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您当前的位置： 新的青霉烯化合物的制作方法
2021-02-01 14:02:08|
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起点商标网 专利名称：新的青霉烯化合物的制作方法
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本发明涉及新的青霉烯化合物，使用该物质治疗细菌感染，以及含有该物质的新配方。
青霉烯是由酸核衍生的一类已知化合物
其中还标明了本文所用的编码系统。该核可以两种同分异构形式存在。5R异构体(即在5-位具有以下构型)
已知具有抗菌活性(由于与青霉素结合蛋白(PBP′s)的相互作用)。该活性通常限于游离酸或阴离子，所以这些青霉烯一般以羧酸阴离子盐的形式或作为可体内水解的酯用于抗菌治疗。5S异构体(在5-位具有以下构型)
一般无抗菌活性(因为与PBP′s无相互作用)。根据H.R.Pfaendler等人，J.Am.Chem.Soc.1979，101(21)p6306-6310，例如由母核酸和丙酮基酯制备5S青霉烯是已知的。
GB2036015，GB2037277，GB2013674，EP0399228，US4282236，GB1604751，ZA8504947和J.Chem.Soc.Chem.Comm.1988，544描述了某些青霉烯-3-羧基酯衍生物，但它们不具有抗菌活性。
GB2042520公开了某些2-(乙基硫)青霉烯-3-甲酰胺(carboxamide)衍生物。
尽管青霉烯的5R和5S对映体的外消旋和其它混合物是已知的，但是，由于总的来说该5S异构体没有抗菌活性，因此几乎没有人试尝分离纯的青霉烯5S异构体。
现在已经发现，某些青霉烯酯5S异构体抑制细菌酶引导肽酶1，因此在治疗细菌感染方面具有潜在的用途。该化合物可以以相对于外消旋混合物的异构富集态制备。
因此，本发明提供了通式(Ⅰ)5S青霉烯化合物的应用
其中n是0或1，R2是氢或取代基，R3是酯-或酰胺形成基团，R1是氢或通过碳连接的有机基团，并且其中5S异构体形式(作为细菌酶引导肽酶1抑制剂)的-COR3基团对于体内水解基本稳定。
本发明还提供一种药物组合物，特别是用于治疗细菌感染(特别是通过细菌酶引导肽酶1抑制机理)，该药物组合物含有式(Ⅰ)化合物和可药用载体。
本发明还提供了一种用作活性治疗物质，特别是用于治疗细菌感染，尤其是通过细菌引导肽酶1抑制机理的式(Ⅰ)化合物。
本发明还提供了在制造用于治疗细菌感染(尤其是通过细菌酶引导肽酶1抑制机理)的药物中的式(Ⅰ)化合物的应用。
本发明还提供了治疗哺乳动物细菌感染(特别是通过细菌酶引导肽酶1抑制机理)的方法，该方法包括对需要这种治疗的哺乳动物施用有效量的式(Ⅰ)化合物。
本文所用的术语“芳基”包括苯基和萘基时，各芳基任选地用5个以下，优选3个以下选自下述的基团取代，所说的基团为卤素、巯基、(C1-6)烷基、苯基、(C1-6)烷氧基、羟基(C1-6)烷基、巯基(C1-6)烷基、卤代(C1-6)烷基、羟基、氨基、季铵、硝基、羧基、(C1-6)烷基羰基氧、(C1-6)烷氧羰基、羧酸、甲酰、(C1-6)烷基羰基和磷酸基。‘芳烷基’包括苯基C1-6烷基和萘基C1-6烷基，每个芳基基团任选地按照如上所述被取代。
本文中所用的术语‘杂环基’和‘杂环’包括在各环上适当地含有4个以下杂原子的芳族和非芳族、单和稠合环，这些杂原子选自氧、氮和硫，该环可以被，例如3个以下的选自下述基团的基团取代或未取代，这些基团为卤素、(C1-6)烷基、(C1-6)烷氧基、卤代(C1-6)烷基、羟基、羧基、羧基盐(carboxy salts)、羧基酯(carboxy esters)如(C1-6)烷氧羰基或(C1-6)烷氧羰基(C1-6)烷基、芳基及氧代基团。每个杂环可以含有4至7个，优选5或6个环原子。术语‘杂芳基’是指可以在每个环上含有5或6个环原子的杂芳族杂环或环状系统。稠和的杂环系统可以包括碳环并且需要包括唯一的杂环。根据杂环基团的性质，含有杂环基团的本发明化合物可以有两个或多个互变异构形式。所有这些互变异构形式均包括在本发明范围内。
本文所用的术语‘烷基’、‘链烯基’、‘炔基’、和‘烷氧基’包括含有1至6个碳原子的直链和支链基团，如甲基、乙基、丙基和丁基。一个具体烷基是甲基。
本文所用的术语“卤素”是指氟、氯、溴和碘。
式(Ⅰ)化合物中的R2可以是氢。
当R2不是氢时，它可以是通过碳、氧或硫原子连接在青霉烯环2-位上的有机基因。例如，R2可以是R4，CO2R4，OR4，SR4或SOR4，其中各个R4可以相同或不同并且可以是氢或者非取代或优选取代的烷基，或者芳基或杂环基。
例如，当R4代表取代的烷基时，烷基上的适当的取代基包括羟基、(C1-5)烷氧基、(C1-4)烷氧基(C1-4)烷氧基、氨基羰基氧、卤素、巯基、(C1-6)烷硫基、芳基、芳硫基、芳氧基、杂环基、杂环硫基、氨基、(单-或双-)-(C1-6)烷氨基，酰氨基或酰氧基，其中酰基可以是芳族或脂族的，例如(C1-6)烷酰基、(C1-6)烷氧羰基、任选取代的苯甲酰基或者任选取代的苯氧羰基、羧基、(C1-6)烷氧羰基、叠氮基和烷基或芳基取代的甲硅烷氧基。
除氢以外的R2取代基的适合的例子包括甲基、羟甲基、羟乙硫基、苯基、4-氯苯基、4-甲氧苯基、4-甲氧羰基苯基、氨基羰基氧甲基、对硝基苄氧羰基氨基甲基、乙硫基、甲硫基、叔-丁基二苯基甲硅烷氧基甲基和苄基。
R2优选是氢、羟甲基、羟乙硫基、苯基、或氨基羰基氧甲基。
COR3优选能抗体内水解。
当R3是酯形成基团时，它可以适当地选自那些已知对体内代谢降解基本上稳定的任何基团。
R3可以是芳氧基。此外，R3也可以是任选取代的(C1-10)烷氧基，其中任选的取代基可以是卤素、或有机基团，例如(C1-6)烷基羰基、(C1-6)烷氧羰基、(C1-10)烷氧取代的(C1-10)烷氧基、芳基或杂环基。该烷氧基R3一般可以被1或2个这些取代基在烷基链(如果该链含有一个以上碳原子)的末端位置取代。
在R3取代的烷氧基链上的任选的芳基取代基的例子包括苯基和取代的苯基，其中该取代基可以选自卤素、羧酸、羧基酯、氨基、季铵、烷氧基、羟基或磷酸。在R3取代的烷基链上的杂环取代基的实例包括任选取代的嘧啶基、苯并吡喃基和呋喃基。
该R3基团的实例包括甲氧基，苄氧基、对-甲氧基苄氧基、2，2，2-三氯乙氧基、对-硝基苯氧基、丙酮氧基苄氧基、间-和对-(甲氧羰基)苄氧基、苯甲酰基甲氧基、对-硝基苄氧基、4-吡啶基甲氧基、2，2，2-三氯乙氧基、2，2，2-三溴乙氧基、叔-丁基氧基、戊氧基、叔-戊基氧基，烯丙氧基、二苯基甲氧基、三苯基甲氧基、金刚烷基氧、2-苄氧基苯氧基、4-甲硫基苯氧基、四氢呋喃-2-基氧基、四氢吡喃-2-基氧基、五氯苯氧基、丙酮氧基、对-甲苯磺酰基乙氧基、甲氧基甲基氧、4-(4-硝基苄氧基羰基)-苄氧基、4-羧基苄氧基及其盐、4-苯基丁氧基、2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基、4-溴苄氧基和(7-甲氧基-2-氧代-2H-1-苯并吡喃-4-基)甲氧基。
R3优选是苄氧基、对-硝基苄氧基、对-甲氧基苄氧基、2，2，2-三氯乙氧基、甲氧基、对-(甲氧羰基)苄氧基或烯丙氧基。
当R3是酰胺形成基团时，它可以是NR52，其中每个R5可以相同或不同并且独立地择自氢、芳基如任选取代的苯基或任选取代的(C1-6)烷基、其中(C1-6)烷基上的任选取代基可选自与烷基R4上的取代可以选择的取代基相同的取代基。此外，两个R5部分还可以是按照上述定义含氮杂环的残基。NR52还可是氨基酸残基、例如天然的α-氨基酸如甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、蛋氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、脯氨酸、羟基脯氨酸、组氨酸或色氨酸，其中氨基酸的氨基与青霉烯环系统3-位上的羰基连接形成酰胺键。
一个适合的R5可以是氢，其它的可以是任选取代的烷基，如芳基取代的烷基如苄基。
这些酰胺形成基团R3的例子包括苄氨基、N-甲基苄氨基、吡咯烷基(pyrrolidino)、苯胺基、二乙氨基、对-甲氧基苄氨基、吗啉代、2-(甲氧羰基)乙氨基、叔-丁基氨基和(3-吡啶甲基)氨基。
R3优选是吡咯烷基。
R1可以是氢。R1还可以是取代基，该取代基选自任选取代的(C1-6)烷基，任选取代的(C1-6)链烯基和C1-6链烷酰基，其中在这些取代基的烷基上的任选取代基可以选自与烷基R4上的取代可选择的取代基相同的取代基。R1优选是在1-位通过借助于氧连接的取代基取代的C1-4烷基，这些取代基如羟基、(C1-5)烷氧基如甲氧基、氨基羰氧基、苯甲酸基、或任选地被基团如苄氧羰基氨取代的(C1-6)链烷酰氧基。当1-位碳原子是手性时，优选的立体化学式如下
R1烷基还可以被R8-COO-或R8CO-NH-取代，其中R8是氨基酸(如天然α-氨基酸)的残基。R1上的取代基还可以是叠氮基、N3或肽残基，如化学式R9-NH-CHR10-CO[-NHCHR10-CO-]n-X-，其中R9是氨基取代基团，如任选取代的C1-6链烷酰基或C1-6烷氧基羰基，R10是从天然氨基酸(如上述的α-氨基酸)衍生的残基，X是O或NH，n是1至4，更具体地说1至3如1至2之间的整数。这种肽残基的例子是(CH3)3CO.CONH.CH(CH3).CONH.CH(CH2.CH(CH3)2).CONH。
R1优选是氢、1-乙酸基乙基或1-羟乙基。
式(Ⅰ)化合物可适当地包括50%或更优选60%或更、更优选70%或更、更优选80%或最理想为90%或更多的5S异构体。特别优选的是式(Ⅰ)化合物基本上是纯5S异构体。
本发明的某些化合物可以从溶剂如有机溶剂中结晶或重结晶。在这种情况下可形成溶剂化物。本发明包括在其范围内的化学计量溶剂化物，包括水合物以及含有可变量水的化合物(该化合物可通过冷冻干燥方法生产)。
因为本发明抗菌化合物打算用于药物组合物，因此很容易理解，这些化合物每个都以基本上纯的形式，如至少60%纯，更合适至少75%纯，优选至少85%、最好至少95%纯(%以重量为基)提供。该不纯的化合物制剂可被用于制备在药物组合物中使用的更纯的制剂;这些低纯化合物制剂应含有至少1%、更合适至少5%、和优选10～49%的式(Ⅰ)化合物。
式(Ⅰ)的某些化合物是已知的，它们还可以通过那些描述于J.A.C.S1979，101(21)，p6306-6310类似的方法制备，例如通过式(Ⅱ)化合物的环化作用制备
其中R21是R2或者可转化成R2或可被R2替代的取代基，R31是R3或者可转化成R3或可被R3替代的基团，R11是R1或者可转化成R1的基团，其中R2、R3和R1定义如式(Ⅰ)，R81是有机基团如苯基。
可转化成R2的R21的例子包括-CH2OSiR3，它可转化成-CH2OH和其它衍生物，或者是与苯基连接的可转化成酸的酯。
当式(Ⅰ)中的R2是氢时，式(Ⅱ)化合物(其中R21是氢)可以从相应的化合物制得，其中相应的化合物中的硫上的取代基是β-(烷氧羰基)乙烯基如β-(乙氧羰基)乙烯基或
R31可以是例如OR91，其中R91是羧酸保护基，可以通过常规方法将其去除，形成式(Ⅲ)的酸
进一步的式(Ⅰ)化合物可以采用已知的酯-或酰胺形成反应，由母核酸(Ⅲ)或其酰化衍生物制备，其中R21、R11和n定义如上述式(Ⅰ)和(Ⅱ)，尤其是其中的酸异构富集于5S异构体。作为纯5S异构体的该酸制剂，例如描述了Pfaendler J.A.C.S.opcit。
适当的酰化衍生物包括对称或混合的酐。在酸结合剂例如叔胺(如吡啶或二甲基苯胺)、分子筛、无机碱(如碳酸钙或碳酸氢钠)或环氧乙烷(Oxirane)(它结合酰化反应中释放的卤化氢)存在条件下可以进行酰化反应。环氧乙烷(Oxirane)优选是(C1-6)-1，2-亚烷基氧化物-例如环氧乙烷或环氧丙烷。酰化反应可以在-50℃至+50℃、优选-20℃至+20℃范围内、于水或非水介质如水、丙酮、四氢呋喃、乙酸乙酯、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺、乙腈、二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、或它们的混合物中进行。该反应还可以在水不混溶溶剂的不稳定乳浊液中，特别是脂族酯或酮、如甲基异丁酮或乙酸丁酯中进行。在碱性催化剂如吡啶或2，6-卢剔啶存在下，用酸酐适当地进行酰化反应。
适当的混合酐是酐与例如碳酸单酯、三甲基乙酸、硫代乙酸、二苯基乙酸、苯甲酸、磷酸(如磷酸、亚磷酸、和次膦酸)或芳族或脂族磺酸(如对-甲苯磺酸或甲磺酸)。
酸(Ⅲ)的另外的酰化衍生物是酰基叠氮、或活化酯如与2-巯基吡啶、氰基甲醇、对硝基苯酚、2，4-二硝基苯酚、苯硫酚、卤代苯酚(包括五氯苯酚)、单甲氧基苯酚、N-羟基琥珀酰亚胺、N-羟基苯并三唑、或8-羟基喹啉的酯;或酰胺如N-酰基糖精，N-酰基噻唑烷-2-硫酮或N-酰基苯邻二甲酰亚胺;或者是酸(Ⅲ)与肟反应制备的亚烷基亚氨基酯。
酸(Ⅲ)的其它的反应酰化衍生物包括在原处与缩合剂如碳化二亚胺，例如N，N′-二乙基-、二丙基-或二异丙基碳化二亚胺，N，N′-二环己基碳化二亚胺，或N-乙基-N′-[3-(二甲氨基)丙基]碳化二亚胺;适当的羰基化合物，例如N，N′-羰基二咪唑、或N，N′-羰基二-三唑;异噁唑啉鎓盐(isoxazolinium salt)，例如N-乙基-5-苯基异噁唑啉鎓-3-磺酸盐或N-叔-丁基-5-甲基异噁唑啉鎓高氯酸盐;或者N-烷氧羰基-2-烷氧基-1，2-二氢喹啉，例如N-乙氧羰基-2-乙氧基-1，2-二氢喹啉反应形成的活性中间产物。其它缩合剂包括路易斯酸(例如BBr3-C6H6);或磷酸缩合剂如二乙基磷酰基氰化物。缩合反应优选在有机反应介质如二氯甲烷、二甲基甲酰胺、乙腈、乙醇、苯、二噁烷或四氢呋喃中进行。
形成式(Ⅲ)酸的酰化衍生物的进一步方法是用溶液或悬浮液处理该式(Ⅲ)酸，该溶液或悬浮液通过将羰基卤化物、优选草酰氯，或磷酰基卤化物如磷酰氯加入卤代烃溶剂，优选含有低级酰基叔酰胺，优选N，N-二甲基甲酰胺的二氯甲烷中制备。
酸(Ⅲ)或其酰化衍生物可以和式HO-R3醇或式HNR52胺(其中R3和R5定义如前)发生反应。由这些醇和胺形成酯和酰胺的方法在有机化学领域中是众所周知的。
这些醇的适当的例子包括苄醇、对-甲氧苄醇、2，2，2-三氯乙醇、甲醇、对-硝基苯酚、和羟基丙酮。
胺的适当的例子包括苄胺、N-甲基苄胺、吡咯烷、苯胺、二乙基胺、对-甲氧基苄胺、吗啉、2-(甲氧羰基)乙胺、叔-丁胺和(3-吡啶甲基)胺。
通过酸(Ⅲ)的酰化衍生物与醇HO-R3在适当的溶剂中反应可以形成酯。例如，式(Ⅰ)的酯可以通过式(Ⅲ)酸的金属盐(如钾盐，该盐可以通过酸(Ⅲ)与金属碱性化合物如碳酸盐反应制备)与卤化物式X-R3(其中X是卤化物基如碘)反应制备。在室温隋性溶剂中，通过游离酸与重氮基链烷烃或二苯基重氮基链烷烃反应也可以形成酯。
在适当的溶剂中(如果需要可含有酸结合剂如三乙胺或吡啶)，通过酸(Ⅲ)或N-酰化衍生物与胺H-NR52反应可以形成酰胺。合适的酸(Ⅲ)的N-酰化衍生物是一种混合酐，例如通过酸(Ⅲ)与氯甲酸乙酯在酸结合剂如三乙胺存在下、在有机溶剂如四氢呋喃中、在例如0至-20℃反应形成的混合酐。可以用就地形成的酐进行酐与胺的反应。
据信如上定义的某些式(Ⅰ)化合物是新的，并且在此意义上构成本发明的另一方面。
尤其是按如上定义的式(Ⅰ)酰胺(其中当R3是氨基或二-低级烷基氨基时，R2不是S-连接的有机基团)，据信是新的，并且在此意义上构成本发明的另一方面。
本发明组合物包括适用于口服、局部或胃肠外使用的那些形式的组合物，这些组合物可用于治疗哺乳动物包括人的细菌感染。
与其它抗菌素类似本发明化合物可以配制成以任何方便途径施用于人或兽医治疗的制剂。
该组合物可配制成以任何途径给药的形式，所说的给药途径例如口服、局部或胃肠外、尤其是口服。该组合物可以是以下形式，片剂、胶囊、粉末、颗粒、锭剂、霜剂或液体制剂、如口服或无菌胃肠外溶液或悬浮液。
本发明的局部制剂可以是、例如油膏、霜剂或洗剂、眼膏和眼或耳滴剂，浸渗敷料和气溶胶，并且可以含有适当的常规添加剂如防腐剂，有助药物渗透的溶剂和油膏和霜剂中的润滑剂。
制剂还可以含有可相容的常规载体，如霜剂或油膏基和用于洗剂的乙醇或油醇。这些载体在制剂中的含量可以从约1%至约98%。通常载体在制剂中的含量在约80%以下。
用于口服给药的片剂和胶囊可制成单位剂量形式，并且含有常规的赋形剂如粘结剂、例如糖浆、阿拉伯胶、明胶、山梨醇、黄蓍胶或聚乙烯吡咯烷酮;填料，例如乳糖、糖、玉米淀粉、磷酸钙、山梨醇或甘油;制片润滑剂，例如硬脂酸镁、滑石、聚乙二醇或二氧化硅;崩解剂，例如土豆淀粉;或者可接受的润湿剂如十二烷基硫酸钠。可以按照在常规制药实践中为人熟知的方法包衣该片剂。口服液制剂可以是以下形式，例如水或油悬浮液、溶液、乳剂、糖浆或酏剂，或者可以制成干产品而在使用前用水或其它适当的赋形剂配制。这种液体制剂可以含有常规的添加剂如悬浮剂、如山梨醇、甲基纤维素、葡萄糖浆、明胶、羟乙基纤维素、羟甲基纤维素、硬脂酸铝胶或氢化可食用脂肪、乳化剂，例如卵磷脂、脱水山梨醇-油酸酯、或阿拉伯胶;非水赋形剂(可以包括食用油)，例如杏仁油、油基酯如甘油、丙二醇、或乙醇;防腐剂，例如对羟基苯甲酸甲酯或丙酯，或者山梨酸，如果需要还含有常规调味剂或着色剂。
栓剂可以含有常规栓剂基质，如可可脂或其它甘油酯。
为了胃肠外给药，利用化合物和无菌赋形剂(优选水)制备液体单位剂量形式。根据赋形剂和所采用的浓度，该化合物可以悬浮或溶解在赋形剂中。在制备溶液中，可将化合物溶解在注射用水中，并且在装入合适的瓶或安瓿瓶封口前进行无菌过滤。
更有益的是，可将例如局部麻醉剂、防腐剂和缓冲剂等制剂溶于该赋形剂。为了提高稳定性，可以在装入瓶子前冷却该组合物并真空除去水。然后将该干的冷冻干燥粉末封入小瓶中，并且可以提供配套的小瓶注射用水以便在使用前配制注射液。除了将化合物悬浮在赋形剂中以代替溶解在赋形剂中和不能采用过滤灭菌之外，以基本相同的方法制备胃肠外悬浮液。在将化合物悬浮在无菌赋形剂之前，可以将化合物暴露于环氧乙烷灭菌。有益的是，将表面活性剂或润湿剂包括在组合物中以利于化合物的均匀分布。
根据给药方法，该组合物可以含有0.1%(重量)，优选10%(重量)至60%(重量)的活性物质。当组合物包含剂量单位时，每个单位优选含有50-500mg活性成份。根据给药的途径和次数，用于成人治疗的剂量优选每天100mg至5g。该剂量相当于每天1.5至70mg/Kg。剂量在每天5至20mg/Kg更合适。
当以上述剂量给药式(Ⅰ)化合物或其可药用盐或者其可体内水解的酯时，没发现不能接受的毒性影响。
式(Ⅰ)化合物可以是本发明组合物中的唯一的治疗剂，或者是与其它抗生素结合使用。
本发明化合物可潜在地用于抗广谱微生物(包括革兰阴性微生物如大肠杆菌和革兰阳性微生物如S.aureus)的抗菌剂。
以下实施例说明本发明化合物及其中间体的制备。
实施例1 (5S)-青霉烯-3-羧酸苄酯1a (4S)-(顺-β-甲酯基乙烯基巯基)氮杂环丁-2-酮
(ⅰ)在-10℃，向(-)顺-β-甲酯基乙烯基异硫脲鎓氯盐(32.1g，0.1mol)(通过Pfaendler H.R.等人(J.Amer.Chem.Soc.，101，1979，6306)方法制备)的乙醇(400ml)溶液中添加预冷的氢氧化钠水溶液(200ml，1.0N，0.2mol)。将生成的含有(-)-顺-β-甲酯基乙烯基硫醇的钠盐的悬浮液直接用于下步反应。
(ⅱ)在-10℃下，将预冷的4-乙酰氧基氮杂环丁-2-酮(12.9g，0.1mol)的乙醇(200ml)溶液加入到上述(-)-顺-β-甲酯基乙烯基硫醇钠悬浮液中。在加入到上述(-)-顺-β-甲酯基乙烯基硫醇钠悬浮液中。在加入过程中溶液内部温度保持在-10℃。然后将反应溶液在-10℃下搅拌30分钟、5℃下搅拌15分钟。加入二氯甲烷和饱和氯化钠溶液，将有机溶液进行分离、干燥(MgSO4)和蒸发。在硅胶上对残余物进行色谱，用乙酸乙酯-己烷混合物洗脱，得到白色半固体的氮杂环丁酮差向异构混合物(26.1g)。将该半固体从二氯甲烷/正戊烷中重结晶，得到白色固体(0.902g)。将该白色固体再在二氯甲烷/正戊烷中重结晶三次，直到所得固体具有恒定熔点。由此获得的产物是纯的(4S)-(顺-β-甲酯基乙烯基巯基)氮杂环丁-2-酮(0.66g)，m.p.130-131℃;[α]23D-79°(c 1.0，CHCl3)，δH(CDCl3)0.77(3H，d，J 7Hz)，0.90(6H，2xd，J 6.5和7Hz)，0.9-2.12(m，9H)，3.08(1H，ddd，J 15.5，2，1Hz)，3.52(1H，ddd，J 15.5，5，2Hz)，4.76(1H，dt，J 11和4.5Hz)，4.92(1H，dd，J 5和2.5Hz)，6.01(1H，d，J 10Hz)，6.28(1H，宽共振)，7.11(1H，d，J 10Hz)。
蒸发有机母液并从二氯甲烷/正戊烷中再次重结晶。对从二氯甲烷/正戊烷中所得固体重复进行重结晶，又得到一定量的纯(4S)-(顺-β-甲酯基乙烯基巯基)氮杂环丁-2-酮(1.66g)，m.p.130℃;[α]23D-80℃(c 1.0，CHCl3)。
1b.[(4S)-(顺-β-
酯基乙烯基巯基)-2-氧代氮杂环丁-1-基]三苯基正膦亚基乙酸苄酯
将乙醛酸苄酯-水合物(0.439g;2.415mM)溶于苯(100ml)中，对该溶液加热回流1小时，同时除去水(Dean and Stark装置)。然后将该溶液冷却至室温并加入(4S)-(顺-β-
酯基乙烯基巯基)氮杂环丁-2-酮(0.500g;1.61mM)的干燥苯(10ml)溶液。加入三乙胺(4滴)，在室温搅拌4小时。然后对该溶液进行减压蒸发，并从甲苯中共沸二次，产生非对映异构羟基乙酸酯泡沫。
将该泡沫溶于干燥四氢呋喃(50ml)中并在氩气氛下将其冷却至-10℃。将2，6-卢剔啶(0.282ml)和亚硫酰(二)氯(0.177ml)加入并在-10℃持续搅拌15分钟。然后过滤该溶液并蒸发滤液，得到非对映异构氯代乙酸酯泡沫。
将该氯代乙酸酯溶于1，4-二噁烷(50ml)中，并向搅拌的溶液中加入三苯膦(1.68gm)。当三苯膦全部溶解后，将该溶液蒸发至较小体积(约10ml)。加入2，6-卢剔啶(0.228ml)并在室温搅拌该溶液16小时。然后将该溶液在乙酸乙酯和水之间分配。用5%柠檬酸溶液、饱和碳酸氢钠溶液、盐水洗涤该有机溶液，干燥(MgSO4)并蒸发。在硅胶上对残余物进行色谱，用乙酸乙酯-己烷混合物洗脱，得到纯标题正膦白色泡沫(0.740g)，νmax(CH2Cl2)1763，1700，1638，1582cm-1。
1c.(5S)-青霉烯羧酸苄酯
将[(4S)-(顺-β-
酯基乙烯基巯基)-2-氧代氮杂环丁-1-基]三苯基正膦亚基乙酸苄酯(0.740g)溶于乙酸乙酯中并在氩气流下冷却至0℃。加入三氟乙酸(15ml)并将溶液在0℃搅拌15分钟，随后冷却至-78℃。向溶液中通入臭氧2小时，t.l.c表明臭氧分解完全。用氩气吹除过量的臭氧并加入三苯膦(0.315g)。加入饱和碳酸氢钠并使溶液加热至室温。用饱和碳酸氢钠、盐水洗涤该有机溶液、干燥(MgSO4)并蒸发。将残余物溶于二氯甲烷(20ml)并在室温搅拌2小时，t.l.c表明环化形成双环青霉烯已经完成。对该溶液进行减压蒸发。残余物在硅胶上进行色谱。用乙酸乙酯-己烷混合物洗脱，得到混有乙醛酸
酯的标题化合物(0.183g)。在硅胶上对该不纯产物再次进行色谱，用0%、1%和2%乙醇的二氯甲烷洗脱，得到纯的标题化合物白色结晶固体(0.051g)，m.p.(EtOAc-己烷)136-140℃;[α]23D-206°(c 1.0，CH2Cl2);νmax(CH2Cl2)1800，1720，1562cm-1;δH(CDCl3)3.59(1H，dt，J 16.5，1.5Hz)，3.86(1H，ddd，J 16.5，4，1Hz)，5.22(1H，d，J 12.5Hz)和5.28(1H，d，J 12.5Hz)(全部ABq)，5.80(1H，dd，J 4，2Hz)，7.2-7.45(6H，m)(实测值C，59.65;H，4.15;N，5.4;S，12.15%;M+，261.0464.C13H11NO3S要求C，59.75;H，4.25;N，5.35;S，12.25%;M，261.0460)。
实施例2 (5RS)-青霉烯-3-羧酸甲酯在10%钯碳催化剂(30mg)存在条件下，于大气压将(5RS)-青霉烯-3-羧酸4-硝基苄酯[U.K.Pat.Appl.2，036，015(Beecham Group)](30mg)的二噁烷(5ml)和水(1.25ml)的溶液氢化2小时。产物经硅藻土过滤并将碳酸钾(8mg)的水(5ml)溶液加入滤液。0.25小时后，对溶液进行减压蒸发直至刚好混浊，然后用乙酸乙酯洗涤二次。对剩余的水溶液进行冷冻干燥，得到粗钾盐。在干燥的二甲基甲酰胺(1ml)中搅拌该盐并加入碘代甲烷(28mg、12μl)。在氩气氛下、于室温搅拌该混合物3小时，然后减压蒸发。将残余物在乙酸乙酯和盐水之间分配;分离有机相，用盐水洗涤，干燥并蒸发。用乙酸乙酯/己烷1∶1作为溶液，在硅胶60上进行色谱，纯化该残余物，得到一种胶，该胶从乙酸乙酯/己烷中结晶得到甲酯(7mg);m.p.91-93℃;νmax(CHCl3)2970，1800，1720和1565cm-1;δH(CDCl3)3.58(1H，d，J 17.0Hz具有细分离峰，6-H)，5.80(1H，dd，J 3.9 & 1.9Hz，5-H)，和7.27(1H，s，2-H);M+(EI)，m/z185。
实施例3 (5R)-青霉烯-3-羧酸苄酯通过M.Ohtani等人(J.Org.Chem.，1984，49，5271)中描述的方法，将(5R)-青霉烯-3-羧酸对甲氧苄酯转化成(5R)-青霉烯-3-羧酸钠盐。然后将其溶解在干燥的N，N-二甲基甲酰胺中并在室温与苄基溴(2当量)一起搅拌2小时。用乙酸乙酯稀释该溶液，并用水、盐水洗涤、干燥(MgSO4)和蒸发。在硅胶上对残余物进行色谱，用10-50%乙酸乙酯和己烷梯度洗脱，得到标题化合物白色固体，[α]23D+201°(C 1.0，CH2Cl2)(ZA8504947，1986，Merck)。
