(0.377ml)，再加入48％HF(1.132ml)。按照上述相同的方法，得到103.4mg(87.6％)目的产物。
实施例58制备C-4环丙酯-7-TES-13-oxayol-浆果赤霉素 室温下，在实施例22产物(72mg，0.099mmol)和实施例6产物(29.4mg，0.110mmol)于甲苯(2ml)的悬浮液中加入DMAP(13.4mg，0.110mmol)。10分钟后，加入DCC(22.6mg，0.110mmol)。反应混合物于室温搅拌2小时，然后通过Celite过滤，用EtOAc淋洗，然后真空浓缩有机相。残余物色谱纯化(含30％EtOAc的己烷)给出产率100％(99mg)的目的产物。
1H NMR(CDCl3)δ8.27-8.24(m，2H)，8.03-7.26(m，13H)，6.42(s，1H)，6.08(m，1H)，5.67(d，J＝7.0Hz，1H)，5.60(d，J＝6.0Hz，1H)，4.92(d，J＝6.1Hz，1H)，4.87(d，J＝8.3Hz，1H)，4.50(dd，J＝6:6Hz，J′＝10.3Hz，1H)，4.16(ABq，J＝8.3Hz，2H)，3.85(d，J＝6.9Hz，1H)，2.56-0.52(m，39H，包括单峰2.15，2.02，1.68，1.20，1.18，各3H，triplet at 0.92，9H).HRMS，C55H66NO13Si(MH+)计算值976.4303，测定值976.4271。
实施例59制备Paclitaxel的C-4环丙酯 0℃下，在实施例58产物(83.4mg，0.084mmol)于THF(0.8ml)和甲醇(0.8ml)的溶液中加入1N HCl(0.42ml)。反应于4℃放置14小时。将反应混合物加热至室温，加入NaHCO3饱和溶液(2.1ml)。反应于室温搅拌3小时，然后倾入水中。用EtOAc(4×20ml)萃取反应混合物。合并的有机相经干燥和真空浓缩，残余物色谱纯化(60％EtOAc/己烷)给出产率为60％的目的产物(45mg)。
实施例60
在一烘箱干燥用氩气吹扫过的25ml烧瓶中，把BMS-189892-01(485mg，3.0mmol)(注解1)溶于无水甲醇(5.0ml)。0℃下用注射器向此烧瓶中滴加三甲基氯代甲硅烷(326mg，3.0mmol)。反应混合物于0℃搅拌5分钟，然后移去冰-水浴，反应混合物在室温下再搅拌14小时。将反应混合物真空浓缩并在高真空下干燥定量地生成1，为白色泡沫体(691mg，100％)。
1.Chem.Abs34408-064-33实施例61 在-25ml烧瓶中将上面得到的1(691mg，3.0mmol)溶于饱和NaHCO3(10ml)，室温下，在此溶液中加入氯甲酸苄酯(512mg，3.0mmol)。反应混合物于室温搅拌14小时，在此期间形成白色沉淀。滤出白色沉淀，用水(2×5ml)和己烷(2×5ml)洗涤，高真空下干燥固体给出2，为米色固体(745mg，86％)。
实施例62 在-用烘箱干燥、氩气吹扫过的，配备有迪安-斯达克分水器的25ml烧瓶中，把2(745mg，2.58mmol)溶于甲苯(12ml)和DMF(2.5ml)，在此溶液中加入PPTS(502mg，2.0mmol)。反应混合物在搅拌下加热回流28小时。混合物用乙酸乙酯稀释(50ml)，用H2O(20ml)洗涤。水相用乙酸乙酯萃取(50ml)，合并的有机馏份用MgSO4干燥、过滤、真空浓缩得到粗产品3(630mg，77％)，为深色油。粗产品3用柱色谱纯化(硅胶，2×12cm，10％乙酸乙酯/己烷为洗脱剂)得到3，为无色粗稠的油(540mg，66％)。
实施例63
在25ml烧瓶中，把3(540mg，2.1mmol)溶于THF(6ml)和H2O(3ml)，室温下向此溶液一次加入固体LiOH(82mg，2.0mmol)。得到的混合物于室温搅拌0.5小时。室温下滴加HCl(2.4ml，1N溶液)停止反应，然后混合物倾入H2O(10ml)，用CH2Cl2(4×15ml)萃取，用MgSO4干燥，过滤，真空浓缩得到粗产品4(420mg，82％)，石黄色油，可直接用于下步反应而无须进一步纯化。
实施例64 在-经烘箱干燥、氩气吹扫过的25ml烧瓶中，于室温下将4(140mg，0.54mmol)、BMS-184260-01(346mg，04.495mmol)和N，N-二甲氨基吡啶(66mg，0.54mmol)悬浮于甲苯(10ml)。将悬浮液搅拌20分钟后，一次加入1，3-二环己基碳化二亚胺(DCC)(111mg，0.54mmol)，混合物于室温下搅拌2小时。接着把N，N-二甲氨基吡啶(66mg，0.54mmol)和1，3-二环己基碳化二亚胺(DCC)(111mg，0.54mmol)再次加入反应混合物中。把反应混合物搅拌14小时，将其倾入饱和NH4Cl(20ml)并用乙酸乙酯(100ml)萃取。通过Celite过滤有机萃取液，然后用乙酸乙酯(4×50ml)淋洗Celite塞。合并的有机相经MgSO4干燥、过滤和真空浓缩给出粗制的5(582mg，125％)。粗制品用柱色谱纯化(硅胶，2×12cm。5％乙酸乙酯/己烷为洗脱液)得到5(413mg，89％)，为无色油。
实施例65 在-烘箱干燥、氩气吹扫过的25ml烧瓶中，把5(92mg，0.094mmol)溶于THF(2.0ml)和甲醇(2.0ml)，0℃下在此烧瓶中加入HCl水溶液(0.5ml，2.0N溶液)，然后将此溶液置于6℃冷浴中14小时。使反应混合物温至室温，在烧瓶中加入饱和NaHCO3(5.0ml)。然后将反应混合物于室温搅拌3小时。将混合物倾入H2O(10ml)，用CH2Cl2萃取(4×20ml)。合并的有机相用MgSO4干燥、过滤、真空浓缩给出粗制BMS-184060-01(70mg)，为白色固体。在溶解于CH3OH(3.0ml)的粗制BMS-184060-01热溶液中加入H2O(～1.0ml)至到溶液出现混浊。溶液于冰箱中过夜进行冷却，用中等多孔玻璃过滤器滤出白色固体，高真空干燥给出最终产物(51mg，64％)，为白色固体。
实施例66制备带有C-13(Oxayolyl-呋喃基)侧链的C-4-环丙基酯-7-TES浆果赤霉素 室温下在实施例22产物(92.3mg，0.127mmol)和实施例63产物(36.0mg，0.140mmol)于甲苯(2.5ml)的悬浮液中加入DMAP(17.1mg，0.140mmol)。10分钟后，再加入DCC(28.8mg，0.140mmol)。室温2小时后加入第二剂量的试剂。反应于室温搅拌过夜。然后过滤反应混合物并用EtOAc洗涤。有机相真空浓缩。残余物色谱纯化(30％EtOAc/己烷)以100％产率得到目的产物(125mg)。
1H NMR(CDCl3)δ 8.20-7.80(m，4H)，7.62-7.39(m，7H)，6.38(m，3H)，6.08(m，1H)，5.67(m，2H)，5.20(d，J＝5.9Hz，1H)，5.20(d，J＝5.9Hz，1H)，4.88(d，J＝9.2Hz，1H)，4.49(dd，J＝6.6Hz，J′＝10.2Hz，1H)，4.16(ABq，J＝8.4Hz，2H)，3.86(d，J＝6.8Hz，1H)，2.54-0.52(m，39H，包括单峰2.14，2.03，1.67，1.21，1.15，各3H，triplet at 0.91，9H).HRMS，C53H54NO14Si(MH+)计算值966.4096测定值966.4134实施例67制备带有呋喃侧链的C-4环丙基酯紫杉烷 将实施例66化合物(69mg，0.0715mmol)溶于THF(1.4ml)和甲醇(1.4ml)。然后在0℃用1N HCl(0.716ml)处理该溶液。4℃下17小时后，使反应混合物温热至室温并用NaHCO3饱和溶液(6.5ml)处理。室温6小时后，反应混合物用EtOAc(4×20ml)萃取，合并的有机相真空浓缩，残留物色谱提纯(60％乙酸乙酯/己烷)得到目的产物(37.4mg)，产率60％。
1H NMR(CDCl3)δ8.12-8.09(m，2H)，7.74-7.26(m，7H)，6.85(d，J＝9.3Hz，1H)，6.39(s，2H)，6.30(s，1H)，6.20(m，1H)，5.93(d，J＝9.3Hz，1H)，5.67(d，J＝7.0Hz，1H)，4.88(s，1H)，4.82(d，J＝7.7Hz，1H)，4.42(m，1H)，4.20(ABq，J＝8.5Hz，2H)，3.85(d，J＝6.8Hz，1H)，2.54-0.88(m，24H，包括单峰2.23，1.88，1.67，1.24，1.14，各3H).
HRMS，C47H52NO15(MH+)计算值870.3337测定值870.3307实施例68制备C-4环丙基酯-2’-碳酸乙酯 在0℃下，于实施例24产物(1.333g，1.52mmol)的二氯甲烷(22.8ml)溶液中加入EtPr2N(1.586ml，9.10mmol)，接着再加入EtOCOCl(0.87ml，9.10mmol)。反应于0℃搅拌6小时。然后反应混合物用EtOAc(200ml)稀释，用水(20ml×3)和盐水洗涤。干燥并真空浓缩有机相。残余物色谱纯化(50％EtOAC/己烷)以88.8％的产率得到目的产物(1.281g)，与86mg起始原料(6.5％)在一起。
1H NMR(CDCl3)δ8.12-8.10(m，2H)，7.76-7.26(m，13H)，6.90(d，J＝9.4Hz，1H)，6.27(m，2H)，6.01(dd，J＝2.1Hz，J′＝9.3Hz，1H)，5.68(d，J＝7.0Hz，m 1H)，5.55(d，J＝2.4Hz，1H)，4.83(d，J＝8.2Hz，1H)，4.44(m，1H)，4.23(m，4H)，3.83(d，J＝7.0Hz，1H)，2.53-0.87(m，27H，包括单峰2.22，1.95，1.87，1.67，1.26，各3H，triplet at 1.32，3H).
HRMS，C52H58NO16(MH+)计算值952.3756测定值952.3726实施例69制备C-4环丙烷-2’-碳酸乙酯-7-取代的前体 把实施例68的2’-碳酸乙酯(53mg，0.056mmol)溶于DMSO(0.5ml)，再加入Ac2O(0.5ml)。反应于室温搅拌14小时。反应混合物用EtOAc(50ml)稀释，用水(5ml×3)、NaHCO3饱和溶液和盐水洗涤。然后干燥和真空浓缩有机相。残余物色谱纯化(40％EtOAc/己烷)以100％的产率得到56.3mg目的产物。
1H NMR(CDCl3)δ8.10-8.07(m，2H)，7.76-7.26(m，13H)，6.90(d，J＝9.4Hz，1H)，6.56(s，1H)，6.23(m，1H)，6.03(d，J＝9.5Hz，1H)，5.70(d，J＝6.9Hz，1H)，5.58(d，J＝2.1Hz，1H)，4.84(d，J＝8.9Hz，1H)，4.66(s，2H)，4.21(m，5H)，3.91(d，J＝6.8Hz，1H)，2.80-0.87(m，30H，包括单峰2.17，2.12，2.11，1.75，1.22，1.20，各3H.triplet at 1.32，3H).
实施例70制备C-4环丙烷-2’-碳酸乙酯-7-磷酸酯前体 在实施例69产物(1.30g，1.286mmol)的二氯甲烷(25.7ml)溶液中加入4A分子筛(1.30g)，再加入NIS(434mg，1.929mmol)和磷酸二苄酯(537mg，1，929mmol)的THF溶液(25.7ml)。反应混合物于室温搅拌5小时。然后反应混合物用Celite过滤，用EtOAc淋洗。去除溶剂，将残余物溶于EtOAc(200ml)，用1％NaHSO3和盐水洗涤，用MgSO4干燥，有机相真空蒸发，残余物色谱提纯(50％乙酸乙酯/己烷)给出1.278g产品，产率80.1％。
1H NMR(CDCl3)δ8.10-8.07(m，2H)，7.76-7.26(m，23H)，6.90(d，J＝9.4Hz，1H)，6.35(s，1H)，6.23(m，1H)，6.02(d，J＝9.5Hz，1H)，5.68(d，J＝6.8Hz，1H)，5.56(s，1H)，5.40(m，1H)，5.04(m，4H)，4.75(d，J＝9.0Hz，1H)，4.20(m，5H)，3.89(d，J＝6.8Hz，1H)，2.78-0.86(m，27H，包括单峰2.18，1.99，1.67，1.18，1.05，各3H triplet at 1.31，3H).
实施例71制备C-4环丙烷-2’-碳酸乙酯-7-磷酸酯 把实施例70化合物(1.278g，1.03mmol)溶于无水EtOAc(41.2ml)，在此溶液中加入催化剂Pd/C(438mg，10％，0.412mmol)。反应混合物在50psi(磅)氢化12小时。然后过滤和真空浓缩反应混合物得到1.08g粗产物，产率100％。
粗产物可不经进一步鉴定直接用于下步反应。
实施例72制备C-4环丙烷-2’-碳酸乙酯-7-磷酸酯三乙醇铵盐
在实施例71产物(1.08g，1.02mmol)的EtOAc溶液(6.8ml)中加入三乙醇胺(6.8ml，0.15M)的0.100M EtOAc溶液，得到的混合物于-20℃放置过夜。然后过滤混合物，固体用冷的10％乙酸乙酯/己烷洗涤，真空干燥12小时，给出目的前药(1.00g)，产率81.2％。经测定(用HPLC)最终产物纯度＞97％1H NMR(CD3OD)δ8.10-8.07(m，2H)，7.80-7.26(m，14H)，6.38(s，1H)，6.07(m，1H)，5.89(d，J＝5.2Hz，1H)，5.63(d，J＝7.0Hz，1H)，5.55(d，J＝5.2Hz，1H)，5.22(m，1H)，4.87(m，2H)，4.23(m，5H)，3.88(d，J＝7.0Hz，1H)，3.80(m，6H)，3.30(m，1H)，3.18(m，6H)，2.97-0.86(m，26H，包括单峰2.15，1.94，1.69，1.57，1.13，各3H，triplet at 1.30，3H).HRMS，C53H61NO20P(MH+，M＝acid)计算值1062.3525测定值1062.3550实施例73制备7-TES-13-TMS浆果赤霉素
把实施例10的7-TES浆果赤霉素(1.895g，2.707mmol)溶于无水DMF(10.8ml)，0℃下此溶液中加入咪唑(736.4mg，10.83mmol)，接着再加入TMSCl(1.37ml，10.83mmol)。反应于0℃搅拌1.5小时，然后反应混合物用EtOAc(400ml)稀释，用水(20ml×3)和盐水(15ml)洗涤，然后干燥和真空浓缩有机层，残余物色谱纯化(20％EtOAc/己烷)给出1.881g(90％)目的产物。
实施例74制备7-TES-13-TMS-1-DMS浆果赤霉素 把实施例73的7-TES-13-TMS浆果赤霉素(305mg，0.430mmol)溶于无水DMF(2ml)，0℃下在此溶液中加入咪唑(87.6mg，1.289mmol)，接着加入二甲基氯硅烷(122mg，1.289mmol)。1小时后，反应混合物用EtOAc(150ml)稀释，用水(10ml×3)和盐水(10ml)洗涤，干燥并真空浓缩得到的有机层，残余物色谱纯化(10％EtOAc/己烷)给出305mg(92.4％)目的产物。
实施例75制备7-TES-13-TMS-1-DMS-C-4羟基浆果赤霉素 把实施例74的1-DMS-7-TES-13-TMS浆果赤霉素溶于无水THF(8ml)，0℃下在此溶液中加入红铝(0.314ml，60％，1.61mmol)。混合物在0℃搅拌40分钟，然后用饱和酒石酸钠溶液(1ml)停止反应2分钟。反应混合物用EtOAc(150ml)萃取，用水(15ml×2)和盐水(15ml)洗涤。有机相经干燥和真空浓缩。残余物色谱纯化(10-20％EtOAc/己烷)给出143.8mg(45.3％)目的产物。
NMR(300MHz，CDCl3)d8.10-8.06(m，2H)，7.55-7.39(m，3H)，6.39(s，1H)，5.59(d，J＝5.5Hz，1H)，4.68(dd，J1＝3.9Hz，J2＝9.6Hz，1H)，4.61(m，1H)，4.53(m，1H)，4.21(ABq，J＝7.8Hz，2H)，4.03(dd，J1＝6.1Hz，J2＝11.6Hz，1H)，3.74(s，1H)，3.48(d，J＝5.7Hz，1H)，2.74-0.48(m，34H，包括单峰2.15，2.06，1.54，1.16，0.92，各3H)，0.28(s，9H)，-0.015&-0.32(doublets，各3H)
实施例76制备7-TES-13-TMS-1-DMS-C-4[OC(O)CH＝CH2]浆果赤霉素 把实施例75化合物(99mg，0.125mmol)溶于无水THF(2.5ml)，0℃下在此溶液中加入LHMDS(0.150ml，1M，0.150mmol)。30分钟后，加入丙烯酰氯(0.0153ml，0.188mmol)。再过30分钟，反应用NH4Cl饱和溶液骤停。反应混合物用EtOAc(100ml)萃取，用水(10ml×2)和盐水(10ml)洗涤。干燥并真空浓缩有机相，残余物色谱纯化(5-10％EtOAc/己烷)给出57.5mg(54.6％)目的产物。
实施例77制备C-4[OC(O)CH＝CH2]浆果赤霉素
把实施例76化合物(105mg，0.125mmol)溶于CH3CN(2.5ml)，0℃下在此溶液中加入吡啶(0.374ml)，接着再加入48％HF(1.12ml)。反应于4℃放置过夜。然后用EtOAc(75ml)稀释反应，有机相用1N HCl(5ml)、NaHCO3饱和溶液(5ml×3)和盐水洗涤，然后干燥和真空浓缩有机相。残余物色谱分离(60％EtOAc/己烷)得到60.6mg(81.3％)目的产物。
实施例78制备7-TES-C-4[OC(O)CH＝CH2]浆果赤霉素 把实施例77的三醇(60.0mg，0.100mmol)溶于无水DMF(0.66ml)，0℃下在此溶液中加入咪唑(27.2mg，0.400mmol)，接着加入TESCl(0.0672ml，0.400mmol)。30分钟后，反应用EtOAc(75ml)稀释，用水(5ml×3)和盐水洗涤。然后干燥并真空浓缩有机层。残余物色谱纯化(40％EtOAc/己烷)给出56.0mg(78.4％)目的产物。
实施例79制备2’，7-双TES-4-[OC(O)CH＝CH2]Paclitaxel 把实施例78的浆果赤霉素(50mg，0.0702mmol)溶于THF(1.4ml)，于-40℃向该溶液中加入LHMDS(0.0843ml，1M，0.0843mmol)，接着立刻加入实施例23的β-内酰胺(40.1mg，0.105mmol)的THF(0.7ml)溶液。-40℃2分钟后，反应在0℃搅拌1小时，然后用NH4Cl饱和溶液使反应骤停。反应混合物用EtOAc萃取，用盐水洗涤，干燥并真空浓缩有机层。残余物色谱纯化(20-30％EtOAc/己烷)给出66mg(86％)目的产物。
实施例80制备C-4[OC(O)CH＝CH2]Paclitaxel
把实施例79化合物(46mg，0.0421mmol)溶于CH3CN(0.85ml)，0℃下在此溶液中加入吡啶(0.125ml)，接着加入48％HF(0.375ml)。反应于4℃放置过夜。然后反应混合物用EtOAc(40ml)稀释，用1NHCl(3ml)和NaHCO3饱和溶液(3ml×3)洗涤。干燥并真空浓缩有机层，残余物色谱纯化(70％EtOAc/己烷)给出28mg(76.9％)目的产物。
实施例81制备7，13-双TES-1-DMS-C-4[C(O)C6H5]浆果赤霉素 把实施例19化合物(279mg，0.336mmol)溶于无水THF(7ml)，0℃下在此溶液中加入LHMDS(0.403ml，1M，0.403mmol)，30分钟后，加入苯甲酰氯(0.0585ml，0.504mmol)。30分钟后，反应用NH4Cl饱和溶液骤停。反应混合物用EtOAc(150ml)萃取，有机层用水和盐水洗涤、干燥和真空浓缩，残余物色谱分离(10％EtOAc/己烷)给出215.5mg(68.6％)目的产物。
实施例82制备C-4苯甲酰基浆果赤霉素 将实施例81化合物(161mg，0.172mmol)溶于CH3CN。0℃下在此溶液中加入吡啶(0.57ml)，接着再加入48％HF(1.80ml)。于4℃5小时后，再加入另一剂量的试剂。反应于4℃放置过夜。反应混合物用EtOAc(100ml)稀释，用1NHCl(5ml)和NaHCO3(5ml×3)洗涤。干燥并真空浓缩有机相，得到的残余物色谱纯化(30-50％EtOAc/己烷)给出48mg(43.0％)目的产物。
实施例83制备7-TES-C-4-苯甲酰基浆果赤霉素
把实施例82的三醇(48.0mg，0.074mmol)溶于DMF(0.40ml)，0℃下在此溶液中加入咪唑(20.1mg，0.296mmol)，接着加入TESCl(0.0496ml，0.296mmol)。30分钟后，反应混合物用EtOAc(45ml)稀释，用水(1ml×3)和盐水洗涤。干燥并真空浓缩有机相，残余物色谱纯化(40％EtOAc/己烷)给出48mg(85.0％)最终目的产物。
实施例84制备C-4-苯甲酰基Paclitaxel 把实施例83化合物(364.6mg，0.478mmol)溶于THF(9.6ml)，在-40℃向此溶液中加入LHMDS(0.718ml，1M，0.718mmol)，接着加入实施例23的β-内酰胺(273.5gmg，0.718mmol)。按照前面实施例同样的方法，得到415mg(75.9％)化合物。之后通过将上述化合物溶于CH3CN(16.5ml)，和在0℃下加入吡啶(0.36ml)，接着再加入48％HF(3.0ml)可得脱保护的Paclitaxel类似物。按照实施例80所列步骤，得到315mg Paclitaxel类似物(产率94.8％)。
实施例85制备带呋喃基侧链的4-环丁烷紫杉烷(A) 把实施例27的7-TES-4-环丁基浆果赤霉素(154mg，0.208mmol)溶于无水甲苯(4ml)。室温下在此溶液中加入实施例63的游离酸(64.2mg，0.250mmol)和DMAP(30.5mg，0.250mmol)。10分钟后加入DCC(51.4mg，0.250mmol)，搅拌反应2小时，此时再加入另一份DCC/DMAP，反应再搅拌12小时。然后通过Celite过滤反应混合物，“滤饼”用EtOAc淋洗。真空浓缩合并的有机相，残余物色谱纯化(30-40％EtOAc/己烷)给出222mg(100％)目的产物。
0℃下，将(A)(182mg，0.186mmol)的THF(2ml)和MeOH(2ml)溶液用1NHCl(1.86ml)处理。在0℃1小时后，将反应于4℃放置过夜。然后反应混合物用饱和NaHCO3(9.6ml)处理。室温下5小时后，反应混合物用EtOAc(120ml)稀释，用水(4×10ml)洗涤，再用MgSO4干燥和真空浓缩有机层，残余物色谱纯化(含40-60％乙酸乙酯的己烷)得到77mg(47％)目的产物。
1H NMR(CDCl3)8.15-8.12(m，2H)，7.73-7.35(m，9H)，6.87(d，J＝9.2Hz，1H)，6.44(m，2H)，6.28(s，1H)，6.20(m，1H)，5.89(d，J＝9.2Hz，1H)，5.66(d，J＝7.1Hz，1H)，4.90(d，J＝8.1Hz，1H)，4.85(s，1H)，4.44(m，1H)，4.27(ABoJ＝8.4Hz，2H)，3.80(d，J＝7.0Hz，1H)，3.56(m，1H)，2.61-0.92(m，25H，包括单峰2.22，1.83，1.69，1.23，1.13，各3H).13C NMR(CDCl3)203.6，174.4，172.4，171.2，166.9，166.8，150.9，142.5，142.0，133.5，133.3，132.9，131.9，130.1，130.0，129.7，129.0，128.5，127.0，110.8，108.0，84.6，80.8，78.9，76.4，75.4 75.0，72.5，72.0，71.3，58.5，50.1，45.6，43.1，38.8，35.6，35.5，26.7，25.3，25.1，21.9，20.7，18.2，14.6，9.5.
