防止饲料霉变和促进动物采食的饲料添加剂、饲料及应用的制作方法
2021-01-06 19:01:30|420|起点商标网
本发明属于饲料添加剂领域,具体涉及防止饲料霉变和促进动物采食的饲料添加剂、饲料及应用。
背景技术:
:饲料在加工、保存和使用的过程中容易受到细菌和霉菌等一系列微生物的浸染,因此防腐剂在饲料行业发挥重要的作用,阻止和延缓饲料的霉变。但随着人们生活质量的上升,越来越开始注重生活品质,化学合成剂添加到饲料中不再是高效生产的代名词。科学家们对化学合成物的深入使用和研究,也渐渐的发现化学合成物有诱癌、致畸和易引起食物中毒等副作用。随着人们越发地开始倾向于购买绿色生态食品,对防腐剂和抗氧化剂的要求也越来越高,安全健康的天然物逐渐的进入人们视野。我国国土面积大、物种丰富,开发功能性的天然防霉防腐或抗氧化剂有很大的优势。天然物具有安全无毒、抗菌性强和作用范围广等优点,而且还具有一定的营养价值,是今后的防腐剂的开发方向。现有技术中,常见的天然抗氧化剂有维生素e、维生素c和茶多酚等。大量的研究发现植物中的提取的多酚类、黄酮类化合物和植酸等也具有良好的抗氧化能力。因此越来越多研究开始寻找一种价格更低更易获取的天然抗氧化物。现目前大量研究发现葡萄籽提取物(主要成分花青素)、迷迭香提取物(多酚)、番茄提取物(番茄红素)等植物提取物抗氧化成分和性价比不低于维生素e。但是植物提取物虽然成分更加单一、效用更高,但是价格相对于植物来讲做工复杂,直接购买价格比较昂贵。此外,植物提取物自身容易氧化失效,因此对保存、以及饲料制备条件更为苛刻。总之,提取物昂贵的价格,容易氧化失效的特性,是制约其在饲料领域应用的重要因素。因此,提供一种饲料添加剂,能克服上述问题,成为了本领域技术人员亟待解决的问题。技术实现要素:本发明的目的之一在于:提供一种防止饲料霉变和促进动物采食的饲料添加剂,不仅具有良好的防止饲料霉变的作用,且成本低廉,制备简单,并具有促进动物采食的作用。本发明的目的之二在于,提供包含该饲料添加剂的饲料。本发明的目的之三在于,提供该饲料添加剂在改善猪肉质量中的应用。为实现上述目的,本发明采用的技术方案如下:本发明所述的一种防止饲料霉变和促进动物采食的饲料添加剂,由天然香料的粉末制成,所述天然香料的粉末包括以下重量份的组分:桂皮粉10-30份,丁香粉10-30份,牛至叶粉10-20份,欧芹粉5-20份,鼠尾草粉1-10份,姜黄根粉1-10份。本发明的部分实施方案中,所述天然香料的粉末包括以下重量份的组分:桂皮粉20份,丁香粉20份,牛至叶15份,欧芹粉10份,鼠尾草粉5份,姜黄根粉5份。本发明的部分实施方案中,还包括四川胡椒粉1-10份,百里香粉5-20份,迷迭香粉5-20份。本发明的部分实施方案中,还包括四川椒粉5份,百里香粉10粉,迷迭香粉10份。本发明的一种防止饲料霉变和促进动物采食的饲料添加剂,由天然香料的粉末制成,所述天然香料的粉末为以下重量份的组分:桂皮粉20份,丁香粉20份,牛至叶15份,欧芹粉10份,鼠尾草粉5份,姜黄根粉5份,四川椒粉5份,百里香粉10粉,迷迭香粉10份。本发明创造性地直接采用天然香料的粉末作为饲料添加剂,而非提取物,效果确切,并且大幅降低了生产成本,制备方法简单。本发明的部分实施方案中,所述天然香料的粉末的粒径小于等于40目。本发明所述的饲料添加剂的饲料,所述饲料添加剂的用量为基础饲料质量的0.05-2%。本发明的部分实施方案中,所述饲料添加剂的用量为基础饲料质量的0.1-0.2%,优选为0.1%。本发明通过反复实验,意外地发现基础日粮中加入过量的本发明的香料组方会影响饲喂效果,这是由于该组方全是采用香料组成,过量反而会影响动物的采食量。虽然本发明实验表明天然香料的用量越大,抑菌效果越好;但同时考虑实际的生产储存要求、生产成本、以及添加天然香料后饲料的适口性,天然香料的用量宜为0.05-2%,优选为0.1-0.2%。本发明所述的饲料添加剂在改善猪肉质量中的应用。本发明意外地发现,采用添加了本发明饲料添加剂的饲料喂养生长猪,不仅其生长性能得到显著提高,猪肉质量也得到了改善。本发明所述的饲料添加剂的制备方法,包括以下步骤:将单味的天然香料粉过40目筛后,再混合均匀,密封保存。天然香料粉混合前后密封保存,其目的一是防止香味损失,二是防止抗氧化性能损失。天然的香料粉可由市场上购买所得,也可直接采用天然香料粉碎。与现有技术相比,本发明具有以下有益效果:本发明设计科学,构思巧妙,创造性地采用天然香料粉而非提取物制备饲料添加剂,不仅能防止饲料霉变,促进动物采食,并且大幅降低了生产成本,可替代现有饲料中添加的人工防腐剂和抗氧化剂。此外,采用本发明的饲料添加剂还具有预料不到的改善猪肉质量的作用。本发明的天然香料组方不含任何抗生素和化学药品,无药品残留,可长期使用且无耐药性、安全高效。具体实施方式以下通过具体实施例对本发明的