实施例4 (5RS)-青霉烯-3-羧酸苄酯按照GB2，036，015(1980)的方法制备该化合物，得到标题化合物m.p.118-119℃λmax(EtOH)260和319nm;νmax(CHCl3)1795，1715cm-1δH(CDCl3)3.49(1H，ddd，J 16，2和2Hz)，3.83(1H，dd，J 16和4Hz)，5.23(2H，s)，5.74(1H，dd，J 4和2Hz)，7.24(1H，dd，J 2Hz)，7.35(5H，s)(实测值C，59.6;H，4.1;N，5.2;S，12.3%.C13H11NO3S要求C，59.7;H，4.2;N，5.4;S，12.3%)。
实施例5 (5RS)-青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯按照GB2，036，015(1980)的方法制备，得到标题化合物mp 160-165°，λmax(EtOH)319nm;νmax(CHCl3)1800，1715cm-1;δH(CDCl3)3.57(1H，ddd，J＝17，2，1Hz)，3.95(1H，ddd，J＝17.4，2Hz)，5.22和5.45(2H，ABq，J＝14Hz)，5.81(1H，dd，J 4，2Hz)，7.35(1H，d，J 1Hz)，7.57(2H，d，J＝9Hz)和8.23(2H，d，J＝9Hz)(实测值C，51.0;H，3.3;N，9.1;S，10.3%，C13H10N2O5S要求C，50.98;H，3.27;N，9.15;S，10.45%)。
实施例6 (5RS)-青霉烯-3-羧酸对甲氧苄酯按照实施例2的方法，用对甲氧苄基溴进行制备，得到标题化合物νmax(CHCl3)1798，1715cm-1;δH(CDCl3)3.55(1H，dt)，3.75-3.95(4H，s+m)，5.18(2H，ABq)，5.78(1H，dd，J 1.85，4.0Hz)，6.90(2H，d，J 8.7Hz)，7.25(1H，s)，7.33(2H，d，J 8.7Hz)(实测值M+291.0571;C14H13NO4S要求391.0565)。
实施例7 (5R)-青霉烯-3-羧酸对甲氧苄酯将(5R，6S)-6-溴代青霉烯-3-羧酸对甲氧苄酯(J.C.S.Chem.Commun.，1989，p.371)(2.0g)溶于乙腈(80ml)中，并在室温与锌粉(1.4g)和1M乙酸铵溶液一起搅拌30分钟。得到的悬浮液经硅藻土过滤、用乙酸乙酯稀释并用碳酸氢钠溶液、盐水洗涤、干燥(MgSO4)和蒸发。在硅胶上对残余物进行色谱，用20→50%EtOAc/己烷梯度洗脱，得到标题化合物浅黄色固体(0.50g)，[α]23D+169°(c 1.0，CHCl3)。
实施例8 (5RS)-青霉烯-3-羧酸三氯乙酯按照与实施例4相类似的方法进行制备，得到标题化合物mp119-121°，λmax(EtOH)322;νmax(CHCl3)1800，1730cm-1;δH(CDCl3)3.53(1H，ddd，J 16，2和1Hz)，3.89(1H，dd，J 16和4Hz)，4.74和4.89(2H，ABq，J 12Hz)，5.31(1H，dd，J 4和2Hz)，7.42(1H，d，J 1Hz).(实测值C，32.3;H，2.0;N，4.9;S，10.6%.C8H6NO3SCl3要求C，31.7;H，2.0;N，4.6;S，10.6%)。
实施例9 (5RS)-2-(羟甲基)青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯按照GB2，037，277B所述方法进行制备，得到标题化合物m.p.137-9°，λmax(EtOH)265和322nm;νmax(CHCl3)3600-3010，1795，1705cm-1;δH(CDCl3)3.11-3.40(1H，bs，exch D2O)，3.51(1H，dd，J＝2，16Hz)，3.84(1H，dd，J＝4，16Hz)4.67(2H，bs)，5.22和5.47(2H，ABq，J＝14Hz)，5.67(1H，dd，J＝2，4Hz)，7.20(2H，d，J＝8Hz)，8.20(2H，d，J＝8Hz).(实测值C，50.21;H，3.43;N，8.26;S，9.52%;C14H12N2O6S要求C，50.0;H，3.60;N，8.33;S，9.53%)。
实施例10 (5RS)-青霉烯-3-羧酸烯丙酯将[(4RS)-三苯甲基硫-2-氧代氮杂环丁-1-基]三苯基正膦亚基乙酸烯丙酯(0.500g;0.711mM)溶于干燥的乙腈(25ml)中。向搅拌着的溶液中加入4-二甲氨基吡啶(0.104g)和硝酸银(0.185g)乙腈溶液。在室温搅拌该溶液1小时。然后将溶液冷却至5℃，并快速连续地加入4-二甲氨基吡啶(0.087g)、碘化钠(1.066g)、随后是乙酸甲酸酐(0.57ml)。除去冷却浴并将溶液在室温搅拌30分钟。然后将反应溶液在乙酸乙酯和水之间分配。用1N HCl、水、饱和碳酸氢钠溶液、盐水洗涤该有机溶液、干燥(MgSO4)并减压蒸发。在硅胶上对粗产物进行色谱。用10-25%乙酸乙酯/己烷进行梯度洗脱，得到标题化合物浅黄色油(0.090g)，vmax(CH2Cl2)1800，1720cm-1;δH(CDCl3)3.58(1H，dt，J 16.6，1.5Hz)，3.88(ddd，J 16.5，4.0，0.7Hz)，4.72(2H，m)，5.2-5.5(2H，m)，5.70(1H，dd，J 2，4Hz)，5.85-6.10(1H，m)，7.30(1H，d，1Hz)，m/e 211.0300(C9H9NO3S要求M，211.0303)。
实施例11 (5S)-青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯11a[(4S)-顺-β-
酯基乙烯基巯基)-2-氧代氮杂环丁-1-基]-三苯基正膦亚基乙酸对硝基苄酯通过实施例1b的方法，让乙醛酸对硝基苄酯-水合物与(4S)-(顺-β-酯基乙烯基巯基)氮杂环丁酮反应，得到标题正膦泡沫，νmax(CH2Cl2)1762，1698，1638，1618，1581cm-1。
11b(5S)-青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯通过实施例1c的方法，对实施例11a的正膦进行臭氧分解，由乙酸乙酯/己烷中得到标题化合物白色结晶固体，[α]23D-151°(C 1.0，CH2Cl2);νmax(CH2Cl2)1800，1722，1610cm-1;δH(CDCl3)3.62(1H，dt，J 16.5和1Hz)和3.90(1H，dd，J 16.5和4Hz)，5.27(1H，d，J 13.5Hz)和5.41(1H，d，J 13.5Hz)，5.83(1H，dd，J 2和4Hz)，7.38(1H，s)，7.60(2H，d，J 8.7Hz)，8.23(2H，d，J 8.7Hz);λmax(EtOH)316(ε7，300)，263nm(ε10，021);m/e 306.0310(C13H10N2O5S要求M，306.0310)。
实施例12 (5S)-青霉烯-3-羧酸甲酯12a(5S)-青霉烯-3-羧酸将(5S)-青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯(0.250g;0.817mM)溶于30%1，4-二噁烷水溶液(50ml)中，并在室温、氢气压下，有10%钯碳催化剂(0.375g)存在条件下摇动1小时。在添加碳酸氢钠(0.076g)的水(2ml)溶液后，经硅藻土对反应悬浮液进行过滤，用水充分洗涤。将滤液蒸发至小体积并在乙酸乙酯和水之间分配。分离水层，蒸发到较小体积并施加到Diaion HP 20-SS柱上，用水洗脱。将含有标题酸钠盐的那些部分合并，然后冷冻干燥得到浅黄色固体。
12b (5S)-青霉烯-3-羧酸甲酯将实施例12a的钠盐悬浮在干燥的二甲基甲酰胺(5ml)中，并在室温与甲基碘(0.5ml)一起搅拌14小时。减压蒸发掉溶剂并将残余物在乙酸乙酯和水之间分配。用盐水洗涤有机溶液、干燥(MgSO4)并蒸发。在硅胶上对残余物进行色谱，用10-50%乙酸乙酯/己烷梯度洗脱，得到标题酯白色固体，λmax(EtOH)315(ε7081)，225nm(ε2651);νmax(CH2Cl2)1800，1728，1568cm-1;δH(CDCl3)3.59(1H，d，J 16.5Hz)，3.8-3.95(4H，重叠s+dd)，5.80(1H，dd，J 1.7和3.8Hz)，7.28(1H，s)，m/e+185.0147(C7H7NO3S要求M，185.0147)。
实施例13 (5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸4-(甲氧羰基)苄酯以40%的产率、按照实施例2的方法用4-(溴乙基)苯甲酸甲酯制备该酯;m.p.135-7℃(乙酸乙酯/己烷);νmax(CHCl3)2960，1800，1725sh，1715和1615cm-1;δH(CHCl3)3.60(1H，dt，J 16.6 & 1.6Hz，6-H)，3.87(1H，d，J 16.6 & 4.0Hz，6-H)，3.92(3H，s，OCH3)，5.25和5.35(2H，ABq，J 13.1Hz，OCH2Ar)，5.81(1H，dd，J 4.0和1.6Hz，5-H)，7.32(1H，s，2-H)，7.47(2H，d，J 8.2Hz，Ar-H)和8.04(2H，d，J 8.2Hz，Ar-H);(实测值C，56.3;H，4.0;N，4.5%.C15H13NO5S要求C，56.4;H，4.1;N，4.4%)。
实施例14 (5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸 4-[(4-硝基苄基)氧基羰基]苄酯以53%的产率，按照实施例2的方法由4-(溴乙基)苯甲酸4-硝基苄酯制备青霉烯酯;m.p.132-5℃(乙酸乙酯/己烷);νmax(CHCl3)1800，1720，1610，1560和1525cm-1;δH(CDCl3)3.60(1H，dt，J 16.6 & 1.6Hz，6-H)，3.87(1H，ddd，J 16.6，3.9 & 0.7Hz，6-H)，5.26和5.37(2H，ABq，J 13.2Hz，OCH2Ar)，5.46(2H，s，OCH2Ar)，5.81(1H，d，J 3.9 & 1.6Hz，5-H)，7.33(1H，s，2-H)，7.50(2H，d，J 8.3Hz，Ar-H)，7.60(2H，d，J 8.7Hz，Ar-H)，8.09(2H，d，J 8.3Hz，Ar-H)和8.26(2H，d，J 8.7Hz，Ar-H);(实测值C，57.6;H，3.8，N，6.2%.C21H16N2O7S要求C，57.3;H，3.7;N，6.4%)。
实施例15 4-[[(5RS)-青霉-2-烯-3-羰基]氧甲基]苯甲酸钠在10%钯-碳催化剂(33mg)存在条件下，将(5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸4-[(4-硝基苄基)氧基羰基]苄酯(33mg)的二噁烷(10ml)和水(2.5ml)溶液在大气压力下氢化3小时。反应混合物经硅藻土过滤，并将碳酸钠(4.0mg)的水(5ml)溶液加入滤液中。0.5小时后，蒸发该溶液直至刚好变混浊，然后用乙酸乙酯洗涤。将水溶液冷冻干燥，得到标题钠盐浅黄色固体(16mg;65%);νmax(KBr)3400，1786，1709和1597cm-1;δH(D2O)3.62(1H，brd，J 17.1Hz，6-H)，3.87(1H，dd，J 17.1 & 3.8Hz，6-H)，5.27(2H，s，OCH2Ar)，5.82(1H，dd，J 3.8 & 1.7Hz，5-H)，7.45(2H，d，J 8.1Hz，Ar-H)，7.62(1H，s，2-H)和7.83(2H，d，J 8.1Hz，Ar-H)。
实施例16 (5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸正戊酯在有10%钯-碳催化剂(50mg)存在条件下，将(5RS)-青霉烯-3-羧酸4-硝基苄酯(50mg)的二噁烷(10ml)和水(2.5ml)溶液在大气压下氢化2小时。产物经硅藻土过滤并将碳酸钾(14mg)的水(5ml)溶液加入该滤液。0.25小时后对该溶液进行减压蒸发直至刚好混浊，然后用乙酸乙酯洗涤两次。用氯化钠使该钾盐水溶液饱和，然后与乙酸乙酯/四氢呋喃1∶1(20ml)一起剧烈搅拌。用0.5N盐酸将该混合物酸化至pH2.0，分离有机相、干燥并蒸发。在室温、氩气氛下，在干燥的二甲基甲酰胺(1ml)中搅拌该粗酸，并用1-碘代戊烷(48mg)和氟化铯(37mg)处理。18小时后，蒸发该混合物，残余物在乙酸乙酯和稀碳酸氢钠水溶液之间分配。分离有机相，用盐水洗涤，然后在硫酸钠上干燥并蒸发。用乙酸乙酯/己烷(4∶6)作为洗脱液，在硅胶60上对残余物进行色谱，得到戊酯胶(10mg);νmax(CHCl3)2980，2950，2880，1800，1715和1560cm-1;δH(CDCl3)，0.91(3H，t，J 7.0Hz，CH3)，1.29-1.43(4H，m，CH2′s)，1.69(2H，pent，J 7.0Hz，OCH2CH2)，3-57(1H，dd，J 16.5 & 1.9Hz)，6-H)，3-85(1H，dd，J 16.5 & 3.9Hz，6-H)，4.12-4.29(2H，m，OCH2)，5.79(1H，dd，J 3.9 & 1.9Hz，5-H)和7.24(1H，s，2-H);[实测值M+，241(EI).C11H15NO3S要求M，241]。
实施例17(5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸4-苯基丁酯以24%产率，按照实施例16的方法，由碘丁基苯制备标题青霉烯酯;νmax(CHCl3)2930，2860，1800，1710和1560cm-1;δH;(CDCl3)1.67-1.80(4H，m，OCH2CH2CH2)，2.60-2.70(2H，m，CH2Ar)，3.57(1H，dt，J 16-6 & 1.7Hz，6-H)，3-85(1H，dd，J 16.6 & 3-9Hz，6-H)，4.14-4.30(2H，m，OCH2)5.78(1H，dd，J 3-9 & 1.7Hz，5-H)，和7.15-7.34(6H，m，2-H和Ar-H′S)[实测值M+，303(EI).C16H17NO3S要求M，303]。
实施例18 (5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸3-(甲酯基)苄酯在有10%钯-碳催化剂(50mg)存在下，将(5RS)-青霉烯-3-羧酸4-硝基苄酯(50mg)的二噁烷(10ml)和水(2.5ml)溶液在大气压下氢化2小时。产物经硅藻土过滤，并向滤液中加入碳酸钾(14mg)和水(5ml)溶液。0.25小时后，减压蒸发该溶液直至刚好混浊，然后用乙酸乙酯洗涤两次。用氯化钠使该钾盐溶液饱和，然后与乙酸乙酯/四氢呋喃1∶1(20ml)一起剧烈搅拌。用0.5N盐酸将混合物酸化至pH2.0并分离有机相。干燥和蒸发。用3-(溴甲基)苯甲酸甲酯(45mg)和粉末状碳酸钾(14mg)处理该粗酸的干燥DMF(1ml)溶液。在氩气氛下、室温、搅拌该反应混合物18小时，然后蒸发。残余物在乙酸乙酯和盐水之间分配;分离有机相，然后用盐水洗涤、在硫酸钠上干燥。蒸发该溶液，并用乙酸乙酯/己烷(4∶6)作为洗脱液在硅胶60上对残余物进行色谱，得到青霉烯酯(25mg);m.p.100-2℃(乙酸乙酯/己烷);νmax(CHCl3)2960，1800，1725和1560cm-1;δH(CDCl3)3.59(1H，dt，J 16.6 & 1.9Hz，6-H)，3.86(1H，dd，J 16.6 & 3.9Hz，6-H)，3.93(3H，s，OCH3)，5.25和5.33(2H，ABq，J 12.6Hz，OCH2)，5.80(1H，dd，J 3.9 & 1.9Hz，5-H)，7.30(1H，s，2H)，7.46(1H，t，J 7.7Hz，Ar5′-H，7.62(1H，s，J 7.7Hz，Ar6′-H)，8.01(1H，d，J 7.7Hz，Ar4′-H)和8.07(1H，s，Ar2′-H)(实测值C，56.9;H，4.0;N，4.6%.C15H13NO5S要求C，56.4;H，4.1;N，4.4%)。
实施例19(5RS)青霉-2-烯-3-羧酸2-(2-甲氧基乙氧基)乙酯以16%产率、采用实施例18的方法，由1-碘-2-(2-甲氧基乙氧基)乙烷制备青霉烯酯胶;δH(CDCl3)3.39(3H，s，OCH3)，3.53-3.69(5H，m，6-H和OCH2CH20Me)，3.76(2H，t，J 4.9Hz，CO2CH2CH2O)，3.85(1H，dd，J 16.5 & 3.9Hz，6-H)，4.35和4.41(2H，2dt，J 12.0 & 4.9Hz，CO2CH2)，5.79(1H，dd，J 3.9 & 1.9Hz，5-H)和7.30(1H，s，2-H);[实测值M+，273(EI).C11H15NO5S要求M，273]。
实施例20 (5RS)青霉-2-烯-3-羧酸4-溴苄酯以54%产率，采用实施例18的方法，由4-溴代-1-(溴甲基)苯制备青霉烯酯;m.p.108℃(乙酸乙酯/己烷);νmax(CHCl3)1800，1720和1565cm-1;δH(CDCl3)3.58(1H，dt，J 16.6 & 1.8Hz，6-H)，3.86(1H，ddd，J 16.6，4.0，0.6Hz，6-H)，5.15和5.24(2H，ABq，J 12.6Hz，CH2Ar)，5.79(1H，dd，J 4.0 & 1.8Hz，5-H)，7.28(2H，d，J 8.2Hz，Ar-H)，7.29(1H，s，2-H)和7.50(2H，d，J 8.2Hz，Ar-H);(实测值C，45.8;H，2.8;N，4.2%.C13H10BrNO3S要求C，45.9;H，3.0;N，4.1%)。
实施例21 (5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸(7-甲氧基-2-氧代-2H-1-苯并吡喃-4-基)甲酯采用实施例18的方法，由4-(溴甲基)-7-甲氧基香豆素制备青霉烯酯，产率51%;m.p.170-2℃;νmax(KBr)1786，1723，1710，1614，1560和1510cm-1;δH[(CD3)2SO/C5D5N1∶1]3.75(1H，brd，J 16.8Hz，6-H)，3.91(3H，s，OCH3)，4.08(1H，dd J 16.8 & 4.0Hz，6-H)，5.58和5.74(2H，2dd，J16.0 & 1.3Hz，CH2Ar)，5.99(1H，dd，J 4.0 & 1.8，5-H)，6.44(1H，s，2-H)，7.01-7-12(2H，m，6′-H & 8′-H)，7.77(1H，d，J 8.8Hz，5′-H)和8.08(1H，s，3′-H);[实测值MH+，360(NH3DCl).C17H13NO6S要求M，359]。
实施例22(5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸甲氧基甲酯采用实施例18的方法，由氯甲基甲醚制备青霉烯甲氧基甲酯，产率36%;m.p.109-110℃(乙酸乙酯/己烷);νmax(CHCl3)2970，1800，1720和1560cm-1;δH(CDCl3)3.52(3H，s，OCH3)3.62(1H，dt，J 16.6 & 1.9Hz，6-H)，3.87(1H，dd，J 16.6 & 3.9Hz，6-H)，5.30和5.44(2H，ABq，J 5.9Hz，OCH2O)，5.81(1H，dd，J 3.9 & 1.9Hz，5-H)和7.35(1H，s，2-H);(实测值C，44.8;H，4.0;N，6.5%;M+，215.C8H9NO4S要求C，44.7;H，4.2;N，6.5;M，215)。
实施例23 (5S)-青霉-2-烯-3-羧酸甲氧基甲酯按照以下条件，对实施例22所述的外消旋甲氧基甲酯在手性固定相进行制备h.p.l.c.柱Chiralpak AD-20mm流定相乙醇/己烷35∶65流量6毫升/分钟温度室温监测UV220nm样品制备3mgml-1乙醇的1ml注射液从柱上洗脱的第二个对映体是所需要的(5S)-青霉烯;25D-258。
实施例24 (5RS)-6-(1-乙酰氧乙基)青霉烯-3-羧酸烯丙酯24a.[3-(1-羟乙基)-4-三苯甲基硫-2-氧代氮杂环丁-1-基]三苯基正膦亚基-乙酸烯丙酯
将[(4RS)-三苯甲基硫-2-氧代氮杂环丁-1-基]三苯基正膦亚基-乙酸烯丙酯(3.0g;4.27mM)溶于干燥的四氢呋喃(75ml)并且在氩气氛下冷却至-78℃。加入二异丙基氨基锂溶液(5.34ml 2.0M在庚烷/四氢呋喃/乙基苯中的溶液)并将该溶液在-78℃搅拌30分钟。然后加入乙醛(1.2ml)的四氢呋喃溶液，并且在加入冰醋酸(2ml)使反应淬火之前在-78℃持续再搅拌30分钟。反应溶液在乙酸乙酯和水之间分配并升至室温。用1N盐酸溶液、水、饱和碳酸氢钠溶液、水、盐水洗涤该有机溶液，干燥(MgSO4)并减压蒸发。在硅胶上对残余物进行色谱，用10-75%乙酸乙酯-己烷梯度洗脱，得到标题正膦的非对映异构体混合物浅黄色泡沫(2.44g)，νmax(CH2Cl2)1755，1622cm-1;m/e(氨气DCI)748(MH+)。
24b[3-(1-乙酰氧乙基)-4-三苯甲基硫-2-氧代氮杂环丁-1-基]三苯基正膦亚基-乙酸烯丙酯
将实施例24a.(2.44g)的醇的非对映异构体混合物溶于干燥的二氯甲烷(200ml)，并在室温与三乙胺(1.32ml)，乙酸酐(0.96ml)和4-二甲氨基吡啶(0.25g)一起搅拌16小时。然后用1N盐酸溶液、水、饱和碳酸氢钠溶液、盐水洗涤有机溶液、干燥(MgSO4)并蒸发。在硅胶上对残余物进行色谱，用乙酸乙酯-己烷混合物洗脱，得到非对映异构的标题正膦白色泡沫(1.48g)νmax(CH2Cl2)1755，1740，1620cm-1。
24c.(5RS)-6-(1-乙酰氧乙基)青霉烯-3-羧酸烯丙酯
将实施例24b的非对映异构体正膦(0.750g;0.95mM)溶于干燥乙腈(25ml)中，并在室温与4-二甲氨基吡啶(0.139g)和硝酸银(0.363g)的乙腈溶液一起搅拌2小时。然后加入乙酸甲酸酐(0.8ml)、4-二甲氨基吡啶(0.118g)和碘化钠(1.42g)并在室温连续搅拌1小时。将反应溶液在乙酸乙酯和水之间分配。用饱和碳酸氢钠溶液、水、盐水洗涤有机层，并干燥(MgSO4)。在进行减压蒸发之前，让溶液在室温保持30分钟。在硅胶(25g)上对残余物进行色谱，用10-50%乙酸乙酯-己烷梯度洗脱。
第一洗脱成分为标题化合物的单一的纯异构体(异构体A)无色胶(0.010g)，νmax(CH2Cl2)1800，1748，1725cm-1;δH(CDCl3)1.53(3H，d J 6Hz)，2.07(3H，s)，4.07(1H，ddd，J 0.7，3.8 10.3Hz)，4.6-4.8(2H，m)，5.2-5.45(3H，m)，5.84(1H，d，J 4.0Hz)，5.85-6.05(1H，m)，7.31(1H，d，0.8Hz)。
第二洗脱成分也是标题青霉烯纯异构体(异构体B)(0.041g)，νmax(CH2Cl2)1801，1748，1728cm-1;δH(CDCl3)1.45(3H，d，J 6.5Hz)，2.12(3H，s)，4.03(1H，重叠ddd，J 1，2，4.5Hz)，4.6-4.85(2H，m)，5.2-5.45(2H，m)，5.62(1H，d，J 2Hz)，5.88-6.06(1H，m)，7.24(1H，d，J 1Hz)。
连续洗脱得到异构体混合物(0.039g)，然后得到标题青霉烯的第三个纯异构体(异构体C)(0.056g)，νmax(CH2Cl2)1802，1748，1722cm-1;δH(CDCl3)1.37(3H，d，J 6.3Hz)，2.09(3H，s)，4.08(1H，dd J 4.4，7.8Hz)，4.6-4.82(2H，m)，5.25-5.58(3H，m)，5.82(1H，d，J 4.4Hz)，5.88-6.05(1H，m)，7.28(1H，d，J 0.7Hz)。
实施例25 (5RS，6RS)-6-[(SR)-1-乙酰氧乙基]-2-(2-羟乙基硫)青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯在氩气氛下将[3-(1SR-乙酰氧乙基-4-(2-羟乙基三硫羰基)-2-氧代氮杂环丁-1-基]三苯基正膦亚基乙酸对硝基苄酯(4.47g)[按照EPO，041，768(16、12、81)所述方法制备]的二甲苯(1L)溶液加热回流5.5小时。将反应混合物蒸发至干并在硅胶上进行色谱二次，用乙酸乙酯/二氯甲烷(1∶9)和乙醚/乙酸乙酯(9∶1)洗脱，得到标题化合物(297mg)，mp151-152℃，λmax(EtOH)260nm，333nm;νmax(CHCl3)1795，1730，1690cm-1;δH(CDCl3)1.55(3H，d，J 6Hz)，2.08(3H，s)，2.14(1H，br s)，3.11-3.32(2H，m)，3.85-3.95(2H，m)，4.03(1H，dd，J 4.0和9.8Hz)，5.22和5.47(2H，ABq，J 13Hz)，5.19-5.31(1H，m)，5.76(1H，d，J 4Hz)，7.61(2H，d，J 9Hz)，8.23(2H，d J 9Hz)(实测值M+468.0647，C19H20N2O8S2要求M，468.0657)。