HRMSC48H54NO15(MH+)计算值884.3493测定值884.3472实施例86制备Paclitaxel将实施例7(b)化合物加入5ml烧瓶中并溶于THF，加入甲醇，把稍带浅黄色的均相溶液冷却至0℃。加入HCl，所得均相溶液在0℃搅拌0.5小时后转移至4℃的冷室，在加入HCl后19.5小时后，TLC检测说明已无起始原料。把反应溶液加入一烧瓶中，其中含有20ml1/2饱和的NaCl溶液。得到的非均相混合物在室温下搅拌45分钟，过滤混合物，固体用15ml水洗涤并在多孔玻璃漏斗中空气干燥。然后在烧结漏斗中洗涤白色固体，使其溶于THF进入另一烧瓶中。浓缩后给出0.169g透明状固体。将物料转移至一管形瓶。使其溶于1.0ml THF，加入NEt3(4eq.，0.63mmol，88ml)，形成沉淀。在室温下搅拌非均相混合物，在加入NEt34.25小时后，TLC表明反应基本完全。混合物用5ml EtOAc和5ml H2O稀释并振摇，水相用5ml EtOAc萃取二次，合并的有机馏份用5ml HCl(in)、5ml饱和NaCl洗涤，用Na2SO4干燥，过滤和浓缩给出0.127g白色固体(Paclitaxel)，产率93.9％。
权利要求
1.一种制备式III的带有噁唑啉侧链的紫杉烷或其盐的方法 其中R1是R5、R7-O-、R7-S-或(R5)(R6)N-；R3和R4独立地是R5、R5-O-C(O)-或(R5)(R6)N-C(O)-；R5和R6独立地是氢、烷基、链烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基或杂环基；R7是烷基、链烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基或杂环基；T是通过C-13直接键连的紫杉烷部分；所述方法包括将式II的噁唑啉或其盐 其中R1、R3和R4如上定义，与带有直接与C-13键连的羟基的紫杉烷或其盐，在偶合剂存在下反应，形成式III的带有侧链的紫杉烷或其盐。
2.权利要求1的方法，其中带有直接与C-13键连的羟基的紫杉烷或其盐是式IX化合物或其盐 其中R8是氢、羟基、R14-O-、R15-C(O)-O-或R15-O-C(O)-O-；R9是氢、羟基、氟、R14-O-、R15-C(O)-O-或R15-O-C(O)-O-；R10和R11独立地是氢、烷基、链烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基或杂环基；R14是羟基保护基；R15是氢、烷基、链烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基或杂环基。
3.权利要求2的方法，其中偶合剂包括选自下列的化合物二环己基碳二亚胺、1，3-二异丙基碳二亚胺、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基-碳二亚胺盐酸盐、二(2-氧代-3-噁唑啉基)膦酰氯、羰基二咪唑、新戊酰氯、2，4，6-三氯苯甲酰氯；和选自下列的化合物1-羟基苯并三唑、N-羟基琥珀酰亚胺、三乙胺、吡啶和第4位被-N(R16)(R17)取代的吡啶，其中R16和R17独立地选自烷基、链烯基、炔基、环烷基、环烯基或杂环基，或其中R16和R17与它们键连的氮原子一起形成杂环基团。
4.权利要求2的方法，其中R1是芳基或烷氧基，R3是芳基或杂环基，R4是氢，R8是羟基或烷基羰氧基，R9是羟基或被保护的羟基基团，R10是烷基，R11是芳基。
5.权利要求4的方法，其中R1是苯基或叔丁氧基，R3是苯基、呋喃基或噻吩基，R8是羟基或乙酰氧基，R9是羟基或三烷基甲硅氧基，R10是甲基，R11是苯基。
6.权利要求5的方法，其中式II的噁唑啉是(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸、(4S-顺式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸或它们的混合物，并且所述紫杉烷是7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III或7-三甲基甲硅烷基浆果赤霉素III。
7.式III的带有噁唑啉侧链的紫杉烷或其盐 其中R1是R5、R7-O-、R7-S-或(R5)(R6)N-；R3和R4独立地是R5、R5-O-C(O)-、或(R5)(R6)N-C(O)-；R5和R6独立地是氢、烷基、链烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基或杂环基；R7是烷基、链烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基或杂环基；T是通过C-13直接键连的紫杉烷部分；
8.权利要求7的化合物，其中T是下式部分 其中R8是氢、羟基、R14-O-、R15-C(O)-O-或R15-O-C(O)-O-；R9是氢、羟基、氟、R14-O-、R15-C(O)-或R15-O-C(O)-O-；R10和R11独立地是氢、烷基、链烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基或杂环基；R14是羟基保护基；R15是氢、烷基、链烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基或杂环基。
9.权利要求8的化合物，其中R1是芳基或烷氧基，R3是芳基或杂环基，R4是氢，R8是羟基或烷基羰氧基，R9是羟基或被保护的羟基基团，R10是烷基，R11是芳基。
10.权利要求9的化合物，其中R1是苯基或叔丁氧基，R3是苯基、呋喃基或噻吩基，R8是羟基或乙酰氧基，R9是羟基或三烷基甲硅氧基，R10是甲基，R11是苯基。
11.权利要求10的化合物，它是7-三乙基甲硅烷基-13-[[(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑基]-羰基]浆果赤霉素III或7-三甲基甲硅烷基-13-[[(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑基]-羰基]浆果赤霉素III。
全文摘要
制备带有侧链的紫杉烷类的新方法，该方法包括制备噁唑啉化合物，使噁唑啉化合物与带有直接键连于紫杉烷C－13的羟基的紫杉烷偶合，以及使如此形成的带有噁唑啉侧链的紫杉烷上的噁唑啉环开环。本发明还提供了由本发明的方法制备的新化合物。
文档编号C07D307/54GK1590386SQ0310824
公开日2005年3月9日 申请日期1993年12月23日 优先权日1992年12月23日
发明者M·A·波斯, D·J·库塞拉, J·L·蒙尼奥特, J·K·托塔特希尔, I·D·特里富诺维奇 申请人:布里斯托尔-迈尔斯斯奎布公司
本申请是申请号为99101066.3，申请日为1993年12月23日，发明名称为“带有侧链的紫杉烷类化合物”的发明专利申请的分案申请。
本申请是申请人的共同未决申请07/995,443(1992年12月23日申请)的部分继续申请，该未决申请被本文全部引入作为参考文献。
本发明涉及制备带有侧链的紫杉烷类化合物及其中间体的方法，以及由这些方法制得的新化合物。
紫杉烷类化合物是在药物领域中已发现用途的二萜化合物。例如，已发现紫杉醇，具有下列结构的紫杉烷是有效的抗癌剂 其中ph是苯基，Ac是乙酰基和Bz是苯甲酰基。天然存在的紫杉烷类化合物如紫杉醇可在植物中发现并且已从中分离出来。然而，这些紫杉烷类化合物以相当低的含量存在于植物中，因此，例如就紫杉醇而言，需要大量生长缓慢的紫杉树作为化合物的来源。所以本领域在继续研究制备紫杉烷类化合物如紫杉醇及其类似物的合成包括半合成途径以及制备用于制备这些化合物的中间体的途径。
本发明提供了制备新的带有侧链的紫杉烷类化合物的新的综合方法，该方法包括下列步骤(a)至(e)(a).制备下式I的噁唑啉化合物或其盐 其中R1是R5，R7-O-，R7-S-或(R5)(R6)N-；R2是R7-O-，R7-S-或(R5)(R6)N-；R3和R4分别是R5，R5-O-C-(O)-，或(R5)(R6)N-C(O)-；R5和R6分别是氢，烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基，芳基或杂环基；R7是烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基，芳基或杂环基；(b).将式I噁唑啉或其盐转化为式II噁唑啉或其盐
其中R1、R3和R4如上定义，(c).使式II噁唑啉或其盐与具有直接键连于其C-13的羟基的紫杉烷或其盐在偶合剂存在下进行偶合生成下式III的带有噁唑啉侧链的紫杉烷或其盐 其中R1、R3和R4如上定义，T是紫杉烷部分，优选式IX化合物与紫杉烷部分的C-13直接键连；(d).使式III带有噁唑啉侧链的紫杉烷或其盐与能够打开式III化合物或其盐的噁唑啉环的含水酸反应生成下式X的带有侧链的紫杉烷或其盐
其中R1、R3、R4和T如上定义，所述式X的胺基的酸盐是通过与所述的开环酸反应生成的；(e).使上述式X的带有侧链的紫杉烷或其盐与碱反应生成下式IV的带有侧链的紫杉烷或其盐 其中R1、R3、R4和T如上定义。
另外，本发明提供了每一步骤(a)至(e)的各个方法，这些方法均是新方法，本发明还提供如下所述的新的式I、II、III、IV、IX和X化合物及其盐和水合物。这些化合物的新的前药也包括在本发明之中。
本发明进一步描述如下本文单独或作为其他基团一部分使用的术语“烷基”或“烷”是指选择性取代的直链和支链饱和烃基，优选在直链中具有1-10个碳原子，最优选低级烷基。典型的未取代的基团包括甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、戊基、己基、异己基、庚基、4，4-二甲基戊基、辛基、2，2，4-三甲基戊基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基等。典型的取代基可包括一个或多个下列基团卤、烷氧基、烷硫基、链烯基、炔基、芳基、(例如形成苄基)、环烷基、环烯基、羟基或被保护的羟基、羧基(-COOH)、烷氧羰基、烷基羰氧基、烷基羰基、氨基甲酰基(NH2-CO-)，取代的氨基甲酰基((R5)(R6)N-CO-，其中R5或R6如上所定义，只是至少R5或R6之一不是氢)、氨基(-NH2)、杂环基、一或二烷基氨基或硫羟基(-SH)。
本文所用术语“低级烷”或“低级烷基”是指如上所述的选择性取代的、在直链中具有1-4个碳原子的烷基。
术语“烷氧基”或“烷硫基”分别是指通过氧键(-O-)或硫键(-S-)键连的如上所述的烷基。本文所用的术语“烷氧羰基”是指通过羰基键连的烷氧基。本文所用的术语“烷基羰基”是指通过羰基键连的烷基。本文所用的术语“烷基羰氧基”是指通过羰基键连，接着通过氧键键连的烷基。术语“一烷基氨基”或“二烷基氨基”是指分别被一个或两个如上所述的烷基取代的氨基。
本文单独或作为其他基团一部分使用的术语“链烯基”是指在其链中含有至少一个碳-碳双键且优选在直链中具有2-10个碳原子的选择性取代的直链和支链的烃基。典型的未取代的此类基团包括乙烯基、丙烯基、异丁烯基、丁烯基、戊烯基、己烯基、庚烯基、辛烯基、壬烯基、癸烯基等。典型的取代基可包括一个或多个下列基团卤、烷氧基、烷硫基、烷基、炔基、芳基、环烷基、环烯基、羟基或被保护的羟基、羧基(-COOH)、烷氧羰基、烷基羰氧基、烷基羰基、氨基甲酰基(NH2-CO-)、取代的氨基甲酰基((R5)(R6)N-CO-，其中R5或R6如上定义，只是至少R5或R6之一不是氢)、氨基(-NH2)、杂环基、一或二烷基氨基或硫羟基(-SH)。
本文单独或作为其他基团一部分使用的术语“炔基”是指在其链中含有至少一个碳-碳三键且优选在直链中具有2-10个碳原子的选择取代的直链和支链的烃基。典型的未取代的基团包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基、庚炔基、辛炔基、壬炔基、癸炔基等。典型的取代基可包括一个或多个下列基团卤、烷氧基、烷硫基、烷基、链烯基、芳基、环烷基、环烯基、羟基或被保护的羟基、羧基(-COOH)、烷氧羰基、烷基羰氧基、烷基羰基、氨基甲酰基(NH2-CO-)，取代的氨基甲酰基((R5)(R6)N-CO-，其中R5或R6如上定义，只是至少R5或R6之一不是氢)、氨基(-NH2)、杂环基、一或二烷基氨基或硫羟基(-SH)。
本文单独或作为其他基团一部分使用的术语“环烷基”是指优选含有1-3个环并每个环具有3-7个碳原子的选择性取代的饱和环烃环体系。典型的末取代的此类基团包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环癸基、环十二烷基、金刚烷基。典型的取代基包括一个或多个如上所述的烷基，或一个或多个如上所述的作为烷基取代基的基团。
本文单独或作为其他基团一部分使用的术语“环烯基”是指选择取代的如上所述的环烷基，且还含有至少一个碳-碳双键形成部分不饱和环的基团。
本文单独或作为其他基团一部分使用的术语“芳”或“芳基”是指优选含有1个或2个环和6-12个环碳原子的选择取代的碳环芳香基。典型的未取代的基团包括苯基、联苯基和萘基。典型的取代基包括一个或多个优选三个或较少的硝基、如上所述的烷基或如上所述的作为烷基取代基的基团。
本文单独或作为其他基团一部分使用的术语“杂环基”或“杂环的”是指在至少一个环中具有至少一个杂原子的选择取代的完全饱和或不饱和的芳香或非芳香的环基，优选在每一环中具有5或6个原子的单环或二环基。例如杂环基在其环中具有1个或2个氧原子，1个或2个硫原子和/或1-4个氮原子。各杂环基可通过其环体系的任一碳原子或杂原子键连。典型的杂环基包括下列基团噻吩基、呋喃基、吡咯基、吡啶基、咪唑基、吡咯烷基、哌啶基、吖庚因基、吲哚基、异吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、苯并噁二唑基和苯并呋咱基。典型的取代基包括一个或多个如上所述的烷基，或者一个或多个如上所述的作为烷基取代基的基团。杂环基还包括较小的杂环基如环氧化物和氮丙啶类。
本文单独或作为其他基团一部分使用的术语“卤素”、“卤代”或“卤”是指氯、溴、氟和碘。
本文所用的术语“紫杉烷部分”是指含有下列核心结构的部分 其核心结构可被取代并且在其环系中可含有乙烯不饱和度。
本文所用的术语“紫杉烷”是指含有上述紫杉烷部分的化合物。
本文所用的术语“羟(或羟基)保护基”是指能够保护游离羟基的任何基团，在其用于反应之后，可在不破坏分子的其余部分的情况下将其除去。这些基团及其合成可在″Protective Groups inOrganic Synthesis″T.W.Greene，John Wiley和Sons，1991或Fieser & Fieser中找到。典型的羟基保护基包括甲氧基甲基、1-乙氧基乙基、1-甲氧基-1-甲基乙基、苄氧基甲基、(β-三甲基甲硅烷基乙氧基)甲基、四氢吡喃基、2，2，2-三氯乙氧基羰基、叔丁基(二苯基)甲硅烷基、三烷基甲硅烷基、三氯甲氧羰基、2，2，2-三氯乙氧基甲基。
术语“盐”包括无机酸和/或有机酸和碱形成的酸盐和/或碱盐。典型的酸盐包括无机酸如HCl、H2SO4或HNO3，或羧酸如三氟乙酸或乙酸形成的盐。典型的碱盐包括与胺如三乙胺、二异丙基乙胺，或吡啶或氨基酸如精氨酸，或胍形成的盐。羟基盐如金属(如碱金属或碱土金属)醇盐也被本文称为“盐”，例如使羟基与金属取代剂反应可生成金属醇盐。
除非另有说明，本发明中所使用的或用本发明的方法制备的有关化合物包括其盐和水合物。
式I的噁唑啉化合物及其盐的制备本发明提供了制备式I的噁唑啉化合物及其盐的新方法，具体是如下所述的脱水、置换和交换方法。
本发明还提供了新的式I的噁唑啉化合物及其盐，包括其所有立体异构体，或者基本上无其他立体异构体、或者与选择的其他立体异构体或所有其他立体异构体的混合物，其条件是当R1是苯基和R3或R4之一是氢时，(i)当R3或R4的另一个是十五烷基，苄基或甲氧羰基时R2不是甲氧基，或者(ii)当R3或R4的另一个是乙氧羰基时R2不是乙氧基；当R1是甲基和R3或R4之一是氢，而R3或R4的另一个是2-甲基丙基时，R2不是8-苯基氧基；当R1是乙酰基甲基和R3和R4是氢时，R2不是乙氧基或NH2。
优选下述的式Ia噁唑啉及其盐，特别是具有下面称为“优选化合物”中选出的那些取代基的化合物。
脱水方法式I噁唑啉化合物或其盐可用脱水方法制备，该方法包括使下式V化合物或其盐 其中R1、R2、R3和R4如上定义，与能够使式V化合物或其盐脱水的酸反应生成式I化合物或其盐的步骤。
起始原料式V化合物及其盐可按例如下列文献中所述的方法制备美国专利申请号07/975,453，Patel等人，1992年11月12日申请；Ojima等人，J.Org.Chem.，56，1681-1683(1991)；Georg等人，Tetrahedron Lett.，32，3151-3154(1991)；Denis等人，J.Org.Chem.，51，46-50(1986)；Corey等人，Tetrahedron Lett.，32，2857-2860(1991)；Denis等人，J.Org.Chem.，57，4320-4323(1992)；Ojima等人，Tetrahedron，48，6985-7012(1992)；Commercon等人，Tett.Lett.，33，5185-5188(1992)；Denis等人，J.Org.Chem.，56(24)，6939-6942(1991)(例如接着酯化并用酸处理)；和Denis等人，J.Org.Chem.，55，1957-1959(1990)，所有上述文献在此引入作为参考文献。
能够脱水的任何酸均可用于本发明的脱水方法，典型的酸包括磺酸如吡啶鎓对甲苯磺酸、对甲苯磺酸、樟脑磺酸和甲磺酸，羧酸如三氟乙酸或乙酸，或无机酸如HCl、H2SO4或HNO3。酸式V化合物的摩尔比优选为大约1∶100至大约1∶1。
反应优选在大约0℃至大约200℃的温度下，在大约1atm至大约5atm下进行，反应也优选在惰性气体如氩气氛中进行。
优选使用的溶剂是惰性有机溶剂如甲苯、四氢呋喃、乙腈、苯或二甲苯。优选使用的溶剂量应使起始原料式V化合物占溶剂和式V化合物总重量的大约2.5％。
式I化合物的噁唑啉环编号如下 就4和5位的碳原子而言，式I化合物的噁唑啉化合物可存在如下四种立体异构体Ia、Ib、Ic和Id
就相应位置的碳原子而言，式V化合物也可存在四种立体异构体。这些立体异构体为下列化合物Va、Vb、Vc和Vd
