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2021-02-01 13:02:41|
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起点商标网 专利名称：线性粘合抑制剂的制作方法
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本发明涉及式Ⅰ的新的线性肽及其生理上可接受的盐，X-A-B-C-Arg-E-G-L-Z (Ⅰ)其中X为H、有1-10个碳原子的酰基、H-Asn、H-Val-Asn、H-Asp-Val-Asn、Fmoc-Gly-Gly、H-Lys-Gly-Gly、H-Lys-Pro、H-Tyr-Gly-Gly、H-Cys-Gly-Gly、H-Cys(Trt)-Gly-Gly、H-Cys-Gly-Gly-Thr-Asp-Val-Asn或H-Thr-Asp-Val-Asn，A、B和C彼此独立地为不存在或为一选自Ala、Arg、Asn、Asp、Asp(OR)、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Lys(AC)、Lys(ACNH2)、Lys(ACSH)、Met、Orn、Fhe、4-Hal-Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val的氨基酸，这里所提到的氨基酸残基也可被衍生，E为Gly、His或Leu-His，G为不存在或为Asp或Asn，L为不存在或为Gly、Ile、Leu或Leu-Leu，Z为NH2或OH，
Hal为F、Cl、Br或I，且AC为有1-10个碳原子的烷酰基。
从例如欧洲专利申请EP0406428中可知道类似的化合物。
本发明的目的是要找到具有有用性质，尤其是可用于制备药物的新化合物。
现已发现，式Ⅰ化合物及其盐具有非常有用的性质。尤其是，它们可作为整合素(integrin)抑制剂，在这种情况下它们具体是抑制β3-整合素受体与配位体之间的相互作用。这一作用可通过例如J.W.Smith等人在J.Biol.Chem.265，12267-12271(1990)中所述的方法加以证实。另外，它们还具有消炎作用，这一作用也可采用文献中已知的方法加以证实。
本发明化合物可用作人药和兽药中的药物活性成分，尤其是用于预防和治疗循环系统疾病、血栓形成、心肌梗塞、动脉硬化、炎症、中风、心绞痛、肿瘤、溶骨疾病、尤其是骨质疏松症、血管成形术后血管生成和再狭窄。它们也可用于伤口愈合过程中的辅助治疗。
本发明化合物也适宜作为杀微生物剂，避免由例如细菌、真菌或酵母等引起的感染。在为插入异体物质如生物材料、植入物、导管或心脏起搏器而进行的手术中，该物质可用作协同杀微生物剂。它们作为抗菌剂。
上、下文中所示的氨基酸缩写符号代表如下氨基酸Ala 丙氨酸Arg 精氨酸Asn 天冬酰胺Asp 天冬氨酸
Asp(OR) 天冬氨酸(β-酯)Cit瓜氨酸Cys半胱氨酸Dab2，4-二氨基丁酸Gln谷氨酰胺Glu谷氨酸Gly甘氨酸His组氨酸Ile异亮氨酸Leu亮氨酸Lys赖氨酸Lys(AC) Nε-酰基赖氨酸Lys(ACNH2) Nε-氨基酰基赖氨酸Lys(ACSH) Nε-巯基酰基赖氨酸Met甲硫氨酸Orn乌氨酸Phe苯丙氨酸4-Hal-Phe4-卤代苯丙氨酸Pro脯氨酸Ser丝氨酸Thr苏氨酸Trp色氨酸Tyr酪氨酸Val缬氨酸另外，以下各缩写符号意义如下BOC 叔丁氧羰基CBZ苄氧羰基DCCI二环已基碳化二亚胺DMF二甲基甲酰胺EDCIN-乙基-N′-(3-二甲氨基丙基)-碳化二亚胺盐酸盐Et乙基FMOC9-芴基甲氧羰基HOBt1-羟基苯并三唑Me甲基MBHA4-甲基二苯甲基胺Mtr4-甲氧基-2，3，6-三甲苯基磺酰基OBut叔丁基酯OMe甲基酯OEt乙基酯POA苯氧基乙酰基TFA三氟乙酸Trt三苯甲基。
如果上面提到的氨基酸以数种对映体形式存在，则所有这些形式及其混合物(如DL-形式)均包括在其中，例如作为式Ⅰ化合物的组成成分。氨基酸和/或氨基酸残基可以本身已知的方式衍生。
本发明还涉及式Ⅰ化合物及其盐的制备方法，其特征在于通过用溶液分解剂或氢解剂处理将其从其一种功能性衍生物中释放出来，或者将式Ⅱ肽M-OH Ⅱ其中M为(a)X，但不为氢，Fmoc-Gly，H-Lys-Gly，H-Lys，H-Tyr-Gly，H-Asp-Val，H-Tyr，H-Val，H-Asp，H-Cys-Gly-Gly-Thr-Asp-Val，H-Cys-Gly-Gly-Thr-Asp，H-Cys-Gly-Gly-Thr，H-Cys-Gly-Gly，H-Cys-Gly，H-Cys，H-Cys(Trt)-Gly，H-Cys(Trt)，H-Thr-Asp-Val，H-Thr-Asp or H-Thr，(b) X-A，(c) X-A-B，(d) X-A-B-C，(e) X-A-B-C-Arg，(f) X-A-B-C-Arg-E or(g) X-A-B-C-Arg-E-G与式Ⅲ氨基化合物反应，
其中Z的定义同前，且Q为(a)A-B-C-Arg-E-G-L，Asn-A-B-C-Arg-E-G-LVal-Asn-A-B-C-Arg-E-G-L，Pro-A-B-C-Arg-E-G-L，Gly-A-B-C-Arg-E-G-L，Gly-Gly-A-B-C-Arg-E-G-L，Asn-A-B-C-Arg-E-G-L，Val-Asn-A-B-C-Arg-E-G-LAsp-Val-Asn-A-B-C-Arg-E-G-L，Thr-Asp-Val-Asn-A-B-C-Arg-E-G-L，Gly-Thr-Asp-Val-Asn-A-B-C-Arg-E-G-L or Gly-Gly-Thr-Asp-Val-Asn-A-B-C-Arg-E-G-L，
(b) B-C-Arg-E-G-L，(c) C-Arg-E-G-L，(d) Arg-E-G-L，(e) E-G-L，(f) G-L or(g) L和/或根据情况酰化游离氨基和/或通过用酸或碱处理将式Ⅰ化合物转化为其一种盐。
除非另有说明，上、下文中残基A、B、C、E、G、L、M、Q、X和Z的含义与式Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ中相同。
以上各式中，烷基优选为甲基、乙基、异丙基或叔丁基。
X优选为氢、H-Asn、Fmoc-Gly-Gly或H-Cys(Trt)-Gly-Gly，但尤其优选H-Cys-Gly-Gly。另外，X也可为有1-10个碳原子的酰基，酰基优选为有1-8个，尤其是1、2、3或4个碳原子的烷酰基，具体优选甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基或已酰基，但也可为芳基-CO，如苯甲酰基、邻-、间-或对-甲苯甲酰基、邻-、间-或对-甲氧基苯甲酰基，以及2-萘酰基或芳基-CnH2n-CO(n＝1-4)，如Ph-CH2-CO、Ph(CH2)2-CO、Ph-(CH2)3CO或Ph-(CH2)4-CO(Ph＝苯基)，这里Ph也可被OCH3或CH3基团取代。
基团A优选为Ala、Leu或Ser，尤其为Gly，但也可不存在。B优选为Asn或Asp。C优选为Ala、D-Ala、His，尤其为Gly。E优选为Gly或His。G优选为Asp，同时L优选为Leu。Z为NH2，但尤其优选为OH。
因此，本发明尤其涉及其中至少一种所述残基具有上述优选含义之一的式Ⅰ化合物。
优选的一组化合物可以式Ⅰa表示，它对应于式Ⅰ，其中B、C、E、X和Z的定义相同，且A为Gly，G为Asp且L为Leu。
再一组优选化合物可以式Ⅰaa-Ⅰad表示，它们在其它方面对应于式Ⅰ或式Ⅰa，但在Ⅰaa中，X为氢或乙酰基A为Gly，B为Asn或Asp，C不存在，或为Ala或Gly，E为Gly或His，G为Asp，L为Leu且Z为NH2或OH，
在Ⅰab中，X为氢或酰基，A不存在或为Gly，B不存在或为Asn，C为Gly，E为Gly或His，G为Asp，L为Leu，且Z为NH2或OH，在Ⅰac中，X为氢，A不存在或为Gly，B不存在或为Asn，C不存在或为Gly，E为Gly或His，G为Asp，L为Leu，且Z为OH或NH2，在Ⅰad中，X为H-Asn，H-Val-Asn，H-Asp-Val-Asn，Fmoc-Gly-Gly，H-Lys-Gly-Gly，H-Tyr-Gly-Gly，H-Cys(Trt)-Gly-Gly，H-Cys-Gly-Gly，H-Cys-Gly-Gly-Thr-Asp-Val-Asn or H-Thr-Asp-Val-Asn，A为Gly，B为Asn，
C为Gly，E为Gly或His，G为Asp，L为Leu，且Z为NH2或OH。
尤其适合的化合物是如下化合物对应于式Ⅰ且其中A、B、C、X和Z具有上述优选定义，而其中中心氨基酸残基为L-Arg(而非D-Arg)、E为Gly或His(而非D-His)、G为Asp且L为Leu。
式Ⅰ化合物及制备它们的起始物可另外通过已知方法制得，如Houben-Weyl，Methoden der Organischen Chemie(Methods of Organis Chemistry)等经典著作中所述的方法，尤其是在已知的且适用于该反应的条件下进行。在这里也可使用没有详细提到的已知改进方法。
根据需要，也可就地形成起始物，使其不从反应混合物中分离出来，而是立即进一步反应，以得到式Ⅰ化合物。
通过溶剂分解，尤其是水解，或者通过氢解使式Ⅰ化合物从其功能性衍生物中释放出来，也可得到式Ⅰ化合物。
用于溶剂分解或氢解的优选起始物是其中含有适当保护的氨基和/或羟基以代替一个或多个游离氨基和/或羟基的化合物，优选携带氨基保护基以代替与N原子键合的H原子的化合物，例如对应于式Ⅰ，但含有NHR1基团(其中R1为氨基保护基，如BOC或CBZ)以代替NH2基团的化合物。
另外，优选以羟基保护基代替羟基的氢原子的起始物，如对应于式Ⅰ但以R″O-苯基(其中R″为羟基保护基)代替羟苯基的起始物。
起始物分子中可存在多个-相同或不同-保护氨基和/或羟基。如果所存在的保护基彼此不同，在许多情况下它们可被选择性地除去。
术语“氨基保护基”是普遍已知的，它是指适用于保护(封阻)氨基不受化学反应，但所需化学反应在分子中其它位置发生后又易于除去的基团。典型的这类基团尤其是未取代或取代酰基、芳基、芳烷氧甲基或芳烷基。由于氨基保护基在所需反应(或反应序列)之后被除去，所以它们的性质及大小并不太重要，但优选有1-20个，尤其是1-8个碳原子的保护基。术语“酰基”在本发明的方法和本发明的化合物中取其最宽含义。它包括得自脂族、芳脂族、芳族或杂环羧酸或磺酸的酰基，尤其是烷氧羰基，芳氧羰基尤其是芳烷氧羰基。这类酰基的例子有烷酰基，如乙酰基、丙酰基或丁酰基;芳烷酰基，如苯基乙酰基;芳酰基，如苯甲酰基或甲苯甲酰基;芳氧烷酰基，如POA;烷氧羰基，如甲氧羰基、乙氧羰基、2，2，2-三氯乙氧羰基、BOC、2-碘乙氧羰基;芳烷氧羰基，如CBZ(“苄酯基”)，4-甲氧苄氧羰基，FMOC和芳基磺酰基，如Mtr。优选的氨基保护基是BOC和Mtr，另外还有CBZ、FMOC、苄基和乙酰基。
术语“羟基保护基”也是普遍已知的，它系指适用于保护羟基不受化学反应，但在所需反应于分子中其它位置发生后又易于除去的基团。典型的这类基团是上述未取代或取代芳基、芳烷基或酰基，另外还有烷基。由于羟基保护基在所需化学反应或反应序列后被除去，它们的性质和大小并不重要;优选有1-20个，尤其是1-10个碳原子的保护基。羟基保护基的例子有苄基、对-硝基苯甲酰基、对-甲苯磺酰基和乙酰基，尤其优选苄基和乙酰基。天冬氨酸和谷氨酸中的COOH基团优选以其叔丁酯形式(如Asp(OBut))保护。
用作起始物的式Ⅰ化合物的功能性衍生物也可采用常规的氨基酸和肽合成法制得，例如所述经典著作和专利申请以及Merrifield Solid Phase method(B.F.Gysin和R.B.Merrifield，J.Am.Chem.Soc.94，3102et seq(1972))中所述的方法。
根据所使用的保护基，利用强酸(优选TFA或高氯酸)，但也可利用其它强无机酸(如盐酸或硫酸)或强有机羧酸(如三氯乙酸)或磺酸(如苯磺酸或对-甲苯磺酸)，可将式Ⅰ化合物从其功能性衍生物中释放出来。其它惰性溶剂的存在是可能的，但并不总是必要的。合适的惰性溶剂优选为有机溶剂，如乙酸等羧酸，四氢呋喃或二噁烷等醚，DMF等酰胺，二氯甲烷等卤代烃，甲醇、乙醇或异丙醇等醇和水。另外，以上溶剂的混合物也是适合的。TFA优选过量使用而不加入其它溶剂，高氯酸是与乙酸混合使用，且按9∶1的比例使用70%的高氯酸。用于断裂的反应温度宜为0-50℃，优选15-30℃(室温)。
基团BOC、OBut和Mtr优选利用TFA的二氯甲烷溶液或利用约3-5N HCl的二噁烷溶液于15-30℃除去，FMOC基团优选利用约5-50%二甲胺、二乙胺或哌啶的DMF溶液于15-30℃除去。
