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2021-02-01 09:02:35|
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起点商标网 专利名称：新化合物及其制备的制作方法
技术领域：
本发明涉及新化合物以及其可药用盐。
更具体地讲，本发明涉及新的肽化合物及其可药用盐，这些化合物具有药理学活性例如内皮素(endothelin)拮抗活性等，本发明还涉及这些化合物的制备方法、含有这些化合物的药物组合物、以及治疗性地应用这些化合物治疗与预防内皮素介导的疾病例如高血压等的方法。
药理学和结构学证据证明至少存在两种内皮素受体亚型，即ETA和ETB。ETA受体主要分布于血管平滑肌、心脏及肠，而ETB受体存在于大脑皮层、肺和肾中。最近，发现除ETA受体外，血管收缩药ETB受体也存在于血管平滑肌中。ETA受体比ET-3和sarafotoxinS6c具有更高的对ET-1的亲和力，而ETB受体对ET和sarafotoxin肽的所有异型显示几乎相同的亲和力。
本发明化合物可以具有ETB拮抗活性。
本发明的一个目的是提供具有药理学活性例如内皮素，特别是ETB拮抗活性等的新的、有用的肽化合物及其可药用盐。
本发明的另一个目的是提供用于制备所述肽化合物及其盐的方法。
本发明的进一步的目的是提供包含作为活性成份的所述肽化合物或其可药用盐的药物组合物。
本发明另一进一步的目的是提供将所述化合物用于治疗和预防内皮素、特别是ETB介导的疾病例如高血压等的方法。
本发明的公开内容本发明的目标化合物可以用下列通式(I)或其可药用盐来表示 其中R4为酰基；R5为低级烷基；R6为任选取代的芳(低级)烷基或任选取代的杂环基(低级)烷基；R7为低级烷基或低级烷硫基(低级)烷基；R8为羧基或被保护的羧基；A为低级亚烷基；Z为下式基团 或-O-R3其中R1为氢、低级烷基、常见的氨基保护基团或任选取代的芳(低级)烷基；R2为氢、低级烷基、任选取代的芳(低级)烷基、任选取代的杂环基(低级)烷基、任选取代的环(低级)烷基(低级)烷基、常见的氨基保护基、氨基(或被保护的氨基)(低级)烷基、任选取代的杂环基羰基或环(低级)烷基；R3为任选取代的杂环基(低级)烷基；和m为整数0至2。
根据本发明，新的肽化合物(I)及其盐可以通过下列路线所示的方法来制备方法1 (II)或其在羧基上的反应活性衍生物，或其盐 或其在氨基上的反应活性衍生物，或其盐 或其盐方法2 或其盐 或其盐方法3 或其在氨基上的反应活性衍生物，或其盐 或其盐方法4 或其盐 或其盐其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、A、Z和m各自如上所定义；Ra2为氨基保护基；Ra8为被保护的羧基；
R9为氢、C1-C5烷基、任选取代的芳基(C1-C5)烷基、任选取代的杂环基(C1-C5)烷基、任选取代的环(低级)烷基(C1-C5)烷基、或氨基(或被保护的氨基)-(C1-C5)烷基；X为离去基团或氢，和Y为亚甲基或羰基。
在上述方法中所用的某些起始化合物是新的，并且可以按照下列方法和/或按下列制备中所述方法或按常规方式制备。
制备方法1 或其在羧基上的反应活性衍生物，或其在氨基上的反应活性衍生物，或其盐或其盐 或其盐 或其盐制备方法2 或其在氨基上的反应活性衍生物，或其盐或其盐 其中R4、R5、R6、R7、R8、A、Z和m各自如上所定义；R10为氨基保护基，和R11为被保护的羧基。
适宜的目标化合物(I)的可药用盐可以是常规的无毒盐，并且包括酸加成盐，例如有机酸盐(例如乙酸盐、三氟乙酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、富马酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、甲酸盐、甲苯磺酸盐等)、无机酸盐(例如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐等)、或与碱形成的盐，所述碱例如为氨基酸(例如精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸等)、碱金属盐(例如钠盐、钾盐等)、碱土金属盐(例如钙盐、镁盐等)、铵盐、有机碱盐(例如三甲胺盐、三乙胺盐、吡啶盐、甲基吡啶盐、二环己胺盐、N，N′-二苄基乙二胺盐等)等。
在本说明书的上述及随后的描述中，本发明在其范围内所包括的各种定义的适宜实施例及说明在下面作了详细解释。
在本说明书中，氨基酸、肽、保护基、缩合剂等是用IUPAC-IUB(Commission on Blological Nomenclature)的缩写(这在本技术领域中常用)来表示的。
术语“低级”是指1-6、优选1-4个碳原子，而术语“高级”是指大于6个、优选7-12个碳原子，除非另外指出。
适宜的“酰基”可以包括脂族酰基、芳族酰基、杂环酰基和被衍生自诸如羧酸、碳酸、氨基甲酸、磺酸之类的酸的芳基或杂环基所取代的脂族酰基。
脂族酰基可以包括饱和的或不饱和的、无环或环状的脂族酰基，例如氨基甲酰基、低级链烷酰基(例如甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基、异丁酰基、3，3-二甲基丁酰基、4，4-二甲基戊酰基)、戊酰基、异戊酰基、新戊酰基、己酰基、3-甲基戊酰基等)、低级烷磺酰基(例如甲磺酰基、乙磺酰基、丙磺酰基等)、低级烷氧羰基(例如甲氧羰基、乙氧羰基、丙氧羰基、丁氧羰基、叔丁氧羰基等)、低级链烯酰基(例如丙烯酰基、甲基丙烯酰基、巴豆酰基等)、(C3-C7)环烷基羰基(例如环己基羰基等)、(C3-C7)环烷基(低级)链烷酰基(例如环己基乙酰基等)、脒基、被保护的羧基羰基例如低级烷草酰基(alkoxalyl)(例如甲草酰基、乙草酰基、叔丁草酰基等)、C3-C7环烷氧羰基(例如环己氧羰基等)、(杂环酰基)(低级)链烷酰基，其中所述杂环酰基与下述基团相同，例如吗啉代羰基(低级)链烷酰基(例如3-吗啉代羰基丙酰基等)、低级或高级烷基氨基甲酰基(例如甲基氨基甲酰基、乙基氨基甲酰基、丙基氨基甲酰基、异丙基氨基甲酰基、丁基氨基甲酰基、2-甲基丁基氨基甲酰基、戊基氨基甲酰基、1，3-二甲基丁基氨基甲酰基、己基氨基甲酰基、庚基氨基甲酰基、辛基氨基甲酰基、壬基氨基甲酰基等)、二(低级)烷基氨基甲酰基(例如N-甲基-N-乙基氨基甲酰基、二甲基氨基甲酰基、二乙基氨基甲酰基、二丙基氨基甲酰基、二异丙基氨基甲酰基、二丁基氨基甲酰基、二异丁基氨基甲酰基、二己基氨基甲酰基等)、C3-C7环烷基氨基甲酰基(例如环丙基氨基甲酰基、环丁基氨基甲酰基、环戊基氨基甲酰基、环己基氨基甲酰基、环庚基氨基甲酰基等)、N-低级烷基-N-(C3-C7)环烷基氨基甲酰基(例如N-甲基-N-环丙基氨基甲酰基、N-甲基-N-环己基氨基甲酰基、N-乙基-N-环己基氨基甲酰基、N-丙基-N-己基氨基甲酰基等)、二(C3-C7)环己基氨基甲酰基(例如二环丙基氨基甲酰基、二环戊基氨基甲酰基、二环己基氨基甲酰基等)、N-[二(低级)烷基氨基甲酰基(C3-C7)环烷基]氨基甲酰基[例如N-(1-(或4-)二甲基氨基甲酰基环己基)氨基甲酰基等]、N-[二(低级)烷基氨基甲酰基(低级)烷基(C3-C7)环烷基]氨基甲酰基[例如N-[1-(或4-)(二甲基氨基甲酰基甲基)环己基]氨基甲酰基等]、N-[氨基甲酰基(低级)烷基]氨基甲酰基[例如N-[1-氨基甲酰基-2-甲基丁基]氨基甲酰基等]、N-[N-(低级)烷基氨基甲酰基(低级)烷基]氨基甲酰基[例如N-(1-异丙基氨基甲酰基-2-甲基丁基)氨基甲酰基等]、N-[N，N-低级亚烷基氨基甲酰基(低级)烷基]氨基甲酰基[例如N-[2-甲基-1-(哌啶子基氨基甲酰基)丁基]氨基甲酰基等]、N-[N，N-二(低级)烷基氨基甲酰基(低级)烷基]氨基甲酰基[例如N-(二甲基氨基甲酰基甲基)氨基甲酰基、N-[1-(或2-)(二甲基氨基甲酰基)乙基]氨基甲酰基、N-[1-(二甲基氨基甲酰基)-2-甲基丙基]氨基甲酰基、N-[2，2-二甲基-1-(二甲基氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基、N-[2-甲基-1-(二甲基氨基甲酰基)丁基]氨基甲酰基、N-[2-甲基-1-(二乙基氨基甲酰基)丁基]氨基甲酰基、N-[3-甲基-1-(二甲基氨基甲酰基)丁基]氨基甲酰基、N-(1-二甲基氨基甲酰基戊基)氨基甲酰基等]、N-(低级)烷基-N-[N，N-二(低级)烷基氨基甲酰基](低级)烷基氨基甲酰基[例如N-甲基-N-[1-二甲基氨基甲酰基-2-甲基丁基]氨基甲酰基、N-甲基-N-[1-二甲基氨基甲酰基-3-甲基丁基]氨基甲酰基等]、N-[N-(低级)环烷基氨基甲酰基(低级)烷基]氨基甲酰基[例如N-(1-环己基氨基甲酰基-2-甲基丁基)氨基甲酰基等]等。
芳族酰基可以包括(C6-C10)芳酰基(例如苯甲酰基、甲苯酰基、二甲苯酰基、萘酰基等)、(C6-C10)芳烃磺酰基(例如苯磺酰基、甲苯磺酰基等)、(C6-C10)芳基氨基甲酰基(例如苯基氨基甲酰基、甲苯基氨基甲酰基等)、(C6-C10)芳基草酰基(例如苯基草酰基等)等。
杂环酰基(其中所述杂环基可以与下述的相同)可以包括杂环羰基(例如糠酰基、噻吩甲酰基、2-(或3-或4-)吡啶基羰基、噻唑基羰基、噻二唑基羰基、四唑基羰基、哌嗪基羰基、吗啉代羰基、硫代吗啉代羰基、吲哚基羰基等)、低级或高级亚烷基氨基羰基(例如氮丙啶-1-基羰基、氮杂环丁烷-1-基羰基、吡咯烷-1-基羰基、哌啶-1-基羰基、六氢-1H-吖庚因-1-基羰基、八氢吖辛因-1-基羰基、四氢喹啉羰基、四氢异喹啉羰基、二氢吡啶羰基、四氢吡啶羰基等)、杂环-氨基甲酰基(其中所述杂环基可以与下述的相同)(例如吡啶基氨基甲酰基、哌啶基氨基甲酰基、六氢-1H-吖庚因基氨基甲酰基等)等。
被芳族基团取代的脂族酰基可以包括(C6-C10)芳(低级)链烷酰基例如苯基(低级)链烷酰基(例如苯乙酰基、苯丙酰基、苯己酰基、萘乙酰基等)、(C6-C10)芳(低级)烷氧羰基例如苯基(低级)烷氧羰基(例如苄氧羰基、苯乙氧基羰基等)、苯氧基(低级)链烷酰基(例如苯氧基乙酰基、苯氧基丙酰基等)、(C6-C10)芳(低级)烷草酰基例如苯基(低级)烷草酰基(例如苄草酰基等)、(C6-C10)芳(低级)链烯酰基例如苯基(低级)链烯酰基(例如肉桂酰基等)、(C6-C10)芳(低级)烷基磺酰基(例如苄基磺酰基等)等。
被杂环基取代的脂族酰基可以包括杂环-(低级)链烷酰基(其中所述杂环基可以与下述的相同)(例如噻吩基乙酰基、咪唑基乙酰基、呋喃基乙酰基、四唑基乙酰基、噻唑基乙酰基、噻二唑基乙酰基、噻吩基丙酰基、噻二唑基丙酰基、吡啶基乙酰基等)、杂环-(低级)烷基氨基甲酰基(其中所述杂环基可以与下述的相同)(例如吡啶基甲基氨基甲酰基、吗啉代乙基氨基甲酰基等)等。
所述酰基可以进一步被一个或多个，优选一至三个适宜取代基取代，所述取代基为例如羟基、低级烷基(例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、戊基、己基等)、卤素(例如氯、溴、碘、氟)、氨基甲酰基、氧代、二(低级)烷基氨基甲酰基、氨基、被保护的氨基例如低级链烷酰氨基(例如甲酰氨基、乙酰氨基、丙酰氨基等)、(低级)烷氧羰基氨基(例如叔丁氧羰基氨基等)、低级烷基磺酰基(例如甲磺酰基等)、芳基磺酰基(例如苯磺酰基、甲苯磺酰基等)、芳(低级)烷基(例如苄基等)、低级烷氧基(例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、叔丁氧基等)、羧基、如下所述的被保护的羧基、羧基(低级)烷基(例如羧甲基、羧乙基等)、被保护的羧基(低级)烷基(例如叔丁氧羰基甲基等)等。
进一步被一个或多个、优选一至三个适宜取代基取代的上述酰基的适宜实例可以是卤代苯基(低级)链烷酰基(例如2-氯苯基乙酰基等)、(氨基苯基)(低级)链烷酰基(例如4-氨基苯基乙酰基等)、[(低级烷氧羰基氨基)苯基](低级)链烷酰基[例如4-(叔丁氧羰基氨基)苯乙酰基等]、氨基(低级)链烷酰基(例如2-氨基-3-甲基戊酰基等)、(低级烷氧羰基氨基)(低级)链烷酰基[例如2-(叔丁氧羰基氨基)-3-甲基戊酰基等)、被适宜取代基例如苯基、氨基、低级烷氧羰基氨基等取代的低级链烷酰基[例如2-氨基-2-苯基乙酰基、2-(叔丁氧羰基氨基)-2-苯基乙酰基等]、二(低级)烷基哌啶基羰基[例如2，6-(或3，5-)二甲基哌啶-1-基羰基等]、[二(低级)烷基氨基甲酰基]哌啶基羰基[例如4-(二甲基氨基甲酰基)哌啶-1-基羰基等]、[二(低级)烷基氨基甲酰基]吡咯烷基羰基[例如2-(二甲基氨基甲酰基)吡咯烷-1-基羰基等]、被适宜取代基例如低级烷基、氧代等取代的哌嗪基羰基[例如4-甲基-3-氧代-2-(1-甲基丙基)哌嗪-1-基羰基等]、N-(低级)烷基-N-[羟基(低级)烷基]氨基甲酰基[例如N-甲基-N-(2-羟基乙基)氨基甲酰基等]、N-[羟基(低级)烷基]氨基甲酰基[例如N-{1-(羟甲基)-3-甲基丁基}氨基甲酰基等]、N-[(C3-C7)环烷基(低级)烷基]氨基甲酰基[例如N-(环己基甲基)氨基甲酰基等]、N-[羧基(低级)烷基]氨基甲酰基[例如N-(1-羧基-2-甲基丁基)氨基甲酰基等]、N-[(低级)烷氧羰基(低级)烷基]氨基甲酰基[例如N-(1-甲氧羰基-2-甲基丁基)氨基甲酰基等]、(氧代杂环基)氨基甲酰基(其中所述杂环基可以与下述的相同)例如{氧代(六氢-1H-吖庚因基)}氨基甲酰基(例如ε-己内酰胺-3-基等)等、N-[N-(低级)烷氧羰基哌啶基]氨基甲酰基[例如N-(N-乙氧羰基哌啶-4-基)氨基甲酰基等)、被苯基或环(低级)烷基取代的N-[N，N-二(低级)烷基氨基甲酰基(低级)烷基]氨基甲酰基[例如N-{1-(N，N-二甲基氨基甲酰基)-1-苯基甲基}氨基甲酰基、N-{1-(N，N-二甲基氨基甲酰基)-1-环己基甲基}氨基甲酰基等]、N-[羟基(C3-C7)环烷基]氨基甲酰基[例如N-(4-羟基环己基)氨基甲酰基等]、N-(低级)烷氧基苯基氨基甲酰基[例如N-(4-甲氧基苯基)氨基甲酰基等]、N-(低级链烷酰氨基)氨基甲酰基[例如N-(2-甲基丙酰氨基)氨基甲酰基等]等。
酰基的优选实例可以是优选被卤素取代的(C6-C10)芳(低级)链烷酰基例如苯基(低级)链烷酰基、卤代苯基(低级)链烷酰基等、任选被卤素取代的C6-C10芳基氨基甲酰基例如苯基氨基甲酰基、卤代苯基氨基甲酰基，其中最优选的可以是苯乙酰基、2-氯苯乙酰基、苯基氨基甲酰基和2-氯苯基氨基甲酰基。
适宜的“低级烷基”可以包括直链或支链低级烷基，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、己基等，其中最优选的实例可以为R1和/或R2为甲基和丁基、R5为异丁基、而R7为异丙基和异丁基。
适宜的“被保护的羧基”可以包括如上所述的酯化的羧基和酰胺化的羧基。
“酯化的羧基”可以指如下所述的酯化的羧基。
酯化的羧基的酯部分的适宜实例可以是例如低级烷基酯(例如甲酯、乙酯、丙酯、异丙酯、丁酯、异丁酯、叔丁酯、戊酯、己酯等)；所述低级烷基酯可以具有至少一个适宜取代基，例如低级链烷酰氧基(低级)烷基酯[例如乙酰氧基甲酯、丙酰氧基甲酯、丁酰氧基甲酯、戊酰氧基甲酯、新戊酰氧基甲酯、己酰氧基甲酯、1-(或2-)乙酰氧基乙酯、1-(或2-或3-)乙酰氧基丙酯、1-(或2-或3-或4-)乙酰氧基丁酯、1-(或2-)丙酰氧基乙酯、1-(或2-或3-)丙酰氧基丙酯、1-(或2-)丁酰氧基乙基、1-(或2-)异丁酰氧基乙酯、1-(或2-)新戊酰氧基乙酯、1-(或2-)己酰氧基乙酯、异丁酰氧基甲酯、2-乙基丁酰氧基甲酯、3，3-二甲基丁酰氧基甲酯、1-(或2-)戊酰氧基乙酯等]、芳酰基(低级)烷基酯、例如苯甲酰基(低级)烷基酯(例如苯甲酰甲基酯等)、低级烷磺酰基(低级)烷基酯(例如2-甲磺酰基乙酯等)、一(或二或三)卤素(低级)烷基酯(例如2-碘乙酯、2，2，2-三氯乙酯等)；低级烷氧羰基氧基(低级)烷基酯[例如甲氧羰基氧基甲酯、乙氧羰基氧基甲酯、丙氧羰基氧基甲酯、叔丁氧羰基氧基甲酯、1-(或2-)甲氧羰基氧基乙酯、1-(或2-)乙氧羰基氧基乙酯、1-(或2-)异丙氧羰基氧基乙酯等]、苯并[C]呋喃酮亚基(phthalidyldene)(低级)烷基酯、或(5-低级烷基-2-氧代-1，3-二氧杂环戊烯-4-基)(低级)烷基酯[例如(5-甲基-2-氧代-1，3-二氧杂环戊烯-4-基)甲酯、(5-乙基-2-氧代-1，3-二氧杂环戊烯-4-基)甲酯、(5-丙基-2-氧代-1，3-二氧杂环戊烯-4-基)乙酯等]；低级链烯基酯(例如乙烯基酯、烯丙酯等)；低级炔基酯(例如乙炔基酯、丙炔基酯等)；可以具有至少一个适宜取代基的芳(低级)烷基酯(例如苄酯、4-甲氧基苄酯、4-硝基苄酯、苯乙基酯、三苯甲基酯、二苯甲基酯、双(甲氧基苯基)甲基酯、3，4-二甲氧基苄基酯、4-羟基-3，5-二叔丁基苄基酯等)；可以具有至少一个适宜取代基的芳基酯(例如苯基酯、4-氯苯基酯、甲苯基酯、叔丁基苯基酯、二甲苯基酯、基酯、枯烯基酯等)；2-苯并[C]呋喃酮基酯等。
所定义的酯化的羧基的优选实例可以是低级烷氧羰基，最优选的是对R8可以是甲氧羰基和乙氧羰基，对R11为乙氧羰基。
适宜的“任选取代的杂环基-(低级)烷基”是指被含有至少一个杂原子例如氧、硫、氮原子等的饱和或不饱和的、单环或多环杂环基团所取代的上述低级烷基。
较优选的杂环部分可以是诸如下述的杂环基-不饱和的3-8元、优选5或6元含有1至4个氮原子的杂单环基团，例如吡咯基、吡咯啉基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、及其N-氧化物、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三唑基(例如4H-1，2，4-三唑基、1H-1，2，3-三唑基、2H-1，2，3-三唑基等)、四唑基(例如1H-四唑基、2H-四唑基等)、二氢三嗪基(例如4，5-二氢-1，2，4-三嗪基、2，5-二氢-1，2，4-三嗪基等)等；-饱和的3至8元，优选5或6元含有1至4个氮原子的杂单环基团，例如氮杂环丁烷基、吡咯烷基、咪唑烷基、哌啶基、吡唑烷基、哌嗪基等；-不饱和的稠合的7至12元含有1至5个氮原子的杂环基团，例如吲哚基、异氮杂茚基、中氮茚基、苯并咪唑基、喹啉基、异喹啉基、吲唑基、苯并三唑基、四唑并吡啶基、四唑并哒嗪基(例如四唑并[1，5-b]哒嗪等)、二氢三唑并哒嗪基等；-不饱和的3至8元、优选5或6元含有1至2个氧原子和1至3个氮原子的杂单环基团，例如噁唑基、异噁唑基、噁二唑基[例如1，2，4-噁二唑基、1，3，4-噁二唑基、1，2，5-噁二唑基等)等；-饱和的3至8元、优选5或6元含有1至2个氧原子和1至3个氮原子的杂单环基团，例如吗啉基等；-不饱和的稠合的7至12元含有1至2个氧原子和1至3个氮原子的杂环基团，例如苯并噁唑基、苯并噁二唑基等；-不饱和的3至8元、优选5或6元含有1至2个硫原子和1至3个氮原子的杂单环基团，例如噻唑基、1，2-噻唑基、噻唑啉基、噻二唑基(例如1，2，4-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基、1，2，3-噻二唑基等)等；-饱和的3至8元、优选5或6元含有1至2个硫原子和1至3个氮原子的杂单环基团，例如噻唑烷基等；-不饱和的3至8元、优选5或6元含有硫原子的杂单环基团，例如噻吩基等；-不饱和的稠合的7至12元含有1至3个硫原子的杂环基团，例如苯并噻吩基(例如苯并[b]噻吩基等)；-不饱和的稠合的7至12元含有1至2个硫原子和1至3个氮原子的杂环基团，例如苯并噻唑基、苯并噻二唑基等；
其中所述杂环基团可以被一个或多个、优选一或两个适宜取代基取代，所述取代基为例如-羟基；-被保护的羟基，其中羟基被常规羟基保护基团例如上述酰基、三(低级)烷基甲硅烷氧基(例如叔丁基二甲基甲硅烷氧基等)等保护起来；-卤素(例如氯、溴、碘或氟)；-低级烷氧基，其可以是直链或支链的低级烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、戊氧基、己氧基等，更优选C1-C4烷氧基(例如甲氧基等)；-上述低级烷基，更优选C1-C4烷基(例如甲基等)；氨基、硝基、氰基等。
另外，若所述杂环基团在其环上具有亚氨部分时，该亚氨部分可以被诸如下列的适宜取代基取代-上述低级烷基(例如甲基、乙基、丙基、异丁基等)；-亚氨基保护基，其与下述氨基保护基相同，更优选低级链烷酰氧基羰基(例如甲酰基等)、芳烃磺酰基(例如甲苯磺酰基等)等。
所定义的“优选取代的杂环基(低级)烷基”的优选实例可以为被不饱和的5或6元含有1至4个氮原子的杂单环基团取代的低级烷基，例如吡啶基(低级)烷基；咪唑基(低级)烷基；被不饱和的稠合的7至12元含有1至5个氮原子的杂环基取代的、任选被低级烷基取代的低级烷基，例如吲哚基、低级烷基吲哚基；被不饱和的稠合的7至12元含有1至3个硫原子的杂环基取代的低级烷基，例如苯并噻吩基；最优选的是，R2和R3为3-吡啶基甲基，而R6为1-甲基吲哚-3-基和3-苯并[b]噻吩基。
适宜的“芳(低级)烷基”部分可以包括C6-C10芳(低级)烷基，例如苯基(低级)烷基(例如苄基、苯乙基等)、甲苯基(低级)烷基、二甲苯基(低级)烷基、萘基(低级)烷基(例如萘甲基等)等，其中所述芳(低级)烷基可以被诸如在上述“任选取代的杂环(低级)烷基”的解释中所述的适宜取代基所取代。
所定义的“任选取代的芳(低级)烷基”的优选实例可以是任选被卤素、低级烷基或低级烷氧基取代的苯基(低级)烷基，和萘基(低级)烷基，最优选的是，R1和/或R2为任选的氯、甲基或甲氧基取代的苄基，和萘甲基，而R6为萘甲基。
适宜的“任选被取代的环(低级)烷基(低级)烷基”是指被C3-C7环(低级)烷基例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基等取代的上述低级烷基，其中所述环(低级)烷基(低级)烷基任选被诸如在前面所述的“任选取代的杂环(低级)烷基”的解释中所提及的适宜取代基所取代，其中更优选的实例可以是C4-C6环(低级)烷基，最优选的是环己基甲基。
适宜的“低级亚烷基”是指直链或支链低级亚烷基，例如亚甲基、1，2-亚乙基、1，3-亚丙基、甲基-1，2-亚乙基、1，4-亚丁基、1，5-亚戊基、1，6-亚己基等，其中最优选的实例可以是1，2-亚乙基、1，3-亚丙基、和1，2-亚丙基。
适宜的“低级烷硫基(低级)烷基”是指被低级烷硫基(例如甲硫基、乙硫基、丙硫基、异丙硫基、丁硫基、戊硫基、己硫基等)取代的直链或支链低级烷基，其中更优选的实例可以是C1-C4烷硫基(C1-C4)烷基，最优选的可以是甲硫基甲基。
适宜的“氨基(或被保护的氨基)(低级)烷基”是指被氨基或被保护的氨基取代的上述低级烷基，其中所述被保护的氨基被下述常见的氨基保护基团保护，其中更优选的实例可以是氨基(低级)烷基、低级烷氧羰基氨基(低级)烷基和C6-C10芳基(低级)烷基氨基(低级)烷基，最优选的可以是2-氨基丙基和2-(叔丁氧羰基氨基)丙基。
适宜的“任选取代的杂环羰基”是指被上述杂环基取代的羰基，其中更优选的实例可以是被不饱和的5或6元含有1至4个氮原子的杂单环基取代的羰基，最优选的可以是吡啶基羰基。
适宜的“环(低级)烷基”可以包括C3-C6环(低级)烷基例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基等，其中最优选的实例可以为环己基。
适宜的“离去基团”可以包括酸残基例如卤素(例如氟、氯、溴、碘)、酰氧基(例如乙酰氧基、甲苯磺酰氧基、甲磺酰氧基等)等，其中更优选的实例可以是氯。
适宜的“常见的氨基保护基”可以包括上述酰基、上述芳(低级)烷基，其中更优选的实例可以是低级烷氧羰基和苯基(低级)烷基，最优选的可以是叔丁氧羰基和苄基。
适宜的“C1-C5烷基”、“任选取代的芳(C1-C5)烷基”、“任选取代的杂环(C1-C5)烷基”、“任选取代的环(低级)烷基(C1-C5)烷基”和“氨基(或被保护的氨基)(C1-C5)烷基”分别指上述低级烷基、任选取代的芳(低级)烷基、任选取代的杂环(低级)烷基、任选取代的环(低级)烷基(低级)烷基和氨基(或被保护的氨基)(低级)烷基，其中所述低级烷基部分具有C1-C5个碳原子。
化合物(I)的每一定义的一个优选的实施方案可以为如下方案R1为氢、低级烷基、任选被卤素、低级烷基和低级烷氧基取代的苯基(低级)烷基、或萘基(低级)烷基；R2为氢、低级烷基、苯基(低级)烷基，其任选被卤素、低级烷基和低级烷氧基取代、萘基(低级)烷基、吡啶基(低级)烷基、环(低级)烷基(低级)烷基或氨基保护基团，例如低级烷氧羰基；R3为吡啶基(低级)烷基；R4为任选被卤素取代的芳(低级)链烷酰基；R5为低级烷基(例如异丁基)；R6为萘基(低级)烷基；R7为低级烷基(例如异丙基)；R8为羧基或被保护的羧基(例如低级烷氧羰基)；和m为整数0。
化合物(I)的每一定义的另一优选实施方案可以为如下方案R1为氢、低级烷基、低级烷氧羰基、任选被卤素、低级烷基和低级烷氧基取代的苯基(低级)烷基或萘基(低级)烷基；R2为氢、低级烷基、苯基(低级)烷基，其任选被卤素、低级烷基和低级烷氧基取代、萘基(低级)烷基、吡啶基(低级)烷基、环(低级)烷基(低级)烷基、氨基(或低级烷氧羰基氨基)(低级)烷基、环(低级)烷基、吡啶基羰基、或低级烷氧羰基；R3为吡啶基(低级)烷基；R4为任选被卤素取代的C6-C10芳(低级)链烷酰基、或任选被卤素取代的C6-C10芳基氨基甲酰基；R5为低级烷基；R6为萘基(低级)烷基、低级烷基吲哚基(低级)-烷基、苯并噻吩基(低级)烷基；R7为低级烷基或低级烷硫基(低级)烷基；R8为羧基或低级烷氧羰基；和m为整数0。另外，更优选的化合物(I)的实施方案可以由下式来表示 其中R1、R2、R4、R8和A各自如上所定义。下面详细解释了目标化合物(I)的制备方法。
方法1目标化合物(I)或其盐可以如下制备使化合物(II)或其在羧基上的反应活性衍生物、或其盐与化合物(III)或其在氨基上的反应活性衍生物或其盐反应。
化合物(III)的氨基上的适宜反应活性衍生物可以包括化合物(III)与羰基化合物例如醛、酮等反应形成的席夫碱型亚胺(imino)或其互变异构的烯胺型异构体；化合物(III)与甲硅烷基化合物例如双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺、单(三甲基甲硅烷基)乙酰胺、双(三甲基甲硅烷基)脲等反应形成的甲硅烷基衍生物；化合物(III)与三氯化磷或光气反应形成的衍生物等。
化合物(III)及其反应活性衍生物的适宜盐可以参见对化合物(I)所列举的酸加成盐。
在化合物(II)的羧基上的适宜反应活性衍生物可以包括酰卤、酸酐、活化的酰胺、活化的酯等。反应活性衍生物的适宜实例可以包括酰氯；酰基叠氮；与诸如下列的酸形成的混合酸酐取代的磷酸[例如二烷基磷酸、苯基磷酸、二苯基磷酸、二苄基磷酸、卤代磷酸等]、二烷基亚磷酸、亚硫酸、硫代硫酸、硫酸、磺酸[例如甲磺酸等]、脂族羧酸[例如乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、新戊酸、戊酸、异戊酸、2-乙基丁酸、三氯乙酸等]或芳族羧酸[例如苯甲酸等]；对称的酸酐；用咪唑、4位取代的咪唑、二甲基吡唑、三唑或四唑活化的酰胺；或活化的酯[例如氰甲基酯、甲氧基甲基酯、二甲基亚氨基(iminio)甲基[(CH3)2N+＝CH-]酯、乙烯基酯、炔丙基酯、对硝基苯基酯、2，4-二硝基苯基酯、三氯苯基酯、五氯苯基酯、甲磺酰基苯基酯、苯偶氮基苯基酯、苯基硫酯、对硝基苯基硫酯、对羟甲苯基硫酯(p-cresyl thioester)、羧甲基硫酯、吡喃基酯、吡啶基酯、哌啶基酯、8-喹啉基硫酯等]、或与N-羟基化合物[例如N，N-二甲基羟胺、1-羟基-2-(1H)-吡啶酮、N-羟基琥珀酰亚胺、N-羟基邻苯二甲酰亚胺、1-羟基-1H-苯并三唑等]形成的酯等。这些反应活性衍生物可根据欲使用的化合物(II)的种类任意选择。