例如，所需立体异构体的式I化合物可按本发明的脱水方法使用合适立体异构体的起始原料式V化合物来制备，因此，使用化合物Va将得到化合物Ia，使用化合物Vb将得到化合物Ib，使用化合物Vc将得到化合物Ic，使用化合物Vd将得到化合物Id。尽管也可使用立体异构体混合物，但在本发明的脱水方法中优选使用起始原料化合物V的单一立体异构体。特别优选使用化合物Va制备化合物Ia，尤其是制备具有下面称为“优选化合物”中列出的那些取代基的化合物。
置换方法式I噁唑啉化合物或其盐也可用置换方法制备，该方法包括使式V化合物或其盐在碱存在下与能够活化式V化合物或其盐的羟基的活化剂反应从而发生分子内置换，生成式I化合物或其盐的步骤，其条件是当R1是苯基，R3或R4之一是氢时，(i)当R3或R4的另一个是乙氧羰基时R2不是乙氧基，或者(ii)当R3或R4的另一个是苄基时R2不是甲氧基。
能够活化式V化合物的羟基并发生分子内置换的任何化合物均可用作本发明置换方法中的活化剂。典型的活化剂包括磺酰卤如烷基磺酰卤(如甲磺酰氯)，或芳基磺酰卤(如苯磺酰氯或对甲苯磺酰氯)，磷酰氯(POCl3)，五氯化磷(PCl5)，或亚硫酰氯(SOCl2)。活化剂式V化合物的摩尔比优选为大约1∶1至大约2∶1。
活化式V化合物或其盐的羟基可制得新的式VI中间体化合物或其盐 其中R1、R2、R3和R4如上定义。L是离去基团如烷基磺酰氧基(如甲磺酰氧基)，芳基磺酰氧基(如苯磺酰氧基或对甲苯磺酰氧基)，氯或磷酰基(PO2-或PO-)。本发明提供了上述新的式VI化合物及其盐，包括其所有立体异构体，或者基本上无其他立体异构体，或者是与选择的其他立体异构体或所有其他立体异构体的混合物，其条件是当R1是苯基、R2是甲氧基、R3或R4之一是氢而另一个是苄基时，L不是氯。
可使用的碱包括有机碱如胺(例如吡啶、三乙胺、二异丙基乙胺、二甲基吡啶或1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯)或六甲基二硅氮烷化锂，或无机碱如碱金属碳酸盐(如碳酸钾)，碱式V化合物的摩尔比优选大于约2∶1。
反应优选在大约-20℃至大约100℃，特别是0℃的温度下，并在大约1atm压力下进行。反应优选在惰性气体如氩气中进行。
优选使用的溶剂是惰性有机溶剂如氯仿、二氯甲烷、甲苯、四氢呋喃、乙腈，最优选的溶剂是在本发明的方法中既能用作溶剂又能用作碱的碱性有机溶剂如吡啶、三乙胺或二甲基吡啶。优选使用的溶剂的量应使起始原料式V化合物占溶剂和式V化合物总重量的大约10％。
例如，所需的式I化合物的立体异构体可按本发明的置换方法使用起始原料式V化合物的合适的立体异构体来制备。因此，使用化合物Va将得到化合物Ic，使用化合物Vb将得到化合物Ib，使用化合物Vc将得到化合物Ia，使用化合物Vd将得到化合物Id，尽管也可使用立体异构体混合物，但在本发明的置换方法中优选使用起始原料化合物V的单一立体异构体。特别优选使用化合物Vc制备化合物Ia，尤其是制备具有下面称为“优选化合物”中列出的那些取代基的化合物。
交换方法其中R1为如下定义的R1’的式I噁唑啉化合物或其盐也可通过交换法制备，此方法包括将下列式VII化合物或其盐 其中R2、R3和R4如上定义，与下列式VII化合物或其盐反应
其中R1’和E分别为烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基，芳基或杂环基；条件是当E为乙基，R3和R4其中之一为氢，并且(i)当R1’为苯基，当R3或R4中的另一个为甲氧羰基时，R2不为甲氧基，和当R3或R4中的另一个为乙氧羰基时，R2不为乙氧基；和(ii)当R3或R4中的另一个为2-甲丙基时，R1’为甲基，R2不为8-苯基氧基。
当两个原料化合物VII和VIII分别以NH2和HN基团上的酸加成盐的形式同时使用时，为了足以令反应进行可以使用胺碱如氨或有机胺碱分别形成游离的NH2和/或HN基团。在此任何形成游离的NH2和/或HN基团的胺碱均可使用。优选叔胺碱例如三乙胺，二异丙基乙基胺，二甲基吡啶，吡啶或1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯。胺碱∶式VII化合物的摩尔比优选是从约1∶1-约10∶1。
式VII原料化合物和其盐可以通过下列文献中所述的方法制备，例如Patcl等人于1992，11，12申请的美国专利申请号07/975,453；Commercon等人，Tetrahedron Lett.，33(36)，5185-5188(1992)；Corey等人，Tetrahedron Lett.，32，2857-2860(1991)；Ojima等人，Tetrahedron，48，6985-7012(1992)和Ojima等人Tetrahedron Lett.，33，5737-5740(1992)。所有这些文献在此引入做为参考。式VIII原料化合物和其盐可以通过例如Kimball等人，Org.Synth.Coll.Vol.II，P284(1943)中所述方法制备。式VIII化合物的酸性盐例如与羧酸，磺酸或无机酸形成的盐是优选使用的原料，因为此类化合物相对稳定并容易得到。上述盐可以通过与上述所用碱反应中和。式VIII化合物∶式VII化合物的摩尔比优选是从约1∶1-约2∶1。
反应优选在约0℃至约100℃温度下和约1atm压力下进行。反应优选在惰性气体如氩气或氮气下进行。
优选使用的溶剂为惰性有机溶剂例如甲苯，四氢呋喃，二氯甲烷，1，2-二氯乙烷或氯仿。所用溶剂的量优选是应使起始原料式VII化合物占以溶剂和式VII化合物总和重量为基准的约6％重量。
同式V化合物一样，式VII化合物可在相应位置碳原子上具有四个立体异构体。这些异构体为下列化合物VIIa，VIIb，VIIc和VIId
所需式I化合物的立体异构体可以通过例如使用式VII原料化合物的适宜立体异构体利用本发明交换方法制备。这样，当使用化合物VIIa时可得到化合物Ia，使用化合物VIIb时可得到化合物Id，使用化合物VIIc时可得到化合物Ic，和使用化合物VIId时可得到化合物Ib。在本发明交换法中尽管也可以使用立体异构体混合物，但优选的是使用原料化合物VII的单一立体异构体。特别优选的是使用化合物VIIa可制得化合物Ia，特别是可制得具有在下列称为“优选化合物”中所列举取代基的化合物Ia。
式II噁唑啉化合物及其盐的制备式II噁唑啉化合物及其盐可通过将基团-C(O)-R2转化成基团-C(O)-OH从而由式I噁唑啉化合物及其盐制备。
任何能够完成上述转化的试剂均可使用。例如当R2为烷氧基如甲氧基或乙氧基时，可用适宜的亲核试剂如甲硫醇的碱金属或碱土金属盐将式I化合物或其盐脱烷基化形成式II化合物。另外，也可利用氢化作用，例如通过使用氢化剂如氢和氢化催化剂如钯可将苄氧羰基基团转化成羧基。
优选的是，通过水解进行基团-C(O)-R2转变成羧基。任何能够完成水解作用的化合物均可在此用作水解剂。典型的水解剂包括含水碱例如氢氧化物(如金属氢氧化物例如氢氧化钡，或优选的是碱金属氢氧化物例如氢氧化锂，氢氧化钠或氢氧化钾)。碱∶式I化合物的摩尔比优选是由约1∶1-约3∶1。水∶式I化合物的摩尔比优选是由约1∶1-约100∶1。
反应优选在约-20℃至约100℃温度下和约1个大气压下进行。其中R2为-N(R5)(R6)的式I化合物或其盐的氢氧化物皂化反应优选在上述温度范围的较高温度下或在接近所用液体介质回流温度下或在所用液体介质回流温度下进行。反应优选在氮气，氩气或空气下进行。
溶剂可选自无机和有机液体如水，醇，甲苯，四氢呋喃，二噁烷，乙腈或二甲基甲酰胺，或它们的混合物。水和有机液体如四氢呋喃混合液优选用作溶剂。所用溶剂的量优选是应使起始原料I化合物占以溶剂和式I化合物总重量为基准的约7％重量。
本发明还提供了新的式II化合物及其盐，包括其所有立体异构体，可以是基本上不含有其它立体异构体的形式，或者是与其它选择性立体异构体或所有其它立体异构体的混合物形式，条件是，当R1为苯基和R3或R4中的一个为氢时，R3或R4中的另一个不为COOH。同式I噁唑啉一样，式II噁唑啉可在4-和5-位碳原子上具有四个立体异构体。这些立体异构体为下列化合物IIa，IIb，IIc和IId
式IIa噁唑啉及其盐是优选的，特别优选的是具有在下列称为“优选化合物”中所列举取代基的式IIa化合物。
在本方法中式I原料化合物或其盐的立体构象可以被保留和/或被转化。例如，分别在4-和5-位上具有相应顺式位置取代基的式I化合物的水解可以水解生成具有相应顺式构象的式II化合物，当对应于起始化合物的5-位羧基取代基被转化时生成具有相应反式构象的式II化合物或上述顺式和反式化合物的混合物，当用碱进行水解时，键合有基团-C(O)-R2的碳原子被脱质子化，随即由环系反方向上述碳原子被再质子化，结果导致立体构象的转化。典型的碱包括上文所述碱金属或碱金属碳酸盐例如碳酸钾，胺碱，或金属如碱金属或碱土金属醇盐，后者醇盐可以在加入之前生成或者就地生成(例如，通过将金属取代剂(metallating agent)如正丁基锂和链烷醇如乙醇一起加入)。
当在上述本方法中立体构象被转化时，相对于式I原料化合物具有转向立体构象的式I化合物可以制成中间体形式(即差向异构化)。例如，在水解反应中，当式I原料化合物4-和5-位取代基在相对彼此顺式位置时，其中相对于原料化合物5-位取代基-C(O)-R2被转化的相应的式I反式化合物可以作为中间体的形式制得。上述转化方法也包含在本发明范围内。
式III带有噁唑啉侧链的紫杉烷及其盐的偶合法制备式III带有侧链的紫杉烷或其盐可以通过下述方法制备，此方法包括在偶合剂存在下将式II噁唑啉化合物或其盐与C-13上直接键合有羟基的紫杉烷或其盐反应。在此方法中优选使用式IIa噁唑啉或其盐，特别是具有在下列称为“优选化合物”中所列举的取代基的式IIa化合物。
紫杉烷为含有下列母核结构的化合物 如上所述，此母核可以被取代并且在其环系中可以含有不饱和烯键。在此方法中任何含有C-13上直接键合的羟基的紫杉烷或其盐(例如C-13羟基的金属醇盐)均可使用。用于本发明方法中的紫杉烷原料可以是欧洲专利公开号400,971(在此作为参考)中所述化合物，或者可以是Chen等人于1992，7，1，申请的美国专利申请号07/907,261或Ueda等人于1992，11，24申请的美国专利申请号07/981,151(上述两篇文献在此作为参考)中所述含有紫杉烷残基的化合物，以及通过其中所述方法或其中所述方法的相似方法制备的化合物。此紫杉烷的实例包括下列式IX化合物或其盐
其中R8为氢，羟基，R14-O-，R15-C(O)-O-或R15-O-C(O)-O-；R9为氢，羟基，氟，R14-O-，R15-C(O)-O-或R15-O-C(O)-O-；R10和R11各自为氢，烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基，R16-O-，芳基或杂环基；R14为羟基保护基；和R15为氢，烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基，芳基或杂环基；R16为烷基。
未具体指明手性中心的式IX化合物所有立体构象均适用于本发明的偶合方法。尽管可以使用其混合物，但优选使用单一的立体异构体，用作式IX原料的优选的一种化合物是7-三烷基甲硅烷基浆果赤霉素III化合物，更优选的是7-三甲基甲硅烷基浆果赤霉素III或7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III。
作为式IX原料化合物优选的另外一系列化合物为其中R8为OC(O)CH3；R9为羟基或羟基保护基例如O-三甲基甲硅烷基或三乙基甲硅烷基；R10除不是金属外如上所定义以及R11为芳基例如苄基的化合物。此后一类化合物被认为是新的，它们的制备方法如下文所述，特别优选的上述化合物为其中R10为环烷基或OR15的化合物。
上述化合物可通过下列一般反应流程制备 步骤F通过与适宜试剂例如卤代三烷基硅烷如卤代三甲基或卤代三乙基硅烷，2，2，2-三氯乙基氯甲酸酯或苄氧羰基(Carbobenzyloxy)反应将浆果赤霉素IIIC-7和C-13位进行保护。可溶解浆果赤霉素III的任何惰性有机溶剂均可使用，例如THF，DMF，MeCl2和二噁烷。反应在叔胺碱如吡啶或咪唑存在下进行。反应温度可在-30℃至室温范围内变化，对于C-7取代作用优选在-30℃-0℃下进行而对于C-13优选在0℃至室温下进行。保护基反应物浓度优选是对C-7和C-13两取代基过量的摩尔浓度(1-10)。
步骤G此后通过在例如DMF，THF，二噁烷或各种醚中与三甲基硅烷或优选二甲基硅烷例如氯代三甲基硅烷或优选氯代二甲基硅烷反应将中间体XIC-1羟基进行保护。如步骤F中所述，反应优选在叔胺碱如咪唑或吡啶中进行，温度范围可以是-30℃至室温，优选是约0℃。
步骤H(A)此后通过与适宜的还原剂如Red-Al或氢化铝锂反应将中间体XIIC-4还原为羟基，通常使用过量摩尔比(1-5当量)还原剂。反应溶剂可以是THF，二噁烷或各种适宜的醚而反应温度可以是-30℃-0℃范围，优选是约0℃。
(B)在仲胺碱的碱金属(Li，Na或K)阴离子存在下，通过与适宜的酰氯酸酐或混合酸酐如丙烯酰氯，苯甲酰氯，环烷基甲酰氯，氯甲酸烷基酯反应将(A)中间体XIII其中C-4羟基转变成适宜的C-4取代基。反应溶剂包括THF，二噁烷等。温度范围可以是-30℃至室温，优选是约0℃。
步骤I(A)此后通过与吡啶鎓氟化物(含水氟化氢的吡啶溶液)于乙腈中反应，随后于THF中用四丁基氟化铵或于THF用氟化铯处理将步骤H(B)中间体XIII脱保护。然后混合物用醇稀释，用温和的有机或无机酸洗涤并分离。
(B)随后如步骤F所述按照上述适于C-7取代基的反应参数在XIV中引入C-7羟基保护基。
随后按照本文所述新的方法或经美国专利5,227,400，5,175,315和5,229,526(在此作为参考)中所述Holton工艺可在C-13上引入适宜的侧链。
因此，本发明新的最终产物是下式化合物或其盐或水合物 其中R1为R5，R7-O-，R7-S-或(R5)(R6)N-；R3和R4各自为R5，R5-O-C(O)-或(R5)(R6)N-C(O)-；R5和R6各自为氢，烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基，芳基或杂环基；和R7为烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基，芳基或杂环基；
T为 其中R8为氢，羟基，R14-O-，R15-C-(O)-O-或R15-O-C(O)-O-；R9为氢，羟基，氟，R14-O-，R15-C(O)-O-或R15-O-C(O)-O-；R10和R11各自为氢，烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基，R15-O-芳基或杂环基；R14为羟基保护基；和R15为氢，烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基，芳基或杂环基，R16为烷基，条件是R10不是甲基。
优选化合物新的式IV化合物中特别优选的是其中R10为环烷基或OR6的化合物。新的式IV化合物中最优选的是其中R10为环烷基，R1为芳基，优选苯基，或烷氧基优选叔丁氧基；R3为芳基，优选苯基，杂环基优选2-或3-呋喃基或噻吩基，异丁烯基，2-丙烯基，异丙基或(CH3)2CH-；R4为氢；R8优选为羟基或烷羰氧基例如乙酰氧基；R9为羟基和R11为芳基，优选苯基的化合物。
任何可用式II噁唑啉或其盐的羧基将原料紫杉烷或其盐的C-13羟基酯化的化合物均可用作本方法中的偶合剂。偶合剂的实例包括当与式II噁唑啉反应时可形成活化噁唑啉酯(例如1-羟基苯并三唑或N-羟基琥珀酰亚胺)或酸酐(例如酰氯如新戊酰氯或双(2-氧-3-噁唑烷基)膦酰氯)的化合物，特别是偶合剂包括如碳化二亚胺(如二环己基碳二亚胺(DCC)，1，3-二异丙基碳二亚胺(DIC)或1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸化物)，双(2-氧代-3-噁唑烷基)膦酰氯)，羰基二咪唑(CDI)，新戊酰氯或2，4，6-三氯苯甲酰氯的化合物；其中上述化合物优选与如1-羟基苯并三唑(HOBt)或N-羟基琥珀酰亚胺(HO-Su)的化合物或如下列的胺一起使用，所述胺如三乙胺，吡啶或在4-位上被-N(R16)(R17)取代的吡啶，其中R16和R17各自选自烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基或杂环基(形成例如4-二甲氨基吡啶(DMAP)的化合物)，或者其中R16和R17与它们所连接的氮原子一起形成一个杂环基(形成例如4-吗啉代吡啶或4-吡咯烷基吡啶的化合物)。偶合剂∶原料紫杉烷的摩尔比优选是由约1∶1至约2∶1。
式II噁唑啉∶原料紫杉烷的摩尔比优选是由约1∶1至约2∶1。
反应优选是在约0℃至约140℃温度下并于一个大气压下进行。反应优选在惰性气体如氩气氛下进行。
所用优选溶剂为惰性有机液体如甲苯，乙腈，1，2-二氯乙烷，氯仿，四氢呋喃，吡啶，二氯甲烷或二甲基甲酰胺。所用溶剂的量优选是应使原料紫杉烷占以溶剂和紫杉烷化合物的总合为基准的约20％重量。
在偶合的式III产物中原料噁唑啉4-和5-位取代基的立体构象可以保留和/或转化，例如，当5-位取代基相应于原料被转化时，则产生由顺式转化成反式的差向异构化作用。
本发明还提供了新的式III带有噁唑啉侧链的紫杉烷及其盐，包括其所有立体异构体，基本上不含有其它立体异构体的形式或与其它选择性立体异构体或所有其它立体异构体混合的形式。
开环形成式X紫杉烷及其盐式X带有侧链的紫杉烷或其盐可以通过下述方法由带有噁唑啉侧链的式III紫杉烷或其盐制备，此方法包括将式III紫杉烷或其盐与能够使与所述紫杉烷化合物紫杉烷残基C-13键合的噁唑啉基团开环以形成所述式X化合物或其盐的含水酸反应。
任何能够完成上述开环反应的含水酸均可用于本发明方法中，可开环酸的实例包括羧酸如乙酸或三氟乙酸，或优选无机酸如盐酸，氢氟酸或硫酸水溶液，可开环酸∶式III化合物的摩尔比优选由约1∶1至约10∶1，水∶式III化合物的摩尔比优选由约1∶1至约100∶1。
开环反应优选是在约-20℃至约40℃温度下并在约1个大气压下进行。反应优选在氮气，氩气或空气气氛下进行。
所用优选溶剂为单独使用或与水混合的惰性有机液体如四氢呋喃，醇(优选低级链烷醇如甲醇)，二噁烷，甲苯，乙腈或它们的混合物，所用溶剂的量优选是应使式III原料化合物占以溶剂和式III化合物的总和为基准的大约5％重量。
本发明优选的实施方案进一步包括脱除紫杉烷残基上的一个或多个基团，特别是游离的羟基以制备式X紫杉烷。例如，脱保护反应可通过用脱保护剂于上述开环反应之前或之后，或与开环反应同时进行，任何能够完成脱保护反应的化合物均可用作脱保护剂。例如，酸如氢氟酸或含水质子传递酸，或四烷基氟化铵如四正丁基氟化铵可用于脱除甲硅烷基保护基；苄基保护基可通过氢化脱除，三氯乙氧羰基保护基可通过与锌反应脱除；而醛缩醇或酮缩醇保护基可通过用质子传递酸或路易斯酸脱除。