经氢解可除去的保护基(如CBZ或苄基)可在催化剂(如钯等贵金属催化剂，优选存在于碳等载体上)存在下通过氢气处理除去。适用于这一情况的溶剂是上面所述的溶剂，尤其是例如甲醇或乙醇等醇类或DMF等酰胺。氢解一般在温度为0-100℃，压力为1-200巴(优选20-30℃和1-10巴)的条件下进行。CBZ基团的氢解易于在5-10%pd-c的甲醇溶液中或利用甲酸铵(代替H2)在pd-c的甲醇/DMF溶液中于20-30℃进行。
也可按例如Houben-Weyl，loe cit，Volume 15/Ⅱ，Pages 1-806(1974)中所述的方法，在适用于肽合成的本身已知的缩合条件下反应式Ⅱ化合物获得式Ⅰ化合物。
反应优选在脱水剂，如碳化二亚胺(如DCCI或EDCI)、丙烷膦酸酐(比照Angew、Chem.92，129(1980))、二苯磷酰基叠氮化物或2-乙氧基-N-乙氧羰基-1，2-二氢喹啉存在下，于惰性溶剂如二氯甲烷等卤代烃、四氢呋喃或二噁烷等醚、DMF或二甲基乙酰胺等酰胺、乙腈等腈类或这些溶剂的混合物中于-10至40℃(优选0-30℃)进行。
除式Ⅱ化合物外，这些物质的合适反应性衍生物，如反应性基团被保护基居间封阻的化合物，也可用于该反应。氨基酸衍生物Ⅱ可以其活性酯形式使用，该活性酯宜通过加入HOBt或N-羟基琥珀酰亚胺就地形成。
式Ⅱ起始物一般是新的。它们可通过已知方法，例如上述肽合成法和保护基除去法制备。
一般来说，首先合成式R′-M′-OR″的保护肽酯，如BOC-M′-OMe或Fmoc-M′-OMe，这里M′对应于N-末端被H原子还原的残基M。它们水解后成为式R′-M′-OH的酸，如BOC-M′-OH或Fmoc-M′-OH，接着再与式Ⅲ化合物缩合。根据需要，式Ⅲ化合物中不进行反应的位置上同样也提供了相应的保护基。
在式Ⅲ化合物的情况下，类似地合成了式R′-Q-Z′-R″的肽酯，如BOC-Q-Z′-OMe或Fmoc-Q-Z′-OMe，其中Z′为-NH-或-O-，然后，在为制备式Ⅰ化合物而进行的缩合反应之前按已知方式切断保护基R′，例如Fmoc可通过用哌啶/DMF溶液处理除去。
更为有利的是，利用按照改进的Merrifield技术的最近的肽合成法，并利用如Peptides，Proc.8th Am.Pept.Symp.，Eds.V.Hruby and D.H.Rich，Pierce Comp.Ⅲ，pp 73-77(1983)by A.Jonczyk and J.Meienhofer(Fmoc Strategy)中所述的肽合成装置，或者是使用 Angew.Chem.104，375-391(1992)中提供的技术。这类方法本身是已知的，因此这里没必要对其进行叙述。
式Ⅰ的碱可用酸转化为适当的酸加成盐。适用于该反应的酸尤其是产生生理上可接受的盐的酸，因此，可使用硫酸、硝酸、氢卤酸(如盐酸或氢溴酸)、磷盐(如正磷酸)和氨基磺酸等无机酸，以及有机酸，尤其是脂族、脂环族、芳脂族、芳族或杂环一元或多元羧酸、磺酸或硫酸，如甲酸、乙酸、丙酸、新戊酸、二乙基乙酸、丙二酸、琥珀酸、庚二酸、富马酸、马来酸、乳酸、酒石酸、苹果酸、苯甲酸、水杨酸、2-或3-苯基丙酸、柠檬酸、谷氨酸、抗坏血酸、烟酸、异烟酸、甲磺酸或乙磺酸、乙烷二磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、对-甲苯磺酸、萘磺酸或萘二磺酸以及十二烷基磺酸。与生理上不可接受的酸形成的盐，如苦味酸盐，可用于分离和/或纯化式Ⅰ化合物。
另一方面，式Ⅰ的酸也可通过与碱反应转化为其一种生理上可接受的金属盐或铵盐。此处合适的盐尤其是钠、钾、镁、钙和铵盐，也可以是取代的铵盐，如二甲基-、二乙基-或二异丙基铵盐，单乙醇-、二乙醇-或三乙醇铵盐，环已基-或二环已基铵盐，二苄基乙二铵盐，以及与N-甲基-D-葡糖胺或精氨酸或赖氨酸形成的盐。
另外，式Ⅰ新化合物可作为整合素配位体用于制备亲和层析柱，该柱用于制备纯整合素。
在这种情况下，配位体，即式Ⅰ肽衍生物是通过其结合功能与聚合支持物共价偶联。
合适的聚合支持材料是肽化学中本身已知的聚合固相，优选具有亲水性质，如交联多糖(如纤维素、琼脂糖或交联葡聚糖)、丙烯酰胺、以聚乙二醇为主要成分的聚合物或Tentakcl Polymers 。
与聚合支持物交联的合适结合官能团优选为有2-12个碳原子的线性亚烷基链，其一端直接与聚合物键合，且另一端具有如羟基、氨基、巯基、马来酰亚氨基或-COOH等官能团，并适于与相应肽的C-或N-末端部分相连。
在这种情况下，肽也可能直接地或以类似方式通过另一个结合官能团与聚合物的结合部位键合。含有功能化侧链的氨基酸残基的肽也可通过它们与聚合物的结合官能团键合。
而且，可对作为式Ⅰ肽组分的某些氨基酸残基进行侧链修饰，使得它们适合于通过SH、OH、NH2或COOH等基团与聚合物的结合部位结合。
在这方面，异常氨基酸也是可能的，如在苯环的4-位上携带了巯基、羟基、氨基或羧烷基链的苯丙氨酸衍生物，其官能团位于链的末端。
其侧链可直接用作结合官能团的氨基酸的例子有Lys、Orn、Arg、Dab、Asp、Asn、Glu、Gln、Ser、Thr、Cys、Cit或Tyr。
N-末端结合点的例子有-CO-CnH2n-NH2、-CO-CnH2n-OH、-CO-CnH2n-SH或-CO-CnH2n-COOH，其中n＝2-12，亚烷基链的长度并不是关键，根据情况它也可被合适的芳基或烷芳基部分或完全取代。
C-末端结合点可以是例如-O-CnH2n-SH、-O-CnH2n-OH、-O-CnH2n-NH2、-O-CnH2n-COOH、-NH-CnH2n-SH、-NH-CnH2n-OH、-NH-CnH2n-NH2或-NH-CnH2n-COOH，其中n和亚烷基链的定义与前述部分相同。
N-末端和C-末端结合点也可用作已功能化的氨基酸侧链的结合成分。这里合适的氨基酸残基是例如Lys(CO-C5H10-NH2)、Asp(NH-C3H5-COOH)或Cys(C3H6-NH2)，该结合点总是与侧链官能团键合。
制备亲和层柱材料是在本身已知的缩合氨基酸的常规条件下进行，它们已在式Ⅰ化合物的制备部分进行了概括，或者在Pierce，Immunotechnology Catalog & Handbook(1990)中已有记载。
通过将式Ⅰ新化合物及其生理上可接受的盐与至少一种赋形剂或助剂-根据需要还包括一种或多种其它活性成分-一起制成合适的剂量形式，可生产出药物制剂。由此获得的制剂可作为人用或兽用药品使用。合适的赋形物质是适用于肠内(如口腔、直肠)、非肠道(如静脉注射)或局部(如表皮、皮肤、眼或鼻)给药或适用于以吸入喷雾方式给药且不与新化合物反应的有机或无机物质，如水或等渗盐水溶液、低级醇、植物油、苄基醇、聚乙二醇、三乙酸甘油酯和其它脂肪酸甘油酯、明胶、大豆卵磷脂、碳水化合物(如乳糖或淀粉)、硬脂酸镁、滑石、纤维素和矿脂。片剂、包衣片剂、胶囊、糖浆、汁液或滴剂等尤其是用于口服给药;尤其感兴趣的是薄膜片剂和包有肠溶衣或胶囊壳的胶囊。栓剂适用于直肠给药，溶液(优选油状溶液或水溶液)、悬浮液、乳液或植入物等被用于通过非肠道途径给药。溶液(如可以眼滴剂形式使用)、悬浮液、乳液、乳油、软膏或敷布等适用于表皮给药。含有溶于或悬浮于推进气体或推进气体混合物(如CO2或含氯氟烃)中的活性成分的喷雾剂可用作吸入喷雾剂。这里，活性成分宜于以微粒化形式使用，其中也可存在一种或多种生理上可接受的其它溶剂，如乙醇。吸入溶液可借助常规吸入器给药。也可将新化合物冷却干燥，并将所获得的冻干粉用于生产注射制剂。注射液可以大药丸或连续输液(如静脉、肌内、皮下或鞘内)方式给药。上述制剂可被消毒和/或可含有辅助物质，如防腐剂、稳定性和/或湿润剂、乳化剂、影响渗透压的盐、缓冲物质、着色剂和/或调味剂。根据需要，它们也可含有一种或多种其它活性物质，如一种或多种维生素。
一般来说，本发明物质可按类似于其它已知市售肽的方式，尤其是类似于US-A-4，472，305中所述化合物的方式给药，优选每剂量单位的剂量为0.05-500mg，尤其是0.5-100mg。日剂量优选为0.01-2mg/kg体重。针对每一患者的具体剂量取决于许多不同因素，例如所用具体化合物的活性，患者的年龄、体重、总的健康状况、性别，饮食，给药时间和途径，排泄途径，药物组合情况以及所要治疗的具体疾病的严重程度。优选非肠道途径给药。
上、下文中所有温度均指摄氏度。在以下实施例中，“常规操作”指加水，根据需要用乙醚或二氯甲烷中和萃取混合物，分离出有机相，于Na2SO4上干燥，过滤，蒸发并将残余物通过硅胶层析或结晶纯化。RT＝在Lichrosorb RP SelectB(250-4.7μm)柱上的保留时间，洗脱剂0.3%TFA的水溶液;异丙醇梯度在50分钟内以1ml/min的流速并在215nm处检测时为0-80%(体积)。M+＝质谱中的分子峰，通过快速原子轰击法(FAB)测得，一般为M++H，即增加一个质子单位的具体化合物的质量。
实施例1将2.2g BOC-Asp-Gly-OH溶于150ml二氯甲烷和20ml DMF的混合物中，冷却至0℃，并用0.5gDCCI、0.3gHOBt、0.23ml N-甲基吗啉和1当量H-Arg-His-Asp-Leu-OMe[两种肽均可按改进的Merrifield技术获得]处理。反应混合物于0℃搅拌20小时后，再于室温搅拌6小时。浓缩，用混合床离子交换剂处理，并加到NaHCO3水溶液中。通过抽滤过滤沉积的产物，并水洗。用乙酸乙酯/石油醚洗涤后得到BOC-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe。
类似地，通过缩合H-Arg-His-Asp-Leu-OMe与下列成分可得到相应产物
BOC-Gly-OHBOC-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Asn-Gly-Asp-Gly-OHBOC-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-OHBOC-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-OHBOC-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Lys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-OHBOC-Lys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Tyr-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-OHBOC-Tyr-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Ala-Asp-Gly-OHBOC-Ala-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-D-Ala-Asp-Gly-OHBOC-D-Ala-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Gly-Asp-Ala-OHBOC-Gly-Asp-Ala-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Gly-D-Asp-Gly-OHBOC-Gly-D-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Gly-Asp-D-Ala-OHBOC-Gly-Asp-D-Ala-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Gly-Asp-OHBOC-Gly-Asp-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Cys(Trt)-Gly-Gly-Gly-Asp-OHBOC-Cys(Trt)-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-OHBOC-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Cys(Trt)-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-OHBOC-Cys(Trt)-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-OHBOC-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Cys-Gly-Gly-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-OHBOC-Cys-Gly-Gly-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-OHBOC-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe.