发明内容做进一步的阐释,但不应理解为本发明的范围仅限于以下的实例,根据本发明的发明思路和全文内容,可以将以下实例中的各个技术特征做适当的组合/替换/调整/修改等,这对于本领域技术人员而言是显而易见的,仍属于本发明保护的范畴。本发明实施例中所述的份除另有说明外,均指质量份;本发明实施例中的天然香料粉均为过40目筛后所得。实施例1本实施例公开了对不同的香料的氧自由基吸收能力值的测定,具体为:采用氧自由基吸收能力法(orac),使用fluorescein,fl作为荧光探针,反应体系由fl、aaph、磷酸钾缓冲溶液及抗氧化物构成,静置一段时间后,用紫外、荧光及lc/ms方法同时检测分析反应混合物,记录荧光值。抗氧化剂作用下的荧光衰退曲线下面积与荧光自然衰退曲线下面积的差作为衡量抗氧化剂的抗氧化能力指标,结果以抗氧化物质trolox作为标准进行表达。通过这种方法对21种常见的香味料总抗氧化能力进行评价研究。检测样品主要有:辣椒粉、桂皮粉、丁香粉、茴香粉、咖喱粉、大蒜粉、姜黄粉、芥末粉、豆蔻粉、洋葱粉、牛至粉、欧芹粉、黑胡椒粉、胡椒粉、白胡椒粉、迷迭香粉、鼠尾草粉、四川胡椒粉、百里香粉、香草豆粉。以上样品均从市场上购买。检测试剂:荧光物质sodiumfluorescein:sigma公司;自由基产生剂aaph:sigma公司;抗氧化标准物质trolox:sigma公司;磷酸氢二钾、磷酸二氢钠均为分析纯:均购于北京试剂公司。使用仪器:synergyh4多功能荧光分析仪:德国bio-tek公司;96微孔板;分析用天平,移液枪等。检测方法参照dávalos,a.,gomez-cordoves,c.,andbartolomé,b.extendingapplicabilityoftheoxygenradicalabsorbancecapacity(orac-fluorescein)assay.j.agric.foodchem.,2004,52:48-54.主要的工艺流程:香料粉-组织匀浆机打碎-离心-清液-方法-取清液-检测。主要流程:称取每种检测样品8g,称取3份,放置烧杯中,加入固液比为1:20的蒸馏水。放入组织匀浆机5min后,将所得到的的混合物放入离心机中离心,离心3min(转速4500r/min)弃沉淀,加上试剂反应,取上清液经紫外可见分光光度计检测(注意:样品尽可能全部溶解,否则得到的数据不可信)。具体操作步骤为:荧光素钠盐、aaph、trolox均用75mmol/l磷酸盐缓冲液溶解并稀释至适当浓度,orac反应在75mmol/l磷酸盐缓冲液(ph7.2)体系中进行。在96孔的黑色荧光酶标板各微孔中分别加入不同浓度的待测样品溶液25μl,用自动加样器向各微孔中添加终浓度为8.61×10-5mmol/l的荧光物质fl溶液150μl,中速振摇2min,在37℃下孵育10min后,用自动加样器加入浓度为153mmol/l的aaph溶液25μl并迅速启动反应,以激发波长(485±20)nm,发射波长(530±20)nm进行连续测定荧光强度,整个体系保持37℃,每2min测定一次荧光强度,每次测定前中速震动孔板10s,测定时间设定在荧光衰减呈基线后为止。试验所得的各微孔不同时间点的绝对荧光强度数据与其初始时间的荧光强度相比,折算成相对荧光强度f,以相对荧光强度采用近似积分法计算荧光衰曲线下面积(auc),如下:auc=0.5×[2×(f0+f1+f2+…+fn)-f0-fn]×t其中fn为第n个测定点的相对荧光强度;t为相邻2个时间点的时间间隔,2min。