本发明优选的实例包括同时进行开环反应和紫杉烷环结构上，特别是C-7上一个或多个羟基保护基的脱保护反应。特别优选的实例包括用能够完成这两个反应的酸(如无机酸例如盐酸)同时进行开环反应和脱保护反应。例如，在上述开环反应条件下使用酸可以使开环反应和C-7上可酸裂解羟基保护基如三烷基甲硅烷基(例如三甲基甲硅烷基或三乙基甲硅烷基)的脱除反应同时进行。
本发明还提供了在开环反应中和任意的脱保护反应中形成的新的式X中间体及其盐，包括其所有立体异构体，基本上不含有其它立体异构体的形式或与选择性地与其它立体异构体或所有其它立体异构体的混合形式。
与碱反应生成式IV紫杉烷及其盐将式X化合物或其盐用碱处理得到式IV化合物或其盐。任何可使酰基-C(O)-R1转变成基团-NH2以生成式IV化合物或其盐的碱均可用于本发明方法中。这种碱的实例包括碱金属碳酸氢盐如碳酸氢钠或碳酸氢钾。碱∶式X化合物的摩尔比优选为约1∶1至约5∶1。
反应优选是在约-20℃至约80℃温度下并于1个大气压下进行。反应优选在氩气，氮气或空气气氛下进行。
所用优选溶剂为单独使用或与水混合的惰性有机液体如四氢呋喃，醇(优选低级链烷醇如甲醇)，甲苯，乙腈，二噁烷或它们的混合物。所用溶剂的量优选应使式X化合物占以溶剂和式X化合物的总和重量为基准的大约1～5％重量。
如上所述，尽管可在开环反应之前进行脱保护反应，但也可在开环反应的同时或之后再用碱进行脱保护基反应，优选是与开环反应同时进行。
分离本发明方法制备的产物可经例如萃取，蒸馏，结晶和柱色谱法分离和纯化。
带侧链的紫杉烷产物本发明方法制备的式IV带侧链的化合物及其盐本身具有药理学活性，或者是可被转化成药理学活性产物的化合物，具有药理学活性的紫杉烷如紫杉醇(taxol)在对癌症例如乳房癌，卵巢癌，结肠癌或肺癌患者治疗中用作抗癌剂。此类带有侧链的紫杉烷的应用已在下列参考文献中公开，例如欧洲专利公开号400,971，美国专利4,876,399，美国专利4,857,653，美国专利4,814,470，美国专利4,924，012，美国专利4,924,011，美国专利申请号07/907,261，1992，7，1由Chen等人申请以及美国专利申请号07/981,151，1992，11，24由Ueda等人申请。所有这些文献在此引入作为参考。
具有下述结构的Taxotere，或者特别是具有上述结构的紫杉醇优选最终以式IV带有侧链的紫杉烷的形式制得 在本发明的任一方法中均可使用或以适宜的形式制得反应物或产物的溶剂化物如水合物。
式IV化合物可溶于水的前药形式也认为包括在本发明范围内。此类式IV化合物的前药形式可通过在C-7或C-10和/或在侧链2’-位上引入下列通式的膦酰氧基制备-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2其中m为0或1-6的整数。
下式新的前药及其膦酰氧基碱盐
其中R1是R5，R7-O-，R7-S-或(R5)(R6)N-；R3和R4各自为R5，R5-O-C(O)-或(R5)(R6)N-C(O)-；R5和R6各自为氢，烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基，芳基或杂环基；和R7为烷基，链烯基，链炔基，环烷基，环烯基，芳基或杂环基；和T为 其中R8为氢，羟基，R14-O-，R15-C(O)-O-，R15-O-C(O)-O-，或-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2；R10和R11各自为氢，烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基，R16-O-芳基，或杂环基；R20为氢，-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2，-OC(O)R21或-OC(O)OR21，其中R21为被1-6个卤原子任意取代的C1-C6烷基，C3-C6环烷基，C2-C6链烯基或下式残基
其中D为一个键或C1-C6烷基而Ra，Rb和Rc各自为氢，氨基，C1-C6一或二烷氨基，卤素，C1-C6烷基或C1-C6烷氧基；R14为羟基保护基；R16为烷基；R30为氢，羟基，氟，-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2或-OC(O)OR21，其中R21如上定义；R15为氢，烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基，芳基或杂环基；m为0或1-6的整数，条件是R8，R20和30中至少一个为-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH2)而R10不为甲基。
优选的式IV’化合物包括其中R10为环烷基；R1为芳基，优选苯基或烷氧基优选叔丁氧基；R3为芳基优选苯基或杂环基优选呋喃基或噻吩基；R4为氢；R8为羟基或烷羰氧基，优选乙酰氧基；R11为芳基优选苯基；R20为-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2或-OC(O)OR21，其中R21为乙基或N-丙基；R30为-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2和m为0或1的化合物。
膦酰氧基通常按照参考文献1993年8月17日申请的U.S.S.N08/108,015中所述方法随式1V最终产物的形成而引入。
在制备上述新的前药过程中，按照U.S.S.N.08/108,015中所述一般反应条件可形成各种新的中间体。用其中不需要的羟基已被保护的式IV化合物作原料，首先将式IV中2’或7或10位或多个位置上存在的活泼羟基被适宜保护的式IV化合物连接到相应的甲硫基甲基醚[-OCH2(OCH2)mSCH3]上，此后根据m的数据，按照上述U.S.S.N.中各步所述将此醚连接成被保护的膦酰氧基甲基醚，然后经常规方法可除去膦酰基保护基和羟基保护基。
此后用常规方法包括将游离酸与金属碱或与胺反应可将游离酸转变成所需碱盐。适宜的金属碱包括钠，钾，锂，钙，钡，镁，锌和铝的氢氧化物，碳酸盐和碳酸氢盐；而适宜的胺包括三乙胺，氨，赖氨酸，精氨酸，N-甲基葡糖胺，乙醇胺，普鲁卡因，苄星(benzathine)二苄胺，缓血酸胺(TRIS)，氯普鲁卡困，胆碱，二乙醇胺，三乙醇胺等。碱盐可进一步经色谱法，随后经冷冻干燥或结晶纯化。
按照上述专利申请(08/108,015)的教导，前药既可以口服也可以非肠道用药。式IV和IV’化合物是新的抗癌剂，其表现在在体外对人结肠癌细胞系HCT-116和HCT-116/VM46及M109肺癌有细胞毒性活性。
下列实施例将进一步描述本发明，这些实施例仅用于说明目的，而对权利要求的范围无任何限制作用。
实施例1(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸乙酯的制备 将(2R，3S)-N-苯甲酰基-3-苯基异丝氨酸乙酯(0.104g，0.332mmol)加到烘箱干燥、氩气清洗的10ml烧瓶中，并悬浮于甲苯(5.0ml)中。加入吡啶鎓对甲苯磺酸(PPTS)(42mg，0.167mmol)，于室温搅拌约1小时后，将混合物加热回流，加热得到澄清的均匀溶液。加热约1小时后，反应混合物变得浑浊。加热16.5小时后，TCL显示反应完全(1∶1乙酸乙酯(EtOAc)∶己烷，PMA(磷钼酸)/乙醇，紫外(U.V.))。
反应混合物用10ml氯仿稀释，用5ml饱和NaHCO3水溶液洗涤，Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到97.8mg黄色油状物(产率＝100％)。1H NMR显示得到仅含微量(＜＜5％)杂质的反式-噁唑啉标题产物，其中没有相应的顺式-噁唑啉。
实施例2(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸乙酯的制备 将(2R，3S)-N-苯甲酰基-3-苯基异丝氨酸乙酯(0.100g，0.319mmol)加到火焰干燥、氩气清洗的5ml烧瓶中，溶于吡啶(1.0ml)并冷至0℃。滴加甲磺酰氯(38mg，0.335mmol)，并于0℃将黄色溶液搅拌13/4小时，然后热至室温。于室温11/2小时后薄层色谱法(TCL)显示反应完全(1∶1乙酸乙酯∶己烷，PMA/乙醇，U.V.)将不均匀混合物用5ml乙酸乙酯稀释并用1/3饱和CuSO4水溶液(10ml)洗涤。水相用2×5ml乙酸乙酯萃取，合并的有机相用5ml饱和NaCl水溶液洗涤，Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到0.12g黄色油状物。
标题产物经硅胶色谱法(柱20mmd×50mml)用1∶1乙酸乙酯∶己烷纯化，得到92.6mg黄色油状物(产率＝98.3％)。1H NMR和质谱显示得到反式-噁唑啉标题产物。旋光率(c＝0.1，CHCl3)，[α]D＝+15.6°，[α]578＝+16.3°，[α]546＝+18.7°，[α]436＝+33.1°。
原料化合物(2S，3S)-N-苯甲酰基-3-苯基异丝氨酸乙酯如下列分离实验制备于0℃搅拌下10分钟内向含有(4S-顺式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸乙酯(0.79g，2.67mmol)甲醇(MeOH)(57ml)溶液的500ml烧瓶中加入1NHCl(57ml)。在加入HCl时有沉淀生成，经加入四氢呋喃(THF)令沉淀溶解，然后向澄清溶液中加入THF(57ml)，并于0℃将混合物搅拌2小时15分钟。用饱和的NaCHO3(120ml)将溶液的PH调至9.0，然后令混合物于室温搅拌18小时。(反应经TLC(硅胶)检测，用4∶6 EtOAc∶己烷作洗脱剂，原料的Rf＝0.71，产物的Rf＝0.42，UV显色)。
将反应用EtOAc(200ml)稀释，分出水层并用EtOAc(100ml×1)萃取，然后将合并的EtOAc溶液用盐水(150ml×1)洗涤，Na2SO4干燥，过滤并浓缩得到固体状粗品(2S，3S)-N-苯甲酰基-3-苯基异丝氨酸乙酯(0.810g)。将其溶于热MeOH(15ml)中并于室温静置30分钟，然后于4℃静置1小时。将固体过滤，用冷MeOH(2ml)洗涤并真空干燥，第一批得到0.43g(2S，3S)-N-苯甲酰基-3-苯基异丝氨酸乙酯，如上所述第二批得到0.24g，总共得到0.67g(80％)(2S，3S)-N-苯甲酰基-3-苯基异丝氨酸乙酯。(白色固体mp＝160-161℃，[α]D＝-40.3°(C，l，CHCl3)。
元素分析C18H19NO40.03H2O计算值实测值C68.8668.99H6.12 6.07N4.46 4.60H2O 0.20 0.20实施例3(4S-反式)-和(4S-顺式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸乙酯 和 将(2S，3S)-N-苯甲酰基-3-苯基异丝氨酸乙酯(66.8g，0.213mmol)加到烘箱干燥、氩气清洗的10ml烧瓶中，并悬浮于甲苯(4.0ml)中。加入吡啶鎓对甲苯磺酸(49mg，0.195mmol)，烧瓶装上迪安-斯达克榻分水器(装有4埃分子筛)，将反应加热回流(加热下大部分固体溶解)。5小时后，TCL显示反应接近完全(1∶1EtOAc∶己烷，PMA/EtOH，U.V.)。
令回流继续过夜，加热22小时后，将反应冷至室温。溶液中生成一些油滴状油状物，将此油状物进一步冷至室温。加入～5ml EtOAc，固体溶解不明显，加入～3ml CHCl3，固体全部溶解。TLC显示没有原料存在。
溶液用5ml饱和NaHCO3水溶液洗涤，Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到64.3mg部分结晶的黄色油状物。1H和13C NMR显示顺式-噁唑啉标题产物反式-噁唑啉标题产物杂质为-5痕量1。反式-噁唑啉标题产物是由存在于原料中的痕量(2R，3S)-N-苯甲酰基-3-苯基异丝氨酸乙酯产生的。产物于硅胶上用1∶1 EtOAc/己烷2∶1 EtOAc/己烷进行色谱分离(Rf＝0.57(1∶1EtOAc/己烷)，得到49.3mg油状黄色固体，产率＝78.4％；1H NMR显示顺式和反式噁唑啉标题产物的比率约为10∶1(顺式∶反式)。
实施例4(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸甲酯的制备(a)苯甲亚氨酸乙酯盐酸化物
将苄腈(30.3g，294mmol)和乙醇(14.2g，308mmol)加到火焰干燥、氩气清洗的100ml烧瓶中并冷至0℃。向搅拌的溶液中吹入HCl20分钟，此时配衡瓶显示已经加入了17.5g HCl。停止加入HCl并于0℃搅拌澄清溶液，约1小时后开始有沉淀生成。
于0℃搅拌约21/2小时后，将均匀混合物转入4℃冷室中。于4℃31/2天后，将固体物捣碎并用150ml冷至4℃乙醚研制。令混合物于4℃静置6小时，将混合物真空过滤并迅速用2×100ml冷乙醚洗涤，高真空(0.5mmHg，17小时)干燥，得到51.6g(94.5％)白色自由流动的粉状标题产物。
(b)(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸甲酯 将(2R，3S)-3-苯基异丝氨酸甲酯盐酸盐(5.76g，24.9mmol)溶于1，2-二氯乙烷(75ml)，加入三乙胺(2.77g，27.3mmol)并在将所得混合物搅拌15分钟后，一次加入上述步骤(a)所制备的苯甲亚氨酸酯(benzimidate)(4.62g，24.9mmol)。将混合物搅拌10分钟，然后加热回流。回流41/2小时后，TCL显示反应完全(1∶1乙酸乙酯/己烷，PMA/乙醇，U.V.)。
反应混合物用150ml二氯甲烷和150ml 10％K2CO3稀释并振摇，分层，水相用3×50ml CH2Cl2萃取，合并的有机相用50ml饱和NaCl水溶液洗涤，Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到黄色油状物，将其于硅胶柱(干柱～750ml；装柱100mmd×110mml)用1∶2乙酸乙酯/己烷纯化，得到6.05g略带颜色的油状标题产物，将其于室温静置固化，产率＝86.4％。
实施例5(4S-顺式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸乙酯的制备 于0℃2分钟内向含有(2R，3S)-N-苯甲酰基-3-苯基异丝氨酸乙酯(2.00g，6.38mmol)的吡啶(20ml)溶液的100ml烧瓶中滴加甲磺酰氯(0.52ml，6.70mmol)。将溶液于0-4℃搅拌90分钟，然后于65-70℃搅拌18小时。(反应经TCL检测，用1∶2EtOAc∶甲苯作展开剂，原料的Rf＝0.42，甲磺酸酯的Rf＝0.48，顺式-噁唑啉标题产物的Rf＝0.78，UV显色)。
将反应冷至室温并用EtOAc(80ml)和1/3饱和CuSO4溶液(80ml)(1/3饱和CuSO4溶液通过将饱和CuSO4溶液稀释至其原始浓度的1/3制备)稀释。分出水层并用EtOAc(40ml×1)萃取，合并的EtOAc溶液用盐水(80ml×1)洗涤，Na2SO4干燥，过滤，浓缩并与庚烷(20ml×2)共沸，得到固体状粗品顺式噁唑啉标题产物(1.88g)。将其溶于热EtOAc(8ml)并加入己烷(4ml)，将结晶混合物于室温静置20分钟，然后于4℃静置30分钟，将固体过滤，用冷10％EtOAc的己烷液洗涤并空气干燥，得到1.34g(71.3％)顺式-噁唑啉标题产物，熔点135℃。[α]D＝-9.25(C＝1.0，CHCl3)。
实施例6(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸的制备 将(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸乙酯(92mg，0.311mmol)导入1英钱管形瓶中并溶于四氢呋喃(THF)(0.8ml)，滴加LiOH(1N水溶液，0.343mmol)并将所得双相混合物于室温剧烈搅拌，5分钟内得到均匀溶液。45分钟后，TLC显示无原料存在(1∶1乙酸乙酯(EtOAc)/己烷，PMA/乙醇(EtOH)，U.V)。
将溶液冷至0℃并进一步用2.0ml THF稀释，反应用0.34ml1N HCl(1.1当量)骤冷。热至室温后，溶液用5ml EtOAC和5mlH2O稀释并振摇。分层，水相用3×5ml EtOAc萃取。(萃取后，水相PH-6)。合并的有机相用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到72.1mg白色固体，产率＝87％。1H和13C NMR以及质谱显示为标题产物，其熔点为201-203℃，[α]D＝+25.6°，[α]578＝+26.9°，[α]546＝+30.7，[α]436＝+53.8，(C＝1.0 CHCl3∶CH3OH(1∶1)。
实施例7(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸的制备 将(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸甲酯(0.509g，1，81mmol)加到10ml烧瓶中并溶于四氢呋喃(THF)(4.7ml)。滴加氢氧化锂(1N水溶液，2.0ml，1.99mmol)，将双相混合物剧烈搅拌，于2分钟内加完氢氧化锂后，得到一澄清溶液。15分钟后，TLC显示反应完全(1∶1乙酸乙酯∶己烷，DMA/乙醇)。
将反应混合物进一步用10ml THF稀释并将所得浑浊溶液冷至0℃。通过滴加2.0ml 1N HCl水溶液使反应骤冷，溶液再用20ml乙酸乙酯和15ml水稀释并振摇。分层，水相用3×10ml乙酸乙酯萃取(萃取后，水层的PH约为6)。合并的有机相用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将所得浓缩物溶于苯和甲醇混合液中，但在甲醇，CHCl3，乙酸乙酯或这些溶剂的混合液中不易溶解。将浓缩物于高真空下干燥过夜，得到白色固体状标题产物0.448g(产率＝93％).M.P.＝201-203°.[α]D＝+25.6，[α]578＝+26.9°，[α]546＝+30.7，[α]436＝+53.8°，(c＝1.0，CHCl3∶CH3OH(1∶1)).