实施例26 (5RS)-2-苯基青霉烯-3-羧酸甲酯26a(4RS)-苯甲酰硫氮杂环丁-2-酮将硫代苯甲酸(1.52g，11mM)溶于二氯甲烷(30ml)中并将溶液冷却至-10℃。将氢氧化钠(0.44g，11mM)溶于水(30ml)中并加至上述冷却的溶液中。5分钟后，将4-乙酰氧基氮杂环丁-2-酮(1.29g，10mM)的二氯甲烷(20ml)悬浮液加至冷却的反应混合物中，然后将其加热至室温并搅拌16小时。用5M盐酸将反应混合物酸化至pH3并分离二氯甲烷层。用二氯甲烷(3×50ml)萃取水层，并与有机层合并，用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，然后在无水硫酸镁上进行干燥。过滤该二氯甲烷溶液并蒸发，得到浅黄色固体，在硅胶60上通过柱色谱纯化该固体，用乙酸乙酯己烷混合物(1∶1)洗脱。分离出标题化合物白色固体(1.54g)。νmax(CH2Cl2)1758，1670，cm-1;δH(CDCl3)7.93(2H，m，Ar)，7.63(1H，m，Ar)，7.50(2H，m，Ar)，6.55(1H，br s，N-H)，5.41(1H，dd，J 5.3，2.5Hz，4-H)，3.55(1H，ddd，J 15.2，5.2，2Hz，3-H)和3.11(1H，ddd，J 15.3，3，2.5Hz，3-H);MS(EI)m/z207。
26b(4RS)-苯甲酰硫-1-(1-羟基-1-甲酯基甲基)-氮杂环丁-2-酮将乙醛酸甲酯(1.76g，16mM)溶于干燥的苯(80ml)中并回流同时共沸除水1小时。使溶液冷却至室温并加入4-苯甲酰硫-氮杂环丁-2-酮(1.0g，4.8mM)，随后加入3滴三乙胺。将反应混合物搅拌1小时，然后蒸发，溶于甲苯(15ml)，过滤除去三乙胺盐酸盐并再次蒸发，得到标题化合物(1∶1差向异构体混合物)，该产物不需纯化就可以在下一个步骤中使用。
26c(4RS)-苯甲酰硫-1-(1-氯-1-甲酯基甲基)-氮杂环丁-2-酮将4-苯甲酰硫-1-(1-羟基-1-甲酯基甲基)氮杂环丁-2-酮差向异构体粗混合物(1∶1)(4.8mM)溶于干燥的四氢呋喃(50ml)中，并将溶液冷却至-10℃，加入2，6-卢剔啶(0.84ml)，随后加入亚硫酰氯(0.52ml)。立即产生白色沉淀并在-10℃搅拌1小时。对反应混合物进行过滤，除去卢剔啶盐酸盐，然后蒸发溶剂，剩下黄色油，从甲苯(2×10ml)中再蒸发该黄色油，除去亚硫酰氯残余物并且不用进一步纯化就可用于下一个步骤。
26d(4RS)-苯甲酰硫-1-(1-甲酯基-1-三苯基正膦亚基甲基)-氮杂环丁-2-酮将4-苯甲酰硫-1-(1-氯-1-甲酯基甲基)氮杂环丁-2-酮(4.8mM)溶于干燥的二噁烷(30ml)中并加入三苯膦(2.52g，9.6mM)。蒸发该溶液得到一种浆体。在室温搅拌该浆体并加入2，6-卢剔啶(0.67ml，5.7mM)。持续搅拌16小时，然后用乙酸乙酯(30ml)稀释该反应混合物并过滤除去2，6-卢剔啶盐酸盐。用1N盐酸(1×10ml)、盐水(1×10ml)洗涤有机层，并在无水硫酸镁上干燥。过滤该溶液并蒸发，得到棕色固体。在硅胶60上通过柱色谱纯化该固体，用乙酸乙酯-己烷混合物(1∶1)洗脱，得到标题化合物白色泡沫(1.59g)。
26e(5RS)-2-苯基青霉烯-3-羧酸甲酯将(4RS)-苯甲酰硫-1-(1-甲酯基-1-三苯基正膦亚基甲基)-氮杂环丁-2-酮(1.59g)溶于干燥的甲苯(100ml)中，并将溶液回流4小时。使反应混合物冷却并蒸发，得到膏状固体。在硅胶60上通过柱色谱纯化该膏状固体，用乙酸乙酯-己烷混合物(1∶1)洗脱，得到标题化合物(0.515g)白色固体。νmax(CHCl2)1800，1720cm-1;
δH(CDCl2)ca，7.45(5H，m，Ar)，5.77(1H，dd，J 3.9，1.8Hz，5-H)3.85(1H，dd，J 16.4，3.8Hz，6-H)，3.72(3H，s，CO2CH3)和3.59(1H，dd，J 16.5 1.8Hz，6-H);MS m/z 261，(实测值M+261.0464 C13H11NO3S要求M+261.0464)。
实施例27 (5RS)-2-(4-甲氧苯基)青霉烯-3-羧酸甲酯按照与实施例26相似的方法制备。νmax(CH2Cl2)1798，1718，cm-1，δH(CDCl3)7.51(2H，d，J 8.8Hz，Ar)，6.99(2H，d，J 8.9Hz，Ar)，5.70(1H，dd，J 3.8，1.8Hz，5-H)，3.84(3H，s，CO2CH3)，3.83(1H，dd，J 16.1，3.8Hz，6-H)，3.54(3H，s，OCH3)和3.56(1H，dd，J 16.2，1.6Hz，6-H);MS m/z291，(实测值M+291.0568，C14H13NO4S要求M+291.0565)。
实施例28(5RS)-2-(4-氯苯基)青霉烯-3-羧酸甲酯按照与实施例26相似的方法制备。νmax(CH2Cl2)1798，1720cm-1;δH(CDCl3)7.44(2H，d，J 8.6Hz，Ar)，7.37(2H，d，J 8.6Hz，Ar)，5.77(1H，dd，J 3.8，1.6Hz，5-H)，3.87(1H，dd，J 16.4，3.8Hz，6-H)，3.73(3H，s，CO2CH3)和3.60(1H，dd，J 16.4，1.6Hz，6-H);MS m/z 295，(实测值M+295.0067，C13H10NO3ClS要求M+295.0070)。
实施例29 (5RS)-2-(4-甲酯苯基)青霉烯-3-羧酸甲酯通过与实施例26相似的方法制备。νmax(CH2Cl2)1805，1728cm-1;δH(CDCl3)8.05(2H，d，J 6.8Hz，Ar)，7.52(2H，d，J 6.8Hz，Ar)，5.80(1H，dd，J 3.8，1.7Hz 5-H)，3.93(3H，s，Ar CO2CH3)，3.89(1H，dd，J 16.5，3.9Hz，6-H)，3.70(3H，s，CO2CH3)和3.62(1H，dd，J 16.48，1.8Hz，6-H);MS m/z319，(实测值M+319.0517C15H13NO5S要求M+319.0514)。
实施例30 (5RS)-2-苄基青霉烯-3-羧酸甲酯通过与实施例26相似的方法制备。νmax(CH2Cl2)1800，1718cm-1;δH(CDCl3)ca7.28(5H，m，Ph)，5.58(1H，dd，J 3.8，1.5Hz，5-H)，4.23(1H，d，J 15.3Hz，CH2-Ph)4.13(1H，d，J 15.2Hz，CH2Ph)，3.87(3H，s，CO2CH3)3.74(1H，dd，J 16.3，3.8Hz，6-H)和3.45(1H，dd，J 16.3，1.5Hz 6-H);MS m/z 275，(实测值M+275.0618C14H13NO3S要求M+275.0616)。
实施例31 (5RS)-2-(羟甲基)青霉烯-3-羧酸苄酯通过与UK2，037，277B所述相似的方法制备该标题化合物。νmax(CH2Cl2)1798，1718cm-1;
δH(CDCl3)ca 7.38(5H，m，Ph)，5.65(1H，dd，J 3.9 1.7Hz 5-H)，5.30(1H，d，J 12.7Hz，CH2Ph)，5.24(1H，d，J 12.7Hz，CH2Ph)，4.68(1H，d，J 15.7Hz，CH2OH)，4.60(1H，d，J 16Hz，CH2OH)，3.80(1H，dd，J 16.5，3.9Hz，6-H)和3.54(1H，dd，J 16.4，1.7Hz，6-H);MS m/z291(实测值M+291.0563 C14H13NO4S要求291.0565)。
实施例32(5RS)-2-(氨基甲酰氧基甲基)青霉烯-3-羧酸苄酯将(5RS)-2-羟甲基-青霉烯-3-羧酸苄酯(57mg)溶于干燥的二氯甲烷(1ml)中，并加入异氰酸三氯乙酰酯(25μl)。在氩气下、在室温搅拌反应混合物30分钟，然后用乙酸乙酯(10ml)稀释并用饱和碳酸氢钠水溶液(5ml)，水(5ml)和盐水(5ml)洗涤。在无水硫酸镁上干燥有机层并蒸发，得到棕色油。将该油溶于甲醇(1ml)，并在加入2，6-卢剔啶(46μl)后于室温搅拌5小时。然后用乙酸乙酯(10ml)稀释该反应混合物，并用5%柠檬酸(5ml)，饱和碳酸氢钠水溶液(5ml)、水(5ml)和盐水(5ml)洗涤。在无水硫酸镁上干燥有机层并蒸发，得到一种油。通过在硅胶60上的柱色谱纯化该油，用乙酸乙酯-己烷混合物(1∶1)洗脱，得到标题化合物胶质固体(23mg)。νmax(CH2Cl2)1805，1748，1715cm-1;δH(CDCl3)ca7.5-7.25(5H，m，Ph)，5.67(1H，dd，J 3.9，1.8Hz，5-H)，5-47(1H，d，J 15.5Hz，CH2OCONH2)，5.30(1H，d，J 12.5Hz，CH2Ph)，5.14(1H，d，J 12.5Hz，CH2Ph)，5.11(1H，dd，J 15.5Hz，CH2OCONH2)，4.70(2H，br s，NH2)3.80(1H，dd，J 16.5，3.9Hz，6-H)和3.53(1H，dd，J 16.4，1.7Hz，6-H);MS(NH3C.I.)MNH4+352。
实施例33(5RS)-2-(氨基甲酰氧基甲基)青霉烯-3羧酸甲酯通过与实施例32所述相似的方法制备标题化合物。νmax(CH2Cl2)1805，1745，1718，cm-1;δH(CDCl3)5.68(1H，dd，J 3.9，1.6Hz，5-H)，5.47(1H，d，J 15.4Hz，CH2OCONH2)，5.11(1H，d，J 15.4Hz，CH2OCONH2)，4.8(2H，br.s.NH2)3.84(3H，s，CO2CH3)，3.77(1H，dd，J 16.5，3.9Hz，6-H)，和3.54(1H，dd，J 16.5，1.9Hz，6-H);MS(NH3C.I.)MNH4+276。
实施例34(5RS)-2-苯基青霉烯-3-羧酸苄酯通过与实施例26所述相似的方法制备标题化合物。νmax(CH2Cl2)1800，1718cm-1;δH(CDCl3)7.50-7.15(10H，m，Phx2)，5.77(1H，dd，J 3.8，1.7Hz，5-H)，5.17(1H，d，J 12.6Hz，CH2Ph)，5.10(1H，d，J 12.6Hz，CH3Ph)，3.84(1H，dd，J 16.4，3.9Hz，6-H)和3.59(1H，dd，J 16.4，1.8Hz，6-H);MS m/z M+337，(实测值M+337.0776，C19H15NO3S要求M+337.0773)。
实施例35(5RS)-2-(4-氯苯基)青霉烯-3-羧酸苄酯按照与实施例26所述相似的方法制备标题化合物。νmax(CH2Cl2)1800，1718cm-1;
δH(CDCl3)7.45-7.15(10H，m，2xPh)，5.77(1H，dd，J 3.8，1.7Hz，5-H)，5.15(1H，d，J 12.6Hz)，CH2Ph)，5.09(1H，d，J 12.6Hz，CH3Ph)，3.84(1H，dd，J 16.4，3.8Hz，6-H)和3.60(1H，dd，J 16.4，1.8Hz，6-H);MS m/z H+371，(实测值M+371.0383，C19H14ClNO3S要求M+371.0383)。
实施例36(5RS)-2-甲基青霉烯-3-羧酸苄酯按照与实施例26所述相似的方法制备标题化合物。νmax(CH2Cl2)1798，1720-1;
δH(CDCl3)7.5-7.3(5H，m，Ph)，5.62(1H，dd，J 3.9，1.8Hz，5-H)，5.30(1H，d，J 12.4Hz，CH2Ph)，5.22(1H，d，J 12.5Hz，CH2Ph)，3.76(1H，dd，J 16.2，3.9Hz，6-H)，3.46(1H，dd，J 16.4，1.8Hz，6-H)和2.35(3H，s CH3);MS m/z M+275，(实测值M+275.0620，C14H13NO3S要求M+275.0616)。
实施例37(5RS)-2-甲基青霉烯-亚砜-3-羧酸苄酯将(5RS)-2-甲基青霉烯-3-羧酸苄酯(27.5mg)溶于二氯甲烷(5ml)并冷却至0℃。加入间氯过苯甲酸(19mg)并在0℃搅拌反应混合物2小时。加入二氯甲烷(60ml)并用10%硫酸钠水溶液(15ml)、10%碳酸钠水溶液(15ml)和盐水(20ml)洗涤有机相，然后在无水硫酸镁上干燥。将溶液过滤并蒸发，得到标题化合物澄清油(12mg)(异构体比例5∶1)δH(CDCl3)，7.5-7.3(5H，m，Ph)，5.35(2H，s，CH2Ph)，4.97(1H，dd J 5.5，3.0Hz，5-H，少数异构体)，4.82(1H，dd，J 5.7，3.3Hz，5-H，主要异构体)，3.64(1H，dd，J 16.9，3.4Hz，6-H主要异构体)3.46(1H，dd，J 16.8，5.7Hz，6-H主要异构体)，2.57(3H，s，CH3主要异构体)和2.42(3H，s，CH3少数异构体);MS m/z M+291(实测值M+291.0566，C14H13NO4S要求291.0565)。
实施例38(5RS)-2-(甲氧基甲氧基甲基)青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯在氩气下，将醇(实施例9)(100mg，0.3mmol)、2，6-卢剔啶(320mg，3mmol)和溴甲基甲醚(375mg，3mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液回流1小时。用碳酸氢钠溶液随后是柠檬酸溶液洗涤该反应混合物，然后干燥、蒸发。在硅胶上进行色谱，用乙酸乙酯/石油混合物洗脱，得到标题化合物浅黄色无定形固体(65mg)。m.p.94-5℃(从乙酸乙酯/石油中得到的浅黄色针状物)。λmax(EtOH)261(12，400)，318(10，000)nm.νmax.(CHCl3)1795，1705，1580cm-1.δH(CDCl3)3.36(3H，s)，3.49(1H，dd，J＝2.16Hz)，3.83(1H，dd，J＝4，16Hz)，4.62(2H，s)，4.64和4.88(2H，ABq的中心，J＝16Hz);5.20和5.44(2H，ABq的中心，J＝13Hz)，5.65(1H，dd，J＝2，4Hz)，7.59(2H，d，J＝8Hz)，8.20(2H，d，J＝8Hz).(实测值C，50.26;H，4.14;N，7.14;S，8.60%.C16H16N2O7S要求C，50.52;H，4.24;N，7.37;S，8.43%)。
实施例39(5RS)-2-(4-硝基苄氧羰基氨甲基)青霉烯-3-羧酸丙酮酯按照与实施例26所述相似的方法制备标题化合物;m.p.(二噁烷/石油)180-2°;νmax.(液体石蜡)1810，1735，1700cm-1;λmax.(EtOH)317nm(ε8740);δH(d6DMSO)2.10(3H，s)，3.48(1H，dd，J 2.16Hz)，3.87(1H，dd，J 4.16Hz)，4.38(2H，d，J 6Hz)，4.83(2H，s)，5.21(2H，s)，5.70(1H，dd，J 2，4Hz)，7.60(2H，d，J 9Hz)，8.04(1H，t，J 6Hz)，8.23(2H，d，J 8Hz);m/z(实测值M+435.0736C18H17N3O8S要求M+435.0736);(实测值C，49.6;H，4.0;N，9.5%.C18H17N3O8S要求C，49.7;H，3.9;N，9.7%)。
实施例40 (5RS)-2-(4-硝基苄氧羰基氨甲基)青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯通过与实施例26所述相似的方法制备标题化合物;νmax.(CHCl3)1795，1720cm-1;m/zM+514(实测值M+514.0776.C32H18N4O9S要求514.0794)。
实施例41(5R，6S)-6-[1-(R)-羟乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯41a[(3S，4R)-3-[1-R-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)乙基)]-2-氧代-4-(三苯甲基硫)氮杂环丁-1-基]三苯基正膦亚基乙酸烯丙酯将(3S，4R)-3-[1-R-(叔丁二甲基甲硅烷氧基)乙基]-4-(三苯甲基硫)氮杂环丁-2-酮(1g)和乙醛酸烯丙酯(342mg)的苯(10ml)溶液在迪安-斯达克榻分水器上回流1小时。将混合物冷却至室温，用三乙胺(0.1ml)处理，放置1 1/2 小时并蒸发。将残余物溶于THF(18ml)，冷却至-20℃并用2，6-卢剔啶(0.47ml)和亚硫酰氯(0.234ml)处理。升至室温后，经硅藻土过滤该混合物并蒸发滤液。将残余物溶于苯(50ml)并蒸发，然后用二噁烷(1.5ml)、2，6-卢剔啶(0.47ml)和三苯膦(4g)处理，并在40℃搅拌过夜。将该混合物溶于乙酸乙酯(100ml)，用0.5N盐酸(100ml)和水洗涤、干燥并蒸发。在硅胶上对残余物进行色谱，用乙酸乙酯/己烷1∶3洗脱，得到标题化合物浅黄色泡沫(1.2g)。νmax.(CHCl3)1750，1610cm-1。
41b(5R，6S)-6-[1-R-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯将上述41a的正膦(1.2g)溶于二氯甲烷(1.5ml)/甲醇(10ml)中，然后用吡啶(0.146ml)和0.15M硝酸银的甲醇(12.1ml)溶液处理。在室温搅拌0.5小时，蒸发该溶液，并将残余物溶于氯仿(100ml)并蒸发。将残余物重复溶于二氯甲烷(17.5ml)、冰冷、然后顺序地用乙酸甲酯酐(1.1ml)、4-二甲基氨吡啶(0.17g)和三乙胺盐酸盐(1.93g)处理。强烈搅拌1/2小时后，经硅藻土过滤该混合物，滤液用乙酸乙酯(100ml)稀释，用0.5N盐酸(100ml)，水(50ml)和碳酸氢钠溶液(50ml)洗涤，干燥并蒸发。将残余物溶于小体积甲苯，在室温放置1 1/2 小时并装入二氧化硅柱。用5%然后是10%乙酸乙酯/己烷洗脱，得到标题化合物(437mg)。从己烷/戊烷中结晶得到的无色针状物，m.p.91-3℃。(实测值C，55.3，H，7.6，N3.8S，8.7%.C17H27NO4SSi要求C，55.3，H，7.4，N 3.8 S 8.7%)νmax.(KBr)1771，1705，1650，1557cm-1。
41c(5S，6S)-6-[1-R-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯将(5R，6S)-6-[1-R-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯(247mg)溶于100ml乙酸乙酯中，并放入Hanovia光化学反应器的容器中。用氩气鼓泡搅拌着的溶液2小时，然后用中压UV灯经Pyrex过滤器照射该溶液1/2小时。蒸发该溶液并在二氧化硅上对残余物进行色谱，用5%然后是8%乙酸乙酯/己烷洗脱。洗脱的第一青霉烯是标题化合物固体(112mg)。
νmax.(KBr)1796，1712，1650，1557cm-1，FAB MS(基体3-NOBA/Na)m/z 392(100%，MNa+).[α]21D-214°(c.68;CHCl3)。
41d(5S，6S)-6-[1-(R)-羟乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯用乙酸(0.036ml)，然后是1M氟化四丁铵的四氢呋喃(0.2ml)处理(5S，6S)-6-[1-R-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯(11mg)。在室温搅拌4小时，用乙酸乙酯(5ml)稀释该混合物，用水(5ml)，碳酸氢钠溶液(5ml)和水(5ml)洗脱、干燥并蒸发。在二氧化硅上对残余物进行色谱，用乙酸乙酯/己烷1∶2洗脱，得到标题化合物无色胶(6.4mg)。νmax.(CHCl3)3600，3500，1795，1710，1650，1555cm-1.δH(CDCl3)1.48(3H，d，J 6Hz)，1.83(1H，宽 s)，3.89(1H，ddd，J 10，4和7Hz)，4.2-4.5(1H，宽 m)，4.6-4.8(2H，m)，5.2-5.5(2H，m)，5.84(1H，d，J 4Hz)，5.85-6.0(1H，m)，7.31(1H，d，J 7Hz)，MS(E.I.)m/z 255(10%，M+)，170(100%)，112(80%)。
实施例42 (5SR，6RS)-6-乙基青霉烯-3-羧酸烯丙酯
42a(3RS，4SR)-3-乙基-4-三苯甲基硫-N-叔丁基二甲基甲硅烷基-氮杂环丁-2-酮在氩气下，将4-三苯甲基硫-N-叔丁基二甲基甲硅烷基-氮杂环丁-2-酮(3g)的干燥四氢呋喃(20ml)溶液滴加到冷却至-76°(浴温)的LDA(二异丙胺1ml+0.83M正丁基锂8.6ml)的四氢呋喃(15ml)溶液中。15分钟后，加入乙基碘(3ml)。0.5小时后用乙酸乙酯稀释该反应产物，随后顺序地用饱和氯化铵溶液和盐水洗涤，接着进行干燥(MgSO4)和蒸发。在SiO2上进行色谱，用正己烷/乙酸乙酯(20∶1)洗脱，得到标题化合物(3.02g)，δH(CDCl3)0.22(6H，s)，0.68(3H，t，J 7.2Hz)，0.90-1.12(11H，m)，3.04-3.12(1H，m)，3.9(1H，d，J 1.63Hz)，7.18-7.5(15H，m)。
42b(5SR，6RS)-6-乙基-青霉烯-3-羧酸烯丙酯通过标准方法(JACS 1979，101(21)，p6306-6310和实施例26b、c、d)将(3RS，4SR)-3-乙基-4-三苯甲基硫-N-叔丁基二甲基甲硅烷基-氮杂环丁-2-酮转化成正膦。除了在进行色谱前需要在乙酸乙酯中加热至40℃0.5小时对反应后处理外，最终环化与实施例24c相似。用乙酸乙酯/正己烷(1∶4)洗脱，得到标题化合物油，产率48%，νmax.(KBr)1778，1710，1648cm-1δH(CDCl3)1.08(3H，t，J 7.4Hz)，1.8-2.06(2H，m)，3.77(1H，m)，4.61-4.82(2H，m)，5.24-5.42(2H，m)，5.50(1H，d，J 1.6Hz)，5.81-6.04(1H，m)，7.24(1H，d，J 1.2Hz)(实测值M+239.0618，C11H13NO3S要求M，239.0616)。
实施例43 (5SR，6SR)-6-乙基青霉烯-3-羧酸烯丙酯将[5SR，5RS]-6-乙基-青霉烯-3-羧酸烯丙酯(0.024g)甲苯溶液加热至100℃4.5小时，此时Hplc表明顺∶反异构体混合物接近1∶1。蒸发反应物并用乙腈/水(0.47∶1)作为洗脱液进行制备Hplc，得到标题化合物蜡状固体(2.6mg)，δH(CDCl3)1.03(3H，t，J 7.37Hz)，1.8-2.14(2H，m)，3.86-3.94(1H，m)，4.66-4.82(2H，m)，5.22-5.45(2H，m)，5.83(1H，d，J 4.13)，5.83-6.04(1H，m)，7.25(1H，d，J 0.82Hz)。
实施例44 (5RS，6SR)-6-[(RS)-1-乙酰氧基乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯44a N-叔-丁基二甲基甲硅烷基-3-(1-羟乙基)-4-(三苯基甲基硫)氮杂环丁-2-酮
将N-叔丁基二甲基甲硅烷基-4-(三苯甲基硫)氮杂环丁-2-酮(3.0g;6.536mM)溶于干燥THF(75ml)并在氩气氛下冷却至-78℃。加入二异丙氨基锂溶液(1.5M在庚烷/THF/乙苯中的溶液;5.23ml;7.84mM)，并将溶液在-78℃搅拌30分钟。加入乙醛(0.438ml)的THF(5ml)溶液，并在-78℃持续搅拌30分钟。通过加入冰醋酸(2ml)使反应淬火，并且反应溶液在乙酸乙酯和水之间分配。用1N HCl、水、饱和NaHCO3溶液、盐水洗涤有机溶液，干燥(MgSO4)并蒸发。在硅胶(60g)上对残余物进行色谱，用10-25%乙酸乙酯-己烷梯度洗脱，得到标题化合物的非对映异构体混合物白色泡沫(1.15g)。
44b 3-(1-羟乙基)-4-(三苯甲基硫)氮杂环丁-2-酮
将44a制备的甲硅烷化的氮杂环丁酮的非对映异构体混合物(3.68g)溶于甲醇(100ml)中，并且在氩气氛下、在-10℃与氟化钾(0.467g)的甲醇溶液一起搅拌2小时。反应溶液在乙酸乙酯和水之间分配，用盐水洗涤有机相，干燥(MgSO4)并蒸发。
经硅胶柱色谱得到标题氮杂环丁酮非对映异构体混合物白色泡沫(2.21g)，νmax.(CH2Cl2)3600，3400，1770cm-1。
44c 3-(1-乙酰氧乙基)-4-(三苯甲基硫)氮杂环丁-2-酮
将44b制备的氮杂环丁酮(2.21gm)溶于干燥的二氯甲烷中，并在冰浴中冷却，同时搅拌。加入三乙胺(0.786ml)、4-二甲氨基吡啶(0.069g)和乙酸酐(0.642ml)并在5℃搅拌该反应溶液1.5小时。然后用1N HCl，水，饱和NaHCO3溶液盐水洗涤该溶液、干燥(MgSO4)和蒸发。进行二氧化硅胶柱色谱，得到标题氮杂环丁酮白色泡沫(1.89gm)，νmax.(CH2Cl2)3400，1780，1740cm-1。
44d [3-(1-乙酰氧乙基)-4-三苯甲基硫-2-氧代氮杂环丁-1-基]三苯基正膦亚基乙酸烯丙酯
按照实施例1的方法，让乙醛酸烯丙酯单水合物与44c制备的氮杂环丁酮非对映异构体混合物(0.092g)反应，得到标题正膦白色泡沫(0.870g)，νmax(CH2Cl2)1755，1622cm-1。
44e(5RS，6SR)-6-[(RS)-1-乙酰氧乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯
根据实施例24c所述方法，使44d制备的非对映异构正膦(0.800gm)反应，得到标题青霉烯，通过硅胶色谱纯化该产物。用10→25%乙酸乙酯-己烷梯度洗脱，得到标题化合物(5RS，6SR，8RS)异构体作为第一洗脱成份(0.036g);λmax.(EtOH)314nm(e 5754)，258nm(ε3137);νmax.(CH2Cl2)1800，1742，1722cm-1;δH(CDCl3)，1.42(3H，d，J 6.44Hz)，2.09(3H，s)，3.94(1H，dt，J 1.0，1.8，7.7Hz)，4.6-4.85(2H，m)，5.2-5.45(3H，m)，5.71(1H，d，J 1.8Hz)，5.85-6.05(1H，m)，7.26(1H，d，J 1.0Hz);(实测值m/e 297.0675.