化合物(II)及其反应活性衍生物的适宜盐可以是碱盐(basesalt)例如碱金属盐[例如钠盐、钾盐等]、碱土金属盐[例如钙盐、镁盐等]、铵盐、有机碱盐[例如三甲胺盐、三乙胺盐、吡啶盐、甲基吡啶盐、二环己基胺盐、N，N′-二苄基乙二胺盐等]等。
所述反应通常在常规溶剂中进行，所述溶剂例如为水、醇[例如甲醇、乙醇等]、丙酮、二噁烷、乙腈、氯仿、二氯甲烷、氯化乙烯、四氢呋喃、乙酸乙酯、N，N-二甲基甲酰胺、吡啶或任何其他不对反应有不利影响的有机溶剂。这些常规溶剂也可以作为与水的混合物使用。
在该反应中，若化合物(II)是以游离酸形式或其盐形式使用，则该反应优选在常规缩合剂的存在下进行，所述常规缩合剂为例如N，N′-二环己基碳化二亚胺；N-环己基-N′-吗啉代乙基碳化二亚胺；N-环己基-N′-(4-二乙氨基环己基)碳化二亚胺；N，N′-二乙基碳化二亚胺、N，N′-二异丙基碳化二亚胺；N-乙基-N′-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺；N，N′-羰基双(2-甲基咪唑)；五亚甲基乙烯酮(pentamethyleneketene)-N-环己基亚胺；二苯基乙烯酮-N-环己基亚胺；乙氧基乙炔；1-烷氧基-1-氯乙烯；亚磷酸三烷基酯；多磷酸乙酯；多磷酸异丙酯；三氯氧化磷(磷酰氯)；三氯化磷；二苯基磷酰基叠氮(diphenylphosphorylazide)、亚硫酰氯、草酰氯；卤代甲酸低级烷基酯[例如氯甲酸乙酯、氯甲酸异丙基等]；三苯膦；2-乙基-7-羟基苯并异噁唑鎓(isoxasolium)盐；氢氧化2-乙基-5-(间-磺苯基)异噁唑鎓分子内盐；N-羟基苯并三唑；1-(对氯苯磺酰氧基)-6-氯-1H-苯并三唑；所谓的Vilsmeier试剂(该试剂是由N，N-二甲基甲酰胺与亚硫酰氯、光气、氯甲酸三氯甲基酯、磷酰氯等反应制备的)等。
所述反应也可以在无机或有机碱例如碱金属碳酸氢盐、三(低级)烷基胺、吡啶、N-(低级)-烷基吗啉、N，N-二(低级)烷基苄胺等的存在下进行的。
所述反应温度不是关键性的，并且该反应一般在冷却至温热条件下进行的。
方法2目标化合物(I-b)或其盐可以通过使化合物(I-a)或其盐进行Ra2氨基保护基的除去反应来制备。
适宜的化合物(I-a)和(I-b)的盐可以参见对于化合物(I)所例举的盐。
该反应是按常规方法例如溶剂分解包括水解法、还原法等进行的。
溶剂分解作用优选在碱或酸包括路易斯酸存在下进行的。
适宜的碱可以包括无机碱和有机碱例如碱金属[例如钠、钾等]、碱土金属[例如镁、钙等]、其氢氧化物或碳酸盐或碳酸氢盐、肼、三烷基胺[例如三甲胺、三乙胺等]、甲基吡啶、1，5-二氮杂二环[4.3.0]壬-5-烯、1，4-二氮杂二环[2.2.2]辛烷、1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯等。
适宜的酸可以包括有机酸[例如甲酸、乙酸、丙酸、三氯乙酸、三氟乙酸等]、无机酸[例如盐酸、氢溴酸、硫酸、氯化氢、溴化氢、氟化氢等]。
采用路易斯酸例如三卤乙酸[例如三氯乙酸、三氟乙酸等]等的除去反应优选在阳离子捕获剂[例如茴香醚、苯酚等]的存在下进行。
所述反应通常在溶剂例如水、醇[例如甲醇、乙醇等]、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺、其混合物或任何其他不对反应有不利影响的溶剂中进行。液态碱或酸也可以用作溶剂。反应温度不是关键性的，并且所述反应通常在冷却至加热的条件下进行。
应用于除去反应的还原法可以包括化学还原和催化还原。
用于化学还原中的适宜的还原剂为化学还原剂例如氢化锂铝、硼氢化钠、氰基硼氢化钠等、金属[例如锡、锌(Zing)、铁等]或金属化合物[例如氯化铬、乙酸铬等]与有机或无机酸[例如甲酸、乙酸、丙酸、三氟乙酸、对甲苯磺酸、盐酸、氢溴酸等]的混合物等。
用于催化还原中的适宜催化剂为常规催化剂，例如铂催化剂[例如铂板、海绵铂、铂黑、胶态铂、氧化铂、铂丝等]、钯催化剂[例如海绵钯、钯黑、氧化钯、钯/炭、胶态钯、钯/硫酸钡、钯/碳酸钡等]、镍催化剂[例如还原镍、氧化镍、阮内镍等]、钴催化剂[例如还原钴、阮内钴等]、铁催化剂[例如还原铁、阮内铁等]、铜催化剂[例如还原铜、阮内铜、Ullman铜等]等。
所述还原反应一般在不对反应有不利影响的常规溶剂例如水、甲醇、乙醇、丙醇、N，N-二甲基甲酰胺、或其混合物中进行。此外，在用于化学还原中的上述酸为液态的情况下，它们也可以用作溶剂。而且，用于催化还原中的适宜溶剂可以是上述溶剂、及其他常规溶剂例如乙醚、二噁烷、四氢呋喃等、或其混合物。
该还原反应的反应温度不是关键性的，并且该反应通常在冷却至加热条件下进行。
方法3目的化合物(I-c)或其盐可以通过在适宜还原剂的存在下，使化合物(I-b)或其在氨基上的反应活性衍生物或其盐与化合物(IV)或其盐反应来制备。
适宜的化合物(I-b)的反应活性衍生物可以参见对化合物(III)所例举的反应活性衍生物。
适宜的化合物(I-c)的盐可以参见对于化合物(I)所例举的盐。
适宜的还原剂可以参见对方法2所例举的还原剂，其中所述还原剂可以还原中间制备的亚氨基官能团，所述还原剂例如为硼氢化钠、氰基硼氢化钠、催化还原剂等。
该反应可以按基本上与方法1和/或2相同的方式进行，因此该反应的反应模式及反应条件[例如反应活性衍生物、溶剂、反应温度等]是指在方法1和2中所述的反应模式及反应条件。
方法4目的化合物(I-e)或其盐可以通过使化合物(I-d)或其盐进行Ra8中的羧基保护基的除去反应来制备。
适宜的化合物(I-d)和(I-e)的盐可以参见对化合物(I)所例举的盐。
该除去反应可以通过肽化学中的常规方法例如溶剂分解、还原等进行，这些方法的细节参见方法2中所述。
上述方法中所得化合物可以按常规方法例如粉碎、重结晶、柱色谱法、再沉淀等来分离和纯化。
目的化合物(I)可以按常规方法转化为其盐。
制备新的起始化合物的方法详细描述如下。
制备方法1[步骤1]化合物(VII)或其盐可以通过使化合物(V)或其在羧基上的反应活性衍生物、或其盐与化合物(VI)或其在氨基上的反应活性衍生物、或其盐反应来制备。
适宜的化合物(V)及其反应活性衍生物的盐可以参见对化合物(II)所例举的相应化合物。
适宜的化合物(VI)及其反应活性衍生物的盐可以参见对化合物(III)所例举的相应化合物。
适宜的化合物(VII)的盐可以参见对化合物(I)所例举的盐。
该反应可以按基本上与方法1所述相同的方式来进行，因而该反应的反应模式及反应条件[例如反应活性衍生物、溶剂、反应温度等]可以参见在方法1中所述的反应模式及反应条件。
化合物(III)或其盐可以通过使化合物(VII)或其盐按常规方式例如在方法2中所述的方式进行R10氨基保护基的除去反应来制备。
制备方法2[步骤1]化合物(IX)或其盐可以通过酰化化合物(VIII)的氨基或其反应活性衍生物或其盐来制备。
适宜的化合物(VIII)和(IX)的盐可以与对化合物(I)所述盐相同。
该反应中所用的适宜酰化剂可以为上述能够引入酰基的常规酰化剂，例如羧酸、碳酸、磺酸及其反应活性衍生物，例如酰卤、酸酐、活化的酰胺、活化的酯等。所述反应活性衍生物的优选实例可以包括酰氯、酰溴、与下述酸的混合酸酐，例如取代的磷酸(例如二烷基磷酸、苯基磷酸、二苯基磷酸、二苄基磷酸、卤代磷酸等)、二烷基亚磷酸、亚硫酸、硫代硫酸、硫酸、碳酸烷基酯(例如碳酸甲酯、碳酸乙酯、碳酸丙酯等)、脂族羧酸(例如新戊酸、戊酸、异戊酸、2-乙基丁酸、三氯乙酸等)、芳族羧酸(例如苯甲酸等)；对称的酸酐；与含有亚氨基官能团的杂环化合物(例如咪唑、4位取代的咪唑、二甲基吡唑、三唑及四唑)形成的活化的酰胺；活化的酯(例如对硝基苯基酯、2，4-二硝基苯基酯、三氯苯基酯、五氯苯基酯、甲磺酰基苯基酯、苯偶氮基苯基酯、苯基硫酯、对硝基苯基硫酯、对羟甲苯基硫酯、羧甲基硫酯、吡啶基酯、哌啶基酯、8-喹啉基硫酯；或与N-羟基化合物(例如N，N-二甲基羟胺、1-羟基-2-(1H)-吡啶酮、N-羟基琥珀酰亚胺、N-羟基邻苯二甲酰亚胺、1-羟基苯并三唑、1-羟基-6-氯苯并三唑等)形成的酯等。
该反应可以在有机或无机碱存在下进行，所述有机或无机碱为例如碱金属(例如锂、钠、钾等)、碱土金属(例如钙等)、碱金属氢化物(例如氢化钠等)、碱土金属氢化物(例如氢化钙等)、碱金属氢氧化物(例如氢氧化钠、氢氧化钾等)、碱金属碳酸盐(例如碳酸钠、碳酸钾等)、碱金属碳酸氢盐(例如碳酸氢钠、碳酸氢钾等)、碱金属醇盐(例如甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钾等)、链烷酸碱金属盐(例如乙酸钠等)、三烷基胺(例如三乙胺等)、吡啶化合物(例如吡啶、二甲基吡啶、甲基吡啶、4-二甲氨基吡啶等)、喹啉等。
在酰化剂是以游离形式或其盐的形式用于该反应时，该反应优选在缩合剂的存在下进行，所述缩合剂为例如碳化二亚胺化合物[例如N，N′-二环己基碳化二亚胺、N-环己基-N′-(4-二乙氨基环己基)碳化二亚胺、N，N′-二乙基碳化二亚胺、N，N′-二异丙基碳化二亚胺、N-乙基-N′-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺等]、乙烯亚胺(ketenimine)化合物(例如N，N′-羰基双(2-甲基咪唑)、五亚甲基乙烯酮-N-环己基亚胺、二苯基乙烯酮-N-环己基亚胺等)；烯醚或炔醚化合物(例如乙氧基乙炔、β-氯乙烯基乙基醚)、N-羟基苯并三唑衍生物的磺酸酯[例如1-(4-氯苯磺酰氧基)-6-氯-1H-苯并三唑等]、亚磷酸三烷基酯或三苯膦与四氯化碳的混合物、二硫化物或二氮烯二羧酸酯(例如二氮烯二羧酸二乙酯等)的混合物、磷化合物(例如多磷酸乙酯、多磷酸异丙酯、磷酰氯、三氯化磷等)、亚硫酰氯、草酰氯、N-乙基苯并异噁唑鎓盐、N-乙基-5-苯基异噁唑鎓-3-磺酸盐、通过酰胺化合物例如N，N-二(低级)烷基甲酰胺(例如二甲基甲酰胺等)、N-甲基甲酰胺等与卤素化合物例如亚硫酰氯、磷酰氯、光气等反应而形成的试剂(称为所谓的“Vilsmeier试剂”)。
所述反应通常在对反应不产生不利影响的常规溶剂中进行，所述常规溶剂为例如水、丙酮、二氯甲烷、醇(例如甲醇、乙醇等)、四氢呋喃、吡啶、N，N-二甲基甲酰胺等、或其混合物。
反应温度不是关键性的，并且反应通常在冷却至加热的条件下进行。
目的化合物(II)或其盐可以如下制备使化合物(IX)或其盐进行R11中羧基保护基的除去反应。
该除去反应可以按肽化学中的常规方法例如溶剂分解法、还原法等进行，所述方法的细节可以参见方法2。
要注意的是，化合物(I)和其他化合物可以包括因不对称碳原子而产生的一个或多个立体异构体，而所有这些异构体及其混合物均包括在本发明范围内。
目的化合物(I)及其可药用盐具有药理学活性，例如内皮素拮抗活性、特别是ETB拮抗活性，例如血管舒张活性等，并且可用于治疗性的治疗与预防内皮素介导的疾病例如高血压(例如特发性高血压、肺动脉高血压、肾性高血压等)；心脏病例如胸绞痛(anginapectoris)、心肌病、血管痉挛性绞痛、心肌梗塞形成、心力衰竭等；大脑卒中例如脑动脉痉挛、脑局部缺血、脑梗塞形成、脑栓子、脑血管抽搐、脑出血等；蛛网膜下出血后的晚期大脑性痉挛；哮喘例如支气管哮喘等；肾衰竭例如急性或慢性肾衰竭、药物(例如Cisplatin、Cyclosporins、FK506等)引起的肾机能不全；末稍循环衰竭例如Takayushi′s疾病、雷诺病、血栓闭塞性脉管炎疾病等；动脉硬化；糖尿病性血管病例如糖尿病性肾病、糖尿病性视网膜病；休克例如出血性休克、内毒素类引起的休克等；恶性血管内皮瘤；再灌注[例如器官和组织移植后、心肌再灌注损伤、经皮经腔的冠状血管病(PTCA)或经皮经腔的冠状再造管术(PTCR)等]后的器官病；手术后的血流障碍；溃疡；过敏性肠综合征(IBS)；排尿困难；视网膜病；痛经；早产例如早产、先兆流产等；青光眼、PTCA手术后的再闭塞，成人呼吸窘迫综合征(ARDS)等。
为治疗目的，本发明的肽化合物(I)及其可药用盐可以以含有作为活性成份的一种所述化合物、以及与之混合的、适于口服、胃肠外或外部施用的可药用载体例如有机或无机酸或液体赋形剂的药物制剂的形式使用。所述药物制剂可以是胶囊剂、片剂、糖衣丸、粒剂、溶液、悬浮液、乳剂、舌下片剂、栓剂、软膏、气雾剂、浸剂、眼用溶液、阴道栓剂等。如果需要，所述制剂中还可以包括辅助物质、稳定剂、润湿剂或乳化剂、缓冲剂及其他常用的添加剂。
然而化合物(I)的剂量可以随患者的年龄和病症而变化，对于静脉内给药而言，日剂量为0.01～100mg活性成份/kg人体重，对于肌内给药而言，日剂量为0.05～100mg活性成份/kg人体重，对于口服给药而言，日剂量为0.1～100mg活性成份/kg人体重，上述日剂量一般用于治疗内皮素介导的疾病。
为了说明目的化合物(I)的用途，下面给出了化合物(I)的有代表性的化合物的药理学试验数据。
试验1放射配体结合测定(1)试验化合物化合物A[实施例13～6)的化合物](2)试验方法(a)粗受体膜制剂作为内皮素受体的膜是从猪肾的内髓分离得到的。将猪肾的内髓置于冰冷的缓冲液(0.25M蔗糖、5mM Tris-HCl、0.1mM EDTA，pH7.5)中。将该内髓在5体积(w/v)的冰冷的缓冲液中、使用Brinkman Polytron PT-10、在16,000rpm处匀化三个10秒的时间。将匀浆在10,000×g的条件下在4℃离心20分钟。将沉淀丸状物弃去，将上清液在4℃在100,000×g的条件下离心60分钟。将最终的沉淀丸状物再悬浮于用于该测定中的3体积的原始湿重的50mMTris-HCl(pH7.5)缓冲液(缓冲液1)中，该缓冲液含有100mMNaCl、5mM MgCl2、1.5μg/ml(对脒基苯基)甲磺酰氟、120μg/ml杆菌肽、12μg/ml亮肽素、6μg/ml抑凝乳蛋白酶素和10μg/ml phosphoramidon 。
(b)125I-内皮素(ET)-1结合测定为了测定[125I]ET-1对肾的结合，将由肾(10μg蛋白质)制备的膜悬浮液在23℃下与[125I]ET-1(4-900pM范围)在总体积为250μl的、含有0.1mg/ml牛血清白蛋白的缓冲液1中、在不断摇动下保温60分钟。在该项研究中，使用了大范围的[125I]ET-1浓度，以便确定在每个制剂中[125I]ET-1具有单一类型的结合位点。以一式两份进行的保温是通过迅速地滤过一Whatman GF/C玻璃滤片而终止的。这些滤片用0.2ml冰冷的50mM Tris-HCl缓冲液(pH7.5)洗涤三次，放射性在γ-计数器(Hewlett-Packard)上、在71％的效率时读出。非特异性结合被定义为3.2μM ET-1的不可移位结合，而特异性结合被定义为总结合与非特异性结合之差。Kd是由Scatchard分析测定的。
为了测定试验化合物的抑制曲线，将由猪肾的内髓制备的膜悬浮液与浓度逐渐增加的试验化合物及[125I]ET-1(16pM)一起保温。特异性结合相当于在猪肾中与16pM[125I]ET-1全部结合的85％。蛋白质浓度是由染色-结合测定法(Bio-Rad蛋白质测定试剂盒)测定的。每一化合物与结合位点的相互作用的Ki是由Williams等人的方程式(J.Biel.Chem.251，6915～6923，1976)计算出的。(3)试验结果结果列于表1中。
表1对在猪肾膜中[125I]ET-1的特异性结合的作用
从上述生物学试验的结果可以清楚地看出，化合物(I)具有内皮素拮抗活性，因而可用于治疗和预防内皮素介导的疾病，例如高血压、心脏病例如胸绞痛、心肌病、心肌梗塞形成等；再灌注[例如器官和组织移植后、心肌再灌注损伤、PTCA、PTCR等]后的器官病；大脑卒中例如脑动脉痉挛、脑局部缺血、脑血管抽搐等；蛛网膜下出血后的晚期大脑性痉挛、哮喘例如支气管哮喘等；肾衰竭例如慢性或急性肾衰竭、因药物(例如顺氯氨铂(Cisplatin)、环孢菌素(Cyclosporins)等)引起的肾机能不全等。
为了详细说明本发明，给出下列实施例。
在本说明书中，除了IUPAC-IUB采用的缩写外，还使用了下列缩写Boc2O 连二碳酸二叔丁基酯AcOH 乙酸NaOH 氢氧化钠CHCl3氯仿EDTA 乙二胺四乙酸NaCl 氯化钠DMF 二甲基甲酰胺MgCl2氯化镁DMSO 二甲亚砜Et 乙基HOBT N-羟基苯并三唑Me 甲基WSCD N-乙基-N′-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺EtOAc乙酸乙酯HCl 氯化氢aq.HCl 盐酸MgSO4硫酸镁Et2O乙醚CH2Cl2二氯甲烷ET3N三乙胺MeOH 甲醇NaBH3CN 氰基硼氢化钠NaHCO3碳酸氢钠SiO2硅胶为了更详细地说明本发明，给出了下列制备例和实施例。
制备例1在0℃下，向N-叔丁氧羰基-D-1-Nal-OH(10.0g)、HCl.H-D-Val-ONe(5.57g)和HOBt(4.71g)的DMF(100ml)溶液中加入WSCD(5.41g)。在室温下搅拌1小时后，该混合物用EtOAc(500ml)稀释，并依次用1N aq.HCl(500ml)、水(500ml)、饱和碳酸氢钠溶液(500ml)、水(500ml)和盐水(500ml)洗涤。有机层用无水MgSO4干燥、真空浓缩。将残余物于0℃溶于4Naq.HCl-EtOAc(300ml)中。在室温下搅拌15分钟后，真空浓缩该混合物。残余物用Et2O研制，得到HCl·H-D-1-Nal-D-Val-OMe(10.0g)，为粉末。
Rf0.50(10％MeOH的CHCl3溶液)。
制备例2在-60℃于氮气氛下，向搅拌着的DMSO(1.34g)的CH2Cl2(10ml)溶液中滴加草酰氯(1.45g)的CH2Cl2(5ml)溶液。5分钟后，向该溶液中滴加N-(叔丁氧羰基)-N-甲基乙醇胺(1.00g)的CH2Cl2(5ml)溶液，将该混合物在相同温度下搅拌5分钟。向该溶液中加入Et3N(2.89g)，并使温度升至0℃，将该混合物在相同温度下搅拌30分钟。蒸发溶剂后，将残余物溶于EtOAc(50ml)中，并依次用1N aq.HCl(50ml)、水(50ml)、饱和碳酸氢钠溶液(50ml)和盐水(50ml)洗涤。有机层用无水MgSO4干燥，真空浓缩，得到油状的N-(叔丁氧羰基)-N-甲基氨基乙醛(0.74g)。
Rf0.60(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)制备例3在室温下，向N-(叔丁氧羰基)-N-甲基氨基乙醛(0.74g)和HCl·H-L-Leu-OEt(836mg)的MeOH(20ml)溶液中加入NaBH3CN(322mg)。在相同温度下搅拌30分钟，真空蒸发溶剂。将残余物溶于EtOAc(50ml)中，并依次用饱和碳酸氢钠溶液(50ml)、水(50ml)和盐水(50ml)洗涤。有机层用无水MgSO4干燥，并真空浓缩。将残余物用硅胶柱色谱法纯化(SiO240g，EtOAc∶己烷＝1∶3作洗脱液)，得到油状N-[2-[N-(叔丁氧羰基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-OEt(0.52g)。
Rf0.57(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)制备例4在室温下，向(2-氯苯基)乙酸(0.34g)、N-[2-[N-(叔丁氧羰基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-OEt(0.52g)和HOBt(0.27g)的DMF(8ml)溶液中加入WSCD(0.36g)。在相同温度下搅拌8小时后，该混合物用EtOAc(40ml)稀释，并依次用1Naq.HCl(40ml)、水(40ml)、饱和碳酸氢钠溶液(40ml)、水(40ml)和盐水(40ml)洗涤。有机层用无水MgSO4干燥，真空浓缩得到油状N-[2-[N-(叔丁氧羰基)-N-甲基氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-OEt(0.76g)。
Rf0.68(EtOAc∶己烷＝1∶1)制备例5在室温下，向N-[2-[N-(叔丁氧羰基)-N-甲基氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-OEt(0.84g)的EtOH(12ml)溶液中加入1N aq.NaOH(6ml)。在相同温度下搅拌1小时后，将该混合物用1N aq.HCl(6ml)中和，并真空浓缩。将残余物溶于EtOAc(40ml)，用盐水(40ml)洗涤。有机层用无水MgSO4干燥，并真空浓缩，得到N-[2-[N-(叔丁氧羰基)-N-甲基氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-OH(0.75g)，为无定型粉末。
Rf0.34(10％MeOH的CHCl3溶液)制备例6按照基本上与制备例2所述相同的方法，制得N-(叔丁氧羰基)氨基乙醛(7.82g)。
Rf0.58(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)制备例7按照基本上与制备例3所述相同的方法，制得N-[2-[N-(叔丁氧羰基)氨基]乙基]-L-Leu-OEt(2.60g)。
Rf0.55(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/ v)制备例8按照基本上与制备例4所述相同的方法，制得N-[2-[N-(叔丁氧羰基)氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-OEt(3.70g)。
Rf0.61(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)制备例9按照基本上与制备例5所述相同的方法，制得N-[2-[N-(叔丁氧羰基)氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-OH(2.83g)。
Rf0.59(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)制备例10在0℃下，向N-叔丁氧羰基-β-Ala-OH(10.0g)、N，O-二甲基羟胺盐酸盐(5.67g)和HOBt(7.86g)的DMF(100ml)溶液中加入WSCD(9.03g)。在室温下搅拌4小时后，将该混合物用EtOAc(500ml)稀释，并依次用1N aq.HCl(500ml)、水(500ml)、碳酸氢钠水溶液(500ml)和盐水(500ml)洗涤。有机层用无水MgSO4干燥，真空浓缩，得到油状N-叔丁氧羰基-β-Ala-N，O-二甲基羟基酰胺(7.23g)。
Rf0.65(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝16∶1∶1，v/v)制备例11在0℃下，向N-叔丁氧羰基-β-Ala-N，O-二甲基羟基酰胺(6.20g)的无水乙醚(100ml)溶液中分批加入氢化锂铝(1.27g)。在相同温度下搅拌20分钟后，小心加入酒石酸水溶液(100ml)，该混合物依次用水(100ml)和盐水(100ml)洗涤。有机层用无水MgSO4干燥。向该溶液中加入MeOH(100ml)和HCl·H-L-Leu-OEt(5.2g)，并减压除去乙醚。向该溶液中加入NaBH3CN(2.0g)，并且将该混合物在室温下搅拌2小时。减压蒸除溶剂，将残余物溶于EtOAc(100ml)中，并用碳酸氢钠水溶液(100ml×2)和盐水(100ml)依次洗涤。有机层用无水MgSO4干燥，并真空浓缩。将残余物用硅胶柱色谱法纯化(EtOAc∶己烷＝1∶3作洗脱剂)，得到N-[3-(N-叔丁氧羰基氨基)丙基氨基]-L-Leu-OEt(3.49g)。
Rf0.41(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)制备例12按照基本上与制备例4所述相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[3-[N-(叔丁氧羰基)氨基]丙基]-L-Leu-OEt(0.70g)。
Rf0.58(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)制备例13按照基本上与制备例5相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[3-[N-(叔丁氧羰基)氨基]丙基]-L-Leu-OH(0.56g)。
Rf0.21(10％MeOH的CHCl3溶液)制备例14-1)将草酰氯(38ml)和几滴N，N-二甲基甲酰胺加入到(2-氯苯基)乙酸(50g)的CH2Cl2(300ml)溶液中。将该混合物在室温下搅拌3小时，然后减压浓缩。减压蒸馏残余物，得到油状(2-氯苯基)-乙酰氯(41.24g)。
b.p.117-118℃(12mmHg)。
制备例14-2)在室温下，向N-[(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)丙基]-L-Leu-OEt(350mg)的CH2Cl2(5ml)溶液中加入(2-氯苯基)乙酰氯(210mg)和Et3N(112mg)。在相同温度下搅拌20分钟后，减压浓缩该混合物。将残余物溶于EtOAc(15ml)中，依次用1N aq.HCl、饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤。该溶液用MgSO4干燥，真空蒸发。残余物用SiO2柱色谱法纯化(用EtOAc/正己烷＝1/3洗脱)，得到N-[(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)丙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-OEt(255mg)，为无定型粉末。
制备例15向N-环己基甘氨酸(0.763g)的1N aq.NaOH(4.86ml)和二噁烷(2ml)溶液中加入Boc2O(1.94g)的二噁烷(5ml)溶液。将该混合物在室温下搅拌过夜。然后向该反应混合物中加入3-(N，N-二甲基氨基)丙胺(0.46g)。搅拌20分钟后，减压浓缩该混合物。残余物溶于AcOEt(50ml)中，并用3.6％aq.HCl、水和盐水依次洗涤。有机层用MgSO4干燥，真空浓缩，得到N-叔丁氧羰基-N-环己基甘氨酸(663.8mg)，为白色晶体。
Rf0.33(10％MeOH的CHCl3溶液)mp101-103℃制备例16-1)向氢化钠(0.4g)的DMF(8ml)悬浮液中滴加入3-吡啶甲醇(1.09g)的DMF(5ml)溶液，并将该混合物在室温下搅拌30分钟。然后，向该混合物中加入溴代乙酸叔丁酯(1.62ml)的DMF(5ml)溶液。搅拌1小时后，将反应混合物减压浓缩。将残余物溶于AcOEt(20ml)中，用盐水洗涤，用MgSO4干燥，减压浓缩。残余物用SiO2柱色谱法纯化(用1％MeOH的CHCl3溶液洗脱)，得到(3-吡啶基甲氧基)乙酸叔丁酯(435mg)，为油状物。
Rf0.50(10％MeOH的CHCl3溶液)制备例16-2)在0℃下，将三氟乙酸(5ml)加入到(3-吡啶基甲氧基)乙酸叔丁酯(420mg)中。在相同温度下搅拌40分钟并在室温下搅拌30分钟后，减压浓缩反应混合物。将残余物溶于4N aq.HCl/AcOEt(4ml)中，并经减压浓缩，得到(3-吡啶基甲氧基)乙酸盐酸盐(344mg)，为无定型粉末。