实施例8(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸的制备将乙醇(0.1ml)与四氢呋喃(1.0ml)混合并将混合物冷至-78℃，滴加正丁基锂(n-BuLi)(2.12M，0.050ml)，并将混合物温热至0℃。加入具有下列结构式的固体(4S-顺式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸乙酯
(20mg，0.0678mmol)并将反应搅拌1小时(有少量水存在)。经TCL检测到顺式噁唑啉乙酯原料和相应的反式噁唑啉乙酯(5-位转向)混合物(在此步骤可观察到很少量的水解反应)。将反应混合物再搅拌1小时，然后令其于冰浴中(0℃至室温)过夜，18小时后，TCL显示绝大部分为反式酸标题化合物并有痕量顺式酯原料(溶剂体系己烷∶EtOAc2∶1(痕量顺式酯)和EtOAc∶丙酮∶H2O∶MeOH7∶1∶1∶1(标题产物))。
反应用磷酸盐(PH＝4.3)缓冲液骤冷并用乙酸乙酯(5×10ml)萃取。将有机相干燥并除去溶剂，得到～17mg(93％)标题产物。(NMR显示为反式酸标题产物)。M.P.＝135℃[α]D＝-92.5°，(C＝1.0，CHCl3)。
实施例9(4S-反式)-和(4S-顺式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸的制备 和 将(4S-顺式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸乙酯(202mg，0.6890mmol)溶于四氢呋喃(1.5ml)并滴加氢氧化锂(1N水溶液，0.718ml)，得到一不均匀溶液，将反应混合物于室温搅拌过夜，此时溶液变得澄清。(TLC(乙酸乙酯∶己烷，1∶1)显示有少量原料存在。TLC(乙酸乙酯∶甲醇∶水∶丙酮7∶1∶1∶1)显示得到顺式和反式噁唑啉标题产物)。
加入1N HCl(0.718ml)，随后加入饱和NaCl(约10ml)和乙酸乙酯(约10ml)，水层用乙酸乙酯洗涤5次(约10ml)并将H2O层由PH～5.5进一步酸化至3.4PH，用约10ml EtOAc萃取。合并的有机层用MgSO4干燥，并过滤。减压蒸发乙酸乙酯，得到183mg(100％)顺式和反式标题产物的混合物(经1H NMR测得3∶1顺式∶反式)。
实施例107-三乙基甲硅烷基13-[[(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑基]羰基]浆果赤霉素III(a)7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉III(i)[2aR-(2aα，4β，4αβ，6β，9α，11β，12α，12aα，12bα)]苯甲酸12b-乙酰氧基-2a，3，4，4a，5，6，9，10，11，12，12a，12b-十二氢-6，9，11-三羟基-4a，8，13，13-四甲基-5-氧代-4-[(三乙基甲硅烷基)氧基]-7，11-亚甲基-1H-环癸[3，4]苯并[1，2-b]氧杂环丁烷-12基酯
将10-去乙酰基浆果赤霉素III(27.4g，50.3mmol，含有H2O1.57％，CH3OH1.6％，乙酸乙酯0.09％和己烷0.03％)和4-二甲氨基吡啶(2.62g，21.4mmol，H2O重量百分比(Karl Fisher法(″K.F.″)＝0.09)加到火焰干燥、氩气清洗的113口烧瓶(装有机械搅拌器和数字温度计)并溶于无水二甲基甲酰胺(122ml，H2O重量百分比(K.F.)＝＜0.01)。加入二氯甲烷(256ml，H2O重量百分比(K.F.)＝＜0.01)(在加入二氯甲烷期间反应溶液的温度由23℃升至25℃)并将所得均匀溶液冷至-50℃。
于3分钟内滴加三乙胺(16ml，120mmol，H2O重量百分比(K.F.)＝0.08)并于-50℃将所得溶液搅拌5分钟后，滴加纯净的三乙基甲硅烷基氯(18.6ml，111mmol)，于10分钟内加入三乙基甲硅烷基氯，此时反应温度不超过-50℃。在加入三乙基甲硅烷基氯期间反应变得十分浑浊。
将所得混合物于约-50℃搅拌1小时，然后令其于-48℃冷冻箱中静置(不搅拌)22小时。(分离实验表明于-48℃将反应搅拌8小时得到～60％转化)，将混合物于冷冻箱中取出并热至约-10℃。混合物TLC分析(溶剂乙酸乙酯，染色剂磷钼酸/乙醇)发现没有原料存在并且显示一个产物色点(Rf＝0.60)。将冷却的混合物与EtOAc(11)合并并用H2O(890ml)洗涤。
分出形成的水层并用EtOAc(250ml)萃取。合并的有机层用5.7％NaH2PO4水溶液(2×250ml，测得5.7％NaH2PO4水溶液PH＝4.30±0.05，测得合并的NaH2PO4洗液PH＝5.75±0.05)，半饱和NaCl水溶液(250ml)、饱和NaCl水溶液(250ml)洗涤，Na2SO4干燥，过滤并于旋转蒸发仪上浓缩(此实施例于旋转蒸发仪上全部浓缩过程于35℃水浴温度下进行)。
将所得半固体状物暴露于高真空下(～1mmHg 20分钟)进一步干燥，得到41.5g白色固体，然后将粗产物溶于CH2Cl2(400ml)(于35℃水浴中加热以使固体溶解)，于旋转蒸发仪上使所得溶液的体积减至～150ml，立即开始析晶并令混合物于室温静置1小时。加入己烷(100ml)并使混合物轻轻回荡，令混合物于4℃冷室中静置16.5小时。将固体过滤，用1∶9 CH2Cl2/己烷(3×250ml)于吸滤器上洗涤，并于高真空下(～0.2mmHg 42小时)干燥，得到26.1g(79％)白色粉末状标题产物。将母液于旋转蒸发仪上浓缩，残余物于CH2Cl2中结晶，得到4.5g(14％)白色结晶状标题产物。用相同方法将第一批产物进行重结晶不需加热将固体溶于CH2Cl2(100ml)，并于旋转蒸发仪上将所得溶液的体积减至～7ml，于5分钟内开始析晶，令混合物于室温静置1小时，4℃冷室中静置42小时。将结晶过滤并于吸滤器上用1∶9 CH2Cl2/己烷(3×50ml)洗涤，于高真空下(～0.2mmHg，18小时)干燥。此批产物的1H NMR与第一批产物的1H NMR相同。两批合并的产率为93％(未校正)。
元素分析(％)C35H50O10Si计算值 实测值C 63.8063.43H 7.65 7.66KF(H2O)0.00 0.00
m.p.239-242℃(分解)[α]22D-53.6°(c1.0，CHCl3)TLCRf＝0.60(硅胶，EtOAc)磷钼酸/乙醇显色。
(ii)[2aR-(2aα，4β，4αβ，6β，9α，11β，12α，12aα，12bα)]-6，12b-双(乙酰氧基)-12-(苯甲酰氧基)-2a，3，4，4a，5，6，9，10，11，12，12a，12b-十二氢-9，11-二羟基-4a，8，13，13-四甲基-4-[(三乙基甲硅烷基)氧基]-7，11-亚甲基-1H-环癸[3，4]苯并[1，2-b]氧杂环丁烷-5-酮(7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III) 将上述步骤(i)所得标题产物(21.4g，32.4mmol)加到火焰干燥、氩气清洗的113口烧瓶(装有机械搅拌器和数字温度计)并溶于THF(350ml，由钠/二苯酮中新蒸的)。将所得溶液冷至-70℃，于23分钟内滴加正丁基锂(n-BuLi)溶液(14.6ml，2.56M己烷溶液，37.3mmol，于0℃THF中用二苯基乙酸滴定，作三次平行分析)，在滴加过程中反应温度不超过-68℃。在加入n-BuLi时有固体生成并且于-70℃溶解不明显。将所得混合物于-70℃搅拌20分钟，然后热至-48℃，当热至-48℃时得到-澄清均匀溶液。
于-48℃搅拌1/2小时后，于7分钟内滴加乙酸酐(4.6ml，49mmol，使用前于氩气氛下(137-138℃1atm)新蒸的)，在滴加过程中反应温度不超过-45℃。将所得溶液于-48℃搅拌20分钟，然后于0℃搅拌1小时，溶液用乙酸乙酯(350ml)稀释，饱和NH4Cl水溶液(250ml)洗涤，分层，水层用乙酸乙酯(200ml)萃取。合并的有机层用饱和NaCl水溶液洗涤，Na2SO4干燥，过滤并于旋转蒸发仪上浓缩(此实施例中于旋转蒸发仪上的所有浓缩过程在35℃水浴温度下进行)。将半固体状物暴露于高真空下(～1.5mmHg，1/2小时)，得到24.7g白色固体。
将粗产物溶于CH2Cl2(300ml)并于旋转蒸发仪上将所得溶液的体积减至～70ml，一分钟内开始结晶。令混合物于室温静置45分钟，然后于4℃冷室中静置18小时。将结晶过滤，于吸滤器上用1∶9 CH2Cl2/己烷(3×100ml)洗涤并于真空下(～0.2mmHg，19小时)干燥，得到20.9g(92.0％)精细白色针状结晶的标题产物。于旋转蒸发仪上将母液浓缩，残余物于CH2Cl2/己烷中结晶，得到0.82g(3.6％)细小白色针状结晶为标题产物。
母液的结晶过程如下所述进行将残余物溶于CH2Cl2(10ml)中并于旋转蒸发仪上将所得溶液的体积减至～5ml。于室温静至1/2小时后，无结晶生成。以每份1ml加入己烷(5ml)并将溶液轻轻摇荡，此时有极少结晶出现。令混合物于室温静置1/2小时(有较多的结晶生成)，然后于4℃冷室中静置18小时，将结晶过滤，于吸滤器上用1∶9CH2Cl2/己烷洗涤，并于高真空下(～0.15mmHg，21小时)干燥。两批产物合并的产率为95.6％。m.p.＝218-219℃(分解)；[α]22D＝-78.4°(C1.0，CHCl3)；TLCRf＝0.37(硅胶，1∶9丙酮∶CH2Cl2，磷钼酸/乙醇显色)。(b)7-三乙基甲硅烷基13-[[(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑基]羰基]浆果赤霉素III 将上述步骤(a)所制7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III(0.209g，0.298mmol)，如实施例6制备的噁唑啉标题产物(80.2mg，0.300mmol)，二环己基碳二亚胺(DCC)(84mg，0.407mmol)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)(25mg，0.205mmol)加到1英钱管形瓶(烘干)，用氩气清洗并悬浮于甲苯(1.0ml)中。于室温搅拌1小时后，部分固体溶解，混合物呈黄色。将不均匀混合物热至85℃，21/2小时后TLC显示有原料存在(1∶1乙酸乙酯∶己烷，PMA/乙醇，U.V.)。于85℃继续加热，5小时后TLC显示基本相同。令反应于室温搅拌过夜，于室温14小时后，TLC仍然相同。将不均匀混合物用1.0ml乙酸乙酯稀释(观察到部分沉淀)并将混合物经一层硅藻土过滤，硅藻土用3×1ml乙酸乙酯洗涤，将滤液浓缩，得到0.349g黄色固体。1H NMR显示存在的标题产物和7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III的比率约为8∶1，另外也可观察到一些1，3-二环己基脲(DCU)和痕量原料噁唑啉或杂质。
将混合物于硅胶上(柱20mm直径×90mm长)用1∶2乙酸乙酯/己烷-1∶1乙酸乙酯/己烷进行部分分离。色谱法分离过程中，TLC分析发现在比偶合标题产物Rf稍低处有一小色点，将此杂质和偶合产物的混合馏分合并。第一个色点偶合标题产物(0.267g灰白色固体，产率94％)(1H NMR显示所需偶合产物和上述杂质的比率约为18∶1)；第一色点和上述混合馏分11.5mg油状物(1HNMR显示所需偶合产物和不同杂质的比率约为2∶1)。M.P.＝139-142℃[a]D＝-49.5°，[α]578＝-52.6°，[α]546＝-63.5°，[α]436＝-157.0°，(c＝1.0，CHCl3)。
实施例117-三乙基甲硅烷基13-[[(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑基]羰基]浆果赤霉素III的制备
将4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸(96.0mg，0.359mmol)，7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III(0.252g，0.359mmol)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)(30mg，0.246mmol)加到火焰干燥的1英钱管形瓶中，用氩气清洗并悬浮于甲苯(1.2ml)中，立即加入二异丙基碳二亚胺(DIC)(63mg，0.503mmol)，于室温搅拌此浅黄色不均匀混合物。随着时间的延长，得到十分浑浊的黄色溶液。此时，将管形瓶密封并浸入80℃油浴中，于～80℃3小时后，得到暗橙色溶液。将反应混合物直接浓缩。1H NMR显示所需偶合产物和7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III的比率约为6∶1。产物经硅胶色谱法用1∶3 EtOAc/己烷进行部分分离，得到0.300g灰白色固体。TLC显示有分离的产物和二异丙基脲副产物。
1H NMR显示仅含有～25∶1的所需偶合产物和杂质及二异丙基脲副产物。所需偶合产物与二异丙基脲副产物的比率约为12∶1。
由上述结果得出所需偶合产物的产率约为85％。
M.P.＝139-142℃.[α]D＝-49.5°，[α]578＝-52.6°，[α]546＝-63.5°，[α]436＝-157.0°，(c＝1.0，CHCl3).
实施例127-三乙基甲硅烷基13-[[(4S-反式)-4，5-二氢-2，5-二苯基-5-噁唑基]羰基]浆果赤霉素III在下列表1所列条件下将7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III(此实施例中缩写为“A”)和(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸(此实施例中缩写为“B”)反应制备标题化合物。烷点＝139-142℃。[α]D＝-49.5°，[α]578＝-52.6°，[α]546＝-63.5°，[α]436＝-157.0°，(C＝1.0，CHCl3)。
表1实施B 试剂 浓度 时间 温度例号 (eq.).(eq.).溶剂 B(M) (hrs) (℃)12a 1.2 DCC(1.4) PhCH30.29 1 23DMAP(0.7) 2.58512b 1.0 DCC(1.4) PhCH30.30 5.585DMAP(0.7)12c 1.0 R2POCl(1.04)1.2-DCE 0.28 6 23DMAP(1.01)15 55NEt3(1.04)12d 10 R2POCl(1.01)1.2-DCE 0.23 5 23NEt3(2.0)16 6544 7512e 1.0 CDl(1.2) THF 0.39 21 70DMAP(1.0)12f 1.0 ArCOCl(1.5) CH2Cl20.23 23 23DMAP(2.0)NEt3(1.5)12g 1.0 ArCOCl(1.5) PhCH30.29 5.523DMAP(2.0)NEt3(1.5)12h 1.0 ArCOCl(1.05) CH2Cl20.30 3.5 -78DMAP(2.0) 19-60NEt3(1.0)1 02023
表1(续)12i1.0 t-BuCOCl(1.1)1，2-DCE0.284.5 23DMAP(2.0)NEt3(1.2) 156012j2.1 t-BuCOCl(2.1)1，2-DCE0.232123DMAP(4.2)NEt3(2.3)12k1.0 t-BuCOCl(1.0)CH2Cl20.241923DMAP(0.07)NEt3(2.0)12l1.0 t-BuCOCl(1.0)Pyridine0.234.5 23DMAP(0.05) 16552323*eq.＝当量，以7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III为基准(根据上述实施例12a＝0.061g；12b＝0.533g；12c＝0.200g；12d＝0.161g；12e＝0.057g；12f＝0.200g；12g＝0.203g；12h＝0.208g；12i＝0.196g；12j＝0.165g；12k＝0.165g；12l＝0.164g所用7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III的量)
表1关键词R2POCl＝ ＝双(2-氧-3-噁唑烷基)膦酰氯DCC＝二环己基碳二亚胺DMAP＝二甲氨基吡啶DlC＝二异丙基碳二亚胺ArCOCl＝2，4，6-三氯苯甲酰氯＝ CDl＝羰基二咪唑t-BuCOCl＝新戊酰氯1，2-DCE＝1，2-二氯乙烷NEt3＝三乙胺THF＝四氢呋喃PhCH3＝甲苯实施例12a在加入溶剂之前将所有试剂混合在一起。经色谱法分离得到108％(90mg)标题产物(含有约10％杂质)。NMR未发现原料化合物A。(此实施例中B的浓度为0.29M。在分离实验中当使用DCC(2.0当量)，DMAP(3.0当量)，DMAP·HCl(2.0当量)的CHCl3溶液和1.0当量B时，27小时后NMR显示B的摩尔浓度为0.07M时不能令反应迅速进行且不足以观察到标题产物的生成。
实施例12b在加入溶剂之前将所有试剂混合在一起。所得标题产物与原料化合物A的比率约为9∶1(经NMR显示)。经色谱法分离得到87％(0.63g)标题产物。
实施例12c在加入溶剂之前将所有试剂混合在一起。所得标题产物与原料化合物A的比率约为1∶1(经NMR显示)。1小时后不再进一步反应。
实施例12d在加入原料化合物A之前令活化的噁唑啉B形成1小时(通过向原料化合物B中加入R2POCl)。所得标题产物与原料化合物A的比率约为1∶6(经NMR显示)。5小时后观察到有极微弱的反应进行。
实施例12e在加入原料化合物A之前使CDI与原料化合物B反应1小时，当t＝4小时时加入DMAP。得到标题化合物与原料化合物A和杂质的比率约为1∶1∶1(经NMR显示)。在加入DMAP之前未发现有反应发生并且过度加热引起一些分解反应。
实施例12f最后加入ArCOCl。得到标题产物与原料化合物A的比率约为1∶1(经NMR显示)。1.5小时后未观察到有进一步反应进行。
实施例12g最后加入ArCOCl。得到标题产物与原料化合物A的比率约为1∶1(经NMR显示)。1小时后未观察到有进一步反应进行。
实施例12h最后加入ArCOCl。得到标题产物与原料化合物A的比率约为1∶1(经NMR显示)。3.5小时后未观察到有进一步反应进行。
实施例12i在加入原料化合物A之前预先制备混合酸酐1小时(通过向原料化合物B中加入t-BuCOCl)。得到标题产物与原料化合物A的比率约为1∶2(经NMR显示)。2小时后未观察到有进一步反应进行。
实施例12j
在加入原料化合物A之前预先制备混合酸酐1小时(通过向原料化合物B中加入t-BuCOCl)。得到标题产物与原料化合物A的比率约为3∶1(经NMR显示)。1小时后未观察到有进一步反应进行。
实施例12k在加入原料化合物A之前预先制备混合酸酐1小时(通过向原料化合物B中加入t-BuCOCl)。加入原料化合物A后1小时加入DMAP。得到标题产物与原料化合物A的比率约为1∶4(经NMR显示)。在未加入DMAP情况下未观察到有反应发生；在加入DMAP后2小时未观察到有进一步反应进行。
实施例12l在加入原料化合物A之前预先制备混合酸酐1小时(通过向原料化合物B中加入t-BuCOCl)。于16小时后55℃加入DMAP。得到标题产物与原料化合物A的比率约为1∶6(经NMR显示)。在加入DMAP之前未观察到有反应发生或者观察到有很微弱的反应。
实施例137-三乙基甲硅烷基13-[[(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑基]羰基]浆果赤霉素III的制备将(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸(65.0mg，0.243mmol)，7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III(0.142g，0.203mmol)，DCC(75mg，256mmol)和吡咯烷并吡啶(38mg，256mmol)加到火焰干燥的1英钱管形瓶中，用氩气清洗并部分溶于甲苯(1.0ml)。将所得黄色不均匀混合物于室温搅拌。3小时后TLC显示有标题产物生成(1∶1 EtOAc∶己烷，PMA/EtOH，U.V.)(于室温下搅拌之后，7小时和23小时TLC显示没有进一步的变化。)将反应混合物用乙酸乙酯(1ml)稀释，经一层硅藻土过滤并浓缩，得到0.275g油状黄色固体。1H NMR显示所需偶合标题产物和7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III的比率约为8∶1，偶合剂的副产物N-酰基脲存在的量约与7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III的量相同。
将固体于硅胶上用1∶2 EtOAc/己烷进行色谱分离，得到0.176g灰白色固体，产率约为91％。1H NMR显示所需偶合产物和N-酰基脲的比率约为11∶1。
实施例147-三乙基甲硅烷基13-[[(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑基]羰基]浆果赤霉素III的制备将(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑基羧酸(66.7mg，0.250mmol)，7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III(0.146g，0.208mmol)，DCC(79mg，0.383mmol)和4-吗啉代吡啶(41mg，0.250mmol)加到火焰干燥的1英钱管形瓶中，用氩气清洗并部分溶于甲苯(1ml)。将所得黄色不均匀混合物于室温搅拌。3小时后TLC显示有标题产物生成(1∶1 EtOAc∶己烷，PMA/EtOH，U.V.)(于室温下搅拌之后，7小时和23小时TLC显示没有进一步的变化。)将反应混合物用乙酸乙酯(1ml)稀释，经一层硅藻土过滤并浓缩，得到0.280g黄色固体。1H NMR显示为所需偶合标题产物且不含有7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III(尽管经TLC可观测到痕量)。偶合剂的副产物N-酰基脲与标题产物的比率约为1∶9。
将固体于硅胶上用1∶2 EtOAc/己烷进行色谱分离，得到0.196g白色固体，1H NMR显示偶合产物和N-酰基脲的比率约为15∶1。产率大于90％。M.P.＝139-142℃.[α]D＝-49.5°，[α]578＝-52.6°，[α]546＝-63.5°，[α]＝436＝-157.0°(c＝1.0，CHCl3)。