实施例2类似于实施例1，通过将BOC-Gly-Asp-Gly-OH与下列物质反应可得到相应的产物H-Arg-His-Asp-OMeBOC-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-OMe;
H-Arg-His-OMeBOC-Gly-Asp-Gly-Arg-His-OMe;
H-Arg-His-Asn-Leu-OMeBOC-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asn-Leu-OMe;
H-Arg-Gly-Asp-Leu-OMeBOC-Gly-Asp-Gly-Arg-Gly-Asp-Leu-OMe;
H-Arg-His-D-Asp-Leu-OMe:
BOC-Gly-Asp-Gly-Arg-His-D-Asp-Leu-OMe;
H-Arg-D-His-Asp-Leu-OMeBOC-Gly-Asp-Gly-Arg-D-His-Asp-Leu-OMe;
H-D-Arg-His-Asp-Leu-OMeBOC-Gly-Asp-Gly-D-Arg-His-Asp-Leu-OMe.
类似于实施例1，通过将BOC-Gly-Asn-Gly-OH与下列物质反应，可得到相应产物H-Arg-His-Asn-Leu-OMeBOC-Gly-Asn-Gly-Arg-His-Asn-Leu-OMe;
H-Arg-His-Asp-Leu-OMeBOC-Gly-Asn-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe.
实施例3类似于实施例1，通过缩合下列成分可得到相应产物BOC-Leu-Asp-His-Arg-OH与H-Gly-Asp-Gly-OEtBOC-Leu-Asp-His-Arg-Gly-Asp-Gly-OEt;
BOC-Lys-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-Leu-OH与H-His-Asp-Gly-OEtBOC-Lys-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-Leu-His-Asp-Gly-OEt;
BOC-Lys-Pro-Ser-Asp-OH与H-Gly-Arg-Gly-OEtBOC-Lys-Pro-Ser-Asp-Gly-Arg-Gly-OEt;
BOC-Arg-His-OH与H-Asp-Leu-OMeBOC-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-D-Lys-D-Pro-D-Ser-D-Asp-D-Gly-OH与H-D-Arg-D-Gly-OMeBOC-D-Lys-D-Pro-D-Ser-D-Asp-D-Gly-D-Arg-D-Gly-OMe;
BOC-Leu-Asp-His-OH与H-Arg-Gly-Asp-OMeBOC-Leu-Asp-His-Arg-Gly-Asp-OMe;
BOC-Leu-Asp-His-OH与H-Arg-Gly-OMeBOC-Leu-Asp-His-Arg-Gly-OMe;
BOC-Gly-Arg-His-OH与H-Asp-Leu-Leu-OMeBOC-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-OMe;
BOC-Arg-Gly-OH与H-Asp-Leu-OMeBOC-Arg-Gly-Asp-Leu-OMe;
BOC-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-OH与H-Leu-His-Gly-OMeBOC-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-Leu-His-Gly-OMe;
BOC-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-OH与H-His-Asp-Ile-OMeBOC-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Ile-OMe.
实施例4将1.3g BOC-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe溶于60ml甲醇，用1.5ml 2NNaOH溶液处理，并于25℃搅拌4小时。除去溶剂后，将残余物溶于水中，加入稀HCl调节PH至3，用乙酸乙酯萃取混合物。用Na2SO4干燥萃取物，除去溶剂后得到BOC-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH，将其溶入20ml 2NHCl的二噁烷溶液中，并于室温下搅拌2小时。浓缩干燥反应混合物，通过HPLC纯化残余物，得到H-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝9.5;M+712。
由实例1化合物起始，类似地除去保护基，得到以下产物
H-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝9.2;M+597;
H-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝11.3;M+883;
H-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝12.9;M+982;
H-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝13.4; M+1097;
H-Lys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝11.5;M+1011;
H-Tyr-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝13.8;M+1046;
H-Ala-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝10.7;M+783;
H-D-Ala-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝11.1;M+783;
H-Gly-Asp-Ala-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝11.0;M+784;
H-Gly-D-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝10.5;M+770;
H-Gly-Asp-D-Ala-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝11.9;M+784;
H-Gly-Asp-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝8.1;M+712;
H-Cys(Trt)-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝27.7;M+1171;
H-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝11.7;M+929;
H-Cys(Trt)-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝27;M+1228;
H-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝11.7;M+987;
H-Cys-Gly-Gly-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝12.7;M+1415;
H-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH.
实施例5按照类似于实施例4的方法，由实例2化合物起始，通过水解和除去BOC保护基，得到以下化合物。
H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-OH;RT＝3.5;M+656;
H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-OH;RT＝3.5;M+541;
H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asn-Leu-OH;RT＝11.2;M+769;
H-Gly-Asp-Gly-Arg-Gly-Asp-Leu-OH;RT＝11.4;M+689;
H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-D-Asp-Leu-OH;RT＝11.7;M+769;
H-Gly-Asp-Gly-Arg-D-His-Asp-Leu-OH;RT＝11.3;M+769;
H-Gly-Asp-Gly-D-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝10.9;M+769.
H-Gly-Asn-Gly-Arg-His-Asn-Leu-OH;RT＝10.8;M+767;
H-Gly-Asn-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝11.6;M+768.
实施例6按照类似于实例4的方法，由实例3化合物起始，通过水解和除去BOC保护基得到以下化合物H-Leu-Asp-His-Arg-Gly-Asp-Gly-OH;RT＝11.1;M+769;
H-Lys-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-Leu-His-Asp-Gly-OH;RT＝9.8;M+1011;
H-Lys-Pro-Ser-Asp-Gly-Arg-Gly-OH;RT＝3.5;M+716;
H-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝8.0;M+540;
H-D-Lys-D-Pro-D-Ser-D-Asp-D-Gly-D-Arg-D-Gly-OH;RT＝24.7;M+938;
H-Leu-Asp-His-Arg-Gly-Asp-OH;RT＝11.5;M+712;
H-Leu-Asp-His-Arg-Gly-OH;RT＝3.9;M+597;
H-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-OH;RT＝15.3;M+710;
H-Arg-Gly-Asp-Leu-OH;RT＝7.0;M+460;
H-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-Leu-His-Gly-OH;RT＝7.2;M+871;
H-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Ile-OH;RT＝15.1;M+986.
实施例7将0.9gH-Arg-His-Asp-Leu-OH溶于200mlDMF水溶液，并在搅拌下通过滴加0.5g溶于10ml二氯甲烷中的乙酰氯处理。搅拌混合物15分钟并超浓缩，分离沉淀产物，得到H3C-CO-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝12.4;M+582.
通过乙酰化下列化合物得到相应产物H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-OHH3C-CO-Gly-Asp-Gly-Arg-His-OH;
H-Arg-Gly-Asp-Leu-OHH3C-CO-Arg-Gly-Asp-Leu-OH;RT＝13.0;M+502;
H-Lys-Pro-Ser-Asp-Gly-Arg-Gly-OHH3C-CO-Lys-Pro-Ser-Asp-Gly-Arg-Gly-OH
H-Arg-His-Asp-Leu-OHH3C-CO-Arg-His-Asp-Leu-OH;
H-D-Lys-D-Pro-D-Ser-D-Asp-D-Gly-D-Arg-D-Gly-OHH3C-CO-D-Lys-D-Pro-D-Ser-D-Asp-D-Gly-D-Arg-D-Gly-OH;
H-Leu-Asp-His-Arg-Gly-Asp-OHH3C-CO-Leu-Asp-His-Arg-Gly-Asp-OH;
H-Leu-Asp-His-Arg-Gly-OHH3C-CO-Leu-Asp-His-Arg-Gly-OH.