Rf0.25(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶2∶1，v/v)制备例17-1)将异氰酸(2-氯苯基)酯(234mg)加入到N-[2-(叔丁氧羰基氨基)乙基]-L-Leu-OEt(0.46g)的AcOEt(10ml)溶液中。在室温下搅拌10分钟后，该溶液依次用3.5％aq.HCl、饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤。用MgSO4干燥后，将该溶液减压蒸发，得到粘稠油状的N-[2-(叔丁氧羰基氨基)-乙基]-N-(2-氯苯基氨基羰基)-L-Leu-OEt(599mg)。
Rf0.66(CHCl3/AcOEt＝5/1，v/v)制备例(Process)17-2)按照基本上与制备例5所述相同的方法，制得N-[2-(叔丁氧羰基氨基)乙基]-N-(2-氯苯基氨基羰基)-L-Leu-OH(307mg)。
Rf0.54(苯∶AcOEt∶AcOH＝20∶20∶1，v/v)mp113-114℃制备例18按照基本上与实施例1相同的方法，由N-叔丁氧羰基-D-Ala-OH(3g)和N，O-二甲基羟胺盐酸盐(1.86g)制得N-叔丁氧羰基-D-Ala-N，O-二甲基羟基酰胺(3.43g)。
Rf0.29(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)mp149℃制备例19-1)按照基本上与制备例18相同的方法，制得N-叔丁氧羰基-L-Ala-N，O-二甲基羟基酰胺(3.41g)。
Rf0.29(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)mp149℃制备例19-2)按照基本上与制备例11相同的方法，制得N-[(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)丙基]-L-Leu-OEt(366mg)。
Rf0.53(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)制备例20按照基本上与制备例5相同的方法，制得N-[(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)丙基]-L-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-OH(323mg)。
Rf0.42(10％MeOH的CHCl3溶液)制备例21按照基本上与制备例3相同的方法，由环己酮(0.5g)和甘氨酸(0.654g)制得N-环己基甘氨酸(0.76g)。
Rf0.53(n-BuOH∶AcOH∶H2O＝5∶2∶3，v/v)mp189-190℃制备例22按照基本上与制备例18相同的方法，制得N-叔丁氧羰基-N-环己基甘氨酸-N，O-二甲基羟基酰胺(232mg)。
Rf0.38(AcOEt∶正己烷＝1∶1，v/v)mp67-68℃制备例23按照基本上与制备例18相同的方法，制得N-甲基-N-甲氧基-2-(3-吡啶基甲氧基)乙酰胺(206mg)。
Rf0.32(10％MeOH的CHCl3溶液)制备例24-1)按照基本上与实施例1相同的方法，由Boc-L-Leu-OH(0.82g)和D-1-Nal-D-Val-OMe·HCl(1.19g)制得Boc-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(1.44g)。
Rf0.51(AcOEt∶正己烷＝1∶1，v/v)mp173～174℃制备例24-2)按照基本上与实施例2相同的方法，制得L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe·HCl(1.46g)。
Rf0.45(10％MeOH的CHCl3溶液)制备例25按照基本上与制备例11相同的方法，由N-甲基-N-甲氧基-2-(3-吡啶基甲氧基)乙酰胺(176mg)和L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe·HCl(200mg)制得N-[2-(3-吡啶基甲氧基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(259.5m8)。
Rf0.49(10％MeOH的CHCl3溶液)制备例26-1)按照与制备例1中前面部分基本上相同的方法，制得Boc-D-1-Nal-D-Cys(Me)-OMe(92mg)。
Rf0.63(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝16∶1∶1，v/v)mp127-129℃制备例26-2)按照与实施例2中较后部分基本上相同的方法，制得D-1-Nal-D-Cys(Me)-OMe·HCl(70mg)。
Rf0.16(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝16∶1∶1，v/v)mp211-213℃(分解)制备例27按照基本上与制备例1相同的方法，制得HCl·(4S)-4-[(H-D-1-Nal)氨基)-6-甲基庚酸乙酯(0.35g)。
Rf0.59(10％MeOH的CHCl3溶液)制备例28按照基本上与制备例1相同的方法，制得HCl·H-D-Trp(Me)-D-Val-OMe(3.54g)。
Rf0.48(10％ MeOH的CHCl3溶液)制备例29按照基本上与制备例1相同的方法，制得HCl·H-β-(3-苯并[b]噻吩基)-D-Ala-D-Val-OMe(3.65g)。
Rf0.50(10 MeOH的CHCl3溶液)制备例30按照基本上与制备例25相同的方法，制得N-[2-(N-叔丁氧羰基-N-环己基氨基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(71.7mg)。
Rf0.30(AcOEt∶正己烷＝1∶1，v/v)实施例1在0℃下，向N-[2-[N-(叔丁氧羰基)-N-甲基氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-OH(0.74g)、HCl·H-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.61g)和HOBt(0.27g)的DMF(13ml)溶液中加入WSCD(0.31g)。在室温下搅拌1小时后，该混合物用EtOAc(70ml)稀释，并用1N aq.HCl(70ml)、水(70ml)、饱和碳酸氢钠溶液(70ml)、水(70ml)及盐水(70ml)依次洗涤。有机层用无水MgSO4干燥，真空浓缩，得到N-[2-[N-(叔丁氧羰基)-N-甲基氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(1.18g)，为无定型粉末。
Rf0.75(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例2将N-[2-[N-(叔丁氧羰基)-N-甲基氨基)乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(1.17g)的4N aq.HCl-EtOAc(30ml)溶液在室温下搅拌30分钟。将该混合物真空浓缩，残余物用Et2O研制，得到N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-(N-甲基氨基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe·HCl(0.94g)，为粉末。
Rf0.38(10％MeOH的CHCl3溶液)。
实施例3按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得N-(2-氯苯基乙酰基)-N-[2-(N-甲基氨基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.18g)。
Rf0.27(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)mp125-129℃实施例4按照基本上与实施例1相同的方法，制得N-[2-[N-(叔丁氧羰基)氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(4.31g)。
Rf0.73(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例5按照基本上与实施例2相同的方法，制得N-(2-氨基乙基)-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe·HCl(3.19g)。
Rf0.35(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例6按照基本上与实施例12-1)相同的方法，制得N-[2-(N-苄基氨基)乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.68g)。
Rf0.54(10％MeOH的CHCl3溶液)
实施例7按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得N-[2-(N-苄基氨基)乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.15g)。
Rf0.35(10％MeOH的CHCl3溶液)mp125-132℃实施例8按照基本上与实施例12-1)相同的方法，由N-(2-氨基乙基)-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe·HCl(1.00g)制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-(N，N-二苄基氨基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.24g)。
Rf0.83(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例9按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-(N，N-二苄基氨基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.19g)。
Rf0.31(5％MeOH的CHCl3溶液)mp114-122℃实施例10按照基本上与实施例12-1)相同的方法，由N-[2-(N-苄基氨基)乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.20g)制得N-[2-(N-苄基-N-正丁基氨基)乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.18g)。
Rf0.94(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例11按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得N-[2-(N-苄基-N-正丁基氨基)乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.13g)。
Rf0.50(10％MeOH的CHCl3溶液)mp103-109℃实施例12-1)在室温下，向N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-(N-甲基氨基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe·HCl(100mg)和苯甲醛(19mg)的MeOH(2ml)溶液中加入NaBH3CN(18mg)。在相同温度下搅拌2小时后，真空浓缩混合物。残余物溶于EtOAc(20ml)中，并依次用饱和碳酸氢钠溶液(20ml×2)及盐水(20ml)洗涤。有机层用无水MgSO4干燥，并真空浓缩。残余物用硅胶薄层色谱法纯化(5％MeOH的CHCl3溶液作洗脱剂)，得到油状N-[2-(N-苄基-N-甲基氨基)乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(83mg)。
Rf0.76(10％MeOH的CHCl3溶液)按照基本上与实施例12-1)相同的方法，制得下列化合物。
实施例12-2)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-(N，N-二甲基氨基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.19g)。
Rf0.65(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-3)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-甲基-N-(1-萘基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.16g)。
Rf0.80(5％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-4)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-甲基-N-(2-萘基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.14g)。
Rf0.80(5％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-5)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-甲基-N-(2-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(90mg)。
Rf0.44(5％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-6)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-甲基-N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.18g)。
Rf0.40(5％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-7)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-甲基-N-(4-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.12g)。
Rf0.40(5％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-8)N-[2-[N-(2-氯苄基)-N-甲基氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.22g)。
Rf0.74(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-9)N-[2-[N-(3-氯苄基)-N-甲基氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.22g)。
Rf0.74(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-10)N-[2-[N-(4-氯苄基)-N-甲基氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.21g)。
Rf0.74(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-11)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(2-甲基苄基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.18g)。
Rf0.74(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-12)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-甲基苄基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.16g)。
Rf0.74(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-13)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(4-甲基苄基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.19g)。
Rf0.74(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-14)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(2-甲氧基苄基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.17g)。
Rf0.74(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-15)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-甲氧基苄基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.13g)。
Rf0.74(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-16)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(4-甲氧基苄基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.12g)。
Rf0.74(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例13-1)在室温下，向N-[2-(N-苄基-N-甲基氨基)乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(73mg)的EtOH(2ml)溶液中加入1N NaOH水溶液(1ml)。在相同温度下搅拌30分钟后，该混合物用1N aq.HCl(1ml)中和，并真空浓缩。将残余物溶于EtOAc(20ml)中，并用盐水(20ml)洗涤。有机层用无水MgSO4干燥，并真空浓缩。残余物用Et2O研制，得到N-[2-(N-苄基-N-甲基氨基)乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(65mg)。
Rf0.30(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)mp125-132℃。
按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得了下列化合物。
实施例13-2)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-(N，N-二甲基氨基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(135mg)。
Rf0.19(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝16∶1∶1，v/v)mp85-105℃实施例13-3)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-甲基-N-(1-萘基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.12g)。
Rf0.40(10％MeOH的CHCl3溶液)mp112-120℃实施例13-4)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-甲基-N-(2-萘基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.11g)。
Rf0.40(10％MeOH的CHCl3溶液)mp118-124℃实施例13-5)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-甲基-N-(2-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(60mg)。
Rf0.50(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)mp84-94℃实施例13-6)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-甲基-N-(3-吡啶基甲基氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.13g)。
Rf0.48(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)mp88-96℃实施例13-7)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-甲基-N-(4-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(95mg)。
Rf0.48(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)mp99-103℃实施例13-8)N-[2-[N-(2-氯苄基)-N-甲基氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.18g)。
Rf0.38(10％MeOH的CHCl3溶液)mp75-80℃实施例13-9)N-[2-[N-(3-氯苄基)-N-甲基氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.17g)。
Rf0.38(10％MeOH的CHCl3溶液)mp73-78℃实施例13-10)N-[2-[N-(4-氯苄基)-N-甲基氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.15g)。
Rf0.38(10％MeOH的CHCl3溶液)mp60-65℃实施例13-11)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(2-甲基苄基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.14g)。
Rf0.38(10％MeOH的CHCl3溶液)mp116-127℃实施例13-12)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-甲基苄基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.12g)。
Rf0.38(10％MeOH的CHCl3溶液)mp113-119℃实施例13-13)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(4-甲基苄基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.15g)。
Rf0.38(10％MeOH的CHCl3溶液)mp118-121℃实施例13-14)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(2-甲氧基苄基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.14g)。
Rf0.38(10％MeOH的CHCl3溶液)mp114-118℃实施例13-15)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-甲氧基苄基)-N-甲基]氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.11g)。
Rf0.38(10％MeOH的CHCl3溶液)mp98-105℃实施例13-16)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(4-甲氧基苄基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.10g)。
Rf0.38(10％MeOH的CHCl3溶液)mp110-116℃实施例14按照基本上与实施例1相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[3-[N-(叔丁氧羰基氨基]丙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.90g)。
Rf0.67(10％MeOH的CHCl3溶液)
实施例15按照基本上与实施例2相同的方法，制得N-(3-氨基丙基)-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe·HCl(0.80g)。
Rf0.20(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例16将N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.10g)的4N aq.HCl·EtOAc(1ml)溶液在室温下搅拌5分钟。蒸发溶剂后，将残余物用Et2O研制，得到N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH·2HCl(0.10g)。
mp126-132℃按照基本上与实施例12-1)相同的方法，制得下列化合物。
实施例17-1)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.15g)。
Rf0.43(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例17-2)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(环己基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.16g)。
Rf0.56(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例17-3)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(正丁基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.11g)。