测定结果以orac值表示,orac值的计算公式为:样品的orac值:=[(aucsample-auc+aaph)/(auctrolox-auc+aaph)](trolox浓度/样品浓度)得到的实验结果见表1。表1不同的香料的氧自由基吸收能力值(orac)根据以上数据表明,桂皮粉、丁香粉、牛至叶、欧芹粉、鼠尾草粉、姜黄粉、四川胡椒粉、百里香粉、迷迭香粉这9中原料的抗氧化性能最高。因此选用这个9种香辛料进行下一步抑菌试验。实施例2本实施例公开了对不同的香料抑菌能力的测定,具体为:1.对照组(生理盐水);2.处理组1:取桂皮粉10份,丁香粉30份,牛至叶10份,欧芹粉20份,鼠尾草粉1份,姜黄根粉10份,四川胡椒粉1份、百里香粉20份、迷迭香粉5份,混合均匀,配置成组方;3.处理组2:取桂皮粉30份、丁香粉10份、牛至叶20份、欧芹粉5份、鼠尾草粉10份、姜黄根粉1份、四川胡椒粉10份、百里香粉5份、迷迭香粉20份,混合均匀,配置成组方;4.处理组3:选取桂皮粉20份、丁香粉20份、牛至叶15份、欧芹粉10份、鼠尾草粉5份、姜黄根粉5份、四川胡椒粉5份、百里香粉10份、迷迭香粉10份,混合均匀,配置成组方;再将各处理组的样品分别用生理盐水分别稀释100倍,500倍,1000倍,得到不同浓度的样品。液体培养基:蛋白胨、nacl、琼脂等。使用菌液:用牙签挑取饲料中霉菌,加入无菌蒸馏水混匀后,分别移1ml到装有5ml培养液的试管中。检测仪器:电子称、烧杯、三角瓶、涂布器、纱布、报纸、无菌培养皿,酒精灯、移液枪、枪头、牛津杯、镊子、培养箱、试管、游标卡尺。检测方法:1)培养基制备:固体和液体培养基制备,分别装于三角瓶中保存。(2)灭菌:培养基、培养皿、牛津杯、试管、枪头等进行灭菌。(3)菌液制备:将液体培养基装入1支已经灭菌的试管中,将霉菌分别接种到2只试管中,恒温培养震荡培养16小时。(4)将牛肉膏蛋白胨固体培养基加热溶解后倒入12个平板,做好标记,每种物质、每个浓度设置两个平行,并在培养基或牛津杯上标记,再设立两个阴性对照组。(5)待凝固后分别将霉菌接种到平板中(用移液枪取0.2ml菌液置于相应平板中,进行涂布,此步操作在超净工作台中进行)。或者将1ml试验菌液和冷却至50摄氏度左右的培养基摇均匀,吸取6ml倒入底层平板上。待凝固再做好标记。(7)将接种好的平板静置5min,按照上述标记,用弯头镊子在每个培养皿中等距离放入4个牛津杯。再将样品滴入牛津杯中(此步操作在超净工作台中进行),放置5min后,置于37℃恒温培养箱中培养16-24小时。表2不同的香料组方对抑菌浓度的影响从抑菌试验上看,处理3的样品在稀释1000倍的时候还有较明显的抑菌圈,因此我们选用处理3的配方再进行下一步的动物试验。实施例3一种防止饲料霉变促进动物采食的饲料添加剂,由以下天然香料粉组成:桂皮粉20份、丁香粉20份、牛至叶15份、欧芹粉10份、鼠尾草粉5份、姜黄根粉5份、四川胡椒粉5份、百里香粉10份、迷迭香粉10份。其制备方法为:分别取上述天然香料粉过40目筛后,按配方量称重,混合均匀,封闭包装,即得。选取30kg左右的“杜×长×大“三元杂交生长猪120头,根据胎次一致、品种相同、体重相近、公母各半的原则,随机分成分为4个处理,每个处理组30头,每5头生长猪为一个重复。处理组1:饲喂表1所示的生长猪基础日粮;处理组2:饲喂表1所示的生长猪基础日粮+占日粮0.05%质量百分比的饲料添加剂,混合后饲喂。处理组3:饲喂表1所示的生长猪基础日粮+占日粮0.075%质量百分比的饲料添加剂,混合后饲喂。处理组4:饲喂表1所示的生长猪基础日粮+饲喂表1所示的生长猪基础日粮+占日粮0.1%质量百分比的饲料添加剂,混合后饲喂。饲喂30天后采血测定生长性能和血清抗氧化指标,结果如表4所示。其中,基础日粮的配方如表3所示,所述预混料为铁骑力士预混料,基础日粮是满足2012nrc或以上的标准,本添加剂都是有效果的,可从市场上购买。该基础日粮按表1的配方通过现有的饲料生产工艺生产为颗粒料。