实施例8类似于实例1，通过将H3C-CO-Gly-Asp-Gly-Arg-His-OH与H-Asp-Leu-OMe缩合后水解，得到H3C-CO-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝14.1M+811。
实施例9将2.0gBOC-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe在25ml 4N盐酸的二噁烷溶液中搅拌2小时。然后浓缩反应混合物，将残余物溶于100ml DMF并将溶液冷却至0℃。依次加入1当量Fmoc-Gly-Gly-Gly-Asp-OH、1.3gTBTU和1.0ml三乙胺。该溶液于0℃搅拌2小时，室温搅拌12小时。浓缩后将浓缩液倒入NaHCO3溶液。过滤出在此过程中沉淀的产物，溶于50ml甲醇，然后用1.5ml 2N NaOH溶液处理溶液，于25℃搅拌4小时，并按常规方式操作，得到Fmoc-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH。RT＝28.0;M+1105。
类似地，通过缩合H-Arg-His-Asp-Leu-OMe与以下化合物可得到相应产物Fmoc-Gly-OHFmoc-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Asn-Gly-Asp-Gly-OHFmoc-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-OHFmoc-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-OHFmoc-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Lys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-OHFmoc-Lys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Tyr-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-OHFmoc-Tyr-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Ala-Asp-Gly-OHFmoc-Ala-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-D-Ala-Asp-Gly-OHFmoc-D-Ala-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Gly-Asp-Ala-OHFmoc-Gly-Asp-Ala-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Gly-D-Asp-Gly-OHFmoc-Gly-D-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Gly-Asp-D-Ala-OHFmoc-Gly-Asp-D-Ala-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Gly-Asp-OHFmoc-Gly-Asp-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Cys(Trt)-Gly-Gly-Gly-Asp-OHFmoc-Cys(Trt)-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-OHFmoc-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Cys(Trt)-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-OHFmoc-Cys(Trt)-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-OHFmoc-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Cys-Gly-Gly-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-OHFmoc-Cys-Gly-Gly-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-OHFmoc-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH.
实施例10将0.7g BOC-Gly-Asp-Gly-Arg(BOC)-His-Asp-Leu-OH溶于100ml二氯甲烷，用1.4当量MBHA树脂处理，并于室温下搅拌24小时。除去溶剂后得到BOC-Gly-Asp-Gly-Arg(BOC)-His-Asp-Leu-MBHA树脂，将其溶入20ml 2NHCl的二噁烷溶液，并于室温下搅拌2小时。接着用TFA处理，得到H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-NH2;RT＝8.8;M+768。
类似地，通过将下列化合物与MBHA树脂反应可得到相应的肽酰胺BOC-Arg(BOC)-His-Asp-Leu-OHH-Arg-His-Asp-Leu-NH2;RT＝5.4;M+539;
BOC-Arg(BOC)-Gly-Asp-Leu-OHH-Arg-Gly-Asp-Leu-NH2;RT＝4.7;M+459;
BOC-Gly-Asp-Gly-Arg(BOC)-Gly-Asp-Leu-OHH-Gly-Asp-Gly-Arg-Gly-Asp-Leu-NH2.
实施例11与实例7类似，由H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-NH2起始，通过乙酰化该肽可得到H3C-CO-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-NH2;RT＝12.4;M+810。
同样可得到以下化合物H-Arg-His-Asp-Leu-NH2H3C-CO-Arg-His-Asp-Leu-NH2;RT＝11.1;M+581;
H-Arg-Gly-Asp-Leu-NH2H3C-CO-Arg-Gly-Asp-Leu-NH2;RT＝11.3;M+501.
实施例12将80mg H-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH于0.01m HCl中溶解3-4次，并在每次溶解操作后冷冻干燥。接着通过HPLC纯化，得到H-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH×HCl。
类似地，通过用TFA处理H-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH，可得到H-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH×TFA;RT＝11.8;M+1198。
实施例13为了制备亲和相，将0.9gN-马来酰亚氨-C5H10-CO-NH-C3H6-聚合物[可通过N-马来酰亚氨-C5H10-COOH与H2N-C3H6-聚合物缩合得到]悬浮于10ml0.1M磷酸盐缓冲液(PH7)中，并于4℃加入1当量H-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-His-Asp-Leu-OH。搅拌混合物4小时，同时加热反应混合物至室温，过滤出固体残余物，两次用10ml缓冲液(PH7)洗涤后三次用10ml水洗涤。得到H-Cys[3-N-马来酰亚氨-C5H10-CO-NH-C3H6-聚合物)]-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-His-Asp-Leu-OH。
实施例14类似于实施例1，通过缩合聚合物-O-C3H6-NH2-[可从市场上买到]与HOOC-C4H8-CO-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe[可通过在所述条件下缩合己二酸与H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe得到]，可得到以下聚合相
聚合物-O-C3H6-NH-CO-C4H8-CO-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe。
按照实例4的方法，在甲醇中用2N NaOH溶液对其进行水解后，得到聚合物-O-C3H6-NH-CO-C4H8-CO-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH。
以下实施例涉及药物制剂实例A注射瓶用2N盐酸将100g式Ⅰ活性化合物和5g磷酸氢二钠的31双蒸馏水溶液调节至PH6.5，无菌过滤后装入注射小瓶中并在无菌条件下冷冻干燥，然后以无菌方式封口。每一注射瓶含5mg活性化合物。
实例B栓剂将20g式Ⅰ化合物与100g大豆卵磷脂和1400g可可油熔合在一起，将混合物倒入模中并冷却。每一栓剂含20mg活性化合物。
实例C溶液将1g式Ⅰ化合物、9.38g NaH2PO4·2H2O、28.48g Na2HPO4·12H2O和0.1g氯化苄烷铵在940ml双蒸水中制成溶液。调至PH6.8，加足至11，并照射无菌。该溶液可作为眼滴剂使用。
实例D软膏将500mg式Ⅰ活性化合物与99.5g矿脂在无菌条件下混合。
实例E片剂将1kg式Ⅰ活性化合物、4Kg乳糖、1.2Kg马铃薯淀粉、0.2Kg滑石和0.1Kg硬脂酸镁按常规方式挤压成片剂，使每一片剂含10mg活性化合物。
实例F包衣片剂按类似实例E方式挤压片剂，然后按常规方式包衣蔗糖、马铃薯淀粉、滑石、黄蓍胶和着色剂。
实例G胶囊按常规方式向硬明胶胶囊中填入2Kg式Ⅰ活性化合物，使得每一胶囊中含有20mg活性化合物。
实例H安瓿将1kg式Ⅰ活性成分的60l双蒸水溶液过滤除菌，装入安瓿中，在无菌条件下冷却干燥，并以无菌方式封口。每一安瓿含10mg活性化合物。
权利要求
1.式Ⅰ线性肽及其生理上可接受的盐X-A-B-C-Arg-E-G-L-Z Ⅰ其中X为H、含1-10个碳原子的酰基、H-Asn、H-Val-Asn、H-Asp-Val-Asn、Fmoc-Gly-Gly、H-Lys-Gly-Gly、H-Lys-Pro、H-Tyr-Gly-Gly、H-Cys-Gly-Gly、H-Cys(Trt)-Gly-Gly、H-Cys-Gly-Gly-Thr-Asp-Val-Asn或H-Thr-Asp-Val-Asn，A、B和C各自独立地不存在或为氨基酸残基，选自Ala、Arg、Asn、Asp、Asp(OR)、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Lys(AC)、Lys(ACNH2)、Lys(ACSH)、Met、Orn、Phe、4-Hal-Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val，这里所提到的氨基酸残基也可被衍生，E为Gly、His或Leu-His，G不存在或为Asp或Asn，L不存在或为Gly、Ile、Leu或Leu-Leu，Z为NH2或OH，Hal为F、Cl、Br或I，AC为有1-10个碳原子的烷酰基。
2.根据权利要求1的式Ⅰ化合物的对映体或非对映体。
3.(a)H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;(b)H-Thr-Asp-Va-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;(c)H-Lys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;(d)Fmoc-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;(e)CH3-CO-Gly-Asp-Gly-Arq-His-Asp-Leu-OH;(f)H-Cys-Gly-Gly-Asp-Arg-His-Asp-Leu-OH;(g)H-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH.
4.制备权利要求1的式Ⅰ化合物或其一种盐的方法，其特征在于通过用溶剂分解剂或氢解剂处理使其从其一种功能性衍生物中释放出来，或者将式Ⅱ化合物M-Z Ⅱ其中Z的定义同前，M为(a)X，but not hydrogen，Fmoc-Gly，H-Lys-Gly，H-Lys，H-Tyr-Gly，H-Asp-Val，H-Tyr，H-Val，H-Asp，H-Cys-Gly-Gly-Thr-Asp-Val，H-Cys-Gly-Gly-Thr-Asp，H-Cys-Gly-Gly-Thr，H-Cys-Gly-Gly，H-Cys-Gly，H-Cys，H-Cys(Trt)-Gly，H-Cys(Trt)，H-Thr-Asp-Val，H-Thr-Asp or H-Thr，(b)X-A，(c)X-A-B，(d)X-A-B-C，(e)X-A-B-C-Arg，(f)X-A-B-C-Arg-E or(g)X-A-B-C-Arg-E-G与式Ⅲ氨基化合物反应，H-Q-Z Ⅲ其中Z的定义同前，Q为(a)H-A-B-C-Arg-E-G-L，H-Asn-A-B-C-Arg-E-G-L，H-Val-Asn-A-B-C-Arg-E-G-L，H-Pro-A-B-C-Arg-E-G-L，H-Gly-A-B-C-Arg-E-G-L，H-Gly-Gly-A-B-C-Arg-E-G-L，H-Asp-Val-Asn-A-B-C-Arg-E-G-L，H-Thr-Asp-Val-Asn-A-B-C-Arg-E-G-L，H-Gly-Thr-Asp-Val-Asn-A-B-C-Arg-E-G-L or H-Gly-Gly-Thr-Asp-Val-Asn-A-B-C-Arg-E-G-L，(b)H-B-C-Arg-E-G-L，(c)H-C-Arg-E-G-L，(d)H-Arg-E-G-L，(e)H-E-G-L，(f)H-G-L or(g)H-L和/或根据需要酰化游离氨基和/或通过酸或碱处理将式Ⅰ化合物转化为其一种盐。