C12H15NO5S要求M+297.0671)。
连续洗脱得到非对映异构体混合物(0.125gm)，然后纯的(5RS，6SR，8SR)异构体(0.052gm)，该异构体与实施例24c得到的异构体B相对应。
实施例45 (5S)-2-苯基青霉烯-3-羧酸甲酯如实施例23，在手性固定相对实施例26所述的外消旋甲酯进行制备hplc，得到所要的(S)-对映体[α]25D-141°。
实施例46 (5RS)-2-(乙基硫)青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯按照GB2，036，015A所述制备该化合物，得到标题化合物，m.p.131°，λmax(EtOH)263和340nm;νmax(CHCl3)1790，1690cm-1;δH(CDCl3)1.36(3H，t，J 8Hz)，2.96(2H，q，J 8Hz)，3.46(1H，dd，J 16，2Hz)，3.83(1H，dd，J 16，4Hz)，5.18和5.45(2H，ABq，J 14Hz)，5.68(1H，dd，J 4，2Hz)，7.59(2H，d，J 9Hz)，8.17(2H，d，J 9Hz)(实测值M+366.0354，C15H14N2O5S2要求366.0343)。
实施例47 (5RS)-2-(甲基硫)青霉烯-3-羧酸苄酯按照GB2，036，015A所述制备该化合物，得到标题化合物，m.p.136-137°;λmax257和339nmνmax(CH2Cl2)1795，1685cm-1;δH(CDCl3)2.50(3H，s)，3.43(1H，dd，J 16，2Hz)，3.79(1H，dd，J 4，2Hz)，7.20-7.50(5H，s)(实测值C，54.6;H，4.4;N，4.6;S，20.8%).C14H13NO3S2要求C，54.7;H，4.2;N，4.6;S，20.9%)。
实施例48 (5RS)-2-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基甲基)青霉烯-3-羧酸苄酯按照GB2，037，277B所述制备该化合物，得到标题化合物，m.p.89-89°;λmax(EtOH)265和323nm;νmax(CHCl3)1785，1700，1580cm-1;δH(CDCl3)1.04(9H，s)，3.44(1H，dd，J 2，16Hz)，5.56(1H，dd，J，2，4Hz)，7.20-7.78(15H，m)(实测值C，67.8;H，5.90;N，2.87;S，6.10%).C30H31NO4SSi要求C，68.02;H，5.90;N，2.64;S，6.05%)。
实施例49(5S，6S，8R)-2-羟甲基-6-(1-羟乙基)青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯49a(5S，6S，8R)-2-羟甲基-6-[1-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)乙基]青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯通过与实施例41c所述相似的方法对(5R，6S，8R)-2-羟甲基-6-[1-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)乙基]青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯(J.Antibiotics，1983，36，938)(1g)进行感光异构，得到标题化合物浅黄色固体(313mg)，νmax(CH2Cl2)1795cm-1;δH(CDCl3)0.13(6H，s)，0.88(9H，s)，1.45(3H，d，J 6Hz)，3.37(1H，t，J 7Hz)，3.91(1H，dd，J 10，4Hz)，4.41(1H，m)，4.66(2H，d，J 7Hz)，5.23(1H，d，J 13.7Hz)，5.49(1H，d，J 13.7Hz)，5.71(1H，d，J 4Hz)，7.62(2H，d，J 8.7Hz)和8.25(2H，d J 8.7Hz);m/zM+494。
49b(5S，6S，8R)-2-羟甲基-6-(1-羟乙基)青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯将(5S，6S，8R)-2-羟甲基-6-[1-叔-(丁基二甲基甲硅烷氧基)乙基]青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯(98.8mg)溶于干燥四氢呋喃(1ml)和乙酸(136μl)中，并加入1M氟化四丁铵的四氢呋喃(780μl)溶液。在室温搅拌反应混合物16小时。用乙酸乙酯(20ml)稀释反应混合物并用饱和碳酸氢钠水溶液(1×20ml)和盐水(1×20ml)洗涤该溶液。在无水硫酸镁上干燥有机层，过滤后进行真空蒸发，得到黄色油。在硅胶60上对该粗产物进行色谱，用乙酸乙酯/己烷(4∶1)洗脱，得到标题化合物浅黄色固体(48mg)。νmax(CH2Cl2)1792cm-1;δH(CDCl3)1.5(3H，d，J 6.2Hz)2.54(2H，brs)，3.89(1H，dd，J 10.3，4.1Hz)，4.39(1H，m)，4.64(1H，d，J 15.8Hz)，4.72(1H，d，J 15.8Hz)，5.23(1H，d，J 13.8Hz)，5.46(1H，d，J 13.7Hz)，5.73(1H，d，J 4.0Hz)，7.62(2H，d，J 8.7Hz)和8.22(2H，d，J 8.7Hz);m/z M+380。
实施例50 (5S，6S)-6-[(R)-1-乙酰氧乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯按照实施例23所述，对实施例24的外消旋酯(异构体A)进行制备手性hplc，得到标题化合物[α]24D-204°。
实施例51 (5RS)-2-(羟甲基)青霉烯-3-羧酸甲酯通过与GB2，037，277B所述相似的方法制备标题化合物。νmax(CH2Cl2)1978，1715cm-1，δ(CDCl3)3.55(1H，dd，J 16.4，1.6Hz，6-H)，3.80(1H，d，J 3.9Hz，6-H)，3.88(3H，s，CO2CH3)，4.64(2H，br s，CH2-OH)，5.69(1H，dd，J 3.9，1.6Hz，5-H).实测值M+，215.0255.C8H9NO4S要求M，215.0252。
实施例52 (5RS，6RS)和(5RS，6SR)-2-乙基硫-6-乙基青霉烯-3-羧酸4-硝基苄酯a)1-乙酰氧基丁-1-烯在120℃搅拌1-丁醛(74ml)、乙酸酐(119ml)和乙酸钾(10.1g)的混合物17小时。然后将混合物冷却，在碳酸氢钠水溶液中和并分离有机相，用无水硫酸镁干燥，得到浅黄色油，蒸馏该油得到标题化合物(7.5g)，b.p.122-4℃，νmax(膜)1755，1678cm-1。
b)(3RS，4RS)和(3RS，4SR)-4-乙酰氧基-3-乙基氮杂环丁-2-酮在室温搅拌和混合1-乙酰氧基丁-1-烯(2.28g)和异氰酸氯磺酰酯(2.83g)2.5小时。在冰浴中冷却该反应混合物，并将水与碳酸氢钠/亚硫酸钠(35∶1)的混合物加至水/二氯甲烷溶液中。分离有机相并干燥(无水硫酸镁)、过滤并真空除去溶剂。在Kieselgel-60上对粗产品进行色谱，用乙酸乙酯-石油混合物(2∶3至1∶1)洗脱，得到标题化合物异构体混合物(1.1g);νmax(CHCl3)3420，1785，1725cm-1。
c)(3RS，4RS)和(3RS，4SR)-3-乙基-4-(乙基咕吨基)氮杂环丁-2-酮5℃的(3RS，4RS)和(3RS，4SR)-4-乙酰氧基-3-乙基氮杂环丁-2-酮(1.0g)的混合物的二氯甲烷(25ml)溶液，与5℃的乙基黄原酸钾(1.15g)反应，并剧烈搅拌该混合物。15分钟后，混合物升温至室温并继续搅拌1小时。分离有机相并用二氯甲烷(3×25ml)萃取水相。合并有机层，用无水硫酸镁干燥，过滤并蒸发，得到标题化合物黄色油(1.3g);λmax(εm)301nm(14，400)，237(3，500);νmax(CHCl3)3410，1770cm-1;δH(CDCl3)1.10(3H，t，J 8Hz)，1.40(3H，t，J 8Hz)1.65-2.12(2H，m)，3.07-3.36(1H，m)，3.40(2H，q，J 8Hz)，5.36(1H，d，J 2Hz)，6.60(1H，br s).实测值M+，235.0153.C8H13NOS3要求M，235.0160]d)(5RS，6RS)和(5RS，6SR)-2-乙基硫-6-乙基青霉烯-3-羧酸4-硝基苄酯通过与实施例26所述相似的方法将上述制备的(3RS，4RS)和(3RS，4SR)-3-乙基-4-(乙基咕吨基)氮杂环丁-2-酮的混合物转化成标题化合物;νmax(CHCl3)1790，1695，1605cm-1;λmax(C2H5OH)338nm(11，300)，261(17，200);实测值M+394.0672.C17H18N2O5S2要求M394.0654)。
实施例53 (5RS，6SR)-6-[(SR)-1-乙酰氧乙基]-2-(乙基硫)青霉烯-3-羧酸4-硝基苄酯在氩气氛下，将[3-[(RS)-1-乙酰氧乙基]-4-(乙基三硫羰基)-2-氧代氮杂环丁-1-基](三苯基正膦亚基)乙酸对硝基苄酯(1.0g)(由EP0041768所述方法制备)的二甲苯(1L)溶液加热回流10小时。将反应混合物蒸发干燥并在硅胶上进行色谱，用乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱，得到标题化合物(120mg)，mp131-3℃;λmax(C2H5OH)334nm(ε11，000)和260nm(ε16，200);νmax(CHCl3)1795，1730，1695cm-1，δH(CDCl3)1.39(3H，t，J 7.4Hz)，1.54(3H，d，J 6.0Hz)，2.06(3H，s)，2.96-3.13(2H，m)，4.01(1H，dd，J 4.0和9.9Hz)，5.21和5.47(2H，ABq，J 13.7Hz重叠aq(J 7.4Hz)在5.26，以及3H)，5.75(1H，d，J 4Hz)，7.61(2H，d，J 8.7Hz)，8.22(2H，d，J 8.7Hz)，实测值M+452.0729;C，50.5;H，4.2;N，6.1;S，13.8.C19H20N2O2S2要求M 452.0712;C，50.5;H，4.4;N，6.2;S，14.2。
实施例54 N-苄基(5RS)-青霉烯-3-甲酰胺
在有10%钯-碳催化剂(30mg)存在下，将(5RS)-青霉烯-3-羧酸4-硝基苄酯[U.K Pat.Appl.2，036，015(Beecham Group)]在二噁烷(5ml)和水(1.25ml)中的溶液在大气压下氢化2小时。产物经硅藻土过滤并将碳酸钾(8mg)的水(5ml)溶液加至滤液中。0.25小时后，减压蒸发该溶液直至刚好混浊。然后用乙酸乙酯洗涤两次。用氯化钠使该钾盐水溶液饱和，然后与乙酸乙酯/四氢呋喃1∶1(10ml)一起强烈搅拌。用0.5N盐酸将该混合物酸化至pH2.0并分离有机相，干燥并蒸发。在-10至-15℃，氩气氛下，在干燥四氢呋喃(2ml)中搅拌该粗游离酸残余物并用三乙胺(18mg，24μl)处理，5分钟后用氯甲酸乙酯(19mg，17μl)处理。放置0.25小时使混合酐形成，然后加入苄胺(11mg，12μl)。在-10至-15℃搅拌该反应混合物1.5小时，然后蒸发。残余物在盐水和乙酸乙酯之间分配;分离有机相、用盐水洗涤、干燥并蒸发。用氯仿作为洗脱液在硅胶60上对残余物胶进行色谱，随后从乙酸乙酯/己烷中结晶，得到苄酰胺(11mg);m.p.85-86℃;νmax(CHCl3)3420，2900，1785，1660，1580和1515cm-1;δH(CDCl3)3.64(1H，ddd，J 16.6，2.0和1.1Hz，6-H)，3.85(1H，dd，J 16.6和3.8Hz，6-H)，4.49(1H，dd，J 15.0和5.7Hz，PhCH)，4.60(1H，dd，J 15.0和6.1Hz，PhCH)，5.82(1H，dd，J 3.8和2.0Hz，5-H)，6.78(1H，br，NH)，7.16(1H，s，2-H)，和7.20-7.40(5H，m，Ary1-H);MH+(NH3DCI)，m/z261。
实施例55 1-[(5RS)-青霉-2-烯-3-羰基]吡咯烷
采用实施例54的方法，由吡咯烷无色胶制备青霉烯酰胺;νmax(CHCl3)2970，2880，1790，1610和1545cm-1;δH(CDCl3)1.80-2.07(4H，m，吡咯烷-H′s)，3.51-3.75(4H，m，吡咯烷-H′s)3.58(1H，dt，J 16.5 & 1.8Hz，6-H)，3.81(1H，ddd，J 16.5，3.8 & 0.6Hz，6-H)，5.83(1H，dd，J 3.8 & 1.8Hz，5-H)和7.10(1H，s，2-H);[实测值M+，224(EI).C10H12N2O2S要求M，224]。
实施例56 (5RS)-N-苯基青霉-2-烯-3-甲酰胺(carboxamide)在有10%钯-碳催化剂(50mg)存在下，将(5RS)-青霉烯-3-羧酸4-硝基苄酯(50mg)在二噁烷(10ml)和水(2.5ml)中的溶液在大气压下氢化2小时。产物经硅藻土过滤并将碳酸钾(14mg)的水(5ml)溶液加入滤液。0.25小时后，减压蒸发该溶液直至刚好混浊，然后用乙酸乙酯洗涤两次。用氯化钠使该钾盐水溶液饱和，然后与乙酸乙酯/四氢呋喃1∶1(20ml)一起强烈搅拌。用0.5N盐酸将该混合物酸化至pH2.0并分离有机相、干燥并蒸发。在-15℃、氩气氛下，在干燥THF(2ml)中的搅拌粗酸溶液，加入三乙胺(27μl)，5分钟后加入二苯基膦酰氯(40μl)。放置15分钟使混合酸酐形成，然后加入苯胺(18μl)和三乙胺(27μl)。2小时内使反应混合物热至室温，然后对其进行蒸发干燥。残余物在乙酸乙酯和盐水之间分配;分离有机相，用盐水洗涤、然后在硫酸钠上面干燥并蒸发得到一种胶，用乙酸乙酯/己烷(3∶7)作为洗脱液在硅胶60上对该胶进行色谱，得到青霉烯酰胺(9mg，23%);m.p.139-141℃(乙酸乙酯/己烷);νmax(CHCl3)3420，1790，1675，1605，1575，1530和1500cm-1;δH(CDCl3)3.73(1H，ddd，J 16.4，2.0 & 1.1Hz，6-H)，3.93(1H，dd，J 16.4 & 3.8Hz，6-H)，5.91(1H，dd，J 3.8 & 2.0Hz，5-H)，7.13(1H，t，J 7.8Hz，Ar-H)，7.24(1H，s，2-H)，7.34(2H，t，J 7.8Hz，Ar-H)和7.57(2H，d，J 7.8Hz，Ar-H).[实测值C，57.8;H，4.1;N，11.1%;M+246.0462(EI).C12H10N2O2S要求C，58.5;H，4.1;N，11.4%;M 246.0463]。
实施例57 (5RS)-N-苄基-N-甲基青霉-2-烯-3-甲酰胺采用实施例56的方法，以22%的产率，由N-甲基苄胺制备青霉烯酰胺无色胶;νmax(CHCl3)3000，1795，1625和1550cm-1;δH(CDCl3)3.02(3H，s，NCH3)，3.58(1H，d，J 16.4Hz，6-H)，3.81(1H，dd，J 16.4 & 3.7Hz，6-H)，4.70(2H，s，PhCH2)，5.80(1H，br s，5-H)和7.20-7.45(6H，m，2-H和Ar-Hs).[实测值M+，274(NH3DCI).C14H14N2O2S要求M，274]。
实施例58 (5RS)-N，N-二乙基青霉-2-烯-3-甲酰胺采用实施例56的方法，用二乙胺制备青霉烯酰二乙胺(24%)无色胶;νmax(CHCl3)3000，2950，1800，1620和1550cm-1;δH(CDCl3)1.19(6H，t，J 7.1Hz，NCH2CH3)，3.46(4H，d，J 7.1Hz，NCH2CH3)，3.58(1H，ddd，J 16.0，2.0 & 1.2Hz，6-H)，3.82(1H，ddd，J 16.6，3.9 & 0.6Hz，6-H)，5.82(1H，dd，J，3.9 & 2.0Hz，5-H)和6.82(1H，s，2-H).[实测值M+，226(EI).C10H14N2O2S要求M，226]。
实施例59 (5RS)-N-(4-甲氧苯基)青霉-2-烯-3-甲酰胺采用实施例56的方法，用茴香胺生产青霉烯酰胺，产率49%;m.p.129-132℃(乙酸乙酯/己烷);νmax(CHCl3)3420，3010，2960，2940，2850，1785，1670，1600，1575和1515cm-1;δH(CDCl3)3.71(1H，ddd，J 16.9，1.9 & 1.1Hz，6-H)，3.80(3H，s，OCH3)，3.91(1H，ddd，J 16.9，3.9 & 0.6Hz，6-H)，5.90(1H，dd，J 3.9 & 1.9Hz，5-H)，6.87(2H，d，J 9.0Hz，Ar-H)，7.21(1H，s，2-H)，7.48(1H，d，J 9.0Hz，Ar-H)和8.21(1H，br s，NH).[实测值C，56.7;H，4.4;N，10.6%;M+，276(EI).C13H12N2O3S要求C，56.5;H，4.4;N，10.2%;M，276]。
实施例60 N-[(5RS)-青霉-2-烯-3-羰基]吗啉采用实施例56的方法，由吗啉制备青霉烯酰胺无色胶;νmax(CHCl3)3000，2980，2940，2870，1795，1620和1550cm-1;δH(CDCl3)3.61(1H，dt，J 15.9 & 2.0Hz，6-H)，3.60-3.85(8H，m，吗啉-H′s)，3.84(1H，dd，J 15.9 & 3.9Hz，6-H)，5.83(1H，dd，J 3.9 & 2.0Hz，5-H)和6.97(1H，s，2-H).[实测值M+，240(EI).C10H12N2O3S要求M，240]。
实施例61 (5RS)-N-(吡啶-3-基甲基)青霉-2-烯-3-甲酰胺采用实施例56的方法，由3-吡啶甲胺制备青霉烯酰胺无色固体(30%);m.p.146℃(分解);νmax(CHCl3)3430，3000，1790，1665，1580和1520cm-1;δH(CDCl3)3.66(1H，ddd，J 16.8，2.0 & 0.8Hz，6-H)，3.86(1H，dd，J 16.8 & 3.8Hz，6-H)，4.52和4.61(2H，2dd，J 17.0 & 5.9Hz，NCH2)，5.84(1H，dd，J 3.8 & 2.0Hz，5-H)，6.88(1H，v，br，NH)，7.18(1H，s，2-H)，7.29(1H，dd，J 8.0 & 4.6Hz，pyr 5-H)，7.70(1H，br d，J 8.0Hz，pyr 4-H)，8.53(1H，d，J 4.6Hz，pyr 6-H)和8.58(1H，d，J 1.0Hz，pyr 2-H).[实测值C，55.4;H，4.0;N，15.7%;M+，261.0571].C12H11N3O2S要求C，55.2;H，4.2;N，16.1%;M，261.0572]。
实施例62 3-[(5RS)青霉-2-烯-3-羰基氨基]丙酸甲酯采用实施例56的方法，用β-氨基丙酸甲酯(通过由其盐酸盐与三乙胺的四氢呋喃溶液一起搅拌1小时制备)制备标题酰胺无色胶，产率37%;νmax(CHCl3)3440，3000，2960，1795，1740，1665，1580和1520cm-1;δH(CDCl3)2.60(2H，t，J 6.1Hz，CH2CO)，3.62(2H，q，J 6.1Hz，CH2N)，3.63(1H，d，J 16.6Hz精细的偶合，6-H)，3.72(3H，s，OCH3)，3.86(1H，dd，J 16.6 & 3.9Hz，6-H)，5.82(1H，dd，J 3.9 & 2.0Hz，5-H)，6.90(1H，br，NH)和7.11(1H，s，2-H).实测值M+256.0517.C10H12N2O4S要求256.0518。
实施例63 (5RS)-N-叔丁基青霉-2-烯-3-甲酰胺采用实施例56的方法，由叔丁胺制备青霉烯叔丁酰胺，产率19%;m.p.116-119℃;νmax(CHCl3)3420，2980，1780，1660，1580和1520cm-1;δH(CDCl3)1.40(9H，s，t-丁基)，3.63(1H，d，J 16.6Hz精细的偶合，6-H)，3.83(1H，dd，J 16.6 & 3.8Hz，6-H)，5.82(1H，dd，J 3.8 & 2.0Hz，5-H)，6.37(1H，brs，NH)和7.02(1H，s，2-H).实测值C，52.5;H，6.3;N，12.2%.C10H14N2O2S要求C，53.1;H，6.3;N，12.4%。
实施例64 (5RS)-2-苄基青霉烯-3-羧酸苄酯采用与实施例26相似的方法制备标题化合物。δH(CDCl3)3.43(1H，dd，J 16.4 & 1.6Hz，6-H)，3.73(1H，dd，J 16.4 & 3.9Hz，6-H)，4.11 & 4.22(2H，ABq，J 15.3Hz，2-CH2)，5.25 & 5.35(2H，ABq，J 12.5Hz，OCH2)，5.57(1H，dd，J 3.9 & 1.6Hz，5-H)，7.20-7.47(10H，m，Ar-Hs).实测值M+，351.0921.C20H17NO3S要求M，351.0929。
实施例65 (5S，6S)-6-[(R)-1-(氨基甲酰氧基)乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯将(5S，6S)-6-[(R)-1-羟乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯(100mg)溶于乙酸乙酯(0.3ml)和异氰酸三氯乙酰酯(0.3ml)中并放置5小时。用乙酸乙酯(20ml)稀释该混合物，并用碳酸氢钠溶液洗涤、干燥并蒸发。将残余物的氯仿溶液装入二氧化硅柱，用乙酸乙酯/己烷1∶1慢慢洗脱，得到标题化合物固体(95mg)。从乙酸乙酯/己烷中结晶得到无色针状物，m.p.161-3℃;[α]21D-290°(c 0.7;CHCl3);νmax(KBr)3439，3357，3291，3211，1776，1717，1661，1620，1553cm-1;δH(CDCl3)1.54(3H，m，J 6.3Hz)，4.06(1H，dd，J 9.8 & 3.6Hz)，4.60(2H，宽s)，4.6-4.8(2H，m)，5.1-5.4(3H，m)，5.83(1J，d，J 4Hz)，5.8-6.1(1H，m)，7.32(1H，d，J 0.8Hz);λmax(C2H5OH)254nm(ε2856)，312nm(ε7788);m/z(FAB，基质 3-NOBA/Na)321(MNa+，65%)。
实施例66 (5S，6S)-6-[(R)-1-苯甲酸乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯将(5S，6S)-6-[(R)-1-羟乙基)青霉烯-3-羧酸烯丙酯(100mg)溶于二氯甲烷(5ml)中，搅拌并冰冷。用三乙胺(0.42ml)、4-二甲氨基吡啶(催化量)和苯甲酰氯(0.33ml)处理该溶液并在室温搅拌2小时。用乙酸乙酯(50ml)稀释该产物，并用0.5N HCl(50ml)、水和NaHCO3溶液洗涤，干燥并蒸发。在二氧化硅对残余物进行色谱，用乙酸乙酯/己烷混合物洗脱，得到标题化合物(83mg)。从乙酸乙酯/己烷中结晶得到无色针状物m.p.146-8℃;[α]22D-283°(c 0.5;CHCl3);νmax(KBr)1791，1702，1649，1554cm-1;δH(CDCl3)1.67(3H，d，J 6.3Hz)，4.23(1H，dd，J 9.8 & 4Hz)，4.6-4.8(2H，m)，5.2-5.5(2H，m)，5.5-5.7(1H，m)，5.91(1H，d，J 4Hz)，5.9-6.1(1H，m)，7.33(1H，s)，7.4-7.7(3H，m)，7.9-8.1(2H，m);λmax(C2H5OH)229nm(ε14975)，313nm(ε7150).实测值C，60.2;H，4.7;N，4.0;S，8.7%C18H17NO5S要求C，60.2;H，4.8;N，3.9;S，8.9%。
实施例67(5S，6S)-6-[(R)-1-甲氧乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯将(5S，6S)-6-[(R)-1-羟乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯(50mg)溶于硝基甲烷(2ml)中，冰冷，强烈搅拌并用无水、粉末状的碳酸钠(375mg)和氟碘酸三甲氧鎓(250mg)处理。5小时后，混合物经硅藻土过滤，用二氯甲烷(20ml)稀释，用NaHCO3溶液洗涤，干燥并蒸发。在二氧化硅上对残余物进行色谱，用乙酸乙酯/己烷混合物洗脱，得到标题化合物无色胶(9mg)。[α]21D-210°(c 0.9;CHCl3);νmax(CHCl3)1790，1710，1650，1555cm-1;δH(CDCl3)1.40(3H，d，J 5.6Hz)，3.32(3H，s)，3.7-4.0(2H，m)，4.6-4.9(2H，m)，5.2-5.5(2H，m)，5.81(1H，d，J 3.7Hz)，5.85-6.05(1H，m)，7.32(1H，s);λmax(C2H5OH)253nm(ε2693)，314nm(ε6520).m/z(E.I.)269(M+，10%);m/z(NH3CI.)270(MH+，80%)，287(MNH+4，100%)。
实施例68 (5S，6S)-6-[(R)-1-[(N-(苄氧羰基)-(S)-丙氨酰)氧基]乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯将(5S，6S)-6-[(R)-1-羟乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯(50mg)，N-(苄氧羰基)-L-丙氨酸(180mg)和4-二甲氨基吡啶(24mg)溶于二氯甲烷(1ml)中，冷却至-15℃并用二环己基碳二亚胺(165mg)处理。将混合物搅拌0.5小时，用乙酸乙酯(20ml)稀释，用0.5N HCl、水和NaHCO3溶液洗涤、干燥并蒸发。在二氧化硅上对残余物进行色谱，用乙酸乙酯/己烷1∶3洗脱。蒸发含有产物的部分，将残余物溶于乙酸乙酯/己烷1∶3(3ml)中，然后过滤除去固体副产物。蒸发滤液得到标题化合物无色胶(54mg)。νmax(CHCl3)3420，1790，1715，1650，1560，1510cm-1;δH(CDCl3)1.40(3H，d，J 7.2Hz)，1.50(3H，d，J 6.2Hz)，4.06(1H，dd，J 10.1 & 3.8Hz)，4.28(1H，五重峰，J 7.2Hz)，4.6-4.8(2H，m)，5.11(2H，s)，5.15-5.45(4H，m)，5.78(1H，d，J 3.8Hz)，5.8-6.1(1H，m)，7.29(1H，s)，7.35(5H，s);m/z(FAB，基质3-NOBA/Na)483(MNa+，55%)。
实施例化合物描述于以下文献中GB2037277 实施例9、31、48J.Chem.Soc.Chem.Commun 1988，544-实施例2ZA8504947-实施例36GB2036015-实施例4，5，46，47US4282236-实施例31在这些文献中没有公开这些化合物的抗菌活性。
生物活性细菌引导肽酶1的抑制作用说明引导肽酶1(CP1)分裂基于与麦芽糖预结合蛋白(pre-MBP)的九肽(H-Phe-Ser-Ala-Ser-Ala-Leu-Ala-Lys-Ile-NH2)成为七肽(H-Phe-Ser-Ala-Ser-Ala-Leu-Ala-O-)和二肽残基(Ⅰ)。通过反相梯度HPLC检测九肽底物和七肽分裂产物。用LP1抑制剂终止或减慢基于pre-MBP的肽的分裂。
分析用HPLC级H2O制备所有溶液。按顺序混合下列成份<
>＊当使用除水之外的溶剂溶解该化合物时，将与试验样品中相同体积的溶剂加至对照肽或对照分析中。
＊对两份完全相同的该实验化合物样品进行分析，以测定平均活性减少。
＊从带有质粒pRD8(2)的菌株制备细菌引导肽酶，并按照Wolf等人1982(3)的方法进行分离。
在37℃将样品预热5分钟。
向每份样品中加入在50mM三乙醇胺(pH8.0)中的5μl 1mM底物肽、1mM EDTA，1%tritonX-100(终体积＝20μl)。
在37℃水浴中保温样品2小时。
将样品离心3秒钟后，向每份样品中加入20μl0.1%TFA以终止反应。
将样品离心5分钟。尽管可以将样品在分析前置于-20℃保藏，但是优选立即在HPLC上对该样品进行分析。
HPLC分析按如下条件建立HPLC柱 Beckman 5μm C18 0.2×15cm溶剂 A＝H2O/0.1%TFAB＝CH3CN/0.08%TFA吸光度 215nm流速 0.2ml/分钟梯度 15%B平衡15%-20%B在起始时20%-46%B13分钟46%-90%B0.1分钟注射 10μl
结果该化合物的活性以LP1活性减少的平均%表示。当产物峰面积的减少与底物峰面积的增加相对应时，以相对于对照的产物峰面积的减少计算该数值。
采用此方法，测得青霉烯-3-羧酸苄酯的两个对映体和外消旋物(实施例1、3和4)的结果如下
因此结论是，由外消旋物观察到的LP1抑制特性是由5S异构体引起的。
(1)Dev，I.K.P.H.Ray & P.Novak(J.Biological Chemistry 1990，265，(33)，p 20069).
(2)Dalbey，R.E.& W.Wickner(J.Biological Chemistry 1985，260 p 15925
(3)Wolfe，P.B.，P.Silver & W.Wickner(J.Biological Chemistry 1982，257 p 7898).