Rf0.40(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例17-4)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[3-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]丙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.14g)。
Rf0.49(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例17-5)N-[3-(N-苄基氨基)丙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(60mg)。
Rf0.56(10％MeOH的CHCl3溶液)。
按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得下列化合物。
实施例18-1)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.12g)。
Rf0.14(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例18-2)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(环己基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(89mg)。
Rf0.27(10％MeOH的CHCl3溶液)mp123-128℃实施例18-3)N-[2-[N-(正丁基)氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(67mg)。
Rf0.27(10％MeOH的CHCl3溶液)mp100-113℃实施例18-4)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[3-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]丙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(95mg)。
Rf0.47(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)mp117-125℃实施例18-5)N-[3-(N-苄基氨基)丙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(40.5mg)。
Rf0.30(10％MeOH的CHCl3溶液)mp111-120℃实施例19将N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(140mg)和1N NaOH水溶液(0.196ml)溶于水(15ml)中。该水溶液经冷冻干燥，得到N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-ONa(138mg)，为粉末。
实施例20-1)按照基本上与实施例1相同的方法，制得N-[2-(叔丁氧羰基氨基)乙基]-N-(2-氯苯基氨基羰基)-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(366mg)。
Rf0.40(AcOEt∶正己烷＝1∶1，v/v)
实施例20-2)在0℃下，将N-[2-(叔丁氧羰基氨基)乙基]-N-(2-氯苯基氨基羰基)-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(431mg)溶于CH2Cl2(5ml)和三氟乙酸(5ml)中。在相同温度下搅拌30分钟后，将该溶液减压浓缩。将残余物溶于AcOEt(20ml)中，并用饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，用MgSO4干燥，真空蒸发，制得N-(2-氨基乙基)-N-(2-氯苯基氨基羰基)-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(397mg)，为无定形粉末。
Rf0.19(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例20-3)按照基本上与实施例6相同的方法，制得N-(2-氯苯基氨基羰基)-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(178mg)。
Rf0.38(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例20-4)按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得N-(2-氯苯基氨基羰基)-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(113mg)。
Rf0.18(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝16∶1∶1，v/v)实施例21-1)按照基本上与制备例11相同的方法，由N-叔丁氧基羰基-D-Ala-N，O-二甲基羟基酰胺(137mg)和N-[(2-氨基乙基)-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe·HCl(200mg)制得N-[2-[N-[(R)-2-(N-叔丁氧羰基氨基)丙基]氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(130.5mg)。
Rf0.53(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例21-2)按照基本上与实施例29-2)和13-1)相同的方法，制得N-[2-[N-[(R)-2-氨基丙基]氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(77.3mg)。
Rf0.20(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例22-1)按照基本上与制备例11相同的方法，制得N-[2-[N-[(S)-2-(N-叔丁氧羰基氨基)丙基]氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(109mg)。
Rf0.47(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例22-2)按照基本上与实施例29-2)和13-1)相同的方法，制得N-[2-[N-[(S)-2-氨基丙基]氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(57.2mg)。
Rf0.24(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例23-1)按照基本上与实施例1相同的方法，制得N-[(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)丙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(264mg)。
Rf0.42(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)实施例23-2)按照基本上与实施例2相同的方法，制得N-[(S)-2-氨基丙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe·HCl(189mg)。
Rf0.36(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例23-3)按照基本上与实施例6相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[(S)-2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]丙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(76mg)。
Rf0.49(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例23-4)按照基本上与实施例13-1)和16相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[(S)-2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]丙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH·2HCl(49mg)。
Rf0.53(CHCl3∶MeOH∶NH4OH＝65∶25∶4，v/v)实施例24-1)按照基本上与制备例4相同的方法，由(2-氯苯基)乙酸(18.8mg)和N-[2-(N-叔丁氧羰基-N-环己基氨基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(66.7mg)制得N-[2-(N-叔丁氧羰基-N-环己基氨基)乙基]-N-[(2-氯苯基]乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(62.6mg)。
Rf0.52(AcOEt∶正己烷＝1∶1，v/v)实施例24-2)按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得N-[2-(N-叔丁氧羰基-N-环己基氨基)乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(45mg)。
Rf0.24(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例24-3)按照基本上与实施例2相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-(N-环己基氨基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH·HCl(28.1mg)。
Rf0.80(CHCl3∶MeOH∶NH4OH＝65∶25∶4，v/v)实施例25-1)按照基本上与制备例14-2)相同的方法，由N-(2-氨基乙基)-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-ONe·HCl(150mg)和烟酰氯盐酸盐(44mg)制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-烟酰基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(140.6mg)。
Rf0.61(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例25-2)按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-烟酰基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(61.9mg)。
Rf0.53(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)实施例26-1)按照基本上与制备例14-2)相同的方法，由(2-氯苯基)乙酰氯(87mg)和N-[2-(3-吡啶基甲氧基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(241mg)制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-(3-吡啶基甲氧基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(155.6mg)。
Rf0.57(10％MeOH的CHCl3溶液)
实施例26-2)按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-(3-吡啶基甲氧基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(119mg)。
Rf0.65(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)实施例27-1)按照基本上与实施例6相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[3-(环己基氨基)丙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(28.6mg)。
Rf0.35(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例27-2)按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[3-(环己基氨基)丙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(21mg)。
Rf0.28(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例28-1)按照基本上与实施例4相同的方法，制得N-[2-(N-叔丁氧羰基氨基)乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Cys(Me)-OMe(173mg)。
Rf0.36(AcOEt∶正己烷＝1∶1，v/v)实施例28-2)按照基本上与实施例2相同的方法，制得N-(2-氨基乙基)-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Cys(Me)-OMe·HCl(156mg)。
Rf0.21(10％MeOH的CHCl3溶液)
实施例28-3)按照基本上与实施例12-1)相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Cys(Me)-OMe(119.1mg)。
Rf0.45(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例28-4)按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Cys(Me)-OH(43.9mg)。
Rf0.56(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)实施例29-1)按照基本上与实施例1相同的方法，制得(4S)-4-[N-[N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(叔丁氧羰基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal]氨基]-6-甲基庚酸乙酯(0.28g)。
Rf0.53(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)实施例29-2)按照基本上与实施例2相同的方法，只是用TFA代替盐酸，制得(4S)-4-[N-[N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-(2-氨基乙基)-L-Leu-D-1-Nal]氨基]-6-甲基庚酸乙酯盐酸盐(145mg)。
Rf0.24(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例29-4)按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得(4S)-4-[N-[N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal]氨基]-6-甲基庚酸(55mg)。
Rf0.42(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)mp85-88℃实施例29-3)按照基本上与实施例12-1)相同的方法，制得(4S)-4-[N-[N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal]氨基]-6-甲基庚酸乙酯(0.12g)。
Rf0.52(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例30-1)按照基本上与实施例1相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(叔丁氧羰基)氨基]乙基]-L-Leu-D-Trp(Me)-D-Val-OMe(0.20g)。
Rf0.46(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)实施例30-2)按照基本上与实施例29-2)相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-(2-氨基乙基)-L-Leu-D-Trp(Me)-D-Val-OMe盐酸盐(1 35mg)。
Rf0.21(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例30-3)按照与实施例12-1)相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-Trp(Me)-D-Val-OMe(0.12g)。
Rf0.49(10％MeOH的CHCl3溶液)
实施例30-4)按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-Trp(Me)-D-Val-OH(80mg)。
Rf0.43(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)mp115-135℃实施例31-1)按照与实施例1基本上相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(叔丁氧羰基)氨基]乙基]-L-Leu-β-(3-苯并[b]噻吩基)-D-Ala-D-Val-OMe(0.32g)。
Rf0.48(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)实施例31-2)按照基本上与实施例29-2)相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-(2-氨基乙基)-L-Leu-β-(3-苯并[b]噻吩基)-D-Ala-D-Val-OMe(156mg)。
Rf0.26(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例31-3)按照基本上与实施例12-1)相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-β-(3-苯并[b]噻吩基)-D-Ala-D-Val-OMe(0.15g)。
Rf0.43(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例31-4)按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-β-(3-苯并[b]噻吩基)-D-Ala-D-Val-OH(103mg)。
Rf0.46(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)mp122-140℃
权利要求
1.下式化合物或其可药用盐 其中R4为酰基；R5为低级烷基；R6为任选取代的芳(低级)烷基或任选取代的杂环基(低级)烷基；R7为低级烷基或低级烷硫基(低级)烷基；R8为羧基或被保护的羧基；A为低级亚烷基；Z为下式基团 或-O-R3其中R1为氢、低级烷基、常见的氨基保护基团或任选取代的芳(低级)烷基；R2为氢、低级烷基、任选取代的芳(低级)烷基、任选取代的杂环基(低级)烷基、任选取代的环(低级)烷基(低级)烷基、常见的氨基保护基、氨基(或被保护的氨基)(低级)烷基、任选取代的杂环基羰基或环(低级)烷基；和R3为任选取代的杂环基(低级)烷基；和m为整数0至2。
2.权利要求1所述的化合物，其中R1为氢、低级烷基、低级烷氧羰基、任选被羟基、被保护的羟基、卤素、低级烷基和低级烷氧基取代的C6-C10芳(低级)烷基、或萘基(低级)烷基，R2为氢、低级烷基、任选被羟基、被保护的羟基、卤素、低级烷基和低级烷氧基取代的C6-C10芳(低级)烷基、萘基(低级)烷基、任选被羟基、被保护的羟基、卤素、低级烷基、低级烷氧基和亚氨基保护基团取代的杂环基(低级)烷基或杂环基羰基，所述的每个杂环基为含有1-4个氮原子的不饱和5或6元杂单环基；任选被羟基、被保护的羟基、卤素、低级烷基和低级烷氧基取代的环(低级)烷基(低级)烷基；环(低级)烷基或低级烷氧羰基，R3为任选被羟基、被保护的羟基、卤素、低级烷基、低级烷氧基和亚氨基保护基所取代的杂环基-(低级)烷基，所述杂环基为含有1-4个氮原子的不饱和的5或6元杂单环基，R4为C5-C10芳(低级)链烷酰基或C6-C10芳基氨基甲酰基，所述每一基团任选被羟基、被保护的羟基、卤素、低级烷基和低级烷氧基所取代，R5为低级烷基，R6为任选被羟基、被保护的羟基、卤素、低级烷基和低级烷氧基所取代的C6-C10芳(低级)烷基、萘基(低级)烷基、或任选被羟基、被保护的羟基、卤素、低级烷基和低级烷氧基所取代的杂环基(低级)烷基，所述杂环基为含有1-4个氮原子的不饱和5或6元杂单环基、含有1-5个氮原子的不饱和的稠合的7-12元杂环基或含有1-3个硫原子的不饱和的稠合的7-12元杂环基，R7为低级烷基或低级烷硫基(低级)烷基，R8为羧基或酯化的羧基，A为低级亚烷基，和m为整数0-2。
3.权利要求2所述的化合物，其中R1为氢、低级烷基、低级烷氧羰基、任选被卤素、低级烷基和低级烷氧基取代的苯基(低级)烷基、或萘基(低级)烷基，R2为氢；低级烷基；任选被卤素、低级烷基和低级烷氧基取代的苯基(低级)烷基，萘基(低级)烷基；杂环基(低级)烷基或杂环基羰基，每一所述杂环基可为吡咯基、吡咯啉基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、吡啶基N-氧化物、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三唑基、四唑基或二氢三嗪基；环(低级)烷基(低级)烷基；环(低级)烷基或低级烷氧羰基，R3为杂环基-(低级)烷基，所述杂环基可以为吡咯基、吡咯啉基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、吡啶基N-氧化物、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三唑基、四唑基或二氢三嗪基，R4为卤代苯基(低级)链烷酰基或卤代苯基氨基甲酰基，R5为低级烷基，R6为萘基(低级)烷基，或任选被低级烷基取代的杂环基(低级)烷基，所述杂环基可以为吡咯基、吡咯啉基、咪唑基、吡唑基、吡啶基及其N-氧化物、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三唑基、四唑基、二氢三嗪基、吲哚基、异吲哚基、中氮茚基、苯并咪唑基、喹啉基、异喹啉基、吲唑基、苯并三唑基、四唑并吡啶基、四唑并哒嗪基、二氢三唑并哒嗪基或苯并噻吩基，R7为低级烷基或低级烷硫基(低级)烷基，R8为羧基或低级烷氧羰基，A为低级亚烷基，和m为整数0-2。
4.权利要求3所述的化合物，其中A为下式基团 其中R1为氢、低级烷基或苯基(低级)烷基，R2为氢、低级烷基、苯基(低级)烷基、卤代苯基(低级)烷基、甲基苯基(低级)烷基、甲氧基苯基(低级)烷基、萘基(低级)烷基、吡啶基(低级)烷基、环(低级)烷基(低级)烷基、吡啶基羰基或环(低级)烷基，R4为卤代苯基(低级)链烷酰基或卤代苯基氨基甲酰基，R5为低级烷基，R6为萘基(低级)烷基，低级烷基吲哚基(低级)烷基或苯并噻吩基(低级)烷基，R7为低级烷基或低级烷硫基(低级)烷基，R8为羧基，A为低级亚烷基，和m为整数0-2。
5.权利要求4所述的化合物，其中R1为氢、C1-C4烷基、C1-C4烷氧羰基或苯基(C1-C4)烷基，R2为氢、C1-C4烷基、苯基(C1-C4)烷基、卤代苯基(C1-C4)烷基、甲基苯基(C1-C4)烷基、甲氧基苯基(C1-C4)烷基、萘基(C1-C4)烷基、吡啶基(C1-C4)烷基、环(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、吡啶基羰基、环(C1-C4)烷基或C1-C4烷氧羰基，R4为卤代苯基(C1-C4)链烷酰基或卤代苯基氨基甲酰基，R5为C1-C4烷基，R6为萘基(C1-C4)烷基、C1-C4烷基吲哚基(C1-C4)烷基或苯并噻吩基(C1-C4)烷基，R7为C1-C4烷基或C1-C4烷硫基(C1-C4)烷基，A为C1-C4亚烷基，和m为整数0-2。
6.用于制备权利要求1所述化合物或其盐的方法，该方法包含(a)使下式化合物或其在羧基上的反应活性衍生物或其盐 与下式化合物或其在氨基上的反应活性衍生物或其盐反应， 得到下式化合物或其盐；或 (b)使下式化合物或其盐进行Ra2氨基保护基的除去反应， 得到下式化合物或其盐；或 (c)在还原剂的存在下，使下式化合物或其在氨基上的反应活性衍生物或其盐 与下式化合物或其盐反应，R9-CO-X得到下式化合物或其盐；或 (d)使下式化合物或其盐进行Ra8中的羧基保护基的除去反应， 得到下式化合物或其盐； 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、m和n各自如上所定义，Ra2为氨基保护基，Ra8为被保护的羧基，R9为氢、C1-C5烷基、任选被取代的芳(C1-C5)烷基、任选被取代的杂环基(C1-C5)烷基、或任选取代的环(低级)烷基(C1-C5)烷基、氨基(或被保护的氨基)(C1-C5)烷基，X为离去基团，和Y为亚甲基或羰基。
7.一种药物组合物，该药物组合物包含权利要求1的化合物或其可药用盐以及可药用载体或赋形剂。
8.用于制备药物组合物的方法，该方法包含使权利要求1的化合物或其可药用盐与可药用载体或赋形剂掺混。
9.用作药物的权利要求1的化合物或其可药用盐。
10.用作内皮素拮抗剂的权利要求1的化合物或其可药用盐。
11.权利要求1的化合物或其可药用盐用于制备治疗和/或预防内皮素介导的疾病的药物的用途。
12.一种用于治疗和/或预防内皮素介导的疾病的方法，该方法包含对人或动物施用权利要求1的化合物或其可药用盐。
全文摘要
用作内皮素拮抗剂的式(1)化合物或其可药用盐，其中R
文档编号C07K5/083GK1129000SQ94193046
公开日1996年8月14日 申请日期1994年6月28日 优先权日1993年6月28日