5.生产药物制剂的方法，其特征在于将权利要求1所述的式Ⅰ化合物和/或其一种生理上可接受的盐与至少一种固体、液体或半液体赋形剂或辅助剂共同形成合适的剂量形式。
6.药物制剂，其特征在于它含有至少一种权利要求1所述的式Ⅰ化合物和/或一种其生理上可接受的盐。
7.根据权利要求1的式Ⅰ化合物或其生理上可接受的盐用于生产控制疾病的药物。
8.根据权利要求1的式Ⅰ化合物或其生理上可接受的盐用于控制疾病。
9.根据权利要求1的式Ⅰ化合物用于制备亲和柱层析的固定配位体。
10.根据权利要求1的式Ⅰ化合物用于通过亲和层析纯化整合素。
全文摘要
本发明涉及式I的新的线性肽及其盐X-A-B-C-Arg-E-G-L-Z I，其中A、B、C、E、G、L、X和Z的定义详见说明书。这些化合物可作为整合素抑制剂，且尤其可用于预防和治疗循环系统疾病和用于治疗肿瘤。
文档编号C07K7/06GK1099040SQ9410407
公开日1995年2月22日 申请日期1994年3月30日 优先权日1993年4月1日
发明者A·琼兹克, B·狄芬巴赫, B·佛尔丁-哈伯曼 申请人:默克专利股份有限公司
技术领域：
本发明涉及式Ⅰ的新的线性肽及其生理上可接受的盐，X-A-B-C-Arg-E-G-L-Z (Ⅰ)其中X为H、有1-10个碳原子的酰基、H-Asn、H-Val-Asn、H-Asp-Val-Asn、Fmoc-Gly-Gly、H-Lys-Gly-Gly、H-Lys-Pro、H-Tyr-Gly-Gly、H-Cys-Gly-Gly、H-Cys(Trt)-Gly-Gly、H-Cys-Gly-Gly-Thr-Asp-Val-Asn或H-Thr-Asp-Val-Asn，A、B和C彼此独立地为不存在或为一选自Ala、Arg、Asn、Asp、Asp(OR)、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Lys(AC)、Lys(ACNH2)、Lys(ACSH)、Met、Orn、Fhe、4-Hal-Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val的氨基酸，这里所提到的氨基酸残基也可被衍生，E为Gly、His或Leu-His，G为不存在或为Asp或Asn，L为不存在或为Gly、Ile、Leu或Leu-Leu，Z为NH2或OH，
Hal为F、Cl、Br或I，且AC为有1-10个碳原子的烷酰基。
从例如欧洲专利申请EP0406428中可知道类似的化合物。
本发明的目的是要找到具有有用性质，尤其是可用于制备药物的新化合物。
现已发现，式Ⅰ化合物及其盐具有非常有用的性质。尤其是，它们可作为整合素(integrin)抑制剂，在这种情况下它们具体是抑制β3-整合素受体与配位体之间的相互作用。这一作用可通过例如J.W.Smith等人在J.Biol.Chem.265，12267-12271(1990)中所述的方法加以证实。另外，它们还具有消炎作用，这一作用也可采用文献中已知的方法加以证实。
本发明化合物可用作人药和兽药中的药物活性成分，尤其是用于预防和治疗循环系统疾病、血栓形成、心肌梗塞、动脉硬化、炎症、中风、心绞痛、肿瘤、溶骨疾病、尤其是骨质疏松症、血管成形术后血管生成和再狭窄。它们也可用于伤口愈合过程中的辅助治疗。
本发明化合物也适宜作为杀微生物剂，避免由例如细菌、真菌或酵母等引起的感染。在为插入异体物质如生物材料、植入物、导管或心脏起搏器而进行的手术中，该物质可用作协同杀微生物剂。它们作为抗菌剂。
上、下文中所示的氨基酸缩写符号代表如下氨基酸Ala 丙氨酸Arg 精氨酸Asn 天冬酰胺Asp 天冬氨酸
Asp(OR) 天冬氨酸(β-酯)Cit瓜氨酸Cys半胱氨酸Dab2，4-二氨基丁酸Gln谷氨酰胺Glu谷氨酸Gly甘氨酸His组氨酸Ile异亮氨酸Leu亮氨酸Lys赖氨酸Lys(AC) Nε-酰基赖氨酸Lys(ACNH2) Nε-氨基酰基赖氨酸Lys(ACSH) Nε-巯基酰基赖氨酸Met甲硫氨酸Orn乌氨酸Phe苯丙氨酸4-Hal-Phe4-卤代苯丙氨酸Pro脯氨酸Ser丝氨酸Thr苏氨酸Trp色氨酸Tyr酪氨酸Val缬氨酸另外，以下各缩写符号意义如下BOC 叔丁氧羰基CBZ苄氧羰基DCCI二环已基碳化二亚胺DMF二甲基甲酰胺EDCIN-乙基-N′-(3-二甲氨基丙基)-碳化二亚胺盐酸盐Et乙基FMOC9-芴基甲氧羰基HOBt1-羟基苯并三唑Me甲基MBHA4-甲基二苯甲基胺Mtr4-甲氧基-2，3，6-三甲苯基磺酰基OBut叔丁基酯OMe甲基酯OEt乙基酯POA苯氧基乙酰基TFA三氟乙酸Trt三苯甲基。
如果上面提到的氨基酸以数种对映体形式存在，则所有这些形式及其混合物(如DL-形式)均包括在其中，例如作为式Ⅰ化合物的组成成分。氨基酸和/或氨基酸残基可以本身已知的方式衍生。
本发明还涉及式Ⅰ化合物及其盐的制备方法，其特征在于通过用溶液分解剂或氢解剂处理将其从其一种功能性衍生物中释放出来，或者将式Ⅱ肽M-OH Ⅱ其中M为(a)X，但不为氢，Fmoc-Gly，H-Lys-Gly，H-Lys，H-Tyr-Gly，H-Asp-Val，H-Tyr，H-Val，H-Asp，H-Cys-Gly-Gly-Thr-Asp-Val，H-Cys-Gly-Gly-Thr-Asp，H-Cys-Gly-Gly-Thr，H-Cys-Gly-Gly，H-Cys-Gly，H-Cys，H-Cys(Trt)-Gly，H-Cys(Trt)，H-Thr-Asp-Val，H-Thr-Asp or H-Thr，(b) X-A，(c) X-A-B，(d) X-A-B-C，(e) X-A-B-C-Arg，(f) X-A-B-C-Arg-E or(g) X-A-B-C-Arg-E-G与式Ⅲ氨基化合物反应，
其中Z的定义同前，且Q为(a)A-B-C-Arg-E-G-L，Asn-A-B-C-Arg-E-G-LVal-Asn-A-B-C-Arg-E-G-L，Pro-A-B-C-Arg-E-G-L，Gly-A-B-C-Arg-E-G-L，Gly-Gly-A-B-C-Arg-E-G-L，Asn-A-B-C-Arg-E-G-L，Val-Asn-A-B-C-Arg-E-G-LAsp-Val-Asn-A-B-C-Arg-E-G-L，Thr-Asp-Val-Asn-A-B-C-Arg-E-G-L，Gly-Thr-Asp-Val-Asn-A-B-C-Arg-E-G-L or Gly-Gly-Thr-Asp-Val-Asn-A-B-C-Arg-E-G-L，
(b) B-C-Arg-E-G-L，(c) C-Arg-E-G-L，(d) Arg-E-G-L，(e) E-G-L，(f) G-L or(g) L和/或根据情况酰化游离氨基和/或通过用酸或碱处理将式Ⅰ化合物转化为其一种盐。
除非另有说明，上、下文中残基A、B、C、E、G、L、M、Q、X和Z的含义与式Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ中相同。
以上各式中，烷基优选为甲基、乙基、异丙基或叔丁基。
X优选为氢、H-Asn、Fmoc-Gly-Gly或H-Cys(Trt)-Gly-Gly，但尤其优选H-Cys-Gly-Gly。另外，X也可为有1-10个碳原子的酰基，酰基优选为有1-8个，尤其是1、2、3或4个碳原子的烷酰基，具体优选甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基或已酰基，但也可为芳基-CO，如苯甲酰基、邻-、间-或对-甲苯甲酰基、邻-、间-或对-甲氧基苯甲酰基，以及2-萘酰基或芳基-CnH2n-CO(n＝1-4)，如Ph-CH2-CO、Ph(CH2)2-CO、Ph-(CH2)3CO或Ph-(CH2)4-CO(Ph＝苯基)，这里Ph也可被OCH3或CH3基团取代。
基团A优选为Ala、Leu或Ser，尤其为Gly，但也可不存在。B优选为Asn或Asp。C优选为Ala、D-Ala、His，尤其为Gly。E优选为Gly或His。G优选为Asp，同时L优选为Leu。Z为NH2，但尤其优选为OH。
因此，本发明尤其涉及其中至少一种所述残基具有上述优选含义之一的式Ⅰ化合物。
优选的一组化合物可以式Ⅰa表示，它对应于式Ⅰ，其中B、C、E、X和Z的定义相同，且A为Gly，G为Asp且L为Leu。
再一组优选化合物可以式Ⅰaa-Ⅰad表示，它们在其它方面对应于式Ⅰ或式Ⅰa，但在Ⅰaa中，X为氢或乙酰基A为Gly，B为Asn或Asp，C不存在，或为Ala或Gly，E为Gly或His，G为Asp，L为Leu且Z为NH2或OH，
在Ⅰab中，X为氢或酰基，A不存在或为Gly，B不存在或为Asn，C为Gly，E为Gly或His，G为Asp，L为Leu，且Z为NH2或OH，在Ⅰac中，X为氢，A不存在或为Gly，B不存在或为Asn，C不存在或为Gly，E为Gly或His，G为Asp，L为Leu，且Z为OH或NH2，在Ⅰad中，X为H-Asn，H-Val-Asn，H-Asp-Val-Asn，Fmoc-Gly-Gly，H-Lys-Gly-Gly，H-Tyr-Gly-Gly，H-Cys(Trt)-Gly-Gly，H-Cys-Gly-Gly，H-Cys-Gly-Gly-Thr-Asp-Val-Asn or H-Thr-Asp-Val-Asn，A为Gly，B为Asn，
C为Gly，E为Gly或His，G为Asp，L为Leu，且Z为NH2或OH。
尤其适合的化合物是如下化合物对应于式Ⅰ且其中A、B、C、X和Z具有上述优选定义，而其中中心氨基酸残基为L-Arg(而非D-Arg)、E为Gly或His(而非D-His)、G为Asp且L为Leu。
式Ⅰ化合物及制备它们的起始物可另外通过已知方法制得，如Houben-Weyl，Methoden der Organischen Chemie(Methods of Organis Chemistry)等经典著作中所述的方法，尤其是在已知的且适用于该反应的条件下进行。在这里也可使用没有详细提到的已知改进方法。
根据需要，也可就地形成起始物，使其不从反应混合物中分离出来，而是立即进一步反应，以得到式Ⅰ化合物。
通过溶剂分解，尤其是水解，或者通过氢解使式Ⅰ化合物从其功能性衍生物中释放出来，也可得到式Ⅰ化合物。
用于溶剂分解或氢解的优选起始物是其中含有适当保护的氨基和/或羟基以代替一个或多个游离氨基和/或羟基的化合物，优选携带氨基保护基以代替与N原子键合的H原子的化合物，例如对应于式Ⅰ，但含有NHR1基团(其中R1为氨基保护基，如BOC或CBZ)以代替NH2基团的化合物。
另外，优选以羟基保护基代替羟基的氢原子的起始物，如对应于式Ⅰ但以R″O-苯基(其中R″为羟基保护基)代替羟苯基的起始物。
起始物分子中可存在多个-相同或不同-保护氨基和/或羟基。如果所存在的保护基彼此不同，在许多情况下它们可被选择性地除去。
术语“氨基保护基”是普遍已知的，它是指适用于保护(封阻)氨基不受化学反应，但所需化学反应在分子中其它位置发生后又易于除去的基团。典型的这类基团尤其是未取代或取代酰基、芳基、芳烷氧甲基或芳烷基。由于氨基保护基在所需反应(或反应序列)之后被除去，所以它们的性质及大小并不太重要，但优选有1-20个，尤其是1-8个碳原子的保护基。术语“酰基”在本发明的方法和本发明的化合物中取其最宽含义。它包括得自脂族、芳脂族、芳族或杂环羧酸或磺酸的酰基，尤其是烷氧羰基，芳氧羰基尤其是芳烷氧羰基。这类酰基的例子有烷酰基，如乙酰基、丙酰基或丁酰基;芳烷酰基，如苯基乙酰基;芳酰基，如苯甲酰基或甲苯甲酰基;芳氧烷酰基，如POA;烷氧羰基，如甲氧羰基、乙氧羰基、2，2，2-三氯乙氧羰基、BOC、2-碘乙氧羰基;芳烷氧羰基，如CBZ(“苄酯基”)，4-甲氧苄氧羰基，FMOC和芳基磺酰基，如Mtr。优选的氨基保护基是BOC和Mtr，另外还有CBZ、FMOC、苄基和乙酰基。
术语“羟基保护基”也是普遍已知的，它系指适用于保护羟基不受化学反应，但在所需反应于分子中其它位置发生后又易于除去的基团。典型的这类基团是上述未取代或取代芳基、芳烷基或酰基，另外还有烷基。由于羟基保护基在所需化学反应或反应序列后被除去，它们的性质和大小并不重要;优选有1-20个，尤其是1-10个碳原子的保护基。羟基保护基的例子有苄基、对-硝基苯甲酰基、对-甲苯磺酰基和乙酰基，尤其优选苄基和乙酰基。天冬氨酸和谷氨酸中的COOH基团优选以其叔丁酯形式(如Asp(OBut))保护。
用作起始物的式Ⅰ化合物的功能性衍生物也可采用常规的氨基酸和肽合成法制得，例如所述经典著作和专利申请以及Merrifield Solid Phase method(B.F.Gysin和R.B.Merrifield，J.Am.Chem.Soc.94，3102et seq(1972))中所述的方法。