质粒pRD8由Prof.W.Wickner-UCLA得到。
测示实施例化合物的抗引导肽酶(Ⅰ)抑制作用。测示结果列于下表
权利要求
1.通式(Ⅰ)5S青霉烯化合物的应用
其中n是0或1，R2是氢或取代基，R3是酯或酰胺形成基团，R1是氢或通过碳连接的有机基团并且其中5S异构体形式(作为细菌酶引导肽酶1的抑制剂)的-COR3基团对于体内水解基本稳定。
2.按照权利要求1的应用，其中R2是氢或通过碳、氧或硫原子连到青霉烯环2-位上的有机基团。
3.按照权利要求2的应用，其中R2是氢、羟甲基、羟乙基硫、苯基或氨基羰基氧甲基。
4.按照权利要求1至3任何之一的应用，其中R3是芳氧基或任选取代的(C1-10)烷氧基，所说的任选取代基可以是卤素或选自(C1-6)烷基羰基，(C1-6)烷氧羰基、(C1-10)烷氧基取代的(C1-10)烷氧基、芳基或杂环基的有机基团。
5.按照权利要求4的应用，其中R3是苄氧基、对硝基苄氧基、对甲氧基苄氧基、2，2，2-三氯乙氧基、甲氧基、对(甲氧羰基)苄氧基或烯丙基氧。
6.按照权利要求1至3任意之一的应用，其中R3是NR52，其中每个R5可以相同或不同并且独立地择自氢、芳基或任选取代的(C1-6)烷基、两个R5部分还可以是含氮杂环的残基，或者NR52是氨基酸残基。
7.按照权利要求6的应用，其中R3是吡咯烷基。
8.按照任何上述权利要求的应用，其中R1是氢或选自任意取代的(C1-6)烷基，任选取代的(C1-6)链烯基和C1-6链烷酰基的取代基。
9.按照权利要求8的应用，其中R1是在1-位通过借助于氧连接的取代基取代的C1-4烷基。
10.按照权利要求9的应用，其中R1是羟基、(C1-5)烷氧基、氨基羰氧基、苯甲酸基、或任选取代的(C1-6)链烷酰氧基。
11.按照权利要求10的应用，其中R1是氢、1-乙酰氧基或1-羟乙基。
12.按照权利要求9至11之一的应用，其中在1-位上的碳原子是手性的，其立体化学式如下
13.权利要求1所定义的式(Ⅰ)化合物的应用，是药剂制造，该药剂通过细菌酶引导肽酶1的抑制机理用于治疗细菌感染。
14.通过细菌酶引导肽酶1的抑制机理治疗哺乳动物细菌感染的方法，该方法包括对需要该治疗的哺乳动物施用有效量的在权利要求1中定义的式(Ⅰ)化合物。
15.一种药物组合物，该组合物包括在权利要求1中定义的式(Ⅰ)化合物，其中当R3是氨基或二低级烷基氨基时R2不是S-连接的有机基团，并且其中化合物不是(5RS)-2-甲基青霉烯-3-羧酸苄酯，及可药用载体。
16.在权利要求1中定义的，用作活性治疗物质的式(Ⅰ)化合物，其中当R3是氨基或二低级烷基氨基时R2不是S-连接的有机基团，并且其中化合物不是(5RS)-2-甲基青霉烯-3-羧酸苄酯。
17.在权利要求1中定义的式(Ⅰ)化合物，该化合物是酰胺，其中当R3是氨基或二-低级烷基氨基时R2是非S-连接的有机基团。
18.在权利要求1中定义的式(Ⅰ)化合物选自(5S)-青霉烯-3-羧酸苄酯(5RS)-青霉烯-3-羧酸对甲氧基苄酯(5RS)-青霉烯-3-羧酸三氯乙酯(5RS)-青霉烯-3-羧酸烯丙酯(5S)-青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯(5S)-青霉烯-3-羧酸甲酯(5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸4-(甲酯基)苄酯(5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸4-[(4-硝基苄基)氧基羰基]苄酯4-[[(5RS)-青霉-2-烯-3-羰基]氧甲基]苯甲酸钠(5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸正戊酯(5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸4-苯基丁酯(5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸3-(甲酯基)苄酯(5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸2-(2-甲氧基乙氧基)乙酯(5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸4-溴苄酯(5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸(7-甲氧基-2-氧代-2H-1-苯并吡喃-4-基)甲酯(5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸甲氧基甲酯(5S)-青霉-2-烯-3-羧酸甲氧基甲酯(5RS)-6-(1-乙酰氧乙基)青霉烯-3-羧酸烯丙酯(5RS，6RS)-6-[(SR)-1-乙酰氧乙基]-2-(2-羟基乙基硫)青霉烯-3-羧酸对硝酸苄酯(5RS)-2-苯基青霉烯-3-羧酸甲酯(5RS)-2-(4-甲氧苯基)青霉烯-3-羧酸甲酯(5RS)-2-(4-氯苯基)青霉烯-3-羧酸甲酯(5RS)-2-(4-甲酯基苯基)青霉烯-3-羧酸甲酯(5RS)-2-苄基青霉烯-3-羧酸甲酯(5RS)-2-(氨基甲酰氧基甲基)青霉烯-3-羧酸苄酯(5RS)-2-(氨基甲酰氧基甲基)青霉烯-3-羧酸甲酯(5RS)-2-苯基青霉烯-3-羧酸苄酯(5RS)-2-(4-氯苯基)青霉烯-3-羧酸苄酯(5RS)-2-甲基青霉烯-亚砜-3-羧酸苄酯(5RS)-2-(甲氧基甲氧基甲基)青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯(5RS)-2-(4-硝基苄基氧基羰基氨甲基)青霉烯-3-羧酸丙酮酯(5RS)-2-(4-硝基苄基氧基羰基氨甲基)青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯(5S，6S)-6-[1-(R)-羟乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯(5SR，6RS)-6-乙基青霉烯-3-羧酸烯丙酯(5RS，6SR)-6-乙基青霉烯-3-羧酸烯丙酯(5RS，6SR)-6-[(RS)-1-乙酰氧基乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯(5S)-2-苯基青霉烯-3-羧酸甲酯(5S，6S，8R)-2-羟甲基-6-(1-羟乙基)青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯(5S，6S)-6-[(R)-1-乙酰氧基乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯(5RS)-2-(羟甲基)青霉烯-3-羧酸甲酯(5RS，6RS)和(6RS，6SR)-2-乙基硫-6-乙基青霉烯-3-羧酸4-硝基苄酯(5RS，6SR)-6-[(SR)-1-乙酰氧基乙基]-2-(乙基硫)青霉烯-3-羧酸4-硝基苄酯N-苄基(5RS)-青霉烯-3-甲酰胺1-[(5RS)-青霉-2-烯-3-羰基]吡咯烷(5RS)-N-苯基青霉-2-烯-3-甲酰胺(5RS)-N-苄基-N-甲基青霉-2-烯-3-甲酰胺(5RS)-N，N-二乙基青霉-2-烯-3-甲酰胺(5RS)-N-(4-甲氧苯基)青霉-2-烯-3-甲酰胺N-[(5RS)-青霉-2-烯-3-羰基]吗啉(5RS)-N-(吡啶-3-基甲基)青霉-2-烯-3-甲酰胺3-[(5RS)-青霉-2-烯-3-羰基氨基]丙酸甲酯(5RS)-N-叔丁基青霉-2-烯-3-甲酰胺(5RS)-2-苄基青霉烯-3-羧酸苄酯(5S，6S)-6-[(R)-1-(氨基甲酰基氧基)乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯(5S，6S)-6-[(R)-1-苯甲酰氧基乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯(5S，6S)-6-[(R)-1-甲氧基乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯(5S，6S)-6-[(R)-1-[(N-(苄氧基羰基)-(S)-丙氨酰)氧基乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯
19.按照权利要求1的应用，其中式(Ⅰ)化合物按权利要求18定义或选自(5RS)-青霉烯-3-羧酸甲酯(5RS)-青霉烯-3-羧酸苄酯(5RS)-青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯(5RS)-2-(羟甲基)青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯(5RS)-2-(羟甲基)青霉烯-3-羧酸苄酯(5RS)-2-甲基青霉烯-3-羧酸苄酯(5RS)-2-(乙基硫)青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯(5RS)-2-(甲基硫)青霉烯-3-羧酸苄酯(5RS)-2-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基甲基)青霉烯-3-羧酸苄酯
20.制备权利要求1的式(Ⅰ)新化合物的方法，该方法包括式(Ⅱ)化合物的环化作用
其中R21是R2或者是可以被转化成R2或被R2替代的取代基，R31是R3或者可以被转化成R3或被R3替代的取代基，R11是R1或可转化成R1的基团，其中R2，R3和R1定义如式(Ⅰ)，R81是有机基团。
全文摘要
通式(I)5S青霉烯化合物的应用其中n是0或1，R是氢或取代基，R
文档编号C07D499/88GK1095721SQ93116820
公开日1994年11月30日 申请日期1993年7月27日 优先权日1992年7月29日
发明者R·索思盖特, S·考尔顿, T·C·施梅尔, A·E·阿尔索, S·D·麦克里思 申请人:史密丝克莱恩比彻姆有限公司
技术领域：
本发明涉及新的青霉烯化合物，使用该物质治疗细菌感染，以及含有该物质的新配方。
青霉烯是由酸核衍生的一类已知化合物
其中还标明了本文所用的编码系统。该核可以两种同分异构形式存在。5R异构体(即在5-位具有以下构型)
已知具有抗菌活性(由于与青霉素结合蛋白(PBP′s)的相互作用)。该活性通常限于游离酸或阴离子，所以这些青霉烯一般以羧酸阴离子盐的形式或作为可体内水解的酯用于抗菌治疗。5S异构体(在5-位具有以下构型)
一般无抗菌活性(因为与PBP′s无相互作用)。根据H.R.Pfaendler等人，J.Am.Chem.Soc.1979，101(21)p6306-6310，例如由母核酸和丙酮基酯制备5S青霉烯是已知的。
GB2036015，GB2037277，GB2013674，EP0399228，US4282236，GB1604751，ZA8504947和J.Chem.Soc.Chem.Comm.1988，544描述了某些青霉烯-3-羧基酯衍生物，但它们不具有抗菌活性。
GB2042520公开了某些2-(乙基硫)青霉烯-3-甲酰胺(carboxamide)衍生物。
尽管青霉烯的5R和5S对映体的外消旋和其它混合物是已知的，但是，由于总的来说该5S异构体没有抗菌活性，因此几乎没有人试尝分离纯的青霉烯5S异构体。
现在已经发现，某些青霉烯酯5S异构体抑制细菌酶引导肽酶1，因此在治疗细菌感染方面具有潜在的用途。该化合物可以以相对于外消旋混合物的异构富集态制备。
因此，本发明提供了通式(Ⅰ)5S青霉烯化合物的应用
其中n是0或1，R2是氢或取代基，R3是酯-或酰胺形成基团，R1是氢或通过碳连接的有机基团，并且其中5S异构体形式(作为细菌酶引导肽酶1抑制剂)的-COR3基团对于体内水解基本稳定。
本发明还提供一种药物组合物，特别是用于治疗细菌感染(特别是通过细菌酶引导肽酶1抑制机理)，该药物组合物含有式(Ⅰ)化合物和可药用载体。
本发明还提供了一种用作活性治疗物质，特别是用于治疗细菌感染，尤其是通过细菌引导肽酶1抑制机理的式(Ⅰ)化合物。
本发明还提供了在制造用于治疗细菌感染(尤其是通过细菌酶引导肽酶1抑制机理)的药物中的式(Ⅰ)化合物的应用。
本发明还提供了治疗哺乳动物细菌感染(特别是通过细菌酶引导肽酶1抑制机理)的方法，该方法包括对需要这种治疗的哺乳动物施用有效量的式(Ⅰ)化合物。
本文所用的术语“芳基”包括苯基和萘基时，各芳基任选地用5个以下，优选3个以下选自下述的基团取代，所说的基团为卤素、巯基、(C1-6)烷基、苯基、(C1-6)烷氧基、羟基(C1-6)烷基、巯基(C1-6)烷基、卤代(C1-6)烷基、羟基、氨基、季铵、硝基、羧基、(C1-6)烷基羰基氧、(C1-6)烷氧羰基、羧酸、甲酰、(C1-6)烷基羰基和磷酸基。‘芳烷基’包括苯基C1-6烷基和萘基C1-6烷基，每个芳基基团任选地按照如上所述被取代。
本文中所用的术语‘杂环基’和‘杂环’包括在各环上适当地含有4个以下杂原子的芳族和非芳族、单和稠合环，这些杂原子选自氧、氮和硫，该环可以被，例如3个以下的选自下述基团的基团取代或未取代，这些基团为卤素、(C1-6)烷基、(C1-6)烷氧基、卤代(C1-6)烷基、羟基、羧基、羧基盐(carboxy salts)、羧基酯(carboxy esters)如(C1-6)烷氧羰基或(C1-6)烷氧羰基(C1-6)烷基、芳基及氧代基团。每个杂环可以含有4至7个，优选5或6个环原子。术语‘杂芳基’是指可以在每个环上含有5或6个环原子的杂芳族杂环或环状系统。稠和的杂环系统可以包括碳环并且需要包括唯一的杂环。根据杂环基团的性质，含有杂环基团的本发明化合物可以有两个或多个互变异构形式。所有这些互变异构形式均包括在本发明范围内。
本文所用的术语‘烷基’、‘链烯基’、‘炔基’、和‘烷氧基’包括含有1至6个碳原子的直链和支链基团，如甲基、乙基、丙基和丁基。一个具体烷基是甲基。
本文所用的术语“卤素”是指氟、氯、溴和碘。
式(Ⅰ)化合物中的R2可以是氢。
当R2不是氢时，它可以是通过碳、氧或硫原子连接在青霉烯环2-位上的有机基因。例如，R2可以是R4，CO2R4，OR4，SR4或SOR4，其中各个R4可以相同或不同并且可以是氢或者非取代或优选取代的烷基，或者芳基或杂环基。
例如，当R4代表取代的烷基时，烷基上的适当的取代基包括羟基、(C1-5)烷氧基、(C1-4)烷氧基(C1-4)烷氧基、氨基羰基氧、卤素、巯基、(C1-6)烷硫基、芳基、芳硫基、芳氧基、杂环基、杂环硫基、氨基、(单-或双-)-(C1-6)烷氨基，酰氨基或酰氧基，其中酰基可以是芳族或脂族的，例如(C1-6)烷酰基、(C1-6)烷氧羰基、任选取代的苯甲酰基或者任选取代的苯氧羰基、羧基、(C1-6)烷氧羰基、叠氮基和烷基或芳基取代的甲硅烷氧基。
除氢以外的R2取代基的适合的例子包括甲基、羟甲基、羟乙硫基、苯基、4-氯苯基、4-甲氧苯基、4-甲氧羰基苯基、氨基羰基氧甲基、对硝基苄氧羰基氨基甲基、乙硫基、甲硫基、叔-丁基二苯基甲硅烷氧基甲基和苄基。
R2优选是氢、羟甲基、羟乙硫基、苯基、或氨基羰基氧甲基。
COR3优选能抗体内水解。
当R3是酯形成基团时，它可以适当地选自那些已知对体内代谢降解基本上稳定的任何基团。
R3可以是芳氧基。此外，R3也可以是任选取代的(C1-10)烷氧基，其中任选的取代基可以是卤素、或有机基团，例如(C1-6)烷基羰基、(C1-6)烷氧羰基、(C1-10)烷氧取代的(C1-10)烷氧基、芳基或杂环基。该烷氧基R3一般可以被1或2个这些取代基在烷基链(如果该链含有一个以上碳原子)的末端位置取代。
在R3取代的烷氧基链上的任选的芳基取代基的例子包括苯基和取代的苯基，其中该取代基可以选自卤素、羧酸、羧基酯、氨基、季铵、烷氧基、羟基或磷酸。在R3取代的烷基链上的杂环取代基的实例包括任选取代的嘧啶基、苯并吡喃基和呋喃基。
该R3基团的实例包括甲氧基，苄氧基、对-甲氧基苄氧基、2，2，2-三氯乙氧基、对-硝基苯氧基、丙酮氧基苄氧基、间-和对-(甲氧羰基)苄氧基、苯甲酰基甲氧基、对-硝基苄氧基、4-吡啶基甲氧基、2，2，2-三氯乙氧基、2，2，2-三溴乙氧基、叔-丁基氧基、戊氧基、叔-戊基氧基，烯丙氧基、二苯基甲氧基、三苯基甲氧基、金刚烷基氧、2-苄氧基苯氧基、4-甲硫基苯氧基、四氢呋喃-2-基氧基、四氢吡喃-2-基氧基、五氯苯氧基、丙酮氧基、对-甲苯磺酰基乙氧基、甲氧基甲基氧、4-(4-硝基苄氧基羰基)-苄氧基、4-羧基苄氧基及其盐、4-苯基丁氧基、2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基、4-溴苄氧基和(7-甲氧基-2-氧代-2H-1-苯并吡喃-4-基)甲氧基。
R3优选是苄氧基、对-硝基苄氧基、对-甲氧基苄氧基、2，2，2-三氯乙氧基、甲氧基、对-(甲氧羰基)苄氧基或烯丙氧基。
当R3是酰胺形成基团时，它可以是NR52，其中每个R5可以相同或不同并且独立地择自氢、芳基如任选取代的苯基或任选取代的(C1-6)烷基、其中(C1-6)烷基上的任选取代基可选自与烷基R4上的取代可以选择的取代基相同的取代基。此外，两个R5部分还可以是按照上述定义含氮杂环的残基。NR52还可是氨基酸残基、例如天然的α-氨基酸如甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、蛋氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、脯氨酸、羟基脯氨酸、组氨酸或色氨酸，其中氨基酸的氨基与青霉烯环系统3-位上的羰基连接形成酰胺键。
一个适合的R5可以是氢，其它的可以是任选取代的烷基，如芳基取代的烷基如苄基。
这些酰胺形成基团R3的例子包括苄氨基、N-甲基苄氨基、吡咯烷基(pyrrolidino)、苯胺基、二乙氨基、对-甲氧基苄氨基、吗啉代、2-(甲氧羰基)乙氨基、叔-丁基氨基和(3-吡啶甲基)氨基。
R3优选是吡咯烷基。
R1可以是氢。R1还可以是取代基，该取代基选自任选取代的(C1-6)烷基，任选取代的(C1-6)链烯基和C1-6链烷酰基，其中在这些取代基的烷基上的任选取代基可以选自与烷基R4上的取代可选择的取代基相同的取代基。R1优选是在1-位通过借助于氧连接的取代基取代的C1-4烷基，这些取代基如羟基、(C1-5)烷氧基如甲氧基、氨基羰氧基、苯甲酸基、或任选地被基团如苄氧羰基氨取代的(C1-6)链烷酰氧基。当1-位碳原子是手性时，优选的立体化学式如下
R1烷基还可以被R8-COO-或R8CO-NH-取代，其中R8是氨基酸(如天然α-氨基酸)的残基。R1上的取代基还可以是叠氮基、N3或肽残基，如化学式R9-NH-CHR10-CO[-NHCHR10-CO-]n-X-，其中R9是氨基取代基团，如任选取代的C1-6链烷酰基或C1-6烷氧基羰基，R10是从天然氨基酸(如上述的α-氨基酸)衍生的残基，X是O或NH，n是1至4，更具体地说1至3如1至2之间的整数。这种肽残基的例子是(CH3)3CO.CONH.CH(CH3).CONH.CH(CH2.CH(CH3)2).CONH。
R1优选是氢、1-乙酸基乙基或1-羟乙基。
式(Ⅰ)化合物可适当地包括50%或更优选60%或更、更优选70%或更、更优选80%或最理想为90%或更多的5S异构体。特别优选的是式(Ⅰ)化合物基本上是纯5S异构体。
本发明的某些化合物可以从溶剂如有机溶剂中结晶或重结晶。在这种情况下可形成溶剂化物。本发明包括在其范围内的化学计量溶剂化物，包括水合物以及含有可变量水的化合物(该化合物可通过冷冻干燥方法生产)。
因为本发明抗菌化合物打算用于药物组合物，因此很容易理解，这些化合物每个都以基本上纯的形式，如至少60%纯，更合适至少75%纯，优选至少85%、最好至少95%纯(%以重量为基)提供。该不纯的化合物制剂可被用于制备在药物组合物中使用的更纯的制剂;这些低纯化合物制剂应含有至少1%、更合适至少5%、和优选10～49%的式(Ⅰ)化合物。
式(Ⅰ)的某些化合物是已知的，它们还可以通过那些描述于J.A.C.S1979，101(21)，p6306-6310类似的方法制备，例如通过式(Ⅱ)化合物的环化作用制备
其中R21是R2或者可转化成R2或可被R2替代的取代基，R31是R3或者可转化成R3或可被R3替代的基团，R11是R1或者可转化成R1的基团，其中R2、R3和R1定义如式(Ⅰ)，R81是有机基团如苯基。
可转化成R2的R21的例子包括-CH2OSiR3，它可转化成-CH2OH和其它衍生物，或者是与苯基连接的可转化成酸的酯。
当式(Ⅰ)中的R2是氢时，式(Ⅱ)化合物(其中R21是氢)可以从相应的化合物制得，其中相应的化合物中的硫上的取代基是β-(烷氧羰基)乙烯基如β-(乙氧羰基)乙烯基或
R31可以是例如OR91，其中R91是羧酸保护基，可以通过常规方法将其去除，形成式(Ⅲ)的酸
进一步的式(Ⅰ)化合物可以采用已知的酯-或酰胺形成反应，由母核酸(Ⅲ)或其酰化衍生物制备，其中R21、R11和n定义如上述式(Ⅰ)和(Ⅱ)，尤其是其中的酸异构富集于5S异构体。作为纯5S异构体的该酸制剂，例如描述了Pfaendler J.A.C.S.opcit。
适当的酰化衍生物包括对称或混合的酐。在酸结合剂例如叔胺(如吡啶或二甲基苯胺)、分子筛、无机碱(如碳酸钙或碳酸氢钠)或环氧乙烷(Oxirane)(它结合酰化反应中释放的卤化氢)存在条件下可以进行酰化反应。环氧乙烷(Oxirane)优选是(C1-6)-1，2-亚烷基氧化物-例如环氧乙烷或环氧丙烷。酰化反应可以在-50℃至+50℃、优选-20℃至+20℃范围内、于水或非水介质如水、丙酮、四氢呋喃、乙酸乙酯、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺、乙腈、二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、或它们的混合物中进行。该反应还可以在水不混溶溶剂的不稳定乳浊液中，特别是脂族酯或酮、如甲基异丁酮或乙酸丁酯中进行。在碱性催化剂如吡啶或2，6-卢剔啶存在下，用酸酐适当地进行酰化反应。
适当的混合酐是酐与例如碳酸单酯、三甲基乙酸、硫代乙酸、二苯基乙酸、苯甲酸、磷酸(如磷酸、亚磷酸、和次膦酸)或芳族或脂族磺酸(如对-甲苯磺酸或甲磺酸)。
酸(Ⅲ)的另外的酰化衍生物是酰基叠氮、或活化酯如与2-巯基吡啶、氰基甲醇、对硝基苯酚、2，4-二硝基苯酚、苯硫酚、卤代苯酚(包括五氯苯酚)、单甲氧基苯酚、N-羟基琥珀酰亚胺、N-羟基苯并三唑、或8-羟基喹啉的酯;或酰胺如N-酰基糖精，N-酰基噻唑烷-2-硫酮或N-酰基苯邻二甲酰亚胺;或者是酸(Ⅲ)与肟反应制备的亚烷基亚氨基酯。
酸(Ⅲ)的其它的反应酰化衍生物包括在原处与缩合剂如碳化二亚胺，例如N，N′-二乙基-、二丙基-或二异丙基碳化二亚胺，N，N′-二环己基碳化二亚胺，或N-乙基-N′-[3-(二甲氨基)丙基]碳化二亚胺;适当的羰基化合物，例如N，N′-羰基二咪唑、或N，N′-羰基二-三唑;异噁唑啉鎓盐(isoxazolinium salt)，例如N-乙基-5-苯基异噁唑啉鎓-3-磺酸盐或N-叔-丁基-5-甲基异噁唑啉鎓高氯酸盐;或者N-烷氧羰基-2-烷氧基-1，2-二氢喹啉，例如N-乙氧羰基-2-乙氧基-1，2-二氢喹啉反应形成的活性中间产物。其它缩合剂包括路易斯酸(例如BBr3-C6H6);或磷酸缩合剂如二乙基磷酰基氰化物。缩合反应优选在有机反应介质如二氯甲烷、二甲基甲酰胺、乙腈、乙醇、苯、二噁烷或四氢呋喃中进行。
形成式(Ⅲ)酸的酰化衍生物的进一步方法是用溶液或悬浮液处理该式(Ⅲ)酸，该溶液或悬浮液通过将羰基卤化物、优选草酰氯，或磷酰基卤化物如磷酰氯加入卤代烃溶剂，优选含有低级酰基叔酰胺，优选N，N-二甲基甲酰胺的二氯甲烷中制备。
酸(Ⅲ)或其酰化衍生物可以和式HO-R3醇或式HNR52胺(其中R3和R5定义如前)发生反应。由这些醇和胺形成酯和酰胺的方法在有机化学领域中是众所周知的。
这些醇的适当的例子包括苄醇、对-甲氧苄醇、2，2，2-三氯乙醇、甲醇、对-硝基苯酚、和羟基丙酮。
胺的适当的例子包括苄胺、N-甲基苄胺、吡咯烷、苯胺、二乙基胺、对-甲氧基苄胺、吗啉、2-(甲氧羰基)乙胺、叔-丁胺和(3-吡啶甲基)胺。
通过酸(Ⅲ)的酰化衍生物与醇HO-R3在适当的溶剂中反应可以形成酯。例如，式(Ⅰ)的酯可以通过式(Ⅲ)酸的金属盐(如钾盐，该盐可以通过酸(Ⅲ)与金属碱性化合物如碳酸盐反应制备)与卤化物式X-R3(其中X是卤化物基如碘)反应制备。在室温隋性溶剂中，通过游离酸与重氮基链烷烃或二苯基重氮基链烷烃反应也可以形成酯。
在适当的溶剂中(如果需要可含有酸结合剂如三乙胺或吡啶)，通过酸(Ⅲ)或N-酰化衍生物与胺H-NR52反应可以形成酰胺。合适的酸(Ⅲ)的N-酰化衍生物是一种混合酐，例如通过酸(Ⅲ)与氯甲酸乙酯在酸结合剂如三乙胺存在下、在有机溶剂如四氢呋喃中、在例如0至-20℃反应形成的混合酐。可以用就地形成的酐进行酐与胺的反应。
据信如上定义的某些式(Ⅰ)化合物是新的，并且在此意义上构成本发明的另一方面。
尤其是按如上定义的式(Ⅰ)酰胺(其中当R3是氨基或二-低级烷基氨基时，R2不是S-连接的有机基团)，据信是新的，并且在此意义上构成本发明的另一方面。
本发明组合物包括适用于口服、局部或胃肠外使用的那些形式的组合物，这些组合物可用于治疗哺乳动物包括人的细菌感染。
与其它抗菌素类似本发明化合物可以配制成以任何方便途径施用于人或兽医治疗的制剂。
该组合物可配制成以任何途径给药的形式，所说的给药途径例如口服、局部或胃肠外、尤其是口服。该组合物可以是以下形式，片剂、胶囊、粉末、颗粒、锭剂、霜剂或液体制剂、如口服或无菌胃肠外溶液或悬浮液。
本发明的局部制剂可以是、例如油膏、霜剂或洗剂、眼膏和眼或耳滴剂，浸渗敷料和气溶胶，并且可以含有适当的常规添加剂如防腐剂，有助药物渗透的溶剂和油膏和霜剂中的润滑剂。
制剂还可以含有可相容的常规载体，如霜剂或油膏基和用于洗剂的乙醇或油醇。这些载体在制剂中的含量可以从约1%至约98%。通常载体在制剂中的含量在约80%以下。
用于口服给药的片剂和胶囊可制成单位剂量形式，并且含有常规的赋形剂如粘结剂、例如糖浆、阿拉伯胶、明胶、山梨醇、黄蓍胶或聚乙烯吡咯烷酮;填料，例如乳糖、糖、玉米淀粉、磷酸钙、山梨醇或甘油;制片润滑剂，例如硬脂酸镁、滑石、聚乙二醇或二氧化硅;崩解剂，例如土豆淀粉;或者可接受的润湿剂如十二烷基硫酸钠。可以按照在常规制药实践中为人熟知的方法包衣该片剂。口服液制剂可以是以下形式，例如水或油悬浮液、溶液、乳剂、糖浆或酏剂，或者可以制成干产品而在使用前用水或其它适当的赋形剂配制。这种液体制剂可以含有常规的添加剂如悬浮剂、如山梨醇、甲基纤维素、葡萄糖浆、明胶、羟乙基纤维素、羟甲基纤维素、硬脂酸铝胶或氢化可食用脂肪、乳化剂，例如卵磷脂、脱水山梨醇-油酸酯、或阿拉伯胶;非水赋形剂(可以包括食用油)，例如杏仁油、油基酯如甘油、丙二醇、或乙醇;防腐剂，例如对羟基苯甲酸甲酯或丙酯，或者山梨酸，如果需要还含有常规调味剂或着色剂。
栓剂可以含有常规栓剂基质，如可可脂或其它甘油酯。
为了胃肠外给药，利用化合物和无菌赋形剂(优选水)制备液体单位剂量形式。根据赋形剂和所采用的浓度，该化合物可以悬浮或溶解在赋形剂中。在制备溶液中，可将化合物溶解在注射用水中，并且在装入合适的瓶或安瓿瓶封口前进行无菌过滤。
更有益的是，可将例如局部麻醉剂、防腐剂和缓冲剂等制剂溶于该赋形剂。为了提高稳定性，可以在装入瓶子前冷却该组合物并真空除去水。然后将该干的冷冻干燥粉末封入小瓶中，并且可以提供配套的小瓶注射用水以便在使用前配制注射液。除了将化合物悬浮在赋形剂中以代替溶解在赋形剂中和不能采用过滤灭菌之外，以基本相同的方法制备胃肠外悬浮液。在将化合物悬浮在无菌赋形剂之前，可以将化合物暴露于环氧乙烷灭菌。有益的是，将表面活性剂或润湿剂包括在组合物中以利于化合物的均匀分布。
根据给药方法，该组合物可以含有0.1%(重量)，优选10%(重量)至60%(重量)的活性物质。当组合物包含剂量单位时，每个单位优选含有50-500mg活性成份。根据给药的途径和次数，用于成人治疗的剂量优选每天100mg至5g。该剂量相当于每天1.5至70mg/Kg。剂量在每天5至20mg/Kg更合适。
当以上述剂量给药式(Ⅰ)化合物或其可药用盐或者其可体内水解的酯时，没发现不能接受的毒性影响。
式(Ⅰ)化合物可以是本发明组合物中的唯一的治疗剂，或者是与其它抗生素结合使用。
本发明化合物可潜在地用于抗广谱微生物(包括革兰阴性微生物如大肠杆菌和革兰阳性微生物如S.aureus)的抗菌剂。
以下实施例说明本发明化合物及其中间体的制备。
实施例1 (5S)-青霉烯-3-羧酸苄酯1a (4S)-(顺-β-甲酯基乙烯基巯基)氮杂环丁-2-酮
(ⅰ)在-10℃，向(-)顺-β-甲酯基乙烯基异硫脲鎓氯盐(32.1g，0.1mol)(通过Pfaendler H.R.等人(J.Amer.Chem.Soc.，101，1979，6306)方法制备)的乙醇(400ml)溶液中添加预冷的氢氧化钠水溶液(200ml，1.0N，0.2mol)。将生成的含有(-)-顺-β-甲酯基乙烯基硫醇的钠盐的悬浮液直接用于下步反应。