表3生长猪的基础日粮配方原料质量比%玉米(二级)61.70豆粕(粗蛋白含量46%)25.71麦麸8.594%市售生长猪预混料4.0合计100表4四个处理组的饲喂结果项目处理组1处理组2处理3处理4平均日增重,g476.65543.71*559.23*580.53**平均日采食,g1291.721304.90*1314.19*1335.22*料肉比2.712.4*2.35*2.3*丙二醛(mda),nmol/ml4.013.85*3.78*3.76*总超氧化物歧化酶(t-sod),u/ml36.7638.62*38.67*38.92*总抗(t-aoc),u/ml1.261.87*1.89*1.91*注:“*”表示通过t检验差异显著(p<0.05)从表4的结果可以看出,处理2,3,4生长性能均高于处理1,随着添加量的增加,生长性能逐渐提高,血清水平在添加剂量上不明显差异。因此本产品的添加量在0.05%-0.1%均有效果。实施例4一种防止饲料霉变促进动物采食的饲料添加剂,由以下天然香料粉组成:桂皮粉20份、丁香粉20份、牛至叶15份、欧芹粉10份、鼠尾草粉5份、姜黄根粉5份、四川胡椒粉5份、百里香粉10份、迷迭香粉10份。其制备方法为:分别取上述天然香料粉过40目筛后,按配方量称重,混合均匀,封闭包装,即得。选取54.9kg左右的“杜×长×大“三元杂交育肥猪200头,随机分成分为2个处理,每个处理100头。处理组1:饲喂表1所示的生长猪基础日粮;处理组2:饲喂表1所示的生长猪基础日粮+占日粮0.1%质量百分比的饲料添加剂,混合后饲喂。表5育肥猪的基础日粮配方原料质量比%玉米(二级)76.3豆粕(粗蛋白含量46%)14.4豆油1小麦麸4.34%市售育肥猪预混料4.0合计100表6两个组的饲喂结果项目处理1处理2平均日增重,g720.24856.97*平均日采食,g1980.652257.93*料肉比2.752.63*饲料价格,元/kg3.6003.650增重饲料成本,元/kg9.909.60比较,%10096.96表7两个组的肉质评价项目处理1处理2肌内脂肪含量,%3.213.45*大理石纹评分1.451.78*肉色评分4.85.9*l*46.5852.35*a*4.768.75*b*5.014.6524hph6.886.55滴水损失,%1.451.32烹煮损失,%24.7821.63*剪切力,kg2.972.94注:“*”表示通过t检验差异显著(p<0.05)从表6和7的结果可以看出,处理2生长性能高于处理1,处理2的肌内脂肪含量、大理石纹评分、肉色评分和肉色亮度和红度均高于对照组;处理2的蒸煮损失低于处理1,这表明在饲粮中加入本组方的香辛料可以显著改善肉质。采用本发明的饲料添加剂,虽然饲料成本每公斤增加了0.05元,但是猪每增重1公斤的成本减少0.3元,综合计算养殖中的饲料成本减少了3.06%,显著减低了成本。实施例5一种防止饲料霉变促进动物采食的饲料添加剂,由以下天然香料粉组成:桂皮粉20份、丁香粉20份、牛至叶15份、欧芹粉10份、鼠尾草粉5份、姜黄根粉5份、四川胡椒粉5份、百里香粉10份、迷迭香粉10份。其制备方法为:分别取上述天然香料粉过40目筛后,按配方量称重,混合均匀,封闭包装,即得。取不同量的本实施例制得的饲料添加剂,分别与同一种基础饲料混合均匀,制得含有不同比例饲料添加剂的饲料,然后置于室外(温度25-30℃,湿度60~80%),观察各组饲料霉变情况。表8防止饲料霉变试验结果组别霉变天数对照组(不含香料组)200.01%香料组210.02%香料组210.05%香料组250.075%香料组280.1%香料组350.2%香料组36注:表中的百分比=饲料添加剂质量/基础饲料质量×100%。从表中可以看出,天然香料制成的饲料添加剂的用量越大,饲料越不容易产生霉变;但同时考虑实际的生产储存要求、生产成本、以及添加天然香料后饲料的适口性,饲料添加剂的用量宜为0.05-2%,优选为0.1-0.2%,更优选为0.1%。以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征以及本发明的优点,上述实施例和说明书所描述的只是说明本发明的原理,在不脱离本发明精神和范围的前提下,本发明还会有各种变化和改进,这些变化和改进都将落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护的范围由所附的权利要求书及其等效物界定。当前第1页1 2 3 