发明者逸见惠次, 闺正博, 深见直喜, 茅切奈津子, 田中洋和 申请人:藤泽药品工业株式会社
技术领域：
本发明涉及新化合物以及其可药用盐。
更具体地讲，本发明涉及新的肽化合物及其可药用盐，这些化合物具有药理学活性例如内皮素(endothelin)拮抗活性等，本发明还涉及这些化合物的制备方法、含有这些化合物的药物组合物、以及治疗性地应用这些化合物治疗与预防内皮素介导的疾病例如高血压等的方法。
药理学和结构学证据证明至少存在两种内皮素受体亚型，即ETA和ETB。ETA受体主要分布于血管平滑肌、心脏及肠，而ETB受体存在于大脑皮层、肺和肾中。最近，发现除ETA受体外，血管收缩药ETB受体也存在于血管平滑肌中。ETA受体比ET-3和sarafotoxinS6c具有更高的对ET-1的亲和力，而ETB受体对ET和sarafotoxin肽的所有异型显示几乎相同的亲和力。
本发明化合物可以具有ETB拮抗活性。
本发明的一个目的是提供具有药理学活性例如内皮素，特别是ETB拮抗活性等的新的、有用的肽化合物及其可药用盐。
本发明的另一个目的是提供用于制备所述肽化合物及其盐的方法。
本发明的进一步的目的是提供包含作为活性成份的所述肽化合物或其可药用盐的药物组合物。
本发明另一进一步的目的是提供将所述化合物用于治疗和预防内皮素、特别是ETB介导的疾病例如高血压等的方法。
本发明的公开内容本发明的目标化合物可以用下列通式(I)或其可药用盐来表示 其中R4为酰基；R5为低级烷基；R6为任选取代的芳(低级)烷基或任选取代的杂环基(低级)烷基；R7为低级烷基或低级烷硫基(低级)烷基；R8为羧基或被保护的羧基；A为低级亚烷基；Z为下式基团 或-O-R3其中R1为氢、低级烷基、常见的氨基保护基团或任选取代的芳(低级)烷基；R2为氢、低级烷基、任选取代的芳(低级)烷基、任选取代的杂环基(低级)烷基、任选取代的环(低级)烷基(低级)烷基、常见的氨基保护基、氨基(或被保护的氨基)(低级)烷基、任选取代的杂环基羰基或环(低级)烷基；R3为任选取代的杂环基(低级)烷基；和m为整数0至2。
根据本发明，新的肽化合物(I)及其盐可以通过下列路线所示的方法来制备方法1 (II)或其在羧基上的反应活性衍生物，或其盐 或其在氨基上的反应活性衍生物，或其盐 或其盐方法2 或其盐 或其盐方法3 或其在氨基上的反应活性衍生物，或其盐 或其盐方法4 或其盐 或其盐其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、A、Z和m各自如上所定义；Ra2为氨基保护基；Ra8为被保护的羧基；
R9为氢、C1-C5烷基、任选取代的芳基(C1-C5)烷基、任选取代的杂环基(C1-C5)烷基、任选取代的环(低级)烷基(C1-C5)烷基、或氨基(或被保护的氨基)-(C1-C5)烷基；X为离去基团或氢，和Y为亚甲基或羰基。
在上述方法中所用的某些起始化合物是新的，并且可以按照下列方法和/或按下列制备中所述方法或按常规方式制备。
制备方法1 或其在羧基上的反应活性衍生物，或其在氨基上的反应活性衍生物，或其盐或其盐 或其盐 或其盐制备方法2 或其在氨基上的反应活性衍生物，或其盐或其盐 其中R4、R5、R6、R7、R8、A、Z和m各自如上所定义；R10为氨基保护基，和R11为被保护的羧基。
适宜的目标化合物(I)的可药用盐可以是常规的无毒盐，并且包括酸加成盐，例如有机酸盐(例如乙酸盐、三氟乙酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、富马酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、甲酸盐、甲苯磺酸盐等)、无机酸盐(例如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐等)、或与碱形成的盐，所述碱例如为氨基酸(例如精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸等)、碱金属盐(例如钠盐、钾盐等)、碱土金属盐(例如钙盐、镁盐等)、铵盐、有机碱盐(例如三甲胺盐、三乙胺盐、吡啶盐、甲基吡啶盐、二环己胺盐、N，N′-二苄基乙二胺盐等)等。
在本说明书的上述及随后的描述中，本发明在其范围内所包括的各种定义的适宜实施例及说明在下面作了详细解释。
在本说明书中，氨基酸、肽、保护基、缩合剂等是用IUPAC-IUB(Commission on Blological Nomenclature)的缩写(这在本技术领域中常用)来表示的。
术语“低级”是指1-6、优选1-4个碳原子，而术语“高级”是指大于6个、优选7-12个碳原子，除非另外指出。
适宜的“酰基”可以包括脂族酰基、芳族酰基、杂环酰基和被衍生自诸如羧酸、碳酸、氨基甲酸、磺酸之类的酸的芳基或杂环基所取代的脂族酰基。
脂族酰基可以包括饱和的或不饱和的、无环或环状的脂族酰基，例如氨基甲酰基、低级链烷酰基(例如甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基、异丁酰基、3，3-二甲基丁酰基、4，4-二甲基戊酰基)、戊酰基、异戊酰基、新戊酰基、己酰基、3-甲基戊酰基等)、低级烷磺酰基(例如甲磺酰基、乙磺酰基、丙磺酰基等)、低级烷氧羰基(例如甲氧羰基、乙氧羰基、丙氧羰基、丁氧羰基、叔丁氧羰基等)、低级链烯酰基(例如丙烯酰基、甲基丙烯酰基、巴豆酰基等)、(C3-C7)环烷基羰基(例如环己基羰基等)、(C3-C7)环烷基(低级)链烷酰基(例如环己基乙酰基等)、脒基、被保护的羧基羰基例如低级烷草酰基(alkoxalyl)(例如甲草酰基、乙草酰基、叔丁草酰基等)、C3-C7环烷氧羰基(例如环己氧羰基等)、(杂环酰基)(低级)链烷酰基，其中所述杂环酰基与下述基团相同，例如吗啉代羰基(低级)链烷酰基(例如3-吗啉代羰基丙酰基等)、低级或高级烷基氨基甲酰基(例如甲基氨基甲酰基、乙基氨基甲酰基、丙基氨基甲酰基、异丙基氨基甲酰基、丁基氨基甲酰基、2-甲基丁基氨基甲酰基、戊基氨基甲酰基、1，3-二甲基丁基氨基甲酰基、己基氨基甲酰基、庚基氨基甲酰基、辛基氨基甲酰基、壬基氨基甲酰基等)、二(低级)烷基氨基甲酰基(例如N-甲基-N-乙基氨基甲酰基、二甲基氨基甲酰基、二乙基氨基甲酰基、二丙基氨基甲酰基、二异丙基氨基甲酰基、二丁基氨基甲酰基、二异丁基氨基甲酰基、二己基氨基甲酰基等)、C3-C7环烷基氨基甲酰基(例如环丙基氨基甲酰基、环丁基氨基甲酰基、环戊基氨基甲酰基、环己基氨基甲酰基、环庚基氨基甲酰基等)、N-低级烷基-N-(C3-C7)环烷基氨基甲酰基(例如N-甲基-N-环丙基氨基甲酰基、N-甲基-N-环己基氨基甲酰基、N-乙基-N-环己基氨基甲酰基、N-丙基-N-己基氨基甲酰基等)、二(C3-C7)环己基氨基甲酰基(例如二环丙基氨基甲酰基、二环戊基氨基甲酰基、二环己基氨基甲酰基等)、N-[二(低级)烷基氨基甲酰基(C3-C7)环烷基]氨基甲酰基[例如N-(1-(或4-)二甲基氨基甲酰基环己基)氨基甲酰基等]、N-[二(低级)烷基氨基甲酰基(低级)烷基(C3-C7)环烷基]氨基甲酰基[例如N-[1-(或4-)(二甲基氨基甲酰基甲基)环己基]氨基甲酰基等]、N-[氨基甲酰基(低级)烷基]氨基甲酰基[例如N-[1-氨基甲酰基-2-甲基丁基]氨基甲酰基等]、N-[N-(低级)烷基氨基甲酰基(低级)烷基]氨基甲酰基[例如N-(1-异丙基氨基甲酰基-2-甲基丁基)氨基甲酰基等]、N-[N，N-低级亚烷基氨基甲酰基(低级)烷基]氨基甲酰基[例如N-[2-甲基-1-(哌啶子基氨基甲酰基)丁基]氨基甲酰基等]、N-[N，N-二(低级)烷基氨基甲酰基(低级)烷基]氨基甲酰基[例如N-(二甲基氨基甲酰基甲基)氨基甲酰基、N-[1-(或2-)(二甲基氨基甲酰基)乙基]氨基甲酰基、N-[1-(二甲基氨基甲酰基)-2-甲基丙基]氨基甲酰基、N-[2，2-二甲基-1-(二甲基氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基、N-[2-甲基-1-(二甲基氨基甲酰基)丁基]氨基甲酰基、N-[2-甲基-1-(二乙基氨基甲酰基)丁基]氨基甲酰基、N-[3-甲基-1-(二甲基氨基甲酰基)丁基]氨基甲酰基、N-(1-二甲基氨基甲酰基戊基)氨基甲酰基等]、N-(低级)烷基-N-[N，N-二(低级)烷基氨基甲酰基](低级)烷基氨基甲酰基[例如N-甲基-N-[1-二甲基氨基甲酰基-2-甲基丁基]氨基甲酰基、N-甲基-N-[1-二甲基氨基甲酰基-3-甲基丁基]氨基甲酰基等]、N-[N-(低级)环烷基氨基甲酰基(低级)烷基]氨基甲酰基[例如N-(1-环己基氨基甲酰基-2-甲基丁基)氨基甲酰基等]等。
芳族酰基可以包括(C6-C10)芳酰基(例如苯甲酰基、甲苯酰基、二甲苯酰基、萘酰基等)、(C6-C10)芳烃磺酰基(例如苯磺酰基、甲苯磺酰基等)、(C6-C10)芳基氨基甲酰基(例如苯基氨基甲酰基、甲苯基氨基甲酰基等)、(C6-C10)芳基草酰基(例如苯基草酰基等)等。
杂环酰基(其中所述杂环基可以与下述的相同)可以包括杂环羰基(例如糠酰基、噻吩甲酰基、2-(或3-或4-)吡啶基羰基、噻唑基羰基、噻二唑基羰基、四唑基羰基、哌嗪基羰基、吗啉代羰基、硫代吗啉代羰基、吲哚基羰基等)、低级或高级亚烷基氨基羰基(例如氮丙啶-1-基羰基、氮杂环丁烷-1-基羰基、吡咯烷-1-基羰基、哌啶-1-基羰基、六氢-1H-吖庚因-1-基羰基、八氢吖辛因-1-基羰基、四氢喹啉羰基、四氢异喹啉羰基、二氢吡啶羰基、四氢吡啶羰基等)、杂环-氨基甲酰基(其中所述杂环基可以与下述的相同)(例如吡啶基氨基甲酰基、哌啶基氨基甲酰基、六氢-1H-吖庚因基氨基甲酰基等)等。
被芳族基团取代的脂族酰基可以包括(C6-C10)芳(低级)链烷酰基例如苯基(低级)链烷酰基(例如苯乙酰基、苯丙酰基、苯己酰基、萘乙酰基等)、(C6-C10)芳(低级)烷氧羰基例如苯基(低级)烷氧羰基(例如苄氧羰基、苯乙氧基羰基等)、苯氧基(低级)链烷酰基(例如苯氧基乙酰基、苯氧基丙酰基等)、(C6-C10)芳(低级)烷草酰基例如苯基(低级)烷草酰基(例如苄草酰基等)、(C6-C10)芳(低级)链烯酰基例如苯基(低级)链烯酰基(例如肉桂酰基等)、(C6-C10)芳(低级)烷基磺酰基(例如苄基磺酰基等)等。
被杂环基取代的脂族酰基可以包括杂环-(低级)链烷酰基(其中所述杂环基可以与下述的相同)(例如噻吩基乙酰基、咪唑基乙酰基、呋喃基乙酰基、四唑基乙酰基、噻唑基乙酰基、噻二唑基乙酰基、噻吩基丙酰基、噻二唑基丙酰基、吡啶基乙酰基等)、杂环-(低级)烷基氨基甲酰基(其中所述杂环基可以与下述的相同)(例如吡啶基甲基氨基甲酰基、吗啉代乙基氨基甲酰基等)等。
所述酰基可以进一步被一个或多个，优选一至三个适宜取代基取代，所述取代基为例如羟基、低级烷基(例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、戊基、己基等)、卤素(例如氯、溴、碘、氟)、氨基甲酰基、氧代、二(低级)烷基氨基甲酰基、氨基、被保护的氨基例如低级链烷酰氨基(例如甲酰氨基、乙酰氨基、丙酰氨基等)、(低级)烷氧羰基氨基(例如叔丁氧羰基氨基等)、低级烷基磺酰基(例如甲磺酰基等)、芳基磺酰基(例如苯磺酰基、甲苯磺酰基等)、芳(低级)烷基(例如苄基等)、低级烷氧基(例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、叔丁氧基等)、羧基、如下所述的被保护的羧基、羧基(低级)烷基(例如羧甲基、羧乙基等)、被保护的羧基(低级)烷基(例如叔丁氧羰基甲基等)等。
进一步被一个或多个、优选一至三个适宜取代基取代的上述酰基的适宜实例可以是卤代苯基(低级)链烷酰基(例如2-氯苯基乙酰基等)、(氨基苯基)(低级)链烷酰基(例如4-氨基苯基乙酰基等)、[(低级烷氧羰基氨基)苯基](低级)链烷酰基[例如4-(叔丁氧羰基氨基)苯乙酰基等]、氨基(低级)链烷酰基(例如2-氨基-3-甲基戊酰基等)、(低级烷氧羰基氨基)(低级)链烷酰基[例如2-(叔丁氧羰基氨基)-3-甲基戊酰基等)、被适宜取代基例如苯基、氨基、低级烷氧羰基氨基等取代的低级链烷酰基[例如2-氨基-2-苯基乙酰基、2-(叔丁氧羰基氨基)-2-苯基乙酰基等]、二(低级)烷基哌啶基羰基[例如2，6-(或3，5-)二甲基哌啶-1-基羰基等]、[二(低级)烷基氨基甲酰基]哌啶基羰基[例如4-(二甲基氨基甲酰基)哌啶-1-基羰基等]、[二(低级)烷基氨基甲酰基]吡咯烷基羰基[例如2-(二甲基氨基甲酰基)吡咯烷-1-基羰基等]、被适宜取代基例如低级烷基、氧代等取代的哌嗪基羰基[例如4-甲基-3-氧代-2-(1-甲基丙基)哌嗪-1-基羰基等]、N-(低级)烷基-N-[羟基(低级)烷基]氨基甲酰基[例如N-甲基-N-(2-羟基乙基)氨基甲酰基等]、N-[羟基(低级)烷基]氨基甲酰基[例如N-{1-(羟甲基)-3-甲基丁基}氨基甲酰基等]、N-[(C3-C7)环烷基(低级)烷基]氨基甲酰基[例如N-(环己基甲基)氨基甲酰基等]、N-[羧基(低级)烷基]氨基甲酰基[例如N-(1-羧基-2-甲基丁基)氨基甲酰基等]、N-[(低级)烷氧羰基(低级)烷基]氨基甲酰基[例如N-(1-甲氧羰基-2-甲基丁基)氨基甲酰基等]、(氧代杂环基)氨基甲酰基(其中所述杂环基可以与下述的相同)例如{氧代(六氢-1H-吖庚因基)}氨基甲酰基(例如ε-己内酰胺-3-基等)等、N-[N-(低级)烷氧羰基哌啶基]氨基甲酰基[例如N-(N-乙氧羰基哌啶-4-基)氨基甲酰基等)、被苯基或环(低级)烷基取代的N-[N，N-二(低级)烷基氨基甲酰基(低级)烷基]氨基甲酰基[例如N-{1-(N，N-二甲基氨基甲酰基)-1-苯基甲基}氨基甲酰基、N-{1-(N，N-二甲基氨基甲酰基)-1-环己基甲基}氨基甲酰基等]、N-[羟基(C3-C7)环烷基]氨基甲酰基[例如N-(4-羟基环己基)氨基甲酰基等]、N-(低级)烷氧基苯基氨基甲酰基[例如N-(4-甲氧基苯基)氨基甲酰基等]、N-(低级链烷酰氨基)氨基甲酰基[例如N-(2-甲基丙酰氨基)氨基甲酰基等]等。
酰基的优选实例可以是优选被卤素取代的(C6-C10)芳(低级)链烷酰基例如苯基(低级)链烷酰基、卤代苯基(低级)链烷酰基等、任选被卤素取代的C6-C10芳基氨基甲酰基例如苯基氨基甲酰基、卤代苯基氨基甲酰基，其中最优选的可以是苯乙酰基、2-氯苯乙酰基、苯基氨基甲酰基和2-氯苯基氨基甲酰基。
适宜的“低级烷基”可以包括直链或支链低级烷基，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、己基等，其中最优选的实例可以为R1和/或R2为甲基和丁基、R5为异丁基、而R7为异丙基和异丁基。
适宜的“被保护的羧基”可以包括如上所述的酯化的羧基和酰胺化的羧基。
“酯化的羧基”可以指如下所述的酯化的羧基。
酯化的羧基的酯部分的适宜实例可以是例如低级烷基酯(例如甲酯、乙酯、丙酯、异丙酯、丁酯、异丁酯、叔丁酯、戊酯、己酯等)；所述低级烷基酯可以具有至少一个适宜取代基，例如低级链烷酰氧基(低级)烷基酯[例如乙酰氧基甲酯、丙酰氧基甲酯、丁酰氧基甲酯、戊酰氧基甲酯、新戊酰氧基甲酯、己酰氧基甲酯、1-(或2-)乙酰氧基乙酯、1-(或2-或3-)乙酰氧基丙酯、1-(或2-或3-或4-)乙酰氧基丁酯、1-(或2-)丙酰氧基乙酯、1-(或2-或3-)丙酰氧基丙酯、1-(或2-)丁酰氧基乙基、1-(或2-)异丁酰氧基乙酯、1-(或2-)新戊酰氧基乙酯、1-(或2-)己酰氧基乙酯、异丁酰氧基甲酯、2-乙基丁酰氧基甲酯、3，3-二甲基丁酰氧基甲酯、1-(或2-)戊酰氧基乙酯等]、芳酰基(低级)烷基酯、例如苯甲酰基(低级)烷基酯(例如苯甲酰甲基酯等)、低级烷磺酰基(低级)烷基酯(例如2-甲磺酰基乙酯等)、一(或二或三)卤素(低级)烷基酯(例如2-碘乙酯、2，2，2-三氯乙酯等)；低级烷氧羰基氧基(低级)烷基酯[例如甲氧羰基氧基甲酯、乙氧羰基氧基甲酯、丙氧羰基氧基甲酯、叔丁氧羰基氧基甲酯、1-(或2-)甲氧羰基氧基乙酯、1-(或2-)乙氧羰基氧基乙酯、1-(或2-)异丙氧羰基氧基乙酯等]、苯并[C]呋喃酮亚基(phthalidyldene)(低级)烷基酯、或(5-低级烷基-2-氧代-1，3-二氧杂环戊烯-4-基)(低级)烷基酯[例如(5-甲基-2-氧代-1，3-二氧杂环戊烯-4-基)甲酯、(5-乙基-2-氧代-1，3-二氧杂环戊烯-4-基)甲酯、(5-丙基-2-氧代-1，3-二氧杂环戊烯-4-基)乙酯等]；低级链烯基酯(例如乙烯基酯、烯丙酯等)；低级炔基酯(例如乙炔基酯、丙炔基酯等)；可以具有至少一个适宜取代基的芳(低级)烷基酯(例如苄酯、4-甲氧基苄酯、4-硝基苄酯、苯乙基酯、三苯甲基酯、二苯甲基酯、双(甲氧基苯基)甲基酯、3，4-二甲氧基苄基酯、4-羟基-3，5-二叔丁基苄基酯等)；可以具有至少一个适宜取代基的芳基酯(例如苯基酯、4-氯苯基酯、甲苯基酯、叔丁基苯基酯、二甲苯基酯、基酯、枯烯基酯等)；2-苯并[C]呋喃酮基酯等。
所定义的酯化的羧基的优选实例可以是低级烷氧羰基，最优选的是对R8可以是甲氧羰基和乙氧羰基，对R11为乙氧羰基。
适宜的“任选取代的杂环基-(低级)烷基”是指被含有至少一个杂原子例如氧、硫、氮原子等的饱和或不饱和的、单环或多环杂环基团所取代的上述低级烷基。
较优选的杂环部分可以是诸如下述的杂环基-不饱和的3-8元、优选5或6元含有1至4个氮原子的杂单环基团，例如吡咯基、吡咯啉基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、及其N-氧化物、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三唑基(例如4H-1，2，4-三唑基、1H-1，2，3-三唑基、2H-1，2，3-三唑基等)、四唑基(例如1H-四唑基、2H-四唑基等)、二氢三嗪基(例如4，5-二氢-1，2，4-三嗪基、2，5-二氢-1，2，4-三嗪基等)等；-饱和的3至8元，优选5或6元含有1至4个氮原子的杂单环基团，例如氮杂环丁烷基、吡咯烷基、咪唑烷基、哌啶基、吡唑烷基、哌嗪基等；-不饱和的稠合的7至12元含有1至5个氮原子的杂环基团，例如吲哚基、异氮杂茚基、中氮茚基、苯并咪唑基、喹啉基、异喹啉基、吲唑基、苯并三唑基、四唑并吡啶基、四唑并哒嗪基(例如四唑并[1，5-b]哒嗪等)、二氢三唑并哒嗪基等；-不饱和的3至8元、优选5或6元含有1至2个氧原子和1至3个氮原子的杂单环基团，例如噁唑基、异噁唑基、噁二唑基[例如1，2，4-噁二唑基、1，3，4-噁二唑基、1，2，5-噁二唑基等)等；-饱和的3至8元、优选5或6元含有1至2个氧原子和1至3个氮原子的杂单环基团，例如吗啉基等；-不饱和的稠合的7至12元含有1至2个氧原子和1至3个氮原子的杂环基团，例如苯并噁唑基、苯并噁二唑基等；-不饱和的3至8元、优选5或6元含有1至2个硫原子和1至3个氮原子的杂单环基团，例如噻唑基、1，2-噻唑基、噻唑啉基、噻二唑基(例如1，2，4-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基、1，2，3-噻二唑基等)等；-饱和的3至8元、优选5或6元含有1至2个硫原子和1至3个氮原子的杂单环基团，例如噻唑烷基等；-不饱和的3至8元、优选5或6元含有硫原子的杂单环基团，例如噻吩基等；-不饱和的稠合的7至12元含有1至3个硫原子的杂环基团，例如苯并噻吩基(例如苯并[b]噻吩基等)；-不饱和的稠合的7至12元含有1至2个硫原子和1至3个氮原子的杂环基团，例如苯并噻唑基、苯并噻二唑基等；
其中所述杂环基团可以被一个或多个、优选一或两个适宜取代基取代，所述取代基为例如-羟基；-被保护的羟基，其中羟基被常规羟基保护基团例如上述酰基、三(低级)烷基甲硅烷氧基(例如叔丁基二甲基甲硅烷氧基等)等保护起来；-卤素(例如氯、溴、碘或氟)；-低级烷氧基，其可以是直链或支链的低级烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、戊氧基、己氧基等，更优选C1-C4烷氧基(例如甲氧基等)；-上述低级烷基，更优选C1-C4烷基(例如甲基等)；氨基、硝基、氰基等。
另外，若所述杂环基团在其环上具有亚氨部分时，该亚氨部分可以被诸如下列的适宜取代基取代-上述低级烷基(例如甲基、乙基、丙基、异丁基等)；-亚氨基保护基，其与下述氨基保护基相同，更优选低级链烷酰氧基羰基(例如甲酰基等)、芳烃磺酰基(例如甲苯磺酰基等)等。
所定义的“优选取代的杂环基(低级)烷基”的优选实例可以为被不饱和的5或6元含有1至4个氮原子的杂单环基团取代的低级烷基，例如吡啶基(低级)烷基；咪唑基(低级)烷基；被不饱和的稠合的7至12元含有1至5个氮原子的杂环基取代的、任选被低级烷基取代的低级烷基，例如吲哚基、低级烷基吲哚基；被不饱和的稠合的7至12元含有1至3个硫原子的杂环基取代的低级烷基，例如苯并噻吩基；最优选的是，R2和R3为3-吡啶基甲基，而R6为1-甲基吲哚-3-基和3-苯并[b]噻吩基。
适宜的“芳(低级)烷基”部分可以包括C6-C10芳(低级)烷基，例如苯基(低级)烷基(例如苄基、苯乙基等)、甲苯基(低级)烷基、二甲苯基(低级)烷基、萘基(低级)烷基(例如萘甲基等)等，其中所述芳(低级)烷基可以被诸如在上述“任选取代的杂环(低级)烷基”的解释中所述的适宜取代基所取代。
所定义的“任选取代的芳(低级)烷基”的优选实例可以是任选被卤素、低级烷基或低级烷氧基取代的苯基(低级)烷基，和萘基(低级)烷基，最优选的是，R1和/或R2为任选的氯、甲基或甲氧基取代的苄基，和萘甲基，而R6为萘甲基。
适宜的“任选被取代的环(低级)烷基(低级)烷基”是指被C3-C7环(低级)烷基例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基等取代的上述低级烷基，其中所述环(低级)烷基(低级)烷基任选被诸如在前面所述的“任选取代的杂环(低级)烷基”的解释中所提及的适宜取代基所取代，其中更优选的实例可以是C4-C6环(低级)烷基，最优选的是环己基甲基。
适宜的“低级亚烷基”是指直链或支链低级亚烷基，例如亚甲基、1，2-亚乙基、1，3-亚丙基、甲基-1，2-亚乙基、1，4-亚丁基、1，5-亚戊基、1，6-亚己基等，其中最优选的实例可以是1，2-亚乙基、1，3-亚丙基、和1，2-亚丙基。
适宜的“低级烷硫基(低级)烷基”是指被低级烷硫基(例如甲硫基、乙硫基、丙硫基、异丙硫基、丁硫基、戊硫基、己硫基等)取代的直链或支链低级烷基，其中更优选的实例可以是C1-C4烷硫基(C1-C4)烷基，最优选的可以是甲硫基甲基。
适宜的“氨基(或被保护的氨基)(低级)烷基”是指被氨基或被保护的氨基取代的上述低级烷基，其中所述被保护的氨基被下述常见的氨基保护基团保护，其中更优选的实例可以是氨基(低级)烷基、低级烷氧羰基氨基(低级)烷基和C6-C10芳基(低级)烷基氨基(低级)烷基，最优选的可以是2-氨基丙基和2-(叔丁氧羰基氨基)丙基。
适宜的“任选取代的杂环羰基”是指被上述杂环基取代的羰基，其中更优选的实例可以是被不饱和的5或6元含有1至4个氮原子的杂单环基取代的羰基，最优选的可以是吡啶基羰基。
适宜的“环(低级)烷基”可以包括C3-C6环(低级)烷基例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基等，其中最优选的实例可以为环己基。
适宜的“离去基团”可以包括酸残基例如卤素(例如氟、氯、溴、碘)、酰氧基(例如乙酰氧基、甲苯磺酰氧基、甲磺酰氧基等)等，其中更优选的实例可以是氯。
适宜的“常见的氨基保护基”可以包括上述酰基、上述芳(低级)烷基，其中更优选的实例可以是低级烷氧羰基和苯基(低级)烷基，最优选的可以是叔丁氧羰基和苄基。
适宜的“C1-C5烷基”、“任选取代的芳(C1-C5)烷基”、“任选取代的杂环(C1-C5)烷基”、“任选取代的环(低级)烷基(C1-C5)烷基”和“氨基(或被保护的氨基)(C1-C5)烷基”分别指上述低级烷基、任选取代的芳(低级)烷基、任选取代的杂环(低级)烷基、任选取代的环(低级)烷基(低级)烷基和氨基(或被保护的氨基)(低级)烷基，其中所述低级烷基部分具有C1-C5个碳原子。
化合物(I)的每一定义的一个优选的实施方案可以为如下方案R1为氢、低级烷基、任选被卤素、低级烷基和低级烷氧基取代的苯基(低级)烷基、或萘基(低级)烷基；R2为氢、低级烷基、苯基(低级)烷基，其任选被卤素、低级烷基和低级烷氧基取代、萘基(低级)烷基、吡啶基(低级)烷基、环(低级)烷基(低级)烷基或氨基保护基团，例如低级烷氧羰基；R3为吡啶基(低级)烷基；R4为任选被卤素取代的芳(低级)链烷酰基；R5为低级烷基(例如异丁基)；R6为萘基(低级)烷基；R7为低级烷基(例如异丙基)；R8为羧基或被保护的羧基(例如低级烷氧羰基)；和m为整数0。
化合物(I)的每一定义的另一优选实施方案可以为如下方案R1为氢、低级烷基、低级烷氧羰基、任选被卤素、低级烷基和低级烷氧基取代的苯基(低级)烷基或萘基(低级)烷基；R2为氢、低级烷基、苯基(低级)烷基，其任选被卤素、低级烷基和低级烷氧基取代、萘基(低级)烷基、吡啶基(低级)烷基、环(低级)烷基(低级)烷基、氨基(或低级烷氧羰基氨基)(低级)烷基、环(低级)烷基、吡啶基羰基、或低级烷氧羰基；R3为吡啶基(低级)烷基；R4为任选被卤素取代的C6-C10芳(低级)链烷酰基、或任选被卤素取代的C6-C10芳基氨基甲酰基；R5为低级烷基；R6为萘基(低级)烷基、低级烷基吲哚基(低级)-烷基、苯并噻吩基(低级)烷基；R7为低级烷基或低级烷硫基(低级)烷基；R8为羧基或低级烷氧羰基；和m为整数0。另外，更优选的化合物(I)的实施方案可以由下式来表示 其中R1、R2、R4、R8和A各自如上所定义。下面详细解释了目标化合物(I)的制备方法。
方法1目标化合物(I)或其盐可以如下制备使化合物(II)或其在羧基上的反应活性衍生物、或其盐与化合物(III)或其在氨基上的反应活性衍生物或其盐反应。
化合物(III)的氨基上的适宜反应活性衍生物可以包括化合物(III)与羰基化合物例如醛、酮等反应形成的席夫碱型亚胺(imino)或其互变异构的烯胺型异构体；化合物(III)与甲硅烷基化合物例如双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺、单(三甲基甲硅烷基)乙酰胺、双(三甲基甲硅烷基)脲等反应形成的甲硅烷基衍生物；化合物(III)与三氯化磷或光气反应形成的衍生物等。
化合物(III)及其反应活性衍生物的适宜盐可以参见对化合物(I)所列举的酸加成盐。
在化合物(II)的羧基上的适宜反应活性衍生物可以包括酰卤、酸酐、活化的酰胺、活化的酯等。反应活性衍生物的适宜实例可以包括酰氯；酰基叠氮；与诸如下列的酸形成的混合酸酐取代的磷酸[例如二烷基磷酸、苯基磷酸、二苯基磷酸、二苄基磷酸、卤代磷酸等]、二烷基亚磷酸、亚硫酸、硫代硫酸、硫酸、磺酸[例如甲磺酸等]、脂族羧酸[例如乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、新戊酸、戊酸、异戊酸、2-乙基丁酸、三氯乙酸等]或芳族羧酸[例如苯甲酸等]；对称的酸酐；用咪唑、4位取代的咪唑、二甲基吡唑、三唑或四唑活化的酰胺；或活化的酯[例如氰甲基酯、甲氧基甲基酯、二甲基亚氨基(iminio)甲基[(CH3)2N+＝CH-]酯、乙烯基酯、炔丙基酯、对硝基苯基酯、2，4-二硝基苯基酯、三氯苯基酯、五氯苯基酯、甲磺酰基苯基酯、苯偶氮基苯基酯、苯基硫酯、对硝基苯基硫酯、对羟甲苯基硫酯(p-cresyl thioester)、羧甲基硫酯、吡喃基酯、吡啶基酯、哌啶基酯、8-喹啉基硫酯等]、或与N-羟基化合物[例如N，N-二甲基羟胺、1-羟基-2-(1H)-吡啶酮、N-羟基琥珀酰亚胺、N-羟基邻苯二甲酰亚胺、1-羟基-1H-苯并三唑等]形成的酯等。这些反应活性衍生物可根据欲使用的化合物(II)的种类任意选择。