根据所使用的保护基，利用强酸(优选TFA或高氯酸)，但也可利用其它强无机酸(如盐酸或硫酸)或强有机羧酸(如三氯乙酸)或磺酸(如苯磺酸或对-甲苯磺酸)，可将式Ⅰ化合物从其功能性衍生物中释放出来。其它惰性溶剂的存在是可能的，但并不总是必要的。合适的惰性溶剂优选为有机溶剂，如乙酸等羧酸，四氢呋喃或二噁烷等醚，DMF等酰胺，二氯甲烷等卤代烃，甲醇、乙醇或异丙醇等醇和水。另外，以上溶剂的混合物也是适合的。TFA优选过量使用而不加入其它溶剂，高氯酸是与乙酸混合使用，且按9∶1的比例使用70%的高氯酸。用于断裂的反应温度宜为0-50℃，优选15-30℃(室温)。
基团BOC、OBut和Mtr优选利用TFA的二氯甲烷溶液或利用约3-5N HCl的二噁烷溶液于15-30℃除去，FMOC基团优选利用约5-50%二甲胺、二乙胺或哌啶的DMF溶液于15-30℃除去。
经氢解可除去的保护基(如CBZ或苄基)可在催化剂(如钯等贵金属催化剂，优选存在于碳等载体上)存在下通过氢气处理除去。适用于这一情况的溶剂是上面所述的溶剂，尤其是例如甲醇或乙醇等醇类或DMF等酰胺。氢解一般在温度为0-100℃，压力为1-200巴(优选20-30℃和1-10巴)的条件下进行。CBZ基团的氢解易于在5-10%pd-c的甲醇溶液中或利用甲酸铵(代替H2)在pd-c的甲醇/DMF溶液中于20-30℃进行。
也可按例如Houben-Weyl，loe cit，Volume 15/Ⅱ，Pages 1-806(1974)中所述的方法，在适用于肽合成的本身已知的缩合条件下反应式Ⅱ化合物获得式Ⅰ化合物。
反应优选在脱水剂，如碳化二亚胺(如DCCI或EDCI)、丙烷膦酸酐(比照Angew、Chem.92，129(1980))、二苯磷酰基叠氮化物或2-乙氧基-N-乙氧羰基-1，2-二氢喹啉存在下，于惰性溶剂如二氯甲烷等卤代烃、四氢呋喃或二噁烷等醚、DMF或二甲基乙酰胺等酰胺、乙腈等腈类或这些溶剂的混合物中于-10至40℃(优选0-30℃)进行。
除式Ⅱ化合物外，这些物质的合适反应性衍生物，如反应性基团被保护基居间封阻的化合物，也可用于该反应。氨基酸衍生物Ⅱ可以其活性酯形式使用，该活性酯宜通过加入HOBt或N-羟基琥珀酰亚胺就地形成。
式Ⅱ起始物一般是新的。它们可通过已知方法，例如上述肽合成法和保护基除去法制备。
一般来说，首先合成式R′-M′-OR″的保护肽酯，如BOC-M′-OMe或Fmoc-M′-OMe，这里M′对应于N-末端被H原子还原的残基M。它们水解后成为式R′-M′-OH的酸，如BOC-M′-OH或Fmoc-M′-OH，接着再与式Ⅲ化合物缩合。根据需要，式Ⅲ化合物中不进行反应的位置上同样也提供了相应的保护基。
在式Ⅲ化合物的情况下，类似地合成了式R′-Q-Z′-R″的肽酯，如BOC-Q-Z′-OMe或Fmoc-Q-Z′-OMe，其中Z′为-NH-或-O-，然后，在为制备式Ⅰ化合物而进行的缩合反应之前按已知方式切断保护基R′，例如Fmoc可通过用哌啶/DMF溶液处理除去。
更为有利的是，利用按照改进的Merrifield技术的最近的肽合成法，并利用如Peptides，Proc.8th Am.Pept.Symp.，Eds.V.Hruby and D.H.Rich，Pierce Comp.Ⅲ，pp 73-77(1983)by A.Jonczyk and J.Meienhofer(Fmoc Strategy)中所述的肽合成装置，或者是使用 Angew.Chem.104，375-391(1992)中提供的技术。这类方法本身是已知的，因此这里没必要对其进行叙述。
式Ⅰ的碱可用酸转化为适当的酸加成盐。适用于该反应的酸尤其是产生生理上可接受的盐的酸，因此，可使用硫酸、硝酸、氢卤酸(如盐酸或氢溴酸)、磷盐(如正磷酸)和氨基磺酸等无机酸，以及有机酸，尤其是脂族、脂环族、芳脂族、芳族或杂环一元或多元羧酸、磺酸或硫酸，如甲酸、乙酸、丙酸、新戊酸、二乙基乙酸、丙二酸、琥珀酸、庚二酸、富马酸、马来酸、乳酸、酒石酸、苹果酸、苯甲酸、水杨酸、2-或3-苯基丙酸、柠檬酸、谷氨酸、抗坏血酸、烟酸、异烟酸、甲磺酸或乙磺酸、乙烷二磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、对-甲苯磺酸、萘磺酸或萘二磺酸以及十二烷基磺酸。与生理上不可接受的酸形成的盐，如苦味酸盐，可用于分离和/或纯化式Ⅰ化合物。
另一方面，式Ⅰ的酸也可通过与碱反应转化为其一种生理上可接受的金属盐或铵盐。此处合适的盐尤其是钠、钾、镁、钙和铵盐，也可以是取代的铵盐，如二甲基-、二乙基-或二异丙基铵盐，单乙醇-、二乙醇-或三乙醇铵盐，环已基-或二环已基铵盐，二苄基乙二铵盐，以及与N-甲基-D-葡糖胺或精氨酸或赖氨酸形成的盐。
另外，式Ⅰ新化合物可作为整合素配位体用于制备亲和层析柱，该柱用于制备纯整合素。
在这种情况下，配位体，即式Ⅰ肽衍生物是通过其结合功能与聚合支持物共价偶联。
合适的聚合支持材料是肽化学中本身已知的聚合固相，优选具有亲水性质，如交联多糖(如纤维素、琼脂糖或交联葡聚糖)、丙烯酰胺、以聚乙二醇为主要成分的聚合物或Tentakcl Polymers 。
与聚合支持物交联的合适结合官能团优选为有2-12个碳原子的线性亚烷基链，其一端直接与聚合物键合，且另一端具有如羟基、氨基、巯基、马来酰亚氨基或-COOH等官能团，并适于与相应肽的C-或N-末端部分相连。
在这种情况下，肽也可能直接地或以类似方式通过另一个结合官能团与聚合物的结合部位键合。含有功能化侧链的氨基酸残基的肽也可通过它们与聚合物的结合官能团键合。
而且，可对作为式Ⅰ肽组分的某些氨基酸残基进行侧链修饰，使得它们适合于通过SH、OH、NH2或COOH等基团与聚合物的结合部位结合。
在这方面，异常氨基酸也是可能的，如在苯环的4-位上携带了巯基、羟基、氨基或羧烷基链的苯丙氨酸衍生物，其官能团位于链的末端。
其侧链可直接用作结合官能团的氨基酸的例子有Lys、Orn、Arg、Dab、Asp、Asn、Glu、Gln、Ser、Thr、Cys、Cit或Tyr。
N-末端结合点的例子有-CO-CnH2n-NH2、-CO-CnH2n-OH、-CO-CnH2n-SH或-CO-CnH2n-COOH，其中n＝2-12，亚烷基链的长度并不是关键，根据情况它也可被合适的芳基或烷芳基部分或完全取代。
C-末端结合点可以是例如-O-CnH2n-SH、-O-CnH2n-OH、-O-CnH2n-NH2、-O-CnH2n-COOH、-NH-CnH2n-SH、-NH-CnH2n-OH、-NH-CnH2n-NH2或-NH-CnH2n-COOH，其中n和亚烷基链的定义与前述部分相同。
N-末端和C-末端结合点也可用作已功能化的氨基酸侧链的结合成分。这里合适的氨基酸残基是例如Lys(CO-C5H10-NH2)、Asp(NH-C3H5-COOH)或Cys(C3H6-NH2)，该结合点总是与侧链官能团键合。
制备亲和层柱材料是在本身已知的缩合氨基酸的常规条件下进行，它们已在式Ⅰ化合物的制备部分进行了概括，或者在Pierce，Immunotechnology Catalog & Handbook(1990)中已有记载。
通过将式Ⅰ新化合物及其生理上可接受的盐与至少一种赋形剂或助剂-根据需要还包括一种或多种其它活性成分-一起制成合适的剂量形式，可生产出药物制剂。由此获得的制剂可作为人用或兽用药品使用。合适的赋形物质是适用于肠内(如口腔、直肠)、非肠道(如静脉注射)或局部(如表皮、皮肤、眼或鼻)给药或适用于以吸入喷雾方式给药且不与新化合物反应的有机或无机物质，如水或等渗盐水溶液、低级醇、植物油、苄基醇、聚乙二醇、三乙酸甘油酯和其它脂肪酸甘油酯、明胶、大豆卵磷脂、碳水化合物(如乳糖或淀粉)、硬脂酸镁、滑石、纤维素和矿脂。片剂、包衣片剂、胶囊、糖浆、汁液或滴剂等尤其是用于口服给药;尤其感兴趣的是薄膜片剂和包有肠溶衣或胶囊壳的胶囊。栓剂适用于直肠给药，溶液(优选油状溶液或水溶液)、悬浮液、乳液或植入物等被用于通过非肠道途径给药。溶液(如可以眼滴剂形式使用)、悬浮液、乳液、乳油、软膏或敷布等适用于表皮给药。含有溶于或悬浮于推进气体或推进气体混合物(如CO2或含氯氟烃)中的活性成分的喷雾剂可用作吸入喷雾剂。这里，活性成分宜于以微粒化形式使用，其中也可存在一种或多种生理上可接受的其它溶剂，如乙醇。吸入溶液可借助常规吸入器给药。也可将新化合物冷却干燥，并将所获得的冻干粉用于生产注射制剂。注射液可以大药丸或连续输液(如静脉、肌内、皮下或鞘内)方式给药。上述制剂可被消毒和/或可含有辅助物质，如防腐剂、稳定性和/或湿润剂、乳化剂、影响渗透压的盐、缓冲物质、着色剂和/或调味剂。根据需要，它们也可含有一种或多种其它活性物质，如一种或多种维生素。
一般来说，本发明物质可按类似于其它已知市售肽的方式，尤其是类似于US-A-4，472，305中所述化合物的方式给药，优选每剂量单位的剂量为0.05-500mg，尤其是0.5-100mg。日剂量优选为0.01-2mg/kg体重。针对每一患者的具体剂量取决于许多不同因素，例如所用具体化合物的活性，患者的年龄、体重、总的健康状况、性别，饮食，给药时间和途径，排泄途径，药物组合情况以及所要治疗的具体疾病的严重程度。优选非肠道途径给药。
上、下文中所有温度均指摄氏度。在以下实施例中，“常规操作”指加水，根据需要用乙醚或二氯甲烷中和萃取混合物，分离出有机相，于Na2SO4上干燥，过滤，蒸发并将残余物通过硅胶层析或结晶纯化。RT＝在Lichrosorb RP SelectB(250-4.7μm)柱上的保留时间，洗脱剂0.3%TFA的水溶液;异丙醇梯度在50分钟内以1ml/min的流速并在215nm处检测时为0-80%(体积)。M+＝质谱中的分子峰，通过快速原子轰击法(FAB)测得，一般为M++H，即增加一个质子单位的具体化合物的质量。
实施例1将2.2g BOC-Asp-Gly-OH溶于150ml二氯甲烷和20ml DMF的混合物中，冷却至0℃，并用0.5gDCCI、0.3gHOBt、0.23ml N-甲基吗啉和1当量H-Arg-His-Asp-Leu-OMe[两种肽均可按改进的Merrifield技术获得]处理。反应混合物于0℃搅拌20小时后，再于室温搅拌6小时。浓缩，用混合床离子交换剂处理，并加到NaHCO3水溶液中。通过抽滤过滤沉积的产物，并水洗。用乙酸乙酯/石油醚洗涤后得到BOC-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe。
类似地，通过缩合H-Arg-His-Asp-Leu-OMe与下列成分可得到相应产物
BOC-Gly-OHBOC-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Asn-Gly-Asp-Gly-OHBOC-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-OHBOC-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-OHBOC-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Lys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-OHBOC-Lys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Tyr-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-OHBOC-Tyr-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Ala-Asp-Gly-OHBOC-Ala-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-D-Ala-Asp-Gly-OHBOC-D-Ala-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Gly-Asp-Ala-OHBOC-Gly-Asp-Ala-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Gly-D-Asp-Gly-OHBOC-Gly-D-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Gly-Asp-D-Ala-OHBOC-Gly-Asp-D-Ala-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Gly-Asp-OHBOC-Gly-Asp-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Cys(Trt)-Gly-Gly-Gly-Asp-OHBOC-Cys(Trt)-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-OHBOC-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Cys(Trt)-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-OHBOC-Cys(Trt)-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-OHBOC-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Cys-Gly-Gly-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-OHBOC-Cys-Gly-Gly-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-OHBOC-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe.