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:饲料在加工、保存和使用的过程中容易受到细菌和霉菌等一系列微生物的浸染,因此防腐剂在饲料行业发挥重要的作用,阻止和延缓饲料的霉变。但随着人们生活质量的上升,越来越开始注重生活品质,化学合成剂添加到饲料中不再是高效生产的代名词。科学家们对化学合成物的深入使用和研究,也渐渐的发现化学合成物有诱癌、致畸和易引起食物中毒等副作用。随着人们越发地开始倾向于购买绿色生态食品,对防腐剂和抗氧化剂的要求也越来越高,安全健康的天然物逐渐的进入人们视野。我国国土面积大、物种丰富,开发功能性的天然防霉防腐或抗氧化剂有很大的优势。天然物具有安全无毒、抗菌性强和作用范围广等优点,而且还具有一定的营养价值,是今后的防腐剂的开发方向。现有技术中,常见的天然抗氧化剂有维生素e、维生素c和茶多酚等。大量的研究发现植物中的提取的多酚类、黄酮类化合物和植酸等也具有良好的抗氧化能力。因此越来越多研究开始寻找一种价格更低更易获取的天然抗氧化物。现目前大量研究发现葡萄籽提取物(主要成分花青素)、迷迭香提取物(多酚)、番茄提取物(番茄红素)等植物提取物抗氧化成分和性价比不低于维生素e。但是植物提取物虽然成分更加单一、效用更高,但是价格相对于植物来讲做工复杂,直接购买价格比较昂贵。此外,植物提取物自身容易氧化失效,因此对保存、以及饲料制备条件更为苛刻。总之,提取物昂贵的价格,容易氧化失效的特性,是制约其在饲料领域应用的重要因素。因此,提供一种饲料添加剂,能克服上述问题,成为了本领域技术人员亟待解决的问题。技术实现要素:本发明的目的之一在于:提供一种防止饲料霉变和促进动物采食的饲料添加剂,不仅具有良好的防止饲料霉变的作用,且成本低廉,制备简单,并具有促进动物采食的作用。本发明的目的之二在于,提供包含该饲料添加剂的饲料。本发明的目的之三在于,提供该饲料添加剂在改善猪肉质量中的应用。为实现上述目的,本发明采用的技术方案如下:本发明所述的一种防止饲料霉变和促进动物采食的饲料添加剂,由天然香料的粉末制成,所述天然香料的粉末包括以下重量份的组分:桂皮粉10-30份,丁香粉10-30份,牛至叶粉10-20份,欧芹粉5-20份,鼠尾草粉1-10份,姜黄根粉1-10份。本发明的部分实施方案中,所述天然香料的粉末包括以下重量份的组分:桂皮粉20份,丁香粉20份,牛至叶15份,欧芹粉10份,鼠尾草粉5份,姜黄根粉5份。本发明的部分实施方案中,还包括四川胡椒粉1-10份,百里香粉5-20份,迷迭香粉5-20份。本发明的部分实施方案中,还包括四川椒粉5份,百里香粉10粉,迷迭香粉10份。本发明的一种防止饲料霉变和促进动物采食的饲料添加剂,由天然香料的粉末制成,所述天然香料的粉末为以下重量份的组分:桂皮粉20份,丁香粉20份,牛至叶15份,欧芹粉10份,鼠尾草粉5份,姜黄根粉5份,四川椒粉5份,百里香粉10粉,迷迭香粉10份。本发明创造性地直接采用天然香料的粉末作为饲料添加剂,而非提取物,效果确切,并且大幅降低了生产成本,制备方法简单。本发明的部分实施方案中,所述天然香料的粉末的粒径小于等于40目。本发明所述的饲料添加剂的饲料,所述饲料添加剂的用量为基础饲料质量的0.05-2%。本发明的部分实施方案中,所述饲料添加剂的用量为基础饲料质量的0.1-0.2%,优选为0.1%。本发明通过反复实验,意外地发现基础日粮中加入过量的本发明的香料组方会影响饲喂效果,这是由于该组方全是采用香料组成,过量反而会影响动物的采食量。虽然本发明实验表明天然香料的用量越大,抑菌效果越好;但同时考虑实际的生产储存要求、生产成本、以及添加天然香料后饲料的适口性,天然香料的用量宜为0.05-2%,优选为0.1-0.2%。本发明所述的饲料添加剂在改善猪肉质量中的应用。本发明意外地发现,采用添加了本发明饲料添加剂的饲料喂养生长猪,不仅其生长性能得到显著提高,猪肉质量也得到了改善。本发明所述的饲料添加剂的制备方法,包括以下步骤:将单味的天然香料粉过40目筛后,再混合均匀,密封保存。天然香料粉混合前后密封保存,其目的一是防止香味损失,二是防止抗氧化性能损失。天然的香料粉可由市场上购买所得,也可直接采用天然香料粉碎。与现有技术相比,本发明具有以下有益效果:本发明设计科学,构思巧妙,创造性地采用天然香料粉而非提取物制备饲料添加剂,不仅能防止饲料霉变,促进动物采食,并且大幅降低了生产成本,可替代现有饲料中添加的人工防腐剂和抗氧化剂。此外,采用本发明的饲料添加剂还具有预料不到的改善猪肉质量的作用。本发明的天然香料组方不含任何抗生素和化学药品,无药品残留,可长期使用且无耐药性、安全高效。具体实施方式以下通过具体实施例对本发明的