实施例15制备7-三乙基甲硅烷基13-[[(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑基]羰基]浆果赤霉素III，和7-三乙基甲硅烷基13-[[(4S-顺式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑基]羰基]浆果赤霉素III 制备实施例9顺反之比为3∶1的顺式和反式噁唑啉标题化合物(100mg)、7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III(219mg，0.3121mmol)、DCC(97mg)和DMAP(23mg)于甲苯(0.9ml)中的混合物。在80℃加热1小时后，有相当数量的7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III没有反应。再加入DMAP(97mg)和DCC(23mg)，混合物在80℃加热过夜。由TLC(己烷∶EtOAc 2∶1)可测出少量起始物。
反应混合物用二氯甲烷(20ml)稀释，向其中加入饱和碳酸氢钠溶液(10ml，水溶液)，水层用二氯甲烷萃取(2×10ml)，合并的有机相用无水MgSO4干燥和真空浓缩后，产品用HPLC(己烷∶乙酸乙酯4∶1)纯化，得到含二环己基脲(DCU)的标题化合物。产物重260mg，在将产品悬浮于乙酸乙酯后，过滤除去DCU。再一次HPLC纯化后给出117mg纯的反式标题化合物(40％)和45mg混合物(～2∶1的反式标题产物∶顺式标题产物(15％))。混合物用制备TLC纯化(己烷∶乙酸乙酯1∶1)得到11mg顺式标题产物。
实施例16制备紫杉醇(Taxol)将上述实施例10得到的偶联标题产物(0.102g，0.107mmol)称重后加入10ml烧瓶中，并溶于四氢呋喃(1.2ml)。然后加入甲醇(1.2ml)，使均相溶液冷至0℃。滴加HCl(水溶液，1N，0.59ml，0.59mmol)，在0℃搅拌澄清的均相溶液。0℃下搅拌3小时后，TLC(1∶1乙酸乙酯∶己烷，PMA/乙醇，U.V)表明仍有起始物。将澄清的均相溶液转移至4℃冷却室内，4℃下18小时后，TLC分析说明反应基本完全(1∶1乙酸乙酯∶己烷，PMA/乙醇，U.V)。得到下述化合物
将澄清溶液加热至室温，加入3.5ml饱和NaHCO3水溶液(可看到产生气泡)生成非均相混合物。加入5ml四氢呋喃和2ml水不能显著增加其溶解性。将非均相混合物于室温剧烈搅拌，1小时后，依然有非均相混合物存在。用7ml水和4ml四氢呋喃进一步稀释非均相混合物，得到的澄清均相混合物于室温下搅拌。
加入NaHCO32.5小时以后TLC表明仅有紫杉醇(2∶1乙酸乙酯/己烷，PMA/乙醇，U.V.)。将反应混合物用25ml乙酸乙酯和25ml水稀释并振荡，分层，水层用3×25ml乙酸乙酯萃取。合并的有机相用Na2SO4干燥、过滤和浓缩得到104mg浅米色透明状固体。1H NMR证实是紫杉醇。得到的固体在硅胶上色谱纯化(柱直径20mm×70mm长)，用2∶1乙酸乙酯/己烷至4∶1乙酸乙酯/己烷洗脱给出79.0mg标题化合物白色固体，产率86.4％。
实施例17制备7，13-双TES浆果赤霉素 把浆果霉素III(3.102g，5.290mmol)溶于无水DMF(21ml)，0℃下向其中加入咪唑(1.80g，26.5mmol)，接着再加入TESCL(4.45ml，26.5mmol)。室温下搅拌过夜，用EtOAC(350ml)稀释，用水(4×20ml)和盐水洗涤。干燥和真空浓缩有机相，残余物经色谱纯化(含20％乙酸乙酸的己烷)给出4.00g(89.1％)目的产物。
实施例18制备1-DMS-7，13-TES浆果赤霉素 把7，13-TES浆果赤霉素(2.877g，3.534mmol)溶于无水四氢呋喃(17.7ml)。0℃下在此溶液中加入咪唑(720.9mg，10.60mmol)，接着加入二甲基氯硅烷(91.18ml，10.60mmol)。在此温度下搅拌反应45分钟，然后用EtOAc(300ml)稀释，用水(4×20ml)洗涤。将有机相干燥和真空浓缩，残余物色谱分离(含10％乙酸乙酯的己烷)，给出2.632g(85.4％)目的产物。
实施例19制备4-羟基-7，13-双TES-1-DMS浆果赤霉素 把实施例18的甲硅烷基化的浆果赤霉素衍生物(815mg，0.935mmol)溶于THF(15.6ml)。0℃下在此溶液中加入红铝(Red-Al)(0.910ml，60％重量比，4.675mmol)。40分钟后，反应用饱和酒石酸钠溶液(7ml)骤停。5分钟后用EtOAc(250ml)稀释反应混合物。有机相用水和盐水洗涤并干燥，然后真空浓缩有机层，残余物经色谱纯化(含10-20％乙酸乙酯的己烷)，给出590mg(76.0％)C4-羟基浆果赤霉素目的类似物。
实施例20制备C4-环丙基酯-7，13-双TES-1-DMS浆果赤霉素
把实施例19的C4-羟基浆果赤霉素衍生物(196mg，0.236mmol)溶于无水THF(4.7ml)。在0℃下用LHMDS(0.283ml，1M，0.283mmol)处理此溶液，在此温度下30分钟以后加入环丙烷羰基氯(0.032ml，0.354mmol)。0℃下搅拌反应1小时，然后用饱和NH4Cl(3ml)骤停。反应混合物用EtOAc(100ml)萃取，用水和盐水洗涤。有机层经干燥和真空浓缩。得到残余物经色谱纯化(含10％乙酸乙酯的己烷)给出137mg(65％)目的产物。
实施例21制备C4-环丙烷基酯浆果赤霉素 把实施例20的7，13-TES-1-DMS-C4-环丙烷浆果赤霉素(673mg，0.749mmol)溶于无水乙腈(6ml)和THF(2ml)。于0℃下在此溶液中加入吡啶(2.25ml)，接着加入48％HF溶液(6.74ml)。0℃，30分钟后，加入TBAF(2.25ml，1M，2.25mmol)。加入附加量的TBAF，直至TLC确定起始物已耗尽。把反应混合物浓缩成浆液，再用EtOAc(350ml)稀释，用1N HCl、NaHCO3饱和溶液和盐水洗涤，真空浓缩。残留物经色谱纯化(含60％乙酸乙酯的己烷)给出366mg(80％)目的产物。
实施例22制备7-TES-4-环丙烷浆果赤霉素 把实施例21的4-环丙烷浆果赤霉素(46.6mg，0.076mmol)溶于无水DMF(1ml)，0℃下在此溶液中加入咪唑(20.7mg，0.305mmol)，再加入TESCl(0.0512ml，0.305mmol)，0℃下搅拌反应30分钟，再用EtOAc(50ml)稀释。反应混合物用水和盐水洗涤、干燥、真空浓缩，残余物经色谱纯化(含30-50％乙酸乙酯的己烷)给出36mg(65.1％)目的产物。
实施例23制备2’，7-双TES-4-环丙烷Paclitaxel
将实施例22化合物(30.0mg，0.413mmol)的THF(1ml)溶液冷却至-40℃，用LHMDS(0.062ml，0.062mmol)处理。5分钟后，加入β-内酰胺*(23.6mg，0.062mmol)的THF溶液(0.5ml)。反应在0℃下搅拌1小时，然后用饱和NH4Cl溶液1ml使反应骤停。反应混合物用EtOAc(40ml)萃取，用水和盐水洗涤。有机层经干燥和真空浓缩，残余物经色谱纯化(含20-30-60％乙酸乙酯的己烷)给出24.5mg(53.6％)目的产物，与5.1mg(17％)的起始物混在一起。
*制备此β-内酰胺的方法见USP5,175,315。
实施例24制备Paclitaxel的4-环丙烷酯
0℃下，将实施例23的产物(22.0mg，0.020mmol)的乙腈溶液(0.5ml)先用吡啶(0.060ml)，再用48％HF溶液(0.180ml)处理。反应混合物于5℃放置过夜，然后用EtOAc(30ml)稀释，用水和盐水洗涤。有机层经干燥和真空浓缩，残余物色谱纯化(含60％乙酸乙酯的己烷)给出10.0mg(57.2％)目的产物。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.10-8.06(m，2H)，7,76-7.26(m，13H)，7.04(d，J＝9.1Hz，1H)，6.27(s，1H)，6.14(m，1H)，5.82(d，J＝9.1Hz，1H)，5.65(d，J＝6.9Hz，1H)，4.85(m，2H)，4.39(m，1H)，4.19(ABq，J＝8.4Hz2H)，3.80(d，J＝6.9Hz，1H)，3.59(d，J＝4.8Hz，1H)，2.60-1.13(m，24H，包括单峰2.23，1.77，1.66，1.23，1.14，各3H).
HRMS C49H54NO14(MH+)计算值880.3544，测定值880.3523实施例25制备7，13-TES-1-DMS-4-环丁烷酯浆果赤霉素 用LHMDS(0.178ml，1M，0.178mmol)于0℃下处理实施例19产物(113.6mg，0.137mmol)的THF溶液(2.6ml)。0℃下30分钟后，加入环丁基羰基氯(24.4mg，0.206mmol)。反应在0℃下搅拌1小时，用NH4Cl饱和溶液(2ml)使反应停止。反应混合物用EtOAc(75ml)萃取，用水和盐水洗涤。有机层经干燥和真空浓缩，残余物经色谱纯化(含10％乙酸乙酯的己烷)给出80mg(64.1％)目的产物。
实施例26制备4-环丁基浆果赤霉素 0℃下，在实施例25化合物的乙腈溶液(3ml)中先加入无水吡啶(0.61ml)，再加入48％HF(1.83ml)。0℃下1小时以后，加入TBAF(0.61ml，1M，0.61mmol)。再加入附加量的TBAF直到所有的起始物全部耗尽。然后部分除去溶剂，残余物用EtOAc(150ml)稀释，用1N HCl和NaHCO3饱和溶液洗涤。有机层经干燥和直空浓缩，残余物色谱纯化(含60％乙酸乙酯的己烷)给出95.6mg(75％)目的产物。
实施例27制备7-TES-4-环丁基酯浆果赤霉素
把实施例26的4-环丁基浆果赤霉素(85mg，0.136mmol)溶于无水DMF(1.4ml)，于0℃下向此溶液中加入咪唑(36.9mg，0.543mmol)和TESCl(91.2μl，0.543mmol)。反应混合物用EtOAc(75ml)稀释，用水和盐水洗涤。有机层经干燥和真空浓缩残余物色谱纯化(含40％乙酸乙酯的己烷)给出74mg(73.6％)目的产物。
实施例28制备2’，7-TES-4-环丁基Paclitaxel 把实施例27的7-TES-4-环丁基酯浆果赤霉素(41mg，0.055mmol)溶于THF(1ml)，将此溶液冷却至-40℃，并先用LHMDS(0.083ml，1M，0.083mmol)，再用实施例23的β-内酰胺(31.7mg，0.083mmol)的THF溶液(0.5ml)处理。反应于0℃放置1小时后用NH4Cl(2ml)骤停。反应混合物用EtOAc(50ml)萃取，用水和盐水洗涤，然后干燥和真空浓缩有机层，残余物色谱纯化(含20-30％乙酸乙酯的己烷)给出56mg(90.2％)目的产物。
实施例29制备4-环丁基Paclitaxel 把实施例28的2’，7-TES-4-环丁基紫杉醇(47mg，0.042mmol)溶于乙腈(1ml)，0℃下在此溶液中先加入吡啶(0.125ml)，再加入48％HF(0.375ml)。反应于5℃放置过夜。然后该反应用EtOAc(50ml)稀释，用1N HCl，NaHCO3饱和溶液和盐水洗涤。有机相经干燥和真空浓缩，残余物经色谱纯化(含60％乙酸乙酯的己烷)给出31.8mg(84.9％)的目的产物。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.15-8.12(m，2H)，7.73-7.26(m，13H)，6.96(d，J＝9.0Hz，1H)，6.26(s，1H)，6.17(m，1H)，5.80(d，J＝9.0Hz，1H)，5.66(d，J＝7.1Hz，1H)，4.83(m，2H)，4.41(m，1H)，4.26(ABq，J＝8.4Hz.2H)，3.78(d，J＝7.0Hz，1H)，3.57(d，J＝5.2Hz，1H)，3.42(m，1H)，2.61-1.14(m，25H，包括单峰2.23，1.76，1.68，1.23，1.14，各3H).
HRMS C50H56NO14(MH+)计算值894.3701，测定值894.3669实施例30制备浆果赤霉素的7，13-TES-1-DMS-4-环戊基酯 0℃下，用LHMDS(0.230ml，1M，0.230mmol)处理实施例19化合物(147mg，0.177mmol)的THF溶液(3.5ml)。30分钟后加入环戊基羰基氯(32.3μl，0.266mmol)。在该温度下搅拌反应1小时后，用NH4Cl饱和溶液使反应停止。反应混合物经萃取、洗涤、干燥和真空浓缩，残留物色谱纯化(含10％乙酸乙酯的己烷)给出90mg(55％)目的产物。
实施例31制备4-环戊基浆果赤霉素
将实施例30的产物(75mg，0.081mmol)的乙腈溶液(1.6ml)于0℃下先用吡啶(0.24ml)，再用48％HF(0.72ml)处理。反应在0℃搅拌1小时，然后加入TBAF(0.405ml，1M，0.405mmol)，1小时后加入5当量上述试剂。反应混合物用EtOAc(100ml)稀释，用1N HCl、NaHCO3饱和溶液和盐水洗涤，有机相经干燥和真空浓缩。残余物色谱纯化(含50％乙酸乙酯的己烷)给出44mg(85％)目的产物。
实施例32制备7-TES-4-环戊基酯浆果赤霉素
把4-环戊基浆果赤霉素(35mg，0.055mmol)溶于无水DMF(1ml)，0℃下在此溶液中加入咪唑(14.9mg，0.219mmol)，接着再加入TESCl(36.8μl，0.219mmol)。反应混合物在0℃搅拌30分钟，用EtOAc(50ml)稀释。有机相经洗涤、干燥和真空浓缩，残余物色谱纯化(含40％乙酸乙酯的己烷)给出31mg(75％)目的产物。
实施例33制备2’，7-TES-4-环戊基酯浆果赤霉素 把实施例32产品(24.5mg，0.0324mmol)的THF溶液(0.6ml)于-40℃先用LHMDS(0.049ml，1M，0.049mmol)，再用实施例23的β-内酰胺(18.6mg，0.049mmol)的THF溶液(0.3ml)处理。反应可0℃下搅拌1小时，然后用NH4Cl饱和溶液骤停。反应混合物用EtOAc(35ml)萃取、洗涤、干燥和真空浓缩。残余物色谱纯化(含20-30-50％乙酸乙酯的己烷)给出15.5mg(42％)目的产物，与7.8mg(31.8％)未反应起始物在一起。
实施例34制备4-环戊基酯Paclitaxel 于0℃下，先用吡啶(0.035ml)，再用48％HF溶液(0.103ml)处理实施例33产品(13mg，0.0115mmol)的乙腈溶液(0.3ml)，反应于5℃放置过夜。然后反应混合物用EtOAc(30ml)稀释，用1NHCl、NaHCO3和盐水洗涤，有机层经干燥和真空浓缩，残余物色谱纯化(含50％乙酸乙酯的己烷)给出7.3mg(70.3％)目的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ 8.17-8.14(m，2H)，7.74-7.26(m，13H)，6.90(d，J＝8.9Hz，1H)，6.27(s，1H)，6.20(m，1H)，5.75(d，J＝8.9Hz，1H)，5.69(d，J＝7.0Hz，1H)，4.79(m，2H)，4.44(m，1H)，4.24(AB q，J＝8.4Hz，2H)，3.81(d，J＝7.0Hz，1H)，3.46(d，J＝4.7Hz，1H)，3.06(m，1H)，2.56-1.15(m，27H，包括单峰2.24，1.82，1.68，1.33，1.15，各3H).HRMS，C51H57NO14Na(MNa+)计算值930.3677，测定值930.3714实施例35制备带有呋喃侧链的2’，7-甲硅烷基化的-4-环戊烷紫杉烷(taxane)
将实施例22产品(75.8mg，0.104mmol)的THF溶液(2ml)于-40℃用LHMDS(0.136ml，1M，0.136mmol)和β-内酰胺*(57.3mg，0.156mmol)处理。反应于0℃下搅拌1小时，然后用NH4Cl饱和溶液(1ml)使反应骤停。反应混合物用EtOAc萃取、洗涤和干燥，以及真空浓缩，残余物色谱纯化(含20％乙酸乙酯的己烷)给出113mg(100％)目的产物。
*制备β-内酰胺的方法见USP5,227,400。
实施例36制备带有呋喃侧链的4-环丙基酯紫杉烷 实施例35产品的乙腈溶液(2ml)在0℃先用吡啶(0.27ml)，再用48％HF(0.81ml)处理，反应于5℃放置3小时，用EtOAc(75ml)稀释，用1N HCl、NaHCO3饱和溶液和盐水洗涤，干燥和真空浓缩，残余物色谱纯化(含50-60％乙酸乙酯的己烷)给出68mg(88.2％)目的产物。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.09-8.06(m，2H)，7.62-7.37(m，3H)，7.26(s，1H)，6.37-6.30(m，3H)，6.19(m，1H)，5.65(d，J＝7.0Hz，1H)，5.37(d，J＝9.9Hz，1H)，5.23(d，J＝9.9Hz，1H)，4.82(d，J＝8.3Hz，1H)，4.76(d，J＝4.1Hz，1H)，4.42(m，1H)，4.18(ABq，J＝8.4Hz，2H)，3.85(d，J＝6.9Hz，1H)，3.37(d，J＝5.4Hz，1H)，2.55-1.01(m，33H，包括单峰2.23，1.90，1.66，1.26，1.14各3H；1.33，9H).HRMS，C45H56NO16(MN+)计算值866.3599，测定值866.3569实施例37制备带有呋喃侧链的2’，7-甲硅烷基化的-4-环丁基酯紫杉烷
实施例22产物的THF溶液(0.8mg)于-40℃用LHMDS(0.050ml，1M，0.050mmol)处理，2分钟后，加入实施例35的β-内酰胺(18.2mg，0.050mmol)。反应混合物于0℃搅拌1小时，用NH4Cl饱和溶液停止反应。反应混合物经萃取、洗涤、干燥和真空浓缩，残余物色谱纯化(含20％乙酸乙酯的己烷)给出33.0mg(89.4％)目的产物。
实施例38制备带有呋喃基侧链的4-环丁基酯紫杉烷 将实施例37产品(30.0mg，0.027mmol)的乙腈溶液(1ml)于0℃下先用吡啶(0.081ml)，接着再用48％HF(0.243ml)处理。反应于5℃放置过夜，用EtOAc(50ml)稀释，用1N HCl、NaHCO3饱和溶液和盐水洗涤。然后干燥和真空浓缩有机层，残余物色谱纯化(含60％乙酸乙酯的己烷)得到22mg(92.4％)目的产物。
1H NMR(300HMz，CDCl3)δ8.13-8.10(m，2H)，7.62-7.45(m，3H)，6.42-6.38(m，2H)，6.30(s，1H)，6.19(m，1H)，5.65(d，J＝7.1Hz，1H)，5.34(d，J＝9.6Hz，1H)，5.18(d，J＝9.8Hz，1H)，4.90(d，J＝7.7Hz，1H)，4.73(dd，J＝2.0Hz，J′＝5.7Hz，1H)，4.45(m，1H)，4.25(ABq，J＝8.4Hz，2H)，3.80(d，J＝7.0Hz，1H)，3.50(m，1H)，3.27(d，J＝5.8Hz，1H)，2.61-1.15(m，34H，包括单峰2.24，1.86，1.68，1.26，1.15，各3H；1.33，9H).
实施例39制备7，13-TES-1-DMS-4-丁酸酯浆果赤霉素 把实施例19的C4-羟基浆果赤霉素衍生物(181mg，0.218mmol)溶于无水THF(4.4ml)，将此溶液于0℃下用LHMDS(0.262ml，1M，0.262mmol)处理，在此温度下30分钟以后，加入丁酰氯(0.034ml，0.33mmol)。反应于0℃搅拌1小时，用饱和NH4Cl(3ml)骤停。反应混合物用EtOAc(100ml)萃取，用水和盐水洗涤。有机相经干燥和真空蒸发。得到的残余物色谱纯化(含10％乙酸乙酯的己烷)，给出138mg(70.3％)目的产物。
实施例40制备C4-丁酸酯浆果赤霉素 把实施例39的7，13-TES-1-DMS-4-丁酸酯浆果赤霉素(527mg，0.586mmol)溶于无水乙腈(19.5ml)，0℃在此溶液中先加入吡啶(1.95ml)，再加入48％HF溶液(5.86ml)。0℃，30分钟以后，反应混合物于5℃放置过夜。然后用EtOAc(400ml)稀释，用1N HCl，NaHCO3饱和溶液和盐水洗涤并真空浓缩。残余物色谱纯化(含60％乙酸乙酯的己烷)给出286mg(80％)目的产物。
实施例41制备7-TES-4-丁酸酯浆果赤霉素
把实施例40的4-丁酸酯浆果赤霉素(286mg，0.466mmol)溶于无水DMF(2.3ml)，0℃下，在此溶液中加入咪唑(127mg，1.86mmol)，接着再加入TESCl(0.313ml，1.86mmol)。反应于0℃搅拌30分钟，然后用EtOAc(100ml)稀释。反应混合物用水和盐水洗涤，然后真空浓缩。残余物色谱纯化(含30-50％乙酸乙酯的己烷)得到283.3mg(83.5％)目的产物。
实施例42制备2’，7-双TES-C4-丁酸酯Paclitaxel 把实施例41产物(300.6mg，0.413mmol)的THF(8.3ml)溶液冷却至-40℃，用LHMDS(0.619ml，0.619mmol)处理，5分钟后，加入实施例23的β-内酰胺(236mg，0.619mmol)的THF溶液(4.1ml)。反应于0℃搅拌1小时，然后用饱和NH4Cl溶液(3ml)骤停。反应混合物用EtOAc(150ml)萃取，用水和盐水洗涤，有机相经干燥和真空浓缩，残余物色谱提纯(含20-30-60％乙酸乙酯的己烷)给出377mg(82.3％)目的产物。
实施例43制备C4-丁酸酯Paclitaxel 实施例42产物(366mg，0.334mmol)的乙腈溶液(15.3ml)于0℃下先用吡啶(0.926ml)，再用48％HF溶液(2.78ml)处理。反应混合物于5℃放置过夜，然后用EtOAc(200ml)稀释，用水和盐水洗涤。有机相经干燥和真空浓缩，残余物色谱纯化(含60％乙酸乙酯的己烷)给出274mg(94.5％)目的产物。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ 8.12-8.09(m，2H)，7.71-7.32(m，13H)，7.00(d，J＝8.9Hz，1H)，6.25(s，1H)，6.16(m，1H)，5.73(d，J＝8.8Hz，1H)，5.64(d，J＝7.0Hz，1H)，4.85(d，KJ＝9.4Hz，1H)，4.76(m，1H)，4.38(m，1H)，4.20(ABq，J＝8.4Hz，2H)，3.77(d，J＝6.9Hz，1H)，3.70(d，J＝4.3Hz，1H)，2.66-0.85(m，26H，包括单峰2.20，1.76，1.65，1.21，1.11，各3H，triplet at 0.88，3H).