(ⅱ)在-10℃下，将预冷的4-乙酰氧基氮杂环丁-2-酮(12.9g，0.1mol)的乙醇(200ml)溶液加入到上述(-)-顺-β-甲酯基乙烯基硫醇钠悬浮液中。在加入到上述(-)-顺-β-甲酯基乙烯基硫醇钠悬浮液中。在加入过程中溶液内部温度保持在-10℃。然后将反应溶液在-10℃下搅拌30分钟、5℃下搅拌15分钟。加入二氯甲烷和饱和氯化钠溶液，将有机溶液进行分离、干燥(MgSO4)和蒸发。在硅胶上对残余物进行色谱，用乙酸乙酯-己烷混合物洗脱，得到白色半固体的氮杂环丁酮差向异构混合物(26.1g)。将该半固体从二氯甲烷/正戊烷中重结晶，得到白色固体(0.902g)。将该白色固体再在二氯甲烷/正戊烷中重结晶三次，直到所得固体具有恒定熔点。由此获得的产物是纯的(4S)-(顺-β-甲酯基乙烯基巯基)氮杂环丁-2-酮(0.66g)，m.p.130-131℃;[α]23D-79°(c 1.0，CHCl3)，δH(CDCl3)0.77(3H，d，J 7Hz)，0.90(6H，2xd，J 6.5和7Hz)，0.9-2.12(m，9H)，3.08(1H，ddd，J 15.5，2，1Hz)，3.52(1H，ddd，J 15.5，5，2Hz)，4.76(1H，dt，J 11和4.5Hz)，4.92(1H，dd，J 5和2.5Hz)，6.01(1H，d，J 10Hz)，6.28(1H，宽共振)，7.11(1H，d，J 10Hz)。
蒸发有机母液并从二氯甲烷/正戊烷中再次重结晶。对从二氯甲烷/正戊烷中所得固体重复进行重结晶，又得到一定量的纯(4S)-(顺-β-甲酯基乙烯基巯基)氮杂环丁-2-酮(1.66g)，m.p.130℃;[α]23D-80℃(c 1.0，CHCl3)。
1b.[(4S)-(顺-β-
酯基乙烯基巯基)-2-氧代氮杂环丁-1-基]三苯基正膦亚基乙酸苄酯
将乙醛酸苄酯-水合物(0.439g;2.415mM)溶于苯(100ml)中，对该溶液加热回流1小时，同时除去水(Dean and Stark装置)。然后将该溶液冷却至室温并加入(4S)-(顺-β-
酯基乙烯基巯基)氮杂环丁-2-酮(0.500g;1.61mM)的干燥苯(10ml)溶液。加入三乙胺(4滴)，在室温搅拌4小时。然后对该溶液进行减压蒸发，并从甲苯中共沸二次，产生非对映异构羟基乙酸酯泡沫。
将该泡沫溶于干燥四氢呋喃(50ml)中并在氩气氛下将其冷却至-10℃。将2，6-卢剔啶(0.282ml)和亚硫酰(二)氯(0.177ml)加入并在-10℃持续搅拌15分钟。然后过滤该溶液并蒸发滤液，得到非对映异构氯代乙酸酯泡沫。
将该氯代乙酸酯溶于1，4-二噁烷(50ml)中，并向搅拌的溶液中加入三苯膦(1.68gm)。当三苯膦全部溶解后，将该溶液蒸发至较小体积(约10ml)。加入2，6-卢剔啶(0.228ml)并在室温搅拌该溶液16小时。然后将该溶液在乙酸乙酯和水之间分配。用5%柠檬酸溶液、饱和碳酸氢钠溶液、盐水洗涤该有机溶液，干燥(MgSO4)并蒸发。在硅胶上对残余物进行色谱，用乙酸乙酯-己烷混合物洗脱，得到纯标题正膦白色泡沫(0.740g)，νmax(CH2Cl2)1763，1700，1638，1582cm-1。
1c.(5S)-青霉烯羧酸苄酯
将[(4S)-(顺-β-
酯基乙烯基巯基)-2-氧代氮杂环丁-1-基]三苯基正膦亚基乙酸苄酯(0.740g)溶于乙酸乙酯中并在氩气流下冷却至0℃。加入三氟乙酸(15ml)并将溶液在0℃搅拌15分钟，随后冷却至-78℃。向溶液中通入臭氧2小时，t.l.c表明臭氧分解完全。用氩气吹除过量的臭氧并加入三苯膦(0.315g)。加入饱和碳酸氢钠并使溶液加热至室温。用饱和碳酸氢钠、盐水洗涤该有机溶液、干燥(MgSO4)并蒸发。将残余物溶于二氯甲烷(20ml)并在室温搅拌2小时，t.l.c表明环化形成双环青霉烯已经完成。对该溶液进行减压蒸发。残余物在硅胶上进行色谱。用乙酸乙酯-己烷混合物洗脱，得到混有乙醛酸
酯的标题化合物(0.183g)。在硅胶上对该不纯产物再次进行色谱，用0%、1%和2%乙醇的二氯甲烷洗脱，得到纯的标题化合物白色结晶固体(0.051g)，m.p.(EtOAc-己烷)136-140℃;[α]23D-206°(c 1.0，CH2Cl2);νmax(CH2Cl2)1800，1720，1562cm-1;δH(CDCl3)3.59(1H，dt，J 16.5，1.5Hz)，3.86(1H，ddd，J 16.5，4，1Hz)，5.22(1H，d，J 12.5Hz)和5.28(1H，d，J 12.5Hz)(全部ABq)，5.80(1H，dd，J 4，2Hz)，7.2-7.45(6H，m)(实测值C，59.65;H，4.15;N，5.4;S，12.15%;M+，261.0464.C13H11NO3S要求C，59.75;H，4.25;N，5.35;S，12.25%;M，261.0460)。
实施例2 (5RS)-青霉烯-3-羧酸甲酯在10%钯碳催化剂(30mg)存在条件下，于大气压将(5RS)-青霉烯-3-羧酸4-硝基苄酯[U.K.Pat.Appl.2，036，015(Beecham Group)](30mg)的二噁烷(5ml)和水(1.25ml)的溶液氢化2小时。产物经硅藻土过滤并将碳酸钾(8mg)的水(5ml)溶液加入滤液。0.25小时后，对溶液进行减压蒸发直至刚好混浊，然后用乙酸乙酯洗涤二次。对剩余的水溶液进行冷冻干燥，得到粗钾盐。在干燥的二甲基甲酰胺(1ml)中搅拌该盐并加入碘代甲烷(28mg、12μl)。在氩气氛下、于室温搅拌该混合物3小时，然后减压蒸发。将残余物在乙酸乙酯和盐水之间分配;分离有机相，用盐水洗涤，干燥并蒸发。用乙酸乙酯/己烷1∶1作为溶液，在硅胶60上进行色谱，纯化该残余物，得到一种胶，该胶从乙酸乙酯/己烷中结晶得到甲酯(7mg);m.p.91-93℃;νmax(CHCl3)2970，1800，1720和1565cm-1;δH(CDCl3)3.58(1H，d，J 17.0Hz具有细分离峰，6-H)，5.80(1H，dd，J 3.9 & 1.9Hz，5-H)，和7.27(1H，s，2-H);M+(EI)，m/z185。
实施例3 (5R)-青霉烯-3-羧酸苄酯通过M.Ohtani等人(J.Org.Chem.，1984，49，5271)中描述的方法，将(5R)-青霉烯-3-羧酸对甲氧苄酯转化成(5R)-青霉烯-3-羧酸钠盐。然后将其溶解在干燥的N，N-二甲基甲酰胺中并在室温与苄基溴(2当量)一起搅拌2小时。用乙酸乙酯稀释该溶液，并用水、盐水洗涤、干燥(MgSO4)和蒸发。在硅胶上对残余物进行色谱，用10-50%乙酸乙酯和己烷梯度洗脱，得到标题化合物白色固体，[α]23D+201°(C 1.0，CH2Cl2)(ZA8504947，1986，Merck)。
实施例4 (5RS)-青霉烯-3-羧酸苄酯按照GB2，036，015(1980)的方法制备该化合物，得到标题化合物m.p.118-119℃λmax(EtOH)260和319nm;νmax(CHCl3)1795，1715cm-1δH(CDCl3)3.49(1H，ddd，J 16，2和2Hz)，3.83(1H，dd，J 16和4Hz)，5.23(2H，s)，5.74(1H，dd，J 4和2Hz)，7.24(1H，dd，J 2Hz)，7.35(5H，s)(实测值C，59.6;H，4.1;N，5.2;S，12.3%.C13H11NO3S要求C，59.7;H，4.2;N，5.4;S，12.3%)。
实施例5 (5RS)-青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯按照GB2，036，015(1980)的方法制备，得到标题化合物mp 160-165°，λmax(EtOH)319nm;νmax(CHCl3)1800，1715cm-1;δH(CDCl3)3.57(1H，ddd，J＝17，2，1Hz)，3.95(1H，ddd，J＝17.4，2Hz)，5.22和5.45(2H，ABq，J＝14Hz)，5.81(1H，dd，J 4，2Hz)，7.35(1H，d，J 1Hz)，7.57(2H，d，J＝9Hz)和8.23(2H，d，J＝9Hz)(实测值C，51.0;H，3.3;N，9.1;S，10.3%，C13H10N2O5S要求C，50.98;H，3.27;N，9.15;S，10.45%)。
实施例6 (5RS)-青霉烯-3-羧酸对甲氧苄酯按照实施例2的方法，用对甲氧苄基溴进行制备，得到标题化合物νmax(CHCl3)1798，1715cm-1;δH(CDCl3)3.55(1H，dt)，3.75-3.95(4H，s+m)，5.18(2H，ABq)，5.78(1H，dd，J 1.85，4.0Hz)，6.90(2H，d，J 8.7Hz)，7.25(1H，s)，7.33(2H，d，J 8.7Hz)(实测值M+291.0571;C14H13NO4S要求391.0565)。
实施例7 (5R)-青霉烯-3-羧酸对甲氧苄酯将(5R，6S)-6-溴代青霉烯-3-羧酸对甲氧苄酯(J.C.S.Chem.Commun.，1989，p.371)(2.0g)溶于乙腈(80ml)中，并在室温与锌粉(1.4g)和1M乙酸铵溶液一起搅拌30分钟。得到的悬浮液经硅藻土过滤、用乙酸乙酯稀释并用碳酸氢钠溶液、盐水洗涤、干燥(MgSO4)和蒸发。在硅胶上对残余物进行色谱，用20→50%EtOAc/己烷梯度洗脱，得到标题化合物浅黄色固体(0.50g)，[α]23D+169°(c 1.0，CHCl3)。
实施例8 (5RS)-青霉烯-3-羧酸三氯乙酯按照与实施例4相类似的方法进行制备，得到标题化合物mp119-121°，λmax(EtOH)322;νmax(CHCl3)1800，1730cm-1;δH(CDCl3)3.53(1H，ddd，J 16，2和1Hz)，3.89(1H，dd，J 16和4Hz)，4.74和4.89(2H，ABq，J 12Hz)，5.31(1H，dd，J 4和2Hz)，7.42(1H，d，J 1Hz).(实测值C，32.3;H，2.0;N，4.9;S，10.6%.C8H6NO3SCl3要求C，31.7;H，2.0;N，4.6;S，10.6%)。
实施例9 (5RS)-2-(羟甲基)青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯按照GB2，037，277B所述方法进行制备，得到标题化合物m.p.137-9°，λmax(EtOH)265和322nm;νmax(CHCl3)3600-3010，1795，1705cm-1;δH(CDCl3)3.11-3.40(1H，bs，exch D2O)，3.51(1H，dd，J＝2，16Hz)，3.84(1H，dd，J＝4，16Hz)4.67(2H，bs)，5.22和5.47(2H，ABq，J＝14Hz)，5.67(1H，dd，J＝2，4Hz)，7.20(2H，d，J＝8Hz)，8.20(2H，d，J＝8Hz).(实测值C，50.21;H，3.43;N，8.26;S，9.52%;C14H12N2O6S要求C，50.0;H，3.60;N，8.33;S，9.53%)。
实施例10 (5RS)-青霉烯-3-羧酸烯丙酯将[(4RS)-三苯甲基硫-2-氧代氮杂环丁-1-基]三苯基正膦亚基乙酸烯丙酯(0.500g;0.711mM)溶于干燥的乙腈(25ml)中。向搅拌着的溶液中加入4-二甲氨基吡啶(0.104g)和硝酸银(0.185g)乙腈溶液。在室温搅拌该溶液1小时。然后将溶液冷却至5℃，并快速连续地加入4-二甲氨基吡啶(0.087g)、碘化钠(1.066g)、随后是乙酸甲酸酐(0.57ml)。除去冷却浴并将溶液在室温搅拌30分钟。然后将反应溶液在乙酸乙酯和水之间分配。用1N HCl、水、饱和碳酸氢钠溶液、盐水洗涤该有机溶液、干燥(MgSO4)并减压蒸发。在硅胶上对粗产物进行色谱。用10-25%乙酸乙酯/己烷进行梯度洗脱，得到标题化合物浅黄色油(0.090g)，vmax(CH2Cl2)1800，1720cm-1;δH(CDCl3)3.58(1H，dt，J 16.6，1.5Hz)，3.88(ddd，J 16.5，4.0，0.7Hz)，4.72(2H，m)，5.2-5.5(2H，m)，5.70(1H，dd，J 2，4Hz)，5.85-6.10(1H，m)，7.30(1H，d，1Hz)，m/e 211.0300(C9H9NO3S要求M，211.0303)。
实施例11 (5S)-青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯11a[(4S)-顺-β-
酯基乙烯基巯基)-2-氧代氮杂环丁-1-基]-三苯基正膦亚基乙酸对硝基苄酯通过实施例1b的方法，让乙醛酸对硝基苄酯-水合物与(4S)-(顺-β-酯基乙烯基巯基)氮杂环丁酮反应，得到标题正膦泡沫，νmax(CH2Cl2)1762，1698，1638，1618，1581cm-1。
11b(5S)-青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯通过实施例1c的方法，对实施例11a的正膦进行臭氧分解，由乙酸乙酯/己烷中得到标题化合物白色结晶固体，[α]23D-151°(C 1.0，CH2Cl2);νmax(CH2Cl2)1800，1722，1610cm-1;δH(CDCl3)3.62(1H，dt，J 16.5和1Hz)和3.90(1H，dd，J 16.5和4Hz)，5.27(1H，d，J 13.5Hz)和5.41(1H，d，J 13.5Hz)，5.83(1H，dd，J 2和4Hz)，7.38(1H，s)，7.60(2H，d，J 8.7Hz)，8.23(2H，d，J 8.7Hz);λmax(EtOH)316(ε7，300)，263nm(ε10，021);m/e 306.0310(C13H10N2O5S要求M，306.0310)。
实施例12 (5S)-青霉烯-3-羧酸甲酯12a(5S)-青霉烯-3-羧酸将(5S)-青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯(0.250g;0.817mM)溶于30%1，4-二噁烷水溶液(50ml)中，并在室温、氢气压下，有10%钯碳催化剂(0.375g)存在条件下摇动1小时。在添加碳酸氢钠(0.076g)的水(2ml)溶液后，经硅藻土对反应悬浮液进行过滤，用水充分洗涤。将滤液蒸发至小体积并在乙酸乙酯和水之间分配。分离水层，蒸发到较小体积并施加到Diaion HP 20-SS柱上，用水洗脱。将含有标题酸钠盐的那些部分合并，然后冷冻干燥得到浅黄色固体。
12b (5S)-青霉烯-3-羧酸甲酯将实施例12a的钠盐悬浮在干燥的二甲基甲酰胺(5ml)中，并在室温与甲基碘(0.5ml)一起搅拌14小时。减压蒸发掉溶剂并将残余物在乙酸乙酯和水之间分配。用盐水洗涤有机溶液、干燥(MgSO4)并蒸发。在硅胶上对残余物进行色谱，用10-50%乙酸乙酯/己烷梯度洗脱，得到标题酯白色固体，λmax(EtOH)315(ε7081)，225nm(ε2651);νmax(CH2Cl2)1800，1728，1568cm-1;δH(CDCl3)3.59(1H，d，J 16.5Hz)，3.8-3.95(4H，重叠s+dd)，5.80(1H，dd，J 1.7和3.8Hz)，7.28(1H，s)，m/e+185.0147(C7H7NO3S要求M，185.0147)。
实施例13 (5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸4-(甲氧羰基)苄酯以40%的产率、按照实施例2的方法用4-(溴乙基)苯甲酸甲酯制备该酯;m.p.135-7℃(乙酸乙酯/己烷);νmax(CHCl3)2960，1800，1725sh，1715和1615cm-1;δH(CHCl3)3.60(1H，dt，J 16.6 & 1.6Hz，6-H)，3.87(1H，d，J 16.6 & 4.0Hz，6-H)，3.92(3H，s，OCH3)，5.25和5.35(2H，ABq，J 13.1Hz，OCH2Ar)，5.81(1H，dd，J 4.0和1.6Hz，5-H)，7.32(1H，s，2-H)，7.47(2H，d，J 8.2Hz，Ar-H)和8.04(2H，d，J 8.2Hz，Ar-H);(实测值C，56.3;H，4.0;N，4.5%.C15H13NO5S要求C，56.4;H，4.1;N，4.4%)。
实施例14 (5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸 4-[(4-硝基苄基)氧基羰基]苄酯以53%的产率，按照实施例2的方法由4-(溴乙基)苯甲酸4-硝基苄酯制备青霉烯酯;m.p.132-5℃(乙酸乙酯/己烷);νmax(CHCl3)1800，1720，1610，1560和1525cm-1;δH(CDCl3)3.60(1H，dt，J 16.6 & 1.6Hz，6-H)，3.87(1H，ddd，J 16.6，3.9 & 0.7Hz，6-H)，5.26和5.37(2H，ABq，J 13.2Hz，OCH2Ar)，5.46(2H，s，OCH2Ar)，5.81(1H，d，J 3.9 & 1.6Hz，5-H)，7.33(1H，s，2-H)，7.50(2H，d，J 8.3Hz，Ar-H)，7.60(2H，d，J 8.7Hz，Ar-H)，8.09(2H，d，J 8.3Hz，Ar-H)和8.26(2H，d，J 8.7Hz，Ar-H);(实测值C，57.6;H，3.8，N，6.2%.C21H16N2O7S要求C，57.3;H，3.7;N，6.4%)。
实施例15 4-[[(5RS)-青霉-2-烯-3-羰基]氧甲基]苯甲酸钠在10%钯-碳催化剂(33mg)存在条件下，将(5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸4-[(4-硝基苄基)氧基羰基]苄酯(33mg)的二噁烷(10ml)和水(2.5ml)溶液在大气压力下氢化3小时。反应混合物经硅藻土过滤，并将碳酸钠(4.0mg)的水(5ml)溶液加入滤液中。0.5小时后，蒸发该溶液直至刚好变混浊，然后用乙酸乙酯洗涤。将水溶液冷冻干燥，得到标题钠盐浅黄色固体(16mg;65%);νmax(KBr)3400，1786，1709和1597cm-1;δH(D2O)3.62(1H，brd，J 17.1Hz，6-H)，3.87(1H，dd，J 17.1 & 3.8Hz，6-H)，5.27(2H，s，OCH2Ar)，5.82(1H，dd，J 3.8 & 1.7Hz，5-H)，7.45(2H，d，J 8.1Hz，Ar-H)，7.62(1H，s，2-H)和7.83(2H，d，J 8.1Hz，Ar-H)。
实施例16 (5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸正戊酯在有10%钯-碳催化剂(50mg)存在条件下，将(5RS)-青霉烯-3-羧酸4-硝基苄酯(50mg)的二噁烷(10ml)和水(2.5ml)溶液在大气压下氢化2小时。产物经硅藻土过滤并将碳酸钾(14mg)的水(5ml)溶液加入该滤液。0.25小时后对该溶液进行减压蒸发直至刚好混浊，然后用乙酸乙酯洗涤两次。用氯化钠使该钾盐水溶液饱和，然后与乙酸乙酯/四氢呋喃1∶1(20ml)一起剧烈搅拌。用0.5N盐酸将该混合物酸化至pH2.0，分离有机相、干燥并蒸发。在室温、氩气氛下，在干燥的二甲基甲酰胺(1ml)中搅拌该粗酸，并用1-碘代戊烷(48mg)和氟化铯(37mg)处理。18小时后，蒸发该混合物，残余物在乙酸乙酯和稀碳酸氢钠水溶液之间分配。分离有机相，用盐水洗涤，然后在硫酸钠上干燥并蒸发。用乙酸乙酯/己烷(4∶6)作为洗脱液，在硅胶60上对残余物进行色谱，得到戊酯胶(10mg);νmax(CHCl3)2980，2950，2880，1800，1715和1560cm-1;δH(CDCl3)，0.91(3H，t，J 7.0Hz，CH3)，1.29-1.43(4H，m，CH2′s)，1.69(2H，pent，J 7.0Hz，OCH2CH2)，3-57(1H，dd，J 16.5 & 1.9Hz)，6-H)，3-85(1H，dd，J 16.5 & 3.9Hz，6-H)，4.12-4.29(2H，m，OCH2)，5.79(1H，dd，J 3.9 & 1.9Hz，5-H)和7.24(1H，s，2-H);[实测值M+，241(EI).C11H15NO3S要求M，241]。
实施例17(5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸4-苯基丁酯以24%产率，按照实施例16的方法，由碘丁基苯制备标题青霉烯酯;νmax(CHCl3)2930，2860，1800，1710和1560cm-1;δH;(CDCl3)1.67-1.80(4H，m，OCH2CH2CH2)，2.60-2.70(2H，m，CH2Ar)，3.57(1H，dt，J 16-6 & 1.7Hz，6-H)，3-85(1H，dd，J 16.6 & 3-9Hz，6-H)，4.14-4.30(2H，m，OCH2)5.78(1H，dd，J 3-9 & 1.7Hz，5-H)，和7.15-7.34(6H，m，2-H和Ar-H′S)[实测值M+，303(EI).C16H17NO3S要求M，303]。
实施例18 (5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸3-(甲酯基)苄酯在有10%钯-碳催化剂(50mg)存在下，将(5RS)-青霉烯-3-羧酸4-硝基苄酯(50mg)的二噁烷(10ml)和水(2.5ml)溶液在大气压下氢化2小时。产物经硅藻土过滤，并向滤液中加入碳酸钾(14mg)和水(5ml)溶液。0.25小时后，减压蒸发该溶液直至刚好混浊，然后用乙酸乙酯洗涤两次。用氯化钠使该钾盐溶液饱和，然后与乙酸乙酯/四氢呋喃1∶1(20ml)一起剧烈搅拌。用0.5N盐酸将混合物酸化至pH2.0并分离有机相。干燥和蒸发。用3-(溴甲基)苯甲酸甲酯(45mg)和粉末状碳酸钾(14mg)处理该粗酸的干燥DMF(1ml)溶液。在氩气氛下、室温、搅拌该反应混合物18小时，然后蒸发。残余物在乙酸乙酯和盐水之间分配;分离有机相，然后用盐水洗涤、在硫酸钠上干燥。蒸发该溶液，并用乙酸乙酯/己烷(4∶6)作为洗脱液在硅胶60上对残余物进行色谱，得到青霉烯酯(25mg);m.p.100-2℃(乙酸乙酯/己烷);νmax(CHCl3)2960，1800，1725和1560cm-1;δH(CDCl3)3.59(1H，dt，J 16.6 & 1.9Hz，6-H)，3.86(1H，dd，J 16.6 & 3.9Hz，6-H)，3.93(3H，s，OCH3)，5.25和5.33(2H，ABq，J 12.6Hz，OCH2)，5.80(1H，dd，J 3.9 & 1.9Hz，5-H)，7.30(1H，s，2H)，7.46(1H，t，J 7.7Hz，Ar5′-H，7.62(1H，s，J 7.7Hz，Ar6′-H)，8.01(1H，d，J 7.7Hz，Ar4′-H)和8.07(1H，s，Ar2′-H)(实测值C，56.9;H，4.0;N，4.6%.C15H13NO5S要求C，56.4;H，4.1;N，4.4%)。
实施例19(5RS)青霉-2-烯-3-羧酸2-(2-甲氧基乙氧基)乙酯以16%产率、采用实施例18的方法，由1-碘-2-(2-甲氧基乙氧基)乙烷制备青霉烯酯胶;δH(CDCl3)3.39(3H，s，OCH3)，3.53-3.69(5H，m，6-H和OCH2CH20Me)，3.76(2H，t，J 4.9Hz，CO2CH2CH2O)，3.85(1H，dd，J 16.5 & 3.9Hz，6-H)，4.35和4.41(2H，2dt，J 12.0 & 4.9Hz，CO2CH2)，5.79(1H，dd，J 3.9 & 1.9Hz，5-H)和7.30(1H，s，2-H);[实测值M+，273(EI).C11H15NO5S要求M，273]。
实施例20 (5RS)青霉-2-烯-3-羧酸4-溴苄酯以54%产率，采用实施例18的方法，由4-溴代-1-(溴甲基)苯制备青霉烯酯;m.p.108℃(乙酸乙酯/己烷);νmax(CHCl3)1800，1720和1565cm-1;δH(CDCl3)3.58(1H，dt，J 16.6 & 1.8Hz，6-H)，3.86(1H，ddd，J 16.6，4.0，0.6Hz，6-H)，5.15和5.24(2H，ABq，J 12.6Hz，CH2Ar)，5.79(1H，dd，J 4.0 & 1.8Hz，5-H)，7.28(2H，d，J 8.2Hz，Ar-H)，7.29(1H，s，2-H)和7.50(2H，d，J 8.2Hz，Ar-H);(实测值C，45.8;H，2.8;N，4.2%.C13H10BrNO3S要求C，45.9;H，3.0;N，4.1%)。
实施例21 (5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸(7-甲氧基-2-氧代-2H-1-苯并吡喃-4-基)甲酯采用实施例18的方法，由4-(溴甲基)-7-甲氧基香豆素制备青霉烯酯，产率51%;m.p.170-2℃;νmax(KBr)1786，1723，1710，1614，1560和1510cm-1;δH[(CD3)2SO/C5D5N1∶1]3.75(1H，brd，J 16.8Hz，6-H)，3.91(3H，s，OCH3)，4.08(1H，dd J 16.8 & 4.0Hz，6-H)，5.58和5.74(2H，2dd，J16.0 & 1.3Hz，CH2Ar)，5.99(1H，dd，J 4.0 & 1.8，5-H)，6.44(1H，s，2-H)，7.01-7-12(2H，m，6′-H & 8′-H)，7.77(1H，d，J 8.8Hz，5′-H)和8.08(1H，s，3′-H);[实测值MH+，360(NH3DCl).C17H13NO6S要求M，359]。
实施例22(5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸甲氧基甲酯采用实施例18的方法，由氯甲基甲醚制备青霉烯甲氧基甲酯，产率36%;m.p.109-110℃(乙酸乙酯/己烷);νmax(CHCl3)2970，1800，1720和1560cm-1;δH(CDCl3)3.52(3H，s，OCH3)3.62(1H，dt，J 16.6 & 1.9Hz，6-H)，3.87(1H，dd，J 16.6 & 3.9Hz，6-H)，5.30和5.44(2H，ABq，J 5.9Hz，OCH2O)，5.81(1H，dd，J 3.9 & 1.9Hz，5-H)和7.35(1H，s，2-H);(实测值C，44.8;H，4.0;N，6.5%;M+，215.C8H9NO4S要求C，44.7;H，4.2;N，6.5;M，215)。
实施例23 (5S)-青霉-2-烯-3-羧酸甲氧基甲酯按照以下条件，对实施例22所述的外消旋甲氧基甲酯在手性固定相进行制备h.p.l.c.柱Chiralpak AD-20mm流定相乙醇/己烷35∶65流量6毫升/分钟温度室温监测UV220nm样品制备3mgml-1乙醇的1ml注射液从柱上洗脱的第二个对映体是所需要的(5S)-青霉烯;25D-258。
实施例24 (5RS)-6-(1-乙酰氧乙基)青霉烯-3-羧酸烯丙酯24a.[3-(1-羟乙基)-4-三苯甲基硫-2-氧代氮杂环丁-1-基]三苯基正膦亚基-乙酸烯丙酯
将[(4RS)-三苯甲基硫-2-氧代氮杂环丁-1-基]三苯基正膦亚基-乙酸烯丙酯(3.0g;4.27mM)溶于干燥的四氢呋喃(75ml)并且在氩气氛下冷却至-78℃。加入二异丙基氨基锂溶液(5.34ml 2.0M在庚烷/四氢呋喃/乙基苯中的溶液)并将该溶液在-78℃搅拌30分钟。然后加入乙醛(1.2ml)的四氢呋喃溶液，并且在加入冰醋酸(2ml)使反应淬火之前在-78℃持续再搅拌30分钟。反应溶液在乙酸乙酯和水之间分配并升至室温。用1N盐酸溶液、水、饱和碳酸氢钠溶液、水、盐水洗涤该有机溶液，干燥(MgSO4)并减压蒸发。在硅胶上对残余物进行色谱，用10-75%乙酸乙酯-己烷梯度洗脱，得到标题正膦的非对映异构体混合物浅黄色泡沫(2.44g)，νmax(CH2Cl2)1755，1622cm-1;m/e(氨气DCI)748(MH+)。
24b[3-(1-乙酰氧乙基)-4-三苯甲基硫-2-氧代氮杂环丁-1-基]三苯基正膦亚基-乙酸烯丙酯
将实施例24a.(2.44g)的醇的非对映异构体混合物溶于干燥的二氯甲烷(200ml)，并在室温与三乙胺(1.32ml)，乙酸酐(0.96ml)和4-二甲氨基吡啶(0.25g)一起搅拌16小时。然后用1N盐酸溶液、水、饱和碳酸氢钠溶液、盐水洗涤有机溶液、干燥(MgSO4)并蒸发。在硅胶上对残余物进行色谱，用乙酸乙酯-己烷混合物洗脱，得到非对映异构的标题正膦白色泡沫(1.48g)νmax(CH2Cl2)1755，1740，1620cm-1。
24c.(5RS)-6-(1-乙酰氧乙基)青霉烯-3-羧酸烯丙酯
将实施例24b的非对映异构体正膦(0.750g;0.95mM)溶于干燥乙腈(25ml)中，并在室温与4-二甲氨基吡啶(0.139g)和硝酸银(0.363g)的乙腈溶液一起搅拌2小时。然后加入乙酸甲酸酐(0.8ml)、4-二甲氨基吡啶(0.118g)和碘化钠(1.42g)并在室温连续搅拌1小时。将反应溶液在乙酸乙酯和水之间分配。用饱和碳酸氢钠溶液、水、盐水洗涤有机层，并干燥(MgSO4)。在进行减压蒸发之前，让溶液在室温保持30分钟。在硅胶(25g)上对残余物进行色谱，用10-50%乙酸乙酯-己烷梯度洗脱。
第一洗脱成分为标题化合物的单一的纯异构体(异构体A)无色胶(0.010g)，νmax(CH2Cl2)1800，1748，1725cm-1;δH(CDCl3)1.53(3H，d J 6Hz)，2.07(3H，s)，4.07(1H，ddd，J 0.7，3.8 10.3Hz)，4.6-4.8(2H，m)，5.2-5.45(3H，m)，5.84(1H，d，J 4.0Hz)，5.85-6.05(1H，m)，7.31(1H，d，0.8Hz)。