化合物(II)及其反应活性衍生物的适宜盐可以是碱盐(basesalt)例如碱金属盐[例如钠盐、钾盐等]、碱土金属盐[例如钙盐、镁盐等]、铵盐、有机碱盐[例如三甲胺盐、三乙胺盐、吡啶盐、甲基吡啶盐、二环己基胺盐、N，N′-二苄基乙二胺盐等]等。
所述反应通常在常规溶剂中进行，所述溶剂例如为水、醇[例如甲醇、乙醇等]、丙酮、二噁烷、乙腈、氯仿、二氯甲烷、氯化乙烯、四氢呋喃、乙酸乙酯、N，N-二甲基甲酰胺、吡啶或任何其他不对反应有不利影响的有机溶剂。这些常规溶剂也可以作为与水的混合物使用。
在该反应中，若化合物(II)是以游离酸形式或其盐形式使用，则该反应优选在常规缩合剂的存在下进行，所述常规缩合剂为例如N，N′-二环己基碳化二亚胺；N-环己基-N′-吗啉代乙基碳化二亚胺；N-环己基-N′-(4-二乙氨基环己基)碳化二亚胺；N，N′-二乙基碳化二亚胺、N，N′-二异丙基碳化二亚胺；N-乙基-N′-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺；N，N′-羰基双(2-甲基咪唑)；五亚甲基乙烯酮(pentamethyleneketene)-N-环己基亚胺；二苯基乙烯酮-N-环己基亚胺；乙氧基乙炔；1-烷氧基-1-氯乙烯；亚磷酸三烷基酯；多磷酸乙酯；多磷酸异丙酯；三氯氧化磷(磷酰氯)；三氯化磷；二苯基磷酰基叠氮(diphenylphosphorylazide)、亚硫酰氯、草酰氯；卤代甲酸低级烷基酯[例如氯甲酸乙酯、氯甲酸异丙基等]；三苯膦；2-乙基-7-羟基苯并异噁唑鎓(isoxasolium)盐；氢氧化2-乙基-5-(间-磺苯基)异噁唑鎓分子内盐；N-羟基苯并三唑；1-(对氯苯磺酰氧基)-6-氯-1H-苯并三唑；所谓的Vilsmeier试剂(该试剂是由N，N-二甲基甲酰胺与亚硫酰氯、光气、氯甲酸三氯甲基酯、磷酰氯等反应制备的)等。
所述反应也可以在无机或有机碱例如碱金属碳酸氢盐、三(低级)烷基胺、吡啶、N-(低级)-烷基吗啉、N，N-二(低级)烷基苄胺等的存在下进行的。
所述反应温度不是关键性的，并且该反应一般在冷却至温热条件下进行的。
方法2目标化合物(I-b)或其盐可以通过使化合物(I-a)或其盐进行Ra2氨基保护基的除去反应来制备。
适宜的化合物(I-a)和(I-b)的盐可以参见对于化合物(I)所例举的盐。
该反应是按常规方法例如溶剂分解包括水解法、还原法等进行的。
溶剂分解作用优选在碱或酸包括路易斯酸存在下进行的。
适宜的碱可以包括无机碱和有机碱例如碱金属[例如钠、钾等]、碱土金属[例如镁、钙等]、其氢氧化物或碳酸盐或碳酸氢盐、肼、三烷基胺[例如三甲胺、三乙胺等]、甲基吡啶、1，5-二氮杂二环[4.3.0]壬-5-烯、1，4-二氮杂二环[2.2.2]辛烷、1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯等。
适宜的酸可以包括有机酸[例如甲酸、乙酸、丙酸、三氯乙酸、三氟乙酸等]、无机酸[例如盐酸、氢溴酸、硫酸、氯化氢、溴化氢、氟化氢等]。
采用路易斯酸例如三卤乙酸[例如三氯乙酸、三氟乙酸等]等的除去反应优选在阳离子捕获剂[例如茴香醚、苯酚等]的存在下进行。
所述反应通常在溶剂例如水、醇[例如甲醇、乙醇等]、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺、其混合物或任何其他不对反应有不利影响的溶剂中进行。液态碱或酸也可以用作溶剂。反应温度不是关键性的，并且所述反应通常在冷却至加热的条件下进行。
应用于除去反应的还原法可以包括化学还原和催化还原。
用于化学还原中的适宜的还原剂为化学还原剂例如氢化锂铝、硼氢化钠、氰基硼氢化钠等、金属[例如锡、锌(Zing)、铁等]或金属化合物[例如氯化铬、乙酸铬等]与有机或无机酸[例如甲酸、乙酸、丙酸、三氟乙酸、对甲苯磺酸、盐酸、氢溴酸等]的混合物等。
用于催化还原中的适宜催化剂为常规催化剂，例如铂催化剂[例如铂板、海绵铂、铂黑、胶态铂、氧化铂、铂丝等]、钯催化剂[例如海绵钯、钯黑、氧化钯、钯/炭、胶态钯、钯/硫酸钡、钯/碳酸钡等]、镍催化剂[例如还原镍、氧化镍、阮内镍等]、钴催化剂[例如还原钴、阮内钴等]、铁催化剂[例如还原铁、阮内铁等]、铜催化剂[例如还原铜、阮内铜、Ullman铜等]等。
所述还原反应一般在不对反应有不利影响的常规溶剂例如水、甲醇、乙醇、丙醇、N，N-二甲基甲酰胺、或其混合物中进行。此外，在用于化学还原中的上述酸为液态的情况下，它们也可以用作溶剂。而且，用于催化还原中的适宜溶剂可以是上述溶剂、及其他常规溶剂例如乙醚、二噁烷、四氢呋喃等、或其混合物。
该还原反应的反应温度不是关键性的，并且该反应通常在冷却至加热条件下进行。
方法3目的化合物(I-c)或其盐可以通过在适宜还原剂的存在下，使化合物(I-b)或其在氨基上的反应活性衍生物或其盐与化合物(IV)或其盐反应来制备。
适宜的化合物(I-b)的反应活性衍生物可以参见对化合物(III)所例举的反应活性衍生物。
适宜的化合物(I-c)的盐可以参见对于化合物(I)所例举的盐。
适宜的还原剂可以参见对方法2所例举的还原剂，其中所述还原剂可以还原中间制备的亚氨基官能团，所述还原剂例如为硼氢化钠、氰基硼氢化钠、催化还原剂等。
该反应可以按基本上与方法1和/或2相同的方式进行，因此该反应的反应模式及反应条件[例如反应活性衍生物、溶剂、反应温度等]是指在方法1和2中所述的反应模式及反应条件。
方法4目的化合物(I-e)或其盐可以通过使化合物(I-d)或其盐进行Ra8中的羧基保护基的除去反应来制备。
适宜的化合物(I-d)和(I-e)的盐可以参见对化合物(I)所例举的盐。
该除去反应可以通过肽化学中的常规方法例如溶剂分解、还原等进行，这些方法的细节参见方法2中所述。
上述方法中所得化合物可以按常规方法例如粉碎、重结晶、柱色谱法、再沉淀等来分离和纯化。
目的化合物(I)可以按常规方法转化为其盐。
制备新的起始化合物的方法详细描述如下。
制备方法1[步骤1]化合物(VII)或其盐可以通过使化合物(V)或其在羧基上的反应活性衍生物、或其盐与化合物(VI)或其在氨基上的反应活性衍生物、或其盐反应来制备。
适宜的化合物(V)及其反应活性衍生物的盐可以参见对化合物(II)所例举的相应化合物。
适宜的化合物(VI)及其反应活性衍生物的盐可以参见对化合物(III)所例举的相应化合物。
适宜的化合物(VII)的盐可以参见对化合物(I)所例举的盐。
该反应可以按基本上与方法1所述相同的方式来进行，因而该反应的反应模式及反应条件[例如反应活性衍生物、溶剂、反应温度等]可以参见在方法1中所述的反应模式及反应条件。
化合物(III)或其盐可以通过使化合物(VII)或其盐按常规方式例如在方法2中所述的方式进行R10氨基保护基的除去反应来制备。
制备方法2[步骤1]化合物(IX)或其盐可以通过酰化化合物(VIII)的氨基或其反应活性衍生物或其盐来制备。
适宜的化合物(VIII)和(IX)的盐可以与对化合物(I)所述盐相同。
该反应中所用的适宜酰化剂可以为上述能够引入酰基的常规酰化剂，例如羧酸、碳酸、磺酸及其反应活性衍生物，例如酰卤、酸酐、活化的酰胺、活化的酯等。所述反应活性衍生物的优选实例可以包括酰氯、酰溴、与下述酸的混合酸酐，例如取代的磷酸(例如二烷基磷酸、苯基磷酸、二苯基磷酸、二苄基磷酸、卤代磷酸等)、二烷基亚磷酸、亚硫酸、硫代硫酸、硫酸、碳酸烷基酯(例如碳酸甲酯、碳酸乙酯、碳酸丙酯等)、脂族羧酸(例如新戊酸、戊酸、异戊酸、2-乙基丁酸、三氯乙酸等)、芳族羧酸(例如苯甲酸等)；对称的酸酐；与含有亚氨基官能团的杂环化合物(例如咪唑、4位取代的咪唑、二甲基吡唑、三唑及四唑)形成的活化的酰胺；活化的酯(例如对硝基苯基酯、2，4-二硝基苯基酯、三氯苯基酯、五氯苯基酯、甲磺酰基苯基酯、苯偶氮基苯基酯、苯基硫酯、对硝基苯基硫酯、对羟甲苯基硫酯、羧甲基硫酯、吡啶基酯、哌啶基酯、8-喹啉基硫酯；或与N-羟基化合物(例如N，N-二甲基羟胺、1-羟基-2-(1H)-吡啶酮、N-羟基琥珀酰亚胺、N-羟基邻苯二甲酰亚胺、1-羟基苯并三唑、1-羟基-6-氯苯并三唑等)形成的酯等。
该反应可以在有机或无机碱存在下进行，所述有机或无机碱为例如碱金属(例如锂、钠、钾等)、碱土金属(例如钙等)、碱金属氢化物(例如氢化钠等)、碱土金属氢化物(例如氢化钙等)、碱金属氢氧化物(例如氢氧化钠、氢氧化钾等)、碱金属碳酸盐(例如碳酸钠、碳酸钾等)、碱金属碳酸氢盐(例如碳酸氢钠、碳酸氢钾等)、碱金属醇盐(例如甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钾等)、链烷酸碱金属盐(例如乙酸钠等)、三烷基胺(例如三乙胺等)、吡啶化合物(例如吡啶、二甲基吡啶、甲基吡啶、4-二甲氨基吡啶等)、喹啉等。
在酰化剂是以游离形式或其盐的形式用于该反应时，该反应优选在缩合剂的存在下进行，所述缩合剂为例如碳化二亚胺化合物[例如N，N′-二环己基碳化二亚胺、N-环己基-N′-(4-二乙氨基环己基)碳化二亚胺、N，N′-二乙基碳化二亚胺、N，N′-二异丙基碳化二亚胺、N-乙基-N′-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺等]、乙烯亚胺(ketenimine)化合物(例如N，N′-羰基双(2-甲基咪唑)、五亚甲基乙烯酮-N-环己基亚胺、二苯基乙烯酮-N-环己基亚胺等)；烯醚或炔醚化合物(例如乙氧基乙炔、β-氯乙烯基乙基醚)、N-羟基苯并三唑衍生物的磺酸酯[例如1-(4-氯苯磺酰氧基)-6-氯-1H-苯并三唑等]、亚磷酸三烷基酯或三苯膦与四氯化碳的混合物、二硫化物或二氮烯二羧酸酯(例如二氮烯二羧酸二乙酯等)的混合物、磷化合物(例如多磷酸乙酯、多磷酸异丙酯、磷酰氯、三氯化磷等)、亚硫酰氯、草酰氯、N-乙基苯并异噁唑鎓盐、N-乙基-5-苯基异噁唑鎓-3-磺酸盐、通过酰胺化合物例如N，N-二(低级)烷基甲酰胺(例如二甲基甲酰胺等)、N-甲基甲酰胺等与卤素化合物例如亚硫酰氯、磷酰氯、光气等反应而形成的试剂(称为所谓的“Vilsmeier试剂”)。
所述反应通常在对反应不产生不利影响的常规溶剂中进行，所述常规溶剂为例如水、丙酮、二氯甲烷、醇(例如甲醇、乙醇等)、四氢呋喃、吡啶、N，N-二甲基甲酰胺等、或其混合物。
反应温度不是关键性的，并且反应通常在冷却至加热的条件下进行。
目的化合物(II)或其盐可以如下制备使化合物(IX)或其盐进行R11中羧基保护基的除去反应。
该除去反应可以按肽化学中的常规方法例如溶剂分解法、还原法等进行，所述方法的细节可以参见方法2。
要注意的是，化合物(I)和其他化合物可以包括因不对称碳原子而产生的一个或多个立体异构体，而所有这些异构体及其混合物均包括在本发明范围内。
目的化合物(I)及其可药用盐具有药理学活性，例如内皮素拮抗活性、特别是ETB拮抗活性，例如血管舒张活性等，并且可用于治疗性的治疗与预防内皮素介导的疾病例如高血压(例如特发性高血压、肺动脉高血压、肾性高血压等)；心脏病例如胸绞痛(anginapectoris)、心肌病、血管痉挛性绞痛、心肌梗塞形成、心力衰竭等；大脑卒中例如脑动脉痉挛、脑局部缺血、脑梗塞形成、脑栓子、脑血管抽搐、脑出血等；蛛网膜下出血后的晚期大脑性痉挛；哮喘例如支气管哮喘等；肾衰竭例如急性或慢性肾衰竭、药物(例如Cisplatin、Cyclosporins、FK506等)引起的肾机能不全；末稍循环衰竭例如Takayushi′s疾病、雷诺病、血栓闭塞性脉管炎疾病等；动脉硬化；糖尿病性血管病例如糖尿病性肾病、糖尿病性视网膜病；休克例如出血性休克、内毒素类引起的休克等；恶性血管内皮瘤；再灌注[例如器官和组织移植后、心肌再灌注损伤、经皮经腔的冠状血管病(PTCA)或经皮经腔的冠状再造管术(PTCR)等]后的器官病；手术后的血流障碍；溃疡；过敏性肠综合征(IBS)；排尿困难；视网膜病；痛经；早产例如早产、先兆流产等；青光眼、PTCA手术后的再闭塞，成人呼吸窘迫综合征(ARDS)等。
为治疗目的，本发明的肽化合物(I)及其可药用盐可以以含有作为活性成份的一种所述化合物、以及与之混合的、适于口服、胃肠外或外部施用的可药用载体例如有机或无机酸或液体赋形剂的药物制剂的形式使用。所述药物制剂可以是胶囊剂、片剂、糖衣丸、粒剂、溶液、悬浮液、乳剂、舌下片剂、栓剂、软膏、气雾剂、浸剂、眼用溶液、阴道栓剂等。如果需要，所述制剂中还可以包括辅助物质、稳定剂、润湿剂或乳化剂、缓冲剂及其他常用的添加剂。
然而化合物(I)的剂量可以随患者的年龄和病症而变化，对于静脉内给药而言，日剂量为0.01～100mg活性成份/kg人体重，对于肌内给药而言，日剂量为0.05～100mg活性成份/kg人体重，对于口服给药而言，日剂量为0.1～100mg活性成份/kg人体重，上述日剂量一般用于治疗内皮素介导的疾病。
为了说明目的化合物(I)的用途，下面给出了化合物(I)的有代表性的化合物的药理学试验数据。
试验1放射配体结合测定(1)试验化合物化合物A[实施例13～6)的化合物](2)试验方法(a)粗受体膜制剂作为内皮素受体的膜是从猪肾的内髓分离得到的。将猪肾的内髓置于冰冷的缓冲液(0.25M蔗糖、5mM Tris-HCl、0.1mM EDTA，pH7.5)中。将该内髓在5体积(w/v)的冰冷的缓冲液中、使用Brinkman Polytron PT-10、在16,000rpm处匀化三个10秒的时间。将匀浆在10,000×g的条件下在4℃离心20分钟。将沉淀丸状物弃去，将上清液在4℃在100,000×g的条件下离心60分钟。将最终的沉淀丸状物再悬浮于用于该测定中的3体积的原始湿重的50mMTris-HCl(pH7.5)缓冲液(缓冲液1)中，该缓冲液含有100mMNaCl、5mM MgCl2、1.5μg/ml(对脒基苯基)甲磺酰氟、120μg/ml杆菌肽、12μg/ml亮肽素、6μg/ml抑凝乳蛋白酶素和10μg/ml phosphoramidon 。
(b)125I-内皮素(ET)-1结合测定为了测定[125I]ET-1对肾的结合，将由肾(10μg蛋白质)制备的膜悬浮液在23℃下与[125I]ET-1(4-900pM范围)在总体积为250μl的、含有0.1mg/ml牛血清白蛋白的缓冲液1中、在不断摇动下保温60分钟。在该项研究中，使用了大范围的[125I]ET-1浓度，以便确定在每个制剂中[125I]ET-1具有单一类型的结合位点。以一式两份进行的保温是通过迅速地滤过一Whatman GF/C玻璃滤片而终止的。这些滤片用0.2ml冰冷的50mM Tris-HCl缓冲液(pH7.5)洗涤三次，放射性在γ-计数器(Hewlett-Packard)上、在71％的效率时读出。非特异性结合被定义为3.2μM ET-1的不可移位结合，而特异性结合被定义为总结合与非特异性结合之差。Kd是由Scatchard分析测定的。
为了测定试验化合物的抑制曲线，将由猪肾的内髓制备的膜悬浮液与浓度逐渐增加的试验化合物及[125I]ET-1(16pM)一起保温。特异性结合相当于在猪肾中与16pM[125I]ET-1全部结合的85％。蛋白质浓度是由染色-结合测定法(Bio-Rad蛋白质测定试剂盒)测定的。每一化合物与结合位点的相互作用的Ki是由Williams等人的方程式(J.Biel.Chem.251，6915～6923，1976)计算出的。(3)试验结果结果列于表1中。
表1对在猪肾膜中[125I]ET-1的特异性结合的作用
从上述生物学试验的结果可以清楚地看出，化合物(I)具有内皮素拮抗活性，因而可用于治疗和预防内皮素介导的疾病，例如高血压、心脏病例如胸绞痛、心肌病、心肌梗塞形成等；再灌注[例如器官和组织移植后、心肌再灌注损伤、PTCA、PTCR等]后的器官病；大脑卒中例如脑动脉痉挛、脑局部缺血、脑血管抽搐等；蛛网膜下出血后的晚期大脑性痉挛、哮喘例如支气管哮喘等；肾衰竭例如慢性或急性肾衰竭、因药物(例如顺氯氨铂(Cisplatin)、环孢菌素(Cyclosporins)等)引起的肾机能不全等。
为了详细说明本发明，给出下列实施例。
在本说明书中，除了IUPAC-IUB采用的缩写外，还使用了下列缩写Boc2O 连二碳酸二叔丁基酯AcOH 乙酸NaOH 氢氧化钠CHCl3氯仿EDTA 乙二胺四乙酸NaCl 氯化钠DMF 二甲基甲酰胺MgCl2氯化镁DMSO 二甲亚砜Et 乙基HOBT N-羟基苯并三唑Me 甲基WSCD N-乙基-N′-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺EtOAc乙酸乙酯HCl 氯化氢aq.HCl 盐酸MgSO4硫酸镁Et2O乙醚CH2Cl2二氯甲烷ET3N三乙胺MeOH 甲醇NaBH3CN 氰基硼氢化钠NaHCO3碳酸氢钠SiO2硅胶为了更详细地说明本发明，给出了下列制备例和实施例。
制备例1在0℃下，向N-叔丁氧羰基-D-1-Nal-OH(10.0g)、HCl.H-D-Val-ONe(5.57g)和HOBt(4.71g)的DMF(100ml)溶液中加入WSCD(5.41g)。在室温下搅拌1小时后，该混合物用EtOAc(500ml)稀释，并依次用1N aq.HCl(500ml)、水(500ml)、饱和碳酸氢钠溶液(500ml)、水(500ml)和盐水(500ml)洗涤。有机层用无水MgSO4干燥、真空浓缩。将残余物于0℃溶于4Naq.HCl-EtOAc(300ml)中。在室温下搅拌15分钟后，真空浓缩该混合物。残余物用Et2O研制，得到HCl·H-D-1-Nal-D-Val-OMe(10.0g)，为粉末。
Rf0.50(10％MeOH的CHCl3溶液)。
制备例2在-60℃于氮气氛下，向搅拌着的DMSO(1.34g)的CH2Cl2(10ml)溶液中滴加草酰氯(1.45g)的CH2Cl2(5ml)溶液。5分钟后，向该溶液中滴加N-(叔丁氧羰基)-N-甲基乙醇胺(1.00g)的CH2Cl2(5ml)溶液，将该混合物在相同温度下搅拌5分钟。向该溶液中加入Et3N(2.89g)，并使温度升至0℃，将该混合物在相同温度下搅拌30分钟。蒸发溶剂后，将残余物溶于EtOAc(50ml)中，并依次用1N aq.HCl(50ml)、水(50ml)、饱和碳酸氢钠溶液(50ml)和盐水(50ml)洗涤。有机层用无水MgSO4干燥，真空浓缩，得到油状的N-(叔丁氧羰基)-N-甲基氨基乙醛(0.74g)。
Rf0.60(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)制备例3在室温下，向N-(叔丁氧羰基)-N-甲基氨基乙醛(0.74g)和HCl·H-L-Leu-OEt(836mg)的MeOH(20ml)溶液中加入NaBH3CN(322mg)。在相同温度下搅拌30分钟，真空蒸发溶剂。将残余物溶于EtOAc(50ml)中，并依次用饱和碳酸氢钠溶液(50ml)、水(50ml)和盐水(50ml)洗涤。有机层用无水MgSO4干燥，并真空浓缩。将残余物用硅胶柱色谱法纯化(SiO240g，EtOAc∶己烷＝1∶3作洗脱液)，得到油状N-[2-[N-(叔丁氧羰基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-OEt(0.52g)。
Rf0.57(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)制备例4在室温下，向(2-氯苯基)乙酸(0.34g)、N-[2-[N-(叔丁氧羰基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-OEt(0.52g)和HOBt(0.27g)的DMF(8ml)溶液中加入WSCD(0.36g)。在相同温度下搅拌8小时后，该混合物用EtOAc(40ml)稀释，并依次用1Naq.HCl(40ml)、水(40ml)、饱和碳酸氢钠溶液(40ml)、水(40ml)和盐水(40ml)洗涤。有机层用无水MgSO4干燥，真空浓缩得到油状N-[2-[N-(叔丁氧羰基)-N-甲基氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-OEt(0.76g)。
Rf0.68(EtOAc∶己烷＝1∶1)制备例5在室温下，向N-[2-[N-(叔丁氧羰基)-N-甲基氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-OEt(0.84g)的EtOH(12ml)溶液中加入1N aq.NaOH(6ml)。在相同温度下搅拌1小时后，将该混合物用1N aq.HCl(6ml)中和，并真空浓缩。将残余物溶于EtOAc(40ml)，用盐水(40ml)洗涤。有机层用无水MgSO4干燥，并真空浓缩，得到N-[2-[N-(叔丁氧羰基)-N-甲基氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-OH(0.75g)，为无定型粉末。
Rf0.34(10％MeOH的CHCl3溶液)制备例6按照基本上与制备例2所述相同的方法，制得N-(叔丁氧羰基)氨基乙醛(7.82g)。
Rf0.58(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)制备例7按照基本上与制备例3所述相同的方法，制得N-[2-[N-(叔丁氧羰基)氨基]乙基]-L-Leu-OEt(2.60g)。
Rf0.55(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/ v)制备例8按照基本上与制备例4所述相同的方法，制得N-[2-[N-(叔丁氧羰基)氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-OEt(3.70g)。
Rf0.61(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)制备例9按照基本上与制备例5所述相同的方法，制得N-[2-[N-(叔丁氧羰基)氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-OH(2.83g)。
Rf0.59(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)制备例10在0℃下，向N-叔丁氧羰基-β-Ala-OH(10.0g)、N，O-二甲基羟胺盐酸盐(5.67g)和HOBt(7.86g)的DMF(100ml)溶液中加入WSCD(9.03g)。在室温下搅拌4小时后，将该混合物用EtOAc(500ml)稀释，并依次用1N aq.HCl(500ml)、水(500ml)、碳酸氢钠水溶液(500ml)和盐水(500ml)洗涤。有机层用无水MgSO4干燥，真空浓缩，得到油状N-叔丁氧羰基-β-Ala-N，O-二甲基羟基酰胺(7.23g)。
Rf0.65(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝16∶1∶1，v/v)制备例11在0℃下，向N-叔丁氧羰基-β-Ala-N，O-二甲基羟基酰胺(6.20g)的无水乙醚(100ml)溶液中分批加入氢化锂铝(1.27g)。在相同温度下搅拌20分钟后，小心加入酒石酸水溶液(100ml)，该混合物依次用水(100ml)和盐水(100ml)洗涤。有机层用无水MgSO4干燥。向该溶液中加入MeOH(100ml)和HCl·H-L-Leu-OEt(5.2g)，并减压除去乙醚。向该溶液中加入NaBH3CN(2.0g)，并且将该混合物在室温下搅拌2小时。减压蒸除溶剂，将残余物溶于EtOAc(100ml)中，并用碳酸氢钠水溶液(100ml×2)和盐水(100ml)依次洗涤。有机层用无水MgSO4干燥，并真空浓缩。将残余物用硅胶柱色谱法纯化(EtOAc∶己烷＝1∶3作洗脱剂)，得到N-[3-(N-叔丁氧羰基氨基)丙基氨基]-L-Leu-OEt(3.49g)。
Rf0.41(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)制备例12按照基本上与制备例4所述相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[3-[N-(叔丁氧羰基)氨基]丙基]-L-Leu-OEt(0.70g)。
Rf0.58(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)制备例13按照基本上与制备例5相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[3-[N-(叔丁氧羰基)氨基]丙基]-L-Leu-OH(0.56g)。
Rf0.21(10％MeOH的CHCl3溶液)制备例14-1)将草酰氯(38ml)和几滴N，N-二甲基甲酰胺加入到(2-氯苯基)乙酸(50g)的CH2Cl2(300ml)溶液中。将该混合物在室温下搅拌3小时，然后减压浓缩。减压蒸馏残余物，得到油状(2-氯苯基)-乙酰氯(41.24g)。
b.p.117-118℃(12mmHg)。
制备例14-2)在室温下，向N-[(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)丙基]-L-Leu-OEt(350mg)的CH2Cl2(5ml)溶液中加入(2-氯苯基)乙酰氯(210mg)和Et3N(112mg)。在相同温度下搅拌20分钟后，减压浓缩该混合物。将残余物溶于EtOAc(15ml)中，依次用1N aq.HCl、饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤。该溶液用MgSO4干燥，真空蒸发。残余物用SiO2柱色谱法纯化(用EtOAc/正己烷＝1/3洗脱)，得到N-[(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)丙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-OEt(255mg)，为无定型粉末。
制备例15向N-环己基甘氨酸(0.763g)的1N aq.NaOH(4.86ml)和二噁烷(2ml)溶液中加入Boc2O(1.94g)的二噁烷(5ml)溶液。将该混合物在室温下搅拌过夜。然后向该反应混合物中加入3-(N，N-二甲基氨基)丙胺(0.46g)。搅拌20分钟后，减压浓缩该混合物。残余物溶于AcOEt(50ml)中，并用3.6％aq.HCl、水和盐水依次洗涤。有机层用MgSO4干燥，真空浓缩，得到N-叔丁氧羰基-N-环己基甘氨酸(663.8mg)，为白色晶体。
Rf0.33(10％MeOH的CHCl3溶液)mp101-103℃制备例16-1)向氢化钠(0.4g)的DMF(8ml)悬浮液中滴加入3-吡啶甲醇(1.09g)的DMF(5ml)溶液，并将该混合物在室温下搅拌30分钟。然后，向该混合物中加入溴代乙酸叔丁酯(1.62ml)的DMF(5ml)溶液。搅拌1小时后，将反应混合物减压浓缩。将残余物溶于AcOEt(20ml)中，用盐水洗涤，用MgSO4干燥，减压浓缩。残余物用SiO2柱色谱法纯化(用1％MeOH的CHCl3溶液洗脱)，得到(3-吡啶基甲氧基)乙酸叔丁酯(435mg)，为油状物。
Rf0.50(10％MeOH的CHCl3溶液)制备例16-2)在0℃下，将三氟乙酸(5ml)加入到(3-吡啶基甲氧基)乙酸叔丁酯(420mg)中。在相同温度下搅拌40分钟并在室温下搅拌30分钟后，减压浓缩反应混合物。将残余物溶于4N aq.HCl/AcOEt(4ml)中，并经减压浓缩，得到(3-吡啶基甲氧基)乙酸盐酸盐(344mg)，为无定型粉末。
Rf0.25(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶2∶1，v/v)制备例17-1)将异氰酸(2-氯苯基)酯(234mg)加入到N-[2-(叔丁氧羰基氨基)乙基]-L-Leu-OEt(0.46g)的AcOEt(10ml)溶液中。在室温下搅拌10分钟后，该溶液依次用3.5％aq.HCl、饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤。用MgSO4干燥后，将该溶液减压蒸发，得到粘稠油状的N-[2-(叔丁氧羰基氨基)-乙基]-N-(2-氯苯基氨基羰基)-L-Leu-OEt(599mg)。