实施例44制备7，13-TES-1-DMS-4-碳酸乙酯浆果赤霉素
把实施例19产物(205mg，0.247mmol)的THF溶液(5ml)于0℃用LHMDS(0.296ml，1M，0.296mmol)处理。0℃，30分钟以后，加入氯甲酸乙酯(0.0354ml，0.370mmol)。反应于0℃搅拌1小时，用NH4Cl饱和溶液(3ml)停止反应。反应混合物用EtOAc(100ml)萃取，用水和盐水洗涤、干燥并真空浓缩有机相。残余物色谱纯化(含10％乙酸乙酯的己烷)，给出155mg(69.6％)目的产物。
实施例45制备C4-碳酸乙酯浆果赤霉素
在0℃下，于实施例44产物(152mg，0.169mmol)的乙腈溶液中(5.6ml)先加入无水吡啶(0.56ml)，再加入48％HF(1.69ml)。0℃，30分钟后，反应混合物于5℃放置过夜。然后残余物用EtOAc(150ml)稀释，用1NHCl和NaNCO3饱和溶液洗涤。有机层经干燥和真空浓缩，残余物色谱纯化(含60％乙酸乙酯的己烷)给出99mg(95.4％)目的产物。
实施例46制备7-TES-C4-碳酸乙酯浆果赤霉素 把实施例45的4-碳酸乙酯浆果赤霉素(95mg，0.154mmol)溶于无水DMF(0.771ml)。0℃下，在此溶液中加入咪唑(42mg，0.617mmol)和TESCl(104μl，0.617mmol)，反应混合物用EtOAc(100ml)稀释，用水和盐水洗涤。干燥和真空浓缩有机层。残余物色谱纯化(含40％乙酸乙酯的己烷)给出95mg(84.4％)目的产物。
实施例47制备2’，7-TES-C4-碳酸乙酯Paclitaxel
把实施例46的7-TES-4-碳酸乙酯浆果赤霉素(93.4mg，0.128mmol)溶于THF(2.6ml)。此溶液冷却至-40℃，并先后用LHMDS(0.192ml，1M，0.192mmol)，和实施例23的β-内酰胺(73.1mg，0.192mmol)的THF溶液(1.3ml)处理。反应于0℃放置1小时，用NH4Cl(3ml)使反应停止。反应混合物用EtOAc(100ml)萃取，用水和盐水洗涤，然后干燥和真空浓缩有机层，残余物色谱纯化(含20-30％乙酸乙酯的己烷)给出118mg(83.0％)目的产物。
实施例48制备C4-碳酸乙酯Paclitaxel
把实施例47的2’，7-TES-4-碳酸乙酯浆果赤霉素(114mg，0.103mmol)溶于乙腈(5.1ml)，0℃下，在此溶液中加入吡啶(0.285ml)，再加入48％HF(0.855ml)。反应于5℃放置过夜，然后用EtOAc(100ml)稀释，用1N HCl、NaHCO3饱和溶液和盐水洗涤。有机相经干燥和真空浓缩，残余物色谱纯化(含60％乙酸乙酯的己烷)给出75mg(82.8％)目的产物。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.09-8.06(m，2H)，7.75-7.24(m，13H)，7.14(d，J＝9.0Hz，1H)，6.24(s，1H)，6.10(m，1H)，5.79(d，J＝7.1Hz，1H)，5.66(d，J＝6.9Hz，1H)，4.95(d，J＝8.2Hz，1H)，4.75(m，1H)，4.41-4.16(m，5H)，3.89(d，J＝4.3Hz，1H)，3.81(d，J＝6.9Hz，1H)，2.56-1.11(m，23H，包括单峰2.21，1.75，1.65，1.18，1.11，各3H，triplet at 1.22，3H).
实施例49制备带有呋喃基侧链的2’，7-甲硅烷基化的-C-4-丁酸酯紫杉烷
-40℃，用LHMDS(0.548ml，1M，0.548mmol)处理实施例41的7-甲硅烷基-4-丁酸酯浆果赤霉素(266mg，0.365mmol)的THF溶液(7.3ml)。2分钟后，加入实施例35的β-内酰胺(201mg，0.548mmol)的THF溶液(3.6ml)。反应混合物于0℃搅拌1小时，用NH4Cl饱和溶液骤停。反应混合物经萃取、洗涤、干燥和真空浓缩，残余物色谱纯化(含20％乙酸乙酯的己烷)给出399.0mg(99％)目的产物。
实施例50制备带有呋喃基侧链的C-4-丁酸酯紫杉烷 实施例49产物(399.0mg，0.364mmol)的乙腈溶液(18.2ml)于0℃先后用吡啶(1.01ml)和48％HF(3.03ml)处理。反应于5℃放置过夜，用EtOAc(200ml)稀释，用1N HCl，NaHCO3饱和溶液和盐水洗涤。干燥和真空浓缩有机相，残余物色谱纯化(含60％乙酸乙酯的己烷)给出305mg(96.5％)目的产物。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.05-8.02(m，2H)，7.56-7.35(m，4H)，6.33-6.26(m，3H)，6.15(m，1H)，5.59(d，J＝7.0Hz，1H)，5.40(d，J＝9.7Hz，1H)，5.26(d，J＝9.7Hz，1H)，4.85(d，J＝9.5Hz，1H)，4.66(m，1H)，4.39(m，1H)，4.17(ABq，J＝8.4Hz，2H)，3.76(d，J＝6.9Hz，1H)，3.64(J＝6.0Hz，1H)，2.65-0.91(m，35H，包括单峰2.18，1.82，1.62，1.21，1.09，各3H1.28，9H，triplet at 0.94，3H).
实施例51制备7，13-双TES-1-DMS-C-4-碳酸甲酯浆果赤霉素 把实施例19化合物(118mg，0.150mmol)溶于THF(3ml)，0℃下在此溶液中加入LHMDS(0.180ml，1M，0.180mmol)。30分钟后，加入氯甲酸甲酯(0.174ml，0.225mmol)。再过30分钟，用NH4Cl使反应停止。反应混合物用EtOAc(100ml)萃取，有机层用水(10ml×2)和盐水(10ml)洗涤。有机层经干燥和真空浓缩。残余物色谱纯化(5-10％EtOAc-己烷)给出104mg(82.1％)目的产物。
实施例52制备C-4-碳酸甲酯浆果赤霉素 把实施例51化合物(89.0mg，0.105mmol)溶于CH3CN(3.5ml)，0℃下在此溶液中加入吡啶(0.30ml)，接着再加入48％HF(1.05ml)。反应于0℃搅拌6小时，然后用EtOAc(100ml)稀释，反应混合物用1N HCl(10ml)，NaHCO3饱和溶液(10ml×3)洗涤，有机相经干燥和真空浓缩。残余物色谱纯化(含50％乙酸乙酯己烷)给出70mg(100％)目的产物。
实施例53制备7-TES-C-4-碳酸甲酯浆果赤霉素
把实施例52化合物(115.5mg，0.192mmol)溶于DMF(0.960ml)，0℃下，在此溶液中加入咪唑(52.2mg，0.767mmol)，接着再加入TESCl(0.128ml，0.767mmol)。30分钟后，反应混合物用EtOAc(100ml)稀释，有机相用水(10ml×2)和盐水(10ml)洗涤，然后干燥并真空浓缩有机相，残余物色谱分离(含40％乙酸乙酯的己烷)给出133mg(96.8％)目的产物。
实施例54制备带有呋喃基侧链的2’，7-甲硅烷基化的-C4-碳酸甲酯紫杉烷 在-40℃，用LHMDS(0.350ml，1M，0.350mmol)处理实施例53的7-甲硅烷基-4-碳酸甲酯浆果赤霉素(227.8mg，0.318mmol)的THF溶液(6.4ml)。2分钟后，加入实施例35的β-内酰胺(140mg，0.382mmol)THF溶液(3.6ml)。反应混合物于0℃搅拌1小时，用NH4Cl饱和溶液停止反应。反应混合物经萃取、洗涤、干燥和真空浓缩，残余物色谱纯化(含20％乙酸乙酯的己烷)给出332.0mg(96.3％)目的产物。
实施例55制备带有呋喃基侧链的C-4-碳酸甲酯紫杉烷 实施例54(332.0mg，0.307mmol)的乙腈溶液(15.3ml)于0℃下先后用吡啶(1.7ml)和48％HF(5.1ml)处理。反应于5℃放置过夜，用EtOAc(200ml)稀释，用1N HCl，NaHCO3饱和溶液和盐水洗涤，然后干燥和真空浓缩有机相。残余物色谱分离(含60％乙酸乙酯的己烷)给出260mg(99％)目的产物。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.05-8.02(m，2H)，7.53-7.37(m，4H)，6.29-6.15(m，4H)，5.62(d，J＝6.9Hz，1H)，5.40(d，J＝9.6Hz，1H)，5.30(d，J＝9.6Hz，1H)，4.91(d，J＝9.3Hz，1H)，4.68(m，1H)，4.34(m，1H)，4.16(ABq，J＝8.5Hz，2H)，3.88(s，3H)，3.80(d，J＝8.9Hz，1H)，3.69(d，J＝5.5Hz，1H)，2.63-1.08(m，28H，包括单峰2.18，1.85，1.60，1.20，1.08，各3H，1.26，9H).
实施例56制备2’，7-甲硅烷基化的-C4-碳酸甲酯Paclitaxel
把实施例53化合物(113.3mg，0.158mmol)溶于THE(3.16ml)，-40℃下在此溶液中加入LHMDS(0.237ml，1M，0.237mmol)，接着加入实施例23的β-内酰胺(90.43mg，0.237mmol)。按照上述同样的方法，得到159mg(91.6％)目的产物。
实施例57制备C4-碳酸甲酯Paclitaxel 把实施例56化合物(149mg，0.136mmol)溶于CH3CN(6.8ml)，0℃下，在此溶液中加入吡啶(0.377ml)，再加入48％HF(1.132ml)。按照上述相同的方法，得到103.4mg(87.6％)目的产物。
实施例58制备C-4环丙酯-7-TES-13-oxayol-浆果赤霉素 室温下，在实施例22产物(72mg，0.099mmol)和实施例6产物(29.4mg，0.110mmol)于甲苯(2ml)的悬浮液中加入DMAP(13.4mg，0.110mmol)。10分钟后，加入DCC(22.6mg，0.110mmol)。反应混合物于室温搅拌2小时，然后通过Celite过滤，用EtOAc淋洗，然后真空浓缩有机相。残余物色谱纯化(含30％EtOAc的己烷)给出产率100％(99mg)的目的产物。
1H NMR(CDCl3)δ8.27-8.24(m，2H)，8.03-7.26(m，13H)，6.42(s，1H)，6.08(m，1H)，5.67(d，J＝7.0Hz，1H)，5.60(d，J＝6.0Hz，1H)，4.92(d，J＝6.1Hz，1H)，4.87(d，J＝8.3Hz，1H)，4.50(dd，J＝6:6Hz，J′＝10.3Hz，1H)，4.16(ABq，J＝8.3Hz，2H)，3.85(d，J＝6.9Hz，1H)，2.56-0.52(m，39H，包括单峰2.15，2.02，1.68，1.20，1.18，各3H，triplet at 0.92，9H).HRMS，C55H66NO13Si(MH+)计算值976.4303，测定值976.4271。
实施例59制备Paclitaxel的C-4环丙酯 0℃下，在实施例58产物(83.4mg，0.084mmol)于THF(0.8ml)和甲醇(0.8ml)的溶液中加入1N HCl(0.42ml)。反应于4℃放置14小时。将反应混合物加热至室温，加入NaHCO3饱和溶液(2.1ml)。反应于室温搅拌3小时，然后倾入水中。用EtOAc(4×20ml)萃取反应混合物。合并的有机相经干燥和真空浓缩，残余物色谱纯化(60％EtOAc/己烷)给出产率为60％的目的产物(45mg)。
实施例60
在一烘箱干燥用氩气吹扫过的25ml烧瓶中，把BMS-189892-01(485mg，3.0mmol)(注解1)溶于无水甲醇(5.0ml)。0℃下用注射器向此烧瓶中滴加三甲基氯代甲硅烷(326mg，3.0mmol)。反应混合物于0℃搅拌5分钟，然后移去冰-水浴，反应混合物在室温下再搅拌14小时。将反应混合物真空浓缩并在高真空下干燥定量地生成1，为白色泡沫体(691mg，100％)。
1.Chem.Abs34408-064-33实施例61 在-25ml烧瓶中将上面得到的1(691mg，3.0mmol)溶于饱和NaHCO3(10ml)，室温下，在此溶液中加入氯甲酸苄酯(512mg，3.0mmol)。反应混合物于室温搅拌14小时，在此期间形成白色沉淀。滤出白色沉淀，用水(2×5ml)和己烷(2×5ml)洗涤，高真空下干燥固体给出2，为米色固体(745mg，86％)。
实施例62 在-用烘箱干燥、氩气吹扫过的，配备有迪安-斯达克分水器的25ml烧瓶中，把2(745mg，2.58mmol)溶于甲苯(12ml)和DMF(2.5ml)，在此溶液中加入PPTS(502mg，2.0mmol)。反应混合物在搅拌下加热回流28小时。混合物用乙酸乙酯稀释(50ml)，用H2O(20ml)洗涤。水相用乙酸乙酯萃取(50ml)，合并的有机馏份用MgSO4干燥、过滤、真空浓缩得到粗产品3(630mg，77％)，为深色油。粗产品3用柱色谱纯化(硅胶，2×12cm，10％乙酸乙酯/己烷为洗脱剂)得到3，为无色粗稠的油(540mg，66％)。
实施例63
在25ml烧瓶中，把3(540mg，2.1mmol)溶于THF(6ml)和H2O(3ml)，室温下向此溶液一次加入固体LiOH(82mg，2.0mmol)。得到的混合物于室温搅拌0.5小时。室温下滴加HCl(2.4ml，1N溶液)停止反应，然后混合物倾入H2O(10ml)，用CH2Cl2(4×15ml)萃取，用MgSO4干燥，过滤，真空浓缩得到粗产品4(420mg，82％)，石黄色油，可直接用于下步反应而无须进一步纯化。
实施例64 在-经烘箱干燥、氩气吹扫过的25ml烧瓶中，于室温下将4(140mg，0.54mmol)、BMS-184260-01(346mg，04.495mmol)和N，N-二甲氨基吡啶(66mg，0.54mmol)悬浮于甲苯(10ml)。将悬浮液搅拌20分钟后，一次加入1，3-二环己基碳化二亚胺(DCC)(111mg，0.54mmol)，混合物于室温下搅拌2小时。接着把N，N-二甲氨基吡啶(66mg，0.54mmol)和1，3-二环己基碳化二亚胺(DCC)(111mg，0.54mmol)再次加入反应混合物中。把反应混合物搅拌14小时，将其倾入饱和NH4Cl(20ml)并用乙酸乙酯(100ml)萃取。通过Celite过滤有机萃取液，然后用乙酸乙酯(4×50ml)淋洗Celite塞。合并的有机相经MgSO4干燥、过滤和真空浓缩给出粗制的5(582mg，125％)。粗制品用柱色谱纯化(硅胶，2×12cm。5％乙酸乙酯/己烷为洗脱液)得到5(413mg，89％)，为无色油。
实施例65 在-烘箱干燥、氩气吹扫过的25ml烧瓶中，把5(92mg，0.094mmol)溶于THF(2.0ml)和甲醇(2.0ml)，0℃下在此烧瓶中加入HCl水溶液(0.5ml，2.0N溶液)，然后将此溶液置于6℃冷浴中14小时。使反应混合物温至室温，在烧瓶中加入饱和NaHCO3(5.0ml)。然后将反应混合物于室温搅拌3小时。将混合物倾入H2O(10ml)，用CH2Cl2萃取(4×20ml)。合并的有机相用MgSO4干燥、过滤、真空浓缩给出粗制BMS-184060-01(70mg)，为白色固体。在溶解于CH3OH(3.0ml)的粗制BMS-184060-01热溶液中加入H2O(～1.0ml)至到溶液出现混浊。溶液于冰箱中过夜进行冷却，用中等多孔玻璃过滤器滤出白色固体，高真空干燥给出最终产物(51mg，64％)，为白色固体。
实施例66制备带有C-13(Oxayolyl-呋喃基)侧链的C-4-环丙基酯-7-TES浆果赤霉素 室温下在实施例22产物(92.3mg，0.127mmol)和实施例63产物(36.0mg，0.140mmol)于甲苯(2.5ml)的悬浮液中加入DMAP(17.1mg，0.140mmol)。10分钟后，再加入DCC(28.8mg，0.140mmol)。室温2小时后加入第二剂量的试剂。反应于室温搅拌过夜。然后过滤反应混合物并用EtOAc洗涤。有机相真空浓缩。残余物色谱纯化(30％EtOAc/己烷)以100％产率得到目的产物(125mg)。
1H NMR(CDCl3)δ 8.20-7.80(m，4H)，7.62-7.39(m，7H)，6.38(m，3H)，6.08(m，1H)，5.67(m，2H)，5.20(d，J＝5.9Hz，1H)，5.20(d，J＝5.9Hz，1H)，4.88(d，J＝9.2Hz，1H)，4.49(dd，J＝6.6Hz，J′＝10.2Hz，1H)，4.16(ABq，J＝8.4Hz，2H)，3.86(d，J＝6.8Hz，1H)，2.54-0.52(m，39H，包括单峰2.14，2.03，1.67，1.21，1.15，各3H，triplet at 0.91，9H).HRMS，C53H54NO14Si(MH+)计算值966.4096测定值966.4134实施例67制备带有呋喃侧链的C-4环丙基酯紫杉烷 将实施例66化合物(69mg，0.0715mmol)溶于THF(1.4ml)和甲醇(1.4ml)。然后在0℃用1N HCl(0.716ml)处理该溶液。4℃下17小时后，使反应混合物温热至室温并用NaHCO3饱和溶液(6.5ml)处理。室温6小时后，反应混合物用EtOAc(4×20ml)萃取，合并的有机相真空浓缩，残留物色谱提纯(60％乙酸乙酯/己烷)得到目的产物(37.4mg)，产率60％。
1H NMR(CDCl3)δ8.12-8.09(m，2H)，7.74-7.26(m，7H)，6.85(d，J＝9.3Hz，1H)，6.39(s，2H)，6.30(s，1H)，6.20(m，1H)，5.93(d，J＝9.3Hz，1H)，5.67(d，J＝7.0Hz，1H)，4.88(s，1H)，4.82(d，J＝7.7Hz，1H)，4.42(m，1H)，4.20(ABq，J＝8.5Hz，2H)，3.85(d，J＝6.8Hz，1H)，2.54-0.88(m，24H，包括单峰2.23，1.88，1.67，1.24，1.14，各3H).
HRMS，C47H52NO15(MH+)计算值870.3337测定值870.3307实施例68制备C-4环丙基酯-2’-碳酸乙酯 在0℃下，于实施例24产物(1.333g，1.52mmol)的二氯甲烷(22.8ml)溶液中加入EtPr2N(1.586ml，9.10mmol)，接着再加入EtOCOCl(0.87ml，9.10mmol)。反应于0℃搅拌6小时。然后反应混合物用EtOAc(200ml)稀释，用水(20ml×3)和盐水洗涤。干燥并真空浓缩有机相。残余物色谱纯化(50％EtOAC/己烷)以88.8％的产率得到目的产物(1.281g)，与86mg起始原料(6.5％)在一起。
1H NMR(CDCl3)δ8.12-8.10(m，2H)，7.76-7.26(m，13H)，6.90(d，J＝9.4Hz，1H)，6.27(m，2H)，6.01(dd，J＝2.1Hz，J′＝9.3Hz，1H)，5.68(d，J＝7.0Hz，m 1H)，5.55(d，J＝2.4Hz，1H)，4.83(d，J＝8.2Hz，1H)，4.44(m，1H)，4.23(m，4H)，3.83(d，J＝7.0Hz，1H)，2.53-0.87(m，27H，包括单峰2.22，1.95，1.87，1.67，1.26，各3H，triplet at 1.32，3H).