第二洗脱成分也是标题青霉烯纯异构体(异构体B)(0.041g)，νmax(CH2Cl2)1801，1748，1728cm-1;δH(CDCl3)1.45(3H，d，J 6.5Hz)，2.12(3H，s)，4.03(1H，重叠ddd，J 1，2，4.5Hz)，4.6-4.85(2H，m)，5.2-5.45(2H，m)，5.62(1H，d，J 2Hz)，5.88-6.06(1H，m)，7.24(1H，d，J 1Hz)。
连续洗脱得到异构体混合物(0.039g)，然后得到标题青霉烯的第三个纯异构体(异构体C)(0.056g)，νmax(CH2Cl2)1802，1748，1722cm-1;δH(CDCl3)1.37(3H，d，J 6.3Hz)，2.09(3H，s)，4.08(1H，dd J 4.4，7.8Hz)，4.6-4.82(2H，m)，5.25-5.58(3H，m)，5.82(1H，d，J 4.4Hz)，5.88-6.05(1H，m)，7.28(1H，d，J 0.7Hz)。
实施例25 (5RS，6RS)-6-[(SR)-1-乙酰氧乙基]-2-(2-羟乙基硫)青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯在氩气氛下将[3-(1SR-乙酰氧乙基-4-(2-羟乙基三硫羰基)-2-氧代氮杂环丁-1-基]三苯基正膦亚基乙酸对硝基苄酯(4.47g)[按照EPO，041，768(16、12、81)所述方法制备]的二甲苯(1L)溶液加热回流5.5小时。将反应混合物蒸发至干并在硅胶上进行色谱二次，用乙酸乙酯/二氯甲烷(1∶9)和乙醚/乙酸乙酯(9∶1)洗脱，得到标题化合物(297mg)，mp151-152℃，λmax(EtOH)260nm，333nm;νmax(CHCl3)1795，1730，1690cm-1;δH(CDCl3)1.55(3H，d，J 6Hz)，2.08(3H，s)，2.14(1H，br s)，3.11-3.32(2H，m)，3.85-3.95(2H，m)，4.03(1H，dd，J 4.0和9.8Hz)，5.22和5.47(2H，ABq，J 13Hz)，5.19-5.31(1H，m)，5.76(1H，d，J 4Hz)，7.61(2H，d，J 9Hz)，8.23(2H，d J 9Hz)(实测值M+468.0647，C19H20N2O8S2要求M，468.0657)。
实施例26 (5RS)-2-苯基青霉烯-3-羧酸甲酯26a(4RS)-苯甲酰硫氮杂环丁-2-酮将硫代苯甲酸(1.52g，11mM)溶于二氯甲烷(30ml)中并将溶液冷却至-10℃。将氢氧化钠(0.44g，11mM)溶于水(30ml)中并加至上述冷却的溶液中。5分钟后，将4-乙酰氧基氮杂环丁-2-酮(1.29g，10mM)的二氯甲烷(20ml)悬浮液加至冷却的反应混合物中，然后将其加热至室温并搅拌16小时。用5M盐酸将反应混合物酸化至pH3并分离二氯甲烷层。用二氯甲烷(3×50ml)萃取水层，并与有机层合并，用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，然后在无水硫酸镁上进行干燥。过滤该二氯甲烷溶液并蒸发，得到浅黄色固体，在硅胶60上通过柱色谱纯化该固体，用乙酸乙酯己烷混合物(1∶1)洗脱。分离出标题化合物白色固体(1.54g)。νmax(CH2Cl2)1758，1670，cm-1;δH(CDCl3)7.93(2H，m，Ar)，7.63(1H，m，Ar)，7.50(2H，m，Ar)，6.55(1H，br s，N-H)，5.41(1H，dd，J 5.3，2.5Hz，4-H)，3.55(1H，ddd，J 15.2，5.2，2Hz，3-H)和3.11(1H，ddd，J 15.3，3，2.5Hz，3-H);MS(EI)m/z207。
26b(4RS)-苯甲酰硫-1-(1-羟基-1-甲酯基甲基)-氮杂环丁-2-酮将乙醛酸甲酯(1.76g，16mM)溶于干燥的苯(80ml)中并回流同时共沸除水1小时。使溶液冷却至室温并加入4-苯甲酰硫-氮杂环丁-2-酮(1.0g，4.8mM)，随后加入3滴三乙胺。将反应混合物搅拌1小时，然后蒸发，溶于甲苯(15ml)，过滤除去三乙胺盐酸盐并再次蒸发，得到标题化合物(1∶1差向异构体混合物)，该产物不需纯化就可以在下一个步骤中使用。
26c(4RS)-苯甲酰硫-1-(1-氯-1-甲酯基甲基)-氮杂环丁-2-酮将4-苯甲酰硫-1-(1-羟基-1-甲酯基甲基)氮杂环丁-2-酮差向异构体粗混合物(1∶1)(4.8mM)溶于干燥的四氢呋喃(50ml)中，并将溶液冷却至-10℃，加入2，6-卢剔啶(0.84ml)，随后加入亚硫酰氯(0.52ml)。立即产生白色沉淀并在-10℃搅拌1小时。对反应混合物进行过滤，除去卢剔啶盐酸盐，然后蒸发溶剂，剩下黄色油，从甲苯(2×10ml)中再蒸发该黄色油，除去亚硫酰氯残余物并且不用进一步纯化就可用于下一个步骤。
26d(4RS)-苯甲酰硫-1-(1-甲酯基-1-三苯基正膦亚基甲基)-氮杂环丁-2-酮将4-苯甲酰硫-1-(1-氯-1-甲酯基甲基)氮杂环丁-2-酮(4.8mM)溶于干燥的二噁烷(30ml)中并加入三苯膦(2.52g，9.6mM)。蒸发该溶液得到一种浆体。在室温搅拌该浆体并加入2，6-卢剔啶(0.67ml，5.7mM)。持续搅拌16小时，然后用乙酸乙酯(30ml)稀释该反应混合物并过滤除去2，6-卢剔啶盐酸盐。用1N盐酸(1×10ml)、盐水(1×10ml)洗涤有机层，并在无水硫酸镁上干燥。过滤该溶液并蒸发，得到棕色固体。在硅胶60上通过柱色谱纯化该固体，用乙酸乙酯-己烷混合物(1∶1)洗脱，得到标题化合物白色泡沫(1.59g)。
26e(5RS)-2-苯基青霉烯-3-羧酸甲酯将(4RS)-苯甲酰硫-1-(1-甲酯基-1-三苯基正膦亚基甲基)-氮杂环丁-2-酮(1.59g)溶于干燥的甲苯(100ml)中，并将溶液回流4小时。使反应混合物冷却并蒸发，得到膏状固体。在硅胶60上通过柱色谱纯化该膏状固体，用乙酸乙酯-己烷混合物(1∶1)洗脱，得到标题化合物(0.515g)白色固体。νmax(CHCl2)1800，1720cm-1;
δH(CDCl2)ca，7.45(5H，m，Ar)，5.77(1H，dd，J 3.9，1.8Hz，5-H)3.85(1H，dd，J 16.4，3.8Hz，6-H)，3.72(3H，s，CO2CH3)和3.59(1H，dd，J 16.5 1.8Hz，6-H);MS m/z 261，(实测值M+261.0464 C13H11NO3S要求M+261.0464)。
实施例27 (5RS)-2-(4-甲氧苯基)青霉烯-3-羧酸甲酯按照与实施例26相似的方法制备。νmax(CH2Cl2)1798，1718，cm-1，δH(CDCl3)7.51(2H，d，J 8.8Hz，Ar)，6.99(2H，d，J 8.9Hz，Ar)，5.70(1H，dd，J 3.8，1.8Hz，5-H)，3.84(3H，s，CO2CH3)，3.83(1H，dd，J 16.1，3.8Hz，6-H)，3.54(3H，s，OCH3)和3.56(1H，dd，J 16.2，1.6Hz，6-H);MS m/z291，(实测值M+291.0568，C14H13NO4S要求M+291.0565)。
实施例28(5RS)-2-(4-氯苯基)青霉烯-3-羧酸甲酯按照与实施例26相似的方法制备。νmax(CH2Cl2)1798，1720cm-1;δH(CDCl3)7.44(2H，d，J 8.6Hz，Ar)，7.37(2H，d，J 8.6Hz，Ar)，5.77(1H，dd，J 3.8，1.6Hz，5-H)，3.87(1H，dd，J 16.4，3.8Hz，6-H)，3.73(3H，s，CO2CH3)和3.60(1H，dd，J 16.4，1.6Hz，6-H);MS m/z 295，(实测值M+295.0067，C13H10NO3ClS要求M+295.0070)。
实施例29 (5RS)-2-(4-甲酯苯基)青霉烯-3-羧酸甲酯通过与实施例26相似的方法制备。νmax(CH2Cl2)1805，1728cm-1;δH(CDCl3)8.05(2H，d，J 6.8Hz，Ar)，7.52(2H，d，J 6.8Hz，Ar)，5.80(1H，dd，J 3.8，1.7Hz 5-H)，3.93(3H，s，Ar CO2CH3)，3.89(1H，dd，J 16.5，3.9Hz，6-H)，3.70(3H，s，CO2CH3)和3.62(1H，dd，J 16.48，1.8Hz，6-H);MS m/z319，(实测值M+319.0517C15H13NO5S要求M+319.0514)。
实施例30 (5RS)-2-苄基青霉烯-3-羧酸甲酯通过与实施例26相似的方法制备。νmax(CH2Cl2)1800，1718cm-1;δH(CDCl3)ca7.28(5H，m，Ph)，5.58(1H，dd，J 3.8，1.5Hz，5-H)，4.23(1H，d，J 15.3Hz，CH2-Ph)4.13(1H，d，J 15.2Hz，CH2Ph)，3.87(3H，s，CO2CH3)3.74(1H，dd，J 16.3，3.8Hz，6-H)和3.45(1H，dd，J 16.3，1.5Hz 6-H);MS m/z 275，(实测值M+275.0618C14H13NO3S要求M+275.0616)。
实施例31 (5RS)-2-(羟甲基)青霉烯-3-羧酸苄酯通过与UK2，037，277B所述相似的方法制备该标题化合物。νmax(CH2Cl2)1798，1718cm-1;
δH(CDCl3)ca 7.38(5H，m，Ph)，5.65(1H，dd，J 3.9 1.7Hz 5-H)，5.30(1H，d，J 12.7Hz，CH2Ph)，5.24(1H，d，J 12.7Hz，CH2Ph)，4.68(1H，d，J 15.7Hz，CH2OH)，4.60(1H，d，J 16Hz，CH2OH)，3.80(1H，dd，J 16.5，3.9Hz，6-H)和3.54(1H，dd，J 16.4，1.7Hz，6-H);MS m/z291(实测值M+291.0563 C14H13NO4S要求291.0565)。
实施例32(5RS)-2-(氨基甲酰氧基甲基)青霉烯-3-羧酸苄酯将(5RS)-2-羟甲基-青霉烯-3-羧酸苄酯(57mg)溶于干燥的二氯甲烷(1ml)中，并加入异氰酸三氯乙酰酯(25μl)。在氩气下、在室温搅拌反应混合物30分钟，然后用乙酸乙酯(10ml)稀释并用饱和碳酸氢钠水溶液(5ml)，水(5ml)和盐水(5ml)洗涤。在无水硫酸镁上干燥有机层并蒸发，得到棕色油。将该油溶于甲醇(1ml)，并在加入2，6-卢剔啶(46μl)后于室温搅拌5小时。然后用乙酸乙酯(10ml)稀释该反应混合物，并用5%柠檬酸(5ml)，饱和碳酸氢钠水溶液(5ml)、水(5ml)和盐水(5ml)洗涤。在无水硫酸镁上干燥有机层并蒸发，得到一种油。通过在硅胶60上的柱色谱纯化该油，用乙酸乙酯-己烷混合物(1∶1)洗脱，得到标题化合物胶质固体(23mg)。νmax(CH2Cl2)1805，1748，1715cm-1;δH(CDCl3)ca7.5-7.25(5H，m，Ph)，5.67(1H，dd，J 3.9，1.8Hz，5-H)，5-47(1H，d，J 15.5Hz，CH2OCONH2)，5.30(1H，d，J 12.5Hz，CH2Ph)，5.14(1H，d，J 12.5Hz，CH2Ph)，5.11(1H，dd，J 15.5Hz，CH2OCONH2)，4.70(2H，br s，NH2)3.80(1H，dd，J 16.5，3.9Hz，6-H)和3.53(1H，dd，J 16.4，1.7Hz，6-H);MS(NH3C.I.)MNH4+352。
实施例33(5RS)-2-(氨基甲酰氧基甲基)青霉烯-3羧酸甲酯通过与实施例32所述相似的方法制备标题化合物。νmax(CH2Cl2)1805，1745，1718，cm-1;δH(CDCl3)5.68(1H，dd，J 3.9，1.6Hz，5-H)，5.47(1H，d，J 15.4Hz，CH2OCONH2)，5.11(1H，d，J 15.4Hz，CH2OCONH2)，4.8(2H，br.s.NH2)3.84(3H，s，CO2CH3)，3.77(1H，dd，J 16.5，3.9Hz，6-H)，和3.54(1H，dd，J 16.5，1.9Hz，6-H);MS(NH3C.I.)MNH4+276。
实施例34(5RS)-2-苯基青霉烯-3-羧酸苄酯通过与实施例26所述相似的方法制备标题化合物。νmax(CH2Cl2)1800，1718cm-1;δH(CDCl3)7.50-7.15(10H，m，Phx2)，5.77(1H，dd，J 3.8，1.7Hz，5-H)，5.17(1H，d，J 12.6Hz，CH2Ph)，5.10(1H，d，J 12.6Hz，CH3Ph)，3.84(1H，dd，J 16.4，3.9Hz，6-H)和3.59(1H，dd，J 16.4，1.8Hz，6-H);MS m/z M+337，(实测值M+337.0776，C19H15NO3S要求M+337.0773)。
实施例35(5RS)-2-(4-氯苯基)青霉烯-3-羧酸苄酯按照与实施例26所述相似的方法制备标题化合物。νmax(CH2Cl2)1800，1718cm-1;
δH(CDCl3)7.45-7.15(10H，m，2xPh)，5.77(1H，dd，J 3.8，1.7Hz，5-H)，5.15(1H，d，J 12.6Hz)，CH2Ph)，5.09(1H，d，J 12.6Hz，CH3Ph)，3.84(1H，dd，J 16.4，3.8Hz，6-H)和3.60(1H，dd，J 16.4，1.8Hz，6-H);MS m/z H+371，(实测值M+371.0383，C19H14ClNO3S要求M+371.0383)。
实施例36(5RS)-2-甲基青霉烯-3-羧酸苄酯按照与实施例26所述相似的方法制备标题化合物。νmax(CH2Cl2)1798，1720-1;
δH(CDCl3)7.5-7.3(5H，m，Ph)，5.62(1H，dd，J 3.9，1.8Hz，5-H)，5.30(1H，d，J 12.4Hz，CH2Ph)，5.22(1H，d，J 12.5Hz，CH2Ph)，3.76(1H，dd，J 16.2，3.9Hz，6-H)，3.46(1H，dd，J 16.4，1.8Hz，6-H)和2.35(3H，s CH3);MS m/z M+275，(实测值M+275.0620，C14H13NO3S要求M+275.0616)。
实施例37(5RS)-2-甲基青霉烯-亚砜-3-羧酸苄酯将(5RS)-2-甲基青霉烯-3-羧酸苄酯(27.5mg)溶于二氯甲烷(5ml)并冷却至0℃。加入间氯过苯甲酸(19mg)并在0℃搅拌反应混合物2小时。加入二氯甲烷(60ml)并用10%硫酸钠水溶液(15ml)、10%碳酸钠水溶液(15ml)和盐水(20ml)洗涤有机相，然后在无水硫酸镁上干燥。将溶液过滤并蒸发，得到标题化合物澄清油(12mg)(异构体比例5∶1)δH(CDCl3)，7.5-7.3(5H，m，Ph)，5.35(2H，s，CH2Ph)，4.97(1H，dd J 5.5，3.0Hz，5-H，少数异构体)，4.82(1H，dd，J 5.7，3.3Hz，5-H，主要异构体)，3.64(1H，dd，J 16.9，3.4Hz，6-H主要异构体)3.46(1H，dd，J 16.8，5.7Hz，6-H主要异构体)，2.57(3H，s，CH3主要异构体)和2.42(3H，s，CH3少数异构体);MS m/z M+291(实测值M+291.0566，C14H13NO4S要求291.0565)。
实施例38(5RS)-2-(甲氧基甲氧基甲基)青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯在氩气下，将醇(实施例9)(100mg，0.3mmol)、2，6-卢剔啶(320mg，3mmol)和溴甲基甲醚(375mg，3mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液回流1小时。用碳酸氢钠溶液随后是柠檬酸溶液洗涤该反应混合物，然后干燥、蒸发。在硅胶上进行色谱，用乙酸乙酯/石油混合物洗脱，得到标题化合物浅黄色无定形固体(65mg)。m.p.94-5℃(从乙酸乙酯/石油中得到的浅黄色针状物)。λmax(EtOH)261(12，400)，318(10，000)nm.νmax.(CHCl3)1795，1705，1580cm-1.δH(CDCl3)3.36(3H，s)，3.49(1H，dd，J＝2.16Hz)，3.83(1H，dd，J＝4，16Hz)，4.62(2H，s)，4.64和4.88(2H，ABq的中心，J＝16Hz);5.20和5.44(2H，ABq的中心，J＝13Hz)，5.65(1H，dd，J＝2，4Hz)，7.59(2H，d，J＝8Hz)，8.20(2H，d，J＝8Hz).(实测值C，50.26;H，4.14;N，7.14;S，8.60%.C16H16N2O7S要求C，50.52;H，4.24;N，7.37;S，8.43%)。
实施例39(5RS)-2-(4-硝基苄氧羰基氨甲基)青霉烯-3-羧酸丙酮酯按照与实施例26所述相似的方法制备标题化合物;m.p.(二噁烷/石油)180-2°;νmax.(液体石蜡)1810，1735，1700cm-1;λmax.(EtOH)317nm(ε8740);δH(d6DMSO)2.10(3H，s)，3.48(1H，dd，J 2.16Hz)，3.87(1H，dd，J 4.16Hz)，4.38(2H，d，J 6Hz)，4.83(2H，s)，5.21(2H，s)，5.70(1H，dd，J 2，4Hz)，7.60(2H，d，J 9Hz)，8.04(1H，t，J 6Hz)，8.23(2H，d，J 8Hz);m/z(实测值M+435.0736C18H17N3O8S要求M+435.0736);(实测值C，49.6;H，4.0;N，9.5%.C18H17N3O8S要求C，49.7;H，3.9;N，9.7%)。
实施例40 (5RS)-2-(4-硝基苄氧羰基氨甲基)青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯通过与实施例26所述相似的方法制备标题化合物;νmax.(CHCl3)1795，1720cm-1;m/zM+514(实测值M+514.0776.C32H18N4O9S要求514.0794)。
实施例41(5R，6S)-6-[1-(R)-羟乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯41a[(3S，4R)-3-[1-R-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)乙基)]-2-氧代-4-(三苯甲基硫)氮杂环丁-1-基]三苯基正膦亚基乙酸烯丙酯将(3S，4R)-3-[1-R-(叔丁二甲基甲硅烷氧基)乙基]-4-(三苯甲基硫)氮杂环丁-2-酮(1g)和乙醛酸烯丙酯(342mg)的苯(10ml)溶液在迪安-斯达克榻分水器上回流1小时。将混合物冷却至室温，用三乙胺(0.1ml)处理，放置1 1/2 小时并蒸发。将残余物溶于THF(18ml)，冷却至-20℃并用2，6-卢剔啶(0.47ml)和亚硫酰氯(0.234ml)处理。升至室温后，经硅藻土过滤该混合物并蒸发滤液。将残余物溶于苯(50ml)并蒸发，然后用二噁烷(1.5ml)、2，6-卢剔啶(0.47ml)和三苯膦(4g)处理，并在40℃搅拌过夜。将该混合物溶于乙酸乙酯(100ml)，用0.5N盐酸(100ml)和水洗涤、干燥并蒸发。在硅胶上对残余物进行色谱，用乙酸乙酯/己烷1∶3洗脱，得到标题化合物浅黄色泡沫(1.2g)。νmax.(CHCl3)1750，1610cm-1。
41b(5R，6S)-6-[1-R-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯将上述41a的正膦(1.2g)溶于二氯甲烷(1.5ml)/甲醇(10ml)中，然后用吡啶(0.146ml)和0.15M硝酸银的甲醇(12.1ml)溶液处理。在室温搅拌0.5小时，蒸发该溶液，并将残余物溶于氯仿(100ml)并蒸发。将残余物重复溶于二氯甲烷(17.5ml)、冰冷、然后顺序地用乙酸甲酯酐(1.1ml)、4-二甲基氨吡啶(0.17g)和三乙胺盐酸盐(1.93g)处理。强烈搅拌1/2小时后，经硅藻土过滤该混合物，滤液用乙酸乙酯(100ml)稀释，用0.5N盐酸(100ml)，水(50ml)和碳酸氢钠溶液(50ml)洗涤，干燥并蒸发。将残余物溶于小体积甲苯，在室温放置1 1/2 小时并装入二氧化硅柱。用5%然后是10%乙酸乙酯/己烷洗脱，得到标题化合物(437mg)。从己烷/戊烷中结晶得到的无色针状物，m.p.91-3℃。(实测值C，55.3，H，7.6，N3.8S，8.7%.C17H27NO4SSi要求C，55.3，H，7.4，N 3.8 S 8.7%)νmax.(KBr)1771，1705，1650，1557cm-1。
41c(5S，6S)-6-[1-R-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯将(5R，6S)-6-[1-R-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯(247mg)溶于100ml乙酸乙酯中，并放入Hanovia光化学反应器的容器中。用氩气鼓泡搅拌着的溶液2小时，然后用中压UV灯经Pyrex过滤器照射该溶液1/2小时。蒸发该溶液并在二氧化硅上对残余物进行色谱，用5%然后是8%乙酸乙酯/己烷洗脱。洗脱的第一青霉烯是标题化合物固体(112mg)。
νmax.(KBr)1796，1712，1650，1557cm-1，FAB MS(基体3-NOBA/Na)m/z 392(100%，MNa+).[α]21D-214°(c.68;CHCl3)。
41d(5S，6S)-6-[1-(R)-羟乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯用乙酸(0.036ml)，然后是1M氟化四丁铵的四氢呋喃(0.2ml)处理(5S，6S)-6-[1-R-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯(11mg)。在室温搅拌4小时，用乙酸乙酯(5ml)稀释该混合物，用水(5ml)，碳酸氢钠溶液(5ml)和水(5ml)洗脱、干燥并蒸发。在二氧化硅上对残余物进行色谱，用乙酸乙酯/己烷1∶2洗脱，得到标题化合物无色胶(6.4mg)。νmax.(CHCl3)3600，3500，1795，1710，1650，1555cm-1.δH(CDCl3)1.48(3H，d，J 6Hz)，1.83(1H，宽 s)，3.89(1H，ddd，J 10，4和7Hz)，4.2-4.5(1H，宽 m)，4.6-4.8(2H，m)，5.2-5.5(2H，m)，5.84(1H，d，J 4Hz)，5.85-6.0(1H，m)，7.31(1H，d，J 7Hz)，MS(E.I.)m/z 255(10%，M+)，170(100%)，112(80%)。
实施例42 (5SR，6RS)-6-乙基青霉烯-3-羧酸烯丙酯
42a(3RS，4SR)-3-乙基-4-三苯甲基硫-N-叔丁基二甲基甲硅烷基-氮杂环丁-2-酮在氩气下，将4-三苯甲基硫-N-叔丁基二甲基甲硅烷基-氮杂环丁-2-酮(3g)的干燥四氢呋喃(20ml)溶液滴加到冷却至-76°(浴温)的LDA(二异丙胺1ml+0.83M正丁基锂8.6ml)的四氢呋喃(15ml)溶液中。15分钟后，加入乙基碘(3ml)。0.5小时后用乙酸乙酯稀释该反应产物，随后顺序地用饱和氯化铵溶液和盐水洗涤，接着进行干燥(MgSO4)和蒸发。在SiO2上进行色谱，用正己烷/乙酸乙酯(20∶1)洗脱，得到标题化合物(3.02g)，δH(CDCl3)0.22(6H，s)，0.68(3H，t，J 7.2Hz)，0.90-1.12(11H，m)，3.04-3.12(1H，m)，3.9(1H，d，J 1.63Hz)，7.18-7.5(15H，m)。
42b(5SR，6RS)-6-乙基-青霉烯-3-羧酸烯丙酯通过标准方法(JACS 1979，101(21)，p6306-6310和实施例26b、c、d)将(3RS，4SR)-3-乙基-4-三苯甲基硫-N-叔丁基二甲基甲硅烷基-氮杂环丁-2-酮转化成正膦。除了在进行色谱前需要在乙酸乙酯中加热至40℃0.5小时对反应后处理外，最终环化与实施例24c相似。用乙酸乙酯/正己烷(1∶4)洗脱，得到标题化合物油，产率48%，νmax.(KBr)1778，1710，1648cm-1δH(CDCl3)1.08(3H，t，J 7.4Hz)，1.8-2.06(2H，m)，3.77(1H，m)，4.61-4.82(2H，m)，5.24-5.42(2H，m)，5.50(1H，d，J 1.6Hz)，5.81-6.04(1H，m)，7.24(1H，d，J 1.2Hz)(实测值M+239.0618，C11H13NO3S要求M，239.0616)。
实施例43 (5SR，6SR)-6-乙基青霉烯-3-羧酸烯丙酯将[5SR，5RS]-6-乙基-青霉烯-3-羧酸烯丙酯(0.024g)甲苯溶液加热至100℃4.5小时，此时Hplc表明顺∶反异构体混合物接近1∶1。蒸发反应物并用乙腈/水(0.47∶1)作为洗脱液进行制备Hplc，得到标题化合物蜡状固体(2.6mg)，δH(CDCl3)1.03(3H，t，J 7.37Hz)，1.8-2.14(2H，m)，3.86-3.94(1H，m)，4.66-4.82(2H，m)，5.22-5.45(2H，m)，5.83(1H，d，J 4.13)，5.83-6.04(1H，m)，7.25(1H，d，J 0.82Hz)。
实施例44 (5RS，6SR)-6-[(RS)-1-乙酰氧基乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯44a N-叔-丁基二甲基甲硅烷基-3-(1-羟乙基)-4-(三苯基甲基硫)氮杂环丁-2-酮
将N-叔丁基二甲基甲硅烷基-4-(三苯甲基硫)氮杂环丁-2-酮(3.0g;6.536mM)溶于干燥THF(75ml)并在氩气氛下冷却至-78℃。加入二异丙氨基锂溶液(1.5M在庚烷/THF/乙苯中的溶液;5.23ml;7.84mM)，并将溶液在-78℃搅拌30分钟。加入乙醛(0.438ml)的THF(5ml)溶液，并在-78℃持续搅拌30分钟。通过加入冰醋酸(2ml)使反应淬火，并且反应溶液在乙酸乙酯和水之间分配。用1N HCl、水、饱和NaHCO3溶液、盐水洗涤有机溶液，干燥(MgSO4)并蒸发。在硅胶(60g)上对残余物进行色谱，用10-25%乙酸乙酯-己烷梯度洗脱，得到标题化合物的非对映异构体混合物白色泡沫(1.15g)。
44b 3-(1-羟乙基)-4-(三苯甲基硫)氮杂环丁-2-酮
将44a制备的甲硅烷化的氮杂环丁酮的非对映异构体混合物(3.68g)溶于甲醇(100ml)中，并且在氩气氛下、在-10℃与氟化钾(0.467g)的甲醇溶液一起搅拌2小时。反应溶液在乙酸乙酯和水之间分配，用盐水洗涤有机相，干燥(MgSO4)并蒸发。
经硅胶柱色谱得到标题氮杂环丁酮非对映异构体混合物白色泡沫(2.21g)，νmax.(CH2Cl2)3600，3400，1770cm-1。
44c 3-(1-乙酰氧乙基)-4-(三苯甲基硫)氮杂环丁-2-酮
将44b制备的氮杂环丁酮(2.21gm)溶于干燥的二氯甲烷中，并在冰浴中冷却，同时搅拌。加入三乙胺(0.786ml)、4-二甲氨基吡啶(0.069g)和乙酸酐(0.642ml)并在5℃搅拌该反应溶液1.5小时。然后用1N HCl，水，饱和NaHCO3溶液盐水洗涤该溶液、干燥(MgSO4)和蒸发。进行二氧化硅胶柱色谱，得到标题氮杂环丁酮白色泡沫(1.89gm)，νmax.(CH2Cl2)3400，1780，1740cm-1。
44d [3-(1-乙酰氧乙基)-4-三苯甲基硫-2-氧代氮杂环丁-1-基]三苯基正膦亚基乙酸烯丙酯
按照实施例1的方法，让乙醛酸烯丙酯单水合物与44c制备的氮杂环丁酮非对映异构体混合物(0.092g)反应，得到标题正膦白色泡沫(0.870g)，νmax(CH2Cl2)1755，1622cm-1。
44e(5RS，6SR)-6-[(RS)-1-乙酰氧乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯
根据实施例24c所述方法，使44d制备的非对映异构正膦(0.800gm)反应，得到标题青霉烯，通过硅胶色谱纯化该产物。用10→25%乙酸乙酯-己烷梯度洗脱，得到标题化合物(5RS，6SR，8RS)异构体作为第一洗脱成份(0.036g);λmax.(EtOH)314nm(e 5754)，258nm(ε3137);νmax.(CH2Cl2)1800，1742，1722cm-1;δH(CDCl3)，1.42(3H，d，J 6.44Hz)，2.09(3H，s)，3.94(1H，dt，J 1.0，1.8，7.7Hz)，4.6-4.85(2H，m)，5.2-5.45(3H，m)，5.71(1H，d，J 1.8Hz)，5.85-6.05(1H，m)，7.26(1H，d，J 1.0Hz);(实测值m/e 297.0675.