Rf0.66(CHCl3/AcOEt＝5/1，v/v)制备例(Process)17-2)按照基本上与制备例5所述相同的方法，制得N-[2-(叔丁氧羰基氨基)乙基]-N-(2-氯苯基氨基羰基)-L-Leu-OH(307mg)。
Rf0.54(苯∶AcOEt∶AcOH＝20∶20∶1，v/v)mp113-114℃制备例18按照基本上与实施例1相同的方法，由N-叔丁氧羰基-D-Ala-OH(3g)和N，O-二甲基羟胺盐酸盐(1.86g)制得N-叔丁氧羰基-D-Ala-N，O-二甲基羟基酰胺(3.43g)。
Rf0.29(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)mp149℃制备例19-1)按照基本上与制备例18相同的方法，制得N-叔丁氧羰基-L-Ala-N，O-二甲基羟基酰胺(3.41g)。
Rf0.29(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)mp149℃制备例19-2)按照基本上与制备例11相同的方法，制得N-[(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)丙基]-L-Leu-OEt(366mg)。
Rf0.53(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)制备例20按照基本上与制备例5相同的方法，制得N-[(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)丙基]-L-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-OH(323mg)。
Rf0.42(10％MeOH的CHCl3溶液)制备例21按照基本上与制备例3相同的方法，由环己酮(0.5g)和甘氨酸(0.654g)制得N-环己基甘氨酸(0.76g)。
Rf0.53(n-BuOH∶AcOH∶H2O＝5∶2∶3，v/v)mp189-190℃制备例22按照基本上与制备例18相同的方法，制得N-叔丁氧羰基-N-环己基甘氨酸-N，O-二甲基羟基酰胺(232mg)。
Rf0.38(AcOEt∶正己烷＝1∶1，v/v)mp67-68℃制备例23按照基本上与制备例18相同的方法，制得N-甲基-N-甲氧基-2-(3-吡啶基甲氧基)乙酰胺(206mg)。
Rf0.32(10％MeOH的CHCl3溶液)制备例24-1)按照基本上与实施例1相同的方法，由Boc-L-Leu-OH(0.82g)和D-1-Nal-D-Val-OMe·HCl(1.19g)制得Boc-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(1.44g)。
Rf0.51(AcOEt∶正己烷＝1∶1，v/v)mp173～174℃制备例24-2)按照基本上与实施例2相同的方法，制得L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe·HCl(1.46g)。
Rf0.45(10％MeOH的CHCl3溶液)制备例25按照基本上与制备例11相同的方法，由N-甲基-N-甲氧基-2-(3-吡啶基甲氧基)乙酰胺(176mg)和L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe·HCl(200mg)制得N-[2-(3-吡啶基甲氧基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(259.5m8)。
Rf0.49(10％MeOH的CHCl3溶液)制备例26-1)按照与制备例1中前面部分基本上相同的方法，制得Boc-D-1-Nal-D-Cys(Me)-OMe(92mg)。
Rf0.63(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝16∶1∶1，v/v)mp127-129℃制备例26-2)按照与实施例2中较后部分基本上相同的方法，制得D-1-Nal-D-Cys(Me)-OMe·HCl(70mg)。
Rf0.16(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝16∶1∶1，v/v)mp211-213℃(分解)制备例27按照基本上与制备例1相同的方法，制得HCl·(4S)-4-[(H-D-1-Nal)氨基)-6-甲基庚酸乙酯(0.35g)。
Rf0.59(10％MeOH的CHCl3溶液)制备例28按照基本上与制备例1相同的方法，制得HCl·H-D-Trp(Me)-D-Val-OMe(3.54g)。
Rf0.48(10％ MeOH的CHCl3溶液)制备例29按照基本上与制备例1相同的方法，制得HCl·H-β-(3-苯并[b]噻吩基)-D-Ala-D-Val-OMe(3.65g)。
Rf0.50(10 MeOH的CHCl3溶液)制备例30按照基本上与制备例25相同的方法，制得N-[2-(N-叔丁氧羰基-N-环己基氨基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(71.7mg)。
Rf0.30(AcOEt∶正己烷＝1∶1，v/v)实施例1在0℃下，向N-[2-[N-(叔丁氧羰基)-N-甲基氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-OH(0.74g)、HCl·H-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.61g)和HOBt(0.27g)的DMF(13ml)溶液中加入WSCD(0.31g)。在室温下搅拌1小时后，该混合物用EtOAc(70ml)稀释，并用1N aq.HCl(70ml)、水(70ml)、饱和碳酸氢钠溶液(70ml)、水(70ml)及盐水(70ml)依次洗涤。有机层用无水MgSO4干燥，真空浓缩，得到N-[2-[N-(叔丁氧羰基)-N-甲基氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(1.18g)，为无定型粉末。
Rf0.75(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例2将N-[2-[N-(叔丁氧羰基)-N-甲基氨基)乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(1.17g)的4N aq.HCl-EtOAc(30ml)溶液在室温下搅拌30分钟。将该混合物真空浓缩，残余物用Et2O研制，得到N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-(N-甲基氨基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe·HCl(0.94g)，为粉末。
Rf0.38(10％MeOH的CHCl3溶液)。
实施例3按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得N-(2-氯苯基乙酰基)-N-[2-(N-甲基氨基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.18g)。
Rf0.27(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)mp125-129℃实施例4按照基本上与实施例1相同的方法，制得N-[2-[N-(叔丁氧羰基)氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(4.31g)。
Rf0.73(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例5按照基本上与实施例2相同的方法，制得N-(2-氨基乙基)-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe·HCl(3.19g)。
Rf0.35(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例6按照基本上与实施例12-1)相同的方法，制得N-[2-(N-苄基氨基)乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.68g)。
Rf0.54(10％MeOH的CHCl3溶液)
实施例7按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得N-[2-(N-苄基氨基)乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.15g)。
Rf0.35(10％MeOH的CHCl3溶液)mp125-132℃实施例8按照基本上与实施例12-1)相同的方法，由N-(2-氨基乙基)-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe·HCl(1.00g)制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-(N，N-二苄基氨基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.24g)。
Rf0.83(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例9按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-(N，N-二苄基氨基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.19g)。
Rf0.31(5％MeOH的CHCl3溶液)mp114-122℃实施例10按照基本上与实施例12-1)相同的方法，由N-[2-(N-苄基氨基)乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.20g)制得N-[2-(N-苄基-N-正丁基氨基)乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.18g)。
Rf0.94(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例11按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得N-[2-(N-苄基-N-正丁基氨基)乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.13g)。
Rf0.50(10％MeOH的CHCl3溶液)mp103-109℃实施例12-1)在室温下，向N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-(N-甲基氨基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe·HCl(100mg)和苯甲醛(19mg)的MeOH(2ml)溶液中加入NaBH3CN(18mg)。在相同温度下搅拌2小时后，真空浓缩混合物。残余物溶于EtOAc(20ml)中，并依次用饱和碳酸氢钠溶液(20ml×2)及盐水(20ml)洗涤。有机层用无水MgSO4干燥，并真空浓缩。残余物用硅胶薄层色谱法纯化(5％MeOH的CHCl3溶液作洗脱剂)，得到油状N-[2-(N-苄基-N-甲基氨基)乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(83mg)。
Rf0.76(10％MeOH的CHCl3溶液)按照基本上与实施例12-1)相同的方法，制得下列化合物。
实施例12-2)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-(N，N-二甲基氨基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.19g)。
Rf0.65(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-3)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-甲基-N-(1-萘基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.16g)。
Rf0.80(5％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-4)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-甲基-N-(2-萘基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.14g)。
Rf0.80(5％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-5)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-甲基-N-(2-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(90mg)。
Rf0.44(5％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-6)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-甲基-N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.18g)。
Rf0.40(5％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-7)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-甲基-N-(4-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.12g)。
Rf0.40(5％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-8)N-[2-[N-(2-氯苄基)-N-甲基氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.22g)。
Rf0.74(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-9)N-[2-[N-(3-氯苄基)-N-甲基氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.22g)。
Rf0.74(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-10)N-[2-[N-(4-氯苄基)-N-甲基氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.21g)。
Rf0.74(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-11)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(2-甲基苄基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.18g)。
Rf0.74(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-12)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-甲基苄基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.16g)。
Rf0.74(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-13)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(4-甲基苄基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.19g)。
Rf0.74(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-14)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(2-甲氧基苄基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.17g)。
Rf0.74(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-15)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-甲氧基苄基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.13g)。
Rf0.74(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例12-16)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(4-甲氧基苄基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.12g)。
Rf0.74(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例13-1)在室温下，向N-[2-(N-苄基-N-甲基氨基)乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(73mg)的EtOH(2ml)溶液中加入1N NaOH水溶液(1ml)。在相同温度下搅拌30分钟后，该混合物用1N aq.HCl(1ml)中和，并真空浓缩。将残余物溶于EtOAc(20ml)中，并用盐水(20ml)洗涤。有机层用无水MgSO4干燥，并真空浓缩。残余物用Et2O研制，得到N-[2-(N-苄基-N-甲基氨基)乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(65mg)。
Rf0.30(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)mp125-132℃。
按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得了下列化合物。
实施例13-2)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-(N，N-二甲基氨基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(135mg)。
Rf0.19(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝16∶1∶1，v/v)mp85-105℃实施例13-3)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-甲基-N-(1-萘基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.12g)。
Rf0.40(10％MeOH的CHCl3溶液)mp112-120℃实施例13-4)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-甲基-N-(2-萘基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.11g)。
Rf0.40(10％MeOH的CHCl3溶液)mp118-124℃实施例13-5)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-甲基-N-(2-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(60mg)。
Rf0.50(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)mp84-94℃实施例13-6)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-甲基-N-(3-吡啶基甲基氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.13g)。
Rf0.48(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)mp88-96℃实施例13-7)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-甲基-N-(4-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(95mg)。
Rf0.48(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)mp99-103℃实施例13-8)N-[2-[N-(2-氯苄基)-N-甲基氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.18g)。
Rf0.38(10％MeOH的CHCl3溶液)mp75-80℃实施例13-9)N-[2-[N-(3-氯苄基)-N-甲基氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.17g)。
Rf0.38(10％MeOH的CHCl3溶液)mp73-78℃实施例13-10)N-[2-[N-(4-氯苄基)-N-甲基氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.15g)。
Rf0.38(10％MeOH的CHCl3溶液)mp60-65℃实施例13-11)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(2-甲基苄基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.14g)。
Rf0.38(10％MeOH的CHCl3溶液)mp116-127℃实施例13-12)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-甲基苄基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.12g)。
Rf0.38(10％MeOH的CHCl3溶液)mp113-119℃实施例13-13)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(4-甲基苄基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.15g)。
Rf0.38(10％MeOH的CHCl3溶液)mp118-121℃实施例13-14)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(2-甲氧基苄基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.14g)。
Rf0.38(10％MeOH的CHCl3溶液)mp114-118℃实施例13-15)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-甲氧基苄基)-N-甲基]氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.11g)。
Rf0.38(10％MeOH的CHCl3溶液)mp98-105℃实施例13-16)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(4-甲氧基苄基)-N-甲基氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.10g)。
Rf0.38(10％MeOH的CHCl3溶液)mp110-116℃实施例14按照基本上与实施例1相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[3-[N-(叔丁氧羰基氨基]丙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.90g)。
Rf0.67(10％MeOH的CHCl3溶液)
实施例15按照基本上与实施例2相同的方法，制得N-(3-氨基丙基)-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe·HCl(0.80g)。
Rf0.20(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例16将N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.10g)的4N aq.HCl·EtOAc(1ml)溶液在室温下搅拌5分钟。蒸发溶剂后，将残余物用Et2O研制，得到N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH·2HCl(0.10g)。
mp126-132℃按照基本上与实施例12-1)相同的方法，制得下列化合物。
实施例17-1)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.15g)。
Rf0.43(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例17-2)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(环己基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.16g)。
Rf0.56(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例17-3)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(正丁基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.11g)。