HRMS，C52H58NO16(MH+)计算值952.3756测定值952.3726实施例69制备C-4环丙烷-2’-碳酸乙酯-7-取代的前体 把实施例68的2’-碳酸乙酯(53mg，0.056mmol)溶于DMSO(0.5ml)，再加入Ac2O(0.5ml)。反应于室温搅拌14小时。反应混合物用EtOAc(50ml)稀释，用水(5ml×3)、NaHCO3饱和溶液和盐水洗涤。然后干燥和真空浓缩有机相。残余物色谱纯化(40％EtOAc/己烷)以100％的产率得到56.3mg目的产物。
1H NMR(CDCl3)δ8.10-8.07(m，2H)，7.76-7.26(m，13H)，6.90(d，J＝9.4Hz，1H)，6.56(s，1H)，6.23(m，1H)，6.03(d，J＝9.5Hz，1H)，5.70(d，J＝6.9Hz，1H)，5.58(d，J＝2.1Hz，1H)，4.84(d，J＝8.9Hz，1H)，4.66(s，2H)，4.21(m，5H)，3.91(d，J＝6.8Hz，1H)，2.80-0.87(m，30H，包括单峰2.17，2.12，2.11，1.75，1.22，1.20，各3H.triplet at 1.32，3H).
实施例70制备C-4环丙烷-2’-碳酸乙酯-7-磷酸酯前体 在实施例69产物(1.30g，1.286mmol)的二氯甲烷(25.7ml)溶液中加入4A分子筛(1.30g)，再加入NIS(434mg，1.929mmol)和磷酸二苄酯(537mg，1，929mmol)的THF溶液(25.7ml)。反应混合物于室温搅拌5小时。然后反应混合物用Celite过滤，用EtOAc淋洗。去除溶剂，将残余物溶于EtOAc(200ml)，用1％NaHSO3和盐水洗涤，用MgSO4干燥，有机相真空蒸发，残余物色谱提纯(50％乙酸乙酯/己烷)给出1.278g产品，产率80.1％。
1H NMR(CDCl3)δ8.10-8.07(m，2H)，7.76-7.26(m，23H)，6.90(d，J＝9.4Hz，1H)，6.35(s，1H)，6.23(m，1H)，6.02(d，J＝9.5Hz，1H)，5.68(d，J＝6.8Hz，1H)，5.56(s，1H)，5.40(m，1H)，5.04(m，4H)，4.75(d，J＝9.0Hz，1H)，4.20(m，5H)，3.89(d，J＝6.8Hz，1H)，2.78-0.86(m，27H，包括单峰2.18，1.99，1.67，1.18，1.05，各3H triplet at 1.31，3H).
实施例71制备C-4环丙烷-2’-碳酸乙酯-7-磷酸酯 把实施例70化合物(1.278g，1.03mmol)溶于无水EtOAc(41.2ml)，在此溶液中加入催化剂Pd/C(438mg，10％，0.412mmol)。反应混合物在50psi(磅)氢化12小时。然后过滤和真空浓缩反应混合物得到1.08g粗产物，产率100％。
粗产物可不经进一步鉴定直接用于下步反应。
实施例72制备C-4环丙烷-2’-碳酸乙酯-7-磷酸酯三乙醇铵盐
在实施例71产物(1.08g，1.02mmol)的EtOAc溶液(6.8ml)中加入三乙醇胺(6.8ml，0.15M)的0.100M EtOAc溶液，得到的混合物于-20℃放置过夜。然后过滤混合物，固体用冷的10％乙酸乙酯/己烷洗涤，真空干燥12小时，给出目的前药(1.00g)，产率81.2％。经测定(用HPLC)最终产物纯度＞97％1H NMR(CD3OD)δ8.10-8.07(m，2H)，7.80-7.26(m，14H)，6.38(s，1H)，6.07(m，1H)，5.89(d，J＝5.2Hz，1H)，5.63(d，J＝7.0Hz，1H)，5.55(d，J＝5.2Hz，1H)，5.22(m，1H)，4.87(m，2H)，4.23(m，5H)，3.88(d，J＝7.0Hz，1H)，3.80(m，6H)，3.30(m，1H)，3.18(m，6H)，2.97-0.86(m，26H，包括单峰2.15，1.94，1.69，1.57，1.13，各3H，triplet at 1.30，3H).HRMS，C53H61NO20P(MH+，M＝acid)计算值1062.3525测定值1062.3550实施例73制备7-TES-13-TMS浆果赤霉素
把实施例10的7-TES浆果赤霉素(1.895g，2.707mmol)溶于无水DMF(10.8ml)，0℃下此溶液中加入咪唑(736.4mg，10.83mmol)，接着再加入TMSCl(1.37ml，10.83mmol)。反应于0℃搅拌1.5小时，然后反应混合物用EtOAc(400ml)稀释，用水(20ml×3)和盐水(15ml)洗涤，然后干燥和真空浓缩有机层，残余物色谱纯化(20％EtOAc/己烷)给出1.881g(90％)目的产物。
实施例74制备7-TES-13-TMS-1-DMS浆果赤霉素 把实施例73的7-TES-13-TMS浆果赤霉素(305mg，0.430mmol)溶于无水DMF(2ml)，0℃下在此溶液中加入咪唑(87.6mg，1.289mmol)，接着加入二甲基氯硅烷(122mg，1.289mmol)。1小时后，反应混合物用EtOAc(150ml)稀释，用水(10ml×3)和盐水(10ml)洗涤，干燥并真空浓缩得到的有机层，残余物色谱纯化(10％EtOAc/己烷)给出305mg(92.4％)目的产物。
实施例75制备7-TES-13-TMS-1-DMS-C-4羟基浆果赤霉素 把实施例74的1-DMS-7-TES-13-TMS浆果赤霉素溶于无水THF(8ml)，0℃下在此溶液中加入红铝(0.314ml，60％，1.61mmol)。混合物在0℃搅拌40分钟，然后用饱和酒石酸钠溶液(1ml)停止反应2分钟。反应混合物用EtOAc(150ml)萃取，用水(15ml×2)和盐水(15ml)洗涤。有机相经干燥和真空浓缩。残余物色谱纯化(10-20％EtOAc/己烷)给出143.8mg(45.3％)目的产物。
NMR(300MHz，CDCl3)d8.10-8.06(m，2H)，7.55-7.39(m，3H)，6.39(s，1H)，5.59(d，J＝5.5Hz，1H)，4.68(dd，J1＝3.9Hz，J2＝9.6Hz，1H)，4.61(m，1H)，4.53(m，1H)，4.21(ABq，J＝7.8Hz，2H)，4.03(dd，J1＝6.1Hz，J2＝11.6Hz，1H)，3.74(s，1H)，3.48(d，J＝5.7Hz，1H)，2.74-0.48(m，34H，包括单峰2.15，2.06，1.54，1.16，0.92，各3H)，0.28(s，9H)，-0.015&-0.32(doublets，各3H)
实施例76制备7-TES-13-TMS-1-DMS-C-4[OC(O)CH＝CH2]浆果赤霉素 把实施例75化合物(99mg，0.125mmol)溶于无水THF(2.5ml)，0℃下在此溶液中加入LHMDS(0.150ml，1M，0.150mmol)。30分钟后，加入丙烯酰氯(0.0153ml，0.188mmol)。再过30分钟，反应用NH4Cl饱和溶液骤停。反应混合物用EtOAc(100ml)萃取，用水(10ml×2)和盐水(10ml)洗涤。干燥并真空浓缩有机相，残余物色谱纯化(5-10％EtOAc/己烷)给出57.5mg(54.6％)目的产物。
实施例77制备C-4[OC(O)CH＝CH2]浆果赤霉素
把实施例76化合物(105mg，0.125mmol)溶于CH3CN(2.5ml)，0℃下在此溶液中加入吡啶(0.374ml)，接着再加入48％HF(1.12ml)。反应于4℃放置过夜。然后用EtOAc(75ml)稀释反应，有机相用1N HCl(5ml)、NaHCO3饱和溶液(5ml×3)和盐水洗涤，然后干燥和真空浓缩有机相。残余物色谱分离(60％EtOAc/己烷)得到60.6mg(81.3％)目的产物。
实施例78制备7-TES-C-4[OC(O)CH＝CH2]浆果赤霉素 把实施例77的三醇(60.0mg，0.100mmol)溶于无水DMF(0.66ml)，0℃下在此溶液中加入咪唑(27.2mg，0.400mmol)，接着加入TESCl(0.0672ml，0.400mmol)。30分钟后，反应用EtOAc(75ml)稀释，用水(5ml×3)和盐水洗涤。然后干燥并真空浓缩有机层。残余物色谱纯化(40％EtOAc/己烷)给出56.0mg(78.4％)目的产物。
实施例79制备2’，7-双TES-4-[OC(O)CH＝CH2]Paclitaxel 把实施例78的浆果赤霉素(50mg，0.0702mmol)溶于THF(1.4ml)，于-40℃向该溶液中加入LHMDS(0.0843ml，1M，0.0843mmol)，接着立刻加入实施例23的β-内酰胺(40.1mg，0.105mmol)的THF(0.7ml)溶液。-40℃2分钟后，反应在0℃搅拌1小时，然后用NH4Cl饱和溶液使反应骤停。反应混合物用EtOAc萃取，用盐水洗涤，干燥并真空浓缩有机层。残余物色谱纯化(20-30％EtOAc/己烷)给出66mg(86％)目的产物。
实施例80制备C-4[OC(O)CH＝CH2]Paclitaxel
把实施例79化合物(46mg，0.0421mmol)溶于CH3CN(0.85ml)，0℃下在此溶液中加入吡啶(0.125ml)，接着加入48％HF(0.375ml)。反应于4℃放置过夜。然后反应混合物用EtOAc(40ml)稀释，用1NHCl(3ml)和NaHCO3饱和溶液(3ml×3)洗涤。干燥并真空浓缩有机层，残余物色谱纯化(70％EtOAc/己烷)给出28mg(76.9％)目的产物。
实施例81制备7，13-双TES-1-DMS-C-4[C(O)C6H5]浆果赤霉素 把实施例19化合物(279mg，0.336mmol)溶于无水THF(7ml)，0℃下在此溶液中加入LHMDS(0.403ml，1M，0.403mmol)，30分钟后，加入苯甲酰氯(0.0585ml，0.504mmol)。30分钟后，反应用NH4Cl饱和溶液骤停。反应混合物用EtOAc(150ml)萃取，有机层用水和盐水洗涤、干燥和真空浓缩，残余物色谱分离(10％EtOAc/己烷)给出215.5mg(68.6％)目的产物。
实施例82制备C-4苯甲酰基浆果赤霉素 将实施例81化合物(161mg，0.172mmol)溶于CH3CN。0℃下在此溶液中加入吡啶(0.57ml)，接着再加入48％HF(1.80ml)。于4℃5小时后，再加入另一剂量的试剂。反应于4℃放置过夜。反应混合物用EtOAc(100ml)稀释，用1NHCl(5ml)和NaHCO3(5ml×3)洗涤。干燥并真空浓缩有机相，得到的残余物色谱纯化(30-50％EtOAc/己烷)给出48mg(43.0％)目的产物。
实施例83制备7-TES-C-4-苯甲酰基浆果赤霉素
把实施例82的三醇(48.0mg，0.074mmol)溶于DMF(0.40ml)，0℃下在此溶液中加入咪唑(20.1mg，0.296mmol)，接着加入TESCl(0.0496ml，0.296mmol)。30分钟后，反应混合物用EtOAc(45ml)稀释，用水(1ml×3)和盐水洗涤。干燥并真空浓缩有机相，残余物色谱纯化(40％EtOAc/己烷)给出48mg(85.0％)最终目的产物。
实施例84制备C-4-苯甲酰基Paclitaxel 把实施例83化合物(364.6mg，0.478mmol)溶于THF(9.6ml)，在-40℃向此溶液中加入LHMDS(0.718ml，1M，0.718mmol)，接着加入实施例23的β-内酰胺(273.5gmg，0.718mmol)。按照前面实施例同样的方法，得到415mg(75.9％)化合物。之后通过将上述化合物溶于CH3CN(16.5ml)，和在0℃下加入吡啶(0.36ml)，接着再加入48％HF(3.0ml)可得脱保护的Paclitaxel类似物。按照实施例80所列步骤，得到315mg Paclitaxel类似物(产率94.8％)。
实施例85制备带呋喃基侧链的4-环丁烷紫杉烷(A) 把实施例27的7-TES-4-环丁基浆果赤霉素(154mg，0.208mmol)溶于无水甲苯(4ml)。室温下在此溶液中加入实施例63的游离酸(64.2mg，0.250mmol)和DMAP(30.5mg，0.250mmol)。10分钟后加入DCC(51.4mg，0.250mmol)，搅拌反应2小时，此时再加入另一份DCC/DMAP，反应再搅拌12小时。然后通过Celite过滤反应混合物，“滤饼”用EtOAc淋洗。真空浓缩合并的有机相，残余物色谱纯化(30-40％EtOAc/己烷)给出222mg(100％)目的产物。
0℃下，将(A)(182mg，0.186mmol)的THF(2ml)和MeOH(2ml)溶液用1NHCl(1.86ml)处理。在0℃1小时后，将反应于4℃放置过夜。然后反应混合物用饱和NaHCO3(9.6ml)处理。室温下5小时后，反应混合物用EtOAc(120ml)稀释，用水(4×10ml)洗涤，再用MgSO4干燥和真空浓缩有机层，残余物色谱纯化(含40-60％乙酸乙酯的己烷)得到77mg(47％)目的产物。
1H NMR(CDCl3)8.15-8.12(m，2H)，7.73-7.35(m，9H)，6.87(d，J＝9.2Hz，1H)，6.44(m，2H)，6.28(s，1H)，6.20(m，1H)，5.89(d，J＝9.2Hz，1H)，5.66(d，J＝7.1Hz，1H)，4.90(d，J＝8.1Hz，1H)，4.85(s，1H)，4.44(m，1H)，4.27(ABoJ＝8.4Hz，2H)，3.80(d，J＝7.0Hz，1H)，3.56(m，1H)，2.61-0.92(m，25H，包括单峰2.22，1.83，1.69，1.23，1.13，各3H).13C NMR(CDCl3)203.6，174.4，172.4，171.2，166.9，166.8，150.9，142.5，142.0，133.5，133.3，132.9，131.9，130.1，130.0，129.7，129.0，128.5，127.0，110.8，108.0，84.6，80.8，78.9，76.4，75.4 75.0，72.5，72.0，71.3，58.5，50.1，45.6，43.1，38.8，35.6，35.5，26.7，25.3，25.1，21.9，20.7，18.2，14.6，9.5.
HRMSC48H54NO15(MH+)计算值884.3493测定值884.3472实施例86制备Paclitaxel将实施例7(b)化合物加入5ml烧瓶中并溶于THF，加入甲醇，把稍带浅黄色的均相溶液冷却至0℃。加入HCl，所得均相溶液在0℃搅拌0.5小时后转移至4℃的冷室，在加入HCl后19.5小时后，TLC检测说明已无起始原料。把反应溶液加入一烧瓶中，其中含有20ml1/2饱和的NaCl溶液。得到的非均相混合物在室温下搅拌45分钟，过滤混合物，固体用15ml水洗涤并在多孔玻璃漏斗中空气干燥。然后在烧结漏斗中洗涤白色固体，使其溶于THF进入另一烧瓶中。浓缩后给出0.169g透明状固体。将物料转移至一管形瓶。使其溶于1.0ml THF，加入NEt3(4eq.，0.63mmol，88ml)，形成沉淀。在室温下搅拌非均相混合物，在加入NEt34.25小时后，TLC表明反应基本完全。混合物用5ml EtOAc和5ml H2O稀释并振摇，水相用5ml EtOAc萃取二次，合并的有机馏份用5ml HCl(in)、5ml饱和NaCl洗涤，用Na2SO4干燥，过滤和浓缩给出0.127g白色固体(Paclitaxel)，产率93.9％。
权利要求
1.一种制备式III的带有噁唑啉侧链的紫杉烷或其盐的方法 其中R1是R5、R7-O-、R7-S-或(R5)(R6)N-；R3和R4独立地是R5、R5-O-C(O)-或(R5)(R6)N-C(O)-；R5和R6独立地是氢、烷基、链烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基或杂环基；R7是烷基、链烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基或杂环基；T是通过C-13直接键连的紫杉烷部分；所述方法包括将式II的噁唑啉或其盐 其中R1、R3和R4如上定义，与带有直接与C-13键连的羟基的紫杉烷或其盐，在偶合剂存在下反应，形成式III的带有侧链的紫杉烷或其盐。
2.权利要求1的方法，其中带有直接与C-13键连的羟基的紫杉烷或其盐是式IX化合物或其盐 其中R8是氢、羟基、R14-O-、R15-C(O)-O-或R15-O-C(O)-O-；R9是氢、羟基、氟、R14-O-、R15-C(O)-O-或R15-O-C(O)-O-；R10和R11独立地是氢、烷基、链烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基或杂环基；R14是羟基保护基；R15是氢、烷基、链烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基或杂环基。
3.权利要求2的方法，其中偶合剂包括选自下列的化合物二环己基碳二亚胺、1，3-二异丙基碳二亚胺、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基-碳二亚胺盐酸盐、二(2-氧代-3-噁唑啉基)膦酰氯、羰基二咪唑、新戊酰氯、2，4，6-三氯苯甲酰氯；和选自下列的化合物1-羟基苯并三唑、N-羟基琥珀酰亚胺、三乙胺、吡啶和第4位被-N(R16)(R17)取代的吡啶，其中R16和R17独立地选自烷基、链烯基、炔基、环烷基、环烯基或杂环基，或其中R16和R17与它们键连的氮原子一起形成杂环基团。
4.权利要求2的方法，其中R1是芳基或烷氧基，R3是芳基或杂环基，R4是氢，R8是羟基或烷基羰氧基，R9是羟基或被保护的羟基基团，R10是烷基，R11是芳基。
5.权利要求4的方法，其中R1是苯基或叔丁氧基，R3是苯基、呋喃基或噻吩基，R8是羟基或乙酰氧基，R9是羟基或三烷基甲硅氧基，R10是甲基，R11是苯基。
6.权利要求5的方法，其中式II的噁唑啉是(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸、(4S-顺式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑羧酸或它们的混合物，并且所述紫杉烷是7-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III或7-三甲基甲硅烷基浆果赤霉素III。
7.式III的带有噁唑啉侧链的紫杉烷或其盐 其中R1是R5、R7-O-、R7-S-或(R5)(R6)N-；R3和R4独立地是R5、R5-O-C(O)-、或(R5)(R6)N-C(O)-；R5和R6独立地是氢、烷基、链烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基或杂环基；R7是烷基、链烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基或杂环基；T是通过C-13直接键连的紫杉烷部分；
8.权利要求7的化合物，其中T是下式部分 其中R8是氢、羟基、R14-O-、R15-C(O)-O-或R15-O-C(O)-O-；R9是氢、羟基、氟、R14-O-、R15-C(O)-或R15-O-C(O)-O-；R10和R11独立地是氢、烷基、链烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基或杂环基；R14是羟基保护基；R15是氢、烷基、链烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基或杂环基。
9.权利要求8的化合物，其中R1是芳基或烷氧基，R3是芳基或杂环基，R4是氢，R8是羟基或烷基羰氧基，R9是羟基或被保护的羟基基团，R10是烷基，R11是芳基。
10.权利要求9的化合物，其中R1是苯基或叔丁氧基，R3是苯基、呋喃基或噻吩基，R8是羟基或乙酰氧基，R9是羟基或三烷基甲硅氧基，R10是甲基，R11是苯基。
11.权利要求10的化合物，它是7-三乙基甲硅烷基-13-[[(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑基]-羰基]浆果赤霉素III或7-三甲基甲硅烷基-13-[[(4S-反式)-4，5-二氢-2，4-二苯基-5-噁唑基]-羰基]浆果赤霉素III。
全文摘要
制备带有侧链的紫杉烷类的新方法，该方法包括制备噁唑啉化合物，使噁唑啉化合物与带有直接键连于紫杉烷C－13的羟基的紫杉烷偶合，以及使如此形成的带有噁唑啉侧链的紫杉烷上的噁唑啉环开环。本发明还提供了由本发明的方法制备的新化合物。
文档编号C07D307/54GK1590386SQ0310824
公开日2005年3月9日 申请日期1993年12月23日 优先权日1992年12月23日
发明者M·A·波斯, D·J·库塞拉, J·L·蒙尼奥特, J·K·托塔特希尔, I·D·特里富诺维奇 申请人:布里斯托尔-迈尔斯斯奎布公司
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