C12H15NO5S要求M+297.0671)。
连续洗脱得到非对映异构体混合物(0.125gm)，然后纯的(5RS，6SR，8SR)异构体(0.052gm)，该异构体与实施例24c得到的异构体B相对应。
实施例45 (5S)-2-苯基青霉烯-3-羧酸甲酯如实施例23，在手性固定相对实施例26所述的外消旋甲酯进行制备hplc，得到所要的(S)-对映体[α]25D-141°。
实施例46 (5RS)-2-(乙基硫)青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯按照GB2，036，015A所述制备该化合物，得到标题化合物，m.p.131°，λmax(EtOH)263和340nm;νmax(CHCl3)1790，1690cm-1;δH(CDCl3)1.36(3H，t，J 8Hz)，2.96(2H，q，J 8Hz)，3.46(1H，dd，J 16，2Hz)，3.83(1H，dd，J 16，4Hz)，5.18和5.45(2H，ABq，J 14Hz)，5.68(1H，dd，J 4，2Hz)，7.59(2H，d，J 9Hz)，8.17(2H，d，J 9Hz)(实测值M+366.0354，C15H14N2O5S2要求366.0343)。
实施例47 (5RS)-2-(甲基硫)青霉烯-3-羧酸苄酯按照GB2，036，015A所述制备该化合物，得到标题化合物，m.p.136-137°;λmax257和339nmνmax(CH2Cl2)1795，1685cm-1;δH(CDCl3)2.50(3H，s)，3.43(1H，dd，J 16，2Hz)，3.79(1H，dd，J 4，2Hz)，7.20-7.50(5H，s)(实测值C，54.6;H，4.4;N，4.6;S，20.8%).C14H13NO3S2要求C，54.7;H，4.2;N，4.6;S，20.9%)。
实施例48 (5RS)-2-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基甲基)青霉烯-3-羧酸苄酯按照GB2，037，277B所述制备该化合物，得到标题化合物，m.p.89-89°;λmax(EtOH)265和323nm;νmax(CHCl3)1785，1700，1580cm-1;δH(CDCl3)1.04(9H，s)，3.44(1H，dd，J 2，16Hz)，5.56(1H，dd，J，2，4Hz)，7.20-7.78(15H，m)(实测值C，67.8;H，5.90;N，2.87;S，6.10%).C30H31NO4SSi要求C，68.02;H，5.90;N，2.64;S，6.05%)。
实施例49(5S，6S，8R)-2-羟甲基-6-(1-羟乙基)青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯49a(5S，6S，8R)-2-羟甲基-6-[1-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)乙基]青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯通过与实施例41c所述相似的方法对(5R，6S，8R)-2-羟甲基-6-[1-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)乙基]青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯(J.Antibiotics，1983，36，938)(1g)进行感光异构，得到标题化合物浅黄色固体(313mg)，νmax(CH2Cl2)1795cm-1;δH(CDCl3)0.13(6H，s)，0.88(9H，s)，1.45(3H，d，J 6Hz)，3.37(1H，t，J 7Hz)，3.91(1H，dd，J 10，4Hz)，4.41(1H，m)，4.66(2H，d，J 7Hz)，5.23(1H，d，J 13.7Hz)，5.49(1H，d，J 13.7Hz)，5.71(1H，d，J 4Hz)，7.62(2H，d，J 8.7Hz)和8.25(2H，d J 8.7Hz);m/zM+494。
49b(5S，6S，8R)-2-羟甲基-6-(1-羟乙基)青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯将(5S，6S，8R)-2-羟甲基-6-[1-叔-(丁基二甲基甲硅烷氧基)乙基]青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯(98.8mg)溶于干燥四氢呋喃(1ml)和乙酸(136μl)中，并加入1M氟化四丁铵的四氢呋喃(780μl)溶液。在室温搅拌反应混合物16小时。用乙酸乙酯(20ml)稀释反应混合物并用饱和碳酸氢钠水溶液(1×20ml)和盐水(1×20ml)洗涤该溶液。在无水硫酸镁上干燥有机层，过滤后进行真空蒸发，得到黄色油。在硅胶60上对该粗产物进行色谱，用乙酸乙酯/己烷(4∶1)洗脱，得到标题化合物浅黄色固体(48mg)。νmax(CH2Cl2)1792cm-1;δH(CDCl3)1.5(3H，d，J 6.2Hz)2.54(2H，brs)，3.89(1H，dd，J 10.3，4.1Hz)，4.39(1H，m)，4.64(1H，d，J 15.8Hz)，4.72(1H，d，J 15.8Hz)，5.23(1H，d，J 13.8Hz)，5.46(1H，d，J 13.7Hz)，5.73(1H，d，J 4.0Hz)，7.62(2H，d，J 8.7Hz)和8.22(2H，d，J 8.7Hz);m/z M+380。
实施例50 (5S，6S)-6-[(R)-1-乙酰氧乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯按照实施例23所述，对实施例24的外消旋酯(异构体A)进行制备手性hplc，得到标题化合物[α]24D-204°。
实施例51 (5RS)-2-(羟甲基)青霉烯-3-羧酸甲酯通过与GB2，037，277B所述相似的方法制备标题化合物。νmax(CH2Cl2)1978，1715cm-1，δ(CDCl3)3.55(1H，dd，J 16.4，1.6Hz，6-H)，3.80(1H，d，J 3.9Hz，6-H)，3.88(3H，s，CO2CH3)，4.64(2H，br s，CH2-OH)，5.69(1H，dd，J 3.9，1.6Hz，5-H).实测值M+，215.0255.C8H9NO4S要求M，215.0252。
实施例52 (5RS，6RS)和(5RS，6SR)-2-乙基硫-6-乙基青霉烯-3-羧酸4-硝基苄酯a)1-乙酰氧基丁-1-烯在120℃搅拌1-丁醛(74ml)、乙酸酐(119ml)和乙酸钾(10.1g)的混合物17小时。然后将混合物冷却，在碳酸氢钠水溶液中和并分离有机相，用无水硫酸镁干燥，得到浅黄色油，蒸馏该油得到标题化合物(7.5g)，b.p.122-4℃，νmax(膜)1755，1678cm-1。
b)(3RS，4RS)和(3RS，4SR)-4-乙酰氧基-3-乙基氮杂环丁-2-酮在室温搅拌和混合1-乙酰氧基丁-1-烯(2.28g)和异氰酸氯磺酰酯(2.83g)2.5小时。在冰浴中冷却该反应混合物，并将水与碳酸氢钠/亚硫酸钠(35∶1)的混合物加至水/二氯甲烷溶液中。分离有机相并干燥(无水硫酸镁)、过滤并真空除去溶剂。在Kieselgel-60上对粗产品进行色谱，用乙酸乙酯-石油混合物(2∶3至1∶1)洗脱，得到标题化合物异构体混合物(1.1g);νmax(CHCl3)3420，1785，1725cm-1。
c)(3RS，4RS)和(3RS，4SR)-3-乙基-4-(乙基咕吨基)氮杂环丁-2-酮5℃的(3RS，4RS)和(3RS，4SR)-4-乙酰氧基-3-乙基氮杂环丁-2-酮(1.0g)的混合物的二氯甲烷(25ml)溶液，与5℃的乙基黄原酸钾(1.15g)反应，并剧烈搅拌该混合物。15分钟后，混合物升温至室温并继续搅拌1小时。分离有机相并用二氯甲烷(3×25ml)萃取水相。合并有机层，用无水硫酸镁干燥，过滤并蒸发，得到标题化合物黄色油(1.3g);λmax(εm)301nm(14，400)，237(3，500);νmax(CHCl3)3410，1770cm-1;δH(CDCl3)1.10(3H，t，J 8Hz)，1.40(3H，t，J 8Hz)1.65-2.12(2H，m)，3.07-3.36(1H，m)，3.40(2H，q，J 8Hz)，5.36(1H，d，J 2Hz)，6.60(1H，br s).实测值M+，235.0153.C8H13NOS3要求M，235.0160]d)(5RS，6RS)和(5RS，6SR)-2-乙基硫-6-乙基青霉烯-3-羧酸4-硝基苄酯通过与实施例26所述相似的方法将上述制备的(3RS，4RS)和(3RS，4SR)-3-乙基-4-(乙基咕吨基)氮杂环丁-2-酮的混合物转化成标题化合物;νmax(CHCl3)1790，1695，1605cm-1;λmax(C2H5OH)338nm(11，300)，261(17，200);实测值M+394.0672.C17H18N2O5S2要求M394.0654)。
实施例53 (5RS，6SR)-6-[(SR)-1-乙酰氧乙基]-2-(乙基硫)青霉烯-3-羧酸4-硝基苄酯在氩气氛下，将[3-[(RS)-1-乙酰氧乙基]-4-(乙基三硫羰基)-2-氧代氮杂环丁-1-基](三苯基正膦亚基)乙酸对硝基苄酯(1.0g)(由EP0041768所述方法制备)的二甲苯(1L)溶液加热回流10小时。将反应混合物蒸发干燥并在硅胶上进行色谱，用乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱，得到标题化合物(120mg)，mp131-3℃;λmax(C2H5OH)334nm(ε11，000)和260nm(ε16，200);νmax(CHCl3)1795，1730，1695cm-1，δH(CDCl3)1.39(3H，t，J 7.4Hz)，1.54(3H，d，J 6.0Hz)，2.06(3H，s)，2.96-3.13(2H，m)，4.01(1H，dd，J 4.0和9.9Hz)，5.21和5.47(2H，ABq，J 13.7Hz重叠aq(J 7.4Hz)在5.26，以及3H)，5.75(1H，d，J 4Hz)，7.61(2H，d，J 8.7Hz)，8.22(2H，d，J 8.7Hz)，实测值M+452.0729;C，50.5;H，4.2;N，6.1;S，13.8.C19H20N2O2S2要求M 452.0712;C，50.5;H，4.4;N，6.2;S，14.2。
实施例54 N-苄基(5RS)-青霉烯-3-甲酰胺
在有10%钯-碳催化剂(30mg)存在下，将(5RS)-青霉烯-3-羧酸4-硝基苄酯[U.K Pat.Appl.2，036，015(Beecham Group)]在二噁烷(5ml)和水(1.25ml)中的溶液在大气压下氢化2小时。产物经硅藻土过滤并将碳酸钾(8mg)的水(5ml)溶液加至滤液中。0.25小时后，减压蒸发该溶液直至刚好混浊。然后用乙酸乙酯洗涤两次。用氯化钠使该钾盐水溶液饱和，然后与乙酸乙酯/四氢呋喃1∶1(10ml)一起强烈搅拌。用0.5N盐酸将该混合物酸化至pH2.0并分离有机相，干燥并蒸发。在-10至-15℃，氩气氛下，在干燥四氢呋喃(2ml)中搅拌该粗游离酸残余物并用三乙胺(18mg，24μl)处理，5分钟后用氯甲酸乙酯(19mg，17μl)处理。放置0.25小时使混合酐形成，然后加入苄胺(11mg，12μl)。在-10至-15℃搅拌该反应混合物1.5小时，然后蒸发。残余物在盐水和乙酸乙酯之间分配;分离有机相、用盐水洗涤、干燥并蒸发。用氯仿作为洗脱液在硅胶60上对残余物胶进行色谱，随后从乙酸乙酯/己烷中结晶，得到苄酰胺(11mg);m.p.85-86℃;νmax(CHCl3)3420，2900，1785，1660，1580和1515cm-1;δH(CDCl3)3.64(1H，ddd，J 16.6，2.0和1.1Hz，6-H)，3.85(1H，dd，J 16.6和3.8Hz，6-H)，4.49(1H，dd，J 15.0和5.7Hz，PhCH)，4.60(1H，dd，J 15.0和6.1Hz，PhCH)，5.82(1H，dd，J 3.8和2.0Hz，5-H)，6.78(1H，br，NH)，7.16(1H，s，2-H)，和7.20-7.40(5H，m，Ary1-H);MH+(NH3DCI)，m/z261。
实施例55 1-[(5RS)-青霉-2-烯-3-羰基]吡咯烷
采用实施例54的方法，由吡咯烷无色胶制备青霉烯酰胺;νmax(CHCl3)2970，2880，1790，1610和1545cm-1;δH(CDCl3)1.80-2.07(4H，m，吡咯烷-H′s)，3.51-3.75(4H，m，吡咯烷-H′s)3.58(1H，dt，J 16.5 & 1.8Hz，6-H)，3.81(1H，ddd，J 16.5，3.8 & 0.6Hz，6-H)，5.83(1H，dd，J 3.8 & 1.8Hz，5-H)和7.10(1H，s，2-H);[实测值M+，224(EI).C10H12N2O2S要求M，224]。
实施例56 (5RS)-N-苯基青霉-2-烯-3-甲酰胺(carboxamide)在有10%钯-碳催化剂(50mg)存在下，将(5RS)-青霉烯-3-羧酸4-硝基苄酯(50mg)在二噁烷(10ml)和水(2.5ml)中的溶液在大气压下氢化2小时。产物经硅藻土过滤并将碳酸钾(14mg)的水(5ml)溶液加入滤液。0.25小时后，减压蒸发该溶液直至刚好混浊，然后用乙酸乙酯洗涤两次。用氯化钠使该钾盐水溶液饱和，然后与乙酸乙酯/四氢呋喃1∶1(20ml)一起强烈搅拌。用0.5N盐酸将该混合物酸化至pH2.0并分离有机相、干燥并蒸发。在-15℃、氩气氛下，在干燥THF(2ml)中的搅拌粗酸溶液，加入三乙胺(27μl)，5分钟后加入二苯基膦酰氯(40μl)。放置15分钟使混合酸酐形成，然后加入苯胺(18μl)和三乙胺(27μl)。2小时内使反应混合物热至室温，然后对其进行蒸发干燥。残余物在乙酸乙酯和盐水之间分配;分离有机相，用盐水洗涤、然后在硫酸钠上面干燥并蒸发得到一种胶，用乙酸乙酯/己烷(3∶7)作为洗脱液在硅胶60上对该胶进行色谱，得到青霉烯酰胺(9mg，23%);m.p.139-141℃(乙酸乙酯/己烷);νmax(CHCl3)3420，1790，1675，1605，1575，1530和1500cm-1;δH(CDCl3)3.73(1H，ddd，J 16.4，2.0 & 1.1Hz，6-H)，3.93(1H，dd，J 16.4 & 3.8Hz，6-H)，5.91(1H，dd，J 3.8 & 2.0Hz，5-H)，7.13(1H，t，J 7.8Hz，Ar-H)，7.24(1H，s，2-H)，7.34(2H，t，J 7.8Hz，Ar-H)和7.57(2H，d，J 7.8Hz，Ar-H).[实测值C，57.8;H，4.1;N，11.1%;M+246.0462(EI).C12H10N2O2S要求C，58.5;H，4.1;N，11.4%;M 246.0463]。
实施例57 (5RS)-N-苄基-N-甲基青霉-2-烯-3-甲酰胺采用实施例56的方法，以22%的产率，由N-甲基苄胺制备青霉烯酰胺无色胶;νmax(CHCl3)3000，1795，1625和1550cm-1;δH(CDCl3)3.02(3H，s，NCH3)，3.58(1H，d，J 16.4Hz，6-H)，3.81(1H，dd，J 16.4 & 3.7Hz，6-H)，4.70(2H，s，PhCH2)，5.80(1H，br s，5-H)和7.20-7.45(6H，m，2-H和Ar-Hs).[实测值M+，274(NH3DCI).C14H14N2O2S要求M，274]。
实施例58 (5RS)-N，N-二乙基青霉-2-烯-3-甲酰胺采用实施例56的方法，用二乙胺制备青霉烯酰二乙胺(24%)无色胶;νmax(CHCl3)3000，2950，1800，1620和1550cm-1;δH(CDCl3)1.19(6H，t，J 7.1Hz，NCH2CH3)，3.46(4H，d，J 7.1Hz，NCH2CH3)，3.58(1H，ddd，J 16.0，2.0 & 1.2Hz，6-H)，3.82(1H，ddd，J 16.6，3.9 & 0.6Hz，6-H)，5.82(1H，dd，J，3.9 & 2.0Hz，5-H)和6.82(1H，s，2-H).[实测值M+，226(EI).C10H14N2O2S要求M，226]。
实施例59 (5RS)-N-(4-甲氧苯基)青霉-2-烯-3-甲酰胺采用实施例56的方法，用茴香胺生产青霉烯酰胺，产率49%;m.p.129-132℃(乙酸乙酯/己烷);νmax(CHCl3)3420，3010，2960，2940，2850，1785，1670，1600，1575和1515cm-1;δH(CDCl3)3.71(1H，ddd，J 16.9，1.9 & 1.1Hz，6-H)，3.80(3H，s，OCH3)，3.91(1H，ddd，J 16.9，3.9 & 0.6Hz，6-H)，5.90(1H，dd，J 3.9 & 1.9Hz，5-H)，6.87(2H，d，J 9.0Hz，Ar-H)，7.21(1H，s，2-H)，7.48(1H，d，J 9.0Hz，Ar-H)和8.21(1H，br s，NH).[实测值C，56.7;H，4.4;N，10.6%;M+，276(EI).C13H12N2O3S要求C，56.5;H，4.4;N，10.2%;M，276]。
实施例60 N-[(5RS)-青霉-2-烯-3-羰基]吗啉采用实施例56的方法，由吗啉制备青霉烯酰胺无色胶;νmax(CHCl3)3000，2980，2940，2870，1795，1620和1550cm-1;δH(CDCl3)3.61(1H，dt，J 15.9 & 2.0Hz，6-H)，3.60-3.85(8H，m，吗啉-H′s)，3.84(1H，dd，J 15.9 & 3.9Hz，6-H)，5.83(1H，dd，J 3.9 & 2.0Hz，5-H)和6.97(1H，s，2-H).[实测值M+，240(EI).C10H12N2O3S要求M，240]。
实施例61 (5RS)-N-(吡啶-3-基甲基)青霉-2-烯-3-甲酰胺采用实施例56的方法，由3-吡啶甲胺制备青霉烯酰胺无色固体(30%);m.p.146℃(分解);νmax(CHCl3)3430，3000，1790，1665，1580和1520cm-1;δH(CDCl3)3.66(1H，ddd，J 16.8，2.0 & 0.8Hz，6-H)，3.86(1H，dd，J 16.8 & 3.8Hz，6-H)，4.52和4.61(2H，2dd，J 17.0 & 5.9Hz，NCH2)，5.84(1H，dd，J 3.8 & 2.0Hz，5-H)，6.88(1H，v，br，NH)，7.18(1H，s，2-H)，7.29(1H，dd，J 8.0 & 4.6Hz，pyr 5-H)，7.70(1H，br d，J 8.0Hz，pyr 4-H)，8.53(1H，d，J 4.6Hz，pyr 6-H)和8.58(1H，d，J 1.0Hz，pyr 2-H).[实测值C，55.4;H，4.0;N，15.7%;M+，261.0571].C12H11N3O2S要求C，55.2;H，4.2;N，16.1%;M，261.0572]。
实施例62 3-[(5RS)青霉-2-烯-3-羰基氨基]丙酸甲酯采用实施例56的方法，用β-氨基丙酸甲酯(通过由其盐酸盐与三乙胺的四氢呋喃溶液一起搅拌1小时制备)制备标题酰胺无色胶，产率37%;νmax(CHCl3)3440，3000，2960，1795，1740，1665，1580和1520cm-1;δH(CDCl3)2.60(2H，t，J 6.1Hz，CH2CO)，3.62(2H，q，J 6.1Hz，CH2N)，3.63(1H，d，J 16.6Hz精细的偶合，6-H)，3.72(3H，s，OCH3)，3.86(1H，dd，J 16.6 & 3.9Hz，6-H)，5.82(1H，dd，J 3.9 & 2.0Hz，5-H)，6.90(1H，br，NH)和7.11(1H，s，2-H).实测值M+256.0517.C10H12N2O4S要求256.0518。
实施例63 (5RS)-N-叔丁基青霉-2-烯-3-甲酰胺采用实施例56的方法，由叔丁胺制备青霉烯叔丁酰胺，产率19%;m.p.116-119℃;νmax(CHCl3)3420，2980，1780，1660，1580和1520cm-1;δH(CDCl3)1.40(9H，s，t-丁基)，3.63(1H，d，J 16.6Hz精细的偶合，6-H)，3.83(1H，dd，J 16.6 & 3.8Hz，6-H)，5.82(1H，dd，J 3.8 & 2.0Hz，5-H)，6.37(1H，brs，NH)和7.02(1H，s，2-H).实测值C，52.5;H，6.3;N，12.2%.C10H14N2O2S要求C，53.1;H，6.3;N，12.4%。
实施例64 (5RS)-2-苄基青霉烯-3-羧酸苄酯采用与实施例26相似的方法制备标题化合物。δH(CDCl3)3.43(1H，dd，J 16.4 & 1.6Hz，6-H)，3.73(1H，dd，J 16.4 & 3.9Hz，6-H)，4.11 & 4.22(2H，ABq，J 15.3Hz，2-CH2)，5.25 & 5.35(2H，ABq，J 12.5Hz，OCH2)，5.57(1H，dd，J 3.9 & 1.6Hz，5-H)，7.20-7.47(10H，m，Ar-Hs).实测值M+，351.0921.C20H17NO3S要求M，351.0929。
实施例65 (5S，6S)-6-[(R)-1-(氨基甲酰氧基)乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯将(5S，6S)-6-[(R)-1-羟乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯(100mg)溶于乙酸乙酯(0.3ml)和异氰酸三氯乙酰酯(0.3ml)中并放置5小时。用乙酸乙酯(20ml)稀释该混合物，并用碳酸氢钠溶液洗涤、干燥并蒸发。将残余物的氯仿溶液装入二氧化硅柱，用乙酸乙酯/己烷1∶1慢慢洗脱，得到标题化合物固体(95mg)。从乙酸乙酯/己烷中结晶得到无色针状物，m.p.161-3℃;[α]21D-290°(c 0.7;CHCl3);νmax(KBr)3439，3357，3291，3211，1776，1717，1661，1620，1553cm-1;δH(CDCl3)1.54(3H，m，J 6.3Hz)，4.06(1H，dd，J 9.8 & 3.6Hz)，4.60(2H，宽s)，4.6-4.8(2H，m)，5.1-5.4(3H，m)，5.83(1J，d，J 4Hz)，5.8-6.1(1H，m)，7.32(1H，d，J 0.8Hz);λmax(C2H5OH)254nm(ε2856)，312nm(ε7788);m/z(FAB，基质 3-NOBA/Na)321(MNa+，65%)。
实施例66 (5S，6S)-6-[(R)-1-苯甲酸乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯将(5S，6S)-6-[(R)-1-羟乙基)青霉烯-3-羧酸烯丙酯(100mg)溶于二氯甲烷(5ml)中，搅拌并冰冷。用三乙胺(0.42ml)、4-二甲氨基吡啶(催化量)和苯甲酰氯(0.33ml)处理该溶液并在室温搅拌2小时。用乙酸乙酯(50ml)稀释该产物，并用0.5N HCl(50ml)、水和NaHCO3溶液洗涤，干燥并蒸发。在二氧化硅对残余物进行色谱，用乙酸乙酯/己烷混合物洗脱，得到标题化合物(83mg)。从乙酸乙酯/己烷中结晶得到无色针状物m.p.146-8℃;[α]22D-283°(c 0.5;CHCl3);νmax(KBr)1791，1702，1649，1554cm-1;δH(CDCl3)1.67(3H，d，J 6.3Hz)，4.23(1H，dd，J 9.8 & 4Hz)，4.6-4.8(2H，m)，5.2-5.5(2H，m)，5.5-5.7(1H，m)，5.91(1H，d，J 4Hz)，5.9-6.1(1H，m)，7.33(1H，s)，7.4-7.7(3H，m)，7.9-8.1(2H，m);λmax(C2H5OH)229nm(ε14975)，313nm(ε7150).实测值C，60.2;H，4.7;N，4.0;S，8.7%C18H17NO5S要求C，60.2;H，4.8;N，3.9;S，8.9%。
实施例67(5S，6S)-6-[(R)-1-甲氧乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯将(5S，6S)-6-[(R)-1-羟乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯(50mg)溶于硝基甲烷(2ml)中，冰冷，强烈搅拌并用无水、粉末状的碳酸钠(375mg)和氟碘酸三甲氧鎓(250mg)处理。5小时后，混合物经硅藻土过滤，用二氯甲烷(20ml)稀释，用NaHCO3溶液洗涤，干燥并蒸发。在二氧化硅上对残余物进行色谱，用乙酸乙酯/己烷混合物洗脱，得到标题化合物无色胶(9mg)。[α]21D-210°(c 0.9;CHCl3);νmax(CHCl3)1790，1710，1650，1555cm-1;δH(CDCl3)1.40(3H，d，J 5.6Hz)，3.32(3H，s)，3.7-4.0(2H，m)，4.6-4.9(2H，m)，5.2-5.5(2H，m)，5.81(1H，d，J 3.7Hz)，5.85-6.05(1H，m)，7.32(1H，s);λmax(C2H5OH)253nm(ε2693)，314nm(ε6520).m/z(E.I.)269(M+，10%);m/z(NH3CI.)270(MH+，80%)，287(MNH+4，100%)。
实施例68 (5S，6S)-6-[(R)-1-[(N-(苄氧羰基)-(S)-丙氨酰)氧基]乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯将(5S，6S)-6-[(R)-1-羟乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯(50mg)，N-(苄氧羰基)-L-丙氨酸(180mg)和4-二甲氨基吡啶(24mg)溶于二氯甲烷(1ml)中，冷却至-15℃并用二环己基碳二亚胺(165mg)处理。将混合物搅拌0.5小时，用乙酸乙酯(20ml)稀释，用0.5N HCl、水和NaHCO3溶液洗涤、干燥并蒸发。在二氧化硅上对残余物进行色谱，用乙酸乙酯/己烷1∶3洗脱。蒸发含有产物的部分，将残余物溶于乙酸乙酯/己烷1∶3(3ml)中，然后过滤除去固体副产物。蒸发滤液得到标题化合物无色胶(54mg)。νmax(CHCl3)3420，1790，1715，1650，1560，1510cm-1;δH(CDCl3)1.40(3H，d，J 7.2Hz)，1.50(3H，d，J 6.2Hz)，4.06(1H，dd，J 10.1 & 3.8Hz)，4.28(1H，五重峰，J 7.2Hz)，4.6-4.8(2H，m)，5.11(2H，s)，5.15-5.45(4H，m)，5.78(1H，d，J 3.8Hz)，5.8-6.1(1H，m)，7.29(1H，s)，7.35(5H，s);m/z(FAB，基质3-NOBA/Na)483(MNa+，55%)。
实施例化合物描述于以下文献中GB2037277 实施例9、31、48J.Chem.Soc.Chem.Commun 1988，544-实施例2ZA8504947-实施例36GB2036015-实施例4，5，46，47US4282236-实施例31在这些文献中没有公开这些化合物的抗菌活性。
生物活性细菌引导肽酶1的抑制作用说明引导肽酶1(CP1)分裂基于与麦芽糖预结合蛋白(pre-MBP)的九肽(H-Phe-Ser-Ala-Ser-Ala-Leu-Ala-Lys-Ile-NH2)成为七肽(H-Phe-Ser-Ala-Ser-Ala-Leu-Ala-O-)和二肽残基(Ⅰ)。通过反相梯度HPLC检测九肽底物和七肽分裂产物。用LP1抑制剂终止或减慢基于pre-MBP的肽的分裂。
分析用HPLC级H2O制备所有溶液。按顺序混合下列成份<
>＊当使用除水之外的溶剂溶解该化合物时，将与试验样品中相同体积的溶剂加至对照肽或对照分析中。
＊对两份完全相同的该实验化合物样品进行分析，以测定平均活性减少。
＊从带有质粒pRD8(2)的菌株制备细菌引导肽酶，并按照Wolf等人1982(3)的方法进行分离。
在37℃将样品预热5分钟。
向每份样品中加入在50mM三乙醇胺(pH8.0)中的5μl 1mM底物肽、1mM EDTA，1%tritonX-100(终体积＝20μl)。
在37℃水浴中保温样品2小时。
将样品离心3秒钟后，向每份样品中加入20μl0.1%TFA以终止反应。
将样品离心5分钟。尽管可以将样品在分析前置于-20℃保藏，但是优选立即在HPLC上对该样品进行分析。
HPLC分析按如下条件建立HPLC柱 Beckman 5μm C18 0.2×15cm溶剂 A＝H2O/0.1%TFAB＝CH3CN/0.08%TFA吸光度 215nm流速 0.2ml/分钟梯度 15%B平衡15%-20%B在起始时20%-46%B13分钟46%-90%B0.1分钟注射 10μl
结果该化合物的活性以LP1活性减少的平均%表示。当产物峰面积的减少与底物峰面积的增加相对应时，以相对于对照的产物峰面积的减少计算该数值。
采用此方法，测得青霉烯-3-羧酸苄酯的两个对映体和外消旋物(实施例1、3和4)的结果如下
因此结论是，由外消旋物观察到的LP1抑制特性是由5S异构体引起的。
(1)Dev，I.K.P.H.Ray & P.Novak(J.Biological Chemistry 1990，265，(33)，p 20069).
(2)Dalbey，R.E.& W.Wickner(J.Biological Chemistry 1985，260 p 15925
(3)Wolfe，P.B.，P.Silver & W.Wickner(J.Biological Chemistry 1982，257 p 7898).
质粒pRD8由Prof.W.Wickner-UCLA得到。
测示实施例化合物的抗引导肽酶(Ⅰ)抑制作用。测示结果列于下表
权利要求
1.通式(Ⅰ)5S青霉烯化合物的应用
其中n是0或1，R2是氢或取代基，R3是酯或酰胺形成基团，R1是氢或通过碳连接的有机基团并且其中5S异构体形式(作为细菌酶引导肽酶1的抑制剂)的-COR3基团对于体内水解基本稳定。
2.按照权利要求1的应用，其中R2是氢或通过碳、氧或硫原子连到青霉烯环2-位上的有机基团。
3.按照权利要求2的应用，其中R2是氢、羟甲基、羟乙基硫、苯基或氨基羰基氧甲基。
4.按照权利要求1至3任何之一的应用，其中R3是芳氧基或任选取代的(C1-10)烷氧基，所说的任选取代基可以是卤素或选自(C1-6)烷基羰基，(C1-6)烷氧羰基、(C1-10)烷氧基取代的(C1-10)烷氧基、芳基或杂环基的有机基团。
5.按照权利要求4的应用，其中R3是苄氧基、对硝基苄氧基、对甲氧基苄氧基、2，2，2-三氯乙氧基、甲氧基、对(甲氧羰基)苄氧基或烯丙基氧。
6.按照权利要求1至3任意之一的应用，其中R3是NR52，其中每个R5可以相同或不同并且独立地择自氢、芳基或任选取代的(C1-6)烷基、两个R5部分还可以是含氮杂环的残基，或者NR52是氨基酸残基。
7.按照权利要求6的应用，其中R3是吡咯烷基。
8.按照任何上述权利要求的应用，其中R1是氢或选自任意取代的(C1-6)烷基，任选取代的(C1-6)链烯基和C1-6链烷酰基的取代基。
9.按照权利要求8的应用，其中R1是在1-位通过借助于氧连接的取代基取代的C1-4烷基。
10.按照权利要求9的应用，其中R1是羟基、(C1-5)烷氧基、氨基羰氧基、苯甲酸基、或任选取代的(C1-6)链烷酰氧基。
11.按照权利要求10的应用，其中R1是氢、1-乙酰氧基或1-羟乙基。
12.按照权利要求9至11之一的应用，其中在1-位上的碳原子是手性的，其立体化学式如下
13.权利要求1所定义的式(Ⅰ)化合物的应用，是药剂制造，该药剂通过细菌酶引导肽酶1的抑制机理用于治疗细菌感染。
14.通过细菌酶引导肽酶1的抑制机理治疗哺乳动物细菌感染的方法，该方法包括对需要该治疗的哺乳动物施用有效量的在权利要求1中定义的式(Ⅰ)化合物。
15.一种药物组合物，该组合物包括在权利要求1中定义的式(Ⅰ)化合物，其中当R3是氨基或二低级烷基氨基时R2不是S-连接的有机基团，并且其中化合物不是(5RS)-2-甲基青霉烯-3-羧酸苄酯，及可药用载体。
16.在权利要求1中定义的，用作活性治疗物质的式(Ⅰ)化合物，其中当R3是氨基或二低级烷基氨基时R2不是S-连接的有机基团，并且其中化合物不是(5RS)-2-甲基青霉烯-3-羧酸苄酯。
17.在权利要求1中定义的式(Ⅰ)化合物，该化合物是酰胺，其中当R3是氨基或二-低级烷基氨基时R2是非S-连接的有机基团。
18.在权利要求1中定义的式(Ⅰ)化合物选自(5S)-青霉烯-3-羧酸苄酯(5RS)-青霉烯-3-羧酸对甲氧基苄酯(5RS)-青霉烯-3-羧酸三氯乙酯(5RS)-青霉烯-3-羧酸烯丙酯(5S)-青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯(5S)-青霉烯-3-羧酸甲酯(5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸4-(甲酯基)苄酯(5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸4-[(4-硝基苄基)氧基羰基]苄酯4-[[(5RS)-青霉-2-烯-3-羰基]氧甲基]苯甲酸钠(5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸正戊酯(5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸4-苯基丁酯(5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸3-(甲酯基)苄酯(5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸2-(2-甲氧基乙氧基)乙酯(5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸4-溴苄酯(5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸(7-甲氧基-2-氧代-2H-1-苯并吡喃-4-基)甲酯(5RS)-青霉-2-烯-3-羧酸甲氧基甲酯(5S)-青霉-2-烯-3-羧酸甲氧基甲酯(5RS)-6-(1-乙酰氧乙基)青霉烯-3-羧酸烯丙酯(5RS，6RS)-6-[(SR)-1-乙酰氧乙基]-2-(2-羟基乙基硫)青霉烯-3-羧酸对硝酸苄酯(5RS)-2-苯基青霉烯-3-羧酸甲酯(5RS)-2-(4-甲氧苯基)青霉烯-3-羧酸甲酯(5RS)-2-(4-氯苯基)青霉烯-3-羧酸甲酯(5RS)-2-(4-甲酯基苯基)青霉烯-3-羧酸甲酯(5RS)-2-苄基青霉烯-3-羧酸甲酯(5RS)-2-(氨基甲酰氧基甲基)青霉烯-3-羧酸苄酯(5RS)-2-(氨基甲酰氧基甲基)青霉烯-3-羧酸甲酯(5RS)-2-苯基青霉烯-3-羧酸苄酯(5RS)-2-(4-氯苯基)青霉烯-3-羧酸苄酯(5RS)-2-甲基青霉烯-亚砜-3-羧酸苄酯(5RS)-2-(甲氧基甲氧基甲基)青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯(5RS)-2-(4-硝基苄基氧基羰基氨甲基)青霉烯-3-羧酸丙酮酯(5RS)-2-(4-硝基苄基氧基羰基氨甲基)青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯(5S，6S)-6-[1-(R)-羟乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯(5SR，6RS)-6-乙基青霉烯-3-羧酸烯丙酯(5RS，6SR)-6-乙基青霉烯-3-羧酸烯丙酯(5RS，6SR)-6-[(RS)-1-乙酰氧基乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯(5S)-2-苯基青霉烯-3-羧酸甲酯(5S，6S，8R)-2-羟甲基-6-(1-羟乙基)青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯(5S，6S)-6-[(R)-1-乙酰氧基乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯(5RS)-2-(羟甲基)青霉烯-3-羧酸甲酯(5RS，6RS)和(6RS，6SR)-2-乙基硫-6-乙基青霉烯-3-羧酸4-硝基苄酯(5RS，6SR)-6-[(SR)-1-乙酰氧基乙基]-2-(乙基硫)青霉烯-3-羧酸4-硝基苄酯N-苄基(5RS)-青霉烯-3-甲酰胺1-[(5RS)-青霉-2-烯-3-羰基]吡咯烷(5RS)-N-苯基青霉-2-烯-3-甲酰胺(5RS)-N-苄基-N-甲基青霉-2-烯-3-甲酰胺(5RS)-N，N-二乙基青霉-2-烯-3-甲酰胺(5RS)-N-(4-甲氧苯基)青霉-2-烯-3-甲酰胺N-[(5RS)-青霉-2-烯-3-羰基]吗啉(5RS)-N-(吡啶-3-基甲基)青霉-2-烯-3-甲酰胺3-[(5RS)-青霉-2-烯-3-羰基氨基]丙酸甲酯(5RS)-N-叔丁基青霉-2-烯-3-甲酰胺(5RS)-2-苄基青霉烯-3-羧酸苄酯(5S，6S)-6-[(R)-1-(氨基甲酰基氧基)乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯(5S，6S)-6-[(R)-1-苯甲酰氧基乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯(5S，6S)-6-[(R)-1-甲氧基乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯(5S，6S)-6-[(R)-1-[(N-(苄氧基羰基)-(S)-丙氨酰)氧基乙基]青霉烯-3-羧酸烯丙酯
19.按照权利要求1的应用，其中式(Ⅰ)化合物按权利要求18定义或选自(5RS)-青霉烯-3-羧酸甲酯(5RS)-青霉烯-3-羧酸苄酯(5RS)-青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯(5RS)-2-(羟甲基)青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯(5RS)-2-(羟甲基)青霉烯-3-羧酸苄酯(5RS)-2-甲基青霉烯-3-羧酸苄酯(5RS)-2-(乙基硫)青霉烯-3-羧酸对硝基苄酯(5RS)-2-(甲基硫)青霉烯-3-羧酸苄酯(5RS)-2-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基甲基)青霉烯-3-羧酸苄酯
20.制备权利要求1的式(Ⅰ)新化合物的方法，该方法包括式(Ⅱ)化合物的环化作用
其中R21是R2或者是可以被转化成R2或被R2替代的取代基，R31是R3或者可以被转化成R3或被R3替代的取代基，R11是R1或可转化成R1的基团，其中R2，R3和R1定义如式(Ⅰ)，R81是有机基团。
全文摘要
通式(I)5S青霉烯化合物的应用其中n是0或1，R是氢或取代基，R
文档编号C07D499/88GK1095721SQ93116820
公开日1994年11月30日 申请日期1993年7月27日 优先权日1992年7月29日
发明者R·索思盖特, S·考尔顿, T·C·施梅尔, A·E·阿尔索, S·D·麦克里思 申请人:史密丝克莱恩比彻姆有限公司
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