发明内容做进一步的阐释,但不应理解为本发明的范围仅限于以下的实例,根据本发明的发明思路和全文内容,可以将以下实例中的各个技术特征做适当的组合/替换/调整/修改等,这对于本领域技术人员而言是显而易见的,仍属于本发明保护的范畴。本发明实施例中所述的份除另有说明外,均指质量份;本发明实施例中的天然香料粉均为过40目筛后所得。实施例1本实施例公开了对不同的香料的氧自由基吸收能力值的测定,具体为:采用氧自由基吸收能力法(orac),使用fluorescein,fl作为荧光探针,反应体系由fl、aaph、磷酸钾缓冲溶液及抗氧化物构成,静置一段时间后,用紫外、荧光及lc/ms方法同时检测分析反应混合物,记录荧光值。抗氧化剂作用下的荧光衰退曲线下面积与荧光自然衰退曲线下面积的差作为衡量抗氧化剂的抗氧化能力指标,结果以抗氧化物质trolox作为标准进行表达。通过这种方法对21种常见的香味料总抗氧化能力进行评价研究。检测样品主要有:辣椒粉、桂皮粉、丁香粉、茴香粉、咖喱粉、大蒜粉、姜黄粉、芥末粉、豆蔻粉、洋葱粉、牛至粉、欧芹粉、黑胡椒粉、胡椒粉、白胡椒粉、迷迭香粉、鼠尾草粉、四川胡椒粉、百里香粉、香草豆粉。以上样品均从市场上购买。检测试剂:荧光物质sodiumfluorescein:sigma公司;自由基产生剂aaph:sigma公司;抗氧化标准物质trolox:sigma公司;磷酸氢二钾、磷酸二氢钠均为分析纯:均购于北京试剂公司。使用仪器:synergyh4多功能荧光分析仪:德国bio-tek公司;96微孔板;分析用天平,移液枪等。检测方法参照dávalos,a.,gomez-cordoves,c.,andbartolomé,b.extendingapplicabilityoftheoxygenradicalabsorbancecapacity(orac-fluorescein)assay.j.agric.foodchem.,2004,52:48-54.主要的工艺流程:香料粉-组织匀浆机打碎-离心-清液-方法-取清液-检测。主要流程:称取每种检测样品8g,称取3份,放置烧杯中,加入固液比为1:20的蒸馏水。放入组织匀浆机5min后,将所得到的的混合物放入离心机中离心,离心3min(转速4500r/min)弃沉淀,加上试剂反应,取上清液经紫外可见分光光度计检测(注意:样品尽可能全部溶解,否则得到的数据不可信)。具体操作步骤为:荧光素钠盐、aaph、trolox均用75mmol/l磷酸盐缓冲液溶解并稀释至适当浓度,orac反应在75mmol/l磷酸盐缓冲液(ph7.2)体系中进行。在96孔的黑色荧光酶标板各微孔中分别加入不同浓度的待测样品溶液25μl,用自动加样器向各微孔中添加终浓度为8.61×10-5mmol/l的荧光物质fl溶液150μl,中速振摇2min,在37℃下孵育10min后,用自动加样器加入浓度为153mmol/l的aaph溶液25μl并迅速启动反应,以激发波长(485±20)nm,发射波长(530±20)nm进行连续测定荧光强度,整个体系保持37℃,每2min测定一次荧光强度,每次测定前中速震动孔板10s,测定时间设定在荧光衰减呈基线后为止。试验所得的各微孔不同时间点的绝对荧光强度数据与其初始时间的荧光强度相比,折算成相对荧光强度f,以相对荧光强度采用近似积分法计算荧光衰曲线下面积(auc),如下:auc=0.5×[2×(f0+f1+f2+…+fn)-f0-fn]×t其中fn为第n个测定点的相对荧光强度;t为相邻2个时间点的时间间隔,2min。测定结果以orac值表示,orac值的计算公式为:样品的orac值:=[(aucsample-auc+aaph)/(auctrolox-auc+aaph)](trolox浓度/样品浓度)得到的实验结果见表1。