Rf0.40(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例17-4)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[3-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]丙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(0.14g)。
Rf0.49(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例17-5)N-[3-(N-苄基氨基)丙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(60mg)。
Rf0.56(10％MeOH的CHCl3溶液)。
按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得下列化合物。
实施例18-1)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(0.12g)。
Rf0.14(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例18-2)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(环己基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(89mg)。
Rf0.27(10％MeOH的CHCl3溶液)mp123-128℃实施例18-3)N-[2-[N-(正丁基)氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(67mg)。
Rf0.27(10％MeOH的CHCl3溶液)mp100-113℃实施例18-4)N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[3-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]丙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(95mg)。
Rf0.47(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)mp117-125℃实施例18-5)N-[3-(N-苄基氨基)丙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(40.5mg)。
Rf0.30(10％MeOH的CHCl3溶液)mp111-120℃实施例19将N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(140mg)和1N NaOH水溶液(0.196ml)溶于水(15ml)中。该水溶液经冷冻干燥，得到N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-ONa(138mg)，为粉末。
实施例20-1)按照基本上与实施例1相同的方法，制得N-[2-(叔丁氧羰基氨基)乙基]-N-(2-氯苯基氨基羰基)-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(366mg)。
Rf0.40(AcOEt∶正己烷＝1∶1，v/v)
实施例20-2)在0℃下，将N-[2-(叔丁氧羰基氨基)乙基]-N-(2-氯苯基氨基羰基)-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(431mg)溶于CH2Cl2(5ml)和三氟乙酸(5ml)中。在相同温度下搅拌30分钟后，将该溶液减压浓缩。将残余物溶于AcOEt(20ml)中，并用饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，用MgSO4干燥，真空蒸发，制得N-(2-氨基乙基)-N-(2-氯苯基氨基羰基)-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(397mg)，为无定形粉末。
Rf0.19(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例20-3)按照基本上与实施例6相同的方法，制得N-(2-氯苯基氨基羰基)-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(178mg)。
Rf0.38(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例20-4)按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得N-(2-氯苯基氨基羰基)-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(113mg)。
Rf0.18(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝16∶1∶1，v/v)实施例21-1)按照基本上与制备例11相同的方法，由N-叔丁氧基羰基-D-Ala-N，O-二甲基羟基酰胺(137mg)和N-[(2-氨基乙基)-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe·HCl(200mg)制得N-[2-[N-[(R)-2-(N-叔丁氧羰基氨基)丙基]氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(130.5mg)。
Rf0.53(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例21-2)按照基本上与实施例29-2)和13-1)相同的方法，制得N-[2-[N-[(R)-2-氨基丙基]氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(77.3mg)。
Rf0.20(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例22-1)按照基本上与制备例11相同的方法，制得N-[2-[N-[(S)-2-(N-叔丁氧羰基氨基)丙基]氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(109mg)。
Rf0.47(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例22-2)按照基本上与实施例29-2)和13-1)相同的方法，制得N-[2-[N-[(S)-2-氨基丙基]氨基]乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(57.2mg)。
Rf0.24(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例23-1)按照基本上与实施例1相同的方法，制得N-[(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)丙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(264mg)。
Rf0.42(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)实施例23-2)按照基本上与实施例2相同的方法，制得N-[(S)-2-氨基丙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe·HCl(189mg)。
Rf0.36(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例23-3)按照基本上与实施例6相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[(S)-2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]丙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(76mg)。
Rf0.49(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例23-4)按照基本上与实施例13-1)和16相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[(S)-2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]丙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH·2HCl(49mg)。
Rf0.53(CHCl3∶MeOH∶NH4OH＝65∶25∶4，v/v)实施例24-1)按照基本上与制备例4相同的方法，由(2-氯苯基)乙酸(18.8mg)和N-[2-(N-叔丁氧羰基-N-环己基氨基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(66.7mg)制得N-[2-(N-叔丁氧羰基-N-环己基氨基)乙基]-N-[(2-氯苯基]乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(62.6mg)。
Rf0.52(AcOEt∶正己烷＝1∶1，v/v)实施例24-2)按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得N-[2-(N-叔丁氧羰基-N-环己基氨基)乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(45mg)。
Rf0.24(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例24-3)按照基本上与实施例2相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-(N-环己基氨基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH·HCl(28.1mg)。
Rf0.80(CHCl3∶MeOH∶NH4OH＝65∶25∶4，v/v)实施例25-1)按照基本上与制备例14-2)相同的方法，由N-(2-氨基乙基)-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-ONe·HCl(150mg)和烟酰氯盐酸盐(44mg)制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-烟酰基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(140.6mg)。
Rf0.61(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例25-2)按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-烟酰基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(61.9mg)。
Rf0.53(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)实施例26-1)按照基本上与制备例14-2)相同的方法，由(2-氯苯基)乙酰氯(87mg)和N-[2-(3-吡啶基甲氧基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(241mg)制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-(3-吡啶基甲氧基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(155.6mg)。
Rf0.57(10％MeOH的CHCl3溶液)
实施例26-2)按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-(3-吡啶基甲氧基)乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(119mg)。
Rf0.65(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)实施例27-1)按照基本上与实施例6相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[3-(环己基氨基)丙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OMe(28.6mg)。
Rf0.35(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例27-2)按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[3-(环己基氨基)丙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Val-OH(21mg)。
Rf0.28(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例28-1)按照基本上与实施例4相同的方法，制得N-[2-(N-叔丁氧羰基氨基)乙基]-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Cys(Me)-OMe(173mg)。
Rf0.36(AcOEt∶正己烷＝1∶1，v/v)实施例28-2)按照基本上与实施例2相同的方法，制得N-(2-氨基乙基)-N-[(2-氯苯基)乙酰基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Cys(Me)-OMe·HCl(156mg)。
Rf0.21(10％MeOH的CHCl3溶液)
实施例28-3)按照基本上与实施例12-1)相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Cys(Me)-OMe(119.1mg)。
Rf0.45(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例28-4)按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal-D-Cys(Me)-OH(43.9mg)。
Rf0.56(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)实施例29-1)按照基本上与实施例1相同的方法，制得(4S)-4-[N-[N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(叔丁氧羰基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal]氨基]-6-甲基庚酸乙酯(0.28g)。
Rf0.53(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)实施例29-2)按照基本上与实施例2相同的方法，只是用TFA代替盐酸，制得(4S)-4-[N-[N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-(2-氨基乙基)-L-Leu-D-1-Nal]氨基]-6-甲基庚酸乙酯盐酸盐(145mg)。
Rf0.24(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例29-4)按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得(4S)-4-[N-[N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal]氨基]-6-甲基庚酸(55mg)。
Rf0.42(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)mp85-88℃实施例29-3)按照基本上与实施例12-1)相同的方法，制得(4S)-4-[N-[N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-1-Nal]氨基]-6-甲基庚酸乙酯(0.12g)。
Rf0.52(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例30-1)按照基本上与实施例1相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(叔丁氧羰基)氨基]乙基]-L-Leu-D-Trp(Me)-D-Val-OMe(0.20g)。
Rf0.46(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)实施例30-2)按照基本上与实施例29-2)相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-(2-氨基乙基)-L-Leu-D-Trp(Me)-D-Val-OMe盐酸盐(1 35mg)。
Rf0.21(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例30-3)按照与实施例12-1)相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-Trp(Me)-D-Val-OMe(0.12g)。
Rf0.49(10％MeOH的CHCl3溶液)
实施例30-4)按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-D-Trp(Me)-D-Val-OH(80mg)。
Rf0.43(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)mp115-135℃实施例31-1)按照与实施例1基本上相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(叔丁氧羰基)氨基]乙基]-L-Leu-β-(3-苯并[b]噻吩基)-D-Ala-D-Val-OMe(0.32g)。
Rf0.48(EtOAc∶己烷＝1∶1，v/v)实施例31-2)按照基本上与实施例29-2)相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-(2-氨基乙基)-L-Leu-β-(3-苯并[b]噻吩基)-D-Ala-D-Val-OMe(156mg)。
Rf0.26(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例31-3)按照基本上与实施例12-1)相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-β-(3-苯并[b]噻吩基)-D-Ala-D-Val-OMe(0.15g)。
Rf0.43(10％MeOH的CHCl3溶液)实施例31-4)按照基本上与实施例13-1)相同的方法，制得N-[(2-氯苯基)乙酰基]-N-[2-[N-(3-吡啶基甲基)氨基]乙基]-L-Leu-β-(3-苯并[b]噻吩基)-D-Ala-D-Val-OH(103mg)。
Rf0.46(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1，v/v)mp122-140℃
权利要求
1.下式化合物或其可药用盐 其中R4为酰基；R5为低级烷基；R6为任选取代的芳(低级)烷基或任选取代的杂环基(低级)烷基；R7为低级烷基或低级烷硫基(低级)烷基；R8为羧基或被保护的羧基；A为低级亚烷基；Z为下式基团 或-O-R3其中R1为氢、低级烷基、常见的氨基保护基团或任选取代的芳(低级)烷基；R2为氢、低级烷基、任选取代的芳(低级)烷基、任选取代的杂环基(低级)烷基、任选取代的环(低级)烷基(低级)烷基、常见的氨基保护基、氨基(或被保护的氨基)(低级)烷基、任选取代的杂环基羰基或环(低级)烷基；和R3为任选取代的杂环基(低级)烷基；和m为整数0至2。
2.权利要求1所述的化合物，其中R1为氢、低级烷基、低级烷氧羰基、任选被羟基、被保护的羟基、卤素、低级烷基和低级烷氧基取代的C6-C10芳(低级)烷基、或萘基(低级)烷基，R2为氢、低级烷基、任选被羟基、被保护的羟基、卤素、低级烷基和低级烷氧基取代的C6-C10芳(低级)烷基、萘基(低级)烷基、任选被羟基、被保护的羟基、卤素、低级烷基、低级烷氧基和亚氨基保护基团取代的杂环基(低级)烷基或杂环基羰基，所述的每个杂环基为含有1-4个氮原子的不饱和5或6元杂单环基；任选被羟基、被保护的羟基、卤素、低级烷基和低级烷氧基取代的环(低级)烷基(低级)烷基；环(低级)烷基或低级烷氧羰基，R3为任选被羟基、被保护的羟基、卤素、低级烷基、低级烷氧基和亚氨基保护基所取代的杂环基-(低级)烷基，所述杂环基为含有1-4个氮原子的不饱和的5或6元杂单环基，R4为C5-C10芳(低级)链烷酰基或C6-C10芳基氨基甲酰基，所述每一基团任选被羟基、被保护的羟基、卤素、低级烷基和低级烷氧基所取代，R5为低级烷基，R6为任选被羟基、被保护的羟基、卤素、低级烷基和低级烷氧基所取代的C6-C10芳(低级)烷基、萘基(低级)烷基、或任选被羟基、被保护的羟基、卤素、低级烷基和低级烷氧基所取代的杂环基(低级)烷基，所述杂环基为含有1-4个氮原子的不饱和5或6元杂单环基、含有1-5个氮原子的不饱和的稠合的7-12元杂环基或含有1-3个硫原子的不饱和的稠合的7-12元杂环基，R7为低级烷基或低级烷硫基(低级)烷基，R8为羧基或酯化的羧基，A为低级亚烷基，和m为整数0-2。
3.权利要求2所述的化合物，其中R1为氢、低级烷基、低级烷氧羰基、任选被卤素、低级烷基和低级烷氧基取代的苯基(低级)烷基、或萘基(低级)烷基，R2为氢；低级烷基；任选被卤素、低级烷基和低级烷氧基取代的苯基(低级)烷基，萘基(低级)烷基；杂环基(低级)烷基或杂环基羰基，每一所述杂环基可为吡咯基、吡咯啉基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、吡啶基N-氧化物、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三唑基、四唑基或二氢三嗪基；环(低级)烷基(低级)烷基；环(低级)烷基或低级烷氧羰基，R3为杂环基-(低级)烷基，所述杂环基可以为吡咯基、吡咯啉基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、吡啶基N-氧化物、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三唑基、四唑基或二氢三嗪基，R4为卤代苯基(低级)链烷酰基或卤代苯基氨基甲酰基，R5为低级烷基，R6为萘基(低级)烷基，或任选被低级烷基取代的杂环基(低级)烷基，所述杂环基可以为吡咯基、吡咯啉基、咪唑基、吡唑基、吡啶基及其N-氧化物、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三唑基、四唑基、二氢三嗪基、吲哚基、异吲哚基、中氮茚基、苯并咪唑基、喹啉基、异喹啉基、吲唑基、苯并三唑基、四唑并吡啶基、四唑并哒嗪基、二氢三唑并哒嗪基或苯并噻吩基，R7为低级烷基或低级烷硫基(低级)烷基，R8为羧基或低级烷氧羰基，A为低级亚烷基，和m为整数0-2。
4.权利要求3所述的化合物，其中A为下式基团 其中R1为氢、低级烷基或苯基(低级)烷基，R2为氢、低级烷基、苯基(低级)烷基、卤代苯基(低级)烷基、甲基苯基(低级)烷基、甲氧基苯基(低级)烷基、萘基(低级)烷基、吡啶基(低级)烷基、环(低级)烷基(低级)烷基、吡啶基羰基或环(低级)烷基，R4为卤代苯基(低级)链烷酰基或卤代苯基氨基甲酰基，R5为低级烷基，R6为萘基(低级)烷基，低级烷基吲哚基(低级)烷基或苯并噻吩基(低级)烷基，R7为低级烷基或低级烷硫基(低级)烷基，R8为羧基，A为低级亚烷基，和m为整数0-2。
5.权利要求4所述的化合物，其中R1为氢、C1-C4烷基、C1-C4烷氧羰基或苯基(C1-C4)烷基，R2为氢、C1-C4烷基、苯基(C1-C4)烷基、卤代苯基(C1-C4)烷基、甲基苯基(C1-C4)烷基、甲氧基苯基(C1-C4)烷基、萘基(C1-C4)烷基、吡啶基(C1-C4)烷基、环(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、吡啶基羰基、环(C1-C4)烷基或C1-C4烷氧羰基，R4为卤代苯基(C1-C4)链烷酰基或卤代苯基氨基甲酰基，R5为C1-C4烷基，R6为萘基(C1-C4)烷基、C1-C4烷基吲哚基(C1-C4)烷基或苯并噻吩基(C1-C4)烷基，R7为C1-C4烷基或C1-C4烷硫基(C1-C4)烷基，A为C1-C4亚烷基，和m为整数0-2。
6.用于制备权利要求1所述化合物或其盐的方法，该方法包含(a)使下式化合物或其在羧基上的反应活性衍生物或其盐 与下式化合物或其在氨基上的反应活性衍生物或其盐反应， 得到下式化合物或其盐；或 (b)使下式化合物或其盐进行Ra2氨基保护基的除去反应， 得到下式化合物或其盐；或 (c)在还原剂的存在下，使下式化合物或其在氨基上的反应活性衍生物或其盐 与下式化合物或其盐反应，R9-CO-X得到下式化合物或其盐；或 (d)使下式化合物或其盐进行Ra8中的羧基保护基的除去反应， 得到下式化合物或其盐； 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、m和n各自如上所定义，Ra2为氨基保护基，Ra8为被保护的羧基，R9为氢、C1-C5烷基、任选被取代的芳(C1-C5)烷基、任选被取代的杂环基(C1-C5)烷基、或任选取代的环(低级)烷基(C1-C5)烷基、氨基(或被保护的氨基)(C1-C5)烷基，X为离去基团，和Y为亚甲基或羰基。
7.一种药物组合物，该药物组合物包含权利要求1的化合物或其可药用盐以及可药用载体或赋形剂。
8.用于制备药物组合物的方法，该方法包含使权利要求1的化合物或其可药用盐与可药用载体或赋形剂掺混。
9.用作药物的权利要求1的化合物或其可药用盐。
10.用作内皮素拮抗剂的权利要求1的化合物或其可药用盐。
11.权利要求1的化合物或其可药用盐用于制备治疗和/或预防内皮素介导的疾病的药物的用途。
12.一种用于治疗和/或预防内皮素介导的疾病的方法，该方法包含对人或动物施用权利要求1的化合物或其可药用盐。
全文摘要
用作内皮素拮抗剂的式(1)化合物或其可药用盐，其中R
文档编号C07K5/083GK1129000SQ94193046
公开日1996年8月14日 申请日期1994年6月28日 优先权日1993年6月28日
发明者逸见惠次, 闺正博, 深见直喜, 茅切奈津子, 田中洋和 申请人:藤泽药品工业株式会社
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