实施例2类似于实施例1，通过将BOC-Gly-Asp-Gly-OH与下列物质反应可得到相应的产物H-Arg-His-Asp-OMeBOC-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-OMe;
H-Arg-His-OMeBOC-Gly-Asp-Gly-Arg-His-OMe;
H-Arg-His-Asn-Leu-OMeBOC-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asn-Leu-OMe;
H-Arg-Gly-Asp-Leu-OMeBOC-Gly-Asp-Gly-Arg-Gly-Asp-Leu-OMe;
H-Arg-His-D-Asp-Leu-OMe:
BOC-Gly-Asp-Gly-Arg-His-D-Asp-Leu-OMe;
H-Arg-D-His-Asp-Leu-OMeBOC-Gly-Asp-Gly-Arg-D-His-Asp-Leu-OMe;
H-D-Arg-His-Asp-Leu-OMeBOC-Gly-Asp-Gly-D-Arg-His-Asp-Leu-OMe.
类似于实施例1，通过将BOC-Gly-Asn-Gly-OH与下列物质反应，可得到相应产物H-Arg-His-Asn-Leu-OMeBOC-Gly-Asn-Gly-Arg-His-Asn-Leu-OMe;
H-Arg-His-Asp-Leu-OMeBOC-Gly-Asn-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe.
实施例3类似于实施例1，通过缩合下列成分可得到相应产物BOC-Leu-Asp-His-Arg-OH与H-Gly-Asp-Gly-OEtBOC-Leu-Asp-His-Arg-Gly-Asp-Gly-OEt;
BOC-Lys-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-Leu-OH与H-His-Asp-Gly-OEtBOC-Lys-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-Leu-His-Asp-Gly-OEt;
BOC-Lys-Pro-Ser-Asp-OH与H-Gly-Arg-Gly-OEtBOC-Lys-Pro-Ser-Asp-Gly-Arg-Gly-OEt;
BOC-Arg-His-OH与H-Asp-Leu-OMeBOC-Arg-His-Asp-Leu-OMe;
BOC-D-Lys-D-Pro-D-Ser-D-Asp-D-Gly-OH与H-D-Arg-D-Gly-OMeBOC-D-Lys-D-Pro-D-Ser-D-Asp-D-Gly-D-Arg-D-Gly-OMe;
BOC-Leu-Asp-His-OH与H-Arg-Gly-Asp-OMeBOC-Leu-Asp-His-Arg-Gly-Asp-OMe;
BOC-Leu-Asp-His-OH与H-Arg-Gly-OMeBOC-Leu-Asp-His-Arg-Gly-OMe;
BOC-Gly-Arg-His-OH与H-Asp-Leu-Leu-OMeBOC-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-OMe;
BOC-Arg-Gly-OH与H-Asp-Leu-OMeBOC-Arg-Gly-Asp-Leu-OMe;
BOC-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-OH与H-Leu-His-Gly-OMeBOC-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-Leu-His-Gly-OMe;
BOC-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-OH与H-His-Asp-Ile-OMeBOC-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Ile-OMe.
实施例4将1.3g BOC-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe溶于60ml甲醇，用1.5ml 2NNaOH溶液处理，并于25℃搅拌4小时。除去溶剂后，将残余物溶于水中，加入稀HCl调节PH至3，用乙酸乙酯萃取混合物。用Na2SO4干燥萃取物，除去溶剂后得到BOC-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH，将其溶入20ml 2NHCl的二噁烷溶液中，并于室温下搅拌2小时。浓缩干燥反应混合物，通过HPLC纯化残余物，得到H-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝9.5;M+712。
由实例1化合物起始，类似地除去保护基，得到以下产物
H-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝9.2;M+597;
H-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝11.3;M+883;
H-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝12.9;M+982;
H-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝13.4; M+1097;
H-Lys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝11.5;M+1011;
H-Tyr-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝13.8;M+1046;
H-Ala-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝10.7;M+783;
H-D-Ala-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝11.1;M+783;
H-Gly-Asp-Ala-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝11.0;M+784;
H-Gly-D-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝10.5;M+770;
H-Gly-Asp-D-Ala-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝11.9;M+784;
H-Gly-Asp-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝8.1;M+712;
H-Cys(Trt)-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝27.7;M+1171;
H-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝11.7;M+929;
H-Cys(Trt)-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝27;M+1228;
H-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝11.7;M+987;
H-Cys-Gly-Gly-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝12.7;M+1415;
H-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH.
实施例5按照类似于实施例4的方法，由实例2化合物起始，通过水解和除去BOC保护基，得到以下化合物。
H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-OH;RT＝3.5;M+656;
H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-OH;RT＝3.5;M+541;
H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asn-Leu-OH;RT＝11.2;M+769;
H-Gly-Asp-Gly-Arg-Gly-Asp-Leu-OH;RT＝11.4;M+689;
H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-D-Asp-Leu-OH;RT＝11.7;M+769;
H-Gly-Asp-Gly-Arg-D-His-Asp-Leu-OH;RT＝11.3;M+769;
H-Gly-Asp-Gly-D-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝10.9;M+769.
H-Gly-Asn-Gly-Arg-His-Asn-Leu-OH;RT＝10.8;M+767;
H-Gly-Asn-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝11.6;M+768.
实施例6按照类似于实例4的方法，由实例3化合物起始，通过水解和除去BOC保护基得到以下化合物H-Leu-Asp-His-Arg-Gly-Asp-Gly-OH;RT＝11.1;M+769;
H-Lys-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-Leu-His-Asp-Gly-OH;RT＝9.8;M+1011;
H-Lys-Pro-Ser-Asp-Gly-Arg-Gly-OH;RT＝3.5;M+716;
H-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝8.0;M+540;
H-D-Lys-D-Pro-D-Ser-D-Asp-D-Gly-D-Arg-D-Gly-OH;RT＝24.7;M+938;
H-Leu-Asp-His-Arg-Gly-Asp-OH;RT＝11.5;M+712;
H-Leu-Asp-His-Arg-Gly-OH;RT＝3.9;M+597;
H-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-OH;RT＝15.3;M+710;
H-Arg-Gly-Asp-Leu-OH;RT＝7.0;M+460;
H-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-Leu-His-Gly-OH;RT＝7.2;M+871;
H-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Ile-OH;RT＝15.1;M+986.
实施例7将0.9gH-Arg-His-Asp-Leu-OH溶于200mlDMF水溶液，并在搅拌下通过滴加0.5g溶于10ml二氯甲烷中的乙酰氯处理。搅拌混合物15分钟并超浓缩，分离沉淀产物，得到H3C-CO-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝12.4;M+582.
通过乙酰化下列化合物得到相应产物H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-OHH3C-CO-Gly-Asp-Gly-Arg-His-OH;
H-Arg-Gly-Asp-Leu-OHH3C-CO-Arg-Gly-Asp-Leu-OH;RT＝13.0;M+502;
H-Lys-Pro-Ser-Asp-Gly-Arg-Gly-OHH3C-CO-Lys-Pro-Ser-Asp-Gly-Arg-Gly-OH
H-Arg-His-Asp-Leu-OHH3C-CO-Arg-His-Asp-Leu-OH;
H-D-Lys-D-Pro-D-Ser-D-Asp-D-Gly-D-Arg-D-Gly-OHH3C-CO-D-Lys-D-Pro-D-Ser-D-Asp-D-Gly-D-Arg-D-Gly-OH;
H-Leu-Asp-His-Arg-Gly-Asp-OHH3C-CO-Leu-Asp-His-Arg-Gly-Asp-OH;
H-Leu-Asp-His-Arg-Gly-OHH3C-CO-Leu-Asp-His-Arg-Gly-OH.