表1不同的香料的氧自由基吸收能力值(orac)根据以上数据表明,桂皮粉、丁香粉、牛至叶、欧芹粉、鼠尾草粉、姜黄粉、四川胡椒粉、百里香粉、迷迭香粉这9中原料的抗氧化性能最高。因此选用这个9种香辛料进行下一步抑菌试验。实施例2本实施例公开了对不同的香料抑菌能力的测定,具体为:1.对照组(生理盐水);2.处理组1:取桂皮粉10份,丁香粉30份,牛至叶10份,欧芹粉20份,鼠尾草粉1份,姜黄根粉10份,四川胡椒粉1份、百里香粉20份、迷迭香粉5份,混合均匀,配置成组方;3.处理组2:取桂皮粉30份、丁香粉10份、牛至叶20份、欧芹粉5份、鼠尾草粉10份、姜黄根粉1份、四川胡椒粉10份、百里香粉5份、迷迭香粉20份,混合均匀,配置成组方;4.处理组3:选取桂皮粉20份、丁香粉20份、牛至叶15份、欧芹粉10份、鼠尾草粉5份、姜黄根粉5份、四川胡椒粉5份、百里香粉10份、迷迭香粉10份,混合均匀,配置成组方;再将各处理组的样品分别用生理盐水分别稀释100倍,500倍,1000倍,得到不同浓度的样品。液体培养基:蛋白胨、nacl、琼脂等。使用菌液:用牙签挑取饲料中霉菌,加入无菌蒸馏水混匀后,分别移1ml到装有5ml培养液的试管中。检测仪器:电子称、烧杯、三角瓶、涂布器、纱布、报纸、无菌培养皿,酒精灯、移液枪、枪头、牛津杯、镊子、培养箱、试管、游标卡尺。检测方法:1)培养基制备:固体和液体培养基制备,分别装于三角瓶中保存。(2)灭菌:培养基、培养皿、牛津杯、试管、枪头等进行灭菌。(3)菌液制备:将液体培养基装入1支已经灭菌的试管中,将霉菌分别接种到2只试管中,恒温培养震荡培养16小时。(4)将牛肉膏蛋白胨固体培养基加热溶解后倒入12个平板,做好标记,每种物质、每个浓度设置两个平行,并在培养基或牛津杯上标记,再设立两个阴性对照组。(5)待凝固后分别将霉菌接种到平板中(用移液枪取0.2ml菌液置于相应平板中,进行涂布,此步操作在超净工作台中进行)。或者将1ml试验菌液和冷却至50摄氏度左右的培养基摇均匀,吸取6ml倒入底层平板上。待凝固再做好标记。(7)将接种好的平板静置5min,按照上述标记,用弯头镊子在每个培养皿中等距离放入4个牛津杯。再将样品滴入牛津杯中(此步操作在超净工作台中进行),放置5min后,置于37℃恒温培养箱中培养16-24小时。表2不同的香料组方对抑菌浓度的影响从抑菌试验上看,处理3的样品在稀释1000倍的时候还有较明显的抑菌圈,因此我们选用处理3的配方再进行下一步的动物试验。实施例3一种防止饲料霉变促进动物采食的饲料添加剂,由以下天然香料粉组成:桂皮粉20份、丁香粉20份、牛至叶15份、欧芹粉10份、鼠尾草粉5份、姜黄根粉5份、四川胡椒粉5份、百里香粉10份、迷迭香粉10份。其制备方法为:分别取上述天然香料粉过40目筛后,按配方量称重,混合均匀,封闭包装,即得。选取30kg左右的“杜×长×大“三元杂交生长猪120头,根据胎次一致、品种相同、体重相近、公母各半的原则,随机分成分为4个处理,每个处理组30头,每5头生长猪为一个重复。处理组1:饲喂表1所示的生长猪基础日粮;处理组2:饲喂表1所示的生长猪基础日粮+占日粮0.05%质量百分比的饲料添加剂,混合后饲喂。处理组3:饲喂表1所示的生长猪基础日粮+占日粮0.075%质量百分比的饲料添加剂,混合后饲喂。处理组4:饲喂表1所示的生长猪基础日粮+饲喂表1所示的生长猪基础日粮+占日粮0.1%质量百分比的饲料添加剂,混合后饲喂。饲喂30天后采血测定生长性能和血清抗氧化指标,结果如表4所示。其中,基础日粮的配方如表3所示,所述预混料为铁骑力士预混料,基础日粮是满足2012nrc或以上的标准,本添加剂都是有效果的,可从市场上购买。该基础日粮按表1的配方通过现有的饲料生产工艺生产为颗粒料。表3生长猪的基础日粮配方原料质量比%玉米(二级)61.70豆粕(粗蛋白含量46%)25.71麦麸8.594%市售生长猪预混料4.0合计100表4四个处理组的饲喂结果项目处理组1处理组2处理3处理4平均日增重,g476.65543.71*559.23*580.53**平均日采食,g1291.721304.90*1314.19*1335.22*料肉比2.712.4*2.35*2.3*丙二醛(mda),nmol/ml4.013.85*3.78*3.76*总超氧化物歧化酶(t-sod),u/ml36.7638.62*38.67*38.92*总抗(t-aoc),u/ml1.261.87*1.89*1.91*注:“*”表示通过t检验差异显著(p<0.05)从表4的结果可以看出,处理2,3,4生长性能均高于处理1,随着添加量的增加,生长性能逐渐提高,血清水平在添加剂量上不明显差异。因此本产品的添加量在0.05%-0.1%均有效果。实施例4一种防止饲料霉变促进动物采食的饲料添加剂,由以下天然香料粉组成:桂皮粉20份、丁香粉20份、牛至叶15份、欧芹粉10份、鼠尾草粉5份、姜黄根粉5份、四川胡椒粉5份、百里香粉10份、迷迭香粉10份。其制备方法为:分别取上述天然香料粉过40目筛后,按配方量称重,混合均匀,封闭包装,即得。选取54.9kg左右的“杜×长×大“三元杂交育肥猪200头,随机分成分为2个处理,每个处理100头。处理组1:饲喂表1所示的生长猪基础日粮;处理组2:饲喂表1所示的生长猪基础日粮+占日粮0.1%质量百分比的饲料添加剂,混合后饲喂。表5育肥猪的基础日粮配方原料质量比%玉米(二级)76.3豆粕(粗蛋白含量46%)14.4豆油1小麦麸4.34%市售育肥猪预混料4.0合计100表6两个组的饲喂结果项目处理1处理2平均日增重,g720.24856.97*平均日采食,g1980.652257.93*料肉比2.752.63*饲料价格,元/kg3.6003.650增重饲料成本,元/kg9.909.60比较,%10096.96表7两个组的肉质评价项目处理1处理2肌内脂肪含量,%3.213.45*大理石纹评分1.451.78*肉色评分4.85.9*l*46.5852.35*a*4.768.75*b*5.014.6524hph6.886.55滴水损失,%1.451.32烹煮损失,%24.7821.63*剪切力,kg2.972.94注:“*”表示通过t检验差异显著(p<0.05)从表6和7的结果可以看出,处理2生长性能高于处理1,处理2的肌内脂肪含量、大理石纹评分、肉色评分和肉色亮度和红度均高于对照组;处理2的蒸煮损失低于处理1,这表明在饲粮中加入本组方的香辛料可以显著改善肉质。采用本发明的饲料添加剂,虽然饲料成本每公斤增加了0.05元,但是猪每增重1公斤的成本减少0.3元,综合计算养殖中的饲料成本减少了3.06%,显著减低了成本。实施例5一种防止饲料霉变促进动物采食的饲料添加剂,由以下天然香料粉组成:桂皮粉20份、丁香粉20份、牛至叶15份、欧芹粉10份、鼠尾草粉5份、姜黄根粉5份、四川胡椒粉5份、百里香粉10份、迷迭香粉10份。其制备方法为:分别取上述天然香料粉过40目筛后,按配方量称重,混合均匀,封闭包装,即得。取不同量的本实施例制得的饲料添加剂,分别与同一种基础饲料混合均匀,制得含有不同比例饲料添加剂的饲料,然后置于室外(温度25-30℃,湿度60~80%),观察各组饲料霉变情况。表8防止饲料霉变试验结果组别霉变天数对照组(不含香料组)200.01%香料组210.02%香料组210.05%香料组250.075%香料组280.1%香料组350.2%香料组36注:表中的百分比=饲料添加剂质量/基础饲料质量×100%。从表中可以看出,天然香料制成的饲料添加剂的用量越大,饲料越不容易产生霉变;但同时考虑实际的生产储存要求、生产成本、以及添加天然香料后饲料的适口性,饲料添加剂的用量宜为0.05-2%,优选为0.1-0.2%,更优选为0.1%。以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征以及本发明的优点,上述实施例和说明书所描述的只是说明本发明的原理,在不脱离本发明精神和范围的前提下,本发明还会有各种变化和改进,这些变化和改进都将落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护的范围由所附的权利要求书及其等效物界定。当前第1页1 2 3 
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