实施例8类似于实例1，通过将H3C-CO-Gly-Asp-Gly-Arg-His-OH与H-Asp-Leu-OMe缩合后水解，得到H3C-CO-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;RT＝14.1M+811。
实施例9将2.0gBOC-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe在25ml 4N盐酸的二噁烷溶液中搅拌2小时。然后浓缩反应混合物，将残余物溶于100ml DMF并将溶液冷却至0℃。依次加入1当量Fmoc-Gly-Gly-Gly-Asp-OH、1.3gTBTU和1.0ml三乙胺。该溶液于0℃搅拌2小时，室温搅拌12小时。浓缩后将浓缩液倒入NaHCO3溶液。过滤出在此过程中沉淀的产物，溶于50ml甲醇，然后用1.5ml 2N NaOH溶液处理溶液，于25℃搅拌4小时，并按常规方式操作，得到Fmoc-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH。RT＝28.0;M+1105。
类似地，通过缩合H-Arg-His-Asp-Leu-OMe与以下化合物可得到相应产物Fmoc-Gly-OHFmoc-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Asn-Gly-Asp-Gly-OHFmoc-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-OHFmoc-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-OHFmoc-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Lys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-OHFmoc-Lys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Tyr-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-OHFmoc-Tyr-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Ala-Asp-Gly-OHFmoc-Ala-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-D-Ala-Asp-Gly-OHFmoc-D-Ala-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Gly-Asp-Ala-OHFmoc-Gly-Asp-Ala-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Gly-D-Asp-Gly-OHFmoc-Gly-D-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Gly-Asp-D-Ala-OHFmoc-Gly-Asp-D-Ala-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Gly-Asp-OHFmoc-Gly-Asp-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Cys(Trt)-Gly-Gly-Gly-Asp-OHFmoc-Cys(Trt)-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-OHFmoc-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Cys(Trt)-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-OHFmoc-Cys(Trt)-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-OHFmoc-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Cys-Gly-Gly-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-OHFmoc-Cys-Gly-Gly-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;
Fmoc-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-OHFmoc-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH.
实施例10将0.7g BOC-Gly-Asp-Gly-Arg(BOC)-His-Asp-Leu-OH溶于100ml二氯甲烷，用1.4当量MBHA树脂处理，并于室温下搅拌24小时。除去溶剂后得到BOC-Gly-Asp-Gly-Arg(BOC)-His-Asp-Leu-MBHA树脂，将其溶入20ml 2NHCl的二噁烷溶液，并于室温下搅拌2小时。接着用TFA处理，得到H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-NH2;RT＝8.8;M+768。
类似地，通过将下列化合物与MBHA树脂反应可得到相应的肽酰胺BOC-Arg(BOC)-His-Asp-Leu-OHH-Arg-His-Asp-Leu-NH2;RT＝5.4;M+539;
BOC-Arg(BOC)-Gly-Asp-Leu-OHH-Arg-Gly-Asp-Leu-NH2;RT＝4.7;M+459;
BOC-Gly-Asp-Gly-Arg(BOC)-Gly-Asp-Leu-OHH-Gly-Asp-Gly-Arg-Gly-Asp-Leu-NH2.
实施例11与实例7类似，由H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-NH2起始，通过乙酰化该肽可得到H3C-CO-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-NH2;RT＝12.4;M+810。
同样可得到以下化合物H-Arg-His-Asp-Leu-NH2H3C-CO-Arg-His-Asp-Leu-NH2;RT＝11.1;M+581;
H-Arg-Gly-Asp-Leu-NH2H3C-CO-Arg-Gly-Asp-Leu-NH2;RT＝11.3;M+501.
实施例12将80mg H-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH于0.01m HCl中溶解3-4次，并在每次溶解操作后冷冻干燥。接着通过HPLC纯化，得到H-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH×HCl。
类似地，通过用TFA处理H-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH，可得到H-Thr-Asp-Val-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH×TFA;RT＝11.8;M+1198。
实施例13为了制备亲和相，将0.9gN-马来酰亚氨-C5H10-CO-NH-C3H6-聚合物[可通过N-马来酰亚氨-C5H10-COOH与H2N-C3H6-聚合物缩合得到]悬浮于10ml0.1M磷酸盐缓冲液(PH7)中，并于4℃加入1当量H-Cys-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-His-Asp-Leu-OH。搅拌混合物4小时，同时加热反应混合物至室温，过滤出固体残余物，两次用10ml缓冲液(PH7)洗涤后三次用10ml水洗涤。得到H-Cys[3-N-马来酰亚氨-C5H10-CO-NH-C3H6-聚合物)]-Gly-Gly-Gly-Asp-Arg-His-Asp-Leu-OH。
实施例14类似于实施例1，通过缩合聚合物-O-C3H6-NH2-[可从市场上买到]与HOOC-C4H8-CO-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe[可通过在所述条件下缩合己二酸与H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe得到]，可得到以下聚合相
聚合物-O-C3H6-NH-CO-C4H8-CO-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OMe。
按照实例4的方法，在甲醇中用2N NaOH溶液对其进行水解后，得到聚合物-O-C3H6-NH-CO-C4H8-CO-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH。
以下实施例涉及药物制剂实例A注射瓶用2N盐酸将100g式Ⅰ活性化合物和5g磷酸氢二钠的31双蒸馏水溶液调节至PH6.5，无菌过滤后装入注射小瓶中并在无菌条件下冷冻干燥，然后以无菌方式封口。每一注射瓶含5mg活性化合物。
实例B栓剂将20g式Ⅰ化合物与100g大豆卵磷脂和1400g可可油熔合在一起，将混合物倒入模中并冷却。每一栓剂含20mg活性化合物。
实例C溶液将1g式Ⅰ化合物、9.38g NaH2PO4·2H2O、28.48g Na2HPO4·12H2O和0.1g氯化苄烷铵在940ml双蒸水中制成溶液。调至PH6.8，加足至11，并照射无菌。该溶液可作为眼滴剂使用。
实例D软膏将500mg式Ⅰ活性化合物与99.5g矿脂在无菌条件下混合。
实例E片剂将1kg式Ⅰ活性化合物、4Kg乳糖、1.2Kg马铃薯淀粉、0.2Kg滑石和0.1Kg硬脂酸镁按常规方式挤压成片剂，使每一片剂含10mg活性化合物。
实例F包衣片剂按类似实例E方式挤压片剂，然后按常规方式包衣蔗糖、马铃薯淀粉、滑石、黄蓍胶和着色剂。
实例G胶囊按常规方式向硬明胶胶囊中填入2Kg式Ⅰ活性化合物，使得每一胶囊中含有20mg活性化合物。
实例H安瓿将1kg式Ⅰ活性成分的60l双蒸水溶液过滤除菌，装入安瓿中，在无菌条件下冷却干燥，并以无菌方式封口。每一安瓿含10mg活性化合物。
权利要求
1.式Ⅰ线性肽及其生理上可接受的盐X-A-B-C-Arg-E-G-L-Z Ⅰ其中X为H、含1-10个碳原子的酰基、H-Asn、H-Val-Asn、H-Asp-Val-Asn、Fmoc-Gly-Gly、H-Lys-Gly-Gly、H-Lys-Pro、H-Tyr-Gly-Gly、H-Cys-Gly-Gly、H-Cys(Trt)-Gly-Gly、H-Cys-Gly-Gly-Thr-Asp-Val-Asn或H-Thr-Asp-Val-Asn，A、B和C各自独立地不存在或为氨基酸残基，选自Ala、Arg、Asn、Asp、Asp(OR)、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Lys(AC)、Lys(ACNH2)、Lys(ACSH)、Met、Orn、Phe、4-Hal-Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val，这里所提到的氨基酸残基也可被衍生，E为Gly、His或Leu-His，G不存在或为Asp或Asn，L不存在或为Gly、Ile、Leu或Leu-Leu，Z为NH2或OH，Hal为F、Cl、Br或I，AC为有1-10个碳原子的烷酰基。
2.根据权利要求1的式Ⅰ化合物的对映体或非对映体。
3.(a)H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;(b)H-Thr-Asp-Va-Asn-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;(c)H-Lys-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;(d)Fmoc-Gly-Gly-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;(e)CH3-CO-Gly-Asp-Gly-Arq-His-Asp-Leu-OH;(f)H-Cys-Gly-Gly-Asp-Arg-His-Asp-Leu-OH;(g)H-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH.
4.制备权利要求1的式Ⅰ化合物或其一种盐的方法，其特征在于通过用溶剂分解剂或氢解剂处理使其从其一种功能性衍生物中释放出来，或者将式Ⅱ化合物M-Z Ⅱ其中Z的定义同前，M为(a)X，but not hydrogen，Fmoc-Gly，H-Lys-Gly，H-Lys，H-Tyr-Gly，H-Asp-Val，H-Tyr，H-Val，H-Asp，H-Cys-Gly-Gly-Thr-Asp-Val，H-Cys-Gly-Gly-Thr-Asp，H-Cys-Gly-Gly-Thr，H-Cys-Gly-Gly，H-Cys-Gly，H-Cys，H-Cys(Trt)-Gly，H-Cys(Trt)，H-Thr-Asp-Val，H-Thr-Asp or H-Thr，(b)X-A，(c)X-A-B，(d)X-A-B-C，(e)X-A-B-C-Arg，(f)X-A-B-C-Arg-E or(g)X-A-B-C-Arg-E-G与式Ⅲ氨基化合物反应，H-Q-Z Ⅲ其中Z的定义同前，Q为(a)H-A-B-C-Arg-E-G-L，H-Asn-A-B-C-Arg-E-G-L，H-Val-Asn-A-B-C-Arg-E-G-L，H-Pro-A-B-C-Arg-E-G-L，H-Gly-A-B-C-Arg-E-G-L，H-Gly-Gly-A-B-C-Arg-E-G-L，H-Asp-Val-Asn-A-B-C-Arg-E-G-L，H-Thr-Asp-Val-Asn-A-B-C-Arg-E-G-L，H-Gly-Thr-Asp-Val-Asn-A-B-C-Arg-E-G-L or H-Gly-Gly-Thr-Asp-Val-Asn-A-B-C-Arg-E-G-L，(b)H-B-C-Arg-E-G-L，(c)H-C-Arg-E-G-L，(d)H-Arg-E-G-L，(e)H-E-G-L，(f)H-G-L or(g)H-L和/或根据需要酰化游离氨基和/或通过酸或碱处理将式Ⅰ化合物转化为其一种盐。
5.生产药物制剂的方法，其特征在于将权利要求1所述的式Ⅰ化合物和/或其一种生理上可接受的盐与至少一种固体、液体或半液体赋形剂或辅助剂共同形成合适的剂量形式。
6.药物制剂，其特征在于它含有至少一种权利要求1所述的式Ⅰ化合物和/或一种其生理上可接受的盐。
7.根据权利要求1的式Ⅰ化合物或其生理上可接受的盐用于生产控制疾病的药物。
8.根据权利要求1的式Ⅰ化合物或其生理上可接受的盐用于控制疾病。
9.根据权利要求1的式Ⅰ化合物用于制备亲和柱层析的固定配位体。
10.根据权利要求1的式Ⅰ化合物用于通过亲和层析纯化整合素。
全文摘要
本发明涉及式I的新的线性肽及其盐X-A-B-C-Arg-E-G-L-Z I，其中A、B、C、E、G、L、X和Z的定义详见说明书。这些化合物可作为整合素抑制剂，且尤其可用于预防和治疗循环系统疾病和用于治疗肿瘤。
文档编号C07K7/06GK1099040SQ9410407
公开日1995年2月22日 申请日期1994年3月30日 优先权日1993年4月1日
发明者A·琼兹克, B·狄芬巴赫, B·佛尔丁-哈伯曼 申请人:默克专利股份有限公司
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